JPS58172550A - カルシトニンの定量法 - Google Patents
カルシトニンの定量法Info
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- JPS58172550A JPS58172550A JP5588682A JP5588682A JPS58172550A JP S58172550 A JPS58172550 A JP S58172550A JP 5588682 A JP5588682 A JP 5588682A JP 5588682 A JP5588682 A JP 5588682A JP S58172550 A JPS58172550 A JP S58172550A
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- Japan
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- column
- enzyme
- liquid
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-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/74—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving hormones or other non-cytokine intercellular protein regulatory factors such as growth factors, including receptors to hormones and growth factors
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明はカルシトニンの定量法に関する。
更に詳しくは検体カルシトニンと酵素標識カルシトニン
をカルシトニン抗体に競争的に免疫反応を行なわせ、形
成された酵素標識カルシトニン−カルシトニン抗体複合
体を第２抗体不溶化担体（第２抗体；抗イムノグロブリ
ン抗体）を充填したカラムに流し、免疫反応を行なわせ
てカラム内に結合させ、カラム内に保持された酵素の活
性を、カラム内にて酵素反応を行なわせて測定すること
により、検体中のカルシトニンの量を求めることを特徴
とするカルシトニン定量法に関する。
をカルシトニン抗体に競争的に免疫反応を行なわせ、形
成された酵素標識カルシトニン−カルシトニン抗体複合
体を第２抗体不溶化担体（第２抗体；抗イムノグロブリ
ン抗体）を充填したカラムに流し、免疫反応を行なわせ
てカラム内に結合させ、カラム内に保持された酵素の活
性を、カラム内にて酵素反応を行なわせて測定すること
により、検体中のカルシトニンの量を求めることを特徴
とするカルシトニン定量法に関する。
カルシトニンは血液中のカルシウム濃度を低下させる分
子量約８，５００の髪１ペプタイドホルモンであり、咄
乳動物では甲状腺がら魚類、鳥類両生類では虫志後腺が
ら分泌される。
子量約８，５００の髪１ペプタイドホルモンであり、咄
乳動物では甲状腺がら魚類、鳥類両生類では虫志後腺が
ら分泌される。
カルシトニンの血中濃度は甲状腺髄様癌、慢性腎不全な
どの疾患の患者において上昇することが報告されており
、カルシトニンを正確に感度良く、また簡単に測定する
ことは臨床に応用する参巷極めて有用である。
どの疾患の患者において上昇することが報告されており
、カルシトニンを正確に感度良く、また簡単に測定する
ことは臨床に応用する参巷極めて有用である。
ｆｌｕｄｒｒ＋ｕｎｄｓｓｏ＋＋ ’Ｉ’、Ｖ、らＣａ
１ｃｉｔｏｎｉｎ １９５９、Ｐｒｏｃ、ｏｒ Ｔｈｅ
８ｅｃｏｎｄ ＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌＳｙ
ｍｐｏｓｉｕｍ、Ｈｅ１ｎｅＩＴ１ａｎ Ｍｅｔｌｉ
ｃａｌ ＢｏｏｋｓＬＴＩＪ。、 Ｌｏｎｄｏｎ、
１０２頁（１９７０年）。
１ｃｉｔｏｎｉｎ １９５９、Ｐｒｏｃ、ｏｒ Ｔｈｅ
８ｅｃｏｎｄ ＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌＳｙ
ｍｐｏｓｉｕｍ、Ｈｅ１ｎｅＩＴ１ａｎ Ｍｅｔｌｉ
ｃａｌ ＢｏｏｋｓＬＴＩＪ。、 Ｌｏｎｄｏｎ、
１０２頁（１９７０年）。
冨田明夫ら、ホルモンと臨床、２９巻、１０９頁（１９
