JPH11505554A

JPH11505554A - キノン類を用いて配位子の光化学的固定方法

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Publication number: JPH11505554A
Application number: JP8529895A
Authority: JP
Inventors: ヤコブセン，モーゲンス，ハブステーン; コッホ，トロエルス
Original assignee: ヤコブセン，モーゲンス，ハブステーン; コッホ，トロエルス
Priority date: 1995-04-07
Filing date: 1996-04-03
Publication date: 1999-05-21
Anticipated expiration: 2016-04-03
Also published as: ES2153097T3; JP3124037B2; GR3035079T3; ATE198079T1; DE69611235D1; CA2217053C; AU699321B2; WO1996031557A1; AU5332996A; EP0820483B1; PT820483E; EP0820483A1; DE69611235T2; CA2217053A1; US6033784A; DK0820483T3

Abstract

(57)【要約】炭素含有基材材料の表面（Ｐ）に配位子（Ｌ）を固定化する方法；前記方法は炭素含有材料表面（Ｐ）に１種またはそれ以上の光化学的に活性な化合物（Ｑ）を結合する光化学的工程を含む；該光化学的に反応性の化合物（Ｑ）は、少なくとも２個の共役カルボニル基と共に、環式炭化水素、または２〜１０融合環式炭化水素を含有するキノン化合物である；そして光化学的工程はＵＶ線〜可視光線の範囲の波長を有する非電離性電磁放射線で、光化学的に反応性の化合物（Ｑ）を照射することからなる。

Description

【発明の詳細な説明】キノン類を用いての配位子の光化学的固定方法１．発明の背景本発明は、また配位子と称せられる官能性化合物の共有結合により重合体表面を変性する方法に関する。技術分野変性された表面を有する合成または天然の重合体から造られた製品は多くの技術的分野において非常に重要である。生物学的に活性な分子の種々の官能基の導入または共有結合による重合体の表面変性は新規な生体適合性移植組織の開発のような種々の異なる領域において、バィオセンサおよび生体用材料用に、親和性クロマトグラフィ用に、表面抵抗性物質用に、バィオセンサ用に、そしてＥＬＩＳＡアッセイにおいての高分子量あるいは低分子量分子の共有固定化用に、近年における増大した研究の主題であった。先行技術熱化学的方法大部分の方法は、また配位子と称される官能性化合物のカップリング反応のためのハンドルとしての機能を果たすための官能基を導入するために化学薬剤を用いての重合体表面の順次的処理を包含する。しかしながら、これらの方法は通常危険な化学剤を使用しそして幾つかの時間を消費する工程を使用する。これに加えて、重合体の機械的および光学的性質が保たれるほんの限られた方法が記載されている。熱化学的反応を用いてポリスチレンチューブ上にそしてミクロ滴定プレート上に第一級アミノ基を導入する方法はＪ．Ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ（１９８５年）６，第３９１頁〜第４０７頁においてＡｌｅｘｉｏ，Ｊ．Ａ．Ｇ．；Ｓｗａｍｉｎａｔｈａｎ，Ｂ；Ｍｉｎｎｉｃｈ，Ｓ．Ａ．；Ｗａｌｌｓｈｅｉｎ，Ｖ．Ａ．により記載された。放射線分析法ＥＰ−Ａ−０１５５２５２は、生物学的に活性な分子が固体重合体表面に放射線グラフト化されたビニル単量体の官能基に共有結合される、免疫反応性固体相を造る方法を開示している。グラフト化は紫外線または電離放射線のような放射線を用いて、不活性な雰囲気下に適当な放射線の線量を必要とする。１０〜１２時間０．２５Ｍｒａｄ／時間の⁶⁰Ｃｏ放射線源を用いる特定の例が提供される。国際出願第ＷＯ９１／０２７６８号は、キノン類あるいは放射線誘導体化中にキノン類またはキノイド構造物が生成される化合物のような非重合性のコンジュガンド類（ｃｏｎｊｕｇａｎｄｓ）を、高いエネルギーのガンマ線の存在下にポリスチレンのような放射線分解可能な重合体と接触させることにより、生成された放射線誘導体化重合体を開示している。放射線誘導体化重合体は、架橋剤を用いてまたはそれを用いることなしにあるいはカルボジイミド類のような活性剤を用いて共有固定化のために、あるいは重合体上に分子を固定化するために固定化用基を導入するために適当である。放射線誘導体化の欠点はその方法を実施するにあたって費用のかかる健康上身体を用心することを必要とする電離性高エネルギーガンマ線の使用である。光化学的方法重合体表面を変性する多くの光化学的方法が知られている。これらの方法において、所望の配位子（Ｌ）（しばしば感受性の生体分子（ｓｅｎｓｉｔｉｖｅｂｉｏｍｏｌｅｃｕｌｅ））は光化学的に反応性の基（Ｑ）およびスペーサー（Ｓ）および場合により、熱化学的反応性基（Ｔ）により重合体物質表面（Ｐ）上に固定される。一般に、表面への所望の分子Ｒ（Ｌ）の共有結合は下記の３つの方法により行われることが出来る：１）（スペーサー（Ｓ）を介して）熱化学的反応性基にカップリングされる光化学的に反応性の基（Ｑ）（Ｑ−Ｓ−Ｔ）は光化学反応により表面（Ｐ）に共有結合される（Ｐ−Ｑ−Ｓ−Ｔ）。次に、所望の分子（Ｌ）は熱化学的反応により表面（Ｐ−Ｑ−Ｓ−Ｔ）に結合される（Ｐ−Ｑ−Ｓ−Ｔ−Ｌ）。２）（スペーサー（Ｓ）を介して）所望の分子に直接カップリングされる光化学的に反応性の基（Ｑ）（Ｑ−Ｓ−Ｌ）は光化学反応により表面（Ｐ）に結合される（Ｐ−Ｑ−Ｓ−Ｌ）。３）光化学的に反応性の基（Ｑ）は熱化学的反応により表面（Ｐ）に共有的にカップリングされる（Ｐ−Ｑ）。次に、所望の分子（Ｌ）は光化学的反応により表面（Ｐ−Ｑ）にカップリングされる（Ｐ−Ｑ−Ｌ）。最初の２つの戦略は、潜在的にもっとも融通性のある戦略でありそして固定化された配位子の配向のコントロールを可能にする。ＥＰ−Ａ２−０３１９９５３は、７００ｎｍより短い波長を有する電磁照射線を用いて重合体の表面に、場合により置換された２または３員の複素環式化合物を固定することにより重合体表面を変性する光化学的方法を開示している。好ましい化合物は場合により置換されたクマリン類、ベンゾフラン類、インドール類およびアンゲリシン類（ａｎｇｅｌｉｃｉｎｓ）である。特に、最も望ましく置換されたソラレン類が好ましい。この方法の欠点はソラレンが容易に合成されない多官能性化合物であることである。それらは費用がかかりそして化学的に安定でなく、例えば（官能基として）第一級アミンを含有するスペーサーは、そのアミンがソラレンと反応するので、表面に導入されることが出来ない。短い波長を有するＵＶ光で照射されたとき、末端位置で配置され且つ（スペーサーを介して）ソラレンにカップリングされた第二級アミンはポリスチレン表面に光化学的に結合されることが出来る。ビオチンがスペーサー誘導体にカップリングされる場合、ビオチンはまた、ポリスチレン表面およびポリメチル−メタクリレート粒子に光化学的に結合されることが出来る。その方法は、これらの２つの例だけが首尾よく働くので、一般に適用可能であるとは考えられることが出来ない。光化学的メカニズムは十分に理解されていなかったが、しかしＵＶ光で照射されたとき、ソラレン誘導体は２＋２シクロ付加反応において二重結合と反応することが知られている。ＢｉｏｍｅｔｒｉｃＳｙｓｔｅｍｓＩｎｃ．により与えられた多くの特許公報ＵＳ−Ａ−４７２２９０６、ＵＳ−Ａ−４９７３４９３、ＵＳ５００２５８２およびＰＣＴ／ＵＳ８８／０４４９１は重合体表面の光化学的変性のための方法を開示している。それらの特許公報は遊離基を生成することが出来る基、カルベン類、ニトレン類、およびケトン類の励起状態からなる群から選ばれた活性化する潜在的に反応性基そして固体表面へのその共有的結合を包含する方法を記載している。電磁スペクトルの紫外部、可視部または赤外部に応答性の開示された潜在的反応性基はアジド類、アクリルアジド類、アジド蟻酸エステル類、スルホニルアジド類、ホスホリルアジド類；ジアゾアルカン類、ジアゾケトン類、ジアゾ酢酸エステル類、ベータ−ケトン−アルファ−ジアゾ酢酸エステル類のようなジアゾ化合物；脂肪族アゾ化合物、ジアジリン類、ケトン、ジフェニルケトン、およびベンゾフェノンやアセトフェノンのような光活性化可能なケトン類；およびジアルキル−およびジアシルペルオキシド類およびペルオキシエステル類のようなペルオキシ化合物である。高いエネルギーのＵＶ光線での照射の際、高い反応性の基を生成する潜在的反応性基、カルベン類またはニトレン類は多くの欠点を受ける。そのような種は極度に反応性でありそして転位するかあるいは大部分の有機化合物、有機溶媒および水と直ちに反応する。照射が溶液中で起こる場合、これは光化学剤の損失を生じそして非効率的でありあるいは重合体表面との反応を生ずる。それらの単純な前駆体は、長い照射時間（典型的には１２時間）を必要とし、これは光反応性基としてのこれらの基の適用を時間のかかるものとしてしまい、効率的でなくそして感受性生体分子の固定化に不適当なものとする。光反応性基としてキノン類を使用する光化学的カップリング反応については記載されてなく、また示唆もされていない。２．発明の開示本発明の目的は、上記欠点を受けない、炭素含有材料の表面上に所望の配位子を固定化するための、光化学的方法を提供することである。本発明の特定の目的は炭素含有材料表面上に配位子を固定するために一般的に使用されることが出来る光化学的方法を提供することである。他の特定の目的は炭素含有材料表面上に配位子を固定化する光化学的方法であって、実施しそしてコントロールするのに容易であり且つ費用がかからずそして既知の方法より最適に速い光化学的方法を提供することである。本発明の別の目的は、炭素含有材料表面上に配位子を固定する光化学的方法であって、配位子が有害な処理に付されずそしてそれ故に配位子が感受性である生体分子である場合でさえ、それらの機能を実質的に維持する光化学的方法を提供することである。この目的は、炭素含有基材材料の表面（Ｐ）に配位子（Ｌ）を固定化する方法を提供することによって達成され、前記方法は次のとおりのことからなる：炭素含有材料表面（Ｐ）に１種またはそれ以上の光化学的に反応性の化合物（Ｑ）を結合する光化学的工程；前記炭素含有材料表面（Ｐ）は、直接にあるいは１種またはそれ以上のスペーサー（Ｓ₁）を介して光化学的に反応性の化合物（Ｑ）に結合される；そして前記光化学的に反応性の化合物（Ｑ）は直接にあるいは場合により１種またはそれ以上のスペーサー（Ｓ）および（または）熱化学的に反応性の化合物（Ｔ）を介して１種またはそれ以上の配位子（Ｌ）に結合される；前記スペーサー（Ｓ₁）および（Ｓ）は等しいかまたは異なり、熱化学的にまたは光化学的に反応性であるかあるいは非反応性であるスペーサーである；光化学的に反応性の化合物（Ｑ）は、単量体キノン化合物、二量体キノン化合物、および対称または不斉のオリゴマーキノン化合物からなる群から選ばれたキノン化合物である；前記キノン化合物（Ｑ）は、環式炭化水素または２〜１０融合環式炭化水素を含有し、前記キノン化合物は少なくとも２つの共役カルボニル基を有し、その数は融合環式炭化水素の数の２倍を超えない；前記キノン化合物（Ｑ）は、配位子（Ｌ）の固定化に対して立体障害を生じないかまたは光化学を妨げない置換基（Ｒ）で、場合により置換されている；そして光化学工程は、ＵＶ線から可視光線までの範囲の波長を有する非電離性電磁放射線を用いて光化学的に反応性の化合物（Ｑ）を照射することからなる。本発明は、請求項１において規定されたとおりの前記キノン化合物が非常に良好な結果で光化学的に反応性の化合物として使用されることが出来ることの驚くべき発見に基づいている。キノン化合物類は光化学的に反応性の化合物として知られているが、しかし重合体表面への配位子の固定化のための新しい方法の開発が盛んであっても、光化学的に反応性のカップリング化合物としてのそれらの使用は今まで全く示唆されていなかった。キノン化合物キノン化合物は少なくとも１つの環式炭化水素構造において配置された少なくとも２つの共役カルボニル基を含む化合物として定義される。そのような化合物は当業者に周知である。本発明に従う方法において使用するために適当であるキノン類は、キノン、キノン二量体またはキノンのオリゴマー類であり、後者は対称結合されたまたは不斉結合されたキノン類を有する。キノン化合物は少なくとも２個の共役カルボニル基を有する、環式炭化水素または２〜１０融合環式炭化水素を含有する。カルボニル基の数は融合環式炭化水素の数の２倍を超えない。環式炭化水素は任意の位置の異性体で融合されてもよい。キノン化合物は、配位子（Ｌ）の固定化に対して立体障害を生じないまたは光化学を妨げない置換基（Ｒ）で、場合により置換されており、例えばその置換基は、例えば蛍光、燐光、遷移のない放射線、等によりキノンの活性化を阻止する発色団を有する。環式炭化水素は、お互いから独立して任意の環の大きさであるが、しかしお互いから独立して−Ｎ−、−ＮＨ−および−Ｏ−の中で選ばれた１または数個のヘテロ原子を含んでよい、優先的に５、６、１０、１４、１８炭素原子員の芳香族環である。共役カルボニル基はキノイド構造が維持されていることを条件として、任意の位置で任意のこれらの環に配置されてよい。適用出来る基本のキノン化合物適用出来る基本のキノン化合物の例示は図１において示され、図１において化合物Ｉ〜ＸＸＸＶＩは下に規定される１つまたはそれ以上の置換基で置換されていてよい。特に好ましいキノン類特に好ましいキノン類は、請求項３および４において請求されている。また図２において示される、一般式（ＸＸＸＶＩＩ）、（ＸＸＸＶＩＩＩ）および（ＸＸＸＩＸ）を有する好ましい態様において、文字ｍ、ｎおよびｏは０または１〜８の整数を示し、ｍ、ｎおよびｏの合計は８またはそれ以下であり；１は０または１からｎの２倍までの整数であり；ｒおよびｑは０、１または２を示し；ｋは０または１からｍの２倍までの整数を示し；そしてｔは０または１からｏの２倍までの整数を示す。ｍ、ｎおよびｏの合計は８またはそれ以下であるのが好ましい。Ｒは下に規定されるとおりの置換基を示す。置換基はお互いから独立して選ばれる。好ましくは、置換基（ｌ＋ｒ＋ｋ＋ｑ＋ｔ）の数の総合計は融合環式担炭化水素の数より小さい。特に好ましいキノン類はアントラキノン類（Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、Ｘ、ＸＩ、ＸＩＩＩ、ＸＸＶＩＩＩ）、フェナントレンキノン類（ＶＩＩＩ、ＩＸ、ＸＩＩ）、ベンゾキノン類（Ｉ、ＩＩ）、ナフトキノン類（ＩＩＩ、ＩＶ、ＸＸＶＩＩ）および化合物（ＸＸＶＩ、ＸＸＩＸ）、特にアントラキノン類、フェナントレンキノン類、および化合物（ＸＸＶＩ）からなる群から選ばれる。置換基Ｒ置換基の選択は、キノンの溶解性および材料表面に対するキノンの全体的親和性をコントロールするにあたって重要である；例えば荷電された置換基の導入は水における溶解性を増大しそしてまた吸引性または反発性イオン相互作用を介して荷電された材料表面に対する親和性を増大させるかまたは減少させる。したがって、置換基Ｒは光反応工程がおこるシステムおよび溶媒に依存する最適の疎水性／親水性特性に関連して選ばれることが出来る。最適にはキノン化合物は溶媒中に部分的に可溶性である。キノン類は融合環式炭化水素の３倍未満である多数の置換基で置換されているのが好ましいが、しかしながらそれらはキノイド構造が維持されていることを条件にして置換基で完全に飽和されていてよい。特に置換基（Ｒ）はそれ自体、キノン類であることが出来る。