JPS5837001A - ヒアルロン酸の製造法 - Google Patents
ヒアルロン酸の製造法Info
- Publication number
- JPS5837001A JPS5837001A JP13489081A JP13489081A JPS5837001A JP S5837001 A JPS5837001 A JP S5837001A JP 13489081 A JP13489081 A JP 13489081A JP 13489081 A JP13489081 A JP 13489081A JP S5837001 A JPS5837001 A JP S5837001A
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- Japan
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- hyaluronic acid
- hyaluronidase
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- molecular
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は高分子ヒアルロンｌ１２を収得する改良法に関
する。詳しくは、鳥類のトサカ、鎖帯、硝子体などのヒ
アルロン酸を多量に含有する動物組線を約７０〜ｌＯ・
０℃で加熱処理し、混入しているヒアルロニダーゼを失
活させた後１、高分子ヒアルロン酸を収率よくかつ、大
量に収得する方法に関する。
する。詳しくは、鳥類のトサカ、鎖帯、硝子体などのヒ
アルロン酸を多量に含有する動物組線を約７０〜ｌＯ・
０℃で加熱処理し、混入しているヒアルロニダーゼを失
活させた後１、高分子ヒアルロン酸を収率よくかつ、大
量に収得する方法に関する。
ヒアルロン酸は、関節、硝子体、軟骨、皮膚、麟帝、ト
サカなどの結合組織中に構成成分とじて存在し、組織の
柔軟性、構造維持、細胞の代＊ｐ＋節などに重要な機能
を果している０このような機能を効率的に来すためには
、ヒアルロン酸は高分子であることが必要である。すな
わち、高分子ヒアルロン＃！は粘性が高く、そのため結
合組織において潤滑油的役割ｔはだすものとして有用で
あり、また低濃度で十分な効果を発揮し、細胞表面でか
報告されているが、高分子とアルｐン酸を収得する方法
として詳細に検討されたものは少ない。
サカなどの結合組織中に構成成分とじて存在し、組織の
柔軟性、構造維持、細胞の代＊ｐ＋節などに重要な機能
を果している０このような機能を効率的に来すためには
、ヒアルロン酸は高分子であることが必要である。すな
わち、高分子ヒアルロン＃！は粘性が高く、そのため結
合組織において潤滑油的役割ｔはだすものとして有用で
あり、また低濃度で十分な効果を発揮し、細胞表面でか
報告されているが、高分子とアルｐン酸を収得する方法
として詳細に検討されたものは少ない。
ヒアルロン酸は安定性に乏しく、ヒアルロニダーゼ処理
、高温加熱、紫外線照射、放射線照射、酸化還元剤、強
酸、強アルカリ処理等の処理によシ低分子化する。その
ため、とアル四ン酸は製造中においてその多くが低分子
化してしまう。
、高温加熱、紫外線照射、放射線照射、酸化還元剤、強
酸、強アルカリ処理等の処理によシ低分子化する。その
ため、とアル四ン酸は製造中においてその多くが低分子
化してしまう。
かかる実情に鑑みて本発明者らは、高分子ヒアルロン酸
のｉ進法を確立するために、これらのヒアルロン酸を低
分子化させる要因がどのようなものであるのか、機々検
討した。この結果後述の実験例２に示す通りヒアルロン
酸の低分子化に最も強力に作用するのはヒアルロニダー
ゼであることを見出した。
のｉ進法を確立するために、これらのヒアルロン酸を低
分子化させる要因がどのようなものであるのか、機々検
討した。この結果後述の実験例２に示す通りヒアルロン
酸の低分子化に最も強力に作用するのはヒアルロニダー
ゼであることを見出した。
ところで、２イソシーム由来のヒアルロニダーゼは、血
液、組織中に存在することが知られているが、ニワトリ
のトサカ、ヒトの鎖帯の抽出液中のヒアルロニダーゼ活
性を測定し良結果を後記実験例３に示す。この実験より
明らかなようにヒトの腑帯中には、かなシのヒアルロニ
