JPS58201747A - ポリプレニルアセテ−トの分離精製方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明はポリプレニルアセテートの分離精製方法に関す
る。さらに詳しくは７本発明は下記一般式（１） ％式％ （１１ ン単位を表わし、ｎはｌＯ〜１９の整数を表わｔ→で示
されるポリプレニルアセテートまたはそれらの混合物を
分離精製する方法に関する。

一般式（１）で示されるポリプレニルアセテートおよび
それらの混合物は医薬、化粧料などの原料３− ゛として有用な物質でおり、とくに哺乳類ドリコール類
の合成中間体として有用である。

ドリコール類ｔ’１１９６０年にｊ　Ｆ、　Ｐｅｎｎｏ
ｃｋらによってブタの肝臓からはじめて単離され［Ｎａ
ｔｕｒｅ（Ｌｏｎｄｏｎ）、１８６．４７０（１９６０
）参照〕、のちにこのものは一般式（Ａ） ＣＨｚ 〔式中、　−ＣＨｚ−Ｃ＝Ｃ−ＣＨ２−はトラレス型イ
ソプレン青 出ＣＨ ン単位を表わす。本明細書中において以下同様。〕で示
される構造を有するポリプレノール同族体の混合物でら
って、式（Ａ）中のシス型イソプレン単位の数を表わす
ｊは一般に１２から１８まで分布し５ｊ＝１４ｓ１５お
よび１６の３種の同族体が主体となっていることが明ら
かにされた［　ＲｏＷ。

４− Ｋｅａｎａｎ　ｅｔ　ａｌ、、　Ｂｉｏｃｈａｍｉｃａ
ｌ　Ｊｏｕｒｎａｌ、　　１６５＋　５０５（１９７７
）参照〕。ドリコール類はブタの肝臓のみならず、哺乳
動物体内に広く分布しており、生体の生命維持の上で極
めて重要な機能を果していることが知られている。例え
ば、Ｊ、Ｂ、Ｈａｒｆｏｒｄ　らは子牛やブタの脳内白
髄質を用いるｉｎ　ｖｉｔｒｏ試験により、外因性ドリ
コールがマンノースなどの糖成分の脂質への取り込みを
促進し、その結果、生体の生命維持のうえで重要な糖蛋
白質の形成を増大させる作用を持つことを明らかにして
いる［　Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ　ａｎｄ　Ｂｉｏｐｈ
ｙｓｉａａＩ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈみ促進効果は成長期の
生体におけるよりも既に成熟している動物において顕著
であることから、老化防止の点でのドリコール輝の働き
が注目されている。また、　ＲｏＷ、Ｋｅｅｎａｎらは
幼年期などの急速に成長を続けている生体にとっては外
からドリコールを摂取し、自己の体内で生合成して得ら
れるドリコールを補うことが重要であると述べている５
− ［Ａｒｃｈｉｖｅｓ　　ｏｆ　Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒ
ｙ　ａｎｄ　Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃｓ、　　１７９゜６３
４（１９７７）参照〕。さらに、赤松らはラットの再生
肝中のドリコールリン酸エステルを定量し。

その量が正常な肝中よりも著しく減少しており、肝組織
での糖蛋白の合成機能が大巾に低下していることおよび
外からドリコールリン酸エステルを加えると該機能が改
善されることを見出した〔第５４同日本生化学会大会（
１９８１年）において発表〕。

上記のようにドリコール類は生体にとって極めて重要な
機能を司る物質であり、医薬品またはその中間体として
有用であるが、従来その入手は容易でなく１例えばブタ
の肝蔵１０ｋｆから複雑な分離操作を経てやっと０．６
ｔのドリコールが得られるに過ぎない（Ｆ、Ｗ、Ｂｕｒ
ｇｏｓ　ａｔ　ａｌ、、　ＢｉｏｃｈｅｍｉｃａｌＪｏ
ｕｒｎａｌ、　８８．４７０（１９６３）参照〕。ドリ
コール類を全合成することは、それらの複雑で特異な分
子構造から明らかなように現在の有機合成の技術では至
難のことである。合成中間体を天然物に依存し、これに
簡単な合成化学的処理を加えるのみ６一 でドリコール類を得ることができるならば有利であるが
、従来そのような好都合な物質は見出されていない。従
来、下記の一般式（Ｂ） ＣＨａ　　　　　　　　　　ＣＨｓ ａＣＨ 〔但し、ｋ＝４〜６〕で示されるポリプレノール類（こ
れらはベツラプレノール類と呼ばれている）がシラカン
パ（Ｂｅｔｕｌａ　ｖｅｒｒｕｃｏｌａ　）から採取し
得ることは知られているが、これらからシス型イソプレ
ン単位の数が１４．１５および１６のものを主体とする
ドリコール類を合成することは現在の有機合成技術では
ほとんど不苛能である。またに、Ｈａｎｎｕｓらはヨー
ロッパ赤松（Ｐｉｎｕｓ　５ｙｌｖｅｓｔｒｉｓ　）の
葉から乾燥重量基準で１％の収率でポリプレニル成分を
単離し、この成分がイソプレン単位ｌＯ〜１９個を主と
してシス配置で有するポリプレニルアセテート混合物で
あることを報告しているが７− ［Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、　１３．２５６３　
（１９７４）参照〕、彼らの報告には該ポリプレニルア
セテート中のトランスおよびシス配置についての詳細ま
では解明されていない。さらに、　Ｄ、　Ｆ、　Ｚｉｎ
ｃｋｅｌらはストロ−７’松（Ｐｉｎｕａ　ａｔｒｏｂ
ｕ’ａ　）の葉の抽出物中にイソプレン単位数１８個ま
たはイソプレン単位数の平均値が１８であるＣｓｏのポ
リプレノールが存在するこトラ報告シティる７！＞Ｅ　
（Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、　１１．３３８７（
１９７２）参照〕、この報告では該ポリプレノールのト
ランス、シス配置について詳細な解析を行なっていない
。

