JPS58173553A - 血漿浄化装置 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、血漿中に溶解している自己抗体、免疫複合体
等の悪性物質の吸着浄化装置に関する。

近年、癌、免疫増殖性症候群、慢性関節リウマチ、全身
性エリテマトーデス、重症筋無力症等の自己免疫疾患、
アレルギーおよび臓器移殖時の拒絶反応等の生体免疫機
能に関係し九疾患の原因および進行と血漿中の自己抗体
、免疫複合体が深く関係していることが明らかになって
きた。

本発明者らは、上記悪性物質の高活性で吸着選択性が高
く、かつ体液浄化治療に安全に使用できる吸着材につい
て鋭意研究した１ｉ１５ＪＪ１良好な吸着材を見い出し
、先に特許出願した（特願昭５６−７１５２、同５６−
７６７７６％同５６−１１２９１９、同５６−１８．９
２３、同５６−１５９４４４）。

すなわち、これら扛不溶性担体に低分子量リガンドを結
合している吸着材であり、自己抗体、免疫複合体を高率
に吸着し、吸着選択性が高く、高圧蒸気滅菌等の滅菌操
作も容易であシ、安全〃・つ実用的な免疫吸着治療を可
能ならしめるものである。

本発明者らは、上記吸着材における血漿の浄化装置につ
いて鋭意研究した結果、本発明に到達した、 すなわち１本発明は、不溶性担体に低分子量リガンドが
結合している吸着材を充填してなる吸着カラムを用いて
血漿を浄化する血漿浄化装置において、浄化すべき血漿
をカラム内滞留時間が少なくとも２分になるような流速
で通液する手段を設けたことを％徴とする血漿浄化装置
である。

従来、血漿浄化用吸着材として、活性炭、スチレン系レ
ジンが知られているが、これらはいずれも、尿酸、タレ
アチニン、胆汁酸等の血漿中の分子量１０００以下の低
分子量の物質を主な対象としているため、該物質の拡散
速度が速く、血漿の通液方法、条件は問題にならなかっ
た。しかし、本発明の対象とするような自己抗体、免疫
複合体は１分子量が１６万から数百万の高分子量物質で
あるため拡散速度が遅いこと、本吸着材は低分子リガン
ドと悪性物質のアフイニテイを利用しているため、その
相互作用力が比較的弱いこと等より、血漿のような高粘
度液での吸着方法、条件については全く未知の領域であ
った。

本発明者らは、不溶性担体に低分子量りガントが結合し
ている吸着材をカラムに充填し、慢性関節リウマチ患者
血漿を各種流速で通液し、血漿中のリウマチ因子吸着能
を評価したところ、驚くべ嘩 きことには、血漿のカラム内滞留時ｉ５は少なくとも２
分必要であること、より好ましくは５分必要でりること
を見い出した。

本発明において、滞留時間とは、高速液体クロマトグラ
フィで用いられるボイドボユームを通液速度で除した値
で定義される量である。

さらにカラムの形状（Ｌ／ｆ）　）を糧々変更し、評価
したところ、Ｌ／Ｄに関係なく一義的に滞留時間に規定
されることが明らかになった（　Ｌ／Ｄ０，５〜８）。

これは本吸着材による血漿中、高分子量タンノシクの吸
着においては、血漿の線速より吸着材全体と血漿の接触
時間が重要であるものと考えられ、高分子量悪性物質の
拡散速度が主に作用しているものと理解される、 また、ｇ＆層材のカラムへの充填率を変更し、吸着活性
点数を増やしても大きな変化は見られなかった、 本発明において用いる担体としては、親水性担体が血漿
成分の非特異吸着を最低限におさえ、好ましく用いられ
る。担体の形状は、血漿の通液低抗面よシ、球状５粒状
が用いられる。担体の材質は通常アフイニテイクロマト
クラフィで用いられるデキストラン、アガロース等の公
知の担体を特に駆足なく用いることができるが％特に架
橋ポリビニルアルコールが有効に利用できる（特願昭５
６−１１０８１７、同５６−１１２９１９）。

本発明の低分子量リガンドは、先の特許出願に記載した
ように、分子量１万以下の有機低分子化合物であシ、ア
ばノ酸、ペプチド、核酸塩基、ヌクレオシド、ヌクレオ
チド％糖、オリゴ糖、ＩＩｊＡリン酸等を例示すること
ができる。

本発明の吸着材の粒子径は、２５μｍから２５００μｍ
のものを用いることができ、好ましくは５０μｍから１
５００μｍである。

本発明の浄化装置を体外循環治療に用いる場合には、採
取した血液を連続遠心分離器または膜型面漿分離器を用
いて、血球成分と血漿成分を分離し、血漿を本＠着カラ
ムに滞留する時間が少なくとも２分となるように流速を
制御されたポンプで通液し、栴度浄化血漿と血球成分を
合流させ、返送することで実施できる。また遠心器を用
いる間欠的血漿浄化にも適用できる。

本発明は、血漿だけでなく、血液についてもヘマトクリ
ット値よシ血叛滞留時間に換算し適用できるものである
。

不発ｆＩＡは、低分子量リガンドを保持している吸着材
管体外循環治療に適用する際に必須の血漿浄化装置を規
定するものであり、これにより吸着材の吸着能力を最大
限有効に活用させ得るものである。

