JPS5816690A - セリンのラセミ化方法 - Google Patents
セリンのラセミ化方法Info
- Publication number
- JPS5816690A JPS5816690A JP11531781A JP11531781A JPS5816690A JP S5816690 A JPS5816690 A JP S5816690A JP 11531781 A JP11531781 A JP 11531781A JP 11531781 A JP11531781 A JP 11531781A JP S5816690 A JPS5816690 A JP S5816690A
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- JP
- Japan
- Prior art keywords
- serine
- culture
- aeromonas
- extract
- racemization
- Prior art date
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- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
更に詳しくは、アヱロモナス属に属する菌体を培養し、
その培養物またはその培養物から分離した培養菌体また
はその培養菌体からの抽出物の存在下にセリンをラセミ
化する方法に関する。
その培養物またはその培養物から分離した培養菌体また
はその培養菌体からの抽出物の存在下にセリンをラセミ
化する方法に関する。
セリンは輸液の一成分として医薬品に用いられまた食品
添加物としても使用されている。更に酵−Ｘ法によるＬ
−チロシン、Ｌ−システィン、Ｌ 一トリプトファン、
Ｌ−ドーパなどのアミノ酸の酵素的製造の原料にも成り
得る重要な物質である。
添加物としても使用されている。更に酵−Ｘ法によるＬ
−チロシン、Ｌ−システィン、Ｌ 一トリプトファン、
Ｌ−ドーパなどのアミノ酸の酵素的製造の原料にも成り
得る重要な物質である。
セリンはその分子中に不斉炭素１個を保有するアミノ酸
であり、立体構造の相ｙによりＬ型およびＤ型が存在す
る。蛋白質の分解および発酵法で得られるセリンは通常
Ｌ型であり、合成法で得られるセリンは通常ＤＬ型であ
る。
であり、立体構造の相ｙによりＬ型およびＤ型が存在す
る。蛋白質の分解および発酵法で得られるセリンは通常
Ｌ型であり、合成法で得られるセリンは通常ＤＬ型であ
る。
医薬および食品添加物として不用なセリンはＬ型であり
、Ｌ−システィン、Ｌ−チロシン、Ｌ −トリプトファ
ンおよびＬ−ドーノ゛等のアミノ酸の製造原料に用い得
るセリンは工、智である。一方、Ｄ−セリンは試薬以外
にはあまり多く利用されていない。
、Ｌ−システィン、Ｌ−チロシン、Ｌ −トリプトファ
ンおよびＬ−ドーノ゛等のアミノ酸の製造原料に用い得
るセリンは工、智である。一方、Ｄ−セリンは試薬以外
にはあまり多く利用されていない。
セリンのラセミ化は、例えば、あまり利用されていない
Ｄ−セリンをＤＬ−セリンに変換するのに必要である。
Ｄ−セリンをＤＬ−セリンに変換するのに必要である。
斯くして、ラセミ化と光学分割の繰返しによってＤ−セ
リンからＬ−セリンまたはＬ−セリンがらＤ−セリンに
変換し得る。
リンからＬ−セリンまたはＬ−セリンがらＤ−セリンに
変換し得る。
セリンのラセミ化の方法としては、セリンの水溶液を高
圧高温処理する方法が知られている。しかし、二の方法
は次のような欠点を有する。即ち（１）高圧高温処理操
作を必要とし、多量のエネルギ−も必要とする。（２）
他のアミノ酸が共存する場合そのアミノ酸をラセミ化す
