JPS58222052A - アミド結合形成用縮合剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明はアミド結合形成用縮合剤に関し、更に詳しくは
カルボン酸塩とアミノ基含有化合物を出発原料とするカ
ルボン酸アミド合成用縮合剤１こ関する。

カルボン酸アミド及びその誘導体は繊維原料から医薬品
等広い用途ｔこ利用され、近年特に注目を集めているβ
−ラクタム系抗生物質や生理活性オリゴペプチドがその
代表例である。

カルボン酸アミドの合成ｔこ関しては既ｔこ多くの方法
が知られているが、例えばペプチド合成のようにラセミ
化が問題となるカルボン酸アミドの合成にこ関しては工
業的１こ実施し得る一般的な方法は未だ確立されていな
いのが実情である。

ラセミ化を細隙することなく、ペプチドを合成する方法
としてアンド法やアイントノプ法（Ｅｉｌｏｐｆ法）が
提案されているが、これらの方法てはいずれも高価ある
いは不安定な試薬を用いる。にに、厳密に制約された反
応条件下で行なう必要があるため、実験室的ｔこ行われ
ている１こすぎない。

そこで、本発明者はかかる実情ｔこ鑑み、ラセミ化を伴
なうことなくペプチド合成はもとより、一般的なカルボ
ン酸アミド合成ｔこも適用し得るのに好適な縮合剤１こ
ついて鋭意検討した結果、クロルスルホン酸の三級アミ
ン塩が本目的１こよく合致することを見出し、本発明を
完成した。

りｐルスルホン酸三級アミン塩を縮合剤とするカルボン
酸アミドの合成ｔこついては従来全く知られておらス、
カルボン酸塩ｔこクロルスルホン酸三級アミン塩を反応
させ、次いで塩基性条件下にアミ７基含有化合物と反応
させることｔこより目的とするカルボン酸アミドが高収
率で製造し得ることが本発明者によって始めて究明され
た。特筆すべきことは原料１こ光学活性なカルボン酸塩
を使用してもラセミ化を制御できることから、オリゴペ
プチド、β−ラクタム系抗生物質等の光学活性カルボン
酸アミドの合成ｔこ有利に適用できることである。

硫酸誘導体は一般ｔこ安価であるが、硫酸誘導体に縮合
剤として用いる方法としてカルボンＭｍにｍ水砕ｅとＮ
、Ｎ−ジメチルホルミアミドの分子化合物を作用させる
方法が知られている（　Ｇ、　Ｗ。

ｒ Ｋｅｎｎ＠Ｉｔ　Ｒ，Ｊ、　Ｓｔｅｄｍａｎ＋　、Ｊ、
　Ｃｈｅｍ、　５ｏｃ−＋　　１９５２　＋２０６９）
。しかしながら、無水硫酸は非常ｔこ反応性の高いガス
であり、その取扱いｔこ細心の注意を要し、又、Ｎ、Ｎ
−ジメチルホルムアミドとの分子化合物も低温で保存し
ても分解し易いなど取扱い難く、殆んど使用されていな
い。然るｔこ本発明は無水硫酸ｔこ比して取扱いが容易
で、価格的ｔこも　　　　　　７゛有利なりロルスルホ
ン酸三級アミン塩かうするアミド結合形成用縮合剤を提
供するもので、本縮合剤を使用してカルボン酸アミドな
合成する際の実施態様側こついて詳細會こ説明すれば次
の通りである。

縮合剤であるクロルスルホン酸の三級アミン塩としては
例えばトリエチルアミン塩、）！ｌ−ｎ−ブチルアミン
塩、Ｎ−メチルそルホリン塩等が挙げられ、これを先ず
カルボン酸塩に対して化学的当量を作用させてカルボキ
シル基を活性化し、次いでアミ７基含有化合物を塩基性
条件下１こ作用させること骨こまってカルボン酸アミド
が生成する。

出発原料として使用されるカルボン酸塩を一般式で表示
すれば次の通りである。

２・−６゜。ＯＭ■ （式中　Ｒｌはアルキル基、アラルキル基、アリール基
又はこれらの置換基、ＭＯは一価の無機又は有機陽イオ
ンを示す）。かかるカルボン酸塩としては例えば脂肪族
カルボン酸塩、芳香族カルボン酸塩、Ｎ−保護中性アミ
ノ酸塩、Ｎ−保護酸性アミノ酸塩、Ｎ　ａ＋　Ｎ　”−
ジ保護塩基性アミノ酸塩等が挙げられ、塩としてはナト
リウム、カリウム、リチウム等のアルカリ金属塩やトリ
エチルアミン、トリーｎ　−ブチルアミン塩、Ｎ−メチ
ルモルホリン等の三級アミン塩等が挙げられる。

