JPH1135479A - 蛋白質ｐ８２をチロシンリン酸化することを特徴とする糖尿病治療方法および糖尿病治療剤 - Google Patents
蛋白質ｐ８２をチロシンリン酸化することを特徴とする糖尿病治療方法および糖尿病治療剤Info
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- JPH1135479A JPH1135479A JP6194870A JP19487094A JPH1135479A JP H1135479 A JPH1135479 A JP H1135479A JP 6194870 A JP6194870 A JP 6194870A JP 19487094 A JP19487094 A JP 19487094A JP H1135479 A JPH1135479 A JP H1135479A
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- C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
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- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
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- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Abstract
(57)【要約】
【構成】 蛋白質ｐ８２をチロシンリン酸化することを
特徴とする糖尿病治療方法、蛋白質ｐ８２をチロシンリ
ン酸化することを特徴とする糖尿病治療剤、蛋白質ｐ８
２をチロシンリン酸化する誘導体、例えば、チアゾリジ
ン誘導体、ベンゾキノン誘導体、ナフトキノン誘導体、
バナジン酸等を有効成分として含有する糖尿病治療剤、
および蛋白質ｐ８２を用いることを特徴とする糖尿病治
療剤のスクリーニング方法。 【効果】 蛋白質ｐ８２のチロシンリン酸化はグリコー
ゲン合成に必須のステップであり、蛋白質ｐ８２をチロ
シンリン酸化する本発明の治療方法、治療剤およびスク
リーニング方法は、高血糖状態の改善、糖尿病、特にイ
ンスリン非依存性糖尿病の予防および／または治療およ
び／または診断および／または測定に有用である。
特徴とする糖尿病治療方法、蛋白質ｐ８２をチロシンリ
ン酸化することを特徴とする糖尿病治療剤、蛋白質ｐ８
２をチロシンリン酸化する誘導体、例えば、チアゾリジ
ン誘導体、ベンゾキノン誘導体、ナフトキノン誘導体、
バナジン酸等を有効成分として含有する糖尿病治療剤、
および蛋白質ｐ８２を用いることを特徴とする糖尿病治
療剤のスクリーニング方法。 【効果】 蛋白質ｐ８２のチロシンリン酸化はグリコー
ゲン合成に必須のステップであり、蛋白質ｐ８２をチロ
シンリン酸化する本発明の治療方法、治療剤およびスク
リーニング方法は、高血糖状態の改善、糖尿病、特にイ
ンスリン非依存性糖尿病の予防および／または治療およ
び／または診断および／または測定に有用である。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は糖尿病の治療方法および
治療剤に関する。更に詳細に述べると、肝臓におけるイ
ンスリンのシグナル伝達系のキー蛋白質であるｐ８２を
チロシンリン酸化（以下、本明細書では単にリン酸化と
いうこともある。）し、グリコーゲンの合成を促進する
ことを特徴とする糖尿病の治療方法、その治療方法のた
めの治療剤、蛋白質ｐ８２をチロシンリン酸化する物質
を有効成分として含有する糖尿病治療剤および蛋白質ｐ
８２を用いることを特徴とする糖尿病治療剤のスクリー
ニング方法に関する。
治療剤に関する。更に詳細に述べると、肝臓におけるイ
ンスリンのシグナル伝達系のキー蛋白質であるｐ８２を
チロシンリン酸化（以下、本明細書では単にリン酸化と
いうこともある。）し、グリコーゲンの合成を促進する
ことを特徴とする糖尿病の治療方法、その治療方法のた
めの治療剤、蛋白質ｐ８２をチロシンリン酸化する物質
を有効成分として含有する糖尿病治療剤および蛋白質ｐ
８２を用いることを特徴とする糖尿病治療剤のスクリー
ニング方法に関する。
【０００２】
【発明の背景】糖尿病とは、インスリン作用の不足に基
