JPS5831919B2 - ドウブツヨウコウセイブツシツソセイブツ - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は水性栄養培地中、アクチノプラネス・オウラン
チカラー（Ａｃｔｉｎｏｐｌａｎｅｓ ａｕｒａｎｔｉ
ｃｏｌｏｒ）ＡＴＣＣ３１０１１（微工研菌寄第３０１
８号）の深部好気増殖により製造された抗生物質混合物
を含有する動物用組成物に関する。

相乗作用の現象については抗生物質関係の文献に多く報
告されている。

例えば、ザ・ジャーナル・オブ・アンチバイオティック
ス（Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ。

ｏｆ Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ） ２５ 、Ａ６，３７
１（１９７２）；Ｊ、Ｃｈｅｍ、 Ｓｏｃ、 １９Ｃ
、１６５３（１９６６） ；Ｂｕｌｌ、Ｓｏｃ、Ｃｈｉ
ｍ、 Ｂｅ１ｇ、 ６８ 、７１６（１９５９）；Ｊ、
Ａｍｅｒ、Ｃｈｅｍ Ｓｏｃ、８２ 、 ４４１４（１
９６０） ；テトラヘドロン・レターズ（Ｔｅｔｒａｈ
ｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔｅｒｓ）２６８７ （１９７１）
； Ｊ、 Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ、 Ｓｅｒ。

Ａ１４，１４（１９６１）；ネイチャー（Ｎａｔｕｒｅ
）１８７ 、５９８ （１９６０） ； Ｊ、Ｃｈｅｍ
、 Ｓｏｃ。

２２８６（１９６０）；アンチミクロビアル・エージエ
ンツ・アンド・ケモセラピイー（Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ
ｉａｌ Ａｇｅｎｔｓ ＆ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｈ
ｙ） ３６０−３６５（１９６４）；テトラヘドロン・
レクーズ（Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔｅｒｓ）
４２３１−４２３８ （１９６６） ；オーガニック
・マス・スペクトロメトリー（Ｏｒｇ−ｎｉｃ ｍａｓ
ｓ Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ） ６ 、１５１−１６
６（１９７２）；テトラヘドロン・レターズ（Ｔｅ−ｔ
ｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔｅｒｓ） ３６９−３７
２ （１９６６）及びＪ、Ｃｈｅｍ、Ｓｏｃ、 １９Ｃ
、１６６９−１６７６（１９６６）が挙げられる。

本発明による新規な、相乗作用を有する抗生物質混合物
は他で報告されている相乗作用を有する混合物、すなわ
ち、ミカマイシン（ｍ ｉｋａｍｙｃ ｉｎ ）。

プリスチナマイシン（Ｐｒｉｓｔｉｎａｍｙｃｉｎ）
、オストレオグリシン（ｏｓ ｔ ｒｅｏｇｒｙｃ ｉ
ｎ ） 、ストレプトグラミン（ｓｔｒｅｐｔｏｇｒａ
ｍｉｎ）、 Ｐ、 Ａ、 １１４ ヴエルナマイシン
（ｖｅｒｎａｍｙｃｉｎ ）及びヴアージニアマイシン
（ｖｉ ｒｇｉｎｉａｍｙｃｉｎ ）の−科に属する。

本発明の混合物は大環式ラクトン類及びデフジペプチド
類を含有しており、溶媒抽出、向流分配カラムクロマト
グラフィーまたはこれらの組合せにより発酵プロスより
分離、回収できる。

個々の抗生物質成分は顕著な抗生作用を示す。

粗製抗生物質混合物またはこの粗製混合物から得られた
純粋な大環式ラクトン及び純粋なデプシペプチドの組合
せは著しい相乗抗生物質活性を示す。

この粗製抗生物質混合物、個々の純粋な抗生物質成分及
び純粋な大環式ラクトン及びデプシペプチドの混合物は
効果的なヒナ及び豚成育促進剤であり、豚赤痢を抑制す
る治療剤である。

本発明の抗生物質の製造に有用な微生物はエジプト産出
の土壌より単離されたものである。

これをバレイショーニンジン寒天上で培養しアクチノプ
ラネス（Ａｃｔｉｎｏｐｌａｎｅｓ ）属のものと同様
に胞子嚢を生産する放線菌類に属するものと判明した。

従って、このものをこの属の研究に使用された多数の培
地上で培養した。

培養用には寒天斜面より得られた生産菌の１片を各々０
．２ｍｌの滅菌蒸留水を含有する小試験管中で粉砕し、
内容物を洗い出し、更に滅菌水と合し、約５ｍｌの容量
とすることにより生産菌の懸濁液を調製した。

これら懸濁体を、種々の培地を含有する試験管、斜面ま
たはペトリ皿に植えつけるのに用いた。

特記しない限り、培養温度は２８℃であった。

結果はある試１験については２２日までの期間をおいて
観察したが、はとんどの結果は１４日後に記録した。

生産菌の色は、メルフ（Ｍａｅｒｚ ）及びボール（Ｐ
ｏｕｌ）によるディクショナリー・オブ・カラーズ（Ｄ
ｉｃｔｉｏｎａｒｙｏｆ Ｃｏ１ｏｒｓ ）第２版、１
９５０年による色を用いたが、個人的観察による色表現
も併記した。

この新規培養物〔ファイザ＝（Ｐｆｉｚｅｒ）Ｆ、Ｄ、
２４０９０）は１９７４年３月１１日付でアメリカ合
衆国メリーランド州ロックビル（Ｒｏｃｖｕ ｉ ｌ
ｌｅ ）のアメリカン・タイプ・カルチャー・コレクシ
ョン（Ｔｈｅ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌ
ｔｕｒｅ Ｃｏｌ １ｅｃｔ ｉｏｎ ）に提出されア
クチップラナス・オウランチカラー（Ａｃｔｉｎ。

ｐｌａｎｅｓ ａｕｒａｎｔｉｃｏｌｏｒ） ＡＴＣＣ
３１０１１と命名された。

生産菌の特性決定に用いた固定培地及びこれら組成に関
する文献は下記の通りである。

１．２％水道水寒天。

２、バレイジョン−ニンジン寒天。

エム・ピレシエバリエール（Ｍ、Ｐ、Ｌｅｃｈｅｖａｌ
ｉｅｒ）、Ｊ、Ｌａｂ。

＆、Ｃｌ１ｎ、 Ｍｅｄ、 ７１ 、９３４−９４４（
１９６８）。

但し、３０Ｐのバレイショ及び２５グのニンジンしか用
いなかったが寒天は２０Ｐ用いた。

３、ツアペック−蔗糖寒天・ニス・ニー・ワックスマン
（Ｓ、Ａ、 Ｗａｋｓｍａｎ ）ザ・アクチノマイセテ
ス（Ｔｈｅ Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｓ ） 、２
、３２８ （１９６１）培地嵐１．第３２８頁。

４、グルコース・アスパラギン寒天、ワックスマン、同
上、培地Ａ２、第３２８頁。

５、酵母エキス−麦芽エキス寒天。

ＡｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓＡｎｎ、１９５６Ｘ１９５７．
第９４７〜９３５頁。