本発明者らは、先に、イチョウ（Ｇｉｎｋｇｏ　ｂｉｌ
ｏｂａ）オヨヒヒマラヤ杉（Ｃｅｄｒｕｓ　ｄｅｏｄａ
ｒａ　）の葉から有機溶媒で抽出される抽出物を適当ガ
分離汰によって処理することにより一般式（１）におい
てｎが１１か６１９１で分布しているポリプレニルアセ
テート同族体混合物からなるポリプレニル画分が得られ
ること、該ポリプレニル画分は哺乳□類ドリコール類に
比べてα−末端の飽和イソプレン単位が存在しないだけ
で哺乳類ドリコール類におけるポリ８− プレニル同族体の分布に非常によく似たポリプレニル同
族体の分布を示すこと、該ポリプレニル画分は所望によ
りその構成成分である個々の（イソプレン単位数が一様
な）ポリプレニル同族体に比較的容易に分離しうろこと
、従って該ポリプレニル画分およびそれから分離された
各ポリプレニル同族体はいずれも哺乳類ドリコール類の
合成中間体として非常に適していることを見出した。ま
た本発明者らの一部とその共同研究者らは、ヒマラヤ杉
と同様にマツ科に属するクロマツ（Ｐｉｎｕｓｔｈｕｎ
ｂｅｒｇｉｉ　）、プカ−ｖ　ツ（Ｐｉｎｕａ　ｄｅｎ
ａｉｆｌｏｒａ　）などの葉からも一般式（１）で示さ
れるポリプレニルアセテートが得られることを見出した
。ただし、クロマツおよびアカマツからは、通常、一般
式（１）においてｎが１０から１８まで分布しているポ
リプレニルアセテート同族体混合物が得られる。

゛しかしながらこれらの植物から有機溶媒で抽出される
抽出物中には通常一般にクロロフィル、カロチノイド、
ステロイド、グリセリド、スフィンゴリピド、フラボノ
イドなど上記ポリプレニルア９− セテート同族体混合物との分離が必ずしも容易でない成
分が含まれておシ、咳抽出物を分離、精製して得られる
ポリプレニルアセテート同族体混合物にはしばしばそれ
らの不純物が数パーセント混入してくる。

本発明者らは上記の問題点を解決し、一般式（１）で示
されるポリプレニルアセテートを含有す石棺物の抽出物
から該ポリプレニルアセテートを高純度に得るために鋭
意研究を重ねた結果、上記抽出物をますケン化処理して
ポリプレニルアセテートをポリプレノールに転化し、こ
れを分離したのち再びポリプレニルアセテートに戻して
精製することにより所期の目的が達成されることを見出
し、本発明を完成するに至った。

すなわち１本発明によれば、一般式（１）で示されるポ
リプレニルアセテートの少なくとも１種を含有する植物
を脂溶性の有機溶媒で抽出して得られる抽出物から該ポ
リプレニルアセテートを分離精製するに際し、該抽出物
をケン化処理しそ該ポリプレニルアセテートを一般式（
■） １０− ＣＨｓ　　　　　　　　　　ＣＨａ （式中、ｎは前記定義のとおシである。）で示されるポ
リプレノールに転化したのち該ポリプレノールを主成分
とする画分を分離取得し、該ポリプレノールを一般式（
Ｉ）で示されるポリプレニルアセテートに戻して精製す
ることにより、該ポリプレニルアセテートを高純度で得
ることができる。

上記抽出物が一般式（１）で示されるポリプレニルアセ
テートとともにこれに対応する遊離のアルコールである
一般式（ＩＩ）で示されるポリプレノールを含有する場
合、該ポリプレノールは本発明方法において一般式（１
）で示されるポリプレニルアセテートに転化される結果
、目的とする該ポリプレニルアセテートの収量の向上に
寄与する。

一般式（１）で示されるポリプレニルアセテートの少な
くとも１種以上または該ポリプレニルアセテートとその
遊離のアルコールを含有する植物から核ポリプレニル成
分を抽出するために使用される脂溶性の有機溶媒として
は、一般に誘電定数（ε）が３２．７以下、好ましくは
２５．０以下、さらに好ましくは２０．７以下のものが
好適であり、具体的には下記に例示する溶媒がそれぞれ
単独でまたは２種もしくはそれ以上の混合溶媒として使
用できる０ （ａ）　　炭化水素類：例えば、石油エーテル、ペンタ
ン、ヘキサン、ヘプタン、ベンゼン、トルエン、キシレ
ンなど。

（ｂ）　　ハロゲン化炭化水素類：例えば、クロロホル
ム、塩化メチレン、四塩化炭素、四塩化エタン。

パークロルエチレンｓ　　ト’）クロルエチレンなど。

（ｅ）　　エステル類；例えば、酢酸メチル、酢酸エチ
ル、プロピオン酸エチルなど。

（ｄ）　　エーテル類：例えば、ジエチルエーテル、ジ
イソプロピルエテル、テトラヒドロフラン、ジオキサン
など。□ （ｅ）　　ケトン類：例えば、アセトン、メチルエチル
ケトン、ジエチルケトン、ジイソプロピルケトンなど。