特１こＮ−保護アミノ酸を用いるペプチド合成などに応
用する場合１こけ、予めアミノ酸のカルボキシル基以外
の官能基、例えばアミノ基、水酸基、メルカプトキシ基
等を常法１こより保護しておくことが必要である。この
際、アミノ基１こ対する保護基としては例えばベンジル
オキシカルボニル基、ｐ−メトキシベンジルオキシカル
ボニル基等の置換又は非置換ベンジルオキシカルボニル
基、第三級ブチルオキシカルボニル基等のウレタン型保
護基、アシル型保護基としてはホルミル基など、エナミ
ン型保護基としては、たとえば２−アセチル−１−メチ
ルビニル基、２−メトキシカルボニル−１−メチルビニ
ル基などが代表的な例として挙げられる。セリン、スレ
オニン等のオキゾアミノ酸の水酸基の保護Ｑこは〇−エ
ーテル型、たとえば０−ベンジル基が用いられる。又、
メチオニン、システィン等のメルカプト基の保護１こは
Ｓ−ベンジル基が使用される。

尚、一方の出発原料であるアミ７基含有化合物ｔこつい
て一般式で表示すれば次の通りである。

（式中、Ｒ２及びＲ８は同−又は異なる基で、夫４水素
原子、アルキル基、アラルキル基、アリール基又はこれ
らの置換基を示し、又　Ｒ／２とＲ８とが互い［こ結合
して環状ｔこ形成していてもよい。但し、Ｒ’ｌとＲ″
とが共１こ水素原子ではない）７ミノ基含有化合物とし
ては、脂肪族アミン、芳香族アミン、中性アミノ酸低級
アルキルエステル、酸性アミノ酸低級アルキルエステル
、塩基性アミノ酸低級アルキルエステルあるいは６−７
ミノペニ／ラン酸、７−アミノセファロスポラン酸等カ
挙ケられる。特１こアミノ酸や６−アミツベニンラン酸
などを用いる場合ｒこけアミン基以外の官能基を常法１
こより保護しておくことが必要である。

カルボキシル基の保護基としてはエステルのアルコール
残基、例えばメトキシ、エトキシ等、置換または非置換
ベンジルオキシ基、例えばベンジルオキシ、ｐ−二）Ｒ
ベンジルオキシ等、あるいはケイ素化合物、例えばトリ
メチルシリルオキシ等が用いられる。又、カルボキシル
基を例えば？）リウム塩、リチウム塩等のアルカリ金属
塩、トリエチルアミン塩、）！ｊ　　ｎ−ブチルアミン
塩等の三級アミン塩の形ｔこ変換して用いることもでき
る。

カルボキシ基以外の官能基の保護基としては、前述した
中から適当ｔこ選択される。

カルボン酸塩及び／又はアミノ基含有化合物１こ於ける
構成アミノ酸成分としてグリシン、アラニン、β−アラ
ニン、ロイシン、インロインン、バリン、フェニルグリ
ンン、フェニルアラニア、トリプトファン、メチオニン
、システィン、スレオニン、セニン等の中性アミノ酸、
アスパラギン酸、グルタミン酸受の酸性アミノ酸、α、
β−ジアミノプロピオン酸、α、γ−ジアミノ酪酸、オ
ルニチン、リジン等の塩基性アミノ酸を例示することが
できる。史に又、同一もしくは異なるアミノ酸が結合し
たジペプチド、トリペプチドを出発原料ｔこ用いること
もできる。

前記一般式表示のカルボン酸塩とアミ７基含有化合物と
を縮合させて （式中、Ｒ’、Ｒ’及びＲ８は前記と同意義）にて表わ
されるカルボン酸アミドを合成する場合１こけ、先ずカ
ルボン酸塩ｔこクロルスルホン酸三級アミン塩を作用さ
せる。この場合、クロルスルホン酸三級７ミン塩の代り
１こ反応系内でクロルスルホン酸三級アミン塩が生成す
る、いわゆるｌｎＳ口ｎ　の状態で、クロルスルホン酸
と三級アミンを別途１こカルボン酸塩１こ作用させても
よい。

カルホン酸塩１こ対するクロルスルホン酸三級アミン塩
、もしくはクロルスルホン酸及ヒ三級アミンの使用量は
共ｔこ化学的当量であれば充分である。

過剰のクロルスルホン酸や三級アミンが存在すると好ま
しくない副反応やラセミ化を生起する。

ラセミ化しやすいカルボン酸塩を原料ｔこ用いる場合、
クロルスルホン酸三級アミン塩の形で作用させた方がク
ロルスルホン酸と三級アミンを別途に作用させたときｔ
こ生ずる中和熱の影響を受けないので有利である。