６、 ヒツキー（Ｈｉｃｋｅｙ）及びトレスナー（Ｔｒ
ｅｓｎｅｒ）寒天、Ｊ、Ｂａｃｔ、６４．８９１−８９
２（１９５２）。

７、バレイショーグルコース寒天。

１００ｆのバレイショの皮をむきサイの目にし、５００
ｍ１の水中で蒸し、ボーズクロスで沢過し、１０グのグ
ルコース、２０Ｐの寒天及び１ｔとするために充分な水
を添加。

８、デンプン寒天。

Ｊ、Ｂａｃｔ、、 ７３ 、１５−２７（１９５７）
。

９、 ゼラチン。

Ｊ、Ｂａｃｔ、、７３，１５−２７（１９５７）。１０
、チロシン寒天。

Ｊ 、Ｂａｃｔ、、 ６９ 、１４７−１５０（１９５
５）。

１１、ディフコ（Ｄｉ ｒｃｏ ）ペプトン鉄寒天。

１２、ディフコ（Ｄｉｆｃｏ）脱脂粉乳。

１３、 テキストロース硝酸塩フロス。

ニス・ニー・ワックスマン、ザ・アクヂノマイセテスＬ
３２８（１９６１）。

蔗糖の代りに３．０１のグルコースを用い、寒天を用い
なかった培地Ａ１゜ １４、有機硝酸塩プロス。

Ｊ、 Ｂａｃｔ、 、 ７３ 、１５−２７（１９５７
）。

１５、ＡＴＣＣ培地１７２゜ＡＴＣＣカタログ、第１０
版、第２３５頁（１９７２）。

１６、炭素資化。

Ｊ、Ｂａｃｔ、、 ５６ 、１０７−１１４（１９４
８）。

この新規生産菌の培養性状は下記の通りである。

水道水寒天 生育は貧弱で薄くて平坦。

色はほぼ９Ｄ２（非常に薄いピンク色）。

気菌糸の生成なし、基質菌糸は無色ないし９Ｄ２゜可溶
性色素の生成なし。

ツアペック−蔗糖寒天。

生育は中庸ないし良好で平坦。

色はほぼ９Ｇ６（薄橙色）。

気菌糸の生成なし。基質菌糸はほぼ９Ｇ６゜可溶性色素
の生成なし。

グルコース−アスパラギン寒天 生育は中庸で盛り上りヒダが形成。

色はほぼ９Ｌ９（明橙色）気菌糸の生成なし。

可溶性色素の生成なし。

酵母エキス−麦芽エキス寒天 生育なし。

ヒツキー及びトレスナー寒天 生育は中庸ないし良好。

わずかに盛り上りヒダが形成。

色はほぼ９Ｆ９（暗橙色）。表面にわずかな白っぽい菌
糸生成。

基質菌糸はほぼ９Ｉ８゜薄褐色の可溶性色素が生成。

バレイショーグルコース寒天 生育は中庸、盛り上りヒダが形成。

色はほぼ９Ｌ９（明橙色）。

気菌糸の生成なし。基質菌糸はほぼ９Ｌ９ｏ可溶性色素
の生成なし。

グロシン寒天 生育は貧弱ないし中庸。

平坦。色は１３Ａ１０（帯赤暗橙色）。

気菌糸の生成なし。基質菌糸はほぼ１０Ｄ１１゜褐色の
可溶性色素が生成。

ゼラチン 生育は中庸。

平坦。色はほぼ９に１２（帯赤橙色）。

痕跡程度の白っぽい菌糸発生。基質菌糸はほぼ９に１２
ｏ可溶性色素の生成なし。

デンプン寒天 生育は中庸ないし良好。

盛り上る。色はほぼ９に１０（橙色）、わずかに白っぽ
い菌糸発生。

基質菌糸はほぼ９に１０ｏ薄黄色の可溶性色素が生成。

デンプンはわずかに加水分解された。

ゼラチンの液化は激しかった。

硝酸塩はいずれの硝酸塩培地においても２２日経過後も
亜硝酸塩に還元されなかった（生育はデキストロース硝
酸塩ブロス中では非常に貧弱であったが、有機硝酸塩中
では良好であった。

）。硫化水素がわずかに生威した。ペプトン鉄寒天中で
は可溶性色素は生威しなかった。

２２日経過後も牛乳は凝固または加水分解を起こさなか
った。

チロシンは消化されなかった。ＡＴＣＣ培地１７２上の
生育は２１〜３７℃で起き、２８℃及び３７℃で最高の
生育が得られた。

４５℃では生育はみとめられなかった。

アラビソス、フラクトース、クルコース、マンニトール
、ラフィノース、ラムノーズ、蔗糖及びキシロースは資
化されたがイノシトールは資化されなかった。

いずれの培地にも臭いはなかった。

胞子嚢はバレイショーニンジン寒天上のみに生成した。

これら胞子嚢は柵状層を形成した。大きさは幅、厚みが
５．５〜１１μ×４．４〜８μであり、高さ９〜１２μ
であった。

これらは非常に多く、形状が不規則であり、漸次軟化に
より胞子を遊離した。

３週間培養後のバレイショーニンジン寒天から得られた
胞子嚢は、培養物塊を１１のグルコース及び１ ｍｌの
ツイーン（Ｔｗｅｅｎ）８０を１ｔの水に溶解させた溶
液（Ｊ、Ｂａｃｔ、 ９４ 、４９５−４９８１９６７
に記載のエム・エル・ヒギンス（Ｍ、Ｌ。

Ｈｉｇｇｉｎｓ ）により用いられた溶液を一部変えた
もの。

〕少量に浸漬したところ、約２１℃にて数時間で胞子を
放った。

胞子は胞子嚢中では不規則な形で鎖状に連結していたが
遊離すると部分球状で１．６μ幅ないし長円球状で１．
６〜２．２μ×１．１〜１．６μとなった。

はとんど全てが運動性を有していた。

試、験的同定により、本発明の生産菌はアクチノプラネ
ス・オウランチカラーに匹敵するものであると判った。

この新規な菌株アクチノプラネス・オウランチカラーＡ
ＴＣＣ３１０１１及びアクチノプラネス・オウランチカ
ラーＡＴＣＣ１５３３０はベネット（Ｂｅｎｎｅｔ ｔ
）の寒天、栄養寒天、酵母エキス寒天、グルコース−
アスパラギン寒天、グリセロール−アスパラギン寒天、
リンコ酸カルシウム寒天及びチロシン寒天上の形態学的
特性、色及び可溶性色素において本質的に似ていた。

いずれの菌も硝酸塩を亜硝酸塩に還元しなかった。

両者ともわずかに硫化水素を生成したが、ペプトン−鉄
基天上にメラニンを生成しなかった。

両者ともにデンプンを加水分解した。

アクチノプラネス・オウランヂカラーＡＴＣＣ１５２２
０は脱脂粉乳式１験管中で例の変化ももたらさなかった
が新規生産菌は使用した６本の牛乳試験管のうち３本に
おいて清澄化を起し、２１日後黄乳白色の可溶性色素を
生成した。