ダーゼ活性が検出された。このヒアルロニダーゼは、７
０℃、１０分間の加熱処理に付すことＫより完全に失活
した〇 一方、新鮮トサカ中には、ヒアルロニダーゼ活性は、は
とんど検出されず、新鮮トサカ抽出液中のヒアルロン酸
の極限粘度は４５．０ （ｄｔ／１１）でめった。とこ
ろが、新鮮トサカを室温で２日間放置したものは、極限
粘度が０．４ （ｄｔ／＃）に低下し、はとんど粘性を
示さなくなっていた。これは、細菌増殖によシ産生され
た細菌性とアルｏ−ダーゼがヒアルロン酸を分解したも
のと思われる。
液、組織中に存在することが知られているが、ニワトリ
のトサカ、ヒトの鎖帯の抽出液中のヒアルロニダーゼ活
性を測定し良結果を後記実験例３に示す。この実験より
明らかなようにヒトの腑帯中には、かなシのヒアルロニ
ダーゼ活性が検出された。このヒアルロニダーゼは、７
０℃、１０分間の加熱処理に付すことＫより完全に失活
した〇 一方、新鮮トサカ中には、ヒアルロニダーゼ活性は、は
とんど検出されず、新鮮トサカ抽出液中のヒアルロン酸
の極限粘度は４５．０ （ｄｔ／１１）でめった。とこ
ろが、新鮮トサカを室温で２日間放置したものは、極限
粘度が０．４ （ｄｔ／＃）に低下し、はとんど粘性を
示さなくなっていた。これは、細菌増殖によシ産生され
た細菌性とアルｏ−ダーゼがヒアルロン酸を分解したも
のと思われる。
後述の実験例４に示すように、精製ヒアルロン酸２、０
ＩＩｌ＃（０，２ｗ／ｗ） Ｋ、）−！ｌｌ’ｌｋ２
日間放置シテ、５倍量の生理食塩液中で抽出した抽出
液５０μｔｔ添加すると図−１に示すように経時的に粘
度が低下してきた。一方、このトサカの抽出液を９０℃
で１０分間加熱処理し九後、その５０１ｔｔ ｆ精製ヒ
アルロン酸２ ｄ （ｏ、 ｚｗ／ｄ）に添加したもの
では、全く粘度の低下は認められなく、ヒアルロニダー
ゼが完全に失活した仁とを示した。
ＩＩｌ＃（０，２ｗ／ｗ） Ｋ、）−！ｌｌ’ｌｋ２
日間放置シテ、５倍量の生理食塩液中で抽出した抽出
液５０μｔｔ添加すると図−１に示すように経時的に粘
度が低下してきた。一方、このトサカの抽出液を９０℃
で１０分間加熱処理し九後、その５０１ｔｔ ｆ精製ヒ
アルロン酸２ ｄ （ｏ、 ｚｗ／ｄ）に添加したもの
では、全く粘度の低下は認められなく、ヒアルロニダー
ゼが完全に失活した仁とを示した。
新鮮トサカ抽出液で社、還元末端法で測定する限りにお
いては、ヒアルロニダーゼを検出することはできなかっ
たが、ヒアルロン酸の製造において、多量の原料を集荷
する場合においては、多少の細菌の混入はさけられない
ものであり、組織中に存在する２イソシーム由来のヒア
ルロニダーゼおよび細菌に由来する極微量のヒアルロニ
ダーゼの作用によってヒアルロン酸の分解が起こること
が危１％され′る０ 。
いては、ヒアルロニダーゼを検出することはできなかっ
たが、ヒアルロン酸の製造において、多量の原料を集荷
する場合においては、多少の細菌の混入はさけられない
ものであり、組織中に存在する２イソシーム由来のヒア
ルロニダーゼおよび細菌に由来する極微量のヒアルロニ
ダーゼの作用によってヒアルロン酸の分解が起こること
が危１％され′る０ 。
本発明者らは、上述のような実−騙ト１とづき高分子と
アルｐン酸の製造方法を検討して本発明會児成した。
アルｐン酸の製造方法を検討して本発明會児成した。
本発明の目的は、高分子ヒアルロン酸１：！：製造する
方法を提供するものであシ、さらに詳しくは、高分子ヒ
アルロン酸を製造するにあたシ原料および製造工程中に
おいて混入するヒアルロニダーゼ？６らかじめ失活させ
てヒアルロン酸の低分子化を防止した後、原料から高分
子ヒアルロン酸を分離することによって高分子ヒアルロ
ン酸ｉ−製造する方法を提供することにある〇 以下に本発明の詳細な説明する。
方法を提供するものであシ、さらに詳しくは、高分子ヒ
アルロン酸を製造するにあたシ原料および製造工程中に
おいて混入するヒアルロニダーゼ？６らかじめ失活させ
てヒアルロン酸の低分子化を防止した後、原料から高分
子ヒアルロン酸を分離することによって高分子ヒアルロ
ン酸ｉ−製造する方法を提供することにある〇 以下に本発明の詳細な説明する。
本発明方法にて用いられる原料は、たとえば鳥類のトサ
カ、動物（九とえは、ウシ、ウマ、ヤギ、ヒツジなどの
咄乳類）の膜帯、硝子体などのヒアル０７１１！含有物