カルボン酸塩とクロルスルホン酸三級アミン塩との反応
は通常反応ｔこ不活性な有機溶媒中で行われる。適当な
有機溶媒として例えば１．２−ジクｐ　ルエタン、クロ
ロホルムのよウナハロゲン化炭化水素、テトラヒドロフ
ランのようなエーテル溶媒、アセトニトリル、あるいは
Ｎ、Ｎ−２メチルホルムアミドのようなアミド溶媒が用
いられる。

反応温度は特１こ限定はなく室温、それ以上もしくはそ
れ以下、例えば６０〜−２０ｔｌ’で行なうことができ
るが、ラセミ化しやすい原料化合物を使用する場合には
室温以下で行なうのが好ましい。

反応１こ要する時間は、反応に開学する化合物、反応温
度および溶剤の種類１こよって異なるが４時間から６時
間程度である。

クロルスルホン酸三級アミン塩（もしくはクロ、　ルス
ルホン酸及び三級アミン）とカルボン酸塩との反応が完
了したならば、引き続きその反応液に７ミノ基含有化合
物を塩基性条件下２＃こ作用させる。

アミノ基含有化合物の使用量はカルボン酸塩ｒこ対して
化学的当量でよいが、有機溶媒中で縮合を行なう場合は
通常１当量、水−有機溶媒混合系で縮合を行なう場合は
通常０．５当量用いるのが好ましい０ 縮合反応は、先に調整したカルボン酸塩及びクロルスル
ホン酸三級アミン塩（もしくは着クロルスルホン酸及び
三級アミン）を含む有機溶剤中１こ、有機溶剤に溶かし
たアミノ基含有化合物を当量の三級アミンと共ｔこ滴下
することｔこまって、あるいはこの逆に有機溶剤に溶か
したアミノ基含有化合物１こ、カルボン酸塩及びクロル
スルホン酸三級アミン塩（もしくはクロルスルホン酸及
び三級アミン）を含む有機溶剤を当量の三級アミンと共
１こ滴下することｔこよって、あ・るいは水又は水と水
溶性有機溶剤との混合溶液ｔこ溶かしたアミノ基含有化
合物ｔこ、塩基性条件下、カルボン酸塩及びクロルスル
ホン酸三級アミン塩（もしくはクロルスルホン酸及び三
級アミン）を含む有機溶剤を滴下すること１こよって行
なわれる。

水溶性有機溶剤としては、例えばアセトン、アセトニト
リル、メタノール等が用いられる。有機溶剤としては先
に述べたものの中から適当に選択できる。三級アミンと
しては、トリエチルアミン、トリーｎ−ブチルアミン、
Ｎ−メチルモルボリンなどが用いられる。

又、塩基性条件としては水酸化ナトリウム、水酸化カリ
ウム等の無機塩基あるいはトリエチルアミン、トリーロ
ーブチルアミン等の有機塩基を使用して反応媒体のｐＨ
を９．０〜１２、好ましくは９．５〜ＩＯ，５ｔこ保持
する。

反応温度は特１こ限定されな（６０〜−２，０ｃで行な
うことができるが、ラセミ化しゃすい原料化合物を使用
する場合ｔこけ室温以下で行なうのが好ましい。

）、 縮合反ｉｔこ要する時間は、反応ｔこ開学する化合物、
反応温度、および溶剤の種類會こよって異なるが、３０
分から２０時間程度である。

反応終了後は常法により処理し、目的化合物を容易１こ
得ることができる。

本発明の縮合剤は、たとえばアンジオテンシン変換酵素
阻害作用を有するオリゴペプチド、抗潰瘍作用を有する
オリゴペプチド、β−ラクタム系抗生物質、界面活性作
用を有するＮ−アシル−α−アミノ酸などの合成ｔこ幅
広く利用することができるので、その工業的意義は大き
い。

以下、実施例にこより具体的ｔこ説明する。

実施例Ｉ Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−アラニン４９．１
　ｔをメチルイソブチルケトン１００ｍ／とトリーロー
ブチルアミン４０．８９の混合溶媒ｔこ溶解し、これｔ
こ攪拌下１０ｔＺ’以下ｔこ保持しつつ、クロルスルホ
ン酸２６．９ｆ及びトリーローブチルアミン４４．８　
Ｆをメチルイソブチルケトン１５０ｍ１Ｖｔこ溶解した
液を滴下した。滴下終了後、室温で４時間攪拌した。こ
の溶液に攪拌下反応温度を５ｃ以下１こ保持しつつＬ−
プロリンメチルエステル２５．８２とトリーｎ−ブチル
アミン４０．８　ｆのメチルイソブチルケトン溶液２４
０ｍ１を滴下した。滴下終了後、更１こｌ０１Ｚ’で２
０時間攪拌した。