アクチノプラネス・オウランチカラーＡＴＣＣ３１０１
１はグルコース、アラビノース、フラクトース、マンニ
トール、ラフィノース、ラムノス、蔗糖及びキシロース
を資化した。

アクチノプラネス・オウランチカラーＡＴＣＣ１５３３
０はラフィノースを除き、これら全ての糖類を資化した
。

二種の菌の胞子嚢及び胞子は似ていたが、アクチノプラ
ネス・オウランチカラＡＴＣＣ１５３３０の方がより桿
状をしていた。

最も重要なことは、アクチノプラネス・オウランチカラ
ーＡＴＣＣ１５３３０はアクチノプラネス・オウランチ
カラーＡＴＣＣ３１０１１が本発明の抗生物質混合物を
製造した発酵条件下において全く抗生物質活性を与えな
かったことである。

アクチノプラネス・オウラングカラーＡＴＣＣ３１０１
１の培養は好ましくは、水性栄養培地中、２８〜３６℃
の温度で、深部好気条件下で撹拌下に行われる。

このような目的に有用な栄養培地は糖類、デンプン及び
糖蜜のような同化可能な炭素源及び、カゼイン、カゼイ
ンの酵素消化物、大豆粉、綿実粉、落花生粉及び小麦グ
ルテンのような有機窒素源を含む。

蒸留残渣の可溶成分、魚粉及び酵母エキスのような生育
物質源並びに塩化ナトリウムや炭酸カルシウムのような
塩及び鉄、マグネシウム、亜鉛、コバルト及びマンガン
のような痕跡量の無機質も好ましい結果をもって資化さ
れる。

発酵中に過度の泡発生が起きる場合に（ま、植物油また
はシリコンのような消泡剤を発酵培地に添加してもよい
。

深部醗酵タンク中の培地の通気は好ましくは、１分間当
りプロス１容量に対し無菌空気約１／２〜２容量の割合
に保たれる。

撹拌は発酵産業界で通常よく知られた撹拌装置により行
うことができる。

勿論、生産菌の移植及びその生育期間中無菌状態を保た
ねばならない。

抗生物質混合物を製造するための種田は上で参照事項を
述べたＡＴＣＣ培地１７２のような培地上の斜面培養か
らの生育物を用いることにより、得られる。

この生育物は振盪フラスコ、種田槽のいずれに接種する
ために用いてもよく、あるいは、種田槽を振盪フラスコ
から種付けしてもよい。

振盪フラスコ中では生育物は通常約４日間で最高に達す
る一方、深部種田槽中の種田は普通２〜３日間で最も好
ましい段階になる。

実質的な抗生物質活性はほぼ２０〜３０時間で最終発酵
槽段階にて得られる。

抗生物質の製造過程は黄色ブドウ球菌 （Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）の感
度の高い菌株を用いてプロスの生物検症により発酵の途
中で都合よく追跡される。

標準平板検定法が採用される。この方法はプロスで飽和
された沢紙盤を映む発育阻止帯の大きさを抗生物質力価
の測度とするものである。

発酵プロスが所望の抗生物質力価に達した後、生成物を
全プロスまたは沢過したプロスのいずれかより単離する
。

後者の場合は菌糸体はｐ過または遠心分離により除去さ
れる。

フィルタープレス、遠心分離等の種々のタイプの装置が
使用できる。

シリカゲルを用いた薄層クロマトグラフィーは発酵培地
で製造された抗生物質混合物及び発酵プロスより抽出し
た粗製及び精製混合物の組成を分析するための有用な手
段である。

抗生物質混合物の成分の分解能は薄層クロマトグラフィ
ーに要した抗生物質の使用量に太いに依存している。

使用量が少なすぎると微量な抗生物質成分を見つけだす
ことができず、一方便用量が多すぎると分解能が乏しく
なり、抗生物質の確認が困難となる。

薄層クロマトグラフィーの展開剤系はクロロホルム−エ
タノール（９：１）である。

展開後この薄層クロマトグラムは紫外線下、２５４ｍμ
及び３６６ｍμにおいて観察される。

抗生物質成分のバイオオートグラフィーによる検出は黄
色ブドウ球菌（Ｓ ｔａｐｌｙｌｏｃｃｕｓ ａｕｒｅ
ｕｓ ）の感度の高い菌株または他の感度の高い試験菌
を植えた栄養豊かな寒天薄層で被うことにより行われる
。

アクチノプラネス・オウランチカラーＡＴＣＣ３１０１
１により製造された抗生物質混合物の主要成分は多くの
大環式ラクトン及びデブシペプチド抗生物質成分を含む
。

これら抗生物質成分の出現もしくは非出現または百分率
組成は発酵条件により変化し、時間、ｐＨ，培地組成等
の関数である。

後出の実施例にて与えられた条件の組合せのもとでは抗
生物質混合物中の主な抗生物質成分は化合物３７．２７
７ （デプシペプチド）及び３６，９２６（大環式ラク
トン）であり、一方、少ない抗生物質成分は化合物３７
．９３２ （デプシペプチド）及び３５，７６３（大環
式ラクトン）である。

抗生物質混合物の成分は例えば溶媒抽出、フレイブ（Ｃ
ｒａｉｇ）向流分配、カラムクロマトグラフィまたはそ
れらの組合せのような多くの種々の方法により発酵プロ
スより分離、回収される。

クロロホルム、酢酸エチル及びメチルイソブチルケトン
のような各種有機溶媒がプロスより抗生物質を抽出する
のに有用である。

溶媒抽出は、好ましくは抗生物質混合物を回収すべきプ
ロスの容量の約１／３〜１／２にほぼ相当する容量の溶
媒を用いて約ｐＨ７でプロスを２回抽出することにより
行われる。

処理すべきプロスの容量により、種々の装置、例えば分
液ロート、撹拌槽及び遠心分離機のような機械的抽出装
置が抽出目的に役立つ。

抗生物質混合物の成分の好ましい分離、回収方法は次の
通りである。

全もしくは清澄化プロスを約ｐＨ７に調整し、約１／３
〜１／２容量のメチルイソブチルケトンで２回抽出する
。

溶媒抽出物を真空下で濃縮し、この濃縮物をヘプタンま
たは石油エーテルで抽出することにより脱脂する。

脱脂した溶媒濃縮物を次いで真空乾固させる。

得られた固体はトルエン５部、エタノール２部、ｐＨ４
，５のリン酸塩緩衝水溶液３部を用いたフレイブ向流分
配（６プレート）にかける。

分離した層は向流分配系の上下相を与える。

分配後、両層を薄層クロマトグラフィーにより調べる。

分離したフラクションを真空乾固させる。

デプシペプチド類を含有する固体はクロロホルムに溶解
し、活性炭処理を行い、沢過して真空蒸発させる。

クロロホルム蒸発で得られた残渣をアセトンに溶解する
。

ヘプタンを添加し、析出した固体を少量のクロロホルム
に溶解し、クロロホルム：ｎ−プロパツール（９９：１
％ン ）中で■ 作りかつ緩衝剤でｐＨ６としたシリカゲルのカラムに適
用する。