（ｆ）　　アルコール類：　例エバ、メチルアルコール
、エチルアルコール、プロピルアルコール、メチルアル
コールなど。

使用する溶媒の選択にあたっては、一般式（１）のポリ
プレニルアセテートまた。はこれと一般式（ＩＩ）のポ
リプレノールを選択的に高効率で抽出し、それ以外の物
質はできるだけ抽出しないものが望ましく、かかる観点
からすれば１、上記溶媒中、炭化水素類、ハロゲン化炭
化水素類、エステル類、ジエチルエーテル、ジイソプロ
ピルエーテルの如き極性の低いエーテル類およびケトン
類が特に好適である。

抽出溶媒の使用量は臨界的なものではなく、用いる溶媒
の種類、抽出すべき植物の種類、部位、状態等に応じて
広範に変えることができるが、一般には抽出に供する植
物体１重量部（乾燥重量基準）当り約１〜約１００重量
部、好ましくは５〜５０重量部、さらに好ましくは１０
〜３０重量部の範囲内で用いることが有利である。

＝１３− 抽出は上記の溶媒中に植物体を浸漬し、必要に応じて連
続的または間欠的に攪拌することにより行なうことがで
きる。抽出時の温度も臨界的なものではなく、用いた溶
媒の種類や量等の条件に応じて広範に変えることができ
るが、一般には約Ｏ℃から溶媒の還流温度までの温度を
用いることができ、通常は室温で充分である。かかる条
件下に抽出は普通１〜１０日間行なうのが有利である。

抽出処理後の浸漬液は植物体その他の固形分を除去した
のち必要に応じて溶媒を除去して濃縮液とする。かくし
て得られる抽出物をそのｉｔケン化処理に供することが
できるが、所望により咳抽出物を適宜前処理によりある
程度精製したのちケン化、処理に供することもできる。

この前精製には後述する分別溶解法および／またはクロ
マトグラフィーがとくに好適に用いられる。この前精製
によって炭化水素溶媒（たとえばｎ−ヘキサン）に不溶
な夾雑物および／ｌたはタール分を除去しておくと後の
精製が容易となる。ケン化処理は、自体公知の方法およ
び条件を用いて行うことが可能１４− であり、たとえば含水率約１〜２０重量−程度の含水メ
タノールまたは含水エタノール中に水酸化ナトリウムま
たは水酸化カリウムを溶解させた溶液（アルカリ金属水
酸化物濃度は好ましくは約ｏ、ｉ〜３０重量優とするこ
とができる）１００重量部に対して上記の抽出物を約５
〜５０重量部の割合で加えて約２５〜９０℃で約０．５
〜５時間反応させればよい。

ケン化処理後、ケン化反応混合物から一般式（ＩＩ）で
示されるポリプレノールを主成分とする両分（ポリプレ
ノール画分）を分離取得する。このポリプレノール画分
の取得は通常好ましくは次の方法により行われる。すな
わち、ますケン化反応混合物を水の存在下、実質的に水
と混和しない有機溶媒で抽出し、有機層と水性層とに分
離する。ここで用いうる有機溶媒としては、例えば石油
エーテル、ペンタン、ヘキサン、ヘプタン、ベンゼン、
トルエン、キシレンなどの炭化水素類、クロロホルム、
塩化メチレン、四塩化炭素、四塩化エタン、パークロル
エチレン、トリクロルエチレンナトノハロゲン化炭化水
素類、酢酸イソプロピル、酢酸ブチル、プロピオン酸エ
チル、プロピオン酸ブチル、ジエチルエーテル、ジイソ
プロピルエーテル、ジｎ−ブチルエーテル、メチルイソ
ブチルケトン、ジイソブチルケトンなどを挙げることが
できる。

これら抽出溶媒の使用量は臨界的ではないが、一般にケ
ン化反応混合物に対して５倍（重量）から１００倍（重
量）が好適であるｄこの抽出に際し、水は有機層と水性
層とが層分離を生じるに必要な最少量以上存在すればよ
いが、通常有機層と水性層との容量比が１！１０〜１０
：１となるような割合で用いることが好ましい。こうし
て得られる有機層を必要に応じ溶媒を留去して濃縮後、
クロマトグラフィー、分別溶解法、分子蒸留法またはこ
れらの方法の２種もしくはそれ以上の組合わせからなる
分離工程に付してポリプレノール画分を分離取得するこ
とができる。

上記分離工程におけるポリプレノールが含有されている
画分の確認は、メルク社製薄層クロマト用プレート（シ
リカゲル５９　Ｆ２１１４被覆；層の厚さ０．２５日）
を用いかつｎ−ヘキサンと酢酸エチルとの容量比で９＝
１の混合溶媒を展開溶媒とする薄層クロマドグ、ラフイ
ー（１０ｙ＋＋展開）において標準物質としてのソラネ
シルアセテートのＲｆ値が０．４０〜０．４５となる条
件下に０．１８〜０．２５の範囲内のＲｆ値のところに
スポットが存在するか否かにより行なうことができる。