８１年）。
８１年）。
ところがカルシトニンの定量法としては従来ラットを用
いた生物検定法が行なわれており、このような定量法は
感度や精度が悪く一般に血中濃度の測定は困難であった
。一方近年、免疫測定法の分野では、ラジオアイソトー
プを標識化合物として用いるラジオイムノアッセイ法（
以ＦＲＩＡ法と称する）が開発され生体体液中に低濃度
で存在する種々の生体成分を正確に測定することが可能
となった。
いた生物検定法が行なわれており、このような定量法は
感度や精度が悪く一般に血中濃度の測定は困難であった
。一方近年、免疫測定法の分野では、ラジオアイソトー
プを標識化合物として用いるラジオイムノアッセイ法（
以ＦＲＩＡ法と称する）が開発され生体体液中に低濃度
で存在する種々の生体成分を正確に測定することが可能
となった。
しかしながら、ＲＩＡ法においては標識化合物としてラ
ジオアイソトープを用いるため実施するに当っては特殊
な設備と技術者を必要とし、また測定廃梁物の処理にお
いても厳重な注意を要するという欠点がある。本発明者
らは以上の現状を考慮し、鋭意検討した結果、酵素を標
識化合物として用いる酵素免疫測定法を用いるこ・どｉ
とより簡単な操作でカルシトニンを高感度に定量できる
ことを見い出したものである。
ジオアイソトープを用いるため実施するに当っては特殊
な設備と技術者を必要とし、また測定廃梁物の処理にお
いても厳重な注意を要するという欠点がある。本発明者
らは以上の現状を考慮し、鋭意検討した結果、酵素を標
識化合物として用いる酵素免疫測定法を用いるこ・どｉ
とより簡単な操作でカルシトニンを高感度に定量できる
ことを見い出したものである。
即ち本発明の方法においては酵素標識カルシトニン、カ
ルシトニン抗体、第２抗体不溶化担体を使用し、検体カ
ルシトニンと酵素標識力ルシトニノをカルシトニン抗体
と競争的に免疫反応を行なわせ、これを第２抗体不溶化
担体を充填したカラムに流し、酵素標識カルシトニン−
カルシトニン抗体複合体を第２抗体と免疫反応を行なわ
せることにまりカラムに結合させ遊離のカルシトニンを
洗い流した後で、カラム内に保持された酵素の活性をカ
ラム内にて酵素反応を行なうことにより＼測定し、カラ
ム内に保持された酵素量より検体中のカルシトニン罐を
定量するものである。
ルシトニン抗体、第２抗体不溶化担体を使用し、検体カ
ルシトニンと酵素標識力ルシトニノをカルシトニン抗体
と競争的に免疫反応を行なわせ、これを第２抗体不溶化
担体を充填したカラムに流し、酵素標識カルシトニン−
カルシトニン抗体複合体を第２抗体と免疫反応を行なわ
せることにまりカラムに結合させ遊離のカルシトニンを
洗い流した後で、カラム内に保持された酵素の活性をカ
ラム内にて酵素反応を行なうことにより＼測定し、カラ
ム内に保持された酵素量より検体中のカルシトニン罐を
定量するものである。
酵素の活性は酵素反応停止液で酵素反応生成物をカラム
より流出させその量を定量することにより測定する。
より流出させその量を定量することにより測定する。
第２抗体を不溶化する担体としては微粒状あるいは繊維
状であることが好ましく、各種の合成あるいは天然のポ
リマー、不溶性多糖ｇｒｔと、例えばアガロースケル、
テキストランゲル、セ蔦ロース繊維、アクリルアミドケ
ル、ポリスチレノヒーズ、ガラスピーズなどを用いるこ
とができる。
状であることが好ましく、各種の合成あるいは天然のポ
リマー、不溶性多糖ｇｒｔと、例えばアガロースケル、
テキストランゲル、セ蔦ロース繊維、アクリルアミドケ
ル、ポリスチレノヒーズ、ガラスピーズなどを用いるこ
とができる。
固相と抗体との結合は物理的吸着を利用するか、固相を
種々の方法で活性化して、共有結合によって結合させる
。担体の活性化方法としては、例えば担体が不溶性多糖
類である場合には、臭化シアン、エビクロルヒドリノ過
ヨウ素酸ソー久１，１′−カルボニルジイミダゾール等
の活性化試薬を用いる方法がある。ま丁コ担体と第２抗
体との共有結合を開裂可能な結合、例えばＳ−８結合に
すれば、使用後に第２抗体を切り離し、再度担体を使う
こともできる。更に抗体と担体との間に適当なスペー姿
瑠導入してもよい。不溶化する第２抗体の量は第２抗体
の純度にもよるが、通常担体Ｉ Ｗ／当り ０．１〜１
０ｑが好ましい。使用するカラムは操作性等を考えると
０１〜１． Ｏｙｌｔのものが好ましい。
種々の方法で活性化して、共有結合によって結合させる
。担体の活性化方法としては、例えば担体が不溶性多糖