であシ、原料は切断、分離後、直ちに使用するかあるい
祉分離後直ちに冷凍し、凍結状態にして保存することが
望ましい。原料は一般にミンチにすることなくそのまま
木兄ゆ」の特徴である加熱処理に付すことが好ましい。
カ、動物（九とえは、ウシ、ウマ、ヤギ、ヒツジなどの
咄乳類）の膜帯、硝子体などのヒアル０７１１！含有物
であシ、原料は切断、分離後、直ちに使用するかあるい
祉分離後直ちに冷凍し、凍結状態にして保存することが
望ましい。原料は一般にミンチにすることなくそのまま
木兄ゆ」の特徴である加熱処理に付すことが好ましい。
加熱処理社一般に水中で行われる。加熱温腿は約７０〜
１００℃二好ましくは約７０〜９０℃であ）、加熱時間
は通常的１０−１２０分間である０この加熱処理によっ
て、原料中に混入している細菌による細菌性ヒアルロニ
ダーゼおよび組織中のライソゾー五由来ヒアルロニダー
ゼが不活性化され、以後の工程中におけるヒアルロン酸
の分解が防止される。
１００℃二好ましくは約７０〜９０℃であ）、加熱時間
は通常的１０−１２０分間である０この加熱処理によっ
て、原料中に混入している細菌による細菌性ヒアルロニ
ダーゼおよび組織中のライソゾー五由来ヒアルロニダー
ゼが不活性化され、以後の工程中におけるヒアルロン酸
の分解が防止される。
かくして加熱処理した原料から自体既知の方法にてヒア
ルロン酸を分離することによって高分子ヒアルロン酸が
製造される。たとえば次の如き方法が例示される。
ルロン酸を分離することによって高分子ヒアルロン酸が
製造される。たとえば次の如き方法が例示される。
、まず、原料ｆｔンチ状に細断した後、蛋白分解−嵩に
よって原料の消化、ヒアルロン酸の抽出を行う０蛋白分
解酵素としては、プロナーゼ〔科研化学（株）製〕、グ
ロリシン〔上田化学工業（株）製〕、パパイン等が利用
できる０これら蛋白分解酵素による処理条件は一般に水
溶液のｐＨ６〜８．３０〜７０℃、２〜４０時間である
０かくして水溶液中にヒアルロン酸が抽出される０ 抽出されたヒアルロン酸は、塩化セチルピリジニウムあ
るいは、エタノール分画によって沈澱として回収される
。エタノール分画の場合ハ、４０〜６０チ程度で沈澱す
る両分を回収する。このとぎ、水溶液中に０．５〜１．
５Ｍの塩化ナトリウムを添加しておくことは、ヒアルロ
ン酸の分離、回収のために好ましい。塩化セチルピリジ
ニウムによって分画する場合には、極めて微量の塩化セ
チルピリジニウムの添加（終濃度０．０１−０．０５％
Ｗ ／ Ｖ ）によってヒアルロン＃ ＃ｉ、沈澱とし
て回収される。
よって原料の消化、ヒアルロン酸の抽出を行う０蛋白分
解酵素としては、プロナーゼ〔科研化学（株）製〕、グ
ロリシン〔上田化学工業（株）製〕、パパイン等が利用
できる０これら蛋白分解酵素による処理条件は一般に水
溶液のｐＨ６〜８．３０〜７０℃、２〜４０時間である
０かくして水溶液中にヒアルロン酸が抽出される０ 抽出されたヒアルロン酸は、塩化セチルピリジニウムあ
るいは、エタノール分画によって沈澱として回収される
。エタノール分画の場合ハ、４０〜６０チ程度で沈澱す
る両分を回収する。このとぎ、水溶液中に０．５〜１．
５Ｍの塩化ナトリウムを添加しておくことは、ヒアルロ
ン酸の分離、回収のために好ましい。塩化セチルピリジ
ニウムによって分画する場合には、極めて微量の塩化セ
チルピリジニウムの添加（終濃度０．０１−０．０５％
Ｗ ／ Ｖ ）によってヒアルロン＃ ＃ｉ、沈澱とし
て回収される。
かかる分画手段をへて回収されるヒアルロン酸は、極限
粘度３０（ｄｊ／７）以上であ抄、一般に３０〜４５（
ｄｔ／Ｉ）である。仁の極限粘度とヒアルロン酸の分子
量は比例し、かくして得られたヒアルロン酸の分子量は
約１９０万以上である。
粘度３０（ｄｊ／７）以上であ抄、一般に３０〜４５（
ｄｔ／Ｉ）である。仁の極限粘度とヒアルロン酸の分子
量は比例し、かくして得られたヒアルロン酸の分子量は
約１９０万以上である。
本発明にて得られた、ヒアルａｙｓは関節炎等に対する
抗炎症作用を有してお夛抗炎症剤として使用されるが、
分子量が大きいゆえ、組織中での生理的条件により適合
するものである。
抗炎症作用を有してお夛抗炎症剤として使用されるが、
分子量が大きいゆえ、組織中での生理的条件により適合
するものである。
本島は、一般に局所投与され、たとえに関節腔、眼球内