このカラムを５．６２４ ｋｆ／ｃｒＡ（８，０ｐｓｉ
）の圧力下、同−溶媒系を用いて展開する。

カラムフラクションを薄層クロマトグラフィーにより調
べる。

分離されたデプシペプチド類を含有するフラクションを
合せて真空蒸発させアセトン−ヘプタンより結晶化させ
る。

大環式ラクトンを含有する向流分配フラクションは合せ
て真空蒸発させ、固体を酢酸エヂルに溶解する。

この溶液をシリカゲルと共に撹拌し、沢過し、溶媒を真
空下で除去する。

残渣を酢酸エチルに溶解し、ヘキサンで析出させる。

固体を少量のクロロホルムに溶解し、酢酸エチル中で作
りかつ緩衝剤でｐＨ６，０にしたシリカゲル上で５．６
２４＠／ｃｒＡ （８０ｐｓ ｉ ）の圧力下でカラム
クロマトグラフィーを行う。

展開剤系は酢酸エチル−テトラヒドロフラン−ヘキサン
（８０：２０：２０）をｐＨ６，０のリン酸塩緩衝水溶
液で飽和させたものである。

カラムフラクションを薄層クロマトグラフィーにより調
べた。

分離された大環式ラクトン類を含有するフラクションを
合せて真空蒸発させた。

各フラクションは別々に更にフレイブ向流分配及び／ま
たは異なる展開剤系を用いたカラムクロマトグラフィー
を行う。

各精製段階を注意深く監視することにより各々大環式ラ
クトンは光分離れて位置付けされるので、溶媒フラクシ
ョンを乾固することにより純粋な化合物が得られる。

アクチノプラネス・オウランチカラーＡＴＣＣ３１０１
１は少なくとも４種のデプシペプチド類及び少なくとも
４種の大環式ラクトン類を製造する。

しかしながら、主要成分はデプシペプチド化合物３７．
２７７ （多）及び３７．９３２ （少）及び大環式ラ
クトン化合物３６，９２６（多）及び３５．７６３（少
）である。

ブロスから直接得られた粗製抗生物質混合物及び精製し
た各々の成分は広い抗菌スペクトルを有する。

これらの抗生物質の存在下で増殖することのできない試
験菌には腸チフス菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌ １ａｔｙｐｈ
ｏｓａ ）、赤痢菌（Ｓｈｉｇｅｌｌａ ｄｙｓｅｎｔ
ｅｒｉａｅ）、大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏ
ｌ ｊ ）、肺炎桿菌（Ｋｌｅｂｓｉｅｌ ｌａｐｎｅ
ｕｍｏｎｉａｅ ）、黄色ブドウ球菌（ＳＬａｐｈｙ
１ｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓ ）、化膿連鎖球菌（Ｓ
ｔ ｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓｐｙｏｇｅｎｓ）、大便
連鎖球菌（５ｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓｆａｅｃａｌｉ
ｓ）、肺炎収繭（Ｄｉｐｌｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍ
。

ｎ１ａｅ）、枯草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ５ｕｂｔｉｌ
ｉｓ）、ジフテリア菌（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕ
ｍ ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａｅ ）、クロストリジウム・
セプチカム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｓｅｐｔｉｃｕ
ｍ）、ウシ流産菌（Ｂｒｕｃｅｌｌａ ａｂｏｒｔｕｓ
）、ナイセリア。

シラ力（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ５ｉｃｃａ）、ラクトバ
チルス・アシドフィルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉ １ｌｉ
ｕｓ ａｃｉｄｏｐｈｉ ｌｕｓ ）及びパスツレラ・
ムルトシダ（Ｐａｓｔｅｕｒｅｌ ｌａ ｍｕｌ ｔ。

ｃｉｄａ）が含まれる。

本発明による抗生物質は、和製混合物としであるいは精
製した各成分もしくはそれらの混合物の形態として、動
物の種々の感染を治療するのに用いることができる。

一般的には、これらの抗生物質は感染のタイプと程度及
び処理すべき被験体の重量により１日当り、０．５〜１
グの経口投薬量または１００〜５００Ｔ１ｇの非経口投
薬量で投与するのが最も望ましい。

本発明による化合物は単独でもまたは薬学的に適当な担
体と組合せて投与してもよい。

そしてこのような投与は単−及び複数投薬量いずれでも
行うことができる。

経口投与を行うにはクエン酸ナトリウム、炭酸カルシウ
ム及びリン酸カルシウムのような各種の賦形剤を含有す
る錠剤をデンプン、アルギン酸、及びある種のケイ酸塩
錯体のような種々の分散増量剤並びにポリビニルピロリ
ドン、蔗糖、ゼラチン及びアラビアゴムのような結合剤
と共に用いることができる。

更に、ステアリン酸マグネシウム、ラウリル硫酸ナトリ
ウム及びタルクのような潤滑剤が錠剤製造目的にしばし
ば有用である。

同様なタイプの固体組成物もソフト及びハードゼラチン
カプセル剤の充填剤として用いられ、好ましい物質とし
ては乳糖及び高分子量ポリエチレングリコール類が含ま
れる。

水性懸濁液及び／またはエリキシルが経口投与に望まし
い場合は、その中の必須活性成分は種々の甘味料もしく
は香味料並びに水、エタノール、プロピレングリコール
、グリセロール及びこれらの種々を組合せたような希釈
剤と併用してもよい。

この活性化合物は動物用飼料または飲料水またはそれら
に混入すべきプレミックス中に添加して投与できる。

興味あることには、本発明による個々の抗生物質は本質
的に太いに静菌性の抗菌活性を示すのに対し、粗製の抗
生物質混合物または精製したデプ呵←シペプヂド及び精
製した大環式ラクトンの混合物は本質的に太いに殺菌性
の相乗作用を示す。

主要大環式ラクトン化合物３６，９２６（Ａ）及び主要
デプシペプチド化合物３７．２７７ （Ｂ ）を別個に
及び組合せて、下記の試験菌に対する試験管希釈法によ
り測定したところ、下記の最小発育阻止濃度（Ｍ、１．
Ｃ）が得られた。

単位はμｆ／ｍｌである。

少ない方の大環式ラクトン化合物３５．７６３（Ａ′）
及び少ない方のデプシペプチド化合物３７．９３２（Ｂ
’）を単独にまたは組合せ、すなわち、Ａ’、Ａ、Ｂ’
、Ｂ そして（Ａ’＋Ｂ’）（Ａ’＋ＢＸＡ＋Ｂ’
）’（Ａ＋Ｂ）、として分析したところ同等の結果が得
られた。