図面扛本発明の血漿浄化装置の例を説明するだめのもの
である。図において崩液祉ポンプＰ、によって血漿分離
器１に導入され、ここで血球成分と血漿成分に分けられ
る。血球成分はライン２に。

血漿成分はライン５にそれぞれ流出され、血漿成分はポ
ンプＰ、を通り血漿浄化用のカラム４に流入する。浄化
された血漿は、ライン５を通シ血球成分と合流する。６
はポンプＰ２の回転数を調整するための調整器であり、
これによシカラム４内の本葉滞留時間を調整することが
できる、この例では、ポンプＰ、と調整器６が血漿のカ
ラム内滞留時間を所定の値になるような血漿流速で通液
する手段を構成している。

以下、実施例により実施の態様を説明する。

実施例１ 酢酸ビニル１００２％　トリアリルイソシアヌレート６
４，３ｆ（Ｘ＝０，４０）、酢酸エチル１００？、ヘプ
タン１００ｔ、ポリ酢酸ビニル（重合度５００　）　７
．５　ｆおよび２．７−アゾピスイソプチロニトリル３
．８ｔよシなるＭ−ａ合液と、ポリビニルアルコール１
重量％、リン酸二水素す）　１７ウムニ水和物０．０５
重量慢およびリン酸水素二ナトリウム十二水利＄１．５
重量嘔を溶解した水４００ｍとをフラスコに入れ、十分
攪拌したのちる５Ｃで１８時間。

さらに７５［で５時間加熱攪拌して懸濁重合をおこない
、粒状共重合体を得た。濾過水洗、ついでアセトン抽出
後、カセイソーダ４６．５　ｆおよびメタノール２ｔよ
りなる溶液中で４０υで１８時間共重合体のエステル交
換反応ｔおこなった。

得られたゲルの平均粒径１ｊ１５，０μｍ、単位重量あ
たシのビニルアルコール単位（ｑＯＨ）は９．Ｏｍｅｑ
／ｒ。

比表面積は６０　ｍ”／７．デキストランによる排除限
界分子量は６Ｘ１０’でおった、 次に、得られたゲル　１０ｆ（乾燥重量）をジメチルス
ルホキシド１２−中に懸濁し、これにエピクロルヒドリ
ン７Ｂ、Ｓａｄ、５０％水酸化ナトリウム１０−を加え
、３０Ｃで５時間攪拌しながら活性化反応を行なった。

反応後ジメチルスルホキシドで洗浄し、水洗し、吸引脱
水した。次に、この活性化ゲルをトリプトファン１，６
３ｆを含む０．１Ｍ炭酸ナトリウムバッファー（ｐＨ９
，８）　１６０−中に懸濁した。５０Ｃで１４時間、攪
拌しながら固定化反応を行ない、その後、６Ｑ、６ｆｗ
ｔのトリス（ヒドロキシエチル）アミノメタン溶液５５
−を加え、さらに５０［，５時間、攪拌しながらブロッ
キング反応（残存活性基をブロックする）を行った。こ
の後、充分水洗して血漿浄化治療用吸着材を得た。この
吸着材に固定されたトリプトファンの量は４００μｍａ
ｔ／ｌ　（乾燥重量）であった。

この吸着材を内径１０關、長さ５０Ｉｕのカラムに充填
し、Ｓ７Ｃに保温し九ムＣＤ加リチウム患者血漿を６程
の流速で１２−流した。

カラ・ム通過前後のリチウム因子（感作血球凝集反応Ｒ
ＡＨＡテスト　富士臓器製）および免疫複合体（Ｃ１ｑ
結合法）を測定した。結果を表１に示した。

比較例１ 滞留時間１分で行った他は、実施例１と同じである。結
果を表１に示した。

表　　１ 実施例２ 実施例１と同様にして得喪活性化ゲル（架橋度Ｘ　＝　
０．４　）に、リガンドとしてフェニルア〉ニンを実施
例１と同様に固定化して血漿浄化治療用吸着材を得た。

吸着材に固定化されたフェニルアラニンは５００μｍｏ
ｔ／ｆ（乾燥重量）であった。

この吸着材を実施例１と同様にリフマチ患者血漿の吸着
テストを行なった。カラ五通過前後のリウマチ因子、免
疫複合体を測定した。結果を表２に示した。

表　　２ 比較例２ 清音時間１分で行う九他は、実施例２と同じである。結
果を表２に示した。

【図面の簡単な説明】

図面は本発明の血漿浄化装置の説明図である。 １・・・・・・血漿分離器　２，３・・・・・・ライン
４・・・・・・力２ム　５・・・・・・ライン　６・・
・・・・調整器ｐ、、ｐ、・・・・・・ポンプ

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 不溶性担体に低分子量リガンドが結合している吸着材を
   充填してなる吸着カラムを用いて血漿を浄化する装置に
   おいて、浄化すべき血漿をカラム内清貿時間が少なくと
   も２分になるよう麦流速で通液する手段を設は友ことを
   特徴とする血漿浄化装置。