JPS58189190A - Ｃｌ１５６５化合物類，その製造方法及びそれを有効成分とする抗腫瘍剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明ｒＪ配号ＣＬ　／！；ｉｓ！；−Ａ、ＣＬ１５４
５−６及びＣＬ　／Ｓｉｘ！；−Ｔで示される抗腫瘍剤
である＃ｒ規のリン含有抗生物質及び同職物質に関する
と共にこれら諸物質の製薬学的に許容され得る＠類、そ
れらの製造方法並びにｖｉ諸物質の用法にも関連する。

更に！ｌＩＩ細には本物質の製法は本発明のＣＬ７３６
ｇ複合物胸造のた約の単離菌株であって寄託番号＾ＴＣ
Ｇ３／９０１ｚを南するストレットばセス橋の菌株（Ｓ
ｔｒθｐｔｍｙｃθｓｓｐ、）の使用による発＃法に関
する。ＣＬ　／！；４ｇ抗生成分の３８Ｉ即ちＣＬ１５
Ａ、！ｔ−＾、ＣＬ／ｊＡ＆−８及びＣＬ１５４！−Ｔ
の化学構造は夫々式ハコａ及び２ｂで示される。

＼ ０３Ｈ２ ／、　　ＣＬ　／！；ｉｓ！−＾ ２Ｂ、Ｒ１−Ｒ２−Ｈ：ＣＬ　　１５６！；　Ｂ、２ｂ
、Ｒ１口Ｒ，−ＯＨ：ＣＬ　／！ｆ４．！−−Ｔ式／、
２ａ及び２ｂとしてＣＬ　／！４！−＾、ＣＬ１５乙、
Ｓ’−８及びＣＬ　／！；ｂ！；−Ｔに夫々与えられた
化学構造式は本件出願の日までに発明者に認識された核
蜀實の構造の最良の表現である。

該構造ＦｉｃＬ／３４．！；−＾、８及びＴ並びに該誘
導体の酸物の物理的及び分光学的特性の比較により得ら
れたものである。その他の物理測定から得られる成績例
えばＸ線結晶学にもとづく成績は式／、２ａ及び２ｂで
示されるｗ４造を将来修正させるかも知れない。しかし
将来修正される可能性のある化学＃Ｉ遣式のいずれのも
のも本発明の範囲内に包含される。史に本発明ＶｉＩＩ
！！！瘍疾患の治療における本発明の上記線化合物の各
種の塩な羊独で又は他の抗腫瘍剤と組合せて含壱する製
薬学的組成物に関するものである。

本発明に従いＣＬ　１５Ａ５複合物な産生するストレプ
トミセス１ｆＩ４薗株であって単離菌株として寄託番号
＾ＴＣ，Ｃ３／ｑ０１ｓをもつ菌株な選択して実質門の
ＣＬ／３１．Ｓ化合物又は化合物類（特にＣＬ／！；ｂ
！；−＾、ＣＬ１５Ａ５−８及びＣＬ　／３４！；−Ｔ
）が産生されるまで適宜の栄養培地中で人為的諸条件１
にこれを培養し／Ｓ又Ｖｉ複数株の該化合物な遊［ａ＆
又ｔｉ−の形で単離すること（よりＣＬ／！；ｂ！；の
線化合物が製造される。

本発明の目的に適するストレゾトハセス属菌株はプラノ
ル国すンノ々ウロで採取された土壌試料中に発晃された
。ｕｉ微生物は適切な寒天平面培地の使用により該土壌
試料から単離された。この培地の一例は塩類例えばりン
鐵カリウム、硫酸マグネシウム及びｍａｓｔ−鉄韮びに
炭素化合物例えばグリセリン及びアスパラギンを含有す
る培地である。

土ＩＩ試料な寒天培地上に置く前に仁れな炭酸石灰で予
備処理し、好適温度％にコＩＩｃＫ恒温保持して±ＩＫ
黴生物な繁殖させる。

単離されたＣＬ　／！４！複合物産生菌はストレゾトゼ
セス属の未同定の菌株であってアメリカンタイ７”カル
テニアコレクション（＾ｍｅｒｌｃａｎ　ＴｙｐｅＣｕ
ｌｔｕｒｅ　Ｃｏｌ　１ｅｃｔｌｏｎ、　Ｒｏｃｋｖｌ
　Ｉ　ｌｅ、　Ｍａｒｙｌａｎｄａｇｊコ）に寄託され
＾ＴＣＣ，？／？θ６としてその永久的寄託機関に保管
されている。ＣＬ　／！＆！−＾及びその同Ｘ＊質の該
産生菌はウオルナーランベルト培養研究所（Ｗａｒｎｅ
ｒ−Ｌａｍｂｅｒｔ／Ｐａｒｋｅ−Ｄａｖｌｓ　Ｃｕ１
ｔｕｒｅＬａｂｏｒａｔｏｒｙ　　）で凍結管、低温壜
及び土壌管の中に休眠培養物として保管され単離１１ｗ
ｐ−ダコ６と表示されている。

抗腫瘍性化合物ＣＬ　／！；ｂ！；−＾及びゝＣＬ／！
；ｌ、！；−Ｂ並び［ＣＬ　／ｊＡ、ｓｉ’−Ｔを包含
する近鰍間部物實″は率＃！鉋ＷＰ−弘＝６の制御され
た条件下の通気発酵により産生される。発Ｗ＃用培地は
炭系源、チツ本源、無機質及び成育因子から成る。炭素
源の蹟例は各種の単純糖例えはセレロースｔ　ｃｅｒθ
ｌｏｓθ）、マンノース、フラクトース、キシロース、
す？−ス及びグリセリン或は他の炭水化物含有物質例え
ばデキストリン、ｒングン。

トウモロコン粉及び乳清である。炭素源の常用量はθ／
〜１０重量−に変化し得る。

チッ素源ｉｉ肩機、無機又は混合有機−無機性源である
。該化合物の鎖側は綿実粉、大豆粉、トウモロコシ胚Ｔ
８、）ウモロコ’／　水浸液（ｃｏｒｎｓｔθθｐ　１
ｌｑｕｏｒｌ　、デイスチラース　ンリュゾルス（ｄｌ
ｓｔｌｌｌｅｒｓ　５ｏｌｕｂｌｅｓ　）　％落花生粉
、ペグトン化乳校び各−アンモニウム塩である。ＳＶ、
の飽加蓋はθ／〜Ｓ囁に質化し得るけれどもこれ以上の
高音も又許容される。

発酵培地中への無機物及び成育因子の添加はＣＬ　／！
６！；−＾及びその間部物質の産生をも助長する。無機
′Ｊｊｉな供給する培地成分の蹟例はリン酸カリウム、
塩化ナトリウム、硫黄第一鉄、炭酸カルシウム、塩化コ
バルト及び硫酸亜鉛である。

成育因子１％ｔは各種のイースト及び乳製品な包含する
。

ｃＬ　／！；６．！ｆ−＾及び間部物質の好適産生法は
深部培養発酵法である６本発明のｍ一様に従えば発酵用
諸成分な浴液としこれを加圧加熱又は蒸気加熱により滅
−する、水性培地のｐＭは弘〜ｌが好適である。この発
酵用培地を適温即ち７６〜ｌｌ５Ｃに冷却して適宜の培
養物Ｖｔ接樵する０通気攪拌下に発酵させるとＣＬ　／
！４！ｒ−＾及びその間部物質の最高産生は通常−〜７
０日間で達成される。