有用な置換基は、お互いから独立して、 −ＮＯ₂、−ＳＯ₃ ^-、−ＳＯ₂ ^-、−ＣＮ、−ＰＯ₃ ^2-、−ＰＯ₂ ^-、−ＣＯＯＨ、ハロゲン、即ち−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、第一級アミン類、第二級アミン類および第三級アミン類またはそれらの誘導体を包含する官能基；及び −ＮＯ₂、−ＳＯ₃ ^-、−ＣＮ、−ＰＯ₃ ^2-、−ＰＯ₂ ^-、−ＣＯＯＨ、ハロゲン、即ち−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、エポキシドおよび−Ｈで置換されていてよいヒドロカルビル類；からなる群の中から選ばれてよく；前記ヒドロカルビルは、１〜３０のＣ−原子を有するアルキル、１〜３０のＣ −原子を有するアルケニル、１〜３０のＣ−原子を有するアルキニル、６〜５０のＣ−原子、好ましくは６〜１８のＣ−原子を有するアリールおよび上に規定された官能基についての等しいかまたは異なる置換基とのこれらの組み合わせを包含する、それらの誘導体を含む；そして前記ヒドロカルビルは、直鎖／分枝鎖、対称／不斉、キラル／アキラルであり；−Ｎ−、−ＮＨ−および−Ｏ−からなる群から選ばれた１つまたはそれ以上のヘテロ原子を含有し；あるいは融合芳香族システムである；前記融合芳香族システムは、任意の位置で結合および（または）融合されていてよい、ピリジル、イミダゾリル、ピリミジニル、ピリダジニル、キノリル、アクリジニル、イミダゾリル、ピロリル、フリル、イソキサゾル、オキサゾリル、および上に規定された官能基についての等しいまたは異なる置換基の組み合わせを含むそれらの誘導体からなる群から選ばれた複素環式である。好ましい置換基は−ＮＯ₂、−ＳＯ₃ ^-、−ＳＯ₂ ^-、−ＣＮ、−ＰＯ₃ ^2-、−ＰＯ₂ ^- 、−ＣＯＯＨ、ハロゲン、即ち−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、第一級アミン、第二級アミンおよび第三級アミンまたはそれらの誘導体を含む官能基；および− ＮＯ₂、−ＳＯ₃ ^-、−ＣＮ、−ＰＯ₃ ^2-、−ＰＯ₂ ^-、−ＣＯＯＨ、ハロゲン、即ち −Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、エポキシドおよび−Ｈで置換されていてもよいヒドロカルビル；からなる群から選ばれる。好ましいアルキルは、直鎖または分枝鎖の、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル、デカニル、ウンデカニル、ドデカニル、トリデカニル、テトラデカニル、ペンタデカニル、ヘキサデカニル、ヘプタデカニル、オクタデカニル、ノナデカニル、エイコサニル、のようなアルキル類、１個またはそれ以上の二重結合または三重結合を有するそれらのものである。好ましいアリールは、フェニル、ナフチル、ビフェニル、トリル、ベンジル、クメニル、メシチル、キシリル、ペンタレニル、インデニルである。非電離性電磁照射線電磁放射線は、キノン類を活性化するために選ばれる。それは、ＵＶ線〜可視光線の範囲の波長、好ましくは７００ｎｍより短い波長を有する非電離性電磁放射線である。通常、中心波長の周囲の１５〜５０ｎｍの範囲の波長の帯域を有する電磁放射線が選ばれる。波長のこの帯域はキノン発色団の最大吸収を提供する電磁放射線を用いてキノン類を活性化出来るために選ばれる。ＵＶ−光線は、キノン類に共有的に結合される官能基および感受性の配位子または生体分子と光の相互作用を最小にするためのＵＶ線〜可視光線の波長を有する（前記基は典型的に、ＵＶ線より短い波長を有する電磁放射線に対して感受性であり、それによりそれらは破壊される）。従って、選ばれる放射線が関連の光化学的に活性な基を特定的に活性化する、電磁放射線をキノン類が吸収する広い範囲の波長においての１波長を有する電磁放射線を選ぶことが可能である。キノン類の上記特定の吸収性の他に、この発明において観察される配位子の光誘導固定化における高い有効性は、キノンの反応性状態（ｎ¶^*）が全吸収（吸光）範囲における励起の際に非常に高い収量で得られる事実により一部分説明されることが出来る。通常、光プローブ（ｐｈｏｔｏｐｒｏｂｅ）を活性化するために干渉性でない（ｉｎｃｏｈｅｒｅｎｔ）連続光が選ばれる。しかしながら、単色光、偏光、パルス光、または干渉性の光のような一層複雑な光源の適用が使用されることが出来る。後で記載される例において、Ｐｈｉｌｉｐｓ社製のＨＰＡランプが光発射源として使用された。そのようなＨＰＡランプは鉄およびコバルト添加剤を有する管上中圧ハロゲン化金属ランプである。そのランプは、本方法において使用するためにそのランプを適当なものとする（主として、３００〜４００ｎｍの、長波ＵＶ−Ａ及びＵＶ−Ｂに相当する）２５０〜４００ｎｍの非電離性ＵＶ−光線および４００〜７００ｎｍの可視光線を発射する。照射時間は、固定化された配位子（Ｌ）または炭素含有材料表面（Ｐ）を劣化させることなしに十分な収量を得るように選ばれる。照射時間は一般に１２時間未満、好ましくは２００分未満、さらに好ましくは６０分未満、最も好ましくは３０分未満である。配位子配位子（ｌｉｇａｎｄ）（Ｌ）は、重合固体表面への固定化の後に、新しい表面特性を有する重合体表面を提供する表面変性用化合物として定義される。配位子（Ｌ）は下記のような官能基であることが出来る：−ＣＯＯＨ（カルボン酸類）、スルホン酸誘導体、−ＣＯＯＲ（活性エステルを含む、エステル類）、−ＣＯＸ（酸ハロゲン化物、酸フッ化物類および酸塩化物類、酸アジド類または同様な活性なカルボン酸誘導体）、−ＣＯＮＨＮＨ₂（酸ヒドラジド類）、− ＮＨＣＯＮＨＮＨ₂（セミカルバジド類）、−ＮＨＣＳＮＨＮＨ₂（チオセミカルバジド類）、−ＣＮ（ニトリル類）、−ＣＨＯ（アルデヒド類）、ＲＲ’ＣＯ（ケトン類）、−ＯＨ（アルコール類）、−ＳＨ（チオール類）、−ＳＳＲ（ジサルファイド類）、−ＮＨ₂（第一級、第二級および第三級のアミン類を包含する、アミン類）、−ＮＨＮＨ₂（ヒドラジン類）、−ＯＲ（エーテル類）、エポキシド類、−ＳＲ（サルファイド類）、−Ｘ（ハロゲン化物類：フッ化物類、塩化物類、臭化物類または沃化物類）、−ＮＯ₂、−ＣＨ₃。また、配位子はビオチンのような生物学的に活性な分子、トキシン類、除草剤類、殺虫剤類、炭水化物類、抗生物質（例えば、ペニシリン類および他の薬品、例えば細胞毒）、ステロイド類、ペプチド類、ヌクレオチド類、ペプチド核酸（ＰＮＡ）および核酸結合性パートナー、たんぱく質およびハプテン類、官能基（またはその誘導体）あるいは、メチル、エチル、イゾブチル、ｔｅｒｔ−ブチルまたは芳香族酸エステルのような非官能性基であることが出来る。これらの非官能性基は、例えばコンタクトレンズ、移植組織、等の生体適合性を改良するために用いられることが出来る。スペーサースペーサー（Ｓ₁）および（Ｓ）は、各々の特定の新しい表面特性についての長さ、可撓性、疎水性／親水性特性に関して一般に選ばれる。スペーサー（Ｓ₁）または（Ｓ）は、熱化学的にまたは光化学的に非活性の距離生成性化合物としてのものである。場合により、配位子はスペーサーを介して重合体の表面に結合され、スペーサーの唯一の機能はそれらの二者間にスペースを造り、それにより特に配位子が大きな分子で有る場合に固定化を容易にすることである。スペーサーはまた重合体表面上に固定されるべき追加の配位子を提供する。スペーサーの長さは特定の目的のために選ばれる。一般にその長さは約４００ Å未満または約４００Åである。或る適用において、好ましくは約１００Å未満である。スペーサーのより長い長さの場合において、追加の配位子を各々のスペーサー単位に結合することが好ましい。スペーサーはまた、その疎水性／親水性特性に関して選ばれる。もし例えば、重合体への光反応の前に、スペーサーがキノンを配位子に結合させるならば、また光反応工程における溶媒に依存する最適の反応条件を得るために全Ｑ−Ｓ−Ｌ分子の疎水性／親水性特性を最適化することが非常に重要である。スペーサーの例は、Ｃ₁〜Ｃ₂₀アルキル基、例えば場合により芳香族またはモノ／ポリ不飽和炭化水素を含有するポリメチレン、ポリエチレングリコールのようなポリオキシエチレン、ポリ−β−アラニン、ポリグリシン、ポリリシン、一般的なポリペプチド類、等のようなオリゴ／ポリアミド類、オリゴ糖、ホスホ− モノ／ジエステルのようなオリゴ／ポリホスフェート、モノ／ジアミド類、等、オリゴ／ポリスルホン酸アミド／エステル類である。さらにスペーサーは上記単位の組み合わせ単位またはそれらの組み合わせ単位からなってよい。スペーサーの長さおよび他の性質における最適化の重要性は例３において明瞭に例示され、例３において第１級アミノ基の光化学的グラフト化はビオチンの、次の熱化学的カップリングそしてアビジンを用いての固定化ビオチンの検出により検出される。この例においてβ−アラニン単位を用いてのスペーサーの段階的延長化が使用された。そのオリゴアミドの種類のスペーサーは、標準のアミド結合形成反応および標準の保護用基および脱保護計画を用いて各々の化合物の容易な合成を可能にした。例えば簡単な脂肪族炭素スペーサーとは対照的に、オリゴアミドスペーサーはアミド結合の回りの束縛回転に起因してかなり硬くそして水素結合の供与体および受容体としての両方の働きをする各々のアミド結合の能力に起因してむしろ親水性（しかし中性）である。この特定の目的のための最適のスペーサーの長さはアントラキノンアミン化合物９であることが分かった。１つ追加のβ−アラニン単位を用いてのスペーサーの長さの増加はシグナルを増大せず、しかしシグナルの小さな減少を示した（データは示されない）。ビオチン− アビジンシステムのためのスペーサー長さの最適化は文献における報告と一致している（例えば、１９８８年ニューヨークＪｏｈｎＷｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ社発行（Ｗ．Ｐ．Ｃｏｌｌｉｎｓ監修）Ｆ．Ｋｏｈｎｅｎ等によるＣｏｍｐｌｅｍｅｎｔａｒｙＩｍｍｕｎｏａｓｓａｙ参照）。熱化学的反応性基熱化学的反応性基（Ｔ）は、当業界において周知でありそして光化学的に反応性の基が非反応性である条件下、重合体表面（Ｐ）または配位子（Ｌ）に共有結合を形成することが出来る、官能基として定義される。熱化学的反応性基は、−ＣＯＯＨ（カルボン酸類）、スルホン酸誘導体類、− ＣＯＯＲ（活性エステル類を含む、エステル類）、−ＣＯＸ（酸ハロゲン化物類、酸アジド類および同様なカルボン酸誘導体類）、−ＣＯＮＨＮＨ₂（酸ヒドラジド類）、−ＮＨＣＯＮＨＮＨ₂（セミカルバジド類）、−ＮＨＣＳＮＨＮＨ₂（チオセミカルバジド類）、−ＣＨＯ（アルデヒド類）、ＲＲ’ＣＯ（ケトン類）、−ＯＨ（アルコール類）、−Ｘ（ハロゲン化物：塩化物類、臭化物類、沃化物類）、−ＳＨ（チオール類）、−ＳＳＲ（ジサルファイド類）、−ＮＨ₂（第一級、第二級および第三級のアミン類を含む、アミン類）、−ＮＨＮＨ₂（ヒドラジン類）、エポキシド類、マレイミド類であってよい。この発明の主要な利点の一つはキノン化合物の化学的安定性である。したがって熱化学的に反応性の基はキノン類と反応しない。このことは、アントラキノン酸ヒドラジド（化合物１２：例１）およびアントラキノンセミカルバジド（化合物１５：例１）の合成において例示される。光化学的に反応性の基としてベンゾフェノン類を用いて、そのような化合物の合成は不可能であり、その理由は酸ヒドラジドまたはチオセミカルバジドがベンゾフェノンにおけるカルボニル基と縮合して環式化合物かまたはオリゴマー類を提供するからである。炭素含有材料表面炭素含有材料表面は重合体表面であることが好ましい。重合体は任意の種類の重合体であってよい。特に好ましい重合体は、ポリスチレン、ポリエチレン、ポリ酢酸ビニル、ポリ塩化ビニル、ポリビニルピロリドン、ポリアクリロニトリル、ポリメタクリル酸メチル、ポリテトラフルオロエチレン、ポリカーボネート、ポリ−４−メチルペンチレン、ポリエステル、ポリプロピレン、セルロース、ニトロセルロース、でんぷん、多糖類、天然ゴム、ブチルゴム、スチレンブタジェンゴム、シリコーンゴムのような合成および天然重合体からなる群から選ばれる。また、炭素含有材料は；材料が炭素を含有するように予め変性された、シリカ、ガラス、コントロールされた細孔ガラス、シリカゲルまたは金属を包含する予め変性された材料；単層フィルムまたは多層フィルム；ラングミュア−ブロジェット−フィルム；ミセル；生物学的膜；たんぱく質；ヌクレオチド、ペプチド核酸（ＰＮＡ）および核酸結合パートナー、生物学的または有機物質で被覆された天然または合成重合体からなる群から選ばれることが出来る。例えば重合体表面は、例えばコロナ処理、γ−光線照射の処理、およびシリル化により予め処理されてよい。そのような処理は重合体の反応性を増大しそして（または）表面の疎水性特性または親水性特性を変性することが出来る。炭素含有材料はまた、他の化合物、即ちキノン化合物または熱化学的に反応性の化合物への共有結合を形成することが出来る表面を造るように、例えばシリル化により、炭素含有するように予め変性された、シリカ、ガラス、コントロールされた細孔のガラスおよびシリカゲルまたは金属であることが出来る。以後、炭素含有材料表面は“重合体表面”または“基材”として記載される。しかしながら、上記非重合体表面は同様に処理されることが出来ることが理解されるべきである。製造の好ましい方法本発明を実施する好ましい方法は、多くの異なる方法でそれぞれの化合物をお互いに結合される、請求項１１〜１６において規定されている。当業者は、本発明の範囲内の多くの他の方法で本方法が実施されることが出来ることを知るであろう。本発明の好ましい且つ例示的な態様（ａ）〜（ｆ）は以下の反応工程からなる：ａ）工程１：Ｑ＋Ｌ → Ｑ−Ｌ工程２：Ｑ−Ｌ＋Ｐ → Ｐ−Ｑ−Ｌ（光反応性工程）ｂ）工程１：Ｑ＋Ｓ → Ｑ−Ｓ工程２：Ｑ−Ｓ＋Ｌ → Ｑ−Ｓ−Ｌ工程３：Ｑ−Ｓ−Ｌ＋Ｐ → Ｐ−Ｑ−Ｓ−Ｌ（光反応性工程）ｃ）工程１：Ｐ＋Ｑ → Ｐ−Ｑ（光反応性工程）工程２：Ｐ−Ｑ＋Ｌ → Ｐ−Ｑ−Ｌｄ）工程１：Ｐ＋Ｓ₁→ Ｐ−Ｓ₁ 工程２：Ｐ−Ｓ₁＋Ｑ → Ｐ−Ｓ₁−Ｑ（光反応性工程）工程３：Ｐ−Ｓ₁−Ｑ＋Ｌ → Ｐ−Ｓ₁−Ｑ−Ｌｅ）工程１：Ｑ＋Ｔ → Ｑ−Ｔ工程２：Ｑ−Ｔ＋Ｐ → Ｐ−Ｑ−Ｔ（光反応性工程）工程３：Ｐ−Ｑ−Ｔ＋Ｌ → Ｐ−Ｑ−Ｔ−Ｌｆ）工程１：Ｑ＋Ｓ → Ｑ−Ｓ工程２：Ｑ−Ｓ＋Ｔ → Ｑ−Ｓ−Ｔ工程３：Ｑ−Ｓ−Ｔ＋Ｐ → Ｐ−Ｑ−Ｓ−Ｔ（光反応性工程）工程４：Ｐ−Ｑ−Ｓ−Ｔ＋Ｌ → Ｐ−Ｑ−Ｓ−Ｔ−Ｌ態様（ｆ）において、ＳおよびＴの反応順序は工程１と２とで逆転されてもよい。光反応工程光反応工程は例において記載されたとおりにして行われることが出来そして熱化学的反応は当業者に知られているような標準の合成方法を用いて行われることが出来る。キノン−配位子結合Ｑは同様な化合物を結合する任意の合成方法によりＬに結合されることが出来る。得られる結合は好ましくはＣ−Ｃ結合、酸誘導体（例えばエステル、アミド等）を介しての結合、エーテル結合、アミン結合、サルファイド結合またはジサルファイド結合のような共有結合である。反応は適当な溶媒中で行われる。反応が完了した後に、溶媒は、例えば蒸発、傾瀉または濾過により除去されてよく、或るいは溶媒は、Ｑ−ＬがＰに結合される次の光反応のために一層適している他の溶媒に置き換えられてよい。この反応は水性溶媒中に行われるのが好ましく、その水性溶媒中でＱ−ＬがＰと接触せられる。配位子Ｌは光反応中に１つまたはそれ以上の保護用基で、光反応中保護されねばならないであろう。そのような保護用基は光化学工程中、配位子の感受性官能性をマスクするようにそして配位子が光固定化の後の次の工程でマスクを取り去られることが出来るように選ばれる。溶媒は最適には化合物のカップリングのすべての工程において同じである。共有結合共有結合を形成するのに包含される反応は、当業者に既知の標準の合成方法、例えば標準の有機合成、ペプチド合成、オリゴヌクレチド合成および関連領域の中から選ばれることが出来る。多官能性基を有する中間体を用いる場合、選ばれた官能基をマスクし、それによりＱ−ＬおよびＱ−Ｓ−Ｌ分子の位置選択的合成を可能にするために半永久的および（または）一時的保護用基が選ばれることが出来る。官能性を保護する周知の技術については、１９９１年ニューヨークのＪｏｈｎＷｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ社発行Ｔ．Ｗ．ＧｒｅｅｎｅおよびＰ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓによる“ＰｒｏｔｅｃｔｉｖｅＧｒｏｕｐｓｉｎＯｒｇａｎｉｃＳｙｎｔｈｅｓｉｓ”参照。結合形成性反応の選択および適当な保護基の選択を包含するＱ−ＬおよびＱ− Ｓ−Ｌ分子の例示的合成は例１において例示される。溶媒光化学工程において使用される溶媒は、好ましくは水性媒体、あるいは１０％ｖ／ｖまでの有機溶媒、好ましくは５％ｖ／ｖまでの有機溶媒を含有する水性媒体である。テトラクロロメタンおよびベンゼンのような純有機溶媒が使用されることが出来る。しかしながら、或る有機溶媒は、例えば励起したキノンとのその反応性の故に問題を起こす可能性がある。