JPH11512739A

JPH11512739A - ポリフルオロアルキルトリプトファントリペプチドトロンビン阻害剤

Info

Publication number: JPH11512739A
Application number: JP9514261A
Authority: JP
Inventors: マーリケイル，ジエイ・アントニー; バークハート，ジヨウゼフ・ピー; ブルースマ，ロバート・ジエイ; ピート，ノートン・ピー
Original assignee: ヘキスト・マリオン・ルセル・インコーポレイテツド
Priority date: 1995-10-02
Filing date: 1996-09-06
Publication date: 1999-11-02

Abstract

(57)【要約】本発明は、ポリフルオロアルキルトリプトファントリペプチドおよび該トリペプチドを含有する組成物に関するものである。これらの化合物は、トロンビン状態の治療並びに貯蔵する全血液および血液生成物の凝固の阻止に有用な抗凝固作用を与える、高度に選択的なトロンビン阻害剤である。

Description

【発明の詳細な説明】ポリフルオロアルキルトリプトファントリペプチドトロンビン阻害剤発明の背景抗凝固剤は、例えば急性深部静脈血栓症、肺動脈塞栓症、四肢の急性動脈塞栓化、心筋梗塞、発作、再狭窄および播種性血管内凝固の薬理学的治療における有用な治療剤である。抗凝固剤の予防的投与は、リウマチ性または動脈硬化心疾患の患者の塞栓症の再発を予防し、手術でのある血栓塞栓併発症を予防するものと信じられる。抗凝固剤の投与は、また、冠状動脈および脳血管疾患の治療に適用される。特に心筋および脳に供給されている動脈における動脈血栓症は、死亡の主要な原因である。血栓症の疾患を治療および予防するために現在使用されている方法は、トロンビン活性またはトロンビン形成を阻害し、結果として血餅形成を予防することからなる。トリペプチド(D)-Phe-Pro-Argがトロンビン接触部位阻害剤であることは、当該技術において知られている。さらに、米国特許第5,391,705号は、トロンビンおよびトリプシンの両方を阻害するポリ弗素化トリペプチドを記載している。同様に、PCT特許出願公開WO 94／25051は、アルギニンがアミノシクロヘキシル部分により置換されたトロンビン阻害剤を記載している。しかしながら、これらの文献記載の技術は、トリプトファンを酵素認識部位のP₁位置におけるアルギニンの代わりに使用した場合に、トリペプチドが抗トロンビン活性を保持するということを示唆していない。本発明者等は、トリプトファンを既知のペンタフルオロエチル置換されたトリペプチドのP₁位置におけるアルギニンまたはアルギニンの誘導体の代わりに使用した場合に、抗トロンビン活性が観察されるだけでなく、他のプロテアーゼ、例えばトリプシンに比較してトロンビンに対して高度に選択的である阻害剤が得られるということを発見した。この新規な級の化合物は、すでに知られているトロンビン阻害剤に代わるまたは補助的な有用な治療剤であり、そして貯蔵された全血液の凝固の阻止および試験または貯蔵に対する他の生物学的試料における凝固の阻止に有用である。発明の要約本発明は、冠状動脈および脳血管疾患、深部静脈血栓症、肺動脈塞栓症、発作（血栓症または塞栓症源の）、心筋梗塞、不安定または難治性アンギナ、血管形成術後の冠状動脈血栓症、再狭窄の治療または予防、貯蔵した全血液の凝固の予防などに有用な、式または〔式中、Ａは、フェニルまたはシクロヘキシルであり；Ｂは、式の基であり；Ｘは、-CF₃、-CF₂CF₃、-CF₂(CH₂)_tCH₃、-CF₂(CH₂)_tCOOR₁、-CF₂(CH₂)_tCONHR₁ 、-CF₂(CH₂)_tCH₂OR₁または-CF₂(CH₂)_vCH=CH₂であり；Ｒは、Ｈまたは-CH₃であり； R₁は、ＨまたはC₁-C₆アルキルであり；ｎは、０または１であり；ｔは、整数２、３または４であり；ｖは、整数１、２または３である〕の新規な化合物またはその立体異性体または混合物、水和物または医薬的に許容し得る塩；およびトロンビン阻害剤としてのこれらの化合物の使用に関するものである。発明の詳細な説明本明細書において使用されるない結合を意味する。 “C₁-C₆アルキル”なる用語は、１〜６個の炭素原子から構成された直鎖状、分枝鎖状または環状の配置の飽和ヒドロカルビル基を意味する。メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、第２ブチル、第３ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル、シクロヘキシルなどが、この用語の範囲に包含される。 “立体異性体”なる用語は、空間における原子の配向においてのみ異なるすべての異性体に対する一般的用語である。それは、鏡像異性体（エナンチオマー）、幾何学的（シス／トランス）異性体、および相互に鏡像でない１個より多くのキラル中心を有する化合物の異性体（ジアステレオマー）を包含する。 “水和物”なる用語は、本発明の化合物のケトンがジヒドロキシメチレン基として存在することができるということを意味する。 “医薬的に許容し得る塩”なる表現は、式（Ｉ）または（ＩＡ）の化合物のすべての非毒性の有機または無機酸塩に適用すべく意図するものである。適当な塩を形成する無機酸の例には、塩酸、臭化水素酸、硫酸および燐酸並びにオルト燐酸一水素ナトリウムおよび硫酸水素カリウムのような酸性金属塩が含まれる。適当な塩を形成する有機酸の例には、モノ、ジおよびトリカルボン酸が含まれる。このような酸の例は、例えば酢酸、トリフルオロ酢酸、グリコール酸、乳酸、ピルビン酸、マロン酸、コハク酸、グルタル酸、フマール酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、安息香酸、ヒドロキシ安息香酸、フェニル酢酸、桂皮酸、サリチル酸、２−フェノキシ安息香酸、およびスルホン酸、例えばメタンスルホン酸および２−ヒドロキシエタンスルホン酸である。このような塩は、水和形態または実質的に無水の形態で存在することができる。表１に記載したようなアミノ酸並びにアミノおよびカルボキシ末端基の次の略号を、本明細書を通じて使用する。グリシンを除いた天然アミノ酸は、キラル炭素原子を含有する。特にことわらない限り、示したように、式ＩにおけるP₃部分、例えばPhe、Cha、PhgまたはChg 部分がＤ−配置にあることが好ましいということを除いて、好ましい化合物は、Ｌ−配置の光学的に活性なアミノ酸である。式(Ｉ)および(ＩＡ)の化合物に関して、P₁−α−アミノ酸残基（トリプトファン）は、Ｄ−もしくはＬ−配置またはその混合物であることができ、そしてP₂− α−アミノ酸残基（プロリン）は、好ましくはＬ−配置にある。同様に、P₃部分のα−アミノ酸残基（すなわち、フェニルアラニン、シクロヘキシルアラニンなど）は、好ましくはＤ−配置にある。好ましい残基はPheまたはChaであり、そしてもっとも好ましい置換分は、Pheである。式ＩＡの化合物の場合において、P₃ 部分（置換分“Ｂ”）は、“TIC”誘導体または“TIC様”誘導体と称されるものである（“TIC”なる表現は、テトラヒドロイソキノリンカルボン酸から派生する）。このような場合において、P₃窒素原子およびP₃−α−炭素で形成された二環式TIC部分は、式である。これらの式において、それぞれ、(2a)および(2b)は、1,2,3,4−テトラヒドロイソキノリン部分を示し、(2′a)および(2′b)は、1,2,3,4−デカヒドロイソキノリン部分を示し、そして(2c)および(2′c)は、2,3−ジヒドロ−１Ｈ− イソインドリルおよびオクタヒドロ−１Ｈ−イソインドリル部分を示す。便宜上、以下においては、これらの部分もまた’“TIC様変性”と称する。一般に、式(Ｉ)および(ＩＡ)の化合物は、当該技術において知られている標準化学反応を使用して製造することができる。例えば、Ｘが-CF₂CF₃である式（Ｉ）の化合物は、スキームＡに示したようにして製造することができる。スキームＡにおいて使用された出発物質、試薬、技術および操作は、公知でありそして当該技術に精通する者に知られている。スキームＡスキームＡは、Ｘが-CF₂CF₃であり、Ａおよびｎが上述した通りでありそしてP gがＮ−保護基である式（Ｉ）の化合物を製造する一般的合成操作を示す。Ｎ− 保護基は、第３ブチルオキシカルボニル(Boc)、カルボベンジルオキシ（Cbz）、第３ブチルジメチルシリル（TBOMS）、第３ブチルジフェニルシリル(TBDPS)などを包含する適当な保護基を意味する。第３ブチルオキシカルボニル（Boc）が好ましい。スキームＡの工程ａにおいては、保護されたアミノ酸エステル３を、保護されたペンタフルオロエチルケトン４に変換する。この場合、一緒に副生成物５が形成される。例えば、保護されたアミノ酸エステル３を、P.G.GassmanおよびN.J． O'Reilly，J．Org．Chem．52，2481-2490(1987)によって記載されているように沃化ペンタフルオロエチルおよびメチルリチウム・臭化リチウム複合体から反応系内で生じさせることのできるペンタフルオロエチルリチウム３〜６モル当量と反応させる。この反応は、適当な無水の溶剤、例えばジエチルエーテル、または無水の溶剤混合物、例えばジエチルエーテル−トルエン（９：１）中において都合よく実施することができる。反応は、−30℃〜−80℃の温度で実施される。− 50℃〜−65℃の温度が好ましい。保護されたペンタフルオロエチルケトン４は、当該技術においてよく知られているように、抽出および蒸発によって反応帯域から単離することができる。生成物は、当該技術においてよく知られている技術、例えばクロマトグラフィーおよび再結晶によって精製することができる。このようにする代わりに、保護されたペンタフルオロエチルケトン４は、M.R ．Angelastro，J.P．Burkhart，P．Bey，N.P．Peet，Tetrahedron Letters，33 ，3265-3268（1992）に記載されている型の反応を使用して、３の保護されたヒドロキサメート類似体を変換することによって製造することができる。スキームＡの工程ｂにおいては、T.H．Green“Protection Groups in Organic Synthesis”，John Wiley and Sons，Chapter 7（1981）に記載されているような当該技術において公知の条件下で４のアミノ酸側鎖官能基を保護したまま、保護されたペンタフルオロエチルケトン４のα−アミン部分を脱保護して、α−アミン脱保護されたペンタフルオロエチルケトン６を得る。例えば、ビス−Boc保護されたペンタフルオロエチルケトン４を、適当なエーテル性溶剤、例えばジオキサンなどの存在下において、適当な酸、例えば塩化水素と接触させて、α−アミン脱保護されたペンタフルオロエチルケトン６を得ることができる。