ＣＬ　／！ｒｂ！；−＾及び間部物質の産生のための固
体状妙の発酵をも又使用し得る。

深部培養法においては振盪フラスコ又は靜置発酢檜の中
で発酵を行う。振盪フラスコの場合ＫＦｉフラスコを振
盪して培地と空気とを混合することにより通気を竹う、
靜璽発酵檜の場合にはディスクタービン、羽根付円盤、
−散型タービン又は船舶用ノロペラ−の形状の羽根車の
使用下の攪拌な行う、空気又は酸系の発＃混合物中への
吹込によっても通気が行われる。

下記の鎖側は諸製品即ちＣＬ　／！；１．！；−＾及び
ｆｉ’ｆＪ　ｍ−ＩＩ質を製造する好適方法の例示であ
る。

例／ 相鉋増殖及び撮盪フラスコ発岬 休眠中の培′＃ｒ物なＣＩＭ−＝３斜面寒天培地へ移燻
し２ｇ’ＣＶＣ７〜／ダ日間恒諷保持する。斜面培養物
の一部なＳｌの＾ＲＭ　／！；３０撞−用培地な入れた
／ざ×７５０−のｍ―用粗管接樵する。

この種−粗管を２１ＩＣに３〜ダ日間振盪する。

７＜デクス（藺標名）（Ａｍｌｄθ×）トウモロコシデ
ンノン１０？ Ｎ−Ｚアミン（＾型）２ｖ 牛肉エキス〔ディフコ（Ｄｌｆｃｏ）］　　　　　　　
／ｌイーストエキス〔ｒイフコ３　　　　　　　　　　
／ｌ塩化第−コバルト穴水化物　　　　　　ａＯユθｆ
寒天　　　　　　　　−〇？ 蒸留水　　　　　　　　　　　１０１００Ｏパクト（商
標名）Ｈ−ストエ中ス［Ｂａｃｔｏ−ＹｅａｓｔＥｘｔ
ｒａｃｔ（Ｄｌｆｃｏ））　　　　　　　　　　０！！
グルコース−水化物　　　　　　　　　　　ａｉ可可溶
性ノンノンディフコ〕　　　　　　　ユダバクトートリ
ゾトファン［８ａｃｔｏ−Ｔｒｙｐｔｏｎｅ（ＤＩｆｃ
ｏ）］Ｓ パクト牛肉エキス〔８ａｃｔｏ−Ｂｅｅｆ　Ｅｘｔｒａ
ｃｔ（ＤＩｆｃｏ））３ ＣａＣＯ３０ユ 注：ＣａＣＯ３絵加前Ｋ　ＮａＯＨで−を’ｚｓｖｃｌ
ｌＩｌｌ整する 種−管から成育微生物の−１１（／ｄ）なとり、これな
３０ｘｌのＳＭＡダ製造用培地を入れた３００１容邪魔
板付きエルレンマイヤ型振盪フラスコへ移す。僧楕後の
フラスコな／！；０ＲＰＨＷＣセットされ九回転振盪機
（コ”’　ｔｈｒｏＷ）を用いて振盪しなから２ｔＩ’
ＣＶＣｇ日間恒温保持する。Ｓ日間の＠鉢後の発絆液は
黄褐色を呈し、−糸体は粒状で発鉢赦のｐｉ＋は約ＳＳ
である。

ＳＭ　Ａ亭製造用培地 乳清［クログル乳業（Ｋｒｏｎｅｒ　Ｄａｌｒｙ）］　
　３！；、０容蓋膚ｒキストリン〔アミｒクス（＾ｍｌ
’ｄｅｘ８！／／　　〕］アメリカトウモロコシ　　　
　　　　　　　　ｌ！ｆ重蓋憾ファルマメディア［Ｐ’
ｈａｒｍａｍｅｄｌａ（Ｔｒａｄｅｒｓ　Ｐｒｏ−ｔｅ
ｌｎ）ｔ１３／３０７］　　　　　　　　　１！；京蓋
囁蒸留水 江：ＮａＯＨで−を６５に調整する。

ｃＬｉｓｂｓ−＾及び同一物な含有する発酵液の／：ｌ
θＯ希釈液についてＬ　／２１０マウス白血病細胞九対
しインビトロで試験する。　Ｌ　／２１０細胞対照と比
較したとき細胞の０〜ＳＯ％成育は活性な有することを
示し、θ優ならば最も活性である。二回の実験的振盪フ
ラスコ発酵における細胞障害性は下表の通りであった。

上記の発酵液について寒天円形培地使用により数種の像
生物九対して試験した。粗発跡液はナイセリアカタラリ
Ｘ　（Ｎｅ１ｓｓｅｒｌａ　ｃａｔａｒｒｈａｌｌｓθ
３！ｆ９４）、スタフイロコクスアウレウス（５ｔａｐ
ｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ　Ｏコ４ｃ１２）
、ノ（チルススブチリス（Ｂａｃｌｌｌｕｓ　５ｕｂｔ
ｌｌｌｓ　０１！５ｇ　）、フレケラ　ブレビｘ　（Ｋ
ｌｏｅｃｋｅｒａ　ｂｒｅｖｌｓ　Ｍ　１３７ｇ）％ｏ
　）”　トｋ　５　／’　ｋ　’？　ニス（Ｒｈｏｄｏ
ｔｏｒｕｌａ　ｇｌｕｔｌｎｌｓＭ／３ｆ４（）、ナツ
カロミセスセレピジエ（ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ　
ｃｅｒｅｖｌｓｌａｅ　Ｏ／！；コＳ）及びペニシリウ
ムアペラネウム（ＰθｎｌｃｌｌｌｌｕｍａＶｅｌｌａ
ｎｅｕｍ　Ｍ　２９　Ｋ　ｇ　）　Ｋ対し活性であるこ
と力を艶出された。

例ユ ２０θガロン（りｓｑｔ＞容発酵槽による発酵（＾）槓
−増殖 約ｌ−の培養物懸濁物を含有する低温壜な接穐源として
用いる。この低温壜内容物なｌ＆１１解させてこれなｓ
ｏｉ：＞ｍの５Ｏ−０！ｒ樵−用培地を有するコを容の
邪魔板付きエルレンマイヤフラスコへ無劇的に移した。

接極後のフラスコな／３０ＲＰＨの速度の回転振盪機上
で２ダＣＫｔＩ４〜＋ｇ時間恒温保持した。

５ｏ−ｏｓ種菌用培地　　　　　　憾 アンペレクスＣＡｍｂｅｒ’ｅｘ／θ０３（＾ｍｂｅｒ
　Ｌａｂｓｌ〕θＳ グルコース−水化物（レロース（６）ｅｒｅｌｏｓｅ）
）　　　０．／ｒキストリンーアミｒクスｌＴ４名１ １１１）ｅｘｔｒｌｎ−Ａｍｌｄｅｘ　８１Ｉ／／（Ｃ
ｏｒｎ　Ｐｒｏｄｕｃｔｓ）］、２．ダ Ｎ−Ｚケー−Ｚ［Ｎ−Ｚ　Ｃａ５ｅ　（Ｈｕｍｋｏ　５
ｈｅｆｆ　１ｅａｄ　）　］θＳ 噴精乾燥肉浴解物［５ｐｒａｙ　Ｄｒｌｅｄ　Ｍｅａｔ
　５ｏｌｕｂｌｅｓ（Ｄａｙｌｌｎ　Ｌａｂｓ）］　　
　　　　　　　　　　θ３ＣａＣＯ３θコ 蒸留水 恒温保持ｌＩｇ時間後Ｋａｍフラスコ内容物な／６ｔの
ＳＤ−〇！ｆｓｌｌＩ用培地な有ｔル３０　ｔ８不銹銅
発ｔ＃器へ無―的に移し入れる。接槽後の発酵器を３０
ＯＲＰＭの攪拌下に速度／ＶＶＭで空気を通人しながら
コ弘ＵＫ／ｌ−コダ時間恒温保持する。この成育微生物
をコｏｏガロン（７ｓ７ｔ）容の製造用発酵槽へ接種す
るために使用する。