反応終了後、反応混合物に水２５０ｍｅを加え、攪拌下
４Ｎ−水酸化ナトリウム水溶液１８４ｍｌを加えｐＨ１
＋、０１こ調整し、メチルインブチルケト７層と水層を
分離した。メチルイソブチルケトン層を０．２Ｎ−水酸
化ナトリウム水溶液２０（］＋＋ｅで洗浄した後、減圧
下ｔこメチルイソブチルケトンを留去した。濃縮残渣ｔ
こ２Ｎ＝水酸化ナトリウム水溶液１２０　ｍｌを加え室
温て２０時間攪拌した。遊離したｌ　！Ｊ　−ｎ−ブチ
ルアミンを分離し、水層をメチルイソブチルケトン５０
ｍ１で洗浄した。

得られた水溶液ｔこメチルイソブチルケトン１５０ｍｅ
を加え、攪拌下２０％硫酸水溶液でｐＨ２，５１こ調整
した。メチルイソブチルケトン層と水層を分離し、水層
ｉこメチルイソブチルケトン１５０ｍ１を加え、１１１
度抽出した。メチルイソブチルケトン溶液を合わせ５％
塩化ナトリウム水溶液１５０ｍ１Ｖで洗浄した後、無水
硫酸ナトリウムで乾燥した。硫酸すトリウムを蒔去し、
濾液を減圧下に濃縮して粗Ｎ−ペンシルオギシカルボニ
ルーＬ−アラニル−１、−プロリン５０．Ｏｆを得た。

この結晶５０．０２を酢酸エチルＶｏｍｌｔこ溶解し、
これ１こ石油ベンジン５９＋ｎｅを加え、−晩５Ｃで放
置した。析出した結晶な濾取、乾燥してＮ−ベンジルオ
キシカルボニル−Ｌ−アラニル−１２−ブーリン４０．
２　ｆを得た（収率６３％）。

赤外吸収スペクトル（ＩＲ）、核磁気共鳴スペクトル（
ＮＭＲ）により構造を同定した。

〔α）Ｄ＝−１１８，９（Ｃ＝ｌ　　ＩＨ２０）この値
は標品の値と一致した。

実施例２ Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−アラニン４９．１
　ｆを１．２−ジクロルエタン＋００＋ｍ／とトリーｎ
−ブチルアミン８５６ｖの混合溶媒會こ溶解し、これｔ
こ攪、押下ＩＯＣ以下１こ保持しつつ、クロルスルホン
酸２７．０　？　ヲ１　＋　２−ジクロルエタン１５０
ｍＡ！ｉこ溶解した液を滴下した。

滴下終了後、室温で４時間攪拌した。この溶液に攪拌下
、反応温度を５Ｃ以下に保持しつつＬ−プロリンメチル
エステル２５．８　Ｆとトリーローブチルアミン４０．
８　Ｆの１．２−ジクロルエタン溶液２００ｍ１を滴下
した。滴下終了後、更に１０Ｃで２０時間攪拌した。

以下、実施例１と同様な操作を行なってＮ−ベンジルオ
キシカルボニル−し−アラニル−し−プロリン３２．６
９を得た（収率５１チ）。

実施例３ Ｎ−−ＣンジルオキンカルボニルーＬ−アラニル−Ｌ−
プロリン３２．Ｏｒを１．２−ジクロルエタンｌｏｏｍ
／とトリーｎ−ブチルアミン１８．５　Ｆの混合溶媒１
こ溶解し、これｔこ攪袢下＋Ｏｒ以下ｔこ保持しつつ、
クロルスルホン酸１１．７　？及ヒ）ソーｎ−ブチルア
ミン＋　８．５　’ｆを１．２−ジクロルエタンｌｏｏ
ｍ（！ｒこ溶解した液を滴下した。滴下終了後、史１こ
室温て４時間攪拌した。この溶液に、攪拌上反応温度５
Ｃ以下ｔこ保持しつつ、Ｌ−プロリンメチルエステル＋
　２．９　ｔとトリーローブチルアミン＋　８．５　ｆ
の１．２−ジクロルエタン溶液１３０ｍｇを滴下した。

滴下終了後、ＩＯＣ以下に保持しつつ２０時間攪拌した
。反応終了後、水１００ｍ／を加え、攪用下４Ｎ−水酸
化ナトリウム水溶液でｐＨ１２，０１こ調整し、ｌ　、
２−ジクロルエタン層と水層を分離した。１．２−ジク
ロルエタン溶液を５％塩化すトリウム水溶液１００ｍ／
で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、硫酸ナトリウ
ムを濾別した後、減圧下ｔこ１，２−ジクロルエタンを
留去した。