等に投与される。
等に投与される。
局所投与される製剤は液状製剤、乾燥製剤などの形をと
りうるが、液状製剤が便宜的である。
りうるが、液状製剤が便宜的である。
製剤化に際しては、たとえば８０〜１００℃にて間欠滅
菌しておくことが好ましい。
菌しておくことが好ましい。
なお、ヒアルロン酸の極限粘度は、日本薬局方９局一般
試験法第２５粘度測定法によって測定し友０ 次に、実施例、実験例によって本発明の方法を詳細に説
明するが、木兄明線、下記の実施例に限定され、あるい
は制約されるものではない。
試験法第２５粘度測定法によって測定し友０ 次に、実施例、実験例によって本発明の方法を詳細に説
明するが、木兄明線、下記の実施例に限定され、あるい
は制約されるものではない。
実施例１
ニワトリを断頭後直ちに水洗し、凍結保存したトサカ１
ｍ１１そのま１８０℃の温水５ｔｃｐＫ３０分間保った
後、トナ力を取）出し、３■のンンチとし、５０ｍＭリ
ン酸２ナトリウム溶液４を中に投入し、プロナーゼ（科
研化学（株）製、蛋白質分解酵素の一種）ｉｏｏｖｔ添
加し、３７℃に４時間、攪拌しながら消化会抽出を行う
０次に１遠心によシ沈澱物を除去し、その上漬液に塩化
ナトリフ＾を１Ｍ１１度になるように添加する。そして
、エタノールを５５−濃度になるように添加する。
ｍ１１そのま１８０℃の温水５ｔｃｐＫ３０分間保った
後、トナ力を取）出し、３■のンンチとし、５０ｍＭリ
ン酸２ナトリウム溶液４を中に投入し、プロナーゼ（科
研化学（株）製、蛋白質分解酵素の一種）ｉｏｏｖｔ添
加し、３７℃に４時間、攪拌しながら消化会抽出を行う
０次に１遠心によシ沈澱物を除去し、その上漬液に塩化
ナトリフ＾を１Ｍ１１度になるように添加する。そして
、エタノールを５５−濃度になるように添加する。
生じた沈澱物音遠心により回収する。回収した沈澱１５
０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ＆ｏ）Ｉｔ中に溶解し、プロ
ナーゼ１ｏｆｔ添加し、３７℃に４時間再び消化する。
０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ＆ｏ）Ｉｔ中に溶解し、プロ
ナーゼ１ｏｆｔ添加し、３７℃に４時間再び消化する。
再消化後、／％イフロースーパーセルをプリコ゛−トシ
たろ過器でろ過し、得られたろ液に１０１塩化セチルピ
リジニウム溶液１２０１Ａｌｔ添加し、ヒアルロン酸を
沈澱させ回収する。次に、０．５Ｍ塩化ナトリウム溶液
１１で沈澱を溶解し、ヒアルロン酸を抽出し、混入して
いたコンドｐイテン硫ａ！を沈澱として除去する。得ら
れた抽出液に塩化ナトリウムをＩＭ一度になるよう添加
し、エタノールｔ−４５チ濃度になるよう添加して、ヒ
アルロン酸を沈澱させ回収する。ここで得られた沈澱は
、７５−エタノール、９９チエタノー羨で順次洗浄し、
最後に減圧乾燥してヒアルロン酸４２４１得た０このも
のの極限粘＃ｌは３１６で、ヒアルロン皺に対する蛋白
質混入率は、０゜０７−であった。また、セルロース・
アセテート換電気泳動でのトルイジンブルー〇染色で、
ヒアルロン酸のスポットのみを検出し、他の酸性ムコ多
糖は検出されなかった。
たろ過器でろ過し、得られたろ液に１０１塩化セチルピ
リジニウム溶液１２０１Ａｌｔ添加し、ヒアルロン酸を
沈澱させ回収する。次に、０．５Ｍ塩化ナトリウム溶液
１１で沈澱を溶解し、ヒアルロン酸を抽出し、混入して
いたコンドｐイテン硫ａ！を沈澱として除去する。得ら
れた抽出液に塩化ナトリウムをＩＭ一度になるよう添加
し、エタノールｔ−４５チ濃度になるよう添加して、ヒ
アルロン酸を沈澱させ回収する。ここで得られた沈澱は
、７５−エタノール、９９チエタノー羨で順次洗浄し、
最後に減圧乾燥してヒアルロン酸４２４１得た０このも
のの極限粘＃ｌは３１６で、ヒアルロン皺に対する蛋白
質混入率は、０゜０７−であった。また、セルロース・
アセテート換電気泳動でのトルイジンブルー〇染色で、
ヒアルロン酸のスポットのみを検出し、他の酸性ムコ多
糖は検出されなかった。
実施例２
ニワトリを断頭後直ちに水洗し、凍結乾燥したトサカ１
０ｒＪ’ｉ実施例１と同様に処理し、（ただし各工程で
のプロナーゼ、緩衝液の添加量は１０倍量である。＞ｎ
製ヒアルロン酸４９１Ｉを得た。
０ｒＪ’ｉ実施例１と同様に処理し、（ただし各工程で