る。例えば、Ｄ−セリンとＬ−チロシンが共存する場合
、Ｄ−セリンのみならず、Ｌ−チロシンをもラセミ化す
る。このことは、例えば、ＤＬ−セリンとフェノールか
ら酵素反応によってＬ−チロシンを得る場合、反応終了
後に未反応のＤ−セリンをラセミ化する場合１て不都合
である。（６）セリンと酵素が共存する場合その酵素も
失活させる。例えば、トリプトファン合成酵素の存在下
、インドールとＤＬ−セリンを反応させてＬ−１Ｊブ°
トフアンを製造する工程において、未反応のＤ−セリン
をこの方法でラセミ化処理すると、生成したＬ−）リプ
トファンをもラセミ化し、同時にトリプトファン合成酵
素も失活させる。
圧高温処理する方法が知られている。しかし、二の方法
は次のような欠点を有する。即ち（１）高圧高温処理操
作を必要とし、多量のエネルギ−も必要とする。（２）
他のアミノ酸が共存する場合そのアミノ酸をラセミ化す
る。例えば、Ｄ−セリンとＬ−チロシンが共存する場合
、Ｄ−セリンのみならず、Ｌ−チロシンをもラセミ化す
る。このことは、例えば、ＤＬ−セリンとフェノールか
ら酵素反応によってＬ−チロシンを得る場合、反応終了
後に未反応のＤ−セリンをラセミ化する場合１て不都合
である。（６）セリンと酵素が共存する場合その酵素も
失活させる。例えば、トリプトファン合成酵素の存在下
、インドールとＤＬ−セリンを反応させてＬ−１Ｊブ°
トフアンを製造する工程において、未反応のＤ−セリン
をこの方法でラセミ化処理すると、生成したＬ−）リプ
トファンをもラセミ化し、同時にトリプトファン合成酵
素も失活させる。
本発明者等は、前記の欠点のないラセミ化方法を種々検
討した結果、アエロモナス属に属するある菌株の培養物
またはその培養物から分離した培養菌体、またはその培
養菌体からの抽出物が、セリンのラセミ化反応を触媒す
ることを見出し、その発見に基づいて本発明を完成させ
た。
討した結果、アエロモナス属に属するある菌株の培養物
またはその培養物から分離した培養菌体、またはその培
養菌体からの抽出物が、セリンのラセミ化反応を触媒す
ることを見出し、その発見に基づいて本発明を完成させ
た。
本発明の方法では、アエロモナス属に属する菌株が用い
られるが、後述した実施例に使用した菌株は、本発明者
等が自然界より分離した菌株で、アエロモナス・プンク
タータ・サブスピーシス・キャビアエ（，４ｚａ−ｙ施
鳩ｉ５三ムｈＡｄ＋Ｉ戸ＯＬ匂ヱム一）ＭＴ−１ｏ２４
６（ｐＥＲＭＢＰ−２１）およびＭＴ−１０２４４（Ｅ
ＥＲＭ ＢＰ−２２）である。
られるが、後述した実施例に使用した菌株は、本発明者
等が自然界より分離した菌株で、アエロモナス・プンク
タータ・サブスピーシス・キャビアエ（，４ｚａ−ｙ施
鳩ｉ５三ムｈＡｄ＋Ｉ戸ＯＬ匂ヱム一）ＭＴ−１ｏ２４
６（ｐＥＲＭＢＰ−２１）およびＭＴ−１０２４４（Ｅ
ＥＲＭ ＢＰ−２２）である。
これ等の菌株の分類学的性質は次の通りであり両菌株の
性質は互に僅かに異なり、またアエロモナスΦプンクタ
ータ・サブスピーシス・キャビアエのタイプ菌株である
ＡＴＯＯ１５４６８とも僅かに異なるが、分類学的には
同一の分類群に属すると考えられる。次にこれ等の菌株
の分類学的性質を記す。
性質は互に僅かに異なり、またアエロモナスΦプンクタ
ータ・サブスピーシス・キャビアエのタイプ菌株である
ＡＴＯＯ１５４６８とも僅かに異なるが、分類学的には
同一の分類群に属すると考えられる。次にこれ等の菌株
の分類学的性質を記す。
形態学的性質：
ＭＴ−１０２４３およびＭＴ−１０２４４の両菌株とも
栄養寒天およびプレイン・ハート・インヒユージョン寒
天培地上で２４時間後の集落は平滑、金縁で不透明であ
る。羊血液寒天上では平滑、金縁で輝いており、増殖の
盛んなところでは灰色の色素が存在する。九および羊血