濃縮残渣をメタノールｌ’５０＋ｕ／ｌこ溶解し、／Ｎ
−水酸化すトリウム水溶液１００ｍ／を加え、３０ｒで
４時間攪拌した。反応終了後、減圧下にメタノールを留
去し、遊離したトリーｎ−ブチルアミンを除去した。こ
の水溶液１こ１，２−ジクロルエタン２００＋ｍ／を加
え、攪拌下、６Ｎ−ＨＣＩ　　でｐｌ（２，５ｔこ調整
した。１．２−ジクロルエタン層と水層を分離し、水層
に１，２ジクロルエタン２００−ａｌを加え、再度抽出
した。１，２−ジクロルエタン溶液を合せ、５チ塩化ナ
トリウム水溶液２００ｑｅで洗浄し、無水硫酸すトリウ
ムで乾燥し、硫酸ナトリウムを濾別した後、減圧下に１
，２−ジクロルエタンを留去してシロップ状のＮ−ベン
ジルオキシカルボニル−′Ｌ−アラニルーし一プロリル
ーし一プロリン２　Ｂ、５　ｆを得た。

このンｐツブ２８．５　ｆｔをメタノール３００ｍ１と
水］００＋＋＋４’の混合溶媒ｔこ溶解し、５％バラジ
ューム炭素２．５２を加え、この溶液に水素を吹き込み
ながら室温で４時間、激しく攪拌した。還元終了後、５
％バランニーム炭素を濾別し、減圧下ｔこ濃縮乾固した
。この濃縮残渣を水２０ＩＩＩ／ｌこ溶解し、イソプロ
ピルアルコール１００ｍｅ加えた後、−晩５Ｃて放置し
た。析出した結晶を濾別し、乾燥し、粗１．−アラニル
ーＬ−７’ロリルーＬ　−フ＋＝リンが１４．５９得ら
れた。

これを水２０ｍｅｔこ溶解し、エチルアルコール１００
ｍ／を加えた後、−晩５Ｃで放置した。析出した結晶を
濾別し、乾燥してＬ−アラニル−し−プロリル−Ｌ−プ
ロリン＋　１．６９を得た（収率４１％）。

ＩＲ，ＮＭＲｔこより構造を確認した。融点１９８〜＋
９９ｒ（分解） 〔α〕ぢ＝−１９８，０２（Ｃ＝ｌ　、Ｈ２Ｏ）この値
は、ＤＣＣ−ＨＯＢＴ法により別途合成した標品の（ｊ
ｆ４と一致した。

０ 標品；〔α）、＝−１９７，７，、，０（Ｃ＝１　、Ｈ
，Ｏ）実施例４ Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−し−フェニルアラニン
６５．８９をメチルイソブチルケトン１５０ｍｅとトリ
ーローブチルアミン４０．８　？の混合溶媒に溶解させ
、攪拌下ｔこ温度］Ｏ１ｒ以下ｔこ保持する。

そこへクロルスルホン酸２５．６Ｐとトリーｎ−７’チ
ルアミン４０．８　Ｆをメチルインブチルケトン２００
ｍ１！に溶解させた液を滴下した。滴下終了後室温で４
時間攪拌した。この溶液を攪拌下、反応温度５Ｃ以下に
保持しつつ、Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル３５
．８　ｔとトリーｎ−ブチルアミン４０．８　ｔのメチ
ルイソブチルケトン溶液２５ＯＮ／を滴下した。滴下終
了後１０１１？以下に保持しつつ、更１こ２０時間攪拌
した。しかる抜水２００　ｄを加え、攪拌下４Ｎ−水酸
化ナトリウム水溶液でｐ’Ｈ１１，ｏｔこ調整したとこ
ろ、結晶が析出した。

結晶を濾別し乾燥して、粗Ｎ−ベンジルオキシカルボニ
ル−し一フェニルアラニルーし一フェニル　　　　　　
１７ラニンメチルエステル６８．２　ｆ　ヲｐ％だ。

こレヲクロロホルム３００　：Ｉｒｅｔこ溶解Ｌ、石ｉ
’１ｌｌ＝−−テル２００ｍ１を加えた後、−晩５ｃで
放置した。

析出した結晶を濾別し乾燥してＮ−ベンジルオキ７カル
ボニルーし一フェニルアラニルーＬ−フェニルアラニン
メチルエステル６１．４９　＜収率６１係）を得た。

ＩＲ，ＮＭＲＩこより構造を同定した。

融点　１４７−１４８ｃ（分解） （α）ｏ−１９，４１（Ｃ＝ｊ＋ＭｅＯＨ）元素分析値
　　計算値（イ）　分析値（イ）Ｃ７０，４２７０，４
２ Ｈ６，１３６，１６ Ｎ　　　　　　　６．０　８　　　　　　　６．１　３
水素−ハラレウム炭素系ｔこより脱ペンジルオキン力ル
ボニル化を行ない、得られたし一フェニル　”アラニル
−Ｌ−フェニルアラニンのｋ　光度を標品と比較した。