生成物６は、当該技術において公知の技術によって、単離および精製することができる。スキームＡの工程ｃにおいては、α−アミン脱保護されたペンタフルオロエチルケトン６を、標準ペプチドカップリング技術によって、式（式中、置換分はすべて上述した通りである）の化合物とカップリングさせる。例えば、通常のペプチド合成において、記載された方法を使用してＮ−末端残基のα−アミンを脱保護しそしてペプチド結合により次の適当にＮ−保護されたアミノ酸とカップリングさせることによってペプチドを延長する。この脱保護およびカップリング操作を、所望の配列が得られるまで反復する。このカップリングは、元来Merrifield，J．Am．Chem．Soc.，1963，85，2149-2154に記載されている方法により、段階的様式で、またはフラグメントの縮合または両方法の組み合わせによって、または固相ペプチド合成によって、構成アミノ酸を使用して遂行することができる。上記文献の開示を参照により本明細書に加入する。固相合成法を使用する場合は、Ｃ −末端カルボン酸を不溶性担体（普通ポリスチレン）に結合させる。これらの不溶性担体は、延長条件に対しては安定であるが後で容易に開裂することのできる結合を形成する。このような担体の例は、クロロ−またはブロモメチル樹脂、ヒドロキシメチル樹脂、およびアミノメチル樹脂である。これらの樹脂の多くは、すでに組み込まれた所望のＣ−末端アミノ酸を有するものとして商業的に入手することができる。上記のほかに、ペプチド合成は、次の文献に記載されている。 StewartおよびYoung，“Solid Phase Peptide Synthesis”，2nd ed.，Pierce Chemical Co.，Rockford，II(1984); Gross，Meienhofer，Udenfriend，Eds.， “The Peptides: Analysis，Synthesis，Biology”Vol．1,2,3,5および9、Acade mic Press，New York，1980-1987; Bodanszky，“Peptide Chemistry: A Practi cal Textbook”，Springer-Verlag，NewYork(1988);およびBodanszky等．“The Practice of Peptide Synthesis",Springer-Verlag，New York(1984)。これらの文献の開示は、参照により本明細書に加入する。２個のアミノ酸の、アミノ酸とペプチドとの、または２個のペプチドフラグメントの間のカップリングは、アジド法、混合炭酸−カルボン酸無水物（クロロギ酸イソブチル）法、カルボジイミド（ジシクロヘキシルカルボジイミド、ジイソプロピルカルボジイミドまたは水溶性カルボジイミド）法、活性エステル（ｐ− ニトロフェニルエステル、Ｎ−ヒドロキシ−スクシニックイミドエステル）法、 Woodward試薬Ｋ法、カルボニルジイミダゾール法、燐試薬、例えばBOP-C1、または酸化還元法のような標準カップリング操作を使用して実施することができる。これらの方法の若干（特にカルボジイミド法）は、１−ヒドロキシベンゾトリアゾールを加えることによって強化することができる。これらのカップリング反応は、溶液（液相）または固相技術を使用して遂行することができる。構成アミノ酸の官能基は、一般に、望ましくない結合の形成を避けるために、カップリング反応の間保護しなければならない。使用することのできる保護基は、Greene，“Protective Groups in Organic Chemistry”，John Wiley & Sons ，New York(1981)および“The Peptides: Analysis，Synthesis，Biology”，Vo l．3，Academic Press，New York(1981)に記載されている。これらの文献の開示は、参照により本明細書に加入する。Ｃ−末端残基のα−カルボキシル基は、通常、開裂してカルボン酸を与えることのできるエステルによって保護される。使用することのできる保護基には、( １)アルキルエステル、例えばメチルおよび第３ブチル、(２)アリールエステル、例えばベンジルおよび置換ベンジル、または(３)おだやかな塩基処理またはおだやかな還元手段によって開裂することのできるエステル、例えばトリクロロエチルおよびフェナシルエステルが含まれる。ペプチド鎖を成長させるためにカップリングさせるそれぞれのアミノ酸のα− アミノ基は、保護されなければならない。当該技術において既知の保護基を使用することができる。これらの保護基の例には、(１)アシル型、例えばホルミル、トリフルオロアセチル、フタロイルおよびｐ−トルエンスルホニル；(２)芳香族カルバメート型、例えばベンジルオキシカルボニル（CbzまたはＺ）および置換されたベンジルオキシカルボニル、１−(ｐ−ビフェニル)−１−メチルエトキシ −カルボニル、および９−フルオレニルメチルオキシカルボニル（Fmoc）;(３) 脂肪族カルバメート型、例えば第３ブチルオキシカルボニル(Boc)、エトキシカルボニル、ジイソプロピル−メトキシカルボニルおよびアリルオキシカルボニル；(４)環式アルキルカルバメート型、例えばシクロペンチルオキシカルボニルおよびアダマンチルオキシカルボニル；(５)アルキル型、例えばトリフェニルメチルおよびベンジル；( ６)トリアルキルシラン、例えばトリメチルシラン；および(７)チオール含有型、例えばフェニルチオカルボニルおよびジチアスクシノイルが含まれる。好ましいα−アミノ保護基は、Boc、CbzまたはFmoc、好ましくはBocである。ペプチド合成のために適当に保護された多くのアミノ酸誘導体が商業的に入手される。新しく加えたアミノ酸残基のα−アミノ基保護基は、次のアミノ酸のカップリングに先立って開裂される。このような保護基の開裂の条件は、Greene、“Prot ective Groups in Organic Chemistry”，Chapter 7，John Wiley & Sons，New York(1981)に記載されている。Boc基を使用する場合は、選択される方法は、正味もしくはジクロロメタン中のトリフルオロ酢酸、またはジオキサンもしくは酢酸エチル中のHClである。それから、得られたアンモニウム塩は、カップリングに先立ってまたは反応系内において、水性緩衝剤またはジクロロメタンもしくはジメチルホルムアミド中の第３アミンのような塩基性溶液で中和する。Fmoc基を使用する場合は、選択される試薬は、ジメチルホルムアミド中のピペリジンまたは置換されたピペリジンであるが、何れの第２級アミンまたは塩基性水溶液も使用することができる。脱保護は、０℃と室温との間の温度において実施される。側鎖官能基を有するアミノ酸の何れも、ペプチドの製造の間、上述した基の何れかを使用して保護しなければならない。当該技術に精通する者により理解されるように、これらの側鎖官能基に対する適当な保護基の選定および使用は、ペプチド中のアミノ酸および他の保護基の存在に依存する。このような保護基の選定は、これらがα−アミノ基の脱保護およびカップリング中除去されてはならないという点において重要である。例えば、Bocがα−アミノ保護基として使用される場合は、Tyr、SerまたはThr のようなアミノ酸のヒドロキシ含有側鎖を保護するために、ベンジル（Bn）エーテルを使用することができる。固相合成を使用する場合は、ペプチドは、通常、保護基の除去と同時的に樹脂から開裂される。Boc保護スキームを合成に使用する場合は、０℃における硫化ジメチル、アニソール、チオアニソールまたはｐ−クレゾールのような無水のHF 含有添加剤による処理が、樹脂からペプチドを開裂する好ましい方法である。ペプチドの開裂は、また、トリフルオロメタンスルホン酸／トリフルオロ酢酸混合物のような他の酸試薬によって達成することもできる。Fmoc保護スキームを使用する場合は、Ｎ−末端Fmoc基は、初期に記載した試薬で開裂される。他の保護基およびペプチドは、トリフルオロ酢酸およびアニソールなどのような種々な添加剤の溶液を使用して、樹脂から開裂される。さらに詳しくは、スキームＡの工程ｃにおいては、構造６ａの適当に保護されたジペプチドを、不活性雰囲気、例えば窒素下において、適当な有機溶剤に溶解する。酢酸エチルが、このカップリング反応に対する好ましい溶剤である。それから、溶液を、適当なアミン１〜４当量で処理する。適当なアミンの例は、第３級有機アミン、例えばトリ（低級アルキル）アミン、例えばトリエチルアミン、または芳香族アミン、例えばピコリン、コリジンおよびピリジンである。ピリジン、ピコリンまたはコリジンを使用する場合は、これらは高い過剰の量で使用することができ、そしてそれ故に、また反応溶剤として使用することもできる。Ｎ −メチルモルホリン(NMM)が、カップリング反応に対して特に適している。それから、溶液を約−20℃に冷却し、そしてクロロギ酸イソブチル１当量を加える。反応混合物を約10〜30分撹拌しそしてα−アミン脱保護されたペンタフルオロエチルケトン６の１〜1.1当量を反応混合物に加える。反応混合物を、約−20℃で30分〜２時間撹拌し、それから室温に加温し、そして１〜３時間撹拌する。それから、構造７のカップリングした生成物を単離し、そして当該技術において公知の技術、例えば抽出技術およびフラッシュクロマトグラフィーによって精製する。例えば、反応混合物を、適当な有機溶剤、例えば塩化メチレンでうすめ、水ですすぎ、無水の硫酸マグネシウム上で乾燥し、濾過し、そして真空下で濃縮する。残留物を、適当な溶離剤、例えば酢酸エチル／ヘキサンを使用してシリカゲル上でフラッシュクロマトグラフィー処理することにより精製して、構造７のカップリングした生成物を得る。スキームＡの工程ｄにおいては、カップリングした生成物７上のα−アミン保護基（Pg）およびP₁アミノ酸側鎖官能基の保護基(Pg)を、T.W.Green，“Protect ive Groups in Organic Synthesis”，Chapter 7，1981,John Wiley & Sons，In c．によって記載されているような当該技術において公知の条件下で除去して、脱保護されたトリペプチド８を得る。例えば、カップリング生成物７上の両方の Pgが第３ブチルカルバメート(Boc)である場合は、化合物を、トリフルオロ酢酸に溶解し、数分撹拌し、そしてそれから真空下で濃縮する。それから、残留物を、Et₂Oに溶解し、そしてヘキサンで沈殿させて脱保護されたトリペプチド８を得る。トリプトファン化合物を脱保護する方法は、Franzin等、J．Chem．Soc.,1699- 1700(1984)によって記載されているように、当該技術において公知である。スキームＡの工程ｅにおいては、脱保護されたトリペプチド８を、脱カルボキシル化反応にうけしめて式（Ｉ）の化合物を得る。