しかして、以下の説明において薄層クロマトグラフィー
のＲｆ値を言及する場合には、特にことわらない限り、
上記条件下に測定した値を意味することを了解すべきで
ある。

上記分離工程において使用しうるクロマトグラフィー、
分別溶解法、分別冷凍沈殿法および分子蒸留法の各方法
の操作はそれ自体公知のものであり、本発明においても
公知の方法に準じて行なうことができるので、各方法の
詳細については文献の引用を以って説明に代え、ここに
は特に注意すべき点のみを記載する。

（６）クロマトグラフィー〔例えば、　ＨｏＨｅｆｔｍ
ａｎ。

”Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ”、　Ｒｅ１ｎｈｏｌ
ｄ　Ｐｕｂｌｉｓｈ　Ｃｏ、、　　Ｎｅｗ１７− Ｙｏｒｋ　（１９６１）参照〕 抽出物が少量の場合には薄層クロマトグラフィーおよび
液体クロマトグラフィーが適当であるが、大量の抽出物
の処理にはカラムクロマトグラフィーが好適である。使
用しうるクロマトグラフィー用担体としては、シリカゲ
ル、アルミナ、フロリジル、セライト、活性炭、セルロ
ースなどが挙げられ、中でもシリカゲルが好適である。

シリカゲルカラムを使用して分離操作を行なう場合の展
開溶媒としては、例えば、ヘキサン／酢酸エチル（容量
比９５：５〜８１２０）、ヘキサン／ジイソプロピルエ
ーテル（容量比９５：５〜８０：２０）、石油エーテル
／酢酸メチル（容量比９５：５〜８０　：　２０　）、
石油エーテル／イソプロピルアルコール（容量比９１１
〜９０；１０）、ベンゼン／ジエチルエーテル（容量比
９５：５〜８０：２０）、ベンゼン／酢酸エチル（容量
比９８：２〜８０：２０）などの混合溶媒系あるいはク
ロロホルム、メチレンクロリドなトカ挙げられる。

１８− ０）分別溶解法〔例えば、Ｌ、　Ｃ，Ｃｒａｉｇ、　”
　Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｏｆ　Ｏｒｇａｎｉｃ　　Ｃｈｅ
ｍｉａｔｒｙ’、−Ｖｏｗ、１３．　　Ｉｎｔｅｒｓｃ
ｉｅｎｃｅ。

（１９５１）参照〕 前記一般式（Ｉｆ）のポリプレノールはペンタン、ヘキ
サンのような非極性溶媒に易溶であり、一方、メタノー
ルや水などの極性溶媒には難溶であるので、前記抽出液
濃縮物を上記非極性溶媒に溶解し、ついで該非極性溶媒
と非混和性の極性溶媒で洗浄することによって、極性溶
媒に易溶な不純物を大幅に除去することができる。本方
法で好適に使用される非極性溶媒としては、例えば、石
油エーテル、ペンタン、ヘキサン、ヘプタン、ベンゼン
、トルエンなどの炭化水素系溶媒およびメチレンクロリ
ド、クロロホルムなどのハロゲン化炭化水素系溶媒が好
適である。また、かかる非極性溶媒と非混和性の極性溶
媒としては例えば水あるいはメタノールが好適であるＯ Ｃ）分別冷凍沈殿法〔例えば、Ｅ、Ｗ、　Ｂｅｒｇ、　
□　“Ｐｔｙａｊｃａｌａｎｄ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｍ
ｅｔｈｏｄｓ　ｏｆ　５ｅｐａｒａｔｉｏｎ　”　Ｃｈ
ａｐｔｅｒ１４、１５．　ＭｃＧｒａｗ−１（ｉｌｌ、
　Ｎｅｗ　Ｙｏｔｋ（１９６３）参照〕前記一般式（Ｉ
Ｉ）のポリプレノールは約−１０℃以下で固化する。従
って、抽出物を一１０℃以下、好ましくは約−１５〜約
−３０℃に冷却下に放置し、目的物を固化させたのち同
一液分離することによって、かかる温度で固化しない不
純物から精製することができる。しかしながら、該ポリ
プレノールはあまり優れた結晶性を有さす、ワックス状
固体となるため、本方法により完全に精製することは難
しい。なお、逆にポリプレノール中に存在する結晶性の
不純物を優先的に析出させて除去することも可能である
。

０分子蒸留法〔例えば％Ｇ、Ｄｕｒｒｏｗｓ、　・Ｍｏ
１ｅｃｕｌａｒ１）ｉａｔｉｌｌａｔｉｏｎ　−、Ｃ１
ａｒｅｎｄｏｎ　Ｐｒｅｓａ、　０ｘｆｏｒｄ　（１９
５Ｑ　）参照〕 前記一般式（ＩＩ）のポリプレノールは分子量が大きい
ため、分子蒸留法を用いることによって低分子量の不純
物を除去することができる。例えば１０−３〜１０　’
　ｍＨｒの゛真空度において１００〜２００℃の加熱条
件下に分子蒸留して、低分子留分と高分子留分とに分割
される。このとき、高分子留分に目的物質は保持され、
低分子量不純物を大幅に除去することができる。

これら分離法の２種もしくはそれ以上の組合わせを用い
ることもできる。例えば、クロマトグラフィーと分別溶
解法；クロマトグラフィーと分別冷凍沈殿法と分別溶解
法；クロマトグラフィーと分別冷凍沈殿法と分別溶解法
と分子蒸留法；クロマトグラフィーと分子蒸留法と分別
溶解法；クロマトグラフィーと分子蒸留法；分子蒸留法
と分別溶解法；分子蒸留法と分別溶解法と分別冷凍沈殿
法などの組合わせを用いることができる。