（α）Ｄ＝−ｚ２．ａ３（ｃ＝＋　、ＡＣＯＨ）杓！＋
’ｉｉｎ：　ｔ：ｌ、＝＋４１．２４（Ｃ＝Ｉ　、ＡＣ
ＯＨ）実施例５ Ｌ−フェニルアラニン５．４５　ｙ　ヲ水ｓ　ｑｒｌｔ
コｆ／ｌＪ４し、これｔこトリーローブチルアミン６．
４２　Ｆを加え８０Ｃで１０分間加熱した。そこへアセ
チルアセトン３．４７９をエチルアルコール４０ｒｎｅ
ｉこ溶がした溶液を加え、１時間加熱還流する。

反応終了後、溶媒を減圧下？こ留去し、得られた残渣ｔ
こ１，２−ジクロルエタン４０ｍ１を加え、再び減圧下
に濃縮する。得られた濃縮残渣に１，２−ジクロルエタ
ン３６耐を加え、不溶のＬ−フェニルアラニンを濾別し
て、Ｎ−２−アセチル−１−メチルビニル−Ｌ−フェニ
ルアラニントリーｎ−ブチルアミン塩の１．２−ジクロ
ルエタン溶液４０ｍ１を調整した。

この溶液を攪拌下、反応温度５ｃ以下に保持しながら、
クロルスルホン酸３．５Ｏｆト１−リ−ｎ　−ブチルア
ミン５．５６　ｆを溶解させた１、２−ジクロルエタン
溶液２５ｍｅを滴下した３１滴下終了後、５Ｃ以下で更
１こ６時間攪拌した。

この溶液ｔこ、攪拌下、反応温度５ｃ以下ｔこ保持しつ
つ、Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル５．３７９と
トリーｎ−ブチルアミン５．５６　ｒの１．２−ジクロ
ルエタン溶液３０＋ＩＩｌを滴下した。

滴下終了後、室温で２０時間攪拌した。反応終了後、水
３０ｍｅを加え、攪拌下、４Ｎ−水酸化ナトリウム水溶
液でｐＨ１２，０１こ調整した後、ｌ、２−ジクロエタ
ン層と水層を分離した。１．２−ジクロルエタン溶液を
５チ塩化ナトリウム水溶液５０ｍｅで洗浄し、無水硫酸
ナトリウムで乾燥し、硫酸すトリウムを濾別した後、減
圧下ｔこ１，２−ジクロルエタンを留去した。濃縮残渣
１こ石油エーテル５０ｍ１を加えた後、析出した結晶を
濾別し、乾燥して粗Ｎ−（２−アセチル−１−メチルビ
ニル）−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−フェニルアラニン
メチルエステルヲ８．ａ　ｙ　得ｔ、＝。

この結晶８．６２を酢酸エチル＋ｓｏｍｇｒこ加熱溶解
した後、−晩５Ｃで放置した。析出した結晶を濾別し乾
燥し、Ｎ−（２−アセチル−１−メチルビニル）−Ｌ−
フェニルアラニル−し−フェニルアラニンメチルエステ
ル７．７ｔを得た（収率６３ｑｂ＞。

ＩＲ，ＮＭＲｒこより構造を同定した。

融点　１５２〜１５３Ｃ（分解）、〔α〕買＝−４１，
４６（Ｃ＝　３　メタノール）。

元素分析値　　計算値（イ）分析値（％）Ｃ７０，５６
７０，６０ Ｈ６，９１６，９９ Ｎ　　　　　　　６．８　６．　　　　　　６．８　４
塩酸加水分解及びアルカリ齢化１こより得られたし一フ
ェニルアラニルーし一フェニルアラニンの旋光度を標品
と比較した。

〔α）Ｄ＝＋４１．５５　（Ｃ＝　Ｉ　、ＡＣＯＨ）標
品：　（（１）Ｄ＝−１−４１，２４（Ｃ＝　ｌ　、　
ＡＣＯＨ）実施例６ Ｎ−ホルミル−し−フェニルアラニントリーｎ−ブチル
アミン塩９．６５　Ｆを用いて、実施例４と同様な反応
操作を行なうこと１こより、Ｎ−ホルミル−し−フェニ
ルアラニル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル７．
２２が得られた（収率４０係）っＩＲ，ＮＭＲｔこより
構造を同定した。

融点　＋４１−＋４２Ｃ（分解） 〔α〕Ｄ−−３７４（Ｃ＝１１ＭｅＯＨ）元素分析値　
計算値（イ）　　分析値（％）Ｃ６７，７８６７，７２ Ｈ６，２６６，２５ Ｎ　　　　　　　７．９　０　　　　　　　　　　　７
．９　０塩酸脱ホルミル化及びアルカリ齢化１こより得
られたＬ−フェニルアラニル−Ｌ−フェニルアラニンの
旋光度な標品と比較した。