類である場合には、臭化シアン、エビクロルヒドリノ過
ヨウ素酸ソー久１，１′−カルボニルジイミダゾール等
の活性化試薬を用いる方法がある。ま丁コ担体と第２抗
体との共有結合を開裂可能な結合、例えばＳ−８結合に
すれば、使用後に第２抗体を切り離し、再度担体を使う
こともできる。更に抗体と担体との間に適当なスペー姿
瑠導入してもよい。不溶化する第２抗体の量は第２抗体
の純度にもよるが、通常担体Ｉ Ｗ／当り ０．１〜１
０ｑが好ましい。使用するカラムは操作性等を考えると
０１〜１． Ｏｙｌｔのものが好ましい。
酵素とカルシトニンの結合には種々の２官能性試薬を用
いることができる。例えばグルタルアルテヒド、カルボ
ジイミド、ｍ−マレイミドベンゾイル−Ｎ−ハイドロキ
シサクシニミドエステル等が用いられる。
いることができる。例えばグルタルアルテヒド、カルボ
ジイミド、ｍ−マレイミドベンゾイル−Ｎ−ハイドロキ
シサクシニミドエステル等が用いられる。
カルシトニン抗体としてはカルシトニンが動物によって
その構造が異ｒｔ リ免疫学的性質が異なるので、測定
しようとするカルシトニン仁ギ、ヤギ、モルモットなど
で作成した抗体を用いることは当然である。また抗体（
カルシトニン抗体または第２抗体）としてイムノグロブ
リンＧ（ＩｇＵ） そのものを用いてもよいが、抗原
結合部位のみを分離したもの 例えばＦａｂ’、Ｆ（ａ
ｈ’）２、などを用いてもよい。第２抗体は通常イムノ
グロブリンＧを異種動物に免疫して作成するが、第２抗
体の代わりにイムノグロブリン結合物質、例えば ５ｔ
ａｐｈｙｌｏｃｏｃｕｓ ａｕｒｅｕｓの生産するプロ
ティンＡを用いてもよいっ 測定系において、試料が、生体体液である場合は、生体
体液成分の干渉作用により測定精度の低下が認められる
ことがある。この干渉作用は抗体を Ｆ ａｂ’または
Ｆ（ａｂ’）ｚの状態にして使用することにより抑制
することができるが、更に疎水性蛋白質と塩類を反応液
に添加することにより抑制または除去することができる
。疎水性蛋白質としてはゼラチン等、塩類としては食塩
等が用いられる。
その構造が異ｒｔ リ免疫学的性質が異なるので、測定
しようとするカルシトニン仁ギ、ヤギ、モルモットなど
で作成した抗体を用いることは当然である。また抗体（
カルシトニン抗体または第２抗体）としてイムノグロブ
リンＧ（ＩｇＵ） そのものを用いてもよいが、抗原
結合部位のみを分離したもの 例えばＦａｂ’、Ｆ（ａ
ｈ’）２、などを用いてもよい。第２抗体は通常イムノ
グロブリンＧを異種動物に免疫して作成するが、第２抗
体の代わりにイムノグロブリン結合物質、例えば ５ｔ
ａｐｈｙｌｏｃｏｃｕｓ ａｕｒｅｕｓの生産するプロ
ティンＡを用いてもよいっ 測定系において、試料が、生体体液である場合は、生体
体液成分の干渉作用により測定精度の低下が認められる
ことがある。この干渉作用は抗体を Ｆ ａｂ’または
Ｆ（ａｂ’）ｚの状態にして使用することにより抑制
することができるが、更に疎水性蛋白質と塩類を反応液
に添加することにより抑制または除去することができる
。疎水性蛋白質としてはゼラチン等、塩類としては食塩
等が用いられる。
以上の如く本発明によればカルシトニン敏を簡単にしか
も感度良く定量することができる。
も感度良く定量することができる。
（以下余白）
・′：：１・１
次に実施例において詳細に説明する。
実施例１
ブタカルシトニンの定量
（１） ブタカルシトニン
ブタカルシトニンはブタ甲状腺より、
Ｈ，Ｂｒｙａｎ Ｂｒｅｗｅｒ らの方法（Ｔｈｅ
Ｊｏａｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ２
４ａ巻、２１号、５７３９頁、１９６８年）に従って、
脱脂しｔこ甲状腺ｉ抽出してセファデックスＧ−５０、
セファデックスＧ−２５、カルボキシメチルセルロース
、を用いて精製した。
Ｊｏａｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ２
４ａ巻、２１号、５７３９頁、１９６８年）に従って、
脱脂しｔこ甲状腺ｉ抽出してセファデックスＧ−５０、
セファデックスＧ−２５、カルボキシメチルセルロース
、を用いて精製した。
！
Ｗ、ｃｏｌｉのβ−ガラクトシターゼのチオール４ｆ４
− （マレイミドメチル）シクロヘキサン−１−カルボ
ン酸のＮ−ヒドロキシサクシニミドエステルを用いて結
合させて調製した。
− （マレイミドメチル）シクロヘキサン−１−カルボ