本発明の好ましい実施態様の１つにおいては、前記ケン
化処理後有機溶媒で抽出された抽出物をカラムクロマト
グラフィーを主体とした分離精製法によって処理するこ
とにより、前記薄層クロマトグラフィーにおいてＲｆ値
が０．１８〜０．２５となる両分（ポリプレノール画分
）を分離取得する。

かくして得られるポリプレノール画分をポリプレニルア
セテートに転化し、この段階で再度精製すると簡単な操
作で容易に高純度に精製できる。

２１− ポリプレノールをポリプレニルアセテートに転化するた
めには、ポリプレノールを酢酸またはその反応性誘導体
、たとえば無水酢酸、塩化アセチルなどとエステル化反
応させればよい。これらエステル化反応は自体公知の方
法および条件を用いて行うことができる。たとえばポリ
プレノール両分とこれに含まれるポリプレノール１モル
あたり約０．８〜１０モル、好ましくは１〜５モルの前
記酸無水物または酸ハライドとを好ましくはペンタン、
ヘキサン、ベンゼン、トルエン、ジエチルエーテル、ジ
イソプロピルエーテルなどの適当な溶媒の存在下、ピリ
ジン、トリエチルアミンなどの適当な塩基の存在下に約
−３０〜＋８０℃、好ましくは０〜３０℃で反応させれ
ばよい。

上記のようにして生成させたポリプレニルアセテートを
精製することにより植物体から抽出したままのポリプレ
ニルアセテートあるいは前記ポリプレノール画分からは
容易には除去し難い夾雑物とくにクロロフィル、カロチ
ノイド、ステロイド、グリセリド、スフィンゴリピド、
フラボノイドな２２− どを容易に除去することができる。この精製には先に述
べたクロマトグラフィー、分別溶解法、分別冷凍沈殿法
、分子蒸留法などを単独でまたは２棟以上組合わせて用
いることができるが、クロマトグラフィーの使用がとく
に好適である。クロマトグラフィーの好ましい実施態様
はポリプレノール両分を得るために用いる分離方法に関
して前記したものと同様である。大量のポリプレニルア
セテートを精製するには、たとえばシリカゲルカラムを
用い、展開溶媒としてたとえばヘキサン／酢酸エチル（
容量比９９：１〜９０７１０）、ヘキサン／ジイソプロ
ピルエーテル（容量比９９：１〜ｃ＋ｏ：ｔｏ）などを
用いてカラムクロマトグラフィーにより精製するのが簡
便であり、とくに好ましい。なお、ポリプレニルア垂テ
ート両分ハ前記薄層クロマトグラフィーにおいて０．５
０−０．５５のＲｆ値を示す。

このようにして得られるポリプレニルアセテートまたは
それらの混合物はクロロフィル、カロチノイド、ステロ
イド、グリセリド、スフィンゴリ９３− ビド、フラボノイドなどの着色性不純物を＃１とんど含
有せず、たとえば哺乳類ドリコール類の合成中間体とし
て使用するのに好適である。得られたポリプレニルアセ
テート混合物は所望ならばたとえば高速液体クロマトグ
ラフィーにより各年−のポリプレニルアセテートに分離
することができる。

以下、本発明を実施例によりさらに詳しく説明する。な
お、実施例中のＩＲ分析は液膜で測定し、ＮＭＲ分析は
ＴＭＳを内部標準として測蝋した。

ＦＤ−ＭＡＳＳ分析（電界電離性質量分析）の値はｒＨ
１１ｍＣ１１６０’として補正した値である。

実施例１ １１月初旬に倉敷市内で採取したイチョウの葉１０ｋｆ
（未乾燥重量）を約５０℃で５時間熱風乾燥したのち室
温（約１５’Ｃ，）でｎ−ヘキサン／アセトン＝４７１
（容量比）の混合溶媒ＳＯ４中に浸漬して１週間抽出し
たのこの抽出液から溶媒を留去し黒かつ色の液状物を得
た。とのものをメタノール４００ｄ、水４０＊ｌおよび
水酸化ナトリウム２゛５ｆと共に２時間６５℃に加熱攪
拌したのち、室温に冷却し、ヘキサン（５００ｗＬｌ）
を加えて抽出し、ヘキサン層を約１ｊｏｍｒの飽和食塩
水で５回水洗したのち無水硫酸マグネシウムで乾−し、
溶媒を留去して黒かつ・色の液状物を得た。ついでこの
液状−を約１陽のシリカゲルを用い□たシリカゲルカラ
ムによりｎ−ヘキサン／酢酸エチル＝９５１５　（容量
比）の混合溶媒を用いて処理することにより、ｎ−へキ
サン／酢酸エチル＝　９／１　（容量比）の混合溶媒を
用いたシ゛リカゲル薄層クロマドグ２フィー〔メルク社
製’Ｉ’ＬＣｐｌａｔｅ　（’５ｉｌｉｃａ　ｇｅ１６
０　Ｆ２５４　ｐｒｅｃｏａｔｅｄ層厚０．２５　ｍ　
）を使用して１゜２５− 副展開〕においてＲｆ＝０．２１となる画分を分離して
２３２の赤かつ色の液状物を得元。この薄層クロマトグ
ラフィー−おいてレラネシルアセテートＦｉ０．４１の
Ｒｆ値を示した詐　゛　　　　′次□いでこの液状物を
ピリジン２０ｆ％　ｎ−ヘキサン３００　ｍｅ中に溶解
し、室温で攪拌しながら無水酢酸２５ｔｈ′を滴下し、
滴下完了後、−一夜室温で攪拌した。得られた反応混合
物を飽和食塩水約１００ｄで３回洗浄したのち無水硫酸
マグネシウムで乾燥し、ｎ゛−ヘキサンを留去して赤か
っ色の液状物を得晃。この液状物を約１峙めシリカゲル
を用いたシリカゲルカラムによりｎ−Ｗキサン／酢酸エ
チル＝　９’７／３　（容量比）の温容溶媒を用いて処
理することにより、前記と同様のシリカゲル薄層クロマ
トグラフィーにおいてｎｆ’＝’　ｏ、　ｓ　ａとなる
画分を分離−して淡黄色液状物１７．９Ｆを得た。