のプロナーゼ、緩衝液の添加量は１０倍量である。＞ｎ
製ヒアルロン酸４９１Ｉを得た。
このものの極限粘度は３４７で、ヒアルロン酸に対する
蛋白質混入率は、０．０３−であった。また、セルロー
ス・アセテート膜電気泳動でも、ヒアルロン酸以外のス
ボツＦは、認められなかった。
蛋白質混入率は、０．０３−であった。また、セルロー
ス・アセテート膜電気泳動でも、ヒアルロン酸以外のス
ボツＦは、認められなかった。
冥験例１
ニワトリ會断頭後直ちに水洗し、凍結乾燥したトサカ１
ＫＰＫ）き５倍量の水を加え、３７℃、５０℃、７０℃
、８０℃、１００℃の各温度に、３０分間保った後、ト
サカを取シ出し％ ３ｍのミンチとし、以下実施例１
と同様に処理して精製ヒアルｐ：／＠を得た０各条件で
得られたヒアルロン酸の極限粘度、収量は表−１の通シ
であった。
ＫＰＫ）き５倍量の水を加え、３７℃、５０℃、７０℃
、８０℃、１００℃の各温度に、３０分間保った後、ト
サカを取シ出し％ ３ｍのミンチとし、以下実施例１
と同様に処理して精製ヒアルｐ：／＠を得た０各条件で
得られたヒアルロン酸の極限粘度、収量は表−１の通シ
であった。
以上の結果から明らかな如く、８０℃で最も極限粘度が
高く、収量も多かつ九。３７℃、５０℃、１００℃では
、極限粘度が低かった。１００’ｃの場合には、加熱時
間が３０分間と長すぎたため、高温によるヒアルロン酸
の低分子化が起ったものと考えられる。
高く、収量も多かつ九。３７℃、５０℃、１００℃では
、極限粘度が低かった。１００’ｃの場合には、加熱時
間が３０分間と長すぎたため、高温によるヒアルロン酸
の低分子化が起ったものと考えられる。
実験例２
ヒアルロン酸の低分子化の要因を追求するため比較実験
を行った０冥施例１と同様の操作によって得られた精製
ヒアル關ン＠（極限粘度３５．０ｄｔ／Ｉ）、’を用い
て実験し、ＩＩ！−２に示すような各々の処理を行い、
ヒアルロンａｌの極限粘度の低下を調べた。その結果ｆ
ｆｉ、＊−２に示した。低分子化の要因としてヒアルロ
ニダーゼが最も大きなものと考えられる。
を行った０冥施例１と同様の操作によって得られた精製
ヒアル關ン＠（極限粘度３５．０ｄｔ／Ｉ）、’を用い
て実験し、ＩＩ！−２に示すような各々の処理を行い、
ヒアルロンａｌの極限粘度の低下を調べた。その結果ｆ
ｆｉ、＊−２に示した。低分子化の要因としてヒアルロ
ニダーゼが最も大きなものと考えられる。
表−２各処理によるヒアルロン酸の極
限粘度の低下 ゛
実験例３
各糧原料の抽出液中のヒアルロニダーゼの活性音調べた
。その結果を表−３に示す。ヒアルロニダーゼの活性測
定法は、山田らの方法〔ジャーナル・オプ・バイオケミ
ストリー、８１巻 ４８５〜４９４頁（１９７７年）〕
を用いた。原料としては、表中のものを使用した。
。その結果を表−３に示す。ヒアルロニダーゼの活性測
定法は、山田らの方法〔ジャーナル・オプ・バイオケミ
ストリー、８１巻 ４８５〜４９４頁（１９７７年）〕
を用いた。原料としては、表中のものを使用した。
表−３抽出液中のとアル胃エダーゼ活性−頴−４
原料としてニワトリのトサカ管用い、生理食塩液で抽出
し、精製したヒアルロン酸（極限粘度４５、ｏａｔ／Ｉ
）ｋ用いて、３７℃での経時的な粘度低下を調べた０ 室温で２日間放置したトサカを５倍量の生理食塩液で抽
出し、その抽出液５０μｍｔ−精製ヒアルロン酸２ ｗ
Ｊ （０，２ｍ９／ｗ）に添加した試料■と室温で２日
間放置したトサカｔ−５倍量の生理食塩液で抽出し、そ
の抽出液＝ｉ９０℃で１０分間加熱処理した後、その５
０μｔをｆｉｔ製ヒアルロン酸２ｄ（０，２ｍｌ／ｄ）
に添加し友試料■を用いた。
し、精製したヒアルロン酸（極限粘度４５、ｏａｔ／Ｉ
）ｋ用いて、３７℃での経時的な粘度低下を調べた０ 室温で２日間放置したトサカを５倍量の生理食塩液で抽
出し、その抽出液５０μｍｔ−精製ヒアルロン酸２ ｗ
Ｊ （０，２ｍ９／ｗ）に添加した試料■と室温で２日
間放置したトサカｔ−５倍量の生理食塩液で抽出し、そ
の抽出液＝ｉ９０℃で１０分間加熱処理した後、その５
０μｔをｆｉｔ製ヒアルロン酸２ｄ（０，２ｍｌ／ｄ）
に添加し友試料■を用いた。
その結果を図−１に示したが、この図より加熱処理した
試料では、粘度の低下は認められ表かつｆＣ。
試料では、粘度の低下は認められ表かつｆＣ。
Claims (1)