ン酸のＮ−ヒドロキシサクシニミドエステルを用いて結
合させて調製した。
（３） カルシトニン抗体の調製
抗カルシトニン血清は（１）で調製したカルシトニー
ン０．５ ｍｆ／をＦｒ洗ｄｓ ｃｏｍｐｌｅｔｅａｊ
＋ｒｖａｎ ｔ と混合して、ウサギに１週問おきに
１０回免疫して採血した血清を用いた抗体は加藤らの方
法（Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｒＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ
、 ８１４．１５５７頁、１９７７年）に従ってＩｇＧ
フラクションを集めカルシトニン抗体を調製した。
ン０．５ ｍｆ／をＦｒ洗ｄｓ ｃｏｍｐｌｅｔｅａｊ
＋ｒｖａｎ ｔ と混合して、ウサギに１週問おきに
１０回免疫して採血した血清を用いた抗体は加藤らの方
法（Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｒＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ
、 ８１４．１５５７頁、１９７７年）に従ってＩｇＧ
フラクションを集めカルシトニン抗体を調製した。
（４）第２抗体不溶化担体の調製
抗つサキ１ｇＧ血清（ヤギ）は医学生物研究所（名古屋
）より購入したものを用いた遇脣体は（３）と同様の方
法で調製しｔコ。
）より購入したものを用いた遇脣体は（３）と同様の方
法で調製しｔコ。
第２抗体（抗つサギＩｐＧ抗体）４００ｑを０．５ Ｍ
Ｎａｅｌを含む０．１Ｍ炭酸緩衝液（ｐＨ８，８）
１５０Ｗ！ｌに溶かし、ＣＮＢｒ活性化セファロース
１０ｆを加えて、４’ｃ１１１反応させて第２抗体不溶
化担体を調製した（５）測定法 ブタカルシトニン標準液（カルントニ ７０〜１５０ＭＲＣミリ単位／ｍｌ ） ０．１ ｖｔ
ｔにカルシトニン抗体希釈液を１ ＃Ｉｌ加え、この液
にβ−カラクトシターセ標識カルントニノ０．１ ｔｅ
ｌを加えて、３７°Ｃで１時間反応させた。次に第２抗
体不溶化担体を０．１ ｍｌ詰めたカラムに上記反応液
１肩ｔを流した。次にカラムをｍ＃ａＦＧ （０，５％
セラチノ、０３Ｍ Ｎａ自、１ ｍ Ｍ Ｍ９Ｃｌ ２
回％Ｎａｆ’ｂ 、０．１％牛血盾アルブミンを含むｐ
Ｈ７の１０ｍＭリン酸カリウム緩衝液八ｖへｔで２回洗
った後をカラムに流し、８７°Ｃで１時間反応後カラム
に０．０８Ｍ炭酸ナトリウム０．５ ｍｌを２をイ々多
ｔこ。
Ｎａｅｌを含む０．１Ｍ炭酸緩衝液（ｐＨ８，８）
１５０Ｗ！ｌに溶かし、ＣＮＢｒ活性化セファロース
１０ｆを加えて、４’ｃ１１１反応させて第２抗体不溶
化担体を調製した（５）測定法 ブタカルシトニン標準液（カルントニ ７０〜１５０ＭＲＣミリ単位／ｍｌ ） ０．１ ｖｔ
ｔにカルシトニン抗体希釈液を１ ＃Ｉｌ加え、この液
にβ−カラクトシターセ標識カルントニノ０．１ ｔｅ
ｌを加えて、３７°Ｃで１時間反応させた。次に第２抗
体不溶化担体を０．１ ｍｌ詰めたカラムに上記反応液
１肩ｔを流した。次にカラムをｍ＃ａＦＧ （０，５％
セラチノ、０３Ｍ Ｎａ自、１ ｍ Ｍ Ｍ９Ｃｌ ２
回％Ｎａｆ’ｂ 、０．１％牛血盾アルブミンを含むｐ
Ｈ７の１０ｍＭリン酸カリウム緩衝液八ｖへｔで２回洗
った後をカラムに流し、８７°Ｃで１時間反応後カラム
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ｔこ。
ブタカルシトニンのＩＭＲＣ単位は１）ｉＶｉｓｉｏ＋
＋ ｏｒ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ５ｔａｎｄａｒ
ｄ、Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎ５ｔｉｔｕｔｅ ’ｆｏ
ｒ Ｍｅｄｉｃａｌ ＲｅｓｅａｒｃｈＬｏｎ＋ｉｏｎ
から供給されるＣａ１ｃｉｔｏｎｉｎ ）ｔｅｓｅａｒ
ｃｈ Ｓもａｎｄａｒｄ Ａ ４０１１ｉ’ ニ相当す
るカルシトニン量である。
＋ ｏｒ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ５ｔａｎｄａｒ
ｄ、Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎ５ｔｉｔｕｔｅ ’ｆｏ
ｒ Ｍｅｄｉｃａｌ ＲｅｓｅａｒｃｈＬｏｎ＋ｉｏｎ