この淡黄色液状物をシリカゲルμｍＦｏｒａａｙｌ　　
を充填剤としｎ−ヘキサン／酢酸工゛チル＝　９７／３
（容量比）の混合溶媒を展開液として廟いた吸着゛型高
速液体クロマトグラフィー−よびシリカゲル２６− μ−Ｂｏｎｄａｐａｋ　−Ｃ１ｓを充填剤としアセトン
／メタノール＝７０／３０（容量比）の混合溶媒を展開
液として用いた分配型高速液体り〒マドグラフィーによ
る分析を行なった結果、目的とする一般式（Ｉ）で示さ
れるポリプレニルアセテート以外のピークは殆んど検出
されず、９９チ以上の純度を有することが確認された。

また、メルク社製セミ分取用高速液体クロマトカラムＬ
ｉＣｈｒｏｓｏｒｂ　ＲＰ、　１９−１０を用いアセト
ン／メタノール＝９０／１０（容量比）の混合溶媒を展
開液とし、示差屈折計を検出器として用いた高速液体ク
ロマトグラフィー分析を行い、得られたクロマトグラム
における各ピークの面積比率を求めたピーク番号　　シ
ス型インブレｙ単位数（ｎ）　　　面積比率（％’１１
　　　　　　　　　　　　１１　　　　　　　　　　　
　　０．５２　　　　　　　　　１２　　　　　　　　
．１．２３　　　　　　　　　１３　　　　　　　　　
　６．３４　　　　　　　　　　　　１４　　　　　　
　　　　　２６．４５　　　　　　　　　１５　　　　
　　　　　３４．９６　　　　　　　　　１６　　　　
　　　　　２０．１７　　　　　　　　　１７　　　　
　　　　　　７．３８　　　　　　　　　１８　　　　
　　　　　　２．４９　　　　　　　　　１９　　　　
　　　　　　０．９この高速液体クロマトグラフィーを
用いて上記の油状物から各成分を分取し、質量分析、赤
外線吸収スペクトル、ＩＨ−ＮＭＲスペクトルおよび１
８Ｃ−ＮＭＲスペクトルによりそれらの成分が一般式（
１）で示される構造を有するポリプレニルアセテートで
あることを確認した。一般式（１）においてｎ＝１４で
あるポリプレニルアセテートについて得られた赤外線吸
収スペクトル、”Ｈ−ＮＭＲスペクトルおよび１３Ｃ−
ＮＭＲスペクトルをそれぞれ第１図、第２図および第３
図に示した。一般式（１）瞥おいてｎが１４以外である
ポリプレニルアセテートについて得られた赤外線吸収ス
ペクトルおよびＮＭＲスペクトルもｎ＝１４のものにつ
いて得られたそれらと特性吸収、特性シグナルの移置に
おいて実質的に同じであった。またＦＤ−ＭＡＳＳ分析
の結果は次のとおりであった。

□ １１　　　　　、　　　１０１２　　。

１　．２　　　　　　　　　　　　　　　　１　０８０
１３　　　　　　　　　　　　　　　　１１４８１　４
　　　　　　　　　　　　　　　　１２１６１５　　　
　　　　、　　１２８４ １６　　　　　　　　　１３５２ １　７　　　　　　　　　　　　　　　　１４２０１８
　　　　　　　　　１４８８ １９　　　　　　　　　１５５６ 参考例１ 実施例１と同じ方法でイチョウの葉１０ｋｆから抽出し
た抽出物を約１ｋｆのシリカゲルを用いたシリカゲルカ
ラムによりｎ−ヘキサン／酢酸エチル２９− ＝９７／３（容量比）の混合溶媒でカラムクロマトグラ
フィー処理して前記シリカゲル薄層クロマトグラフィー
においてＲｆ＝０．５１近辺のポリプレニルアセテート
画分を分離した。これは黒かつ色の液状物であシ、純度
が低かったので同じシリカゲルカラム条件を用いてさら
に２回クロマトグラフィーによる精製を行なって赤橙色
の液状物１９．２２を得た。このものについて実施例１
と同じく高速液体クロマトグラフィーにより分析を行な
った結果９２％の純度であることが確認された。以上の
ことによって、実施例１のごとく植物体から抽出したポ
リプレニルアセテートをケン化してポリプレノールで精
製したのち再度ポリプレニルアセテートに戻して精製す
る方法が着色成分を含む不純物の除去に有効であること
が確認された。