（８）発酵槽による製造 ５Ｍ４４４培地Ｏｌ＆Ｑｔｆａ：ｙ　Ｃｂ０４１）ｋ入
れた２００ガロン（り５りｔ）容の発酵槽を７２ＩＣで
ダ０分関蒸熱殺菌する。この培地なコ’ＩＣＥ冷却して
から３０を容橿菌発簿器がらの約ｉｂｔの成育微生物な
接種する。接糧済み培地を攪拌速ｆ／ｑθＰＰＭ、通ａ
／ｖｖＭ”ｃ−コｌＩＣＣ５〜り日間発酵させる。消泡
剤としてダウコーニングＣ（Ｄｏｗ　Ｃｏｒｎｌｎｇ　
’Ｃ”）　　及びポリゲルコール（ｐｏｌｙｇｌｙｃｏ
ｌ　Ｐ−コθＯθ）　な用いて起泡な制御する。

発酵サイクルの全般にわたりＣＬ　／！ｌ、！；−＾及
び少くとも２種の関連抗麺瘍性抗生物質即ちＣＬ　／！
；１．！；−８及びＣＬ　／ｋ１．！；−Ｔの産生状ｌ
１１４な監視するがそれＫは発酵ノ９ラメ−ター例えば
ｐｈ及び沈積物又は増鵠物の油分率を記録し、又Ｌ／、
２１０マウス白血病細胞に対する試験管内検査を行い、
そして島田液体クロマトグラフ処理（後記＆照）な施す
。２００ガロン（７！ｒ７ｔ）容発ｅ＃檜による発酵状
況の一例を下表に示す。

Ｉ−一一汁一　−−、−、−一−−，，，，゛＠酔ｌダ
コ時間後に発酵槽からの収量（容積）は／ダ０ガロン（
！；３０ｔ）であった。

例３ ｃＬｉｓｂｓ−＾の単離 前記の発酵により得られた発酵済み液に３ダ峙のセライ
）（Ｃｏｒｌｔｅ　！ｒダ３１（商標名）を混合して戸
板及び枠付きフィルタープレスな通して一過した。Ｐ液
（ダ７３ｔ）をｌコＱｔの樹脂ＨＰ−２０（商標名）　
ＣＨＰ　−Ｘ）　ｒｅｓｌｎ　（ＧｌｌｌｌｅｓＩｎｔ
ｅｒｎａｔｌｏｎａｌ、　Ｉｎｃ、　、　Ｌａ　Ｊｏｌ
　ｌａ、　Ｃａｌ　１ｆｏｒｎｌａ）　〕を有する３θ
、ｆｆｍ［０，Ｄ、）コラムを通して濾過（ｐｅｒｃｏ
ｌａｔｅ　）　シた。次にこの樹脂を水（６０Ｓｔ）及
び水：メタノール（９０：／θ）混液Ｃ／７０１）で洗
った。次いで水：メタノール（ざ０：２０）（ｌ液によ
りＣＬ　１５４５−ＡＯ大部分′Ｉｋ樹脂から溶出させ
た。浴出物について高圧液体クロマトグラフ分析（ＨＰ
ＬＣ）（後記参照）な行つと下表の溶出状態が示された
。

浴出１％［φコ及びφ３′１に個別に濃−して凍結乾燥
すると夫々９ａコを及び７！７Ｆの暗褐色固体な与えた
。これらの生成物を−ＮＫして３ｔの水にとかし、得ら
れた溶液なコアｔのメタノールに対し攪拌しながら加え
た。−夜５ＣＫ放置してからこの混合物をＰして沈毀ｔ
Ｓｔのメタノールで洗った。Ｐ液と洗浄液とな合併し真
空中でｌｌｌ１ｍシ凍結乾燥すると１０４Ａ！ｆの固体
を生じた。この生成物の一部（９３ｔ）Ｋ水ｌＳｔな加
えてこれを／７ｔの／−プロ／９ノールに対し徐々に攪
拌下に加えた。得られた混合物を／時間後Ｋｆｐ遇し沈
殿−ｊｋ−２１の／−プロ／９ノールで洗った。Ｆ液と
洗液とを合して濃縮し凍結乾燥すると５７９の固体を与
え、これ′４ｔＨＰＬＣ分析にかけるとこのものは約１
５ｆのＣＬ　／、ｔＡ５−＾な含有していた。

この生成物を約７５２のロフトとし、７．１−ｔ：ｍ［
０，Ｄ、　］　のコラムに詰められた／２１のグ０μｍ
の０７ｇ−シリカゲル（商標名） （Ａｎａｌｙｔｉｃｈｅｍ　Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａ
ｌ、　Ｉｎｃ、、ＨａｒｂｏｒＣｉｔｙ、　Ｃａｔ　１
ｆｏｒｎｉａ）　　上でりＯ’？トゲラフ処理した。

使用の溶離剤はｐ１５のθ００！；Ｍ酢酸アンモニウム
緩衝液であり、次にＳ％アセトニトリル含壱のｐＨＱ５
のθｏｏｓＭ酢酸アンモニウムであった。

各画分を集めてＨＰＬＣによる試験を行った。ＣＬ／！
；ｌ、！；＝Ａ含有の画分な集め、濃縮し、凍結乾燥し
た。得られた生成物の一部（５７θｑ）をり０？トゲラ
フ装置［Ｐｒｅｐ　ＬＣ／Ｓｙｓｔｅｍ５（Ｘ）ａｐｐ
ａｒａｔｕｓｆｉｔｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ａ　ｐｒｅｐ−
Ｐａｋ　−３００／Ｃ１Ｂ　ｃｏｌｕｍｎ（Ｗａｔｅｒ
ｓ　Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ、　Ｉｎｃ、　、　Ｘｉ　
１ｆｏｒｄ、Ｍａｓｓａｃｈｕｓｅｔｔｓ））の使用下
に溶離剤として１０％アセトニトリル含有のｐＨ，４５
の０７Ｍリン酸塩緩衝液を用いて再びクロマトグラフ処
理した。約３７３ＭＩｇのＣＬ１５乙５−Ａを含む主画
分を採り真空濃縮した。

水溶液をコＯθｍｇのＨＰ−コθ樹脂（水中充填）な南
するコラムに通した。この樹脂を／グＯＯ−の水で洗い
、コラム上に残留するＣＬ　／！；ｂ！−＾な３！；Ｏ
Ｌｔの５０ｇ６メタノールで溶出し九、溶出液を真空濃
縮し３Ｓ−の樹脂（商標名ＤＯＷｅＸ−＋ ｊＯＸ、２１　（Ｎａ　　）　　を有するコラムを通過
させた。

流出液（ｐＨよ５）と樹脂の水洗液とを合し凍結乾燥す
るとナトリウム塩として単離されたｉｇｏ’ａｔの純化
されたＣＬ　／！４！−＾な生じた。

この製品な分析するとこのものは親物質としてのＣＬ　
／Ｓｔ、！；−＾遊離績のｌ０モルにつき約１３モルの
ナトリウムな含有することを示した。

遊離酸（ＣＬ　／ｌ、！！−＾、ＣＬ／３４．ｔ−８及
びＣＬ　／！ｒｂ！；−Ｔ　）は不安定であるのでＣＬ
／　５４５Ｍ離鹸化合物な塩例えばナトリウム塩の形で
、好１しくは遊１１４ａＩｉｌＯモル当り約７０〜約二
〇モルのナトリウムな有する塩として、単一することが
好適である。