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ｃｈ Ｓもａｎｄａｒｄ Ａ ４０１１ｉ’ ニ相当す
るカルシトニン量である。
実施例２
生物学的測定法との比較
カルシタール注射用（山之内製薬株式会社）を標準品と
してブタカルシトニンを含む検体について、折茂らの方
法（ホルモンと臨床、２１巻、１２１７頁、１９７８年
）に従ってラットの血中カルシウム低下能より生物学的
濃度を求めた。
してブタカルシトニンを含む検体について、折茂らの方
法（ホルモンと臨床、２１巻、１２１７頁、１９７８年
）に従ってラットの血中カルシウム低下能より生物学的
濃度を求めた。
それと同時に実施例１と同じ方法でブタカルシトニンを
定量したところ第１表の結果を得た。相関式 ｙ＝１．
１７χ−６８０、相関係数は０９９１となり２つの方法
の値はきわめてよく一致する。
定量したところ第１表の結果を得た。相関式 ｙ＝１．
１７χ−６８０、相関係数は０９９１となり２つの方法
の値はきわめてよく一致する。
（以下余白）
−１６１０ＭＲＣｊり単位は体重１５０ｆの雄ラットに
２４時闇絶食後、検体を静脈内に注射し、１時間後に血
清カルシウムを約１０％低下させる量 実施例３ ヒトカルシトニンの定量 ヒトカルシトニンは市販の合成カルシトニン抗体いた。
２４時闇絶食後、検体を静脈内に注射し、１時間後に血
清カルシウムを約１０％低下させる量 実施例３ ヒトカルシトニンの定量 ヒトカルシトニンは市販の合成カルシトニン抗体いた。
酵素標識カルシトニン、カルシトニン抗体、第２抗体不
溶化担体は実施例１覧 の方法に従って調補した。ヒトカルシトニン標準液（カ
ルシトニン ０〜７０Ｍ）ｔｃｊり単位／ｍｌ）を用い
て、実施例１の方法に従ってヒトカルシトニンについて
定量を行った。本測定法によって得られた標準液の検量
線を図−２に示す。ブタカルシトニンよりも感度良く測
定でめた。変動係数は５％以下であった。
溶化担体は実施例１覧 の方法に従って調補した。ヒトカルシトニン標準液（カ
ルシトニン ０〜７０Ｍ）ｔｃｊり単位／ｍｌ）を用い
て、実施例１の方法に従ってヒトカルシトニンについて
定量を行った。本測定法によって得られた標準液の検量
線を図−２に示す。ブタカルシトニンよりも感度良く測
定でめた。変動係数は５％以下であった。
実施例４
ヒトカルシトニンの定量の場合の血清干渉について
実施例３と同様にして血清中のヒトカルシトニンの定量
を行った。反応に用いる緩衝液として緩衝液Ｇと緩衝液
Ａ （０，ＩＭ ＮａＣ１，１ｍＭ Ｍｆ／ ＣＩ ｚ
、０１％ＮａＮ２．０１％牛血清アルブミンを含む ｐ
Ｈ７のｌＱｍＭリン酸ナトリウム緩尚液）を用いた所緩
憤液Ｇを用いた場合の回収率は９０〜１０５％、平均９
７．８％であった。
を行った。反応に用いる緩衝液として緩衝液Ｇと緩衝液
Ａ （０，ＩＭ ＮａＣ１，１ｍＭ Ｍｆ／ ＣＩ ｚ
、０１％ＮａＮ２．０１％牛血清アルブミンを含む ｐ
Ｈ７のｌＱｍＭリン酸ナトリウム緩尚液）を用いた所緩
憤液Ｇを用いた場合の回収率は９０〜１０５％、平均９
７．８％であった。
緩衝液Ａの場合は１１５〜１４０％、平均１２７％とな
った。即ち、反応にｄａ液にセラチンを加えＮａＣ１濃
度を上げたものを用いることによって測定精度が良くな
る。
った。即ち、反応にｄａ液にセラチンを加えＮａＣ１濃
度を上げたものを用いることによって測定精度が良くな
る。
実施例５
ブタカルシトニンの添加回収率
実椎例２においてブタカルシトニンをｆｆ１ｌｌ 定し
た検体にフタカルシトニン２０ＭＲＣευ単位／肩ｌ〜
１００ＭＲＣ；り単位／肩ｔを添加し、実施例１の方法
に準してブタカルシトニンを測定したところ、測定値は
計算値（構体のカルシトニン濃度十添加したカルシトニ
ノ濃度）の９４〜１０５％平均９７５％の頃をホした。
た検体にフタカルシトニン２０ＭＲＣευ単位／肩ｌ〜
１００ＭＲＣ；り単位／肩ｔを添加し、実施例１の方法
に準してブタカルシトニンを測定したところ、測定値は
計算値（構体のカルシトニン濃度十添加したカルシトニ
ノ濃度）の９４〜１０５％平均９７５％の頃をホした。
第１図は、ブタカルシトニンの検量線を示すものであり
、第２図はヒトカルシトニンの検量線を示すものである
。 特許出願人 天野製薬株式会社第１図 ５０ １００ １５０ ブタカルシトニン（ｍｕ ／ｄ） 第２図 ヒトカルントニ／（ｍｕ、ｚ＆／）
、第２図はヒトカルシトニンの検量線を示すものである
。 特許出願人 天野製薬株式会社第１図 ５０ １００ １５０ ブタカルシトニン（ｍｕ ／ｄ） 第２図 ヒトカルントニ／（ｍｕ、ｚ＆／）