- ヒアルロン酸’ｔｉ！！ｌ！造するにあたり、原料をあ
らかじめ約７０〜１００℃で加熱処理し、原料中に存在
するヒアルロニダーゼ管失活させた後、高分子ヒアルレ
ンａｌｔ−抽出、採取することｔ特徴とするヒアルロン
酸の製造法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP13489081A JPS5837001A (ja) | 1981-08-27 | 1981-08-27 | ヒアルロン酸の製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP13489081A JPS5837001A (ja) | 1981-08-27 | 1981-08-27 | ヒアルロン酸の製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5837001A true JPS5837001A (ja) | 1983-03-04 |
| JPS6354001B2 JPS6354001B2 (ja) | 1988-10-26 |
Family
ID=15138900
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP13489081A Granted JPS5837001A (ja) | 1981-08-27 | 1981-08-27 | ヒアルロン酸の製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS5837001A (ja) |
Cited By (14)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1986004355A1 (en) * | 1985-01-18 | 1986-07-31 | Bio-Technology General Corp. | Method of producing high molecular weight sodium hyaluronate by fermentation of streptococcus |
| WO1986005984A1 (en) * | 1985-04-09 | 1986-10-23 | Pharmacia Ab | Hyaluronic acid preparation to be used for treating inflammations of skeletal joints |
| WO1986006728A1 (en) * | 1985-05-09 | 1986-11-20 | Hill David Cullis | Preparation of hyaluronic acid |
| JPS62501471A (ja) * | 1985-01-18 | 1987-06-18 | バイオ−テクノロジ−・ジエネラル・コ−ポレイシヨン | 連鎖球菌の発酵による高分子量ヒアルロン酸ナトリウムの製造方法 |
| US4782046A (en) * | 1983-11-25 | 1988-11-01 | Mobay Corporation | Ultrapure hyaluronic acid and method of making it |
| US4801539A (en) * | 1984-05-25 | 1989-01-31 | Shiseido Company Ltd. | Fermentation method for producing hyaluronic acid |
| US4851521A (en) * | 1985-07-08 | 1989-07-25 | Fidia, S.P.A. | Esters of hyaluronic acid |
| JPH01502964A (ja) * | 1986-06-18 | 1989-10-12 | サルフォン プロプライエタリー リミテッド | 蒸留装置および方法 |
| US5202431A (en) * | 1985-07-08 | 1993-04-13 | Fidia, S.P.A. | Partial esters of hyaluronic acid |