〔α）、）＝＋　４１．３０　（Ｃ＝　Ｉ　　、　ＡＣ
ＯＨ）実施例７ Ｎ−アセチル−β−アラニア４８．８　Ｆとトリーｎ−
ブチルアミン７２．８９を１．２−ジクロルエタン７８
ｍ／ｌこ溶解し、これ１こクロルスルホン酸４５．５　
Ｆとトリーローブチルアミン７２．８　Ｆを１．２−ジ
クロルエタン１９０ｍ／ｒこ溶解した液ヲ反応温度をｆ
ｏｒ〜５Ｃｉこ保持しつつ、攪拌下ｔこ滴下した。滴下
終了後、室温で４時間攪拌した。

他方、Ｌ−ヒスチジン塩酸塩１水和物５２．３　ｆを水
４００＋＋＋／ｉこ溶解した後、約１１２＝ｕｅの４Ｎ
−水酸化すトリウム水溶液でｐＨＩ　０．５に調整した
。

この溶液の温度を５〜ｌ０ｔｒおよびｐＨｌ０．３〜１
０．５の範囲ｔこ保持しつつ、先ｔこ調整したＮ−アセ
チル−β−アラニン、クロルスルホン酸及びトリーロー
ブチルアミンを含むＩ＋２　０クロルエタン溶液と、４
Ｎ−水酸化ナトリウム水溶液３３０ｍ／を同時１こ滴下
した。滴下終了後、室温で３０分間攪拌し、約３０ｍｅ
の４Ｎ−水酸化ナトリウム水溶液でｐＨ１３，ｏｔこ調
整した。反応液を静置し、上層のメチルイソブチルケト
ン層を除去した。下層の水層をダイヤイオン５Ｋ−ＩＢ
（Ｈ型）１、Ｏｔのカラムｔこ通液させ、生成したＮ−
アセチル−β−アラニル−Ｌ−ヒスチジンを吸着させた
。

しかる後、中性ｔこなるまでカラムを水洗し、１１５Ｎ
アンモニア水溶液１．５ｔで溶出し、さら１こ水２．５
ｔで洗浄する。溶出液と洗液を合わせて減圧下ｔこ７０
０ｍ／まで濃縮し、その溶液をアンバーライトＩＲＣ−
５０（Ｈ型）２００ｍ１！に通液させ、次ルコール４３
０ｍｅを徐々１こ加えた後、１晩、室温まで放冷し、析
出した結晶な濾別、乾燥し粗Ｎ−アセチルーβ−アラニ
ル−し一ヒスチジンを得た。

この結晶を活性炭処理１こより脱色し、水−イソプロピ
ルアルコールより再結晶してＮ−アセチル−β−アラニ
ル−し−ヒスチジンの結晶４９．６ｆを得た。

本物質はニンヒドリンで発色せず、水含こ可溶、アセト
ン、エーテル、石油エーテルｔこ不溶である。

ＩＲｌＮＭＲにより構造を同定した。

〔α〕も’＝＋　２６．６　（ｃ＝３．　Ｈ２Ｏ）　、
この値は標品と一致した。

実施例８ Ｎ−フタリル−β−アラニア２．５０　ｆ　ト）　！Ｊ
エチルアミン１．６０＋ｑＪをアセトン５ｍ（！ｔこ溶
解し、これｔこ攪拌上反応温度を５′ｃ〜１ｏｒｌこ保
持しつつクロルスルホン酸１．３２９とトリエチルアミ
ン１．６０ｍＪをアセトンｌ０ｍ１ｒこ溶解した液を滴
下した。滴下終了後、更ｔこ室温で４時間攪拌した。

一方、Ｌ−ヒスチジン塩酸塩１水和物２．１ｙを水１５
ｍ／ｌこ懸濁し、次いでトリエチルアミン１４ｍｅを加
えて溶解させた。この溶液を５Ｃ−１０ｔ？ｔこ保ち、
トリエチルアミンｔこてｐ　Ｈヲ８．５〜９．０ｔこ調
整しつつ、先ｔこ調整したＮ−フタリル−β−アラニン
、クロルスルホン酸及びトリエチルアミンを含む溶液を
３０分を要して滴下した。同温度で１時間、吏ｔこ室温
で１時間攪拌した後、トリエチルアミンでｐＨな５．５
に調整し、減圧下に濃縮乾固した。残渣１こメタノ−Ｉ
しを加えて結晶化させ、これを濾取、乾燥さをてＮ−フ
タリル−β−アラニン−し−ビスチジン２．５　ｔ　（
収率７０チ）を得た。Ｎ−フタリル−β−アラニン−し
−ヒスチジ７２．３２を水１０ｍ１ｔこ溶解し、８０多
泡水ヒドラジン０．７５＋ｌＩｅを加え、室温で２昼夜
反応させた。　　　　　　″反応終了後酢酸０．８ｍｌ
を加え、析出した固体を濾去した。濾液を減圧下１こ濃
縮し、残渣？こエタノールを加えて結晶化させ、更に水
−エタノールより再結晶してβ−アラニル−し−ヒスチ
ジン１．０８２を得た（収率７′４チ）。融点　２５５
〜２５９Ｃ（分解）、〔α弓−＋　２１．３　（Ｃ’＝
　１．０　、Ｈ’、；ｏ’）この値は文献値と一致した
。