実施例２ ５月下旬に採取したヒマラヤ杉の葉１０ｋｆ（未乾燥重
量）を約５０℃で８時間熱風乾燥したのち室温（約２０
℃）でクロロホルム１００ｊ中に浸漬して１週間抽出し
た。この抽出液から溶媒を留−３〇− 去し、黒かつ色の液状物を得た。このものを約１階のシ
リカゲルを用いたシリカゲルカラムによりｎ−ヘキサン
／酢酸エチル＝９５１５（容量比）の混合溶媒を用いて
処理することにより、ｎ−ヘキサン／酢酸エチル＝９／
１（容量比）の混合溶媒を用いたシリカゲル薄層クロマ
トグラフィー〔メルク社製ＴＬＣｐｌａｔｅ　（ａｉｌ
ｉｃａｇｅｌ　　６　Ｑ　Ｆ２５４　ｐｒｅｃｏａｔｅ
ｄ。

層厚０，２５■）を使用して１０ｃＩｎ展開〕において
Ｒｆ＝Ｑ、５付近およびＲｆ＝Ｑ、２付近の両分を集め
て黒かつ色の液状物５８ｆを得た。この薄層クロマトグ
ラフィーにおいてソラネシルアセテートは０．４１のＲ
ｆ値を示した。

次いでこの黒かつ色の液状物をメタノール４００ｄ１水
４０ｍ１および水酸化カリウム１５Ｆと共に４時間６５
℃に加熱攪拌したのち室温に冷却し、ヘキサン約８００
−を加えて抽出し、ヘキサン層を約２００　ｔｕｇの飽
和食塩水で５回洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し
１．溶媒を留去して黒かつ色の液状物４９ｆを得た。こ
の液状物を約１１ｃｐのシリカゲルを用いたシリカゲル
カラムによりｎ−ヘキサン／酢酸エチル＝９７／３（容
量比）の混合溶媒を用いて処理することにより、前記シ
リカゲル薄層クロマトグラフィーにおいてＲｆ＝０．２
１となる画分を分離して赤かつ免液状物２３．２ｔを得
た。

次いでこの液状物をピリジン２０ｆ、ｎ−ヘキサン３０
〇−中に溶解し、室温で攪拌しながら塩化アセチル２５
ｆを滴下し、滴下完了後、−夜攪拌を継続した。得られ
た反応液を■Ｉ■■■■■飽和食塩水約１０〇− で・回洗浄したのち無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ｎ
−ヘキサンを留去して赤かつ色の液状物を得た。この液
状物を約１ｋｆのシリカゲルを用いたシリカゲルカラム
によりｎ−ヘキサン／酢酸エチル＝９７７３（容量比）
の混合溶媒を用いて処理することによし、前記シリカゲ
ル薄層クロマドグ２フイーにおいてＲｆ＝０．５１とな
る画分を分離して淡黄色液状物２０．８９を得た。この
液状物について実施例１と同様に高速液体クロマトグラ
フィーによる分析を行なったところ、一般式（１）で示
されるポリプレニルアセテート以外のピークは殆んど流
側１と同じ方法で測定した分子量分布は下記のとおりで
あった １　　　　　　　　１１　　　　　　　０．７６２　　
　　　　　　　　　　　　　２．０６３　　　　　　　
１３　　　　　　　７．００４　　　　　　　　　　　
　　　２４．３２４ ５　　　　　　　１５　　　　　　３９．５４６　　　
　　　１５　　　　　１９．２２７　　　　　　　　　
　　　　５．１９′７ ８　　　　　　　１８　　　　　　　１．３９ｇ　　　
　　　　　　　　　　　　　０．５４９ なお、実施例１と同様に高速液体クロマトグラフィーを
用いて各成分を分取し、質量分析、赤外線吸収スペクト
ル、”Ｈ−ＮＭＲスペクトルおよび”Ｃ−ＮＭＲスペク
トルによりそれらの成分が実施例１で得た各成分と実質
曽に同一の化合物であることを確認した。

３３− 比較例２ 実施例２と同様にしてヒマラヤ杉の葉から抽出した抽出
物から約１神のシリカゲルを用いたシリカゲルカラムに
よりｎ−ヘキサン／酢酸エテル＝９７／３（容量比）の
混合溶媒を用いて前記シリカゲル薄層クロマトグラフィ
ーにおいてＲｆ＝０．５１管示す両分を分離して濃かつ
色の液状物を得た。

同じクロマト条件によりさらに３回精製を繰り返して赤
橙色液状物２２．３ｆを得た。この液状物を実施例１と
同じく高速液体クロマトグラフィーにより分析したとこ
ろ不純物が検出され１面積比率から計算した純度１１ｔ
９２チであった。