例えば脱保護されたトリペプチド８を、適当な塩素化炭化水素溶剤、例えば四塩化炭素、塩化エチレン、塩化メチレン、クロロホルム、1,2,4−トリクロロベンゼンまたはｏ− ジクロロベンゼンに溶解し、そして脱カルボキシル化を完了するのに十分な時間、例えば24〜72時間撹拌する。生成物(Ｉ)は、当該技術において公知の技術によって単離することができる。さらに、ＸがX′（ここでX′は、-CF₃、-CF₂CF₃、-CF₂(CH₂)_tCH₃、-CF₂(CH₂)_t C(O)NHR、-CF₂(CH₂)_tCH₂ORまたは-CF₂(CH₂)_vCH=CH₂である）本発明の化合物は、 1995年２月21日に発行された米国特許第5,391,705号に記載されているような既知の操作と同様にして製造することができる。本質的に、式（Ｉ）および（ＩＡ）の弗素化アルキルトリペプチドの合成は、重要な中間体として使用される必要なポリフルオロアルキルケトンアミノ酸誘導体を与える２−フェニル−5(4H)− オキサゾロンとトリフルオロ酢酸、ペンタフルオロプロピオン酸またはジフルオロペンテン酸（所望のX′部分に依存する）の無水物またはアシルハライドとの変性Dakin-West反応に依存する。それから、さらなる反応は、式（Ｉ）および（ＩＡ）の所望のペプチドへのこれらのアミノ酸類似体の変換を可能にする。Ｘが -CF₃、-CF₂CF₃、-CF₂(CH₂)_tCH₃、-CF₂(CH₂)_tC(O)NHR、-CF₂(CH₂)_tCH₂ORまたは-C F₂(CH₂)_vCH=CH₂である本発明の化合物を製造する一般的合成操作は、スキームＢに示す通りである。スキームＢにおいて、特にことわらない限りは、出発物質および試薬は、公知でありそして当該技術に精通する者に知られている。スキームＢスキームＢ（続き）スキームＢは、X′が-CF₃、-CF₂CF₃、-CF₂(CH₂)_tCH₃、-CF₂(CH₂)、C(O)NHR₁、 -CF₂(CH₂)_tCH₂OR₁または-CF₂(CH₂)_vCH=CH₂である場合の本発明の化合物を製造する一般的合成操作を示す。スキームＢに記載された置換分は、すべて、特にことわらない限りは、上述した通りである。スキームＢの工程ａにおいては、δ−Ｋ−トリプトファン９を、公知のそして当該技術に精通する者により知られている標準Ｎ−保護技術によってN^α−保護して、N^α−Ｋ−N^δ−ベンジルオキシカルボニル−トリプトファン10を得る。Ｋは、カルボベンジルオキシ(Cbz)、第３ブチルジメチルシリル（TBDMS）、第３ブチルジフェニルシリル（TBDPS）などを包含する適当な保護基を意味する。カルボベンジルオキシ（Cbz）が好ましい。例えば、δ−Cbz−Ｌ−トリプトファン９を、塩化ベンゾイルおよび標準ショッテン−バウマン条件を使用してN^α−保護する。特に、反応温度を約０℃〜５ °の間に維持しながら、ジエチルエーテルのようなエーテル溶剤中の塩化ベンゾイルの溶液を、水酸化ナトリウムと同時に約0.5〜１時間にわたって、水酸化ナトリウム中のδ−Cbz−Ｌ−トリプトファン９の溶液に加える。それから、反応混合物を、室温で約４時間撹拌し、ジエチルエーテルのようなエーテル溶剤で抽出し、そして濃塩酸溶液を使用して約pH１に酸性化する。それから、さらに水を加え、そして混合物を約48時間放置する。固体を集め、当該技術に精通する者によく知られている技術によって精製して、N^α−ベンゾイル−N^δ−ベンジルオキシカルボニルトリプトファン10を得る。スキームＢの工程ｂにおいては、N^α−ベンゾイル−N^δ−ベンジルオキシカルボニルトリプトファン10を環化して２−フェニル−５−(4H)−オキサゾロン11を得る。例えば、塩化メチレンのような適当な有機溶剤中のN^α−ベンゾイル−N^δ−ベンジルオキシカルボニルトリプトファン10のスラリーを、ジシクロヘキシルカルボジイミド約0.1〜1.0モル当量と接触させる。それから、反応混合物を、約２〜５時間撹拌し、そして得られる沈澱したジシクロヘキシル尿素副生成物を濾過し、適当な有機溶剤、例えば塩化メチレンで洗浄する。それから、濾液を濃縮し、適当なエーテル溶剤、例えばジエチルエーテルでうすめ、そして場合によっては方法を反復する。それから、環化生成物２−フェニル−５−(4H)−オキサゾロン 11を単離し、そして当該技術に精通する者によく知られている技術、例えば沈澱および結晶化によって精製する。スキームＢの工程ｃにおいては、２−フェニル−５−(4H)−オキサゾロン11を、標準アシル化技術によってアシル化して、構造12の相当するＯ−アシル化合物を得る。例えば、不活性雰囲気、好ましくは窒素下で約−10℃〜10℃の温度範囲で、適当な第３級アミン、例えばトリエチルアミンを、適当な有機溶剤、例えばテトラヒドロフランまたはテトラヒドロフラン／ヘプタン混合物中の２−フェニル−５ −(4H)−オキサゾロン11の溶液に加える。反応温度を約−10℃〜10℃の間に維持しながら、適当な有機溶剤、例えばヘプタン中の適当なハロゲン化アシルまたは相当する適当な無水物、例えばα,α−ジフルオロペンテノイルクロライド、トリフルオロ酢酸無水物、ペンタフルオロプロピオン酸無水物などの溶液を、反応混合物に徐々に加える。約30〜60分後に、反応混合物を室温に加温し、そしてさらに約30分撹拌する。トリエチルアミン塩酸塩を、当該技術において公知の抽出技術、例えば濾過によって除去し、そして濾液を濃縮して構造12の相当するＯ− アシル化合物を得る。スキームＢの工程ｄにおいては、構造12の相当するＯ−アシル化合物を、場合によってはアシル化触媒と反応させて、構造13の相当するＣ−アシル化合物を得る。例えば、構造12の相当するＯ−アシル化合物を、適当な有機溶剤、例えばテトラヒドロフランに溶解し、そしてアシル化触媒例えばジアルキルアミノピリジン、好ましくは４−ジメチルアミノピリジン（DMAP）と接触させる。それから、反応混合物を、室温で約２〜４時間撹拌して構造13のＣ−アシル化合物を得、これを、さらに単離または精製することなしに使用する。スキームＢの工程ｅにおいては、構造13のＣ−アシル化合物を、脱カルボキシル化剤、例えば蓚酸、コハク酸など（蓚酸が好ましい）で脱カルボキシル化して、ケトンおよびその水和形態の混合物として構造14の所望の脱カルボキシル化弗素化化合物を得る。例えば、テトラヒドロフランのような適当な有機溶剤中の乾燥した蓚酸１〜５モル当量を含有する溶液を、構造13のＣ−アシル化合物を含有するスキームＢの工程ｄからの反応混合物に加え、そして16〜32時間撹拌する。それから、反応混合物を濃縮し、適当な酸、例えば塩酸で処理し、そして酢酸エチルで抽出する。層を分離し、そして有機層を適当な塩基、例えば炭酸ナトリウム、重炭酸ナトリウムまたは水酸化ナトリウムで洗浄し、場合によってはブラインで洗浄し、適当な乾燥剤、例えば硫酸マグネシウムで乾燥し、そして濃縮する。それから、脱カルボキシル化生成物14を単離し、そして当該技術に精通する者によく知られている技術、例えば沈澱および結晶化によって精製する。スキームＢの工程ｆにおいては、構造14の脱カルボキシル化弗素化生成物を、適当な還元剤と接触させて構造15のアルコールを得る。当該技術において公知であるように、この還元で、立体異性体の混合物である誘導体が得られる。適当な還元剤は、当該技術において公知であり、そして限定するものではないが、リチウムトリ−第３ブチルオキシアルミノ水素化物、水素化硼素カリウム、リチウムトリ第２ブチル硼水素化物、水素化硼素リチウム、水素化硼素ナトリウムおよびリチウムトリエチル硼水素化物が含まれる。水素化硼素ナトリウムが好ましい。例えば、構造14の脱カルボキシル化弗素化生成物を、モル過剰の適当な還元剤と接触させる。反応は、適当な溶剤中で実施される。水素化物還元に対する適当な溶剤は、当該技術において公知であり、例えばトルエン、ジエチルエーテル、メチル第３ブチルエーテル、テトラヒドロフラン（THF）およびテトラヒドロフラン／エタノール混合物である。反応は、−78℃〜約10℃の範囲の温度で実施される。還元生成物である構造15のアルコールは、抽出によって反応帯域から単離し、そしてそれから、当該技術において公知の方法、例えばクロマトグラフィーおよび再結晶により精製することができる。スキームＢの工程ｇにおいては、構造15のアルコールを適当な脱保護剤、例えば濃塩酸と接触させ、約100℃〜110℃に加熱して、構造16の脱保護されたアルコールを得る。例えば、６Ｎ水性塩酸中の構造15のアルコールの溶液を、約15〜20時間加熱還流(約110℃)する。それから、反応混合物を冷却し、そして安息香酸結晶を濾過により除去する。濾液をジエチルエーテルで抽出し、そして層を分離する。水性層を活性炭で処理し加熱する。それから、それを濾過し、濃縮し、そして乾燥して、構造16の脱保護されたアルコール生成物を得る。Ｘが-CF₂(CH₂)₂CH₃である化合物を製造することが望まれる特定の場合においては、構造12の化合物を製造するために使用される酸無水物またはハロゲン化アシル反応剤は、部分-CF₂CH₂CH=CH₂を有する。したがって、構造15のアルコールも、また部分-CF₂CH₂CH=CH₂を有する。この部分を、脱保護に先立ってアルキレン還元剤と接触させて構造16の脱保護されたアルコールを得ることができる。適当なアルキレン還元剤には、ジボラン、ジイソアルキルボラン、ボラン／第３級アミン複合体および水素化触媒の存在下における水素が含まれる。もっとも好ましいアルキレン還元剤は、水素添加触媒の存在下における水素である。水素添加触媒の例は、白金、パラジウム、ロジウム、ルテニウムおよびニッケルである。微細に分散した固体としての、または炭素またはアルミナのような不活性支持体上に吸着した金属、およびこれらの金属のある可溶性複合体が、触媒活性を示す。例えば、Ｘが-CF₂CH₂CH=CH₂である構造15のアルコールを、適当なアルコール、例えばイソプロパノール、および適当な酸、例えば塩酸に溶解する。それから、この溶液を、アルキレン還元剤、例えば不活性炭素支持体上に吸着されたパラジウムジヒドロキシドで処理し、そして水素ガス（40〜60psi）下で約20〜30時間を振盪する。反応混合物を濾過し、濃縮して、N^α−ベンゾイル−ジフルオロアルコール塩酸塩を得る。それから、N^α−ベンゾイル−ジフルオロアルコール塩酸塩を、適当な脱保護剤、例えば塩酸と触媒させ、そして加熱還流する。反応混合物を室温に冷却し、濾過し、そして濾液をジエチルエーテルで抽出し、層を分離する。水性層を活性炭で処理し、加熱し、濾過し、そして濃縮して、構造16 の適当な脱保護されたアルコールを得る。 R₃が-CF₂(CH₂)_tCH₃（式中、ｔは整数３または４である）である特定の場合においては、相当するオレフィン(例えば-CF₂CH₂=CH-CH₃またはCF₂CH₂CH=CH CH₂CH₃)を還元する。