づいて糖の代謝機構が障害に陥る疾患であり、基本的な
特徴は耐糖機能の低下、慢性の高血糖である。糖尿病は
障害の原因によって二つに分類される。
づいて糖の代謝機構が障害に陥る疾患であり、基本的な
特徴は耐糖機能の低下、慢性の高血糖である。糖尿病は
障害の原因によって二つに分類される。
【０００３】一つは食物摂取により血糖値が上昇しても
インスリンが分泌されないかまたは分泌量が非常に少な
くなるタイプで、インスリン依存性糖尿病（ＩＤＤＭま
たはＩ型糖尿病）と呼ばれている。インスリン依存性糖
尿病は、膵臓のβ細胞が破壊されることによって引き起
こされることがわかっている。治療法としては、インス
リンを体外より補給する方法がとられている。
インスリンが分泌されないかまたは分泌量が非常に少な
くなるタイプで、インスリン依存性糖尿病（ＩＤＤＭま
たはＩ型糖尿病）と呼ばれている。インスリン依存性糖
尿病は、膵臓のβ細胞が破壊されることによって引き起
こされることがわかっている。治療法としては、インス
リンを体外より補給する方法がとられている。
【０００４】他の一つは、インスリンは正常に分泌され
ているにも関わらず、末梢組織の応答機構が正常に作動
しなくなり、例えば、筋での糖取り込み促進作用の低
下、肝でのグリコーゲン合成抑制と糖新生の亢進等によ
り血糖値が低下しないタイプであり、インスリン非依存
性糖尿病（ＮＩＤＤＭまたはII型糖尿病）と呼ばれてい
る。米国では、４０歳以上の人口の５％はインスリン非
依存性糖尿病に罹っていると言われるほど一般的な疾患
であるが、その原因は未だ解明されるには至っていな
い。
ているにも関わらず、末梢組織の応答機構が正常に作動
しなくなり、例えば、筋での糖取り込み促進作用の低
下、肝でのグリコーゲン合成抑制と糖新生の亢進等によ
り血糖値が低下しないタイプであり、インスリン非依存
性糖尿病（ＮＩＤＤＭまたはII型糖尿病）と呼ばれてい
る。米国では、４０歳以上の人口の５％はインスリン非
依存性糖尿病に罹っていると言われるほど一般的な疾患
であるが、その原因は未だ解明されるには至っていな
い。
【０００５】正常状態でのグルコース代謝は以下のメカ
ニズムで行われる。すなわち、食物として摂取された炭
水化物は小腸でグルコースにまで消化され、血中に取り
込まれる。血糖の上昇を膵臓のβ細胞が感知し、インス
リンを分泌する。インスリンは血流にのって標的末梢組
織（筋肉と肝臓）に作用し、血中のグルコースの吸収を
促進してグリコーゲンとして蓄積することによって血糖
値を低下させる。
ニズムで行われる。すなわち、食物として摂取された炭
水化物は小腸でグルコースにまで消化され、血中に取り
込まれる。血糖の上昇を膵臓のβ細胞が感知し、インス
リンを分泌する。インスリンは血流にのって標的末梢組
織（筋肉と肝臓）に作用し、血中のグルコースの吸収を
促進してグリコーゲンとして蓄積することによって血糖
値を低下させる。
【０００６】具体的に説明すると、筋においてはグルコ
ーストランスポーター４（Glut 4）という糖輸送体が特
異的に発現されており、インスリンシグナル伝達にとも
なって Glut 4 が細胞内から細胞膜にトランスロケーシ
ョンすること、およびその数が増大することによって糖
の取り込み活性を促進する。一方、肝においては糖輸送
体として、その数は変化しないと言われているGlut 2が
存在する。また肝では、インスリンのシグナル伝達にと
もなって解糖系のキー蛋白質であるグルコキナーゼ、ホ
スホフルクトキナーゼ、ピルビン酸キナーゼの酵素誘導
促進が観察される。その結果、肝では糖吸収の増加、新
生された糖の血中への放出の抑制が生じる。また、肝で
はインスリンの作用によりグリコーゲン合成酵素の活性
促進およびホスホリラーゼキナーゼの抑制が生じ、グリ
コーゲンが組織内に蓄積する。
ーストランスポーター４（Glut 4）という糖輸送体が特
異的に発現されており、インスリンシグナル伝達にとも
なって Glut 4 が細胞内から細胞膜にトランスロケーシ
ョンすること、およびその数が増大することによって糖
の取り込み活性を促進する。一方、肝においては糖輸送
体として、その数は変化しないと言われているGlut 2が
存在する。また肝では、インスリンのシグナル伝達にと
もなって解糖系のキー蛋白質であるグルコキナーゼ、ホ
スホフルクトキナーゼ、ピルビン酸キナーゼの酵素誘導
促進が観察される。その結果、肝では糖吸収の増加、新
生された糖の血中への放出の抑制が生じる。また、肝で