実施例３ １２月上旬に倉敷市内で採取したアカマツの葉１０　ｋ
ｇ（未乾燥重量）を約６０℃で２４時間熱風乾燥したの
ち室温（約ｌθ℃）で酢酸エテル８０５１を加えて不溶
性成分をν別し、Ｆ液を濃縮し黒かつ色の液状物を得た
。このもの管メタノール３４− ４００ｄ、水４Ｑｍｌおよび水酸化ナトリウム２５Ｖと
共に２時間６５℃に加熱、攪拌したのち、室温に冷却し
、ヘキサン（５００ｄ）ｉ加えて抽出し、ヘキサン層を
約１００ｍｊ！の飽和食塩水で５回水洗したのち無水硫
酸マグネシウムで乾燥し、溶媒を留去して黒かつ色液状
物を得た。ついでこの液状物を約５００ｔのシリカゲル
管用いたシリカゲルカラムによりｎ−ヘキサン／酢酸エ
チル＝９５．１５・（、容量比）の混合溶媒を用いて処
理することによりｎ−へ午サン１５酢酸エテＳ−％’Ｍ
１（・・容、量比）の混合溶媒を用い六シリカゲル薄層
クロマドグ２フィーにおいてＲｆ＝０．２１となる両分
を分離して６，７ｆの赤かつ色液状物を得た。

次いでこの液状物をピリジン５２．ｎ−ヘキサン１００
ｊＩ／中に溶解し、室温で攪拌しながら無水酢酸５ｔを
滴下し、滴下完了後、−夜室温で攪拌した。得られた反
応混合物を飽和食塩水約２０−で４回洗浄したのち無水
硫酸マグネシウムで乾燥し、ｎ−ヘキサンを留去して赤
かつ色の液状物を得た。この液状物を約３０ｏｆのシリ
カゲルを用いたシリカゲルカラムによりｎ−ヘキサン／
酢酸エチル＝、９７／３（容量比）の混合溶媒を用いて
処理することにより、前記と同様のシリカゲル薄層クロ
マトグラフィーにおいてＲｆ＝０．５３となる両分を分
離して淡黄色液状物４．９５ｆを得た。この液状物につ
いて実施例１と同様に高速液体クロマトグラフィーによ
る分析を行なったところ、一般式（１）で示されるポリ
プレニルアセテート以外のピークは殆んど検出されず９
９チ以上の純度を有することが確認された。また、この
ポリプレニルアセテートについて実施例１と同じ方法で
測定した分子量分布は下記のとおりであった。

１　　　　　　　１（１２，４ ２１’ｌ　　　　　　　　３．０ ３　　　　　　　１２　　　　　　　９．９４　　　　
　　　１３　　　　　　３２．２５　　　　　　　１４
　　　　　　３４．３６　　　　　　　１５　　　　　
　１１．５７　　　　　　　１６　　　　　　　２．５
８　　　　　　　１７　　　　　　　２．２９　　　　
　　　１８　　　　　　　１．６比較例３ 実施例３と同様にアカマツから抽出された抽出物から約
５００９のシリカゲルを用いたシリカゲルカラムにより
ｎ−ヘキサン／酢酸エチル＝９７／３（容量比）を用い
て前記シリカゲル薄層クロマトグラフィーにおいてＲｆ
＝０．５１を示す両分を得、これを同じクロマト条件に
よりさらに３回精製し５．２１ｆの赤橙色液状物を得た
。この液状物を実施例１と同じく高速液体クロマトグラ
フィーにより分析したところ不純物が検出され５面積比
率から計算した純度は９４’ｊｉであった。

【図面の簡単な説明】

第１図、第２図および第３図は実施例１において単離さ
れたイソプレン単位数１７のポリプレニルアセテートに
ついて測定されに赤外線吸収スペクトル（第１図）、Ｉ
Ｈ−ＮＭＲスペクトル（第２図）、およびＩａＣ−１Ｎ
ＭＲスペクトル（・第３図）である。 特峠出願人株式会社゛し”□ラ　し 代理人°弁理士本多　堅 ３７− ダ掘屑

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、一般式（１）　　　　　’　　　　、：（式中、−
   ＣＨ２−Ｃ＝Ｃ−ＣＨ２−Ｆｉ　）　、ｙ　ンス型イン
   ７’　Ｌ／プレン単位を表わし、ｎは１０−１９の整数
   を表わす。） で示されるポリプレニルアセテートの少なくとも１種を
   含有する植物を脂溶性の有機溶媒で抽出して得られる抽
   出物から該ポリプレニルアセテートを分離精製するに際
   し、該抽出物をケン化処理して核ポリプレニルアセテ−
   ）’ｔボ！Ｊ７”ｉ− レノ〜ルに転化したのち該ポリプレノールを主成分とす
   る両分を分離取得し、該ポリプレノールをポリプレニル
   アセテートに戻して精製することを特徴とするポリプレ
   ニルアセテートの分離精製方法。 ２、植物がイｆヨウ（Ｇｉｎｋｇｏ　ｂｉｌｏｂａ　）
   である特許請求の範囲第１項記載の方法。□ ３、植物がマツ科植物である特許請求の範囲第１項記載
   の方法。 ４、マツ科植物がヒマラヤ杉（Ｃｅｄｒｕａ　　ｄｅｏ
   ｄａｒａ　）である特許請求の範囲第１項記載の方法。 ５、脂溶性有機溶媒が炭化水素類、ハロゲン化炭化水素
   類、エステル類、エーテル類、ケトン類およびそれらの
   混合物から選にれる特許請求の範囲第１項記載の方法。 ６、植物から抽出された抽出物をケン化処理し。 ケン化反応混合物を水の存在下に実質的に水に混和しな
   い有機溶媒で抽出し、得られる有機層を漉網後カラムク
   ロマトグラフィーによりポリプレノール両分を分離取得
   し、該ポリプレノー２− ルをポリプレニルアセテートに戻し、これを力　、ラム
   クロマトグラフィーにより精製する！許請求の範囲第１
   項記載の方法。