これらの後者の型のオレフィンを製造するためには、R.W． Lang等 Tetrahedron Letters，29，3291(1988)により記載された方法によって、出発ハロゲン化アシルまたは無水物を製造することができる。スキームＢの工程ｈにおいては、上記のスキームＡの工程ｃに記載したような標準ペプチドカップリング技術によって、構造16の適当な脱保護されたアルコールを６ａの化合物とカップリングさせて、構造17のトリペプチドアルコール17を得る。スキームＢの工程ｉにおいては、構造17のトリペプチドアルコールを、適当な酸化剤と反応させて、構造18のＮ−末端保護されたトリペプチドを得る。例えば、構造17の適当なトリペプチドアルコールを、公知のそして当該技術に精通する者に知られている標準酸化技術を使用して、適当な酸化剤、例えばDess -Martinパーアイオジナン、無水クロム酸ピリジン複合体、ピリジニウムジクロメート、またはジメチルスルホキシド複合体、例えばDMSO-(COCl)₂(Swern条件) で酸化して、構造18のＮ−末端保護されたトリペプチドを得る。標準酸化技術は、Swern酸化操作、Synthesis，165(1981); Dess-Martinパーアイオジナンの使用、Dess Martin，J ．Org.Chem．48，4155(1983); およびJones酸化操作(米国特許第5,391,705号参照)のような操作を包含する。Swern酸化操作がもっとも好ましい。例えば、塩化オキサリル約1.5当量を、適当な無水の有機溶剤、例えば塩化メチレンに溶解し、そして約−55℃〜−78℃の温度に冷却する。この溶液に、温度を−55℃またはそれ以下に維持しながら、メチルスルホキシド約３〜８当量を滴加する。構造17のトリペプチドアルコールの相当量を、適当な量の無水の有機溶剤、例えば塩化メチレンに溶解し、そして撹拌しながら、徐々に反応混合物に加える。添加完了後に、反応混合物を、約−55℃〜−78℃の温度で約30分間撹拌し、過剰な適当な有機塩基、例えばトリエチルアミンまたはＮ−メチルモルホリンを加え、そして反応混合物を室温に加温する。それから、酸化生成物である構造18のＮ−末端保護されたトリペプチドを単離し、そして当該技術に精通する者によく知られている技術、例えば抽出技術、沈澱、結晶化およびクロマトグラフィーによって精製する。スキームＢの工程ｊにおいては、構造18のＮ−末端保護されたトリペプチドを、スキームＢの工程ｇに記載した操作によって脱保護して、式(Ｉ)の所望の化合物を得る。Ｘが-CF₂(CH₂)_tCOOR₁である特定の場合においては、必要な中間体(所望のＸ部分が-CF₂(CH₂)_tCOOR₁である以外、構造16の化合物に相当する)を製造する操作は、スキームＣの反応を利用することができる。スキームＣ中間体19は、D．Ranganathan等、J ．Chem．Res．Synop.，3，78(1983)およびD ．Ranganathan等、J ．Org．Chem．45，1185(1980)によって開示されている。反応剤20は、Reformatsky条件下でブロモジフルオロエチルアセテート〔R.H．Abel esおよびC.P．Govardham，Archives of Biochemistry and Biophysics，280，13 7(1990)参照〕を適当なアルデヒドと反応させて相当するジフルオロアルコールを得ることによって製造することができる。それから、ジフルオロアルコール20 および構造19の中間体を、当該技術において公知の技術および条件を使用して、テトラヒドロフランのような適当な有機溶剤中で炭酸カリウムを使用して縮合させて、構造21のニトロアルコール中間体を形成させる。それから、構造21のニトロアルコール中間体を、触媒水素添加によって還元して、構造22の中間体を得る。それから構造22の中間体は構造16にとり込まれ、スキームＢの工程ｈ、ｉおよびｊに記載したように処理して、Ｘが -CF₂(CH₂)_tCOOR₁である式(Ｉ)の所望の化合物を得る。このようにする代わりに、Sham等、Biochem ．and Biophys．Res．Comm.175，9 14(1991)および米国特許第5,391,705号によって記載されているような標準のそして公知の操作および技術によって、構造19および20の化合物に対してメシル化、除去および水素添加反応を行って、構造22の中間体を得ることができる。Ｘが-CF₂(CH₂)₂CH₃である場合の構造12のＯ−アシル化合物の製造に対して必要なα,α−ジフルオロペンテノイルクロライド中間体12aは、米国特許第5,391, 705号において説明されている、およびスキームＤに記載されているようにして得ることができる。この工程に使用する試薬、出発物質および技術は、当該技術に精通する者が容易に利用できるものである。スキームＤスキームＤの工程ａにおいては、2,2−ジフルオロ−４−ペンテン酸12cは、当該技術において公知の技術および操作、例えば塩基加水分解によって、α,α− ジフルオロペンテン酸エチル12b（1995年２月21日発行の米国特許第5,391,705号）の加水分解によって製造される。例えば、水酸化リチウムのような適当な塩基約1.0〜1.5モル当量を、約−10℃ 〜10℃の温度で、水中のα,α−ジフルオロペンテン酸エチル（2,2−ジフルオロ −４−ペンテン酸エチルとしても知られている）12b（1989年７月11日発行の米国特許第4,847,401号）の溶液に加える。反応混合物を、約２〜４時間室温に加温し、そしてそれから約40℃〜55℃でさらに２〜４時間加熱する。エタノールおよび水を、反応混合物から除去し、そして2,2−ジフルオロ−４−ペンテン酸12c を、抽出によって反応帯域から単離し、それから当該技術において公知の方法によって精製することができる。スキームＤの工程ｂにおいては、2,2−ジフルオロ−４−ペンテン酸12c を、適当な塩素化剤と接触させて、2,2−ジフルオロ−４−ペンテノイルクロライド12aを得る。適当な塩素化剤は、ヒドロキシル基をクロロ基に変換し出発物質または生成物を分解しないものである。適当な塩素化剤には、三塩化燐、塩化チオニル、塩化オキサリルなどが含まれる。例えば、2,2−ジフルオロ−４−ペンテン酸12cを、適当な塩素化剤約1.0〜1.5 モル当量と接触させる。反応は適当な溶剤、例えばジクロロメタン、トルエンまたはジメチルホルムアミド中で実施される。反応は、約20℃〜35℃の温度で実施され、そして一般に約４〜24時間を必要とする。生成物2,2−ジフルオロ−４− ペンテノイルクロライド12aは、分別蒸溜によって単離し、そして当該技術において公知の技術、例えばクロマトグラフィーによって精製することができる。Ｘが-CF₂CF₃でありそして残りの置換分のすべてが上述した通りである式(ＩＡ )の化合物を製造するために、スキームＥを使用することができる。スキームＥスキームＥは、Ｘが-CF₂CF₃でありそして残りの置換分のすべてが上述した通りである式(ＩＡ)の化合物を製造する一般的合成操作を示す。スキームＥの工程ａにおいては、スキームＡにおいて製造されたα−アミン脱保護されたペンタフルオロエチルケトン６を、Pg-T-C(O)Pro-OH(式中、Ｔは上述したような、そして(2a)、(2b)、(2c)、(2′a)、(2′b)および(2′c)として示したようなTIC様部分である)とカップリングさせて、カップリングした生成物23を形成させる。TIC様部分は、1995年２月21日に発行された米国特許第5,391,705号およびShuman等、J ．Med．Chem．36,314-319(1993)に開示されている。該特許および該文献は、参照によって本明細書中に加入する。カップリング反応は、スキームＡの工程ｃにおいて上述した操作と同様にして実施される。スキームＥの工程ｂにおいては、カップリングした生成物23を、スキームＡの工程ｄおよびｅにおいて上述したような当該技術において公知の条件下で、脱保護または固相から開裂して式(ＩＡ)のトリペプチドを得る。置換分のすべてが上述した通りである式(ＩＡ)の化合物を製造するために、スキームＦを使用することができる。スキームＦスキームＦは、置換分のすべてが上述した通りである式(ＩＡ)の化合物を製造する操作を示す。スキームＦの工程ａにおいては、スキームＢにおいて製造されたα−アミン脱保護されたアルコール16を、Pg-T-C(O)Pro-OH（式中、Ｔは上述したそして(2a) 、(2b)、(2c)、(2′a)、(2′b)および(2′c)として示したようなTIC様部分である）とカップリングさせて、カップリングした生成物24を形成させる。カップリング反応は、スキームＡの工程ｃにおいて上述した操作と同様にして実施される。スキームＦの工程ｂにおいては、カップリングした生成物24を、スキームＢの工程ｉに記載した操作によって酸化して、構造25のＮ−保護されたトリペプチドを得る。スキームＦの工程ｃにおいては、構造25のＮ−保護されたトリペプチドを、スキームＢの工程ｊに記載した操作によって脱保護して、式(ＩＡ)の所望の化合物を得る。Ｎ−メチル化α−アミノ酸は、スキームＧおよび一般にPitzele、B.S.等、J ． Med．Chem ．37，888-896(1994)に記載されたようにして製造することができる。これらの文献は、参照により本明細書中に加入する。とくにことわらない限り、置換分はすべて上述した通りである。試薬および出発物質は、当該技術に精通する者によって容易に入手することができる。スキームＧスキームＧの工程ａにおいては、構造26（式中、Ｗは適当なα−カルボキシル保護基、例えばメチルエステルまたは固相樹脂である）のα−アミノ酸を、スキームＡの工程ｃにおいて記載した操作と同様な方法で、Pgとカップリングさせて、カップリングした生成物を得る。スキームＧの工程ｂにおいては、カップリングした生成物を、当該技術において公知の条件下で、脱保護または固相から開裂して、構造27の酸を得る。例えばＷが構造26上のメチルまたはエチル基である場合は、化合物を適当な有機溶剤、例えばエタノールに溶解し、そしてほぼ等容量の水で処理する。この溶液に、撹拌しながら水酸化リチウム１〜２当量を加え、そして反応混合物を１〜６時間撹拌する。それから得られた酸を単離し、そして当該技術において公知の技術によって精製する。例えば、有機溶剤を真空下で除去し、そして残った水溶液を稀塩酸で酸性にする。それから、水性相を適当な有機溶剤、例えば酢酸エチルで抽出し、そして合した有機抽出液を、無水の硫酸マグネシウム上で乾燥し、濾過し、そして真空下で濃縮する。それから、残留物を適当な溶離剤、例えばメタノール／クロロホルムを使用してシリカゲル上でフラッシュクロマトグラフィー処理して精製し、構造27の酸を得る。スキームＧの工程ｃにおいては、酸27をＮ−メチル化して、構造28のＮ−保護されたＮ−メチル化化合物を得る。例えば、酸27を適当な有機溶剤、例えばテトラヒドロフランに溶解し、約０℃に冷却し、そして過剰の沃化メチルで処理する。