例弘 上述と同様にして製造された発酵液の濾過液を３θｊｍ
［ｏ、Ｄ、］のコラムに充填された３／ｌの樹脂（Ｄｏ
ｗｅｘ−／　ｘ　２　）　（塩化物型）へ通した。流出
液とそれに絖〈水洗水とは検出し得る暮のＣＬ１５４５
成分（機敏）を含有していなかった。ここに記載の全−
分について浩剤糸としてのθ／Ｈのリン酸基Ｉｌｋ働液
（Ｎａ”）−アセトニトリルＥｇｇ　：　／２）の使用
下ＫＨＰＬＣ法（彼紀鯵照）により監視した。ダウエク
ス−／（商標名）樹脂Ｙ／Ｈの塩化ナトリウム−メタノ
ール（／：／）混液で俗用処理し浴出液な２個の一、Ｐ
”’Ｉｔ−分及び６個の／Ｓｔ幽分の中に集めた。ＣＬ
　／１４５−＾、ＣＬ　１５４！ｆ−８，ＣＬ　／！ｉ
６に−Ｔの大部分及びＣＬ　／！；ｌｈｓｍ成分の逼加
童は纂ユ〜６１１目の浴出液中に？）在していた。これ
らの諸−分な合して２弘６１のア竜トンで希釈した。得
られた混合物な終夜５Ｃに保持した。澄明上澄液を取出
して／６１となるまで真空下に濃縮した。濃縮液な凍結
乾燥するとｇｏｏｔの固体な与えた。この生成物（７ｔ
ＩＯ？）を一様にして得られた生成物の５！；２１に対
して加え、この合併固体を２０１の水にとかした。舟ら
れた溶液（ｐＨム０）な／Ｓｔ：ｍ　［Ｏ，Ｄ、　）の
コラムに充填されたｇｏｔのＨＰ−２０樹脂上でクロマ
トグラフ処理した。１−ＩＰ−２０樹脂のコラムを／　
７！ｔの水で浴出処理してＣＬ　／！ｆＡｊ−Ｔの大部
分と極性をもつ少量のＣＬ　／！４！；成分（複数）の
全部とな分離した。

ＣＬ　／ｉｔ、Ｓ−＾成分の大部分な１ｏｏｔのメタノ
ール−水ｔｉｓ：ｔｔｓ＞混液で浴出した；ＣＬ／＆Ａ
＆−８及び残りの量のＣＬ　１３４ｇ−＾なｇ３１のメ
タノール−水（１０：！；０）混液で浴出した。ＣＬ　
／！４！−＾に富む溶出液を合併しａｍし凍結乾燥する
とｌコ３ｆの固体な与えたがこれＦｉＨＰＬｃ分析によ
ると約１ｔｏｔのＣＬ／ｊ＆＆−＾を含むものである。

この生成物のうちの７５ｆをコｔの−ｉｇのθθｊＭリ
ン＃塩緩慟液にとかし／　！ｔｅｘｔ　［０，Ｄ、　）
のコラム中ＫｐＢムｇのａｏｓＭリン酸塩緩衝液（Ｎａ
）Ｙ充填されたＳコｔ（２３Ｋｇ）の７リカ１’ル［／
　００　μｍ　ＣＩＢ　ｒｅｖｅｒｓｅ　ｐｈａｓｅ　
ｓｉｌｉｃａｇｅＮ＾ｎａｌｙｔｌｃｈｅｍ　Ｉｎｔｅ
ｒｎａｔｌｏｎａｌ、　Ｉｎｃ、、　ＨａｒｂｏｒＣｌ
ｔｙ、　Ｃａｔ　１ｆｏｒｎｌａ）　）上でのりｏ’ｖ
トゲラフ処理によりｌＪ！に純化した。増加量（＠θ〜
ムＳ慢）のアセトニトリルな含有する６０５ＭりンｆＭ
塙緩憤液ケ用いて上記のコラムを展開処理した。早期の
一分（（＆数〕は王としてＣＬ　ｌ！ｉ６ｇ−Ｔな含有
し、そして極性をもつ少普の追加分のｃＬｉｓｂｓ成分
（複数）を含有していた。ＣＬ　／！；ｌ、！−＾成分
の大−分は彼の画分中ｔｌｃｆｍ出された。ＣＬｉ５ｂ
ｓ−＾含有−分（複数）のみがＵＶ−吸収成分であって
、これな集めて真空下にコＯｔとなるｌでｌ１ＩＩ縮し
た。この濃縮物をＳＣに終夜保存し、沈殿する無機塩を
Ｐ去した０次に２ざｔのＨＰ−コ０輿脂ゲ有する７５国
［，０，Ｄ、　］のコラム上にＰ漁を負号した。水（４
６ｔ）で側腹な洗ってからダ２ｔのメタノール−水Ｃ！
；０：ｊ５−０）混液でＣＬ　／３４．！；−＾を浴出
した。ＣＬ　／！；ｌ、！−＾の大部分な色有する浴出
液（複数）な合しく２６ｊｌ、＃ｍＬで凍結乾燥すると
酸量の無機不純物を含有する３ダｔのＣＬ　／３４！；
−＾を与えた。

メタノール中に上記生成物（蒼Ｏ〜１０θｑ／１］を俗
かし、不＃ｉ物質を戸去し、Ｐ液がＸ使丁に濃縮された
ものであるのでこのＰ液に対しひんばんニ水す加えてこ
のＦ＃ｌｋ：水浴液とすることＫより上記の無機不純物
を除去し得る。得られた水性濃縮物をＨＰ−２０樹脂上
でクロマトグラフ処理す７：ｒことＫＬす１１１１８的
ＫＣＬ　／！６！’−Ａを純化する。

追加量のＣＬ　／！ｌ、！ｒ成分（複数）の単離ＣＬ　
１５４５含壱発＃液から得られた濃縮液なシ１７　ｔｙ
　’ｙ’ル（商標名Ｃ１ｇ−シリカｒル）又は日ｐ−２
０樹脂上で注意深くクロマトグラフ処理することにより
ＣＬ　／！ｒＡｓ’−＾以外のＣＬｉ５ｂｓ成分（複数
）を含む緒画分が得られる。

かようＫして６種以上の化合物がＨＰＬＣＫより検出さ
れるがこれらは類似の紫外ｌ１ｌＩ＆収スペクトルを有
することにもとづ＠ＣＬ　／！４！ｆ−＾関遅物質であ
る。これら諸成分のうちの２種即ちＣＬ／、！ｔＡ、！
ｔ−８及びＣＬ　１３６！−Ｔを本質的に純な化合物と
して単離した。　ＣＬ　／ｌ、！ｆ［）ｉｔ成分＾、Ｂ
及び■はアセトニトリルな各種の割合で含むａｏｓＭ〜
ａｉｏＭリン酸塩緩衝液を流速ｌ５１７分において使用
するシリカグルコラム［μ８ｏｎｄａｐａｋ　　ＣＩＢ
−ｓｌｌｌｃａ　ｇｅｌ　　ｃｏｌｕｍｎ　　（Ｊ９ｗ
ａａ１、　Ｄ、　ｘ　３０ｔｗｒ　ｌ’）　　上の１−
ＩＰＬＣにより容易に区別され２Ｓダｎｍでの紫外吸収
により検出される。上記のＨ’Ｐ　Ｌ　Ｃ線条件を用い
るＣＬ　／！ｂ！ｆ−＾、Ｂ及びＴの代表的保持時間（
分）は下表の通りである。

注：★θＱ　３　Ｍ　ｐｎ　’Ｚダリン鈑塩緩衝液−ア
竜トニトリル（ざ７：／３）混液 圓矢θ０５Ｍｐｎ２亭リン＃塩緩伽液−アセトニトリル
（７ｇ二二コ）混液 使用溶媒が−ムｔのθ／Ｍリン酸塩緩衝液−アセトニト
リＡ；ｔｒｇ　：　／、２）混液であること以外は土窯
におけると同様の方法で粗発酵液について試験すること
ができる。この場合に流速ユ１／分においてＣＬ　／１
４！−Ｔ％ＣＬ　／、Ｓ−４５−＾及びＣＬｌｓ＆！；
−８の保持時間は夫々的２７、ＳＯ及び〉７２分である
。