精製した大環式ラクトン及びデプシペプチドの組合せに
よる最大相乗作用は約１〜２：１の比率範囲で得られる
。

はぼこのような比率はアクチノプラネス・オウランチカ
ラーＡＴＣＣ３１０１１の発酵プロス及びそれより単離
した粗製の抗生物質混合物において現われる。

このような発見は相乗作用因子は発酵プロス及び粗製混
合物において最適以下で現われるという他に報告されて
いる相乗作用を有する抗生物質混合物とは対照的である
。

黄色ブドウ球菌属（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｏ
ｕｒｅｕｓ）の菌株で実験的に感染させたマウスにおけ
る経口及び皮下投与による生体内保護データを下記の表
１に示す。

本発明による抗生物質はその広い抗菌スペクトルのため
に家禽類及び動物の生育促進剤として、及び豚赤痢に関
係する嫌気性スピロヘータであるトレポネーマ・バイオ
ダイセンテリー（Ｔｒｅｐ。

ｎｅｍａ ｈｙｏｄｙｓｅｎｔｅｒｉａｅ ）に対する
顕著な作用のためこの病気の治療のために特に興味深い
ものとみなされている。

粗製抗生物質混合物（ロット１，４４頁）の生育促進作
用を若い肥育用豚において４０日間の試験で測定した。

１日商りの平均体重増加、飼料消ネ＊費及び飼料効率は
施薬しなかった対照動物に対し著しく向上していた。

（表２参照）※体重増加ボンド当りの飼料ポンド数 第４４頁に記載した組成を有する他の粗製の抗生物質混
合物により１０〜１００凹の範囲で同等の結果が得られ
た。

同様に個々の純粋な化合物３６，９２６ 、３７，９３
２及び３７．２７７または第４４頁に記載されている粗
製の抗生物質混合物と組成において似かよって☆☆いる
純粋な化合物の混合物を投与することにより同等の結果
が得られる。

生育促進効率はヒナ鳥バッチＩＪ−％ｉｌ育実験におい
て立証された。

この抗生物質含有飼料を与えたヒナ烏について、施薬し
なかった対照ヒナ鳥に対し対重増加において著しい向上
（ｐ＜ｏ、ｏ １ ）が観察された。

第４４頁に記載した組成を有する他の粗製の抗生物質混
合物を用い１０〜１００ｐｐｆｆｌの範囲で同等の結果
が得られた。

同様に個々の純粋な化合物３６．９２６．３７，９３２
及び３７．２７７または第４４頁に記載した粗製の抗生
物質混合物と組成において似ている純粋な化合物の混合
物を投与することにより同等の結果が得られる。

嚇☆ 本発
明による抗生物質の予防効能は豚赤痢を起こす感染物質
に実験的に感染させた豚において測定した。

豚赤痢が流行ったと診断された集団から結腸内容物及び
粘膜掻爬物を得た。

正常の豚にこの物質を直接接種することにより感染させ
た。

抗生物質を含有する飼料を２８日間にわたり投与した。

結果を表４に示す。第４４頁の他の抗生物質混合物、純
粋な個々の化合物３６，９２６．３７，９３２及び３７
．２７７または第４４頁に記載した粗製の抗生物質混合
物と組成の似ている混合物を用いて１０〜１００ｐｐｌ
Ｉｌの範囲で同等の結果を得ることができる。

以下、本発明の実施例を示す。

実施例 １ 下記の組成を有する滅菌水性培地を調製した。

ＡＴＣＣ培地１７２上で生育したアクチノプラネス・オ
ウランチカラーＡＴＣＣ３１０１１の斜面培養からの細
胞を各々５０７１１１のこの培地を含有している一組の
３００ｍ１のエーレンマイヤー（Ｅｒｌｅｎｍｙｅｒ
）フラスコに移し、回転振盪機で３〜４日間、２８〜３
０℃で振盪した。

生育した接種物の部分標本５ｍｌずつを各々１００ｍ１
の上述した滅菌培地を含有している３００Ｔｌｌのエー
レンマイヤーフラスコに移した。

２８〜３０℃で３〜４日間振盪した後、生育した接種物
の５〜１０％■■を、下記の滅菌培地２ｔずつを含有し
ている４ｔの発酵槽に移した。

発酵を２８〜３６℃にて１７００ｒｐｍで撹拌し、１分
間当りプロス１容量につき約１容量の空気を用いて通気
して２０〜３０時間行った。

全ブロスを必要ならばｐＨ７，０に調整後、１／３〜１
／２容量のメチルイソブチルケトンで２回抽出した。

溶媒抽出物を真空濃縮し、石油エーテルで抽出すること
により脱脂した。

発酵ブロス、溶媒抽出物及びその後のフラクションの活
性は展開剤としてクロロホルム−エタノール（９：１）
を用いたシリカゲル薄層クロマトグラフィー及び２５４
ｍμと３６６ｍμにおける紫外線吸収の観察により追跡
した。

脱脂した溶媒濃縮物を真空乾固させた。

得られた固体を、トルエン５部、エタノール５部及びリ
ン酸塩緩衝水溶液（ｐＨ４，５）３部を用いた６プレー
トのフレイブ（Ｃｒａｉｇ）向流分配にかけた。

分離した層は向流分配系の上下相を提供した。

分配後、これらの層を薄層クロマトグラフィーにより調
べた。

デプシペプチドである化合物３７．２７７は上部の層、
主としてプレートＯに集中していた、第２のデプシペプ
チドである化合物３７．９３２はプレート１，２及び３
の上部層から回収された。

大環式ラクトンである化合物３５．７６３は主としてプ
レート０及び１の下部層に発見された。

化合物３６．９２６はプレート２，３，４及び５の下部
層に集中していた。

化合物３７．２７７を含有するプレート０の上部相を真
空乾固させ、クロロホルムに溶解し、活性炭とともに約
３０分間撹拌した。

溶液を濾過し真空蒸発させた。

残渣をアセトンに溶解し、ヘプタンを添加して固体を析
出させた。

析出した固体を少量のクロロホルムに溶解し、クロロホ
ルム：ｎプロパツール（９９： １％Ｖ／Ｖ ）中で作
った、ｐＨ６に調整したシリカゲルカラムでクロマトグ
ラフィーを行った。

このカラムを５．６２４ ｋｇ／ｃｒＡ（８０ｐｓｉ）
の圧力下、同一溶媒系を用いて展開した。

カラムフラクションを薄層クロマトグラフィーにより調
べた。

分離された化合物３７．２７７を含有しているフラクシ
ョンを合せ、真空蒸発させ、アセトン−へブタンからこ
の化合物を結晶化させた。

化合物３７．２７７は決った融点を有しておらず、分解
は１４０〜１５０℃で始まった。

この化合物はジエチルエーテル、ヘキサン、ヘプタン及
び水は不溶性であった。

このものはアセトン及びベンゼンにわずかに溶解し、メ
タノール、エタノール、クロロホルム及びジクロルメタ
ンに易溶性であった。

化合物３７．２７７を分析したところ、下記の平均組成
比を得た。

炭 素 ６０．９１水 素
５．９８窒 素
１０．４５酸 素（差により） ２
２．６６化合物３７．２７７は光学的活性を有し、比旋
光度は〔α、ｌ］７５＝＋１１°（１％エタノール溶液
）であった。