それから、水素化ナトリウム１〜３当量を溶液に加え、これを０℃で約10分間撹拌し、それから室温に加温し、そして24〜48時間撹拌する。それから生成物を、当該技術においてよく知られている技術、例えば抽出方法によって単離する。例えば、稀水性塩酸を加え、そして反応混合物を適当な有機溶剤、例えば酢酸エチルで抽出する。それから、有機抽出液を合し、５％チオ硫酸ナトリウム、ブラインで洗浄し、無水の硫酸マグネシウム上で乾燥し、シリカゲルの床を通して濾過し、そして真空下で濃縮して、Ｎ−保護されＮ−メチル化された化合物28を得る。このようにする代わりに、Ｎ−保護されＮ−メチル化された化合物28は、スキームＧの工程ｄおよびｅに記載した操作によって、構造27の酸から製造することができる。スキームＧの工程ｄにおいては、酸27を環化して構造27aによって記載されるオキサゾリジンを得る。例えば、酸27を適当な有機溶剤、例えばベンゼンに溶解し、そして過剰のパラホルムアルデヒドで処理する。これにｐ−トルエンスルホン酸約0.2〜0.4当量を加え、そして反応混合物をジェーン−スタークトラップを使用して水を連続的に除去しながら、約23時間加熱還流する。それから反応混合物を室温に冷却し、そして生成物を単離し、当該技術において公知の技術によって精製する。例えば、冷却した反応混合物を真空下で濃縮し、残留物を適当な有機溶剤、例えば酢酸エチルにとり、飽和重炭酸ナトリウムですすぎ、有機相を無水の硫酸マグネシウム上で乾燥し、濾過し、そして真空下で濃縮する。それから残留物を適当な溶離剤、例えば酢酸エチル／ヘキサンを使用してシリカゲル上でフラッシュクロマトグラフィー処理することにより精製して、オキサゾリジン27aを得る。スキームＧの工程ｅにおいては、オキサゾリジン27aを、当該技術において公知の条件下で還元して、Ｎ−保護され、Ｎ−メチル化された化合物28を得る。例えば、オキサゾリジン27aを適当な有機溶剤、例えばクロロホルムに溶解し、そして過剰のトリフルオロ酢酸で処理する。この溶液に、室温で撹拌しながら、過剰のトリエチルシランを加える。反応混合物を１〜７日間撹拌し、そしてそれから真空下で濃縮して、Ｎ−保護され、Ｎ−メチル化された化合物28を得る。以下の実施例は、スキームＡ〜Ｇに記載したような典型的な合成を示す。これらの実施例は、単に説明のためのものであって、本発明の範囲を如何なる点においても限定するものでないことは理解されるべきである。NMRスペクトルは、¹³C に対しては75MHz、¹⁹Fに対しては282MHzおよび¹Hに対しては300MHzにおいて記録した。¹⁹F NMRシグナルは、CFCl₃からのppmで記録した。MSおよびHRMSデータは、HRMSリファレンスとしてパーフルオロケロセンによるコンピューター化ピークマッチングを使用して70eVで記録した。 TLC分析は、アルカリ性過マンガン酸塩およびUV照射による可視化を使用して、M erck DC-F₂₅₄またはAnaltech GHLFシリカゲルプレートで遂行した。フラッシュクロマトグラフィーは、Merckシリカゲル60（0.040-0.063mm）で遂行した。CF₃C F₂Liは、Richmond Chemical Companyから得られたCF₃CF₂Iを使用してGassman & O'Reilly，J．Org．Chem．52，2481-2490(1987)に記載されているようにして形成した。トリプトファン化合 1699-1700(1984)〕を利用した。本明細書において使用される次の用語は、以下に示した意義を有する。“ｇ” はグラムを意味し；“mmol”はミリモルを意味し；“ml”はミリリットルを意味し；“bp”は沸点を意味し；“mp”は融点を意味し；“℃”は摂氏度を意味し； “mmHg”は水銀のミリメーターを意味し；“μｌ”はミクロリットルを意味し； “μg”はミクログラムを意味し、そして“μM”はミクロモルを意味する。実施例１ (Ｓ)−３−〔２−〔〔（1,1−ジメチルエトキシ）カルボニル〕アミノ〕−4,4,5 ,5,5−ペンタフルオロ−３−オキソペンチル〕−1H−インドール−１−カルボン酸1,1−ジメチルエチルエステル(Ｃ)；および(Ｓ)−〔3,3,4,4,4−ペンタフルオロ−１−(1H−インドール−３−イルメチル)−２−オキソブチル〕−カルバミン酸1,1−ジメチルエチルエステル(Ｄ)の製造スキームＡの工程ａ；窒素雰囲気下そして−60℃（内部温度計）に冷 Soc.，1699-1700，1984)(7.15ｇ、17.08ミリモル)の撹拌溶液に、凝縮したCF₃CF₂ I（6.85ml、58.09ミリモル）を加えた。内部反応温度を−52℃〜−62℃の間に維持するような速度で、MeLi-LiBr(Et₂O中の1.5Ｍ溶液37.6ml、56.36ミリモル) を加える。添加完了後に、反応混合物を−55℃〜−60℃で１時間撹拌する。−55 ℃より下の内部反応温度を維持するような速度でイソプロパノール（4.31ml、56 .3ミリモル）を加えることによって、反応をクエンチする。反応混合物を−35℃ に加温し、そしてそれから反応混合物を10％水性KHSO₄(100ml)に注加する。層を分離し、有機層を10％水性KHSO₄（50ml）およびブライン（25ml）で洗浄し、そしてMgSO₄で乾燥する。濾過および濃縮して粗製生成物ＣおよびＤを得る。溶離剤としてヘキサン中のEtOAcの勾配（15〜25％）を使用してフラッシュクロマトグラフィー処理（シリカゲルカラム7.5×19cm）して、黄色のフォーム状物としてＣ（5.43ｇ、63％）および淡黄色の固体としてＤ（1.50ｇ、22％）を得た。化合物Ｃ： TLC R_f 0.37(25:75 EtOAc：ヘキサン)；¹H NMR（CDCl₃，３日，ケトンのみ，主ロータマー）δ 8.14(br d，1H，J=7.9Hz，H₇)，7.50(ddd，1H，J=0.8，1.1，7. 8Hz，H₄)，7.42(br s，1H，H₂)，7.35(ddd，J=1.3，7.4，8.4Hz，H₆)，7.27(dt ，J=1.0，7.8Hz，H₅)，5.15-5.05(m，1H，CH)，4.99(br d，1H，J=7.6Hz，NH)， 3.36(dd，1H，4.7，15.0Hz，1/2 CH₂)，3.04(dd，1H，J=7.5，15.0Hz，1/2 CH₂) ，1.67(s，9H，Nⁱⁿ-Boc)，1.38(s，9H，Boc)；¹⁹F NMR（CDCl₃，３日，ケトンのみ，主ロータマー）δ-82.06(s，CF₃)，-120.85および-122.48(pr d，J=297Hz， CF₂)；MS(CI，NH₃)m／z（相対強度）524(100，M＋NH₄ ⁺)，507(3，M＋)，468(30) ，412(17)，230(32)，130(54)。分析(C₂₃H₂₇F₅N₂O₅・0.34 H₂O)C，H，N。化合物Ｄ：融点＝135-141℃；TLC R_f 0.15(25:75 EtOAc：ヘキサン)；¹HMR（DMSO-d₆＋D₂O ，水和物のみが存在）δ 7.44-7.50(m，1H)，7.32-7.26(m，1H)，7.06-6.90(m， 3H)，4.15-4.08(m，0.3H，ロータマーＡのCH)，3.98-3.91(m，0.7H，ロータマーＢのCH)，3.16(dd，0.3H，J=1.8，14.2Hz，ロータマーＡの1/2 CH₂)，3.12(dd， 0.7H，J=1.6，14.5Hz，ロータマーＢの1/2 CH₂)，2.75(dd，0.7H，J=11.7，14.6 Hz，ロータマーＢの1/2 CH₂)，2.58(dd，0.3H，J=11.9，14.2Hz，ロータマーＡの1/2 CH₂)，1.10(s，6.3H，ロータマーＢのBoc)，0.67(s，2.7H，ロータマーＡのBoc)；¹⁹F NMR(DMSO-d₆＋D₂O，水和物のみが存在)δ-77.54(s，ロータマーＢのCF₃)，-77.63(s，ロータマーＡのCF₃)，-121.46および-123.59(pr d，J=276Hz ，ロータマーＢのCF₂)，-121.46および-123.35(pr d，J=267Hz，ロータマーＡのCF₂)；MS (CI，NH₃)m／z(相対強度)424(37，M＋NH₄ ⁺)，368(100)，130(40)。分析(C₁₈H₁₉F₅N₂O₃・0.34 H₂O)C，H，N。実施例２ (Ｓ)−３−（２−アミノ−4,4,5,5,5−ペンタフルオロ−３−オキソペンチル） −1H−インドール−１−カルボン酸1,1−ジメチルエチルエステルモノ塩酸塩の製造スキームＡの工程ｂ；ジオキサン（5.0ml）中の4.0Ｎ塩化水素を、窒素雰囲気下でジオキサン（2.4ml）中の実施例１からの化合物Ｃ（1.04ｇ、2.00ミリモル）の撹拌溶液に徐々に加える。１時間後に得られた懸濁液を吸引濾過し、そして集めた固体をEt₂O（３×10ml）で洗浄する。灰白色の固体を高真空下KOHペレット上で乾燥して、ケトンおよび水和物（比２：３）の混合物として標記化合物19 5mg（22％）を得た。標記化合物の不安定性のため、標記化合物は直ぐに次の工程に使用する。上記からの合した濾液を稀釈し冷凍して、追加的な標記化合物（ 571mg、64％）を得た。¹ H NMR（CDCl₃）δ 8.79(br s)，7.99(br，d，1H，J=6.6Hz)，7.88-7.66(m)，7. 51(d，0.4H，J=7.4Hz，ケトンのAr-H)，7.41(d，0.6H，J=7.4Hz，水和物のAr-H) ，7.28-7.12(m，2H)，6.48(br s，水和物 OH)，5.10-4.96 (m，0.4H，ケトンのCH)，3.75-3.93(m，0.6H，ケトンのCH)，3.63-3.10(m，2H， CH₂)，1.55(s，9H，Boc)；¹⁹F NMR(CDCl₃)δ-79.48(s，水和物のCF₃)，-81.77(s ，ケトンのCF₃)，-119.56および-122.40(pr d，J=297Hz，ケトンのCF₂)，-123.3 8(br s，水和物のCF₂)；MS(CI，NH₃)m／z（相対強度）424(21，M＋NH₄ ⁺)，407(4 2，MH＋)，387(100)。実施例３ (Ｓ)−Ｎ−〔(1,1−ジメチルエトキシ)カルボニル〕−Ｎ−メチル−Ｄ−フェニルアラニル−Ｎ−〔１−〔〔１−〔(1,1−ジメチルエトキシ)カルボニル〕−1H −インドール−３−イル〕メチル〕−3,3,4,4,4−ペンタフルオロ−２−オキソブチル〕−Ｌ−プロリンアミドの製造スキームＡ、工程ｃ；窒素雰囲気下そして−18℃に冷却したEtOAc(３ml)中のＮ−Boc−Ｎ−メチル−Ｄ−Phe−Ｌ−Pro−OH(1994年11月10日に公開されたVebe r等、PCT特許出願公開No．WO94／25051)(0.15ｇ、0.41ミリモル)の撹拌溶液に、Ｎ−メチルモルホリン（45μl、0.41ミリモル）次いでクロロギ酸イソブチル（5 3μl、0.41ミリモル）を加える。