また有機溶媒は一層費用がかかりそして環境問題を生ずる可能性がある。重合体と接触している溶液は次に露光されそして照射は場合により２００分までの期間、典型的には６０分未満の期間、好ましくは３０分未満の期間、行われる。この変性は重合体の物理的性質（安定性、強度、透明性、等）を変えない。共有カップリングが起こる溶液、好ましくは水溶液はしばしば緩衝化される。これは反応中に、規定されたｐＨを保つためにそして或る基がイオン性であることを確保するために行われる。ｐＨ値は、好ましくは０〜７の範囲または７〜１２の範囲である。最適のｐＨ値は、特定の反応および包含される化合物により非常に左右される。アミン類がカップリングされる場合、ｐＨはアミン官能性をプロトン化するために８未満が好ましい。これを行うことによりその化学剤は水中に容易に溶解出来そして化合物の他の部分におけるキノンと一緒に、全体としてその化学剤はソープ（ｓｏａｐ）として働く。これは親油性キノン部分が重合体に付着しそして極性アミノ基が溶媒において顕著となる（ｐｏｉｎｔｏｕｔ）であろうことを意味する。例えばカルボキシル基が固定されるべきである場合、同じ効果を得るためにｐＨは６より高いのが好ましい。水性システムを用いる場合、全体としての化学剤のこの異なる極性は光化学的固定化において重要である。追加の利点ベンゾフェノンとは対照的に、キノン類の特定のレドックス性は、光分解中形成されることが出来そして図３において例示されるように“再循環”されるべき表面に共有結合されていない、全体的に還元されたキノン類を可能にする。この再循環システムは全体的光化学的カップリングの有効性を増大する。本発明に従う方法の高い効率およびキノン−配位子共役が種々の異なる重合体上に光化学的に固定されることの驚くべき発見は、光プローブ類（ｐｈｏｔｏｐｒｏｂｅｓ）（光化学反応に付されるべき光化学化合物類）のこの関連再循環および“ 保存（ｃｏｎｓｅｒｖａｔｉｏｎ）”により一部分説明される。上に述べたように、励起されたキノン類はラジカル反応（遊離基反応）で反応する。最初の工程は一般に水素原子引き抜き反応でありそして反応の速度は水素と（それが結合される）炭素との間の共有結合の結合エネルギーにより決定される。この反応メカニズムは、励起したキノンが、水素原子の最も強い結合を有すると思われる水と反応することが出来ないとの帰結を有する。それ故に、溶媒として水を用いることにより、その溶媒と反応することが出来ない極度に反応性の種を生成することが可能である。好ましい用途この発明の方法に従って造られたような炭素含有材料の好ましい用途は、検出システムにおける使用、特に固体相イムノアッセイにおける担体としての使用、ならびに特にプレート、ビーズ及び微細球のような試験用粒子、試験管、試験棒及び試験細片としての使用、そしてペプチド、オリゴヌクレオチド、炭水化物及び小さい有機分子の固相合成のための担体としての使用を含む。３．図面の簡単な記載図１は本発明に従って適用出来る基本的なキノン化合物（Ｉ）〜（ＸＸＸＶＩ）の例示を示す。図２は本発明に従う特に好ましいキノン類（ＸＸＸＶＩＩ）〜（ＸＸＸＩＸ）を示す。図３は還元されたキノン類の再循環の例示を示す。図４はアリールアジド類の光化学反応を例示する。図５はベンゾフェノンの光化学反応を例示する。図６はこの発明のキノン類の光化学的性質を例示する。図７は例１において造られたキノン−配位子、キノン−スペーサー−配位子化合物Ｎｏ．１〜Ｎｏ．２２を示す。図８ａはポリスチレン表面（ＰｏｌｙＳｏｒｐ^R）上へのフェナントレンキノンアミン化合物Ｎｏ．３のＵＶグラフト化を示す。光プローブ濃度および照射時間の効果。◇ＵＶ照射なし（対照）；□５分照射；△７分；○１０分。図８ｂはポリスチレン表面（Ｎｕｎｃｌｏｎ^RＤｅｌｔａ処理）上へのフェナントレンキノンアミン化合物Ｎｏ．３のグラフト化を示す。光プローブ濃度及び照射時間の効果。◇ＵＶ照射なし（対照）；□５分照射；△７分；○１０分。図９ａはポリスチレン表面（ＰｏｌｙＳｏｒｐ^R）上へのアントラキノンアミン化合物Ｎｏ．５のグラフト化を示す。光プローブ濃度および照射時間の効果。 ◇ＵＶ照射なし（対照）；□５分照射；△７分；○１０分。図９ｂはポリスチレン表面（Ｎｕｎｃｌｏｎ^RＤｅｌｔａ処理）上へのアントラキノンアミン化合物Ｎｏ．５のＵＶグラフト化を示す。光プローブ濃度および照射時間の効果。◇照射なし（対照）；□５分照射；△７分；○１０分。図１０はポリスチレン表面上へのアントラキノンアミン化合物Ｎｏ．５、Ｎｏ．７およびＮｏ．９のＵＶグラフト化を示す。シグナル強度上へのスペーサーアーム長さの影響。開いた記号：Ｎｕｎｃｌｏｎ^RＤｅｌｔａ処理された表面についての結果。閉じた記号：ＰｏｌｙＳｏｒｐ^Rプレートについての結果。○／● アミン５。□／■アミン７。△／▲アミン９。図１１はＮｕｎｃｌｏｎ^RＤｌｅｔａ処理されたポリスチレン表面上にＵＶグラフト化されたアントラキノンアミン化合物Ｎｏ．９の貯蔵安定性を示す。値はゼロ日に相対して提供される。○貯蔵温度４℃；△２０℃；□３７℃； ◇６０ ℃。図１２はＰｏｌｙＳｏｒｐ^Rポリスチレン表面上にＵＶグラフト化されたアントラキノンアミン化合物Ｎｏ．９の貯蔵安定性を示す。値はゼロ日に相対して提供される。○貯蔵温度４℃；△２０℃；□３７℃；◇６０℃。図１３はポリスチレン表面上へのアントラキノンカルボン酸誘導体化合物Ｎｏ．１３のＵＶグラフト化を示す。開いた記号：ＵＶ照射をしない結果（対照）；閉じた記号：１０分ＵＶ照射後の結果。○／●ＰｏｌｙＳｏｒｐ^Rプレート； △／▲Ｎｕｎｃｌｏｎ^R Ｄｅｌｔａ処理されたプレート。図１４はポリスチレン表面上へのＮ−末端アントラキノン置換されたペプチド化合物Ｎｏ．９のＵＶグラフト化を示す。照射時間およびＨｙｂ１６１−２抗・ペプチドモノクロナール抗体の濃度の効果。○２分照射；●５分照射；△１０分；▲１５分；□３０分；□６０分。図１５はポリスチレン表面上へのアントラキノンペプチド化合物Ｎｏ．１９のＵＶグラフト化を示す。Ｈｙｂ１６１−２抗・ペプチドモノクローナル抗体の一定濃度を用いての照射時間の効果。○Ｈｙｂ１６１−２が加えられない非特異的結合；●Ｈｙｂ１６１−２添加（１ｍｇ／ｍｌ）。図１６はポリスチレン表面上へのＮ−末端アントラキノン置換されたペプチド化合物Ｎｏ．１９のＵＶグラフト化を示す。ペプチド濃度の効果。閉じた記号：１０分照射時間。開いた記号：照射なし。○／●アントラキノン−ペプチド１９。△／▲非置換ペプチド。図１７はＵＶグラフトされたペプチド化合物Ｎｏ．１９の貯蔵安定性を示す。 ○貯蔵温度３７℃。●４℃。図１８ａはポリスチレン表面上へのアントラキノンＮＴＡ誘導体２０のＵＶグラフト化を示す。光プロープ濃度の効果。開いた記号：ＵＶ照射なし（対照）の結果。閉じた記号：５分照射後の結果。図１８ｂはＮＴＡ変性ポリスチレン表面上への、ビオチニル化ヒスチジン結合ペプチドの結合を示す。１：ペプチド添加なし（対照）、２：ビオチニル化ヒスチジン結合なしのペプチドビオチン−εＡｈｘ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＯＨの結合（対照）、３：ビオチニル化ヒスチジン結合ペプチドビオチン−εＡｈｘ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ −Ｈｉｓ−Ｈｉｓ−Ｈｉｓ−Ｈｉｓ−Ｈｉｓ−Ｈｉｓ−ＯＨの結合、４：ビオチニル化ヒスチジン結合なしのペプチドビオチン−εＡｈｘ−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｇｌｎ−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｈｉｓ− Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−Ａｓｈ−Ｉｌｅ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｔｈｒ− Ｐｒｏ−ＯＨ（対照）の結合。図１９はポリスチレン表面上へのアントラキノンＰＥＧ２０００誘導体２２のＵＶグラフト化を示す。ＰＳ０６３：０．３ｍＭ光プローブ，５分間照射、ＰＳ０６４：０．３ｍＭ光プローブ，ＵＶ照射なし（対照）、ＰＳ０６５：０．３ｍＭＰＥＧ２０００，５分ＵＶ照射（対照）、ＰＳ０６６：０．３ｍＭＰＥＧ２０００，ＵＶ照射なし（対照）、ＰＳ０６７：Ｈ₂Ｏ単独，５分ＵＶ照射（対照）、ＰＳ０６８：Ｈ₂Ｏ単独，ＵＶ照射なし（対照）。図２０はポリプロピレン表面上へのアントラキノンＰＥＧ２０００誘導体２２のＵＶグラフト化を示す。ＰＰ０１１：０．３ｍＭ光プローブ，５分ＵＶ照射、ＰＰ０１２：０．３ｍＭ光プローブ，ＵＶ照射なし（対照）、ＰＰ０１３：Ｈ₂ Ｏ単独，ＵＶ照射なし（対照）。４．詳細な記載先行技術−アリールアジド類の光化学的反応アリールアジド類およびそれらの誘導体の光化学的反応が、図４において例示される。Ｎｕ−Ｈは例えばＨ₂Ｏ、Ｒ−ＯＨ、Ｒ−ＳＨ、Ｒ−ＮＨ₂または“重合体”である。高いエネルギーのＵＶ光線で照射されたとき、即ち、例２の表１におけるように、非常に反応性のニトレンが形成されそしてジヒドロアゼピンに迅速に転位される。後者は極度に不安定でありそしてそれが出会う最初の求核性化合物と直ちに反応する。もしこれが溶媒、例えば水であるならば、光化学剤は損失しそして重合体との反応が果たされない。したがって、そのような化学剤を用いる場合、表面を光化学剤で予めインキュベートし、その後に余分な化学剤を除去し、光分解の前に表面を乾燥することを必要とする。強い電子吸引性基を導入する場合、光化学的メカニズムはニトレン光化学的反応に変えられることが出来るがしかし、ニトレン化合物はまた、水を包含する溶媒と反応する。長い照射時間（典型的には１２時間）と組み合わせて、これはこの光反応性基の適用の時間消費を消費するものとし、効果的ではない。先行技術−ケトン類の光化学的反応光化学的反応性ケトン類の主な欠点は光化学的化学剤の損失を生ずる、対応するアルコールへのそれらの光化学的酸化である。また、それらは典型的には１２時間の長い照射時間を必要とし、このことはこれらを、感受性生体分子の固定化に不適当なものとする。先行技術−ベンゾフェノンの光化学的反応ベンゾフェノンの光化学は、エーテル結合を生成するキノン類とは対照的に、Ｃ−Ｃ結合の形成を生ずる。両方の基は水と非反応性である利点を有する。したがって水は溶媒として使用出来る。ベンゾフェノンおよびその誘導体の光化学反応は図５に例示されており、図５においてＲは重合体を示す。そのようなベンゾフェノンに基づく光反応性基は、高いエネルギーのＵＶ光線で励起し、次に基材から水素原子を引き抜くことによりラジカルを形成し、このラジカルは形成基材ラジカルと結合して生成物となるかあるいはそのラジカルは基材から他の水素原子を引き抜いて、対応するアルコールへの光化学的還元を生じて、結果として光化学剤の損失を生ずる。これらの反応について基材は合成重合体だけでなく、また例えばアルコールのような有機溶媒を包含する有機分子である。その光化学的カップリングは、典型的には重合体への有効なカップリングを得るためには１２時間３２０ｎｍでの照射を必要とする。この発明のキノン類の光化学的性質励起したキノンは一般に遊離基として反応しそして二重結合／三重結合への付加を生じ、水素原子を引き抜き、連鎖反応を開始する、等々。図６において例示されるように、キノンの共鳴構造に起因して、ラジカル反応がキノンの両方のカルボニル基上でまたはすべてのカルボニル基上で起こることが出来る。これらの反応パターンは、この発明におけるキノン類の基本的な光化学的性質である。それらの一般的挙動に起因して、大部分のキノン類はこの種の化学を果たすことが出来る。５．例以下に、本発明は多くの特定の例に関連することによりさらに記載される。ＡＱ：アントラキノンＢＯＰ：ベンゾトリアゾール−１−イル−Ｎ−オキシトリス−(ジメチルアミノ) −ホスホニウムヘキサフルオロホスフェートＢｕｔ：ｔｅｒｔ−ブチルＤＣＣ：ジシクロヘキシルカルボジイミドＤＣＵ：ジシクロヘキシル尿素ＤＩＥＡ：ジイソプロピルエチルアミンＤＭＦ：ジメチルホルムアミドＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシドＥＩ：電子イオン化ＥＬＩＳＡ：酵素結合された免疫吸着剤アッセイＦＡＢ：高速原子衝撃Ｆｍｏｃ：フルオレニルメトキシカルボニルＨＰＬＣ：高速液体クロマトグラフィＭｐ：融点ＭＳ：質量分光測定ＮＭＲ：核磁気共鳴ＮＴＡ：Ｎ−ニトリロトリ酢酸ＯＰＤ：フェニレン−１，２−ジアミン二塩酸塩ＰＥＧ：ポリエチレングリコールＰｍｃ：２，２，５，７，８ペンタメチルクロマン−６−スルホニルＴＦＡ：トリフルオロ酢酸ＴＨＦ：テトラヒドロフランＴＬＣ：薄層クロマトグラフィ。例１：図７は以下に記載されたとおりにして合成された、キノン−配位子、キノン− スペーサー−配位子化合物Ｎｏ．１〜Ｎｏ．２２を示す。モノ−Ｂｏｃ−保護ジアミン類がＳｙｎｔｈｅｔｉｃＣｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ（１９９０）２０第２５５９頁〜第２５６４頁においてＫｒａｐｃｈｏおよびＫｕｅｌｌにより記載されたとおりにして造られた。３−カルボキシ−フェナントレンキノン（化合物Ｎｏ．１）３−アセチルフェナントレン（５ｇ、０．２３ミリモル）を温かい酢酸（１００ｍｌ、６０℃）に溶解しそして酸化クロム（ＶＩ）（３０ｇ、０．６モル）を少しづつ加えた。この間に温度は沸点に上昇した。全ての酸化クロム（ＶＩ）の添加後、溶液を水（５００ｍｌ）で希釈しそして沈殿物を濾過し、酢酸／Ｈ₂Ｏ（１：１）、次に冷酢酸そして最後にジエチルエーテルで洗浄した。収量：２．１ｇ（３−アセチルフェナントレンから３７％）。Ｍｐ：２８０℃ ＭＳ（ＥＩ）：２５２（Ｍ⁺）．¹ ＨＮＭＲ（ｄ₆−ＤＭＳＯ）：８．７０ｐｐｍ（ｓ，１Ｈ），８．３４（ｄ，１Ｈ），８．０８（ｍ，３Ｈ），７．８０（ｔ，１Ｈ），７．５７（ｔ，１Ｈ）．Ｎ−（３−Ｂｏｃ−アミノプロピル）−フェナントレンキノン−３−カルボキシアミド（化合物Ｎｏ．２）化合物Ｎｏ．１（２５０ｍｇ、１．０ミリモル）、ＤＣＣ（２４５ｍｇ、１．２ミリモル）およびＨＯＤｈｂｔ（１７８ｍｇ、１．１ミリモル）をジオキサン（５０ｍｌ）中に溶解しそしてその混合物を一夜、反応させた。ジオキサンを真空蒸発させそして残留物をＤＭＦ（２５ｍｌ）中に懸濁させた。モノ−Ｂｏｃ− １，３−プロパンジアミン・ＨＣｌ（３３３ｍｇ、１．２ミリモル）を該懸濁液に加え、次に過剰のトリエチルアミン（１ｍｌ）を加えた。１時間後にＤＣＵを濾過しそして水（１５０ｍｌ）を加えた。黄色沈殿物を濾過により集めそして生成物を酢酸エチルから再結晶化した。収量：０．２３５ｍｇ（化合物Ｎｏ．１から５６％）、Ｍｐ：１９５℃（分解）¹ ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）：８．０２ｐｐｍ（ｔ，１Ｈ），７．９８（ｓ，１Ｈ），７．６５（ｄ，１Ｈ），７．５１−７．４５（ｍ，２Ｈ），７．３３（ｄ，１Ｈ），７．１４（ｔ，１Ｈ），６．８９（ｔ，１Ｈ），５．６２（ｂ，１Ｈ），２．８９−２．７１（ｍ，２Ｈ），２．４４−２．４１（ｍ，２Ｈ），１．１１−０．７５（ｍ，１１Ｈ）．Ｎ−（３−アミノプロピル）−フェナントレンキノン−３−カルボキシアミド・ＨＣｌ（化合物Ｎｏ．３）化合物Ｎｏ．２（１００ｍｇ、０．２４ミリモル）を、僅かに温められた酢酸（２．５ｍｌ、５０℃）に溶解しそして酢酸（２．５ｍｌ）中の１ＭのＨＣｌを加えた。５分後に、エーテル（１０ｍｌ）を加えそして沈殿物を濾過により集めそしてエーテルで数回洗浄した。収量：８１ｍｇ（化合物Ｎｏ．２から９５％）¹ ＨＮＭＲ（ｄ₆−ＤＭＳＯ）：９．２０ｐｐｍ（ｂ，１Ｈ），８．７８（ｓ，１Ｈ），８．５４（ｄ，１Ｈ），８．１４−７．９９（ｍ，６Ｈ），７．８６（ｔ，１Ｈ），７．６０（ｔ，１Ｈ），３．３８（−ＣＨ₂−Ｎ−Ｒ），２．８８（ｂ，２Ｈ），１．６９（ｓ，２Ｈ）．ＵＶ（エタノール／水）：^λｍａｘ＝２６６ｎｍ（ε＝３９０００），３３０（５７００），４２４（１４００）．Ｎ−（３−Ｂｏｃ−アミノプロピル）−アントラキノン−２−カルボキシアミド（化合物Ｎｏ．４）アントラキノン−２−カルボン酸（２．５２ｇ、１０ミリモル）を乾燥ＴＨＦ（１００ｍｌ）中に懸濁させた。懸濁液を０℃に冷却しそしてＤＣＣ（２．０６ｇ、１０ミリモル）を加えそして混合物を５分間かき混ぜた。固体ＨＯＤｈｂｔ（１．６３ｇ、１０ミリモル）を加え、そして混合物を０℃で１０分間そして次に室温で一夜かき混ぜた。