ＨＰ−一〇樹脂から、及び逆相シリカゲル（ｒｅｖｅｒ
ｓｅ　ｐｈａｓｅ　５ｌｌｌｃａ　ｇａｌｌからのｍ出
速度はＣＬ　／！；ｉｎ！；−＾よりもＣＬ　ｌ！ｆ４
！ｆ−Ｔの方が早い。ＨＰ−二〇樹脂使用の例ダ記載の
Ｃ１Ｂ−シリカゲルコラムの初期の一分からそれな単離
し得る。

１Ｐ−コＯ樹脂から及び逆相シリカゲルからの摺出速度
はＣＬ　／！ｒｌ、！！−＾よりもｃＬ　／！ｒｂ３−
６の方が遅い。ＣＬ　ｌ！１．３−１３は例ダ記載の粗
ダウエクス−／による生成物のＨＰ−一〇クロマトグラ
フィの際に！；ＯＳメタノールの使用で浴出される。こ
の成分は既述のＣＬ　／ｋｌ、！ｆ−＾純化操作と本質
的に同じ操作を使用してＨＰ−二〇上の再クロマトグラ
フィ及びそれに続＜’ＩＯｉｉｍＣ□８−シリカｒル上
のクロマトグラフィにより最も都合良く単離され得る。

ＣＬ　／、ｌｉ’Ａ３−＾ナトリウム塩の緒性１Ｎ：メ
タノール中の紫外吸収スペクトル（第１図１照）／ λｍａｘ　２１．ｇ　ｎｍ　（ａ　１　＝　ｇ（Ｂ　ｌ
　２！９及び２７ｇ　ｎｍ　Ｋ屈折点ありにＢｒ中の赤
外吸収スペクトル（第２図参照）王吸収位：３ダ０θ、
／７／θ、１ｂ３ｏ、ｉダ２０．７３ｇ７、／２１．θ
、／／！！；１１０９０．１ｏｔｏ、９７！；、ｑ２０
、ｇ２θ、及び７７！；ｔｙｍ”旋光度 〔α〕２３＋２ｇ２°　（θ／　Ｍ　ｐｇ　７リン酸塩
緩衝液中１０修）７Ｃ本分析 計算値：　（Ｃ１ｇ　Ｈ２７，７ｏ１０”ａｌ、３ｐと
して）ＩＩ’ｉｇｔｉ　　　ｓｇｂ　　　ムコク　　ム
ダ９央験櫨：　　ｔｉｇ、ｏｉ　　ｓｇｇ　　＆Ｏ５ム
３質量スペクトル（ｖｉａ　ｆａｓｔ　ａｔｏｍ　ｂｏ
ｍｂａｒｄｍｅｎｔ）計算値：［Ｃ１ｇ　Ｈ２５Ｎａ２
０ｇＰ＋Ｈ］十としてｍ／ｚ　１７７！ｒ［Ｃ１９Ｈ２
６Ｎａ　ＯｇＰ＋Ｈ］＋としで　ｍ／ｚ　’Ｉ！；３夾
験値：　ｍ／ｚ　ｌＩ７？、ｑｓ３ ３ｂＯＨＨｚノロトン磁気共鳴スペクトル（Ｄ２０中）
（第３図に照） 主信号： （ｓ−単線、ｄ−二亀一、を−三重線、ｍ−多１［１ｉ
：１．９ｓ　（ＪＨ）、　ｉｓざｔ　（／Ｈ）、　／、
７０ｍ　（／Ｈ１゜ユ１Ｉ９−．：ＬＳｇｍ　ｉＨ）、
　＜Ａｌ１−１４／ざｍ　（、？Ｈ）、４ｆＡｔ（／Ｈ
）、Ｓ０９ｍ（／Ｈ）、！；、５３ｔ（／Ｈ）、！；、
９−４．ＯｍｃダＨ１，ム／弘ｔ（／Ｈ１，ム３２ｔ（
／Ｈ）、ムｓｓｔ＜ｉＨ）。

＆’７５ｄｄ　（／Ｈ）、及び２０９ｍ（／Ｈ）ｐｐｍ
ダウンフィルド（ＤＳＳにもとづ＜　）　Ｃｐａｒｔｓ
　ｐｅｒ　ｍ１ｌｌｌｏｎ　ｄｏｗｎ　−ず１ｅｌｄ　
　ｆｒｏｍ　　ｓｏｄｌｕｍ　　２．２−ｄｌｍｅｔｈ
ｙｌ−２−ｓｌｌａｐｅｎｔａｎｅ−３−ｓｕｌｆｏｎ
ａｔｅ（ＤＳＳ）］／３Ｃ−核磁気共鳴スベクトル（Ｄ
２０中）（第ｑ図皺照）主信号： ２　　／ダ９Ｊ　　　　　　／３　　７９．０３　　７
３ｇ、／　　　　　　／ｌＩ’７よ６１１　　　／３よ
０　　　　　／Ｓ　　６弘ダ、Ｓ−／３’Ａダ　　　　
　　　　　　　／６　　　６ユク１、　　　／、３ｉ３
　　　　　　／’／　　　３９．ダ’７　　　　／２７
（１１ｇ　　　　コデクｇ　　　　　／２ムク　　　　
　　　　　　　／９　　　　２３．！；９　　　　／２
’１．９　　　　　　ｐｌ）ｍダウンフィルド（ＴＭＳ
にもとづ３　／　Ｐ−［４気共鳴スペクトル（Ｄ２０中
）は二重姻［ａ　ｄｏｕｂｌｅｔ　（Ｊ＝／（７Ｈｚｌ
　ａｔ　０５０ｔ１．ｐｐｍ　ｄｏｗｎｆｌｅｌｄｆｒ
ｏｍ　ｇ３ｆｋ　ｐｈＯ５ｐｈｏｒｌｃ　ａｃｌｄ）を
表わす。

鍋圧液体りロマトグツフィ コラム：　　　μＢＯｎｄａｐａｋ　ＣＩＢンリカｒル
（３，９５ｍ１．Ｄ。

ｘ３０ａｓｓ） 俗ｇ　　　：　　　ａｏθ５１０）ｔｌ’Ｚ３リン緻ナ
トリタナトリウム緩衝液ニトリル（ｑＯ：　１０） 流速　：　２ｖ／分 検出　：　　Ｊ陣ｎｍにおける紫外吸収保持時間：２１
ｇ分 抗Ｉ！ｌ活性　・ ／−当りｓｏｏμｆのＣＬ　／！Ｉｔ、Ｓ−＾な含む水
浴液な浸ませた円形ｐ紙（直径／ニア■）な下記の微生
物が接鴇されている寒天層上に置いた。