このもののエタノール中での紫外線吸収極太は２２５，
２７４，２８３，３０３及び３５５ｍμで起り、各々の
吸光度ＥｌＬ値は３０．９３ 、３６．６７゜４５．０
１，７０及び２０であった。

化合物３７．２７７の赤外線スペクトルを図１として添
付した。

クロロホルム溶液は、赤外領域で下記の波長において特
性吸収を示す。

その波長とは３．０５，３，４０ ５．７０ ５，７７
５．９３６．０７ 、６．６２ 、６．８２及び７．
６７ミクロンである。

化合物３５，７６３及び３６，９２６を含有している向
流分配フラクションを真空蒸発させ、残渣を酢酸エチル
に溶解し、溶液をシリカゲルとともに撹拌した。

汗過した溶液を真空蒸発させ、残渣を酢酸エチルに溶解
し、ヘキサンを添加して固体を析出させた。

析出した固体を少量のクロロホルムに溶解し、酢酸エチ
ル中で作った、ｐＨ６，０に調整したシリカゲルカラム
でクロマトグラフィーを行った。

カラムをｐＨ６，０のリン酸塩緩衝水溶液で飽和させた
酢酸エチル：テトラヒドロフラン：ヘキサン（８０：２
０：２０）を用いて５．６２４ｋｇ／ｃａ （８０ｐｓ
ｉ）で展開した。

最初の１７のカラムフラクションは各々２０７ｎｌで、
黄色の油を含有しているものであったがこの油は廃棄し
た。

フラクション２６〜４０は化合物３６，９２６を多く含
有していた。

フラクション４１〜５０は主として化合物３６，９２６
及び３５．７６３の混合物であった。

フラクション２６〜４０を合せて、真空濃縮し、再びシ
リカゲルでクロマトグラフィーを行い、２０ｍ１ずつの
フラクションを採取した。

最初の１５のフラクションは黄色の油を含有しており、
これは廃棄した。

フラクション１６〜３ｏは主に化合物３６．９２６であ
った。

フラクション３１〜４０は化合物３６，９２６及び３５
，７６３の混合物を含有していた。

フラクション１６〜３ｏを真空蒸発させ、残渣を少量の
クロロホルムに溶解し、クロロホルム中で作ったｐＨ６
，０に調整したシリカゲルカラムに適用した。

このカラムラ９．１３９１（ｔ７／ｃｒＡ （１３０ｐ
ｓ ｉ ）の圧力下でクロロホルム：エタノール（９５
，５：４．５％Ｖ／Ｖ ）で展開し、各６７１１１宛の
フラクション１６０個を採取した。

フラクション６０〜９０は化合物３６，９２６のみを含
んでいた。

これらを合せ、真空蒸発させた。残渣を最少限のエタノ
ールに溶解し、エーテルテ析出させることにより純粋な
無定形の化合物３６，９２６を得た。

化合物３６，９２６はメタノール、エタノール、クロロ
ホルム及びジクロルメタンに可溶性であった。

このものはジエチルエーテル、ヘキサン及びヘプタンに
溶解しなかった。

化合物３６，９２６は明確な融点を有さなかった。

分解は約１００℃で開始した。

分析により下記の平均組成比を得た。

炭 素 ５７．８９水 素
６．７８窒 素
８．０４酸 素（差により） ２
７．２９高分解能マススペクトルによる分子量は５０１
で、分子式Ｃ２６Ｈ３５Ｎ３０７であった。

化合物３６，９２６は光学的に活性であり比旋光度〔α
）２５ｏ−−１３０°（１％エタノール溶液）を有り していた。

この化合物のエタノール中での紫外線吸収極太は２１４
ｍμでその吸光度Ｅ（よは、７２３．８であった。

化合物３６，９２６の赤外線スペクトルを図２として添
付した。

ＫＢｒディスクは赤外領域で下記の波長において特性吸
収を示した。

その波長とは２．９５ 、３．４０ 、５．７５ 、５
．９８．６．２３，６．５８゜６．８７ 、７．４５
、８．２５ 、８．３８．８．８０，９．０８゜１０．
１５．１０．３５．１１．１０及び１３．３０ミクロン
である。

この化合物は１９７４年９月１１〜１３田こ開催された
殺菌剤及び化学療法に関する第１４回Ｉ ＣＡＡＣ（Ｔ
ｈｅ Ｆｏｕｒｔｅｅｎｔｈ Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃ
ｅ Ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ ｏｎ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏ
ｂｉａｌ Ａｇｅｎｔｓ ａｎｄ Ｃｈｅｍ。

ｔｈｅｒａｐｈｙ ）にて報告された抗生物質である。

Ａ２３１５Ｂと類似もしくはそれと見分けがっかないよ
うであった。

化合物３５，７６３を化合物３６，９２６の場合とほと
んど同じ方法により単離、精製した。

純粋な化合物はメタノール、エタノール、クロロホルム
及びジクロルメタンに可溶性であり、ジエチルエーテル
、ヘキサン及びヘプタンに不溶性であった。

明確な融点は存在せず、分解は約１００℃で開始した。

分析により下記の平均組成比を得た。炭 素
６１．２９水 素
６．７３窒 素 ８．
８３酸 素（差により） ２３．１５高分解能
マススペクトルによる分子量は５０３であり、分子式は
Ｃ２６Ｈ３□Ｎ３０７であった。

化合物３５，７６３は光学的に活性であり、比旋光度〔
α〕２５−−１１４°（１％エタノール溶液）を有して
いた。

この化合物のエタノール中での紫外線吸収極大は２１８
？？Ｚμでありその吸光度ＥＥミは６６８９であった。

化合物３５，７６３の赤外線スペクトルを図３として添
付した。

ＫＢｒディスクは赤外領域で下記の波長において特性吸
収を示した。

その波長とは２．９５ 、３．３８ 、５．７３ 、６
．００．６．２３，６．６０゜６．８８ 、７．２３
、８．２５ 、８．３８ 、８．８３及び１０．２０ミ
クロンである。

化合物３５，７６３はオランダ特許第７，３１０，６１
３号に記載された抗生物質Ａ−２３１５と類似もしくは
それと見分けがつかないようであった。

化合物３７．９３２を含有している向流分配フラクショ
ンを真空乾固させ、残渣を石油ニータル中で粉砕し、上
述のようにシリカゲルカラムを用いてクロマトグラフィ
ーを行った。

適当なフラクションを合せ、アセトン：ヘプタンより結
晶化することにより化合物３７．９３２を得た。

化合物３７，９３２はメタノール、エタノール、クロロ
ホルム及びジクロルメタンに可溶性であり、ジエチルエ
ーテル、ヘキサン、ヘプタン及び水に不溶性であった。

この化合物は明確な融点を有さなかった。

分解が約１８５℃で開始した。元素分析により下記の平
均組成比を得た。

炭 素 ５９．４１水 素
６．０１窒 素
１０．６６酸 素（差により） ２
３．９２化合物３７．９３２は光学的に活性であり、比
旋光度〔α〕２５０＝＋５．０°（０，２５％クロロホ
ルム溶り 液）を有していた。