液寒天上で２４時間後にＭＴ−１０２４３で集落の廻り
に非常に弱い溶血現象がみられるが、ＭＴ−１０２４４
は溶血現象を示さない。両菌株とも強い運動性があり、
ダラム陰性で極性のまたは純極性の単鞭をも有する短桿
菌である。
栄養寒天およびプレイン・ハート・インヒユージョン寒
天培地上で２４時間後の集落は平滑、金縁で不透明であ
る。羊血液寒天上では平滑、金縁で輝いており、増殖の
盛んなところでは灰色の色素が存在する。九および羊血
液寒天上で２４時間後にＭＴ−１０２４３で集落の廻り
に非常に弱い溶血現象がみられるが、ＭＴ−１０２４４
は溶血現象を示さない。両菌株とも強い運動性があり、
ダラム陰性で極性のまたは純極性の単鞭をも有する短桿
菌である。
生化学的性質：
ＡＴＯＯＭＴ ＭＴ
１５４６８ １０２４３ １０２４４カ
タラーゼ ＋°＋＋ オキシダーゼ ＋ ＋ ＋酸化−発酵
培地 グルコースの酸化 ＋ 十 ＋グル
コースの発酵 ＋ ＋ ＋アルカリ
性グルコースー −−インドールの生成 十
＋ 十メチルレッド 室温 ＋
＋ ＋シラーゼ − −− ボキシラーゼ −−− 硫化水素（ＴＲＩ） −−− ウレアーゼ −−− グルコン酸の酸化 −−− ゼラチナーゼ ＋ 十 ＋硝
酸塩の還元 ＋ ＋ ＋ペクチ
ンの加水分 −−− 解 クエン酸の利用 −−− り一酒石酸の利用 −−− らのガス発生 − ダルシトールから −−− の酸生成 からのガス発生 −−− Ｄ−ンルビトール からの酸生成 −−− らの酸生成 −−− ０ＮＰＧの生成 ＋ ＋ ＋カ
ゼイン加水分解 ＋ ＋ ＋フオス
ファゑターゼ − ＋ ＋耐 １５％Ｎ−０−ｉｌ性 −−− 〇５％Ｎαび要求性 、−ｍ− 唯一の炭素源としての生育 （スタンニエルの培地） ＤＬ−アルギニン ＋ ＋ 十し
−ヒスチジン ＋ ＋ ＋Ｄ−グ
ルコース ＋ 十 ＋Ｄ−マン
ニトール ＋ ＋ ＋Ｌ−アラビノ
ース ＋ ＋ ＋対照 −−
− 以上の菌学的諸性状を、Ｂ６ルｇ＜７−ＩＭａｎｕａｌ
４愼ヒれ机す私九υるＢαＧムん＝ｄσ〃第８版（１
９７４）の分類基準から判断すれば、菌株ＭＴ−１０２
４３およびＭＴ−１Ｑ２４４はアエロモナス プンクタ
ータ サブスピーシス キャビアエ（Ａ休−電ｊ三工ψ
とＡｄと７ａ４ＱＪ＋４ｊ ＣＩＬＶｂＣＬ４−）に
属する。
タラーゼ ＋°＋＋ オキシダーゼ ＋ ＋ ＋酸化−発酵
培地 グルコースの酸化 ＋ 十 ＋グル
コースの発酵 ＋ ＋ ＋アルカリ
性グルコースー −−インドールの生成 十
＋ 十メチルレッド 室温 ＋
＋ ＋シラーゼ − −− ボキシラーゼ −−− 硫化水素（ＴＲＩ） −−− ウレアーゼ −−− グルコン酸の酸化 −−− ゼラチナーゼ ＋ 十 ＋硝
酸塩の還元 ＋ ＋ ＋ペクチ
ンの加水分 −−− 解 クエン酸の利用 −−− り一酒石酸の利用 −−− らのガス発生 − ダルシトールから −−− の酸生成 からのガス発生 −−− Ｄ−ンルビトール からの酸生成 −−− らの酸生成 −−− ０ＮＰＧの生成 ＋ ＋ ＋カ
ゼイン加水分解 ＋ ＋ ＋フオス
ファゑターゼ − ＋ ＋耐 １５％Ｎ−０−ｉｌ性 −−− 〇５％Ｎαび要求性 、−ｍ− 唯一の炭素源としての生育 （スタンニエルの培地） ＤＬ−アルギニン ＋ ＋ 十し
−ヒスチジン ＋ ＋ ＋Ｄ−グ
ルコース ＋ 十 ＋Ｄ−マン
ニトール ＋ ＋ ＋Ｌ−アラビノ
ース ＋ ＋ ＋対照 −−
− 以上の菌学的諸性状を、Ｂ６ルｇ＜７−ＩＭａｎｕａｌ
４愼ヒれ机す私九υるＢαＧムん＝ｄσ〃第８版（１
９７４）の分類基準から判断すれば、菌株ＭＴ−１０２
４３およびＭＴ−１Ｑ２４４はアエロモナス プンクタ
ータ サブスピーシス キャビアエ（Ａ休−電ｊ三工ψ
とＡｄと７ａ４ＱＪ＋４ｊ ＣＩＬＶｂＣＬ４−）に
属する。