15分後に、さらにＮ−メチルモルホリン（45μ l、0.41ミリモル）次いで実施例２の生成物（0.18ｇ、0.41ミリモル）を加える。反応混合物を−15℃〜−20℃で４時間撹拌し、EtOAc（50ml）でうすめ、そして10％水性クエン酸（２ ×25ml）、半飽和水性NaHCO₃（２×15ml）およびブライン（25ml）で洗浄する。乾燥（MgSO₄）し、次いで濾過および濃縮して粗製生成物を得る。溶離剤としてE tOAc−ヘキサン（45：55）を使用してフラッシュクロマトグラフィー処理（シリカゲルカラム 2.5×12cm）して、淡黄色のフォーム状物として標記化合物（ケトンおよび水和物の混合物、0.16ｇ、52％）を得た。 TLC R_f 0.34(45：55 EtOAc：ヘキサン)；¹⁹F NMR(CDCl₃)δ-79.27(s，水和物のC F₃)，-82.09(s，ケトンのCF₃)，-122.81および-124.74(pr d，J=275Hz，水和物のCF₂)，-121.75〜-121.90(m，ケトンのCF₂)，ケトン：水和物の比＝２：３；MS (CI，NH₃)m／z（相対強度）782(30，M＋NH₄ ⁺)，765(45，MH＋)，205(92)，122(1 00)； HRMS C₃₈H₄₆F₅N₄O₇(MH＋)計算値 765.3287，実測値 765.3281。実施例４ (Ｓ)−Ｎ−メチル−Ｄ−フェニルアラニル−Ｎ−〔１−〔(１−カルボキシ−1H −インドール−３−イル)メチル〕−3,3,4,4,4−ペンタフルオロ−２−オキソブチル〕−Ｌ−プロリンアミドモノ（トリフルオロ酢酸）塩の製造スキームＡ、工程ｄ；窒素雰囲気下で、実施例３の生成物（150mg、0.2 ミリモル）に、CF₃CO₂H（２ml）を加え、そして得られた溶液を３分間撹拌する。溶剤を除去し、残留物をEt₂O（３ml）に溶解し、そしてヘキサン（20ml）を撹拌しながら徐々に加える。窒素雰囲気下で吸引濾過して、灰白色の固体として標記化合物（117mg、82％）を得た。標記化合物は、脱カルボキシル化に対して不安定である。¹ H NMR(CDCl₃，NCH₃シグナルのみ)δ 2.44(s，3H，NCH₃)；¹⁹F NMR(CDCl₃)δ -8 2.11(s，ケトンのCF₃)，-121.60〜-122.91(m，ケトンのCF₂)；MS(FAB，MNBA)m／ z（相対強度）609.2(MH＋，46)，565.2(MH-CO₂ ⁺，81)，448.2(6)，404.2(38)，1 34.1(100)。実施例５Ｎ−メチル−Ｄ−フェニルアラニル−Ｎ−〔3,3,4,4,4,−ペンタフルオロ−１− （1H−インドール−３−イルメチル）−２−オキソブチル〕−Ｌ−プロリンアミドモノ（トリフルオロ酢酸）塩の製造スキームＡ、工程ｅ；実施例４の生成物（82mg、0.1ミリモル）をCHCl₃に溶解し、48時間撹拌する。溶剤を除去し、そして残留物をCH₂Cl₂−ヘキサンに溶解し、それから濃縮して、明るい黄色の固体として標記化合物(DLLおよびDLDジアステレオマーの１：１混合物、76mg、100％)を得た。TLC R_f 0.66(５：95 Et₃N：C H₃CN)；TLC R_f 0.12(５：95 Et₃N：EtOAc)；¹H NMR(CDCl₃)δ 9.69(s，0.5H，DL LジアステレオマーのNⁱⁿ-H)，9.26(s，0.5H，DLDジアステレオマーのNⁱⁿ-H)，8. 18(br d，0.5H，J=6.4Hz，DLDジアステレオマー)，7.61-7.02(m)，5.11(dd，0.5 H，J=5.8，11.8Hz，DLDジアステレオマーのTrpのCH)，5.04(dt，0.5H，J=3.6，1 0.9Hz，DLLジアステレオマーのTrpのCH)，4.54(dd，0.5H，J=2.0，7.7Hz，DLDジアステレオマーのProのCH)，4.42(dd，0.5H，J=1.9，7.8Hz，DLLジアステレオマーのProのCH)，4.03(dd，0.5H，J=4.2，11.2Hz，DLDジアステレオマーのPheのCH )，3.97(dd，0.5H，J=4.4，11.3Hz，DLLジアステレオマーのPheのCH)，3.5-2.9( m)，2.23(s，1.5H，DLDジアステレオマーのNCH₃)，2.10-1.90(m)， 1.93(s，1.5H，DLLジアステレオマーのNCH₃)，1.70-1.65(m)，1.50-1.22(m)；¹⁹ F NMR(CDCl₃)δ -82.11(s，DLLジアステレオマーのCF₃)，-82.34(s，DLDジアステレオマーのCF₃)，-120.22および-123.54(pr d，J=294Hz，DLDジアステレオマーのCF₂)，-121.92(s，DLLジアステレオマーのCF₂)，DLD：DLLの比＝１：１；MS (CI，NH₃)m／z（相対強度）565(MH＋，100)，547(39)，436(15)，276(12)，259( 8)； HRMS C₂₈H₃₀F₅N₄O₃(MH＋)計算値 565.2238，実測値 565.2253。実施例６〔2S-〔1(S^*),2R^*〕〕−Ｎ−〔3,3,4,4,4-ペンタフルオロ−１−（1H-インドール−３−イルメチル）−２−オキソブチル〕−１−〔(1,2,3,4−テトラヒドロ− ３−イソキノリニル）カルボニル〕−２−ピロリジンカルボキサミドモノ（トリフルオロ酢酸）塩の製造 (a) Boc-D-3-Tiq-Pro-Trp(Boc)-CF₂CF₃の製造スキームＥ、工程ａ；窒素雰囲気下そして−18℃に冷却したEtOAc(３ml)中のB oc-D-3-Tiq-Pro-OH(1995年２月21日発行のNeises等の米国特許第5,391,705号)(0 .15ｇ、0.41ミリモル)の撹拌溶液を、Ｎ−メチルモルホリン（45μl、0.41ミリモル）次いでクロロギ酸イソブチル（53μl、0.41ミリモル）と接触させ、そして実施例３に記載した方法と同様な方法で実施例２の生成物（0.18ｇ、0.41ミリモル）にカップリングさせて標記化合物を得た。 (b) D-3-Tiq-Pro-Trp(COOH)-CF₂CF₃モノ（トリフルオロ酢酸）塩の製造スキームＥ、工程ｂ；実施例６(a)の生成物（150mg、0.2ミリモル）を、実施例４に記載された方法と同様な方法で、CF₃CO₂H（２ml）、Et₂O(３ml)およびヘキサン（20ml）で脱保護して標記化合物を得た。 (c) 〔2S-〔1(S^*),2R^*〕〕−Ｎ−〔3,3,4,4,4-ペンタフルオロ−１−（1H−インドール−３−イルメチル）−２−オキソブチル〕−１−〔(1,2,3,4−テトラヒドロ−３−イソキノリニル）カルボニル〕−２−ピロリジンカルボキサミドモノ（トリフルオロ酢酸）塩の製造スキームＡ、工程ｅ；実施例６(ｂ)の生成物（82mg、0.1ミリモル）を、実施例５に記載した方法と同様にして、CHCl₃（２ml）およびCH₂Cl₂−ヘキサンで脱カルボキシル化して標記化合物を得た。実施例７〔2S-〔1(S^*),2R^*〕〕−Ｎ−〔3,3,4,4,4-ペンタフルオロ−１−（1H−インドール−３−イルメチル）−２−オキソブチル〕−１−〔(1,2,3,4-テトラヒドロ− １−イソキノリニル）カルボニル〕−２−ピロリジンカルボキサミドモノ（トリフルオロ酢酸）塩の製造 (a) Boc-D-1-Tiq-Pro-Trp(Boc)-CF₂CF₃の製造スキームＥ、工程ａ；窒素雰囲気下そして−18℃に冷却したEtOAc(３ml)中のB oc-D-1-Tiq-Pro-OH(1995年２月21日発行のNeises等の米国特許第5,391,705号)(0 .15ｇ、0.41ミリモル)の撹拌溶液を、Ｎ−メチルモルホリン（45μl、0.41ミリモル）次いでクロロギ酸イソブチル（53μl、0.41ミリモル）と接触させ、そして実施例３に記載した方法と同様な方法において実施例２の生成物（0.18ｇ、0. 41ミリモル）にカップリングさせて標記化合物を得た。 (b) D-1-Tiq-Pro-Trp(COOH)-CF₂CF₃モノ（トリフルオロ酢酸）塩の製造スキームＥ、工程ｂ；実施例７(ａ)の生成物（150mg、0.2ミリモル）を、実施例４に記載した方法と同様な方法において、CF₃CO₂H（２ml）、Et₂O（３ml）およびヘキサン（20ml）で脱保護して標記化合物を得た。 (c) 〔2S-〔1(S^*),2R^*〕〕−Ｎ−〔3,3,4,4,4-ペンタフルオロ−１−（1H−インドール−３−イルメチル）−２−オキソブチル〕−１−〔(1,2,3,4−テトラヒドロ−１−イソキノリニル）カルボニル〕−２−ピロリジンカルボキサミドモノ（トリフルオロ酢酸）塩の製造スキームＡ、工程ｅ；実施例７(b)の生成物（82mg、0.1ミリモル）を、実施例５に記載した方法と同様な方法において、CHCl₃（２ml）およびCH₂Cl₂−ヘキサンで脱カルボキシル化して標記化合物を得た。実施例８３−シクロヘキシル−Ｎ−メチル−Ｄ−アラニル−Ｎ−〔3,3,4,4,4−ペンタフルオロ−１−（1H−インドール−３−イルメチル）−２−オキソブチル〕−Ｌ− プロリンアミドモノ（トリフルオロ酢酸）塩の製造 (a) N-Boc-N-メチル-D-Cha-OHの製造スキームＧ、工程ｃ；Boc-D-Cha-OH（10.8ｇ、40ミリモル）をTHF（200ml）に溶解し、そして溶液を０℃に冷却する。水素化ナトリウム（油中の60％分散液、 4.8ｇ、120ミリモル）を、１時間にわたって少量ずつ加え、20分間撹拌する。それから沃化メチル（19.7ml、316ミリモル）を加え、反応混合物を０℃で３時間そして室温で一夜にわたって撹拌する。反応混合物を０℃に再冷却し、そして徐々に水（100ml）を加える。濃縮してTHFを除去し、そして混合物をジエチルエーテル（２×150ml）で洗浄する。水性層を6N HClで酸性化して約pH３となし、そして酢酸エチル(４×100ml)で抽出する。有機抽出液を合し、５％チオ硫酸ナトリウム（100ml）、ブライン（100ml）で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥し、そして真空下で濃縮して標記化合物を得た。 (b) N-Boc-N-メチル-D-Cha-Pro-OCH₃の製造スキームＡ、工程ｃ；HCl・Pro-OCH₃（0.33ｇ、2.0ミリモル）をDMF（20ml）に溶解し、そして溶液を０℃に冷却する。トリエチルアミン（0.31ml、2.2ミリモル）を加え、10分間撹拌する。それから実施例８(ａ)の生成物（THF 100mlに溶解、2.0ミリモル）を加え、次いでHOBt・1H₂O（0.27ｇ、2.0ミリモル）およびEDC （0.40ｇ、2.1ミリモル）を加える。反応混合物を０℃で３時間、それから室温で一夜にわたって撹拌する。反応混合物を真空下で濃縮し、そして残留物を1N HCl（100ml）にとり、酢酸エチル（３×100ml）で抽出する。