ＴＨＦを真空除去し（４０℃）そして固体残留物をＤＭＦ（１００ｍｌ）中に懸濁させた。モノ−Ｄｏｃ−１，３−プロパンジアミン・ＨＣｌ（４．２１ｇ、２０ミリモル）を懸濁液に加え、次に過剰のトリエチルアミン（７ｍｌ）を加えた。２時間後、ＤＣＵを濾過により除きそして水（２００ｍｌ）を加えた。黄色沈殿物を濾過により集めそして生成物を酢酸エチル（２００ｍｌ）から再結晶化した。収量：３．５３ｇ（アントラキノン−２−カルボン酸から８７％）。Ｍｐ：１７３−１７５℃；ＴＬＣ（酢酸エチル）：Ｒ_f＝０．６１．ＭＳ（ＦＡＢ⁺）：４０９．１（ＭＨ⁺）¹ ＨＮＭＲ（ｄ₆−ＤＭＳＯ）：９．００ｐｐｍ（ｔ１Ｈ），８．７５（ｓ，１Ｈ），８．４０（ｄｄ，１Ｈ），８．３０（ｍ，３Ｈ），８．０５（ｍ，２Ｈ），６．９０（ｔ，１Ｈ），３．４０（ｑ，２Ｈ），３．１０（ｑ，２Ｈ），１．８０（ｑｎ，２Ｈ），１．４５（ｓ，９Ｈ）．Ｎ−（３−アミノプロピル）−アントラキノン−２−カルボキシアミド・ＨＣｌ（化合物Ｎｏ．５）化合物Ｎｏ．４（５．９２ｇ、１４．５ミリモル）をメタノール（２００ｍｌ）中に懸濁させた。メタノール（１５ｍｌ）中の６ＭのＨＣｌを加えそして混合物を１時間加熱還流させた。混合物を０℃に冷却しそしてジエチルエーテル（２００ｍｌ）を加えた。沈殿した生成物を濾過により集めそしてエーテルで数回洗浄した。収量：３．９８ｇ（化合物Ｎｏ．４から８０％）。Ｍｐ：２５０℃（分解）。ＴＬＣ（１−ブタノール／酢酸／水４：１：１）：Ｒｆ＝０．４３ＭＳ（ＦＡＢ⁺）：３０９．１（ＭＨ⁺）．¹ ＨＮＭＲ（ｄ₆−ＤＭＳＯ）：９．００ｐｐｍ（ｔ，１Ｈ），８．７５（ｓ，１Ｈ），８．５０（ｄｄ，１Ｈ），８．３０（ｍ，３Ｈ），８．１５（ｓ，３Ｈ），８．１０（ｍ，２Ｈ），３．５０（ｑ，２Ｈ），２．９５（ｔ，２Ｈ），１．９５（ｑｎ，２Ｈ）．ＵＶ（エタノール／水）：^λｍａｘ＝２５６ｎｍ（ε＝４９０００），３３２（４７００），３９０（３１０）．Ｂｏｃ−βＡｌａ−ＮＨ−（ＣＨ₂）₃−ＮＨＣＯ−ＡＱ（化合物Ｎｏ．６）Ｂｏｃ−β−Ａｌａ−ＯＨ（０．６０５ｇ、３．２０ミリモル）およびＢＯＰ（１．２８３ｇ、２．９ミリモル）をＤＭＦ（５０ｍｌ）中に溶解しそしてトリエチルアミン（４ｍｌ、３０ミリモル）を加えた。混合物を５分間予備活性化し、その後に化合物Ｎｏ．５（１．００ｇ、２．９０ミリモル）を一回で加えた。反応混合物を一夜室温でかき混ぜ、そして水（５０ｍｌ）の添加により生成物を沈殿させた。粗製生成物を濾過し、水で数回洗浄しそして最後にエタノール／水から再結晶化させた。収量：１．４０ｇ（化合物Ｎｏ．５から９２％）Ｍｐ：１７８−１７９℃，ＴＬＣ（８５：１０：５）：Ｒ_f＝０．７３．ＭＳ（ＦＡＢ⁺）：４８０．２（ＭＨ⁺）．¹ ＨＮＭＲ（ｄ₆−ＤＭＳＯ）：９．００ｐｐｍ（ｔ，１Ｈ），８．７５（ｓ，１Ｈ），８．４０（ｄｄ，１Ｈ），８．３５（ｍ，３Ｈ），８．０５（ｍ，２Ｈ），７．９０（ｔ，１Ｈ），６．８０（ｔ，１Ｈ），３．４０（ｑ，２Ｈ），３．２０（ｑ，４Ｈ），２．３０（ｔ，２Ｈ），１．７５（ｑｎ，２Ｈ），１．４５（ｓ，９Ｈ）．Ｈ−βＡｌａ−ＮＨ−（ＣＨ₂）₃−ＮＨＣＯ−ＡＱ・ＨＣｌ（化合物Ｎｏ．７）化合物Ｎｏ．６（０．２２０ｇ、２．５４ミリモル）をメタノール（４０ｍｌ）中に懸濁させた。メタノール（５ｍｌ）中の６ＭのＨＣｌを加えそして混合物を１時間加熱還流させた。混合物を０℃に冷却しそしてジエチルエーテル（４０ｍｌ）を加えた。沈殿した生成物を濾過により集めそしてエーテルで数回洗浄した。収量：０．９７０ｇ（化合物Ｎｏ．６から９２％）。Ｍｐ：２１９℃（分解）。ＴＬＣ（１−ブタノール／酢酸／水４：１：１）：Ｒｆ＝０．４０。ＭＳ（ＦＡＢ⁺）：３８０．１（ＭＨ⁺）．¹ ＨＮＭＲ（ｄ₆−ＤＭＳＯ）：９．１０ｐｐｍ（ｔ，１Ｈ），８．７５（ｓ，１Ｈ），８．４５（ｄｄ，１Ｈ），８．３５（ｍ，４Ｈ），８．１５（ｓ，３Ｈ），８．１０（ｍ，２Ｈ），３．４５（ｍ，４Ｈ），３．２５（ｑ，２Ｈ），３．１０（ｔ，２Ｈ），１．８０（ｑ，２Ｈ）．Ｂｏｃ−βＡｌａ−βＡｌａ−ＮＨ−（ＣＨ₂）₃−ＮＨＣＯ−ＡＱ（化合物Ｎｏ．８）化合物Ｎｏ．７（０．４９２ｇ、２．６０ミリモル）およびＢＯＰ（０．９５５ｇ、２．１６ミリモル）をＤＭＦ（８０ｍｌ）中に溶解しそしてトリエチルアミン（１．５ｍｌ、１０．２８ミリモル）を加えた。混合物を５分間、予備活性化させ、その後に化合物Ｎｏ．７（０．９００ｇ、２．１６ミリモル）を１回で加えた。反応混合物を一夜、室温でかき混ぜそして生成物を水（８０ｍｌ）の添加により沈殿させた。粗製生成物を濾過し、水で数回洗浄しそして最後にエタノール／水から再結晶化させた。収量：０．７４０ｇ（化合物Ｎｏ．７から６２％）。Ｍｐ：１８３〜１８４℃。ＴＬＣ（酢酸エチル／メタノール／酢酸８５：１０：５）：Ｒｆ＝０．４５ＭＳ（ＦＡＢ⁺）：５５１．３（ＭＨ⁺）．¹ ＨＮＭＲ（ｄ₆−ＤＭＳＯ）：９．０５ｐｐｍ（ｔ，１Ｈ），８．７５（ｓ，１Ｈ），８．３０（ｍ，４Ｈ），８．１０（ｍ，２Ｈ），７．９０（ｄｔ，２Ｈ），６．７５（ｔ，１Ｈ），３．４０（ｑ，２Ｈ），３．３５（ｑ，２Ｈ），３．２０（ｄｑ，４Ｈ），２．３０（ｄｔ，４Ｈ），１．８０（ｑｎ，２Ｈ），１．４５（ｓ，９Ｈ）．Ｈ−βＡｌａ−βＡｌａ−ＮＨ−（ＣＨ₂）₃−ＮＨＣＯ−ＡＱ・ＨＣｌ（化合物Ｎｏ．９）化合物Ｎｏ．８（０．７４０ｇ、１．３５ミリモル）をメタノール（１５ｍｌ）中に懸濁させた。メタノール（１ｍｌ）中の６ＭのＨＣｌを加えそして混合物を１時間加熱還流させた。混合物を０℃に冷却しそしてジエチルエーテル（１５ｍｌ）を加えた。沈殿した生成物を濾過により集め、そしてエーテルで数回洗浄した。収量：０．５９１ｇ（化合物Ｎｏ．６から９０％）。Ｍｐ：２１６〜２１９℃。ＴＬＣ（１−ブタノール／酢酸／水４：１：１）：Ｒｆ＝０．２６。ＭＳ（ＦＡＢ⁺）：４５１．１（ＭＨ⁺）．¹ ＨＮＭＲ（ｄ₆−ＤＭＳＯ）：９．００ｐｐｍ（ｔ，１Ｈ），８．６０（ｄ，１Ｈ），８．３５（ｄｄ，１Ｈ），８．３０（ｄ，１Ｈ），８．２５（ｍ，２Ｈ），８．１５（ｔ，１Ｈ），７．９５（ｍ，３Ｈ），７．８０（ｓ，３Ｈ），３．３０（ｍ，６Ｈ），３．１５（ｑ，２Ｈ），２．５０（ｔ，２Ｈ），２．３０（ｔ，２Ｈ），１．７５（ｑｎ，２Ｈ）．Ｂｏｃ−βＡｌａ−βＡｌａ−βＡｌａ−ＮＨ−（ＣＨ₂）₃−ＮＨＣＯ−ＡＱ（化合物Ｎｏ．１０）化合物Ｎｏ．９（０．２６３ｇ、１．３９ミリモル）およびＢＯＰ（０．５１３ｇ、１．１６ミリモル）をＤＭＦ（５０ｍｌ）中に溶解しそしてジイソプロピルエチルアミン（２ｍｌ、１２ミリモル）を加えた。混合物を５分間予備活性化させ、その後に化合物Ｎｏ．９（０．５６４ｇ、１．１６ミリモル）を１回で加えた。反応混合物を一夜、室温でかき混ぜそして水（５０ｍｌ）の添加により生成物を沈殿させた。粗製生成物を濾過し、水で数回洗浄しそして最後にエタノール／水から再結晶化させた。収量：０．６５４ｇ（化合物Ｎｏ．９から９１％）。Ｍｐ：２０９〜２１３℃。ＴＬＣ（メタノール）：Ｒｆ＝０．６０。ＭＳ（ＦＡＢ⁺）：６２２．２（ＭＨ⁺）。¹ ＨＮＭＲ（ｄ₆−ＤＭＳＯ）：９．０５ｐｐｍ（ｔ，１Ｈ），８．７５（ｓ，１Ｈ），８．３０（ｍ，４Ｈ），８．１０（ｍ，２Ｈ），８．００（ｄｔ，２Ｈ），７．９０（ｔ，１Ｈ），６．８０（ｔ，１Ｈ），３．３０（ｄｑ，６Ｈ），３．２０（ｄｑ，４Ｈ），２．３０（ｔｔ，６Ｈ），１．８０（ｑｎ，２Ｈ），１．４５（ｓ，９Ｈ）．Ｈ−βＡｌａ−βＡｌａ−βＡｌａ−ＮＨ−（ＣＨ₂）₃−ＮＨＣＯ−ＡＱ・ＨＣｌ（化合物Ｎｏ．１１）化合物Ｎｏ．１０（０．５００ｇ、０．８００ミリモル）をメタノール（１５ｍｌ）中に懸濁させた。メタノール（１ｍｌ）中の６ＭのＨＣｌを加えそして混合物を１時間加熱還流させた。混合物を０℃に冷却しそしてジエチルエーテル（１５ｍｌ）を加えた。沈殿した生成物を濾過により集めそしてエーテルで数回洗浄した。収量：０．４００ｇ（化合物Ｎｏ．１０から８９％）。Ｍｐ：２３５〜２３７℃（分解）。ＴＬＣ：（１−ブタノール／酢酸／水４：１：１）：Ｒｆ＝０．１４。ＭＳ（ＦＡＢ⁺）：５２２．１（ＭＨ⁺）。¹ ＨＮＭＲ（ｄ₆−ＤＭＳＯ）：９．００ｐｐｍ（ｔ，１Ｈ），８．６５（ｄ，１Ｈ），８．３０（ｄ，１Ｈ），８．２５（ｍ，２Ｈ），８．１５（ｔ，１Ｈ），８．００（ｍ，２Ｈ），７．９０（ｓ，３Ｈ），３．３５（ｔ，２Ｈ），３．２５（ｑ，４Ｈ），３．１５（ｑ，２Ｈ），２．９５（ｑ，２Ｈ），２．５０（ｔ，２Ｈ），２．３０（ｄｔ，４Ｈ），１．７０（ｑｎ，２Ｈ）．Ｎ−（５−カルボキシメチル−ペンチル）アントラキノン−２−カルボキシアミド（化合物Ｎｏ．１２）アントラキノン−２−カルボン酸（２．５２ｇ、１０ミリモル）を乾燥ＴＨＦ（１００ｍｌ）中に懸濁させそして０℃に冷却した。次にＤＣＣ（２．２６ｇ、１１ミリモル）を加えそして混合物を５分間かき混ぜた。固体ＨＯＤｈｂｔ（１．６３ｇ、１０ミリモル）を加えそして混合物を１０分間０℃でそして次に一夜室温でかき混ぜた。ＴＨＦを真空除去しそして固体残留物をＤＭＦ（１００ｍｌ）中に再懸濁させた。６−アミノヘキサン酸メチルエステル・ＨＣｌ（１．９９ｇ、１１ミリモル）を加え、次にトリエチルアミン（７ｍｌ、５０ミリモル）を加えそして混合物を一夜、室温でかき混ぜた。ＤＣＵを濾過により除去しそして生成物を水（２００ｍｌ）の添加により沈殿させた。粗製生成物を濾過により集めそして酢酸エチルから再結晶化させた。収量：３．０９ｇ（アントラキノン−２− カルボン酸から７３％）。Ｍｐ：１４４〜１４５℃。ＴＬＣ（酢酸エチル）：Ｒｆ＝０．６８。ＭＳ（ＦＡＢ⁺）：３８０．１（ＭＨ⁺）。¹ ＨＮＭＲ（ｄ₆−ＤＭＳＯ）：９．００ｐｐｍ（ｔ，１Ｈ），８．７５（ｓ，１Ｈ），８．４０（ｄｄ，１Ｈ），８．３０（ｍ，３Ｈ），８．０５（ｍ，２Ｈ），３．７０（ｓ，３Ｈ），３．４０（ｑ，２Ｈ），２．４０（ｔ，２Ｈ），１．７０（ｑｎ，６Ｈ），１．４０（ｑｎ，４Ｈ）．Ｎ−（５−カルボキシペンチル）−アントラキノン−２−カルボキシアミド（化合物Ｎｏ．１３）化合物Ｎｏ．１２（０．９４９ｇ、２．５ミリモル）をＴＨＦ（１５ｍｌ）中に懸濁させた。０．５ＭのＬｉＯＨ（１５ｍｌ）を加えそして混合物を１時間、室温でかき混ぜた。ＴＨＦを真空除去しそして２ＭのＨＣｌ（６ｍｌ）の添加により生成物を沈殿させた。粗製生成物を濾過により集め、水で洗浄しそして真空乾燥させた。収量：０．８２２ｇ（化合物Ｎｏ．１２から９０％）。Ｍｐ：１９８〜１９９℃。ＴＬＣ（石油エーテル／酢酸エチル／酢酸５：５：１）：Ｒｆ＝０．４３。ＭＳ（ＦＡＢ⁺）：３６６．２（ＭＨ⁺）。¹ ＨＮＭＲ（ｄ₆−ＤＭＳＯ）：１２．００ｐｐｍ（ｓ，１Ｈ），９．００（ｔ，１Ｈ），８．７５（ｓ，１Ｈ），８．４０（ｄｄ，１Ｈ），８．３５（ｍ，３Ｈ），８．００（ｍ，２Ｈ），２．３０（ｔ，２Ｈ），１．６０（ｑｎ，６Ｈ），１．４０（ｑｎ，４Ｈ）．Ｎ−（６−ヒドラジド−ヘキシル）−アントラキノン−２−カルボキシアミド（化合物Ｎｏ．１４）化合物Ｎｏ．１２（０．５ｇ、１．３２ミリモル）をメタノール（５ｍｌ）中に懸濁させた。ヒドラジン一水和物（１ｍｌ、２０ミリモル）を１回で加えそして反応混合物を６時間還流させそして次に放置して、室温に冷却させた。溶媒を真空除去しそして残留磁気物質（リマネンス：ｒｅｍａｎｅｎｃｅ）を氷冷水（２０ｍｌ）中に再懸濁させた。沈殿した生成物を濾過により集めそして水で洗浄しそして真空乾燥させた。収量：０．３７３ｇ（化合物Ｎｏ．１２から７５％）。Ｍｐ：１８１℃（分解）。ＴＬＣ（酢酸エチル／メタノール６：４）：Ｒｆ＝０．４８。ＭＳ（ＦＡＢ⁺）：３８０．２４（ＭＨ⁺）。１−（３−（カルボキシアミド−アントラキノン−２−イル）−プロピル）−チオセミカルバジド（化合物Ｎｏ．１５）ＢＯＰ（０．２５７ｇ、０．５８ミリモル）および二硫化炭素（０．３５ｍｌ、５．８ミリモル）をＤＭＦ中に溶解した。次に、トリエチルアミン（０．２４ｍｌ、１．７４ミリモル）を加え、次に固体化合物Ｎｏ．５（０．２ｇ、０．５８ミリモル）を加えた。混合物を室温で１時間かき混ぜた。過剰の二硫化炭素を真空除去しそしてその溶液を、ＤＭＦ（０．５ｍｌ）中のヒドラジン一水和物（０．５ｍｌ、７．８ミリモル）のかき混ぜた氷冷溶液に滴下して加えた。混合物を一夜、室温でかき混ぜそして生成物を氷冷水（２５ｍｌ）の添加により沈殿させた。沈殿した生成物を濾過により集め、そして水で洗浄しそして真空乾燥させた。収量：０．１６４ｇ（化合物Ｎｏ．５から７４％）。Ｍｐ：２０２〜２０５ ℃（分解）。ＴＬＣ（酢酸エチル／メタノール６：４）：Ｒｆ＝０．６３。ＭＳ（ＦＡＢ⁺）：３８３．１（ＭＨ⁺）。ＨＯ₂Ｃ−（ＣＨ₂）₃−ＣＯＮＨ−（ＣＨ₂）₃−ＮＨＣＯ−ＡＱ（化合物Ｎｏ．１６）化合物Ｎｏ．１２（０．４５ｇ、１．３１ミリモル）および無水マレイン酸（０．１９ｇ、１．９ミリモル）をＤＭＦ（３０ｍｌ）中に溶解した。トリエチルアミン（１．８ｍｌ、１３．１ミリモル）を加えそして混合物を３時間室温でかき混ぜた。生成物を氷冷０．５ＭのＨＣｌ（３０ｍｌ）の添加により沈殿させ、濾過により集めそしてエタノール／水から再結晶化させた。収量：０．３７４ｇ（化合物Ｎｏ．１２から７９％）。ＴＬＣ（酢酸エチル／メタノール６：４）：Ｒｆ＝０．３３。ＭＳ（ＦＡＢ⁺）：４０９．１（ＭＨ⁺）。α−Ｄ−Ｇｌｃｐ（１−∞４）−β−Ｄ−Ｇｌｃｐ−１−Ｎ（Ａｃ）−（ＣＨ₂ ）₃−ＮＨ−ＣＯ−ＡＱ（化合物Ｎｏ．１７）化合物Ｎｏ．１５（０．１０３ｇ、０．３００ミリモル）及びマルトース一水和物（０．３２４ｍｇ、０．９００ミリモル）を乾燥メタノール中に溶解した。ＤＩＥＡ（７０μｌ、０．４００ミリモル）を加えそして混合物を一夜、窒素雰囲気中で加熱した。混合物を０℃に冷却しそして無水酢酸（１ｍｌ）を加えた。室温で一夜、放置した後に、メタノールを真空除去しそして残留物を水中に溶解しそして０．２μｍのフィルター中を通過させて濾過しそして凍結乾燥させた。得られた固体を水中に再溶解しそしてＳｅｐ−ＰａｋＶａｃカートリッジ（Ｃ₁₈、１００ｍｇ吸着剤（ｓｏｒｂｅｎｔ））上に載せた。残留する遊離マルトースを水（２×１０ｍｌ）で溶離しそしてキノン−マルトース共役を５０％アセトニトリル／水で溶離した。合併したアセトニトリル／水分画を凍結乾燥して僅かに黄色の容量のある粉末として化合物Ｎｏ．１７を生成した。収量：０．２０３ｍｇ（化合物Ｎｏ．１５から１００％）。ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．３２（大きいスポット，化合物Ｎｏ．１７）；Ｒｆ＝０．６６（小さいスポット，ＣＨ₃−ＣＯＮＨ−（ＣＨ₂）₃−ＮＨＣＯ−ＡＱ）。ＨＰＬＣ（ＤｅｌｔａＰａｋ５μ Ｃ₁₈ ３．９×１５０ｍｍ；緩衝液Ａ：Ｈ₂Ｏ中０．１％ＴＦＡ；緩衝液Ｂ：アセトニトリル／水９：１中０．１％ＴＦＡ；勾配：２分間１００Ａ、次に２０分間にわたって１００％Ａから１００％Ｂへの線状勾配、次に５分間１００％Ｂ）：Ｒｔ＝１２．０７分，（７７％，３３２ｎｍ），１２．２９（５％），１２．６７（１４％），１３，３５（４％，ＣＨ₃−ＣＯＮＨ−（ＣＨ₂）₃−ＮＨＣＯ− ＡＱ）．ＭＳ（ＦＡＢ⁺）：６７５．２５（ＭＨ⁺）；７１７．４８（ＭＨ⁺＋ＣＨ₃−ＣＯ）；７５９．５８（ＭＨ⁺＋２ＣＨ₃ＣＯ）；３５１．１６（ＣＨ₃−ＣＯＮＨ −（ＣＨ₂）₃−ＮＨＣＯ−ＡＱ・Ｈ⁺）．ＡＱ−ＣＯ−（ＣＨ₂）₃−ＮＨ−６−ケトエストラジオール−６−（Ｏ−カルボキシメチル）−オキシム（化合物Ｎｏ．１８）化合物Ｎｏ．５（４８ｍｇ、０．１３９ミリモル）、６−ケトエストラジオール−６−（Ｏ−カルボキシメチル）−オキシム（５０ｍｇ、０．１３９ミリモル）およびＢＯＰ（６５ｍｇ、０．１３９ミリモル）をＤＭＦ中に懸濁させた。ジイソプロピルエチルアミン（４９μｌ、０．２７８ミリモル）を加えそして混合物を３時間、室温でかき混ぜた。水（３ｍｌ）を加えそして沈殿した生成物を濾過し、１０％Ｎａ₂ＣＯ₃（３回）で、１０％ＫＨＳＯ₄（３回）で、洗浄しそして水で数回洗浄しそして最後に真空乾燥した。収量９０ｍｇ（１００％）。ＴＬＣ（酢酸エチル／酢酸９５：５）：Ｒｆ＝０．２７。ＭＳ（ＦＡＢ⁺）：６５０．２６（ＭＨ⁺）；６７２．２８（Ｍ＋Ｎａ⁺）。ＡＱ−ＣＯ−εＡｈｘ−Ｇｌｎ−Ｇｌｕ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−ＯＨ（化合物Ｎｏ．１９）Ｈ−Ｇｌｎ−Ｇｌｕ（ＯＢｕ^t）−Ｓｅｒ（ｂｕ^t）−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ（ｂｕ^t）−Ｇｌｙ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−ＰｅｐＳｙｎ−ＫＡがカップリング反応の固相オンライン監視を有する特注による製造の完全自動連続流ペプチド合成器上で標準のＦｍｏｃ−プロトコールを用いて合成された。Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−ＰｅｐＳｙｎ−ＫＡ樹脂（７５０ｍｇ、０．０９ミリモル／ｇ）をカラム上に乗せそしてＤｈｂｔ−エステルとしてセリンがカップリングされた以外は、触媒／指示薬として加えられた対応するＦｍｏｃ−アミノ−酸−ＯＰｆｐ− エステル（３当量）およびＨＯＤｈｂｔ（１当量）を用いて各それぞれのカップリングが行われた。合成の終わりに、ペプチジル樹脂を泡立て装置に移しそして樹脂にＮ−（５−カルボキシペンチル）−アントラキノン−２−カルボキシアミド（化合物Ｎｏ．１３）（３当量）およびＢＯＰ（３当量）を加え、次にＤＩＥＡ（９当量）を加えた。カップリング反応を一夜進行させた。化学剤Ｋ（ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ／チオアニソール／フェノール／エタンジエチオール８２．５：５：５：２．５）を用いて樹脂からＮ−末端キノン置換ペプチドを開裂した。樹脂を焼結ガラスフィルター上で濾過し、ＴＦＡで数回洗浄し、そして開裂混合物を窒素流中で濃縮した。氷冷ジエチルエーテルを用いてペプチドを沈殿させそしてペプチドペレットを２％酢酸／水中に再溶解し、０．２μｍフィルター中を通過させて濾過しそして最後に凍結乾燥した。ＨＰＬＣ（ＤｅｌｔａＰａｋ５μ Ｃ₁₈ ３．９×１５０ｍｍ；緩衝液Ａ：Ｈ₂Ｏ中０．１％ＴＦＡ；緩衝液Ｂ：アセトニトリル／水９：１中０．１％ＴＦＡ；勾配：２分間１００％Ａ、次に２０分間にわたって１００％Ａから１００％Ｂに線状勾配、次に５分間１００％Ｂ）：Ｒｔ＝１３．６４分。純度≧９０％（２２０ｎｍ）。ＭＳ（ＦＡＢ⁺）：１１６６．３５（ＭＨ⁺）。ＮＴＡ−βＡｌａ−βＡｌａ−ＮＨ−（ＣＨ₂）₃−ＮＨＣＯ−ＡＱ（化合物Ｎｏ．２０）グリセリンｔｅｒｔ−ブチルエステル・ＨＣｌ（３．３４ｇ、２０ミリモル）を水性炭酸ナトリウム中に溶解した。遊離のｔｅｒｔ−ブチルエステルをジクロロメタン（３×１００ｍｌ）中に抽出しそして炭酸ナトリウム上で乾燥した。溶媒を真空除去して遊離のｔｅｒｔ−ブチルエステルの２．４４ｇ（９２％）を得た。ＤＩＥＡ（２０ｍｌ）を加え、次にベンジル−２−ブロモアセテート（８ｍｌ）を加えた。混合物を４５分間加熱還流し、次に室温に冷却し、酢酸エチルで希釈しそして水性炭酸ナトリウムで洗浄し、次に水で洗浄した。溶媒を真空除去しそしてＮＴＡ−ｔｅｒｔ−ブチル−ジベンジルエステルを、溶離剤としてヘキサン中１０〜３０％の酢酸エチルの勾配を用いてシリカゲルカラム上で精製した。収量：７．１ｇ（８３％）。ＴＦＡとジクロロメタンの１：１の混合物を用いて２時間還流によりそのｔｅｒｔ−ブチルエステルを開裂してトリフルオロ酢酸塩としてＮＴＡ−ジベンジルエステルを得た。化合物Ｎｏ．９（０．３９４ｇ、０．８０９ミリモル）、ＮＴＡ−ジベンジルエステル（０．３８３ｇ、１．０３ミリモル）およびＢＯＰ（０．４５６ｇ、１．０３ミリモル）をＤＭＦ（２０ｍｌ）中に懸濁させた。ＤＩＥＡ（０．８７ｍｌ、５ミリモル）を加えそして混合物を一夜、放置した。水（２０ｍｌ）を加えそして沈殿した生成物を濾過により集めそして水で数回洗浄した。粗製生成物を熱いエタノール（７５ｍｌ）中に溶解しそして活性炭を用いて溶液を脱色した。水（５０ｍｌ）を加えそして溶液を約６０ｍｌに濃縮した。混合物を室温で一夜、放置しそして沈殿した生成物を濾過した。固体をＴＨＦ（１０ｍｌ）中に懸濁させそして０．５ＭのＬｉＯＨ（５ｍｌ）を加えた。溶液を２．５時間、室温でかき混ぜ、次にＴＨＦを真空除去しそして１０％燐酸を加えた。生成物を濾過により集め、水で洗浄しそして真空乾燥した。収量：０．２１４ｇ（化合物Ｎｏ．９から４２％）。Ｍｐ：１５８〜１６３℃。ＴＬＣ（メタノール／ピリジン／酢酸８０：２０：６）：Ｒｆ＝０．４２。ＭＳ（ＦＡＢ⁺）：６２４．２３（ＭＨ⁺）；６４６．２０（Ｍ＋Ｎａ⁺）アントラキノン−２−カルボン酸クロライド（化合物Ｎｏ．２１）アントラキノン−２−カルボン酸（２．５２ｇ、１０ミリモル）をジクロロメタン（１００ｍｌ）中に懸濁させた。塩化チオニル（５０ｍｌ）を加えそして混合物を数時間、窒素雰囲気中で加熱還流して、透明な黄色溶液を得た。ジクロロメタンおよび過剰の塩化チオニルを真空除去して黄色固体を得た。固体を濾過し、石油エーテルで数回洗浄しそして真空乾燥した。収量：２．６９ｇ（アントラキノン−２−カルボン酸から９９％）。Ｍｐ：１４３〜１４４．５℃。ＴＬＣ（メチルエステルとして分析された：少量の酸塩化物のサンプルを乾燥メタノール中に溶解しそして溶離剤として酢酸エチルを用いて直ちに分析した）：Ｒｆ＝０．６８。ＭＳ（ＦＡＢ⁺）：３０７．１（ＭＨ⁺）。ＡＱ−ＣＯ−ＰＥＧ２０００（化合物Ｎｏ．２２）ＰＥＧ２０００（２．００ｇ、１ミリモル）をトルエン（１００ｍｌ）中に溶解した。トルエンの５０ｍｌを留去しそして溶液を室温に冷却した。アントラキノン−２−カルボン酸クロライド（０．２７１ｇ、１ミリモル）を加え、次にピリジン（１．６ｍｌ、２０ミリモル）を加えそして混合物を窒素雰囲気中で１時間加熱還流した。トルエンおよび過剰のピリジンを蒸留により除去し、次に水（１００ｍｌ）を加えそして残留トルエンを共沸蒸留により除去した。目的の化合物を水から凍結乾燥により単離した。収量：２．２８ｇ（１０２％）。ＨＰＬＣ（ＤｅｌｔａＰａｋ５μ Ｃ₁₈ ３．９×１５０ｍｍ；緩衝液Ａ：水中０．１％ＴＦＡ；緩衝液Ｂ：アセトニトリル／水９：１中０．１％ＴＦＡ；勾配：２分間２５％Ａ＋７５％Ｂ、１０分間にわたって２５％Ａ＋７５％Ｂから１００％Ｂの線状勾配、次に１０分にわたって１００％Ｂ）：Ｒｔ＝２．４分（アントラキノン−２−カルボン酸：２．６％（３３０ｎｍ））；Ｒｔ＝３．６９分（ＡＱ−ＣＯ−ＰＥＧ２０００：７８．９％（３３０ｎｍ））；Ｒｔ＝７．０８分（ＡＱ−ＣＯ−ＰＥＧ２０００−ＣＯ−ＡＱ：１８．５％（３３０ｎｍ））例２：アントラキノン（ＶＩＩ）置換されている例１における化合物Ｎｏ．５（この実験においてＱ１と称する）及びフェナントレンキノン（ＶＩＩＩ）置換されている例１における化合物Ｎｏ．３（この実験においてＱ２と称する）及び選ばれた数の他の光プローブが１９０〜８２０ナノメータの波長範囲における吸収において研究された。化合物ＸＸＶＩは図１に示される構造に相当する。以下の吸収極大および吸光係数（ε）が見いだされた（表１参照）。例３：ＵＶグラフト化によるポリスチレン表面上への第一級アミノ基の導入第一級アミノ基の導入に対する、キノンのタイプの影響ならびに光プローブ濃度および照射時間の影響が、２つのタイプのポリスチレン（即ち、（１）Ｎｕｎｃ−Ｉｍｍｕｎｏ^RＭｏｄｕｌｅＦ１６ＰｏｌｙＳｏｒｐ（非処理ポリスチレン、ＮｕｎｃｃａｔＮｏ．４６７６７９）：（２）消毒されていないＮｕｎｃＦ９６Ｎｕｎｃｌｏｎ^RＤｅｌｔａ処理プレート）上にフェナントレンキノンアミン化合物Ｎｏ．３およびアントラキノンアミン化合物Ｎｏ．５を用いて試験された。キノンアミン化合物Ｎｏ．３および化合物Ｎｏ．５を蒸留水中に溶解しそして光プローブの０．５８μＭの出発濃度で５倍希釈シリーズでＥＬＩＳＡプレートの各々のウェル（ｗｅｌｌ）に１００μｌを加えた。ＵＶランプ（ＰｈｉｌｉｐｓＨＰＡ４００：そのランプは主として３００〜４００ｎｍの低エネルギーＵＶ−ＡおよびＵＶ−Ｂを発射する）下１４ｃｍにプレートを置きそしてそれらをそれぞれ５分、７分および１０分間照射した。ウエルを脱イオン水で３回リンスしそして６０℃で５０分間乾燥した。光プローブを含有するプレートを対照として光分解中暗所に維持した。ＰＢＳ緩衝液（燐酸塩緩衝化食塩水：０．１５ＭのＮａ⁺、４．２ｍＭのＫ⁺、７．９ｍＭの燐酸イオン，ｐＨ７．２）中の、ビオチン−スクシンイミドエステル（Ｓｉｇｍａｃａｔ．Ｎｏ．Ｈ１７５９）を加え（１００μｌ／ウェル）そしてウェルを室温で一夜インキュベートした。そのウェルをＣｏｖａＢｕｆｆｅｒ（ＰＢＳ緩衝液，ｐＨ７．２＋２ＭのＮａＣｌ＋４．１ｍＭのＭｇＳＯ₄＋０．５％（ｖ／ｖ）Ｔｗｅｅｎ２０^R）で３回洗浄し、最後の洗浄後、１０分間ＣｏｖａＢｕｆｆｅｒをウェル中にそのままにして置いた。ウェルを吸引しそしてアビジン混合物（ｐＨ７．２のＰＢＳ緩衝液中の４μｇ／ｍｌのアビジン（Ｓｉｇｍａｃａｔ．Ｎｏ．Ａ９３９０）および０．１３μｇ／ｍｌのＨｏｒｓｅＲａｄｉｓｈペルオキシダーゼ共役アビジン（ＤＡＫＯｃａｔ．Ｎｏ．Ｐ３４７）を各々のウェルに加えた（１００μｌ／ウェル）。ウェルを２時間室温でインキュベートしそして上記のとおりのＣｏｖａＢｕｆｆｅｒで２回洗浄した。結合したたんぱく質の量は、色素生成性基材として、０．０１５％（ｖ／ｖ）Ｈ₂Ｏ₂および０．６ｍｇ／ｍｌのＯＰＤ（ＳｉｇｍａＣａｔ．Ｎｏ．Ｐ８４１２）を含有するくえん酸塩緩衝液（０．１Ｍ、ｐＨ５．０）中においてペルオキシダーゼ活性を測定することにより定量化された。その酵素反応をＨ₂ＳＯ₄（２Ｍ、１００μｌ／ウェル）の添加により６分後に停止させそしてＥＬＩＳＡ読み取り装置（ｒｅａｄｅｒ）（ＩｎｔｅｒＭｅｄＩｍｍｕｎｏ読み取り装置ＮＪ２０００）上の４９０ｎｍでの吸収を測定することにより、着色反応を定量化した。フェナントレンキノンアミン化合物Ｎｏ．３についての結果を図８ａおよび８ｂに示す。ＰｏｌｙＳｏｒｐ^R表面（図８ａ）上において、対照水準よりも意義ある高いシグナルは観察されず、一方ではＮｕｎｃｌｏｎ^RＤｅｌｔａ処理表面上においては、全ての照射時間について高いシグナルが観察され、最大は０．１１６ｍＭの光プローブ濃度および５分の照射時間を用いて得られた。アントラキノンアミン化合物Ｎｏ．５についての結果を図９ａおよび９ｂに示す。ＰｏｌｙＳｏｒｐ^R 表面（図９ａ）上において、背景（対照）より意義ある高いシグナルが明らかに見られた。最大は０．１１６ｍＭ〜０．０２３２ｍＭの光プローブ濃度および１０分間の照射時間を用いて得られた。Ｎｕｎｃｌｏｎ^RＤｅｌｔａ処理表面上において、３．７２・１０^-5ｍＭより高い光プローブの濃度を用いてすべての照射時間において、背景（対照）より有意義に高いシグナルが観察された。種々のスペーサーアーム（ａｒｍ）の効果がアントラキノンアミン化合物Ｎｏ．５、Ｎｏ．７およびＮｏ．９について試験された。０．１ｍＭの光プローブの濃度になるようにアントラキノンアミンを蒸留水中に溶解しそして１００μｌをＮｕｎｃ−Ｉｍｍｕｎｏ^RＭｏｄｕｌｅＦ１６ＰｏｌｙＳｏｒｐおよび消毒されていないＮｕｎｃＦ９６（Ｎｕｎｃｌｏｎ^RＤｅｌｔａ処理）プレートの各々のウェルに加えた。プレートをＵＶランプ下１０ｃｍに置きそして１０分間照射した。ウェルを脱イオン水で３回洗浄しそして６０℃で５０分間乾燥した。ＰＢＳ緩衝液中のビオチン−スクシンイミドエステルの２倍希釈シリーズを加え（１００μｌ／ウェル）そしてウェルを室温で一夜インキュベートした。ウェルをＣｏｖａＢｕｆｆｅｒで３回洗浄し、アビジン混合物を加えそして結合したたんぱく質の量を前に記載されたとおりにして定量化した。その結果を図１０に示しそして結合材（ｌｉｎｋｅｒ）の長さの影響を明らかに示している。２つの β−アラニン単位を有する化合物Ｎｏ．９はＰｏｌｙＳｏｒｐ^R上にグラフトされた場合に全体的に最も高いシグナルを示した。化合物Ｎｏ．９がＮｕｎｃｌｏｎ^RＤｅｌｔａ処理プレート上にグラフト化された場合に、より低いシグナルが見られた。しかしながら、そのシグナルは化合物Ｎｏ．５および化合物Ｎｏ．７についてのシグナルよりいぜんとして高く、光プローブと第一級アミノ基との間の最適なスペーサー長さを有することの利点を示している。ポリスチレン表面上に光化学的にグラフト化されたアミノ基の均一性がアントラキノンアミン化合物Ｎｏ．９を用いて試験された。０．１ｍＭの光プローブの濃度になるように化合物Ｎｏ．５を蒸留水中に溶解した。１００μｌの溶液を、４つの消毒されていないＮｕｎｃＦ９５（Ｎｕｎｃｌｏｎ^RＤｅｌｔａ処理）プレートにおける各々のウェルに加え、ＵＶランプ下１０ｃｍに置きそして１０分間照射した。各々のウェルを脱イオン水で３回洗浄しそして６０℃で５０分間乾燥した。ＰＢＳ緩衝液中のビオチン−スクシンイミドエステルを加え（１２５ μｇ／ｍｌ、１００μ／ウェル）そしてウェルを室温で一夜インキュベートさせた。ＣｏｖａＢｕｆｆｅｒで３回洗浄後、アビジン混合物を各々のウェルに加えそして前に記載されたとおりにして結合たんぱく質の量を定量化した。結果を表２に示す。ポリスチレン表面上に光化学的にグラフト化されたアミノ基の貯蔵安定性を、アントラキノンアミン化合物Ｎｏ．９を用いて試験した。０．１ｍＭの光プローブの濃度になるように化合物Ｎｏ．５を蒸留水中に溶解した。１００μｌの溶液を消毒していないＮｕｎｃＦ９６（Ｎｕｎｃｌｏｎ^RＤｅｌｔａ処理）プレートおよびＮｕｎｃ−Ｉｍｍｕｎｏ^RＭｏｄｕｌｅＦ８ＰｏｌｙＳｏｒｐプレート（Ｎｕｎｃｃａｔ．Ｎｏ．４６９０７８）中の各々のウェルに加え、ＵＶランプ下１０ｃｍに置きそして１０分間、照射した。各々のウェルを脱イオン水で３回洗浄しそして６０℃で５０分間乾燥させた。各タイプの１つのプレートを、密封したプラスチックバッグ中にパックしそして４℃、２０℃、３７℃および６０℃で３０日までの間、貯蔵した。貯蔵の１、２、６、１３、２０および３０日の間隔で試験のためにプレートを取り出した。各々のタイプの１つのプレートを安定性試験のために用いた。プレートをビオチン−スクシンイミドエステルで、次にアビジン混合物でインキュベートしそして結合したたんぱく質の量を前に記載された通りに定量化した。結果を図１１および１２に示す。すべてのデータはゼロ日（貯蔵なし）に相対して正規化された。それらの結果は３７℃またはそれ以下の貯蔵温度で活性において意味ある減少は見られないけれども、６０℃で貯蔵したプレートはシグナルにおいて僅かな減少を示した。ＵＶグラフト化によるポリスチレン表面上へのカルボン酸の導入アントラキノンカルボン酸誘導体化合物Ｎｏ．１３を０．１ＭのＬｉＯＨに溶解しそして５ｍＭの濃度になるように蒸留水で希釈した。光プローブの２倍希釈シリーズ（１００μｌ／ウェル）が消毒されていないＮｕｎｃＦ９６（Ｎｕｎｃｌｏｎ^RＤｅｌｔａ処理）プレートにおいてそしてＮｕｎｃ−Ｉｍｍｕｎｏ^RＭｏｄｕｌｅＦ８ＰｏｌｙＳｏｒｐプレートにおいて造られた。プレートはＵＶ照射まえに５０℃で１時間シェーカー（ｓｈａｋｅｒ）上に置かれた。ウェルを吸引しそしてＵＶランプ下１４ｃｍに置きそして１０分間照射した。照射されていないプレートを対照として用いた。ウェルを脱イオン水で３回洗浄しそして各々のウェルにクリスタルバイオレット（Ｍｅｒｃｋｃａｔ．Ｎｏ．１４０８：蒸留水の１００ｍｌ中１５ｍｇ）を加えた（１００μｌ／ウェル）。プレートを室温で３０分間インキュベートし、脱イオン水で３回洗浄しそして６０℃で３０分間乾燥させた。結合されたクリスタルバイオレットの溶解は各々のウェルに９６％エタノール中の１ＭのＨＣｌの溶液を加えることにより行われた。５９０ｎｍでＩｎｔｅｒＭｅｄＩｍｍｕｎｏ読み取り装置ＮＪ２０００上で結果を読み取りそして図３に示す。クリスタルバイオレットはイオン対としてカルボン酸に結合するので、シグナルにおける増加は表面上に固定化されたカルボン酸基の存在を示す。ＵＶ照射されなかったプレート上でシグナルは得られなかったけれども光プローブの濃度の増加とともに有意義に増大するシグナルがＰｏｌｙＳｏｒｐ^R表面に見られた。例４：ＵＶグラフト化によるポリスチレン表面上へのペプチドの共有カップリングＮ−末端アントラキノン置換されているペプチド化合物Ｎｏ．１９を蒸留水に溶解した（０．１ｍｇ／ｍｌ）。ブランク対照として用いられた−列Ａ以外は− ２つのＮｕｎｃ−Ｉｍｍｕｎｏ^RＭｏｄｕｌｅＦ１６ＰｏｌｙＳｏｒｐ^Rの各々のウェルに１００μｌを加えた。１つの時間で１つのストリップ（２×８ウェル）が２、５、１０、１５、３０および６０分、それぞれ照射された（ＵＶランプ下１４ｃｍ）。ＵＶ照射後プレートを０．２５％Ｔｗｅｅｎ２０^Rを含有する０．４ＭのＮａＯＨで３回リンスしそしてＰＢＳ緩衝液で３回リンスした。固定化されたペプチドはモノクロナール抗・ペプチド抗体（デンマーク、コペンハーゲンのＳｔａｔｅｎｓＳｅｒｕｍｉｓｔｉｔｕｔからの培養上澄み液Ｈｙｂ１６１−２）を用いて検出された。ＰＢＳ−Ｔｗｅｅｎ^R緩衝液中の抗体の２倍希釈シリーズが列Ｃおよびそれ以上がＩｍｍｕｎｏＭｏｄｕｌｅｓにおいて造られた（１００μｌ／ウェル）。