本発明に使用するアエロモナス属の菌株は通性嫌気性菌
であるが、通常、嫌気的により好気的条件下で培養した
方が増殖が順調に進行する。培養温度は２０〜４０°Ｃ
である。培養中の培地のｐＨは中性または微アルカリ性
に維持することが望ましい。培養期間は、通常１〜５日
間である。
であるが、通常、嫌気的により好気的条件下で培養した
方が増殖が順調に進行する。培養温度は２０〜４０°Ｃ
である。培養中の培地のｐＨは中性または微アルカリ性
に維持することが望ましい。培養期間は、通常１〜５日
間である。
培地に使用する炭素源および窒素源は、使用菌の利用可
能なものならば何れの種類を用いてもよい。即ち、炭素
源としては、グルコース、グリセロール、フラクトース
、シュクロース、Ｉｌｌ加水分解液、糖蜜などの種々の
炭水化物が使用出来る。
能なものならば何れの種類を用いてもよい。即ち、炭素
源としては、グルコース、グリセロール、フラクトース
、シュクロース、Ｉｌｌ加水分解液、糖蜜などの種々の
炭水化物が使用出来る。
窒素源としては、アン七ニア、塩化アンモニウム、硫酸
アンモニウム、炭酸アンモニウム、酢酸アンモニウムな
どの各種の無機および有機アンモニウム塩類、または肉
エキス、酵母エキス、コーンースチープ・リカー、カゼ
イン加水分解物、フイシュミールあるいはその消化物、
脱脂大豆粕あるいはその消化物などの天然窒素源が使用
可能である。
アンモニウム、炭酸アンモニウム、酢酸アンモニウムな
どの各種の無機および有機アンモニウム塩類、または肉
エキス、酵母エキス、コーンースチープ・リカー、カゼ
イン加水分解物、フイシュミールあるいはその消化物、
脱脂大豆粕あるいはその消化物などの天然窒素源が使用
可能である。
天然窒素源の多くの場合は、窒素源であるとともに炭素
源にもなり得る。更に無機物として燐酸第一水素カリウ
ム、燐酸第二水素カリウム、塩化カリウム、塩化ナトリ
ウム、硫酸マグネシウム、硫酸第一鉄なども必咳に応じ
て使用する。
源にもなり得る。更に無機物として燐酸第一水素カリウ
ム、燐酸第二水素カリウム、塩化カリウム、塩化ナトリ
ウム、硫酸マグネシウム、硫酸第一鉄なども必咳に応じ
て使用する。
本発明に使用する酵素源としては、セリンをラセミ化す
る能力を有するアエロモナス属の菌株の培養物そのまま
、または培養液から遠心分離などの方法により採取した
生菌体、その乾燥菌体あるいは菌体を磨砕、自己消化、
音波処理などの処理により得られた菌体処理物、更には
これらの菌体よりの抽出物並びに該抽出物より得られる
酵素の組成物が利用可能である。勿論、これらの固定化
酵素または固定化菌体でもよい。
る能力を有するアエロモナス属の菌株の培養物そのまま
、または培養液から遠心分離などの方法により採取した
生菌体、その乾燥菌体あるいは菌体を磨砕、自己消化、
音波処理などの処理により得られた菌体処理物、更には
これらの菌体よりの抽出物並びに該抽出物より得られる
酵素の組成物が利用可能である。勿論、これらの固定化
酵素または固定化菌体でもよい。
セリンのラセミ化反応は、水溶液中で行われるが、セリ
ンの濃度には特に制限はない。反応温度は２０〜５０°
０、反応液のｐＨは５−１０の範囲内が好適である。
ンの濃度には特に制限はない。反応温度は２０〜５０°
０、反応液のｐＨは５−１０の範囲内が好適である。
次に実施例により本発明を説明するが、実施例における
セリンのラセミ化の程度の測定は、旋光度およびバイオ
アッセイにより行なった。なおチはすべて重量係で示し
た。
セリンのラセミ化の程度の測定は、旋光度およびバイオ
アッセイにより行なった。なおチはすべて重量係で示し
た。
実施例１
アエロモナス・ブンクタータ・サブスピーシス・キャビ
アエＭＴ−１０２４３を次の培地５０ｍ１を入れた坂ロ