文献値：融点　２５６〜２６０Ｃ 〔α〕■＝＋　２１．７　（Ｃ＝　１．１　、　Ｈ２Ｏ
）実施例９ アセ１ニトリル５０ｍ／ｌこトリエチルアミン７、Ｏｍ
ｌを加え、−２０ｉＣ１こ冷却した溶液１こクロルスル
ホン酸５８３２を滴下した。

Ｎ−（＋−メトキンカルボニルプロペン−２−イル）−
り一α−７ミノフエニル酢酸ナトリウム１３．５９をア
セトニトリル］００ｍｅｌこ加え、サラ１こＮ−メチル
モルフォリン０．１ｍｌを添加した溶液を５Ｃに冷却し
、これ１こ上記クロルスルホン酸トリエチルアミン塩の
アセトニトリル溶液を滴下し、史１こ同温度で４時間攪
拌を続けた。この溶液を、７−アミノセファロスポラン
ｆｉ＋３．６ｆを水７０ｙｎｅとアセトニトリル７０ｍ
ｅとの混合溶媒１こ加え、トリエチルアミンでｐＨ８，
Ｏｔこ調整しり溶液ｔコ２０分間で滴下した。この際、
反応液の温度を５〜ｌ０Ｃｔこ保持すると同時１こｐＨ
を７．０〜８．０の間１こ保持するよう會こトリエチル
アミンで調整した。

滴下終了後、同温度、同ｐＨで１時間攪５拌を続けた。

反応液１こ６Ｎ塩酸を加え、ｐＨを１．７とし、室温で
２時間脱保護基反応を行った後會こ、＋ｏ％苛性ソーダ
水溶液でｐＨを４．０とし、減圧下１こ２５Ｃ以下で濃
縮乾固した。残渣を水、次いでアセトニトリルで洗浄し
た後に減圧下で乾燥することｔこヨリ、淡黄色粉末の７
−（Ｄ−α−アミノフェニルアセトアミド）−セファロ
スポラン酸を６．０２得た（収率３０係）。

実施例１Ｏ ラウリン酸４．４２およびトリエチルアミン２．２２を
アセトニトリル３０ｍ１に加え、これｔこ攪拌上反応温
度を５ｒｔこ保持しつつクロルスルホン酸２．５７９　
ト）リエチルアミン２．２２をアセトニトリル７０ｍ１
！に溶解した液を滴下した。滴下終了後史１こ室温で１
時間攪１件した、 他方、し−グルタミン酸２．９４ｆをメタノール３０ｍ
ｅと水３０ｍｅの混合溶媒中に懸濁し、これを６Ｎ＝水
酸化ナトリウム水溶液でｐＨ１３ｉこ調整して得た溶液
１こ攪拌下、反応温度を２１〜２２Ｃ１こ保持しつつ、
先に調製したラウリン酸、トリエチルアミン及びクロル
スルホン酸を含むアセトニトリル溶液を滴下した。

滴下終了後、更１こ１５分間攪拌後、減圧下にアセトニ
トリル及びメタノールを留去し、得られた水溶液ｔこ硫
酸を加えｐＨ１にした。

析出した結晶を濾取し、石油ベンジンで洗浄後乾燥する
ことによりＮ−ラウロイル−Ｌ−グルタミン酸６．２５
　Ｆを得た（収率９５チ）。

融点　９８〜ｌ　０１　ｔｌ’０ 特許出願人　味の素株式会社

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. （１）　　クロルスルホン酸の三級アミン塩からなるア
   ミド結合形成用縮合剤。
2. （２）一般式 ％式％ （式中、Ｒ’はアルキル基、アラルキル基、アリール基
   又はこれらの置換基、Ｍ■は一価の無機又は有機陽イオ
   ンを示す） て表わされるカルボン酸塩と一般式 （式中、Ｒ２及びＲ３は同−又は異なる基で、夫々水素
   原子、アルキル基、アラルキル基、アリール基又はこれ
   らの置換基を示し、又、Ｒ２とＲ−１とが互いＶこ結合
   して環状ｔこ形成していてもよい。但し　Ｒ２とＲ８が
   共に水素原子ではない） で表わされるアミン基含有化合物を塩基性条件丁番こ縮
   合させて一般式 （式中、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は前記と同意義）で表わさ
   れるカルボン酸アミドな合成する際１こ使用される特許
   請求の範囲＋１１項記載の縮合剤。