Claims (1)
- 検体カルシトニンと酵素標識カルシトニンをカルシトニ
ン抗体に競争的に結合させた後形成された酵素標識カル
シトニン−カルシトニン抗体複合体を第２抗体不溶化担
体を充填したカラムに結合させ、カラム内に保持された
酵素の活性をカラム内にて酵素反応を行なうことにより
測定し、カラム内に保持された酵素砥より検体カルシト
ニンの量を求めることを特徴とするカルシトニンの定量
法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5588682A JPS58172550A (ja) | 1982-04-02 | 1982-04-02 | カルシトニンの定量法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5588682A JPS58172550A (ja) | 1982-04-02 | 1982-04-02 | カルシトニンの定量法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS58172550A true JPS58172550A (ja) | 1983-10-11 |
Family
ID=13011579
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP5588682A Pending JPS58172550A (ja) | 1982-04-02 | 1982-04-02 | カルシトニンの定量法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS58172550A (ja) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4937188A (en) * | 1986-04-15 | 1990-06-26 | Northeastern University | Enzyme activity amplification method for increasing assay sensitivity |
| US5190864A (en) * | 1986-04-15 | 1993-03-02 | Northeastern University | Enzyme amplification by using free enzyme to release enzyme from an immobilized enzyme material |
| CN104792997A (zh) * | 2014-01-22 | 2015-07-22 | 天津汇滨生物科技有限公司 | 一种人降钙素原免疫检测试剂盒及其制备方法与应用 |
| CN110441297A (zh) * | 2019-08-29 | 2019-11-12 | 济南大学 | 一种基于四苯乙烯纳米簇的电化学发光猝灭型传感器制备方法及应用 |
-
1982
- 1982-04-02 JP JP5588682A patent/JPS58172550A/ja active Pending
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4937188A (en) * | 1986-04-15 | 1990-06-26 | Northeastern University | Enzyme activity amplification method for increasing assay sensitivity |
| US5190864A (en) * | 1986-04-15 | 1993-03-02 | Northeastern University | Enzyme amplification by using free enzyme to release enzyme from an immobilized enzyme material |
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| CN110441297A (zh) * | 2019-08-29 | 2019-11-12 | 济南大学 | 一种基于四苯乙烯纳米簇的电化学发光猝灭型传感器制备方法及应用 |
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