終夜２ｇＵｔ／Ｃ恒温保持した彼に下記の阻止円が観察
された。

ｔｓａｃｃｎａｒｏｍｙｃＯｌｏｅｓ　　ｌＵＧＷ１ｇ
ｌｌＪしｌユｌＯ白血病細胞に対する（：Ｌ／！ｆｂ！
ｆ−＾のインビトロでの活性 ｌ　Ｄ　３０−００７１　ｓｆ／ｍｌ マウスのＰ、３１ｇリンパ球性白血病に対するＣＬ　／
Ｓｔ、！−＾のインビｌでの抗ｍｓ活性 Ｊ、／−５７ｔｐａｒｔＪ）、　／ソ’１２　］記載の
方法に従ったＣＬ／！ｒＡｊ−Ｔナトリウム塩の諸性寅
メタノール中の紫外吸収スペクトル ｗ＋／図に示されるものとほとんど岡じであるが／ 但しλｍａｘ２Ａざｎｍ　（ａ、−り７ＩＩ）　２１．
０及び２７１ｎｍ’４ｃ屈折点あり ＫＢｒ中の赤外吸収スペクトル 王吸収位：３弘ｏｏ、／７／３．／４３θ、／３１θ、
ｌコロθ、１０？θ、９７０、ｇａｏ及び７７０ｔｓ’
ｇｉＩ量スペクトル（ｖｌａ　ｆａｓｔ　ａｔｏｍ　ｂ
ｏｍｂａｒｄｍｅｎｔ）計算ｆｌ　：　〔Ｃ１ｇ　Ｈ２
４５Ｎａ２０１０Ｐ＋Ｈ３＋としてｍ／ｚｌ１９／実験
値：　ｍ／ｚ　４Ｉ９／ ３６０ＭＨｚノロトン磁気共鳴スイクトル（Ｄ２０中１
ＣＬ　　／ｉＡ！ｆ−Ｔの　Ｈ−ＮＭＲスペクトルはＣ
Ｌ　／Ｓ；ｌ、！；−ＴのＩ　ＨＮ　Ｍ　Ｒｘ　’クト
“と著しく類似するけれども但し前者のスペクトルにお
いては病３弘ｐｐｒｎにおいて二１１複数）が一つの二
重線として表われる特性的な７個のプロトン信号な示し
、２２〜３２００ｍダウンフィルド（ＤＳＳにもとづ＜
）［おいて例らの信号をも示さない。

ＣＬ／３４ｇ−Ｔナトリウム塩の主信号：（Ｓ−率巌、
ｄ−二重−１をｍ＝重線、ｍ−多重４１）ｉ、３０ｓ（
３Ｈ１，ｉ！ｒ！；−１４ダｍ（／Ｈ）、１７３ｔ　（
／Ｈ）ｑ、１３−１Ａ−〇ｍ（／Ｈ）、４Ｉｓ／Ａｄ（
−Ｈ）、４４，１ｄｄ（）Ｈ）。

弘９弘ｔ（））ｌ）、　！ｆ、０？ｄｄ　（／）（）、
、！；、！！Ｆｔ　（／１−１３゜５ｇ？−ムＯＡｍ（
３Ｈ）、＆／！、ｍ（コＨ）、＆ＪＡｔ（／Ｈ）ム！；
ｂｔ（／Ｈ）、ム７ｂＣＪｃＪ　（／Ｈ）、　２／ダｄ
ｄ　Ｌ／Ｈ）ｐｐｍ　　ダウンフィルド（ＤＳＳＫもと
づく）ｑａ弘Ｍ＋ｚ／ｊＣ−核磁気共鳴スペクトル（Ｄ
ａＯ中）：最大値番号　化学７７−　飯大値番号　化学
シフ−／　　　　　　　２４Ａ１０　　　　　　／／　
　　　　　／２ム？／ユ　　　　参１６０　　　／コ　
　　／コ２／１３　　　　　　１Ａｆ　　　　　　／Ｊ
　　　　　　／ＡＫ’／９ダ　　　　６ダ９０　　　　
／ダ　　　　／３３．、ｕ５　　　６ムｔｔ　　　　　
ｉｓ　　　　ｉ３ムｇ７６７＆コｔ　　　　Ｈ，ｉ３’
ｉコ３ ７　　　　　　り父ｇ／　　　　　　／７　　　　　　
／ダニ、２７Ｋ　　　　　ｇ’Ａ３３　　　１ｇ　　　
　　／弘か弓９　　　　　／２１ＡＩＩＯ／９　　　　
　／１，９１，１゜１０　　　　　／コム２ノ 注：餐ｐｐｍ　　ダウンフィルド（ＶＭＳ、にもとづく
）マウスのＰ３ｇｇリンパ球性白血病に対するＣし１５
６に−Ｎのインビがでの抗腫瘍活性メタノール中の紫外
吸収スベク）ｋ ・ｌ λｍａｘ　２１，７　ｎｍ　Ｃａ、−ＫＯ！；）！、！
；９及び２７７ｎｍに屈折点あり Ｋｓｒ中の赤外吸収スペクトル 王吸収位：／７２θ、１ｂｉｉｏ、１３ｇ５．ｉ２ｏθ
、１０４０、　ｑ７０、及び１２０国−１３ｂ　ＯＭＬ
（Ｚ７’ロトン磁気共鳴スペクトル（Ｄ２０中）主信号
： （Ｓ−単一、ｄ−二本線、を−二重線、ｍ−多重線）ｌ
３コｓ　（ＪＨ）、１ｓｔｔ　（／１．Ｉｔコｔ　（／
Ｈ）。

１７’ｌｃｊ　（３Ｈ）、！１．５−−二４ｔｍ　（コ
Ｈ）、　ｌＡ／３ｔ（／Ｈ）、’Ａｇ？ｔ　（／Ｈ）、
、ｔ／θｍ（／Ｈ）、ｊ：ｅ９ｔ（／Ｈ）、　、Ｓ：ざ
３−ムコ／ｍ　（ＡＨ）、ｌ−！ｆＯ−１−６ダｍＬ２
Ｈ１，’２０６−２／３ｍ　（／Ｈ）ｐｐｍダウンフィ
ルド（ＤＳＳＫもとづく） ｑＧｉｌｌ　ＭＨｚ　／ＪＣ−核磁気共鳴スペク）ル（
ＤｇＯ中）最大値番号　化学７７トゝ　最大値Ｉｎ　　
化学シフト”／　　　　　　２（２７０／／　　　　／
２７２１７２　　　　２５、θ６　　　　ｌコ　　　／
コｑ、ｌＩ’７３　　　　　　３７９１　　　　　　／
、３　　　　　／コπｔＯダ　　　　　　ダｌざ、！ｌ
−／４’　　　　　／、３久６６Ｓ　　　　　６ムざｊ
　　　　　／！　　　　／３よりｑｂ　　　　　　７’
ｌｔ７　　　　　＃　　　　／、３ムロ７り　　　　　
　　　　　　ｇ【ス１７　　　　　　　　　　／’Ｉ　
　　　　　　　　ｌｌｌ０．ｌＩＬｇ　　　　　　１１
Ｍ　　　　　／ｌ　　　　／、！−二０７９　　　　　
　／コ２．ｔ）　　　　　　／？　　　　　　／７０．
！ｌ。

／θ　　　　　／コ＠ダＳ 注−１’ｆｐｐｍダウンフィルド（ＴＭＳＫもとづく）
マウスのＰ３ｇｇリンノや球性白血病に対するＣＬ／３
４！；−８のインビ♂での抗腫瘍活性抗生物質ＣＬ　１
５Ａｊ−＾及びその同輌物質は七の抗微生物活性及び抗
腫瘍活性にもとづき各種ｆｆａｉｕ例えばナトリウム、
カリウム、カルシウム又はマグネンウム塩及び類似物又
はその他の塩例えばアンモニウム塩或は適宜の有機アミ
ンから形成される塩のいかなるものケも含有する製薬学
的組成物の形で使用され得る。ｕｉ製楽学的組成物は製
薬学上軒容用能な共存担体と共に使用される。この組成
物は他の活性抗彼生物剤及び（又は〕抗抗腫瘍剤も含有
し得る。Ｄａ成物は所用の投与れ路に適するいかなる製
薬学的形状に作られてもよい。

かような組成物の例Ｆｉ経口投与のための固体組成物例
えば錠剤、カプセル、ビル、粉剤及び顆粒剤、及び局所
的投与又は経口投与の丸めの液状組成物例えば重液、懸
濁液、シロップ及びエリキシル並びに非経口投与のため
の製品例えば滅−＃液、懸濁液或は乳濁液を包含する。