フラスコに一白金耳接種し、３０’Ｏにて２４時間振盪
培養した。
アエＭＴ−１０２４３を次の培地５０ｍ１を入れた坂ロ
フラスコに一白金耳接種し、３０’Ｏにて２４時間振盪
培養した。
培地組成 肉エキス １０％
ペプトン ０５％
酵母エキス ０１％
初期ｐＨ７，０
培養液１１を遠心分離して、菌体を集め次のセリンラセ
ミ化反応に供した。
ミ化反応に供した。
Ｄ−セリフ５０ｆｌ、ピリドキサール燐酸１ｏｏ）、硫
酸アンモニウム１０ｇを含む水溶液１ｅに培養液１１分
から得られた菌体を加え、窒素シール中でゆるやかに攪
拌しながら３５°０２４時間反応を行なった。反応後、
反応液の分析を行なったところ、反応液中にＤ−セリン
３０，９．Ｌ−１セリン２０ｇが含まれていた。
酸アンモニウム１０ｇを含む水溶液１ｅに培養液１１分
から得られた菌体を加え、窒素シール中でゆるやかに攪
拌しながら３５°０２４時間反応を行なった。反応後、
反応液の分析を行なったところ、反応液中にＤ−セリン
３０，９．Ｌ−１セリン２０ｇが含まれていた。
実施例２
実施例１の菌株ＭＴ −１１１］ ２４５の代りにＭＴ
−１（１２４４を用い同様の実験を行なった。反応液を
分析した結果、Ｌ−セリン５２９、Ｄ−セリンｉ ｓｙ
が含まれていた。。
−１（１２４４を用い同様の実験を行なった。反応液を
分析した結果、Ｌ−セリン５２９、Ｄ−セリンｉ ｓｙ
が含まれていた。。
実施例６
実施例１のＤ−セリンの代りにＬ−セリンを用いて同様
に実験した。反応液を分析した結果、Ｌ−セリン２９ｇ
、Ｄ−セリン２０９が含まれていた。
に実験した。反応液を分析した結果、Ｌ−セリン２９ｇ
、Ｄ−セリン２０９が含まれていた。
特許出願人 三井東圧化学株式会社
−４／
Claims (1)
- アエロモナス属に属する菌株を培養し−１その培養物ま
たは培養物から分離した培養菌体またはその培養菌体か
らの抽出物の存在下にセリンをラセミ化することを特徴
とするセリンのラセミ化方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP11531781A JPS5816690A (ja) | 1981-07-24 | 1981-07-24 | セリンのラセミ化方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP11531781A JPS5816690A (ja) | 1981-07-24 | 1981-07-24 | セリンのラセミ化方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5816690A true JPS5816690A (ja) | 1983-01-31 |
| JPS614518B2 JPS614518B2 (ja) | 1986-02-10 |
Family
ID=14659607
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP11531781A Granted JPS5816690A (ja) | 1981-07-24 | 1981-07-24 | セリンのラセミ化方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS5816690A (ja) |
-
1981
- 1981-07-24 JP JP11531781A patent/JPS5816690A/ja active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS614518B2 (ja) | 1986-02-10 |
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