| WO1998029125A1 (fr) * | 1996-12-27 | 1998-07-09 | Seikagaku Corporation | Remedes contre des troubles de la vessie |
| EP1174142A2 (en) * | 2000-06-20 | 2002-01-23 | Adaputogen Seiyaku K.K., (acting as Adaputogen Pharmaceutical Co., Ltd.) | Immunopotentiator comprising peptide and hyaluronic acid |
| KR100395298B1 (ko) * | 2000-07-07 | 2003-08-25 | 아답트겐 세이야쿠 가부시키가이샤 | 면역증강제 및 그 제조방법 |
| EP1865002A1 (en) | 2005-03-22 | 2007-12-12 | Q.P. Corporation | Low molecular weight hyaluronic acid and/or salt thereof, method for producing same, and cosmetic preparation and food composition containing same |
| JP2016518312A (ja) * | 2013-03-11 | 2016-06-23 | カトリック ユニバーシティ インダストリー アカデミック コーオペレイション ファウンデーション | 眼科炎症疾患治療用点眼剤組成物及びその製造方法 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS52105199A (en) * | 1976-03-01 | 1977-09-03 | Seikagaku Kogyo Co Ltd | Isolation of acidic polysaccharide |
-
1981
- 1981-08-27 JP JP13489081A patent/JPS5837001A/ja active Granted
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS52105199A (en) * | 1976-03-01 | 1977-09-03 | Seikagaku Kogyo Co Ltd | Isolation of acidic polysaccharide |
Cited By (19)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4782046A (en) * | 1983-11-25 | 1988-11-01 | Mobay Corporation | Ultrapure hyaluronic acid and method of making it |
| US4801539A (en) * | 1984-05-25 | 1989-01-31 | Shiseido Company Ltd. | Fermentation method for producing hyaluronic acid |
| WO1986004355A1 (en) * | 1985-01-18 | 1986-07-31 | Bio-Technology General Corp. | Method of producing high molecular weight sodium hyaluronate by fermentation of streptococcus |
| JPS62501471A (ja) * | 1985-01-18 | 1987-06-18 | バイオ−テクノロジ−・ジエネラル・コ−ポレイシヨン | 連鎖球菌の発酵による高分子量ヒアルロン酸ナトリウムの製造方法 |
| US4780414A (en) * | 1985-01-18 | 1988-10-25 | Bio-Technology General Corp. | Method of producing high molecular weight sodium hyallronate by fermentation of streptococcus |