この化合物のエタノール中での紫外線吸収極大は２２６
．２７６．２８３ 。

３０５及び３５５ｍμに現われ、その吸光度Ｂ １ 、
Ｚ値は各々３０４．４ 、３６．８ 、４３．４９ 、
７０．２５及び２０．０７であった。

化合物３７．９３２の赤外線スペクトルを図４として添
付した。

ＫＢｒディスクは赤外領域で下記の波長において特性吸
収を示した。

その波長とは、２．９６ 、３．０５ 、３．３８ 、
５．６８，５．７３，５．９３゜５．９８ 、６．１３
、６．５０ 、６．５８，６．８８，７．４０゜７．
６５ 、８．０８ 、８．４５ 、８．６０，９．０３
，９．４５゜９．７０，９．９８，１０．５５，１１．
００，１１．２５゜１１．６０ 、１２．３５及び１３
．２５ミクロンである。

実施例 ２ 下記の組成を有する発酵培地を用いて実施例１の方法を
繰り返すことにより同等の結果を得た。

実施例 ３ 下記の組成を有する発酵培地を用いて実施例１の方法を
繰り返すことにより同等の結果を得た。

実施例 ４ 下記の組成を有する発酵培地を用いて実施例１の方法を
繰り返すことにより同等の結果を得た。

実施例 ５ 実施例１の方法を繰り返した。

発酵の終了したブロスのメチルイソブチルケトン抽出物
を真空乾固させ、残渣を石油エーテル中で粉砕した。

この脆い物質を磨砕し、抗生物質成分を、高速液体クロ
マトグラフィー分析により定量測定した。

別々の発酵生産物からの和製抗生物質混合物の代表的な
バルクロットの分析値は下記の通りであった。

実施例 ６ 非反すう動物の飼料効率を増大させ、豚赤痢を抑制する
ために飼料組成物に混入する抗生物質プレミックスを次
の成分からなる基礎配合物から製造した。

（Ａｃｔｉｎｏｐｌａｎｏｅｓ ａｕｒａｎｔｉｃｏｌ
ｏｒ ） ＡＴＣＣ３１０１１の発酵により生産された
化合物３５．７６３ ；３６．９２６；３７，２７７お
よび３７．９３２からなる抗生物質混合物、あるいは各
々化合物３７，２７７または３６，９２６または３７．
９３２単独１０１を含有するプレミックスである。

完全飼料１トン当りプレミックス１ポンドでは最終抗生
物質レベル１１ｐｐｌ［Ｉとなる。

実施例 ７ アクチノプラネス・オウランチカラー （Ａｃｔｉｎｏｐｌａｎｅｓ ａｕｒａｎｔｉｃｏｌｏ
ｒ） ＡＴＣＣ３１０１１の発酵によって生産された化
合物３５，９６３；３６．９２６；３７，２７７および
３７．９３２からなる抗生物質混合物あるいは各々化合
物３７，２７７；３６．９２６または３７．９３２単独
をエタノールまたはプロピレングリコールのような適当
な溶媒に溶解することによって所望の濃度の抗生物質を
含有する、非反すう動物の飼料効率を高め、豚赤痢を抑
制するために飲料水に添加するに適した抗生物質プレミ
ックス液体濃縮物を製造した。