列Ａ（ペプチドブランク）において希釈されていない培養上澄み液が加えられ、一方では列ＢがＨｙｂ１６１−２なしの対照として用いられた。ＩｍｍｕｎｏＭｏｄｕｌｅｓを室温で２時間インキュベートしそして次に０．０５％ＴｒｉｔｏｎＸ−１００^Rを含有するＰＢＳ緩衝液を用いて３回洗浄した。ウサギ抗-マウス（ｒａｂｂｉｔａｎｔｉ− ｍｏｕｓｅ）（２μｇ／ｍｌＤＡＫＯｃｏｄｅＺ２５９）及びワサビダイコン（ｈｏｒｓｅｒａｄｉｓｈ）ペルオキシダーゼ共役ヤギ抗−マウス（ｇｏａｔａｎｔｉ−ｍｏｕｓｅ）（１：５００，ＤＡＫＯｃｏｄｅＰ４４７）の混合物を各々のウェルに加え（１００μｌ）、室温で１時間インキュベートしそして上記のとおりにして３回洗浄した。ＯＰＤ基材（１００μｌ）を各々のウェルに加えそして２ＭのＨ₂ＳＯ₄（１００μｌ／ウェル）を用いて４分後に基材反応を停止させた。結果は図１４に示されそして最適の照射時間が２〜１５分であったことを明瞭に示している。Ｈｙｂ１６１−２培養上澄み液の最適な希釈ファクターは約１０でありそして次の実験において用いられた。照射時間の効果をさらに調べた。Ｈｙｂ１６１−２の一定の濃度（１０倍希釈された培養上澄み液）が使用された以外は、実験は上記のとおりにして行われた。結果を図１５に示すそして１０分の照射時間が最適であったがしかし２分後でさえ、最大応答の８０％より大が得られたことを明らかに示している。ペプチドが存在しないウェルにおける並びにＨｙｂ１６１−２が存在しないウェルにおける背景（特定反応なし）は低かった。より長い照射時間における減少はペプチドバックボーンとアントラキノン光プローブとの光化学架橋が増大してエピトープ識別の破壊に導くことに起因していると思われる。ペプチド濃度の影響を試験した。Ｎ−末端アントラキノン置換ペプチド化合物Ｎｏ．１９およびアントラキノン部分がない（遊離のＮ−末端）ペプチドを水中に溶解した（２ｍｇ／ｍｌ）そしてＮｕｎｃＦ１６ＰｏｌｙＳｏｒｐ^RＩｍｍｕｎｏＭｏｄｕｌｅｓにおける各々のペプチド溶液について２倍希釈シリーズが造られた。それらのＭｏｄｕｌｅｓは１０分間（ＵＶランプ下１４ｃｍで）照射されそして前に記載されたとおりにして洗浄された。アントラキノン−ペプチドを有するＩｍｍｕｎｏＭｏｄｕｌｅｓおよび遊離ペプチドを有するＩｍｍｕｎｏＭｏｄｕｌｅｓを、対照として光分解中、暗所に維持した。固定化されたペプチドは一定の濃度のＨｙｂ１６１−２（１０倍希釈された培養上澄み液）を用いて上に記載されたとおりにして測定された。結果を図１６に示す。アントラキノン−ペプチドを含有する照射されたウェルだけが何らかの検出出来るシグナルを示した。アントラキノン−ペプチドの最適の濃度は約４μｇ／ｍｌであった。より高い濃度におけるシグナルの減少は、前に記載されたとおりに、固定化されたペプチドのペプチドバックボーンを光化学的に架橋し、エピトープ識別における破壊に導くことに起因している可能性がある。これに加えて、溶液中のアントラキノン−ペプチドのより高い濃度は重合体との反応よりも溶液相光化学を優先し、可溶性光化学架橋されたペプチド凝集体に導き、これは後で洗浄工程で除去される。光化学的にグラフト化されたペプチドの貯蔵安定性を調べた。アントラキノンペプチドＮｏ．１９を蒸留水に溶解し（０．１ｍＭ）そしてＮｕｎｃ−Ｉｍｍｕｎｏ^RＭｏｄｕｌｅＦ１６ＰｏｌｙＳｏｐｒ^Rの各々のウェルにその溶液を加えた。ウェルを１０分間（ＵＶランプ下１４ｃｍで）照射しそして最後に前に記載されたとおりにして洗浄した。ウェルをＰＢＳ緩衝液中１％スクロースでコーティングし（３００μｌ／ウェル）、室温で１時間インキュベートし、次に吸引しそして圧縮空気を用いて乾燥した。プレートを、密封されたプラスチックバッグ中にパックしそして４℃および３７℃で貯蔵した。１〜３２日の間隔で試験のために取り出した。ＥＬＩＳＡを前に記載されたとおりにして行いそしてデータを図１７に提供する。すべてのデータはゼロ日に相対して正規化された。貯蔵期間中にシグナルにおける低下は検出されなかったがしかし３７℃の貯蔵温度は、一貫して４℃の場合より僅かに低いシグナルを提供した。例５：ポリスチレン表面上へのアントラキノンニトリロトリ酢酸（ＮＴＡ）誘導体２０のＵＶグラフト化アントラキノンＮＴＡ誘導体２０を燐酸塩緩衝液（ｐＨ５．５）に溶解して１ｍＭの出発濃度にした。２つのＮｕｎｃ−Ｉｍｍｕｎｏ^TRＭｏｄｕｌｅＦ１６ＰｏｌｙＳｏｒｐプレートにおいて２倍希釈シリーズの溶液を造り（１００μｌ／ウェル）そして５０℃で１時間インキュベートした。ウェルを吸引しそして一方のプレートをＵＶランプ（ＰｈｉｌｉｐｓＨＰＡ４００）下１４ｃｍに置きそして５分間ＵＶ光で照射する一方、他方のプレートを対照として暗所に維持した。すべてのウェルを脱イオン水で洗浄し、次にクリスタルバイオレット溶液（脱イオン水の１００ｍｌ中１５ｍｇ：１００μｌ／ウェル）を添加しそして３０分間、室温でインキュベートした。プレートを水で洗浄しそして１時間６０℃で乾燥した。クリスタルバイオレットの溶解は、各々のウェルに、エタノール中１ＭのＨＣｌの溶液を加えることにより行われた。結果を５９０ｎｍでのＩｎｔｅｒＭｅｄＩｍｍｕｎｏ読み取り装置ＮＪ上で読み取った。結果を図１１に示しそして光プローブの濃度の増大とともにシグナルにおいての意義ある増大を示す。ＵＶ照射されなかったウェルにおいてシグナルは得られなかった。金属キレート類、特にニッケルキレート類がヒスチジン結合ペプチド類およびたんぱく質類に対して特異の結合性質を有することが報告された（ＨｏｃｈｕｌｉによるＪ．Ｃｈｒｏｍａｔ．４１１，ｐｐ１７７〜１８４（１９８７））。新規なＮＴＡ−誘導化ミクロ滴定（ｍｉｃｒｏｔｉｔｒｅ）プレートが、ヒスチジン結合ペプチドと選択的に結合する能力を試験するために、ヘキサヒスチジンとの結合を有するそしてそれとの結合を有しない、３種のビオチニル化ペブチドは標準のＦｍｏｃ固相ペプチド合成により合成された（３種のペプチドは例１におけるアントラキノン置換ペプチド（化合物１９）と同様に造られた）。溶液の前もっての吸引を行うことなしにプレートが１０分間ＵＶ−光線で照射された以外は、アントラキノン置換ＮＴＡ誘導体の光カップリングは上に記載されたとおりにして行われた。プレートをＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．２）で３回洗浄しそして次にＮｉＳＯ₄（ＭｉｌｌｉＱ水中５０ｍＭ、１００μｌ／ウェル）を加えることによりニッケルを入れた。室温で３０分間インキュベートした後、ウェルをＭｉｌｌｉＱ水で３回洗浄した。検定緩衝液（０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０^Rおよび５００ｍＭのＮａＣｌを含有するＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．２））中の各々のペプチドの溶液（２３μＭ、１００μｌ／ウェル）をプレートの別々の列（ｒｏｗ）に加えた。対照として水を残りの列に加えた。ペプチドを室温で一夜インキュベートし、次にウェルを該検定緩衝液で３回洗浄しそして該検定緩衝液中のアビジン混合物（１００μｌ／ウェル：詳細については例３参照）をウェルに加えた。室温で２時間後にウェルを空にし、該検定緩衝液で３回洗浄しそしてペルオキシダーゼ活性を測定（詳細については例３参照）することにより固定化されたアビジンの量を定量化した。結果を図１８ａに示しそしてヒスチジン結合ペプチドがニッケルキレートプレートにおいて何らかの意義ある結合を提供することを明らかに示している。例６：ポリスチレン表面上へのアントラキノン置換ポリエチレングリコール２０００（ＡＱ−ＣＯ−ＰＥＧ２０００）誘導体２２のＵＶグラフト化アントラキノンＰＥＧ２０００誘導体２２をＭｉｌｌｉＱ水に溶解して０．３ｍＭの濃度にした。（デンマークのＮｕｎｃからの）ポリスチレンスライドを、９６％エタノールでリンス（超音波をかけて１×５分）しそしてＭｉｌｌｉＱ水でリンス（超音波をかけて２×５分）しそしてＣａＣｌ₂上非真空デシケーター中で乾燥した（ＣａＣｌ₂上大気中残留水：０．１４〜１．４ｍｇ／ｌ）。光固定化の前に、スライドを大気中の自然の水含有量と平衡にした。２つのスライドを小さな金属の容器中に置きそして光プローブ溶液を加えてスライドの表面上約２．５ｍｍの溶液でスライドの表面をカバーした。スライドの１つをＵＶ− ランプ（ＰｈｉｌｉｐｓＨＰＡ４００）下１０ｃｍに置きそして５分間照射し、一方では他のスライドを対照として暗所に維持した。両方のスライドをボトルからのＭｉｌｌｉＱ水を用いて、次に超音波をかけてＭｉｌｌｉＱ水を用いて３回（３×５分）十分にリンスした。スライドをＣａＣｌ₂上非真空デシケーター中で乾燥させた。追加の対照として、２つのスライドをＰＥＧ２０００溶液（０．３ｍＭ）で上記のとおりに処理しそして他のスライドをＭｉｌｌｉＱ水だけで処理した。ＶＣＡ−２０００機器（ＡＳＴＰｒｏｄｕｃｔｓ，Ｉｎｃ．製）を用いて前進（ａｄｖａｎｃｉｎｇ）接触角度を測定することにより光グラフト化の効果を試験した。ＭｉｌｌｉＱ水の５滴（１．５〜２．５μｌ）を各各のスライド上に置きそして製造者のソフトウェアを用いて前進接触角度を測定した（液滴当たり２つの接触角度はスライド当たり１０の接触角度を与える）。各系列の測定の前に、スライドを大気中の自然の水含有量と平衡にした。結果を図１２に示すそして対照と比較して、アントラキノン置換ＰＥＧ２０００光グラフト化ポリスチレンスライド上の前進接触角度の減少を明らかに示している。例７：ポリプロピレン表面上へのアントラキノン置換ポリエチレングリコール２０００（ＡＱ−ＣＯ−ＰＥＧ２０００）誘導体２２のＵＶグラフト化アントラキノンＰＥＧ２０００誘導体２２をＭｉｌｌｉＱ水に溶解して０．３ｍＭの濃度にした。（デンマークのＮｕｎｃからの）ポリプロピレンスライドを、ポリスチレンスライド（例６）について記載されたとおりにしてリンスしそして乾燥した。２つのスライドを小さな金属容器中に入れそして光プローブ溶液を加えてスライドの表面上溶液の約２．５ｍｍでスライドの表面をカバーした。スライドの１つをＵＶ−ランプ（ＰｈｉｌｉｐｓＨＰＡ４００）下１０ｃｍに置きそして５分間照射した一方、他のスライドを対照として暗所に維持した。両方のスライドをボトルからのＭｉｌｌｉＱ水でそして次に超音波をかけてＭｉｌｌｉＱ水で１０回（１０×５分）十分にリンスした。スライドをＣａＣｌ₂ 上の非真空デシケーター中で乾燥した。追加の対照として１つのスライドを、上記のとおりに洗浄し且つ乾燥した。ポリスチレンスライドについて記載されたとおりにして、前進接触角度の測定を行った。結果を図１３に示すそして対照と比較してアントラキノン置換ＰＥＧ２０００光グラフト化ポリプロピレンスライド上の前進接触角度における減少を明らかに示している。

【手続補正書】特許法第１８４条の８第１項【提出日】１９９７年４月８日【補正内容】 (1) 明細書第６頁及び第７頁の差替頁の翻訳文本発明の目的は、上記欠点を受けない、炭素含有材料の表面上に所望の配位子を固定化するための、光化学的方法を提供することである。本発明の特定の目的は炭素含有材料表面上に配位子を固定するために一般的に使用されることが出来る光化学的方法を提供することである。他の特定の目的は炭素含有材料表面上に配位子を固定化する光化学的方法であって、実施しそしてコントロールするのに容易であり且つ費用がかからずそして既知の方法より最適に速い光化学的方法を提供することである。本発明の別の目的は、炭素含有材料表面上に配位子を固定する光化学的方法であって、配位子が有害な処理に付されずそしてそれ故に配位子が感受性である生体分子である場合でさえ、それらの機能を実質的に維持する光化学的方法を提供することである。この目的は、炭素含有基材材料の表面（Ｐ）に配位子（Ｌ）を固定化する方法を提供することによって達成され、前記方法は次のとおりのことからなる：炭素含有材料表面（Ｐ）に１種またはそれ以上の光化学的に反応性の化合物（Ｑ）を介して１種またはそれ以上の配位子（Ｌ）を結合する光化学的工程；前記炭素含有材料表面（Ｐ）は、直接にあるいは１種またはそれ以上のスペーサー（Ｓ₁）を介して光化学的に反応性の化合物（Ｑ）に結合される；そして前記光化学的に反応性の化合物（Ｑ）は直接にあるいは場合により１種またはそれ以上のスペーサー（Ｓ）および（または）熱化学的に反応性の化合物（Ｔ）を介して１種またはそれ以上の配位子（Ｌ）に結合される；前記スペーサー（Ｓ₁）および（Ｓ）は等しいかまたは異なり、熱化学的にまたは光化学的に反応性であるかあるいは非反応性であるスペーサーである；光化学的に反応性の化合物（Ｑ）は、単量体キノン化合物、二量体キノン化合物、および対称または不斉のオリゴマーキノン化合物からなる群から選ばれたキノン化合物である；前記キノン化合物（Ｑ）は、環式炭化水素または２〜１０融合環式炭化水素を含有し、前記キノン化合物は少なくとも２つの共役カルボニル基を有し、その数は融合環式炭化水素の数の２倍を超えない；前記キノン化合物（Ｑ）は、配位子（Ｌ）の固定化に対して立体障害を生じないかまたは光化学を妨げない置換基（Ｒ）で、場合により置換されている；そして光化学工程は、ＵＶ線から可視光線までの範囲の波長を有する非電離性電磁放射線を用いて光化学的に反応性の化合物（Ｑ）を照射する；但し前記炭素含有材料は核酸プローブからならないことを条件とする；ことからなる。本発明は、請求項１において規定されたとおりの前記キノン化合物が非常に良好な結果で光化学的に反応性の化合物として使用されることが出来ることの驚くべき発見に基づいている。 (2) 明細書第１９頁の差替文の翻訳文当業者は、本発明の範囲内の多くの他の方法で本方法が実施されることが出来ることを知るであろう。本発明の好ましい且つ例示的な態様（ａ）〜（ｆ）は以下の反応工程からなる：ａ）工程１：Ｑ＋Ｌ → Ｑ−Ｌ工程２：Ｑ−Ｌ＋Ｐ → Ｐ−Ｑ−Ｌ（光反応性工程）ｂ）工程１：Ｑ＋Ｓ → Ｑ−Ｓ工程２：Ｑ−Ｓ＋Ｐ → Ｑ−Ｓ−Ｌ工程３：Ｑ−Ｓ−Ｌ＋Ｐ → Ｐ−Ｑ−Ｓ−Ｌ（光反応性工程）ｅ）工程１：Ｑ＋Ｔ → Ｑ−Ｔ工程２：Ｑ−Ｔ＋Ｐ → Ｐ−Ｑ−Ｔ（光反応性工程）工程３：Ｐ−Ｑ−Ｔ＋Ｌ → Ｐ−Ｑ−Ｔ−Ｌｆ）工程１：Ｑ＋Ｓ → Ｑ−Ｓ工程２：Ｑ−Ｓ＋Ｔ → Ｑ−Ｓ−Ｔ工程３：Ｑ−Ｓ−Ｔ＋Ｐ → Ｐ−Ｑ−Ｓ−Ｔ（光反応性工程）工程４：Ｐ−Ｑ−Ｓ−Ｔ＋Ｌ → Ｐ−Ｑ−Ｓ−Ｔ−Ｌ態様（ｆ）において、ＳおよびＴの反応順序は工程１と２とで逆転されてもよい。 (3) 明細書第２８頁の差替頁の翻訳文光化学的反応性ケトン類の主な欠点は光化学的化学剤の損失を生ずる、対応するアルコールへのそれらの光化学的酸化である。また、それらは典型的には１２時間の長い照射時間を必要とし、このことはこれらを、感受性生体分子の固定化に不適当なものとする。先行技術−ベンゾフェノンの光化学的反応ベンゾフェノンの光化学は、エーテル結合を生成する可能性があるキノン類とは対照的に、Ｃ−Ｃ結合の形成を生ずる。両方の基は水と非反応性である利点を有する。したがって水は溶媒として使用出来る。ベンゾフェノンおよびその誘導体の光化学反応は図５に例示されており、図５においてＲは重合体を示す。そのようなベンゾフェノンに基づく光反応性基は、高いエネルギーのＵＶ光線で励起し、次に基材から水素原子を引き抜くことによりラジカルを形成し、このラジカルは形成基材ラジカルと結合して生成物となるかあるいはそのラジカルは基材から他の水素原子を引き抜いて、対応するアルコールへの光化学的還元を生じて、結果として光化学剤の損失を生ずる。これらの反応について基材は合成重合体だけでなく、また例えばアルコールのような有機溶媒を包含する有機分子である。その光化学的カップリングは、典型的には重合体への有効なカップリングを得るためには１２時間３２０ｎｍでの照射を必要とする。請求の範囲１．