抗微生物剤としての使用のために対象の特定微生物に対
する最少成育阻止濃度よりも高い活性成分濃度となるよ
うに該組成物を投与する。

下記の蹟例は疾患％Ｋ１１ｌｉ生物による疾患の治療の
ための一樵又＃ｉ複数権の製品即ちＣＬ　／ｊＳ−１，
！ｉミニ−、ＣＬ　１３４！−１３及びＣＬ／３４！−
Ｔを含有する好適な製薬学的組成物の例示である。

例＾ 非経口用として各アングル中に７！；ｑ（ＤＣ，Ｌｉ５
ｌａｓ−＾ナトリウム＃ｉな含む滅菌され凍結乾燥され
た製品Ｖ該化合物（注射用蒸留水中）から製造した。

例８ ＣＬ　　／１Ａｊ−＾ナトリウム塙　　７Ｓ岬アスコル
ビン醗ナトリウム　　　　３３ｑ上記成分な滅薗壜に入
れる。常法により上記混合物な生理＊塩水に溶かすこと
Ｋより注射港な製造する。必要に応じ緩衝剤を添加し得
る。

例Ｃ ＣＬ　／Ｓｔ、！；−＾ナトリウム塩ＣＩ０Ｃｌ０Ｏ０
とアスコルビン酸ナトリウム＜ｔｉｔｉｏ’ａｔ）とな
１ＯＯ−の水ＫＭかす。滅菌−過器を通過させてこの浴
液なテし、予め滅菌した壜の中へこの＃液を無−的に充
たして凍結乾燥する。予め滅−した蓋でこの壜なチッ素
気中で密封しＳＣ又はそれ以下の温度で貯蔵する。

ＣＬ　／！１４Ｎ−＾の代りにＣＬ　１５Ａ！−８及び
ＣＬ　１５Ａ！−Ｔな使用し例＾、８及’ｕ　ｃの記載
とｌＷＩ様にして他の好適処方な配合し得る。哺乳動物
のための抗腫瘍剤としての使用の目的でＣし１ｓｂｓ−
＾、ＣＬ　／＆Ａ３−８及びＣＬ　１５Ａｊ−■の夫々
について示唆される用量は静脈注射／日／ｌ！！１当り
ｌ平方メートルにつきｌθ〜ｌＯθキである。

【図面の簡単な説明】

添付図面の第２図はＣＬ　／ｌ、！−＾ナトリウム塩の
メタノール中での紫外吸収スペクトルを表わし；第２図
はＣＬ　／！４！−＾ナトリウム塩のＫＢｒ中での赤外
吸収スペクトルナ表わし：＠３図はＣＬ　／！；４！；
−＾ナトリウム塩のＤｇＯ中での３　ｂ　ＯＭＨｚ　　
プロトン磁気共鳴スペクトルな表わし；そしてｔ４を図
はＣＬ　／ｊＡ＆−＾ナトリウム塩のＤ２０　中での／
３Ｃ−核磁気共鳴スペクトルな表わす。 ＦＩＧ、　１ し 第１頁の続き 優先権主張　＠１９８２年１１月８日■米国（ＵＳ）■
４３９９７３ ＠１９８２年１２月２日■米国（ＵＳ）■４４７５４４ ０発　明　者　ジョセフイノ・ビー・ツナツクアメリカ
合衆国ミシガン州４８０９ ６トロイ・フエアモント４６３７ ０発　　明　者　ティモジ−・アール・ハーリイアメリ
カ合衆国ミシガン州４８１０ ５アン・アーバー・グリーンプ ライアー・ドライヴ３７３５アパー トメント２２０−ビー ０発　明　者　リチャード・エイチ・バギーアメリカ合
衆国ミシガン州４８１０ ５アン・アーバー・トラヴアー ・ロード２５２０