有機抽出液を合し、飽和重炭酸ナトリウム（100ml）、ブライン（100 ml）ですすぎ、無水の硫酸マグネシウム上で乾燥し、シリカゲルの短い床を通過させ、そして真空下で濃縮する。残留物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製して標記化合物を得る。 (c) N-Boc-N-メチル-D-Cha-Pro-OHの製造スキームＧ、工程ｂ；実施例８(ｂ)の生成物（4.0ｇ、10.2ミリモル）をTHF（ 100ml）および水（50ml）に溶解する。水酸化リチウムモノ水和物（900mg、21.5 ミリモル）を加え、そして反応混合物を室温で一夜にわたって撹拌する。濃縮してTHFを除去し、それから残留物をジエチルエーテル（２×100ml）で洗浄し、そして水性層を6N HClで酸性化してpH３にする。それから酸性化した水性層を酢酸エチル（３×100ml）で抽出する。有機抽出液を合し、無水の硫酸マグネシウム上で乾燥し、そして濾液を真空下で濃縮して標記の酸を得た。 (d) N-Boc-N-メチル-D-Cha-L-Pro-Trp(Boc)-CF₂CF₃の製造スキームＡ、工程ｃ；窒素雰囲気下そして−18℃に冷却したEtOAc(３ml)中実施例８(ｃ)の生成物（0.16ｇ、0.41ミリモル）の撹拌溶液をＮ−メチルモルホリン（45μl、0.41ミリモル）次いでクロロギ酸イソブチル（53μl、0.41ミリモル）と接触させ、そして実施例３に記載した方法と同様な方法において、実施例２の生成物（0.18ｇ、0.41ミリモル）にカップリングさせて標記化合物を得た。 (e) N-メチル-D-Cha-L-Pro-Trp(COOH)-CF₂CF₃モノ（トリフルオロ酢酸）塩の製造スキームＡ、工程ｄ；実施例８(ｄ)の生成物（154mg、2.0ミリモル）を、実施例４に記載した方法と同様な方法において、CF₃CO₂H（２ml）、Et₂O（３ml ）およびヘキサン（20ml）で脱保護して標記化合物を得た。 (f) ３−シクロヘキシル−Ｎ−メチル−Ｄ−アラニル−Ｎ−〔3,3,4,4,4−ペンタフルオロ−１−（1H−インドール−３−イルメチル）−２−オキソブチル〕− Ｌ−プロリンアミドモノ（トリフルオロ酢酸）塩の製造スキームＡ、工程ｅ；実施例８(ｅ)の生成物（73mg、0.1ミリモル）を、実施例５に記載した方法と同様な方法において、CHCl₃（２ml）およびCH₂Cl₂−ヘキサンで脱カルボキシル化して標記化合物を得た。さらに他の実施例においては、本発明は式(Ｉ)または(ＩＡ)の化合物の治療的に有効な量を患者に投与することからなる、トロンビンの阻害を必要とする患者におけるトロンビンを阻害する方法または罹患した患者のトロンビン状態を治療または予防する方法を提供する。“トロンビン状態”なる用語は、血栓または塞栓形成を特徴とする疾患または状態を意味し、そして限定するものではないが、冠状動脈および脳血管疾患、深部静脈血栓症、肺動脈塞栓症、発作（血栓症または塞栓症源）、心筋梗塞、不安定性または難治性アンギナ、血管形成術後の冠状動脈血栓症、再狭窄などを包含する。この分野に経験を有するものは、トロンビン阻害剤および（または）抗凝固剤治療を必要とする情況について容易に知ることができる。トロンビン状態の治療に対して特に好ましい式(Ｉ)および(ＩＡ)の化合物には、以下の表５および６に開示されている化合物が含まれる。トロンビン状態の治療に対してもっとも好ましい化合物は、Ｎ−メチル−Ｄ−フェニルアラニル−Ｎ −〔3,3,4,4,4−ペンタフルオロ−１−（1H−インドール−３−イルメチル）− ２−オキソブチル〕−Ｌ−プロリンアミドモノ（トリフルオロ酢酸）塩である。本明細書において使用される“患者”なる用語は、哺乳動物のような温血動物であり、そしてモルモット、犬、猫、ラット、マウス、馬、牛、羊およびヒトがこの用語の意義の範囲内の哺乳動物の例であることは理解されるべきである。 “治療的に有効な量”なる用語は、患者に対する連続した注入によってまたは単一のもしくは多数回の用量投与によって、血栓または塞栓の大きさを減少またはトロンビン状態に関連した損傷の程度を低下して、治療しない場合において予期される結果に比較して改善された結果および（または）疾患進行の遅延または阻止を招くのに有効な量を意味する。“治療的に有効な量”なる用語は、必ずしも完全に疾患を除去または治療することを示すものではない。治療的に有効な量または投与量の決定においては、限定するものではないが、哺乳動物の種類；その大きさ、年令および一般的健康；関係する特定の疾患；疾患の程度；個々の患者の応答；投与される特定の化合物；投与の型式；投与される製剤の生物学的利用能特性；選定される投与レジメン；付随的な医薬の使用；および他の関連した情況を包含する多数の因子が担当診断医師によって考慮される。式(Ｉ)または(ＩＡ)の化合物の治療的に有効な量は、１日につき体重１kg当り約25mg（約25mg／kg／日）〜約200mg／kg／日の間で変わる。好ましい量は、約4 0〜70mg／kg／日の間で変わる。静脈内には、もっとも好ましい投与量は、一定速度の注入の間、約0.1〜20mg／kg／分の範囲にある。本発明の化合物は、トロンビンの選択的阻害剤である。本発明の化合物は、酵素トロンビンの阻害によって薬理学的作用を示し、そしてそれによって冠状動脈および脳血管疾患、深部静脈血栓症、肺動脈塞栓症、発作（血栓症または塞栓症源）、心筋梗塞、不安定性または難治性アンギナ、血管形成術後の冠状動脈血栓症、再狭窄などを包含するトロンビン状態を遅延または阻止するものと信じられる。しかしながら、本発明が最終用途での適用におけるその有効性を説明する特定の理論または提案された機構に限定されないことは理解されるべきである。上述した疾患に罹患した患者の有効な治療において、式(Ｉ)の化合物は、経口的および非経口的経路を包含する、化合物を有効な量で生物学的に利用することを可能にする形態または方法で投与することができる。例えば、式(Ｉ)の化合物は、経口的、皮下、筋肉内、静脈内、経皮的、鼻内、直腸的、局所的などに投与することができる。経口的または静脈内投与が一般的に好ましい。処方を製造する技術に精通する者は、治療すべき疾患に対して選択された化合物の特性、疾患の段階および他の関連した情況によって、適当な形態および投与方法を容易に選定することができる。 Remington's Pharmaceutical Sciences，18th Edition，Mack Publishing Co.(1 990)。本化合物は、単独でまたは医薬的に許容し得る担体または賦形剤と組み合わされた医薬組成物の形態で投与することができる。これらの担体または賦形剤の割合および性質は、選定された化合物の溶解性および化学的性質、選定された投与経路および標準製薬プラクチスによって決定される。本発明の化合物は、それ自体で有効であるけれども、安定性、結晶化の便利さ、増加した溶解度などのために、医薬的に許容し得る塩、例えば酸付加塩の形態で処方しそして投与することができる。他の実施化においては本発明は、１種または２種以上の不活性担体と混合されたまたは一緒にされた式(Ｉ)または(ＩＡ)の化合物からなる組成物を提供する。これらの組成物は、例えば検査標準として、バルク輸送を可能にする有利な手段として、または貯蔵した全血の凝固を阻止するようなおよび試験または貯蔵のための他の生物学的試料における凝固を阻止するような血液凝固の阻止が必要である場合に有用である。すなわち、トロンビン阻害剤は、トロンビンを含有するかもしくはトロンビンを多分含有していると思われる媒質に加えるか、または該媒質と接触させることができ、そして例えば哺乳動物の血液が血管移植片、ステント、整形プロテーゼ、心臓プロテーゼおよび体外循環系からなる群から選択された物質と接触する場合に、血液凝固が阻止されるということが望ましい。式(Ｉ)または(ＩＡ)の化合物の抗凝固量は、血液を液状状態に維持する量である。式(Ｉ)または(ＩＡ)の化合物の抗凝固量は、一般に約45μM〜約1,000μMの間で変わる。式(Ｉ)または(ＩＡ)の化合物の好ましい抗凝固量は、約90μM〜約3 00μMである。不活性担体は、式(Ｉ)または(ＩＡ)の化合物を分解しない、またはこれらの化合物と共有的に反応しない何れかの物質であることができる。適当な不活性担体の例は、水；一般に高速液体クロマトグラフィー（HPLC）分析において有用であるような水性緩衝液；有機溶剤、例えばアセトニトリル、酢酸エチル、ヘキサンなど；および医薬的に許容し得る担体または賦形剤である。さらに特に本発明は、１種または２種以上の医薬的に許容し得る担体または賦形剤と混合された、または一緒にされた式(Ｉ)または(ＩＡ)の化合物の治療的に有効な量からなる医薬組成物を提供する。医薬組成物は、製薬技術において公知の方法で製造される。担体または賦形剤は、活性成分に対するベヒクルまたは媒質として役立つことのできる固体、半固体または液状の物質である。適当な担体または賦形剤は、当該技術において公知である。医薬組成物は、経口的、非経口的または局所的使用に適しており、そして錠剤、カプセル、坐剤、溶液、懸濁液などの形態で患者に投与することができる。本発明の化合物は、例えば不活性稀釈剤または可食担体と一緒に経口的に投与することができる。これらはゼラチンカプセルに封入するか、または錠剤に圧縮することができる。経口的治療投与の目的に対して、化合物は賦形剤と混合され、そして錠剤、トローチ、カプセル、エリキサー、懸濁液、シロップ、ウエハース、チューインガムなどの形態で使用することができる。これらの製剤は、特定の形態によって変えることができるけれども、活性成分として本発明の化合物少なくとも４％を含有しなければならずそして有利には、単位の重量の４〜 70％の間にあることができる。組成物中に存在する化合物の量は、適当な投与量が得られるような量である。本発明による好ましい組成物および製剤は、経口的投与単位が本発明の化合物5.0〜300mgを含有するように製造される。錠剤、ピル、カプセル、トローチなどはまた、１種または２種以上の次の補助剤を含有することができる：結合剤、例えば微小結晶性セルロース、トラガントゴムまたはゼラチン；賦形剤、例えば澱粉またはラクトース；崩壊剤、例えばアルギン酸、プリモゲル、とうもろこし澱粉など；滑沢剤、例えばステアリン酸マグネシウムまたはステロテックス；滑剤、例えばコロイド二酸化珪素；および甘味剤、例えばスクロースまたはサッカリン；風味剤、例えばペパーミント、サリチル酸メチルまたはオレンジ風味料。投与単位形態がカプセルである場合は、それは上記の型の物質のほかに、液状担体、例えばポリエチレングリコールまたは脂肪油を含有することができる。他の投与単位形態は、投与単位の物理的形態を変性する他の種々な物質、例えばコーティングを含有することができる。すなわち、錠剤またはピルは、糖、シェラックまたは他のエンテリック被覆剤で被覆することができる。