【図面の簡単な説明】 第１図乃至第４図は各々本発明による抗生物質である化
合物３７，２７７ 、３６，９２６．３５，７６３及び
３７．９３２の赤外吸収スペクトルを示す。 微量ミネラルプレミックス（ｂ）こん跡量（ａ） 飼
料１ポンド当りビタミンＡ、２０００国際単位；ビタミ
ンＤ１２００国際単位；ビタミンＥ％ ５国際単位；
ビタミンに、１■；ニアシン１２１ｎｇ；リボフラビン
、１５■；パントテン酸７η；塩化コリン、５００７Ｉ
ＩＩｉ；ビタミンＢ１□、１０ｍｃｇ配合。 （ｂ） ？グネシウム、１２０１）ｐｌｎ；鉄、４ｏ
ｐｐｍ；銅、４ｐ−；ヨウ素、２４ｐＩ）ＩＩＩ；コバ
ルト、ｏ、４ｐｐｍ；亜鉛、１００ｍ配合。 プレミックス１ポンド当りの抗生物質の量は所望通り変
更できる。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 化合物３６，９２６ ； ３７，２７７ ；３７，
   ９３２ ；またはそれらの混合物および動物用飼料、飲
   料水またはプレミックスを含む薬学上適当な担体からな
   る動物用抗生物質組成物。 ただｂｆ昭物３６，９２６はメタノール、エタノール、
   クロロホルム及ヒジクロルメタンに可溶性であって、ジ
   エチルエーテル、ヘキサン及びヘプタノに溶解せず、明
   確な融点を有せず分解は約１００℃で開始し、分析によ
   り下記の平均組成比を得し： 炭素 ５７．８９ 水素 ６，７８ 窒素 ８．０４ 酸 素（差により） ２７．２９ 高分解能マススペクトルによる分子量は５０１で、分子
   式Ｃ２６Ｈ３５Ｎ３０７であり、光学的に活性であり、
   比旋光度〔α〕２５°−−１３００（１％エタノ−ル溶
   液）を有し、エタノール中での紫外線吸収極大は２１４
   ｍμでその吸光度ＥＦ乙は７２３８であり、赤外線スペ
   クトルは第２図のとおりであり、ＫＢｒディスクは赤外
   領域で下記の波長において特性吸収を示し： ２．９５ 、３．４０ 、５．７５ 、５．９８．６．
   ２３，６．５８゜６．８７ 、７．４５ 、８．２５
   、８．３８．８．８０，９．０８゜１０．１５，１０．
   ３５，１１．１０及び１３３０ミクロン； 化合物３７．２７７は決った融点を有しておらず、分解
   は１４０〜１５０℃で始まり、ジエチルエーテル、ヘキ
   サン、ヘプタノ及び水に不溶性であり、アセトン及びベ
   ンゼンにわずかに溶解し、メタノール、エタノール、ク
   ロロホルム及びジクロルメタンに易溶性であり、下記の
   平均組成比を有し：炭素 ６０．９１ 水素 ５，９８ 窒素 １０．４５ 酸 素（差により） ２２．６６光学的活性を
   有し、比旋光度は〔α〕２５°＝＋１１゜（１％エタノ
   ール溶液）であり、エタノール中での紫外線吸収極太は
   ２２５，２７４．２８３，３０３及び３５５ｍμで起り
   、各々の吸光度Ｅ（急値は３０９．３，３６．６７．４
   ５．０１，７０及び２０であり、赤外線スペクトルは第
   １図のとおりであり、クロロホルム溶液は、赤外領域で
   下記の波長において特性吸収を示し： ３．０５ 、３．４０ 、５．７０ 、５．７７ 、５
   ．９３，６，０７６．６２ 、６．８２及び７．６７ミ
   クロン；化合物３７，９３２はメタノール、エタノール
   、クロロホルム及びジクロルメタン６Ｃ可溶性であり、
   ジエチルエーテル、ヘキサン、ヘプタン及び水に不溶性
   であり、明確な融点を有しておらず、分解が約１８５℃
   で開始し、元素分析により下記の平均組成比を有し： 炭素 ５９．４１ 水素 ６．０１ 窒素 １０．６６ 酸 素（差により） ２３．９２ ２５゜ 光学的に活性であり、比旋光度〔α、ｌ −＋５．０
   ゜（０，２５％クロロホルム溶液）を有し、エタノール
   中での紫外線吸収極太は２２６．２７６．２８３゜３０
   ５及び３５５ｍμに現われ、その吸光度Ｅ１％ｃｍ 値は各々３０４．４ 、３６．８ 、４３．４９ 、７
   ０．２５及び２０．０７であり、赤外線スペクトルは第
   ４図のとおりであり、ＫＢｒディスクは赤外領域で下記
   の波長において特性吸収を示した： ２．９６ 、３．０５ 、３．３８ 、５．６８ 、５
   ．７３，５．９３゜５．９８．６．１３．６．５０．６
   ．５８．６．８８，７．４０゜７．６５ ８．０８ ８
   ．４５ ８．６０ ９．０３９．４５９．７０ 、９．
   ９８ 、１０．５５ 、１１．００ 、１１．２５゜１
   １．６０ 、１２．３５及び１３．２５ミクロン。 ２ 化合物３６，９２６および／または３５，７６３お
   よび化合物３７，２７７および／または３７，９３２か
   らなる相乗作用を有する動物用抗生物質組成物。 ただし、化合物３６，９２６はメタノール、エタノール
   、クロロホルム及びジクロルメタンに可溶性であって、
   ジエチルエーテル、ヘキサン及びヘプタンに溶解せず、
   明確な融点を有せず、分解は約１００℃で開始し、分析
   により下記の平均組成比を得し： 炭素 ５７．８９ 水素 ６．７８ 窒素 ８．０４ 酸 素（差により） ２７．２９高分解能マス
   スペクトルによる分子量は５０１で、分子式Ｃ２６Ｈ３
   ５Ｎ３０７であり、光学的に活性であり、比旋光度〔α
   〕２５°−−１３０° （１％エタノール溶液）を有し
   、エタノール中での紫外線吸収極大は２１４ｍμでその
   吸光度Ｅ皿は７２３．８であり、赤外線スペクトルは第
   ２図のとおりであり、ＫＢｒディスクは赤外領域で下記
   の波長において特性吸収を示し： ２．９５ 、３．４０ 、５．７５ 、５．９８，６．
   ２３，６．５８゜６．８７ 、７．４５ 、８．２５
   、８．３８，８．８０，９．０８゜１０．１５，１０．
   ３５，１１．１０及び１３．３０ミクロン。 化合物３５，７６３はメタノール、エタノール、クロロ
   ホルム及びジクロルメタンに可溶性であり、ジエチルエ
   ーテル、ヘキサン及びヘプタンに不溶性であり、明確な
   融点は存在せず、分解は約１００℃で開始し、分析によ
   り下記の平均組成比であり：炭素 ６１．２９ 水素 ６．７３ 窒素 ８８３ 酸 素（差により） ２３．１５高分解能マス
   スペクトルによる分子量は５０３であり、分子式はＣ２
   ６Ｈ３□Ｎ３０７であり、光学的に活性であり、比旋光
   度〔α）２５°＝−１１４°（１％エタノール溶液）を
   有し、この化合物のエフノル中での紫外線吸収極大は２
   １８ｍμでありその吸光度Ｅ４．：は６６８．９であり
   、赤外線スペクトルは第３図のとおりであり、ＫＢｒデ
   ィスクは赤外領域で下記の波長において特性吸収を示し
   ：２．９５ ３，３８ ５．７３ ６，００ ６
   ．２３ ６．６０６．８８ 、７．２３ 、８．２５
   、８．３８ 、８．８３及び１０２０ミクロン； 化合物３７，２７７は決った融点を有しておらず、分解
   は１４０〜１５０℃で始まり、ジエチルエーテル、ヘキ
   サン、ヘプタン及び水に不溶性であり、アセトン及びベ
   ンゼンにわずかに溶解し、メタノール、エタノール、ク
   ロロホルム及びジクロルメタンに易溶性であり、下記の
   平均組成比を有し：炭素 ６０．９１ 水素 ５．９８ 窒素 １０．４５ 酸 素（差により） ２２．６６光学的活性
   を有し、比旋光度は〔α〕２５′＝＋１１゜（１％エタ
   ノール溶液）であり、エタノール中での紫外線吸収極大
   は２２５，２７４，２８３゜３０３及び３５５ｍμで起
   り、各々の吸光度Ｅ１％ＣｒｒＬ 値は３０９．３，３６．６７．４５．０１，７０及び２
   ０であり、赤外線スペクトルは第１図のとおりであり、
   クロロホルム溶液は、赤外領域で下記の波長において特
   性吸収を示し： ３．０５ 、３．４０ 、５．７０ 、５．７７．５．
   ９３．６．０７゜６．６２ 、６．８２及び７．６７ミ
   クロン；化合物３７．９３２はメタノール、エタノール
   、クロロホルム及びジクロルメタンに可溶性であり、ジ
   エチルエーテル、ヘキサン、ヘプタノ及び水に不溶性で
   あり、明確な融点を有しておらず、分解が約１８５℃で
   開始し、元素分析により下記の平均組成比を有し： 炭素 ５９．４１ 水素 ６．０１ 窒素 １０．６６ 酸 素（差により） ２３．９２光学的に活
   性であり、比旋光度〔α）ｊ”＝＋ ５．０’（０，２
   ５％クロロホルム溶液）を有し、エタノール中での紫外
   線吸収極大は２２６，２７６．２８３゜３０５及び３５
   ５ｍμに現われ、その吸光度Ｅ１％ｃｍ 値は各々３０４．４ 、３６．８ 、４３．４９ 、７
   ０．２５及び２０．０７であり、赤外線スペクトルは第
   ４図のとおりであり、ＫＢｒディスクは赤外領域で下記
   の波長において特性吸収を示した： ２．９６ 、３．０５ 、３．３８ 、５．６８．５．
   ７３，５．９３゜５．９８．６．１３ 、６．５０ 、
   ６．５８．６．８８，７．４０゜７．６５ 、８．０８
   、８．４５ 、８．６０．９．０３．９．４５゜９．
   ７０ 、９．９８ 、１０．５５ 、１１．００ 、１
   １．２５゜１１．６０ 、１２．３５及び１３．２５ミ
   クロン。