はインスリンの作用によりグリコーゲン合成酵素の活性
促進およびホスホリラーゼキナーゼの抑制が生じ、グリ
コーゲンが組織内に蓄積する。
【０００７】
【化１】
【０００８】特にインスリンによるグリコーゲン合成調
節系は、現在、最も注目されている領域の一つである。
節系は、現在、最も注目されている領域の一つである。
【０００９】
【従来の技術】肝でのインスリンによるグリコーゲン合
成促進の作用機序は、セリン−スレオニンキナーゼカス
ケード系を中心に研究されており、
成促進の作用機序は、セリン−スレオニンキナーゼカス
ケード系を中心に研究されており、
【００１０】
【化２】
【００１１】（ＭＡＰＫＫはmitogen-activated protei
n kinase kinase 、ＩＳＰＫはinsulin-stimulated pro
tein kinase 、ＰＰ１Ｇはprotein phosphatase 1G、Ｇ
ＳＫ３はglycogen synthase kinase 3を意味する。）で
示される伝達経路の完成は肝におけるインスリンによる
グリコーゲンの合成調節機序の解明に大きな進歩をもた
らした。
n kinase kinase 、ＩＳＰＫはinsulin-stimulated pro
tein kinase 、ＰＰ１Ｇはprotein phosphatase 1G、Ｇ
ＳＫ３はglycogen synthase kinase 3を意味する。）で
示される伝達経路の完成は肝におけるインスリンによる
グリコーゲンの合成調節機序の解明に大きな進歩をもた
らした。
【００１２】一方、インスリンがインスリン受容体のα
サブユニットに結合すると、βサブユニットが自己リン
酸化され、同時に、受容体に内在するチロシンキナーゼ
部位が活性化される。このキナーゼによってリン酸化さ
れる基質としては、６種類の蛋白質が明らかにされてい
る。
サブユニットに結合すると、βサブユニットが自己リン
酸化され、同時に、受容体に内在するチロシンキナーゼ
部位が活性化される。このキナーゼによってリン酸化さ
れる基質としては、６種類の蛋白質が明らかにされてい
る。
【００１３】一つは、1235個のアミノ酸からなる、分子
量１８５ｋＤのインスリン受容体基質−１（ＩＲＳ−
１）である。ＩＲＳ−１がチロシンリン酸化されると、
ホスファチジルイノシトールをリン酸化する酵素である
ＰＩ３−キナーゼが結合し、活性化されることが判明し
ている。また、ＩＲＳ−１を介してＲａｓの活性化が生
じると考えられており、この間に関与する蛋白としてＡ
ｓｈ／Ｇｒｂ２（分子量２５ｋＤ）およびＳｏｓ（分子
量１８ｋＤ）の結合物を介する経路が報告されている
が、まだ証明されるには至っていない。
量１８５ｋＤのインスリン受容体基質−１（ＩＲＳ−
１）である。ＩＲＳ−１がチロシンリン酸化されると、
ホスファチジルイノシトールをリン酸化する酵素である
ＰＩ３−キナーゼが結合し、活性化されることが判明し
ている。また、ＩＲＳ−１を介してＲａｓの活性化が生
じると考えられており、この間に関与する蛋白としてＡ
ｓｈ／Ｇｒｂ２（分子量２５ｋＤ）およびＳｏｓ（分子
量１８ｋＤ）の結合物を介する経路が報告されている
が、まだ証明されるには至っていない。
【００１４】1988年、クーパー (Cooper, G. J. S.) 等
は高血糖状態に伴い、インスリンと同様膵臓β細胞から
分泌されるホルモンを発見し、アミリンと命名した。彼
らはアミリンの生理作用としてインスリン作用を阻害す
ることから、アミリンはインスリン抵抗性の惹起物質で
あると指摘した。1991年、アミリンをトランスジェニッ
クマウスで過剰発現させるとインスリン非依存性糖尿病
が引き起こされるという決定的な報告がなされた。さら
に最近、アミリンが肝におけるインスリンによるグリコ
ーゲン合成促進作用を阻害することが報告された。しか
しながら、アミリンがインスリンの情報伝達系にどのよ
うに関与しているかについては現在のところ不明であ
る。
は高血糖状態に伴い、インスリンと同様膵臓β細胞から
分泌されるホルモンを発見し、アミリンと命名した。彼
らはアミリンの生理作用としてインスリン作用を阻害す
ることから、アミリンはインスリン抵抗性の惹起物質で
あると指摘した。1991年、アミリンをトランスジェニッ
クマウスで過剰発現させるとインスリン非依存性糖尿病
が引き起こされるという決定的な報告がなされた。さら