シロップは本化合物のほかに、甘味剤としてのスクロース、およびある防腐剤、染料および着色剤および風味料を含有することができる。これらの種々な組成物の製造に使用される物質は、医薬的に純粋であり、そして使用される量において非毒性であらねばならない。非経口的治療投与の目的に対しては、本発明の化合物を溶液または懸濁液中に混入させることができる。これらの製剤は、本発明の化合物少なくとも0.1％を含有しなければならないが、製剤の重量の0.1〜約50％の間に変化することができる。このような組成物中に存在する本発明の化合物の量は、適当な投与量が得られるような量である。本発明による好ましい組成物および製剤は、非経口的投与単位が本発明の化合物5.0〜100mgを含有するように製造される。本発明の式(Ｉ)または(ＩＡ)の化合物はまた、局所的に投与することもでき、そのようにする場合は、担体は好ましくは、溶液、軟こうまたはゲル基材からなる。例えば基材は、１種または２種以上の次の物質からなる：ワセリン、ラノリン、ポリエチレングリコール、みつろう、鉱油、稀釈剤、例えば水およびアルコール、並びに乳化剤、および安定剤。局所用処方は、約0.1〜10 ｗ／ｖ（重量／単位容量）％の濃度の式(Ｉ)もしくは(ＩＡ)の化合物またはその医薬的塩を含有する。溶液または懸濁液はまた、１種または２種以上の次の補助剤を含有することができる：滅菌稀釈剤、例えば注射用の水、生理食塩溶液、不揮発性油、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコールまたは他の合成溶剤；抗菌剤、例えばベンジルアルコールまたはメチルパラベシ；抗酸化剤、例えばアスコルビン酸または重亜硫酸ナトリウム；キレート剤、例えばエチレンジアミン四酢酸；緩衝剤、例えば酢酸塩、クエン酸塩または燐酸塩、および緊張性の調節剤、例えば塩化ナトリウムまたはデキストロース。非経口的製剤は、ガラスまたはプラスチックから製造されたアンプル、使い捨て注射器または多数回投与バイアルに封入することができる。試験管内阻害検査本発明の化合物は、トリプシンのような他のセリンプロテアーゼと対比して、高度に選択的なトロンビン阻害剤である。例えば、式(Ｉ)および(ＩＡ)の化合物のトロンビン阻害活性は、Tuppy等、Hoppe-Seyler's Z ．Physiol．Chem.，329 ， p．278(1962)の方法による分光測光検査を使用して証明することができる。この方法においては、405nmにおける吸光度（ε＝10800M^-1cm^-1）の増加を測定することによって、ｐ−ニトロアニリンの遊離を測定する。トロンビンはヒト血漿から得られ、Sigma Chemical Co.から入手できる。活性度は、NIH単位で表示される。１バイアルは、水１mlで再構成される凍結乾燥された粉末として290単位（比活性＝蛋白質１mg当り3000単位）を含有する。基質は発色ペプチドサルコシル −プロリン−アルギニン−ｐ−ニトロアニリド（K_M＝0.9mM）であり、緩衝液は0 .1Ｍトリス(pH7.4)(最終容量１ml)であり、そして検査は約30℃の温度で実施され、１回の検査当り酵素の0.029NIH単位が必要である。即時型阻害剤の動力学的確認は、Dixonプロットにより、そしてこれに反して、緩慢におよび（または）強固に結合する阻害剤の確認は、WilliamsおよびMorrisonにより検討されたデータ分析技術を使用する。時間依存性阻害剤の動力学的確認は、Kitz & Wilsonプロット、Kitz R.およびWilson I.B.，J ．Biol．Chem.，237，3245-3249(1962)による。式(Ｉ)および(ＩＡ)の化合物のトリプシン阻害活性は、上述したTuppy等、Hop pe-Seyler's Z ．Physiol．Chem .，329，p．278(1962)の方法による分光測光検査を使用して証明することができる。トリプシンは豚の膵臓から得られ、Sigma Ch emical Co.から入手できる。活性度は、シグマ単位で表示される。トリプシン源の比活性は、蛋白質１mg当り15900シグマ単位であり、１単位はpH7.6および25℃ におけるベンゾイル−アルギニン− エチルエステルの加水分解の結果として１分当り0.001の253nmにおける吸光度の増加をもたらす酵素の量として定義される。基質はペプチドベンゾイル−アルギニン−ｐ−ニトロアニリド（K_M＝1.7mM）であり、緩衝液は0.05Ｍトリス、0.05 Ｍ CaCl₂(pH7.8)(最終容量１ml)であり、そして検査は30℃の温度で実施され、１回の検査当り酵素の８シグマ単位が必要である。即時型阻害剤の動力学的確認はDixonプロットにより、そしてこれに反して緩慢におよび(または)強固に結合する阻害剤の確認は、WilliamsおよびMorrisonにより検討されたデータ分析技術を使用する。時間依存性阻害剤の動力学的確認は、Kitz & Wilsonプロットによる。表２は、トリプシンと対比してトロンビンを選択的に阻害する本発明の選択された化合物の能力を要約する。本明細書において“TFA”はトリフルオロ酢酸を意味する。抗凝固活性の測定実験動物 Harlan Sprague Dawley Inc.(インジアナポリス、IN 46 229)から購入した雄のスプラグ−ダウレーラット（200〜450ｇ）を、これらの研究に使用した。凝固検査活性化部分トロンボプラスチン時間（aPTT）測定を、Dade Diagnos tics Inc.（Aguada，Puerto Rico 00602）の試薬および方法を使用して実施する。全血液凝固時間は、MLA-Electra 750，MLA Inc．（Pleasantville，NY 10570 ）を使用して半自動的に測定した。凝固時間を２倍にするのに必要な濃度（ID₂ ）を、簡単な線状回帰を使用して計算した。表３は、本発明の選択された化合物の抗凝固活性を示す。ラットの血漿における活性化部分トロンボプラスチン時間（aPTT）の生体内測定活性化部分トロンボプラスチン時間（aPTT）測定をラットの血漿において、ラットにTFA・HNMe-D-Phe-L-Pro-D,L-Trp-CF₂CF₃を注射した後の種々な時間で実施した。Harlan Sprague Dawley Inc．（インジアナポリス，IN46229）から購入した雄のスプラグ−ダウレーラット(200〜450ｇ)を、これらの研究に使用した。５ mg／kg（静脈内）、10mg／kg（静脈内）および30mg／kg（静脈内）の投与からの結果は、表４に開示される通りである。 ^*i.v.＝静脈内；i.p.＝腹腔内 ^aaPTT＝活性化部分トロンボプラスチン時間特に重要である本発明の好ましい化合物（ＩおよびＩＡ）は、表５および６に記載した化合物である。表５は、式Ｉの好ましい化合物を開示する。同様に、表６は、式ＩＡの好ましい化合物を開示する。本発明をその特定の実施化に関して記載したけれども、本発明はさらに変形することができ、そして本出願は、一般に本発明の原理にしたがった、そして本発明が関係する技術の範囲内の既知または慣用の実施であるような、上述した本質的特徴に適用できるような、および特許請求の範囲内に包含されるような本発明の開示からの離脱を包含する、本発明のすべての変形、使用または適応を包含することを企図するものであることは理解されるべきである。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ)，ＵＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＺ，ＶＮ (72)発明者ブルースマ，ロバート・ジエイアメリカ合衆国オハイオ州45242．シンシナテイ．バイアーストーンレーン10170 (72)発明者ピート，ノートン・ピーアメリカ合衆国ニュージャージー州08853. ネシヤニクステーション．ブライアーウエイ97

Claims

【特許請求の範囲】１．式または〔式中、Ａは、フェニルまたはシクロヘキシルであり；Ｂは、式の基であり；Ｘは、-CF₃、-CF₂CF₃、-CF₂(CH₂)_tCH₃、-CF₂(CH₂)_tCOOR₁、-CF₂(CH₂)_tCONHR₁ 、-CF₂(CH₂)_tCH₂OR₁または-CF₂(CH₂)_vCH=CH₂であり；Ｒは、Ｈまたは-CH₃であり； R₁は、ＨまたはC₁-C₆アルキルであり；ｎは、０または１であり；ｔは、整数２、３または４であり；ｖは、整数１、２または３である〕の化合物、またはその立体異性体または混合物、その水和物または医薬的に許容し得る塩。２．Ｘが、-CF₃、-CF₂CF₃、-CF₂(CH₂)₂CH₃、-CF₂(CH₂)₂CO₂CH₂CH₃、-CF₂(CH₂)₂C ONHCH₃および-CF₂(CH₂)₄CONHCH₃からなる群から選択されたものである請求項１記載の化合物。３．Ａがフェニルであり、ｎが１であり、そしてＲが-CH₃である式Ｉの構造を有する請求項２記載の化合物。４．Ａがシクロヘキシルであり、ｎが１である式Ｉの構造を有する請求項２記載の化合物。５．Ｘが、-CF₃、-CF₂CF₃、-CF₂(CH₂)₂CH₃、-CF₂(CH₂)₂CO₂CH₂CH₃、-CF₂(CH₂)₂C ONHCH₃および-CF₂(CH₂)₄CONHCH₃からなる群から選択されたものである式ＩＡの構造を有する請求項１記載の化合物。６．Ｂがである式ＩＡの構造を有する請求項５記載の化合物。７．Ｂがである式ＩＡの構造を有する請求項５記載の化合物。８．Ｘが-CF₂(CH₂)₂CH₃である請求項３記載の化合物。９．Ｘが-CF₂(CH₂)₂CH₃である請求項４記載の化合物。 10．Ｘが-CF₂(CH₂)₂CH₃である請求項５記載の化合物。 11．Ｘが-CF₂CF₃である請求項３記載の化合物。 12．Ｘが-CF₂CF₃である請求項４記載の化合物。 13．Ｘが-CF₂CF₃である請求項５記載の化合物。 14．化合物が、Ｎ−メチル−Ｄ−フェニルアラニル−Ｎ−〔3,3,4,4,4−ペンタフルオロ−１−（１Ｈ−インドール−３−イルメチル）−２−オキソブチル〕− Ｌ−プロリンアミドモノ（トリフルエロ酢酸）塩である請求項１記載の化合物。 15．請求項１記載の化合物および担体からなる組成物。 16．請求項１記載の化合物および医薬的に許容し得る担体からなる医薬組成物。 17．請求項１記載の化合物の治療的に有効な量を患者に投与することからなる、患者におけるトロンビンを阻害する方法。 18．請求項１記載の化合物の治療に有効な量を患者に投与することからなる、トロンビン状態に罹患した患者を治療する方法。 19．トロンビン状態が深部静脈血栓症である請求項18記載の方法。 20．トロンビン状態が血管形成術後の冠状動脈血栓症である請求項18記載の方法。 21．請求項15記載の組成物を血液に加えることからなる血液におけるトロンビンを阻害する方法。 22．請求項15記載の組成物を血液に加えることからなる血液における血栓形成を阻害する方法。