方法が以下のとおりのことからなる：炭素含有材料表面（Ｐ）に１種またはそれ以上の光化学的に反応性の化合物（Ｑ）を介して１種またはそれ以上の配位子（Ｌ）を結合する光化学的工程；前記炭素含有材料表面（Ｐ）は、直接にあるいは１種またはそれ以上のスペーサー（Ｓ₁）を介して光化学的に反応性の化合物（Ｑ）に結合される；そして前記光化学的に反応性の化合物（Ｑ）は直接にあるいは場合により１種またはそれ以上のスペーサー（Ｓ）および（または）熱化学的に反応性の化合物（Ｔ）を介して１種またはそれ以上の配位子（Ｌ）に結合される；前記スペーサー（Ｓ₁）および（Ｓ）は等しいかまたは異なり、熱化学的または光化学的に反応性であるかあるいは非反応性であるスペーサーである；光化学的に反応性の化合物（Ｑ）は、単量体キノン化合物、二量体キノン化合物、および対称または不斉のオリゴマーキノン化合物からなる群から選ばれたキノン化合物である；前記キノン化合物（Ｑ）は、環式炭化水素、または２〜１０融合環式炭化水素を含有し、前記キノン化合物は少なくとも２つの共役カルボニル基を有し、その数は融合環式炭化水素の数の２倍を超えない；前記キノン化合物（Ｑ）は、配位子（Ｌ）の固定化に対して立体障害を生じないかまたは光化学を妨げない置換基（Ｒ）で、場合により置換されている；そして光化学的程は、ＵＶ線から可視光線までの範囲の波長を有する非電離性電磁放射線を用いて光化学的に反応性の化合物（Ｑ）を照射することからなる；但し、前記炭素含有材料は核酸プローブからならないことを条件とする：ことを特徴とする、炭素含有基材材料の表面（Ｐ）に配位子（Ｌ）を固定化する方法。２．照射時間が一般に１２時間未満、好ましくは２００分未満、さらに好ましくは６０分未満、最も好ましくは３０分未満である、請求項１に記載の方法。３．キノン化合物が下記の一般式（ＸＸＸＶＩＩ）、（ＸＸＸＶＩＩＩ）および（ＸＸＸＩＸ）（但し、式中、ｍ、ｎおよびｏは０または１〜８の整数であり、ｍ、ｎおよびｏの合計は８またはそれ以下であり；ｌは０または１〜ｎの２倍の整数を示し；ｒおよびｑは０、１または２を示し；ｋは０または１〜ｍの２倍の整数を示し；そしてｔは０または１〜ｏの２倍の整数を示す）に従う１〜４融合環式炭化水素からなる、請求項１または２に記載の方法：４．キノン化合物（Ｑ）がアントラキノン類（Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、Ｘ、ＸＩ、ＸＩＩＩ、ＸＸＶＩＩＩ）、フェナントレンキノン類（ＶＩＩＩ、ＩＸ、ＸＩＩ）、ベンゾキノン類（Ｉ、ＩＩ）、ナフトキノン類（ＩＩＩ、ＩＶ、ＸＸＶＩＩ）および化合物（ＸＸＶＩ、ＸＸＩＸ）からなる群から選ばれ、特にアントラキノン類、フェナントレンキノン類および化合物（ＸＸＶＩ）である、請求項３に記載の方法：５．キノン化合物（Ｑ）が：−ＮＯ₂、−ＳＯ₃ ^-、−ＳＯ₂ 、−ＣＮ、−ＰＯ₃ ^2- 、−ＰＯ₂ ^-、−ＣＯＯＨ、ハロゲン、即ち−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、第一級アミン、第二級アミンおよび第三級アミンまたはそれらの誘導体を包含する官能基；及び−ＮＯ₂、−ＳＯ₃ ^-、−ＣＮ、−ＰＯ₃ ^2-、−ＰＯ₂ ^-−ＣＯＯＨ、ハロゲン、即ち−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、エポキシドおよび−Ｈで置換されていてもよいヒドロカルビル；からなる群から選ばれた置換基（Ｒ）で置換されており、前記ヒドロカルビルが好ましくは直鎖または分枝鎖の、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル、デカニル、ウンデカニル、ドデカニル、トリデカニル、テトラデカニル、ペンタデカニル、ヘキサデカニル、ヘプタデカニル、オクタデカニル、ノナデカニル、エイコサニルのようなアルキル類、１個またはそれ以上の二重結合または三重結合を有するそれらのもの：およびフェニル、ナフチル、ビフェニル、トリル、ベンジル、クメニル、メシチル、キシリル、ペンタレニル、インデニルのようなアリールである、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。６．重合体がポリスチレン、ポリエチレン、ポリ酢酸ビニル、ポリ塩化ビニル、ポリビニルピロリドン、ポリアクリロニトリル、ポリメタクリル酸メチル、ポリテトラフルオロエチレン、ポリカーボネート、ポリ−４−メチル−ペンチレン、ポリエステル、ポリプロピレン、セルロース、ニトロセルロース、でんぷん、多糖類、天然ゴム、ブチルゴム、スチレンブタジエンゴム、シリコーンゴムのような合成及び天然の重合体からなる群から選ばれる、請求項１に記載の方法。７．炭素含有材料（Ｐ）が炭素を含有するように予め変性された、シリカ、ガラス、コントロールされた細孔のガラス、シリカゲルまたは金属を包含する予め変性された材料；単層フィルムまたは多層フィルム；ラングミュア−ブロジェットフィルム；ミセル類；生物学的膜、たんぱく質；生物学的または有機物質で被覆された天然または合成重合体；からなる群から選ばれる、請求項１に記載の方法。８．配位子（Ｌ）が、−ＣＯＯＨ（カルボン酸類）、スルホン酸誘導体類、− ＣＯＯＲ（活性エステルを包含する、エステル類）、−ＣＯＸ（酸ハロゲン化物、酸フッ化物および酸塩化物、酸アジド類または同様な活性カルボン酸誘導体）、−ＣＯＮＨＮＨ₂（酸ヒドラジド類）、−ＮＨＣＯＮＨＮ₂（セミカルバジド類）、−ＮＨＣＳＮＨＮＨ₂（チオセミカルバジド類）、−ＣＮ（ニトリル類）、−ＣＨＯ（アルデヒド類）、ＲＲ’ＣＯ（ケトン類）、−ＯＨ（アルコール類）、−ＳＨ（チオール類）、−ＳＳＲ（ジサルファイド類）、−ＮＨ₂（第一級アミン、第二級アミンおよび第三級アミンを包含するアミン類）、−ＮＨＮＨ₂ （ヒドラジン類）、−ＯＲ（エーテル類）、エポキシド類、−ＳＲ（サルファイド類）、−Ｘ（ハロゲン化物類）、−ＮＯ₂、−ＣＨ₃からなる群から選ばれた官能基；またはそれらの誘導体；メチル、エチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチルまたは芳香族酸エステルのような非官能性基であるか；あるいは配位子はビオチンのような生物学的に活性な分子、トキシン、除草剤、殺虫剤、炭水化物、ペニシリン類のような抗生物質、細胞毒のような他の薬品、ステロイド類、ペプチド類、ヌクレオチド類、ペプチド核酸類（ＰＮＡ）及び核酸パートナー、たんぱく質類およびハプテンからなる群から選ばれる、請求項１に記載の方法。９．スペーサー（Ｓ）が、場合により芳香族またはモノ／ポリ不飽和炭化水素を含有する、ポリメチレンのようなＣ₁〜Ｃ₂₀アルキル基；ポリエチレングリコールのようなポリオキシエチレン；ポリ−β−アラニン、ポリグリシン、ポリリシン、ペプチド類のようなオリゴ／ポリアミド類；オリゴ糖類；ホスホーモノ／ジエステル類のようなオリゴ／ポリホスフェート；モノ／ジアミド類；およびオリゴ／ポリスルホンアミド／エステル類；からなる群から選ばれた距離生成基、あるいは上記単位の組み合わせ単位またはそれらの組み合わせ単位である、請求項１に記載の方法。１０．熱化学的反応性化合物（Ｔ）が：−ＣＯＯＨ（カルボン酸類）、スルホン酸誘導体、−ＣＯＯＲ（活性エステルを包含する、エステル類）、−ＣＯＸ（酸ハロゲン化物類、酸アジド類および同様なカルボン酸誘導体類）、−ＣＯＮＨＮＨ₂（酸ヒドラジド類）、−ＮＨＣＯＮＨＮＨ₂（セミカルバジド類）、−ＮＨＣＳＮＨＮＨ₂（チオセミカルバジド類）、−ＣＨＯ（アルデヒド類）、ＲＲ’ ＣＯ（ケトン類）、−ＯＨ（アルコール類）、−Ｘ（ハロゲン化物：塩化物、臭化物、沃化物）、−ＳＨ（チオール類）、−ＳＳＲ（ジサルファイド類）、−ＮＨ₂（第一級、第二級および第三級アミンを包含するアミン類）、−ＮＨＮＨ₂（ヒドラジン類）、エポキシド類、およびマレイミド類からなる群から選ばれた熱化学的に反応性の基を含有する化合物である、請求項１に記載の方法。１１．配位子（Ｌ）に、請求項１に規定したとおりのキノン化合物（Ｑ）を結合させてキノン−配位子共役（Ｑ−Ｌ）を得、そして基材材料表面（Ｐ）上に該キノン−配位子共役（Ｑ−Ｌ）を光固定化して基材料（Ｐ−Ｑ−Ｌ）を得る工程を含む、請求項１に記載の方法。１２．光化学的または熱化学的化合物の使用によりスペーサー分子（Ｓ）に配位子（Ｌ）を結合し、請求項１に規定したとおりのキノン化合物（Ｑ）にスペーサー−配位子共役（Ｓ−Ｌ）を結合して中間スペーサー分子を有するキノン−配位子共役（Ｑ−Ｓ−Ｌ）を得、そして基材表面（Ｐ）上に該キノン−配位子（Ｑ −Ｓ−Ｌ）を光固定化して基材材料（Ｐ−Ｑ−Ｓ−Ｌ）を得る工程を含む、請求項１に記載の方法。１３．スペーサー分子（Ｓ）に、請求項１に規定したとおりの少なくとも１種のキノン化合物（Ｑ）を結合し、配位子（Ｌ）にスペーサー−キノン共役（Ｑ− Ｓ）を結合して中間スペーサー分子を有するキノン−配位子共役（Ｑ−Ｓ−Ｌ）を得、そして次に基材表面（Ｐ）上に該キノン−配位子共役を光固定化して基材材料（Ｐ−Ｑ−Ｓ−Ｌ）を得る工程を含む、請求項１に記載の方法。１４．基材表面（Ｐ）に、請求項１に規定したとおりのキノン化合物（Ｑ）を結合してキノン−基材表面共役（Ｐ−Ｑ）を得、該キノン−基材表面共役（Ｐ− Ｑ）に配位子（Ｌ）を光固定化して基材材料（Ｐ−Ｑ−Ｌ）を得る工程を含む、請求項１に記載の方法。１５．光化学的または熱化学的化合物の使用によりスペーサー分子（Ｓ₁）を基材表面（Ｐ）に結合し、スペーサー−基材表面共役（Ｐ−Ｓ₁）に、請求項１に規定したとおりのキノン化合物（Ｑ）を結合して中間スペーサー分子を有するキノン−基材表面共役（Ｐ−Ｓ₁−Ｑ）を得、そしてキノン−重合体表面共役に配位子（Ｌ）を光固定化する工程を含む、請求項１に記載の方法。１６．請求項１に規定したとおりのキノン化合物（Ｑ）をスペーサー分子（Ｓ）に結合させ、基材表面にスペーサー−キノン共役（Ｑ−Ｓ）を結合して中間スペーサー分子を有するキノン−基材表面共役（Ｐ−Ｑ−Ｓ）を得る工程を含む、請求項１に記載の方法。１７．光反応が水性媒体中で行われる、請求項１に記載の方法。１８．請求項１に記載れれたとおりの方法に従って、炭素含有基材材料表面（Ｐ）に配位子を固定化するための、請求項１に規定したとおりのキノン（Ｑ）の使用。１９．請求項１に記載された方法に従って造られた、その表面（Ｐ）に固定化された配位子（Ｌ）を有する炭素含有基材材料。２０．検出システムにおいて、請求項１に記載された方法に従って造られたとおりの炭素含有基材材料の使用。２１．固体相イムノアッセイのための担体として、請求項１に造られたとおりの炭素含有基材材料の使用。２２．担体が、ウェルプレート、ビーズおよび微細球のような試験粒子、試験管、試験棒及び試験細片からなる群から選ばれる、請求項２１に記載の使用。２３．ペプチド類、オリゴヌクレオチド類、炭水化物および小さい有機分子の固相合成のための担体として、請求項１において造られたとおりの炭素含有基材材料の使用。【手続補正書】【提出日】１９９７年１０月７日【補正内容】１．請求の範囲を別紙の通り、補正する。２．明細書を下記の通り補正する。 (1) 明細書第１３頁第２行の「化合物１２」を『化合物１４』と訂正する。 (2) 明細書第２１頁第１行の「光化学的酸化」を『光化学的還元』と訂正する。３．図面の１／３０頁と２／３０頁（それぞれ第１図の１／４頁と２／４頁に相当する）を別紙添付のものと差し替える。請求の範囲１．方法が以下のとおりのことからなる：炭素含有材料表面（Ｐ）に１種またはそれ以上の光化学的に反応性の化合物（Ｑ）を介して１種またはそれ以上の配位子（Ｌ）を結合する光化学的工程；前記炭素含有材料表面（Ｐ）は、直接にあるいは１種またはそれ以上のスペーサー（Ｓ₁）を介して光化学的に反応性の化合物（Ｑ）に結合される；そして前記光化学的に反応性の化合物（Ｑ）は直接にあるいは場合により１種またはそれ以上のスペーサー（Ｓ）および（または）熱化学的に反応性の化合物（Ｔ）を介して１種またはそれ以上の配位子（Ｌ）に結合される；前記スペーサー（Ｓ₁）および（Ｓ）は等しいかまたは異なり、熱化学的または光化学的に反応性であるかあるいは非反応性であるスペーサーである；光化学的に反応性の化合物（Ｑ）は、単量体キノン化合物、二量体キノン化合物、および対称または不斉のオリゴマーキノン化合物からなる群から選ばれたキノン化合物である；前記キノン化合物（Ｑ）は、環式炭化水素、または２〜１０融合環式炭化水素を含有し、前記キノン化合物は少なくとも２つの共役カルボニル基を有し、その数は融合環式炭化水素の数の２倍を超えない；前記キノン化合物（Ｑ）は、配位子（Ｌ）の固定化に対して立体障害を生じないかまたは光化学を妨げない置換基（Ｒ）で、場合により置換されている；そして光化学的程は、ＵＶ線から可視光線までの範囲の波長を有する非電離性電磁放射線を用いて光化学的に反応性の化合物（Ｑ）を照射することからなる；但し、前記炭素含有材料は核酸プローブからならないことを条件とする：ことを特徴とする、炭素含有基材材料の表面（Ｐ）に配位子（Ｌ）を固定化する方法。２．照射時間が一般に１２時間未満、好ましくは２００分未満、さらに好ましくは６０分未満、最も好ましくは３０分未満である、請求項１に記載の方法。３．キノン化合物が下記の一般式（ＸＸＸＶＩＩ）、（ＸＸＸＶＩＩＩ）および（ＸＸＸＩＸ）（但し、式中、ｍ、ｎおよびｏは０または１〜８の整数であり、ｍ、ｎおよびｏの合計は８またはそれ以下であり；ｌは０または１〜ｎの２倍の整数を示し；ｒおよびｑは０、１または２を示し；ｋは０または１〜ｍの２倍の整数を示し；そしてｔは０または１〜ｏの２倍の整数を示す）に従う１〜４融合環式炭化水素からなる、請求項１または２に記載の方法：４．キノン化合物（Ｑ）がアントラキノン類（Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、Ｘ、ＸＩ、ＸＩＩＩ、ＸＸＶＩＩＩ）、フェナントレンキノン類（ＶＩＩＩ、ＩＸ、ＸＩＩ）、ベンゾキノン類（Ｉ、ＩＩ）、ナフトキノン類（ＩＩＩ、ＩＶ、ＸＸＶＩＩ）および化合物（ＸＸＶＩ、ＸＸＩＸ）からなる群から選ばれ、特にアントラキノン類、フェナントレンキノン類および化合物（ＸＸＶＩ）である、請求項３に記載の方法：５．キノン化合物（Ｑ）が：−ＮＯ₂、−ＳＯ₃ ^-、−ＳＯ₂ ^-、−ＣＮ、−ＰＯ₃ ^2- 、−ＰＯ₂ ^-、−ＣＯＯＨ、ハロゲン、即ち−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、第一級アミン、第二級アミンおよび第三級アミンまたはそれらの誘導体を包含する官能基；及び−ＮＯ₂、−ＳＯ₃ ^-、−ＣＮ、−ＰＯ₃ ^2-、−ＰＯ₂ ^-−ＣＯＯＨ、ハロゲン、即ち−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、エポキシドおよび−Ｈで置換されていてもよいヒドロカルビル；からなる群から選ばれた置換基（Ｒ）で置換されており、前記ヒドロカルビルが好ましくは直鎖または分枝鎖の、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル、デカニル、ウンデカニル、ドデカニル、トリデカニル、テトラデカニル、ペンタデカニル、ヘキサデカニル、ヘプタデカニル、オクタデカニル、ノナデカニル、エイコサニルのようなアルキル類、１個またはそれ以上の二重結合または三重結合を有するそれらのもの：およびフェニル、ナフチル、ビフェニル、トリル、ベンジル、クメニル、メシチル、キシリル、ペンタレニル、インデニルのようなアリールである、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。６．重合体がポリスチレン、ポリエチレン、ポリ酢酸ビニル、ポリ塩化ビニル、ポリビニルピロリドン、ポリアクリロニトリル、ポリメタクリル酸メチル、ポリテトラフルオロエチレン、ポリカーボネート、ポリ−４−メチル−ペンチレン、ポリエステル、ポリプロピレン、セルロース、ニトロセルロース、でんぷん、多糖類、天然ゴム、ブチルゴム、スチレンブタジエンゴム、シリコーンゴムのような合成及び天然の重合体からなる群から選ばれる、請求項１に記載の方法。７．炭素含有材料（Ｐ）が炭素を含有するように予め変性された、シリカ、ガラス、コントロールされた細孔のガラス、シリカゲルまたは金属を包含する予め変性された材料；単層フィルムまたは多層フィルム；ラングミュア−ブロジェットフィルム；ミセル類；生物学的膜、たんぱく質；生物学的または有機物質で被覆された天然または合成重合体；からなる群から選ばれる、請求項１に記載の方法。８．