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （１）記号ＣＬ／１４３−＾、ＣＬ／ｊ６５−８及びＣ
   Ｌ／Ｓｔ、！；−Ｔで示され、夫々下式／、２８及び２
   わ ＯＯ ＼ ０３Ｈ２ ／、ＣＬ　　ｌ！５６ｇ−＾ ２　ａ　、　Ｒ１−Ｒ２−Ｈ：　ＣＬ　／　！；　Ａ　
   ！；　Ｂ２ｂ、Ｒ１−Ｒ２−ＯＨ；ＣＬ　／！；ｂ！ｒ
   −Ｔな南し、ＣＬ／！；ｂ！；−＾ナトリウム場は（ａ
   ）（−のメタノール中の紫外吸収スペクトルが／ λｍａｘ　２１ｓｔ　ｎｍ　（ａ−ｇθＳ）を示しコ５
   ９及び／ ＝７ｇｎｍに屈折点があり； （１））　　にＢｒ中の赤外吸収スペクトルの王吸収位
   は３ダθ０、／７１０、／６３０、ｌダコ０、／３ざ７
   、／λ６０、／／！；！；、　１０ｑｏ、１０６０．９
   ７５％９１０、ｇ２０、及び１ ７７５鐸　　であり； （ｃ）　　＊光度〔α〕Ｄ十−ざコ０（θ／Ｍｐｉｉ７
   　　リン酸塙緩＃液中ｌθ囁）な示し； （（ｊ）１１ｍスペクトル（ｖｌａ　ｆａｓｔ　ａｔｏ
   ｍｂｏｍｂａｒｄｍ＠ｎｔ）　ｔｄ　ＩＩ　７５及びダ
   Ｓ３にｍ／　ｚ最大値を南し； （θ）　３６０ＭＨｚ　７°ｏトン磁気共鳴スペクトル
   （Ｄ２０中）の主信号（Ｓ−準線、ｄ−二重線、ｔ　＝
   ＝ｉｍ、ｍ−多重線）は１２９ｓ（３Ｈ。 １！；Ｉｔ　（／Ｈ）、１７０ｍ（／Ｈ）、Ｑ’１９−
   Ｑ！；ｇｍＬ２Ｈ）、　４１．／３−４Ａ／ｇｍ　（３
   ＨＪ、　ｌＡｇ１．ｔ　（／Ｈ１゜ふ０９ｍ　（／Ｈ）
   、　！；、３．３ｔ　（／ＨＪ、′より−ＡＯｍ　（＋
   ｌ−１］　。 Ａ、ｌｔ　（／Ｈ）、ｌｈ３コｔ　（／Ｈ）、　１ｉｓ
   −ｔ　（／Ｈ）。 Ａ７５ｄｄ　（／Ｈ）、及び７．０９ｍ　（／Ｈ）　ｌ
   ）ｌ）ｍダウンフィルド（ＤＳＳＫもとづく）であり；
   （ｔ）ｉａｃ−核ｍ　気共鳴ｘ　＜　７　）　ル（Ｄ　
   ２０中）の主信号は ／ＡＸダ　　　　　り９Ｓ ／ｌＩ父ｇ　　　　　７９．０ ／３ｇ、／　　　　　’７よ６ １３ぷ０　　　６／Ａ亭 ／３１Ａｔｌ　　　　　ｌ、ニア １３７３　　　　３デ亭 ／コ２ダ　　　　　コデク ／コム７　　　　　　コ、ｚｔ　　ｐｐｍダウンフィル
   ド八１へ　　　　（テトラメチルシランに／コ＆ｔ　　
   　　　もとづく） ／コθ／ であることにより％黴づけられ； ＣＬ１５１５−Ｔナトリウム塩は （ａ）　　そのメタノール中の紫外吸収スペクトルが／ λｍａｘ　２６ざｎｍ（ａ　−７’ｌ）＆示し２６０及
   ／ び２７ｇｎｍＫ屈折点があり； （ｂ）　　ＫＳｒ中の赤外吸収スペクトルの主吸収位は
   ３ダ００．１７１５、／ｌ、、３０，１３ｇ０１／２６
   ０．１０９０％９７０．１３θ、及び１ ７７０３　　であり； （Ｃ）　　實ｔｉｔスペクトル（ｖｉａ　ｆａｓｔ　ａ
   ｔｏｍｂｏｍｂａｒｄｍｅｎｔ　）はりデ／Ｋｍ／ｚ＠
   大値を南し； （ｄ）　　ｊＡ（７ＭＨｚ　　グロトン出気共鳴スペク
   トル（Ｄ２０中）の主信号（Ｓ−単一、ｄ−二重線、ｔ
   −三ａｍ、ｍ−多Ｊｌ１ｍ）はｉ、３０ｓ　（ＪＨ）。 １ｒｓ−／、！、’１ｍ　（／Ｈ）、　１７．３ｔ　（
   ／）Ｉ）、　ＩＡ／３−（Ａ２０ｍ（／Ｈ）、４Ａ／Ａ
   ｃＪ（ＪＨ）、４Ｊ４’ｃｌｄ（／Ｈ）。 １Ｑｔ（／＋３．ｊ、θ９ｄｄ（／Ｈ）、、ｔ！、！−
   ｔ　（／Ｈ）。 ！；、Ｅ９−１．０１−ｍ　（３１−１）、　ｌ−／ｌ
   −ｍ　（ＪＨ）、　１−３１．ｔ（／Ｈ）、ムｓｂｔ＜
   ｉ日）、ム７Ａｄｄ　（／Ｈ１゜２／＋ｄｄ（／Ｈ）ｐ
   ｐｍ／ウンフイル）’（ＤＳＳＫ。 もとづく）であり； （ｅ）９θｌＩＭＨｚ／ＪＣ−核磁気共鳴スヘクトル（
   Ｄ２０中）は下ｆＲ： 最大値番号　化学シフト簀　　最大値番号　化学７フト
   ★／　　　　コ侶１０　　　　　　／／　　　　／２ム
   ｑ／２　　　　　’ｌｉｔ、０　　　　　　／コ　　　
   ７１２１ｇ３　　　　１、’Ａ１．ｇ　　　　　　／３
   　　　　／コ＆？？ダ　　　　ｌ、’Ａ９０　　　　　
   　／ダ　　　／、３３３４！；　　　　　６＆６７　　
   　　　　／ｊ　　　　１３４ｇ７６　　　７＆コざ　　
   　　　／６　　　へｎユ３７　　　　７！ｇ／　　　　
   　　　　／り　　　　／ダニ、、２７Ｋ　　　　　ｇ’
   Ａ３３　　　　　　／ｌ　　　　／ＩＩ９．弘６？／ａ
   弱４１０　　　　　　１９　　　　／４９Ａ＆１０　　
   　／２ム一７ 黄 注ｐｐｍダウンフィルド（ＶＭＳＫもとづく）の儲な示
   すことにより特徴づけられ； ＣＬ／ｊ４．Ｓ”−８ナトリウム塩は （ａ）　　そのメタノール中の紫外吸収スペクトルがび
   ２７７ｎｍＫ屈折点があり； （ｂ）　　ＫＢｒ中の赤外吸収スペクトルの主吸収位は
   ／７２０、／６ダ０．７３ざｉ　／−〇〇、１０６０．
   ９７０、及びざユｏ　ｃｌｌｌｌであり；（ｃ）　　３
   ｂＯＨＨｚグロトン磁気共鳴スペクトル（Ｄ２０中）の
   主信号（Ｓ−単線、ｄ−二重線、を−三ｍｍ、ｍ＝多重
   １ａ）Ｆｉ１３コＳ　（，７ｌ−１）。 １！；ｇｔ　（／）−１）、　１７コｔ　（／Ｈ）、ｉ
   り？ｄ（３）１）。 、２．＋、Ｓ−−二６ｇｍ（−Ｈ）、４４７ｊｔ　（／
   ）−１）、４ｇ？１（／Ｈ）、　３．１０ｍ　（／Ｈ）
   、　５１Ｉ？ｔ　（／Ｈ）、　！；、ｇ３−１２／ｍ　
   （ＡＨｌ、　ｌ−！；０−ムロ１１ｍ（ＪＨ）、’２０
   ６−７／３ｍ（／Ｈ）ｐｐｍダウンフィルｌ’　（ＤＳ
   ＳＫもとづく）であり； （ｄ）　　９０．ｌＩＭＨｚ　　／ＪＣ−核磁気共鳴ス
   ペクトル（Ｄ２０中）は下表： 最大値番号　化学シフト１　最大値番号　化学シフ−／
   　　　　　２ａ７θ　　　　１０　　　　／ムダＳ２　
   　　　　　コふ０１．　　　　　　　／／　　　　　　
   ／＝７．２ダ３　　　　　　．３１９／　　　　　　　
   ／ユ　　　　　／２９．ダ７ＩＩ　　　　　　’／−１
   ｇ、５−　　　　　　／、３　　　　　　／、２γｑ０
   Ｓ　　　　　　　６ムｇ！；　　　　　　　／’Ｉ　　
   　　　　／３ダ６６１、　　　　　　７７、ｇ７　　　
   　　　１５　　　　　／、１１７　　　　　　ＫＯ，ｇ
   ’／　　　　　／Ａ　　　　／３１．．６７ｇ　　　　
   　　ｇ７１，４ｔ　　　　　／７　　　　／’ＩＱ’ｌ
   コ９　　　　／２詳／　　　　７ｇ　　　／″ユθ／／
   ９　　　　　／７０．！；ｌ。 ｅＥ矢ｐｐｍダウンフィルド（ＴＭＳにもとづく）のイ
   １な示すことにより特徴づけられるリン含有抗生物質及
   び製薬掌上許容可能のそれらの塩＊。 ＠　抗生物質がＣＬ／ｊ＆！−＾である特許請求の範囲
   ＃！／項に記載の抗生物質。 ■　抗生物質がＣＬ／ｊ’Ａ３−８である特許請求の範
   囲＠／ｊＪｃ記載の抗生物質。 佼）　抗生物質がｃＬ１１＆！ｒ−Ｔである特許請求の
   範囲第１ＪＪｉＫ記載の抗生物質。 （５３ＣＬ／！ｆ４５複合物を産生するストレプトミセ
   ス縞の寄託番号＾ＴＣＣ３／デ０６で示される菌株をＣ
   ＬＩ！；４！；化合物又は化合物類のｌｌ！質當が得ら
   れるまで適宜の培地中和培養し該化合物類の一極又は複
   数ｓ１な遊離酸又は塩の形で単離することな特徴とする
   特許請求の範囲第１項に記載の少くと４−ｍのＣ，Ｌ／
   ！ｆｉｚ！；化合物の製造方法。 （６）％許晴求の範囲第１項に記載のｃＬｉｓｂｓ−＾
   、ＣＬ１５４！−８及びＣＬ／１４＆−Ｔ並びにそれら
   の製薬学的受答可能塩のうちの少くとも一極と製楽字的
   受容可能担体とを含有することな％似とする製薬学的組
   成物。 （７）抗生物質がＣＬ／ｊＡ５−＾す）　ＩＪウム塩で
   ある特許請求の範囲第１ＪＪＫ記畝の抗生物質。 鎖　抗生物質がｃＬ／３４＆−８ナトリウム塩である特
   許請求の範囲第１ＪＪＫ記畝の抗生物質。 （９）抗生物質がＣＬ１５Ａ＆−Ｔナトリウム塩である
   特許請求の範囲第１項に記載の抗生物質。