| WO1986005984A1 (en) * | 1985-04-09 | 1986-10-23 | Pharmacia Ab | Hyaluronic acid preparation to be used for treating inflammations of skeletal joints |
| WO1986006728A1 (en) * | 1985-05-09 | 1986-11-20 | Hill David Cullis | Preparation of hyaluronic acid |
| EP0221167A1 (en) * | 1985-05-09 | 1987-05-13 | CULLIS-HILL, David | Preparation of hyaluronic acid |
| US4851521A (en) * | 1985-07-08 | 1989-07-25 | Fidia, S.P.A. | Esters of hyaluronic acid |
| US5202431A (en) * | 1985-07-08 | 1993-04-13 | Fidia, S.P.A. | Partial esters of hyaluronic acid |
| US5336767A (en) * | 1985-07-08 | 1994-08-09 | Fidia, S.P.A. | Total or partial esters of hyaluronic acid |
| JPH01502964A (ja) * | 1986-06-18 | 1989-10-12 | サルフォン プロプライエタリー リミテッド | 蒸留装置および方法 |
| WO1998029125A1 (fr) * | 1996-12-27 | 1998-07-09 | Seikagaku Corporation | Remedes contre des troubles de la vessie |
| EP1174142A2 (en) * | 2000-06-20 | 2002-01-23 | Adaputogen Seiyaku K.K., (acting as Adaputogen Pharmaceutical Co., Ltd.) | Immunopotentiator comprising peptide and hyaluronic acid |
| EP1174142A3 (en) * | 2000-06-20 | 2002-01-30 | Adaputogen Seiyaku K.K., (acting as Adaputogen Pharmaceutical Co., Ltd.) | Immunopotentiator comprising peptide and hyaluronic acid |
| US6403560B1 (en) | 2000-06-20 | 2002-06-11 | Adaptgen Pharmaceutical Co., Ltd. | Immunopotentiator and method for preparing the same |
| KR100395298B1 (ko) * | 2000-07-07 | 2003-08-25 | 아답트겐 세이야쿠 가부시키가이샤 | 면역증강제 및 그 제조방법 |
| EP1865002A1 (en) | 2005-03-22 | 2007-12-12 | Q.P. Corporation | Low molecular weight hyaluronic acid and/or salt thereof, method for producing same, and cosmetic preparation and food composition containing same |
| JP2016518312A (ja) * | 2013-03-11 | 2016-06-23 | カトリック ユニバーシティ インダストリー アカデミック コーオペレイション ファウンデーション | 眼科炎症疾患治療用点眼剤組成物及びその製造方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS6354001B2 (ja) | 1988-10-26 |
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