配位子（Ｌ）が、−ＣＯＯＨ（カルボン酸類）、スルホン酸誘導体類、− ＣＯＯＲ（活性エステルを包含する、エステル類）、−ＣＯＸ（酸ハロゲン化物、酸フッ化物および酸塩化物、酸アジド類または同様な活性カルボン酸誘導体）、−ＣＯＮＨＮＨ₂（酸ヒドラジド類）、−ＮＨＣＯＮＨＮＨ₂（セミカルバジド類）、−ＮＨＣＳＮＨＮＨ₂（チオセミカルバジド類）、−ＣＮ（ニトリル類）、−ＣＨＯ（アルデヒド類）、ＲＲ’ＣＯ（ケトン類）、−ＯＨ（アルコール類）、−ＳＨ（チオール類）、−ＳＳＲ（ジサルファイド類）、−ＮＨ₂（第一級アミン、第二級アミンおよび第三級アミンを包含するアミン類）、−ＮＨＮＨ₂（ヒドラジン類）、−ＯＲ（エーテル類）、エポキシド類、−ＳＲ（サルファイド類）、−Ｘ（ハロゲン化物類）、−ＮＯ₂、−ＣＨ₃からなる群から選ばれた官能基；またはそれらの誘導体；メチル、エチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチルまたは芳香族酸エステルのような非官能性基であるか；あるいは配位子はビオチンのような生物学的に活性な分子、トキシン、除草剤、殺虫剤、炭水化物、ペニシリン類のような抗生物質、細胞毒のような他の薬品、ステロイド類、ペプチド類、ヌクレオチド類、ペプチド核酸類（ＰＮＡ）及び核酸パートナー、たんぱく質類およびハプテンからなる群から選ばれる、請求項１に記載の方法。９．スペーサー（Ｓ）が、場合により芳香族またはモノ／ポリ不飽和炭化水素を含有する、ポリメチレンのようなＣ₁〜Ｃ₂₀アルキル基；ポリエチレングリコールのようなポリオキシエチレン；ポリ−β−アラニン、ポリグリシン、ポリリシン、ペプチド類のようなオリゴ／ポリアミド類；オリゴ糖類；ホスホ−モノ／ジエステル類のようなオリゴ／ポリホスフェート；モノ／ジアミド類；およびオリゴ／ポリスルホンアミド／エステル類；からなる群から選ばれた距離生成基、あるいは上記単位の組み合わせ単位またはそれらの組み合わせ単位である、請求項１に記載の方法。１０．熱化学的反応性化合物（Ｔ）が：−ＣＯＯＨ（カルボン酸類）、スルホン酸誘導体、−ＣＯＯＲ（活性エステルを包含する、エステル類）、−ＣＯＸ（酸ハロゲン化物類、酸アジド類および同様なカルボン酸誘導体類）、−ＣＯＮＨＮＨ₂（酸ヒドラジド類）、−ＮＨＣＯＮＨＮＨ₂（セミカルバジド類）、−ＮＨＣＳＮＨＮＨ₂（チオセミカルバジド類）、−ＣＨＯ（アルデヒド類）、ＲＲ’ ＣＯ（ケトン類）、−ＯＨ（アルコール類）、−Ｘ（ハロゲン化物：塩化物、臭化物、沃化物）、−ＳＨ（チオール類）、−ＳＳＲ（ジサルファイド類）、−ＮＨ₂（第一級、第二級および第三級アミンを包含するアミン類）、−ＮＨＮＨ₂（ヒドラジン類）、エポキシド類、およびマレイミド類からなる群から選ばれた熱化学的に反応性の基を含有する化合物である、請求項１に記載の方法。１１．配位子（Ｌ）に、請求項１に規定したとおりのキノン化合物（Ｑ）を結合させてキノン−配位子共役（Ｑ−Ｌ）を得、そして基材材料表面（Ｐ）上に該キノン−配位子共役（Ｑ−Ｌ）を光固定化して基材料（Ｐ−Ｑ−Ｌ）を得る工程を含む、請求項１に記載の方法。１２．光化学的または熱化学的化合物の使用によりスペーサー分子（Ｓ）に配位子（Ｌ）を結合し、請求項１に規定したとおりのキノン化合物（Ｑ）にスペーサー−配位子共役（Ｓ−Ｌ）を結合して中間スペーサー分子を有するキノン−配位子共役（Ｑ−Ｓ−Ｌ）を得、そして基材表面（Ｐ）上に該キノン−配位子（Ｑ −Ｓ−Ｌ）を光固定化して基材材料（Ｐ−Ｑ−Ｓ−Ｌ）を得る工程を含む、請求項１に記載の方法。１３．スペーサー分子（Ｓ）に、請求項１に規定したとおりの少なくとも１種のキノン化合物（Ｑ）を結合し、配位子（Ｌ）にスペーサー−キノン共役（Ｑ− Ｓ）を結合して中間スペーサー分子を有するキノン−配位子共役（Ｑ−Ｓ−Ｌ）を得、そして次に基材表面（Ｐ）上に該キノン−配位子共役を光固定化して基材材料（Ｐ−Ｑ−Ｓ−Ｌ）を得る工程を含む、請求項１に記載の方法。１４．基材表面（Ｐ）に、請求項１に規定したとおりのキノン化合物（Ｑ）を結合してキノン−基材表面共役（Ｐ−Ｑ）を得、該キノン−基材表面共役（Ｐ− Ｑ）に配位子（Ｌ）を光固定化して基材材料（Ｐ−Ｑ−Ｌ）を得る工程を含む、請求項１に記載の方法。１５．光化学的または熱化学的化合物の使用によりスペーサー分子（Ｓ₁）を基材表面（Ｐ）に結合し、スペーサー−基材表面共役（Ｐ−Ｓ₁）に、請求項１に規定したとおりのキノン化合物（Ｑ）を結合して中間スペーサー分子を有するキノン−基材表面共役（Ｐ−Ｓ₁−Ｑ）を得、そしてキノン−重合体表面共役に配位子（Ｌ）を光固定化する工程を含む、請求項１に記載の方法。１６．請求頂１に規定したとおりのキノン化合物（Ｑ）をスペーサー分子（Ｓ）に結合させ、基材表面にスペーサー−キノン共役（Ｑ−Ｓ）を結合して中間スペーサー分子を有するキノン−基材表面共役（Ｐ−Ｑ−Ｓ）を得る工程を含む、請求項１に記載の方法。１７．光反応が水性媒体中で行われる、請求項１に記載の方法。１８．請求項１に記載れれたとおりの方法に従って、炭素含有基材材料表面（Ｐ）に配位子を固定化するための、請求項１に規定したとおりのキノン（Ｑ）の使用。１９．請求項１に記載された方法に従って造られた、その表面（Ｐ）に固定化された配位子（Ｌ）を有する炭素含有基材材料。２０．検出システムにおいて、請求項１に記載された方法に従って造られたとおりの炭素含有基材材料の使用。２１．固体相イムノアッセイのための担体として、請求項１に造られたとおりの炭素含有基材材料の使用。２２．担体が、ウェルプレート、ビーズおよび微細球のような試験粒子、試験管、試験棒及び試験細片からなる群から選ばれる、請求項２１に記載の使用。２３．ペプチド類、オリゴヌクレオチド類、炭水化物および小さい有機分子の固相合成のための担体として、請求項１において造られたとおりの炭素含有基材材料の使用。【図１】【図１】

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ)，ＵＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ

Claims

【特許請求の範囲】１．方法が以下のとおりのことからなる：炭素含有材料表面（Ｐ）に１種またはそれ以上の光化学的に反応性の化合物（Ｑ）を結合する光化学的工程；前記炭素含有材料表面（Ｐ）は、直接にあるいは１種またはそれ以上のスペーサー（Ｓ₁）を介して光化学的に反応性の化合物（Ｑ）に結合される；そして前記光化学的に反応性の化合物（Ｑ）は直接にあるいは場合により１種またはそれ以上のスペーサー（Ｓ）および（または）熱化学的に反応性の化合物（Ｔ）を介して１種またはそれ以上の配位子（Ｌ）に結合される；前記スペーサー（Ｓ₁）および（Ｓ）は等しいかまたは異なり、熱化学的または光化学的に反応性であるかあるいは非反応性であるスペーサーである；光化学的に反応性の化合物（Ｑ）は、単量体キノン化合物、二量体キノン化合物、および対称または不斉のオリゴマーキノン化合物からなる群から選ばれたキノン化合物である；前記キノン化合物（Ｑ）は、環式炭化水素、または２〜１０融合環式炭化水素を含有し、前記キノン化合物は少なくとも２つの共役カルボニル基を有し、その数は融合環式炭化水素の数の２倍を超えない；前記キノン化合物（Ｑ）は、配位子（Ｌ）の固定化に対して立体障害を生じないかまたは光化学を妨げない置換基（Ｒ）で、場合により置換されている；そして光化学的程は、ＵＶ線から可視光線までの範囲の波長を有する非電離性電磁放射線を用いて光化学的に反応性の化合物（Ｑ）を照射することからなる；ことを特徴とする、炭素含有基材材料の表面（Ｐ）に配位子（Ｌ）を固定化する方法。２．照射時間が一般に１２時間未満、好ましくは２００分未満、さらに好ましくは６０分未満、最も好ましくは３０分未満である、請求項１に記載の方法。３．キノン化合物が下記の一般式（ＸＸＸＶＩＩ）、（ＸＸＸＶＩＩＩ）および（ＸＸＸＩＸ）（但し、式中、ｍ、ｎおよびｏは０または１〜８の整数であり、ｍ、ｎおよびｏの合計は８またはそれ以下であり；１は０または１〜ｎの２倍の整数を示し；ｒおよびｑは０、１または２を示し；ｋは０または１〜ｍの２倍の整数を示し；そしてｔは０または１〜ｏの２倍の整数を示す）に従う１〜４融合環式炭化水素からなる、請求項１または２に記載の方法：４．キノン化合物（Ｑ）がアントラキノン類（Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、Ｘ、ＸＩ、ＸＩＩＩ、ＸＸＶＩＩＩ）、フェナントレンキノン類（ＶＩＩＩ、ＩＸ、ＸＩＩ）、ベンゾキノン類（Ｉ、ＩＩ）、ナフトキノン類（ＩＩＩ、ＩＶ、ＸＸＶＩＩ）および化合物（ＸＸＶＩ、ＸＸＩＸ）からなる群から選ばれ、特にアントラキノン類、フェナントレンキノン類および化合物（ＸＸＶＩ）である、請求項３に記載の方法。５．キノン化合物（Ｑ）が：−ＮＯ₂、−ＳＯ₃ ^-、−ＳＯ₂ ^-、−ＣＮ、−ＰＯ₃ ^2- 、−ＰＯ₂ ^-、−ＣＯＯＨ、ハロゲン、即ち−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、第一級アミン、第二級アミンおよび第三級アミンまたはそれらの誘導体を包含する官能基；及び−ＮＯ₂、−ＳＯ₃ ^-、−ＣＮ、−ＰＯ₃ ^2-、−ＰＯ₂ ^-−ＣＯＯＨ、ハロゲン、即ち−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、エポキシドおよび−Ｈで置換されていてもよいヒドロカルビル；からなる群から選ばれた置換基（Ｒ）で置換されており、前記ヒドロカルビルが好ましくは直鎖または分枝鎖の、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル、デカニル、ウンデカニル、ドデカニル、トリデカニル、テトラデカニル、ペンタデカニル、ヘキサデカニル、ヘプタデカニル、オクタデカニル、ノナデカニル、エイコサニルのようなアルキル類、１個またはそれ以上の二重結合または三重結合を有するそれらのもの：およびフェニル、ナフチル、ビフェニル、トリル、ベンジル、クメニル、メシチル、キシリル、ペンタレニル、インデニルのようなアリールである、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。６．重合体がポリスチレン、ポリエチレン、ポリ酢酸ビニル、ポリ塩化ビニル、ポリビニルピロリドン、ポリアクリロニトリル、ポリメタクリル酸メチル、ポリテトラフルオロエチレン、ポリカーボネート、ポリ−４−メチル−ペンチレン、ポリエステル、ポリプロピレン、セルロース、ニトロセルロース、でんぷん、多糖類、天然ゴム、ブチルゴム、スチレンブタジエンゴム、シリコーンゴムのような合成及び天然の重合体からなる群から選ばれる、請求項１に記載の方法。７．炭素含有材料（Ｐ）が炭素を含有するように予め変性された、シリカ、ガラス、コントロールされた細孔のガラス、シリカゲルまたは金属を包含する予め変性された材料；単層フィルムまたは多層フィルム；ラングミュア−ブロジェットフィルム；ミセル類；生物学的膜、たんぱく質；ヌクレオチド類、ペプチド核酸類（ＰＮＡ）および核酸結合パートナー；生物学的または有機物質で被覆された天然または合成重合体；からなる群から選ばれる、請求項１に記載の方法。８．配位子（Ｌ）が、−ＣＯＯＨ（カルボン酸類）、スルホン酸誘導体類、− ＣＯＯＲ（活性エステルを包含する、エステル類）、−ＣＯＸ（酸ハロゲン化物、酸フッ化物および酸塩化物、酸アジド類または同様な活性カルボン酸誘導体）、−ＣＯＮＨＮＨ₂（酸ヒドラジド類）、−ＮＨＣＯＮＨＮＨ₂（セミカルバジド類）、−ＮＨＣＳＮＨＮＨ₂（チオセミカルバジド類）、−ＣＮ（ニトリル類）、−ＣＨＯ（アルデヒド類）、ＲＲ’ＣＯ（ケトン類）、−ＯＨ（アルコール類）、−ＳＨ（チオール類）、−ＳＳＲ（ジサルファイド類）、−ＮＨ₂（第一級アミン、第二級アミンおよび第三級アミンを包含するアミン類）、−ＮＨＮＨ₂ （ヒドラジン類）、−ＯＲ（エーテル類）、エポキシド類、−ＳＲ（サルファイド類）、−Ｘ（ハロゲン化物類）、−ＮＯ₂、−ＣＨ₃からなる群から選ばれた官能基；またはそれらの誘導体；メチル、エチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチルまたは芳香族酸エステルのような非官能性基であるか；あるいは配位子はビオチンのような生物学的に活性な分子、トキシン、除草剤、殺虫剤、炭水化物、ペニシリン類のような抗生物質、細胞毒のような他の薬品、ステロイド類、ペプチド類、ヌクレオチド類、ペプチド核酸類（ＰＮＡ）及び核酸結合パートナー、たんぱく質類およびハプテンからなる群から選ばれる、請求項１に記載の方法。９．スペーサー（Ｓ）が、場合により芳香族またはモノ／ポリ不飽和炭化水素を含有する、ポリメチレンのようなＣ₁〜Ｃ₂₀アルキル基；ポリエチレングリコールのようなポリオキシエチレン；ポリ−β−アラニン、ポリグリシン、ポリリシン、ペプチド類のようなオリゴ／ポリアミド類；オリゴ糖類；ホスホ−モノ／ジエステル類のようなオリゴ／ポリホスフェート；モノ／ジアミド類；およびオリゴ／ポリスルホンアミド／エステル類；からなる群から選ばれた距離生成基、あるいは上記単位の組み合わせ単位またはそれらの組み合わせ単位である、請求項１に記載の方法。１０．熱化学的反応性化合物（Ｔ）が：−ＣＯＯＨ（カルボン酸類）、スルホン酸誘導体、−ＣＯＯＲ（活性エステルを包含する、エステル類）、−ＣＯＸ（酸ハロゲン化物類、酸アジド類および同様なカルボン酸誘導体類）、−ＣＯＮＨＮＨ₂（酸ヒドラジド類）、−ＮＨＣＯＮＨＮＨ₂（セミカルバジド類）、−ＮＨＣＳＮＨＮＨ₂（チオセミカルバジド類）、−ＣＨＯ（アルデヒド類）、ＲＲ’ ＣＯ（ケトン類）、−ＯＨ（アルコール類）、−Ｘ（ハロゲン化物：塩化物、臭化物、沃化物）、−ＳＨ（チオール類）、−ＳＳＲ（ジサルファイド類）、−ＮＨ₂（第一級、第二級および第三級アミンを包含するアミン類）、−ＮＨＮＨ₂（ヒドラジン類）、エポキシド類、およびマレイミド類からなる群から選ばれた熱化学的に反応性の基を含有する化合物である、請求項１に記載の方法。１１．配位子（Ｌ）に、請求項１に規定したとおりのキノン化合物（Ｑ）を結合させてキノン−配位子共役（Ｑ−Ｌ）を得、そして基材材料表面（Ｐ）上に該キノン−配位子共役（Ｑ−Ｌ）を光固定化して基材料（Ｐ−Ｑ−Ｌ）を得る工程を含む、請求項１に記載の方法。１２．光化学的または熱化学的化合物の使用によりスペーサー分子（Ｓ）に配位子（Ｌ）を結合し、請求項１に規定したとおりのキノン化合物（Ｑ）にスペーサー−配位子共役（Ｓ−Ｌ）を結合して中間スペーサー分子を有するキノン−配位子共役（Ｑ−Ｓ−Ｌ）を得、そして基材表面（Ｐ）上に該キノン−配位子（Ｑ −Ｓ−Ｌ）を光固定化して基材材料（Ｐ−Ｑ−Ｓ−Ｌ）を得る工程を含む、請求項１に記載の方法。１３．スペーサー分子（Ｓ）に、請求項１に規定したとおりの少なくとも１種のキノン化合物（Ｑ）を結合し、配位子（Ｌ）にスペーサー−キノン共役（Ｑ− Ｓ）を結合して中間スペーサー分子を有するキノン−配位子共役（Ｑ−Ｓ−Ｌ）を得、そして次に基材表面（Ｐ）上に該キノン−配位子共役を光固定化して基材材料（Ｐ−Ｑ−Ｓ−Ｌ）を得る工程を含む、請求項１に記載の方法。１４．基材表面（Ｐ）に、請求項１に規定したとおりのキノン化合物（Ｑ）を結合してキノン−基材表面共役（Ｐ−Ｑ）を得、該キノン−基材表面共役（Ｐ− Ｑ）に配位子（Ｌ）を光固定化して基材材料（Ｐ−Ｑ−Ｌ）を得る工程を含む、請求項１に記載の方法。１５．光化学的または熱化学的化合物の使用によりスペーサー分子（Ｓ₁）を基材表面（Ｐ）に結合し、スペーサー−基材表面共役（Ｐ−Ｓ₁）に、請求項１に規定したとおりのキノン化合物（Ｑ）を結合して中間スペーサー分子を有するキノン−基材表面共役（Ｐ−Ｓ₁−Ｑ）を得、そしてキノン−重合体表面共役に配位子（Ｌ）を光固定化する工程を含む、請求項１に記載の方法。１６．請求項１に規定したとおりのキノン化合物（Ｑ）をスペーサー分子（Ｓ）に結合させ、基材表面にスペーサー−キノン共役（Ｑ−Ｓ）を結合して中間スペーサー分子を有するキノン−基材表面共役（Ｐ−Ｑ−Ｓ）を得る工程を含む、請求項１に記載の方法。１７．光反応が水性媒体中で行われる、請求項１に記載の方法。１８．水性媒体が、０〜７の範囲のまたは７〜１２の範囲のｐＨ値を有する、請求項１６の方法。１９．請求項１に記載れれたとおりの方法に従って、炭素含有基材材料表面（Ｐ）に配位子を固定化するための、請求項１に規定したとおりのキノン（Ｑ）の使用。２０．請求項１に記載された方法に従って造られた、その表面（Ｐ）に固定化された配位子（Ｌ）を有する炭素含有基材材料。２１．検出システムにおいて、請求項１に記載された方法に従って造られたとおりの炭素含有基材材料の使用。２２．固体相イムノアッセイのための担体として、請求項１に造られたとおりの炭素含有基材材料の使用。２３．担体が、ウェルプレート、ビーズおよび微細球のような試験粒子、試験管、試験棒及び試験細片からなる群から選ばれる、請求項２２に記載の使用。２４．ペプチド類、オリゴヌクレオチド類、炭水化物および小さい有機分子の固相合成のための担体として、請求項１において造られたとおりの炭素含有基材材料の使用。