に最近、アミリンが肝におけるインスリンによるグリコ
ーゲン合成促進作用を阻害することが報告された。しか
しながら、アミリンがインスリンの情報伝達系にどのよ
うに関与しているかについては現在のところ不明であ
る。
【００１５】
【目的】本発明者らは、アミリンが肝におけるインスリ
ンのグリコーゲン合成促進作用を阻害することに注目
し、アミリンのインスリンによるチロシンリン酸化カス
ケード系阻害部位を検討した結果、分子量８２Ｋｄの蛋
白（ｐ８２）の同定に成功した。そして本発明者等は生
化学的検討の結果、ｐ８２蛋白は肝でのグリゴーゲン合
成に関与する蛋白であることを明らかにし、本発明を完
成した。
ンのグリコーゲン合成促進作用を阻害することに注目
し、アミリンのインスリンによるチロシンリン酸化カス
ケード系阻害部位を検討した結果、分子量８２Ｋｄの蛋
白（ｐ８２）の同定に成功した。そして本発明者等は生
化学的検討の結果、ｐ８２蛋白は肝でのグリゴーゲン合
成に関与する蛋白であることを明らかにし、本発明を完
成した。
【００１６】
【発明の構成】本発明は、（１）蛋白質ｐ８２をチロシ
ンリン酸化することを特徴とする糖尿病治療方法、
（２）蛋白質ｐ８２をチロシンリン酸化することを特徴
とする糖尿病治療剤、（３）蛋白質ｐ８２をチロシンリ
ン酸化する物質を有効成分として含有する糖尿病治療
剤、および（４）蛋白質ｐ８２を用いることを特徴とす
る糖尿病治療剤のスクリーニング方法に関する。
ンリン酸化することを特徴とする糖尿病治療方法、
（２）蛋白質ｐ８２をチロシンリン酸化することを特徴
とする糖尿病治療剤、（３）蛋白質ｐ８２をチロシンリ
ン酸化する物質を有効成分として含有する糖尿病治療
剤、および（４）蛋白質ｐ８２を用いることを特徴とす
る糖尿病治療剤のスクリーニング方法に関する。
【００１７】既に報告されているように肝においてイン
スリンはグリコーゲン合成を促進する。一方、アミリン
はインスリンのグリコーゲン合成促進作用を濃度依存的
に抑制する。本発明者らはこれはアミリンがインスリン
シグナル伝達系を阻害するためではないかと考え、イン
スリン依存的チロシンリン酸化カスケード系を抗ホスホ
チロシン抗体を用いたウエスタンブロット法で検討し
た。その結果、アミリン処理により特異的にチロシンリ
ン酸化が阻害される分子量８２ｋＤの蛋白の同定に成功
した。
スリンはグリコーゲン合成を促進する。一方、アミリン
はインスリンのグリコーゲン合成促進作用を濃度依存的
に抑制する。本発明者らはこれはアミリンがインスリン
シグナル伝達系を阻害するためではないかと考え、イン
スリン依存的チロシンリン酸化カスケード系を抗ホスホ
チロシン抗体を用いたウエスタンブロット法で検討し
た。その結果、アミリン処理により特異的にチロシンリ
ン酸化が阻害される分子量８２ｋＤの蛋白の同定に成功
した。
【００１８】以下、この蛋白質をその分子量からｐ８２
と呼び、さらにチロシンリン酸化された蛋白質をｐｐ８
２と呼ぶことにする。肝ではインスリンによりチロシン
リン酸化される蛋白が数個報告されているが、分子量８
２ｋＤの蛋白の報告はされていない。分子量からみてこ
れはこれまでに知られていない全く新規な蛋白と推定さ
れる。また、本発明の蛋白ｐ８２はＡｓｈ／Ｇｒｂ２お
よびＳｏｓに対する抗体とは反応しないことより、蛋白
質ｐ８２はＡｓｈ／Ｇｒｂ２およびＳｏｓとは全く異な
る新規な蛋白と推定される。
と呼び、さらにチロシンリン酸化された蛋白質をｐｐ８
２と呼ぶことにする。肝ではインスリンによりチロシン
リン酸化される蛋白が数個報告されているが、分子量８
２ｋＤの蛋白の報告はされていない。分子量からみてこ
れはこれまでに知られていない全く新規な蛋白と推定さ
れる。また、本発明の蛋白ｐ８２はＡｓｈ／Ｇｒｂ２お
よびＳｏｓに対する抗体とは反応しないことより、蛋白
質ｐ８２はＡｓｈ／Ｇｒｂ２およびＳｏｓとは全く異な
る新規な蛋白と推定される。
【００１９】本発明者等は、次にｐ８２のチロシンリン
酸化度とグリコーゲン合成促進度の相関関係を種々の化
合物を用いて検討した。（±）−５−［４−（６−ヒド
ロキシ−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−２−
イルメトキシ）ベンジル］−２，４−チアゾリジンジオ
ン（ＣＳ−０４５）、ビタミンＫ5 およびバナジン酸は
肝においてグリコーゲン合成を促進することが報告され
ている。そこでこれらの化合物によるｐ８２のチロシン
リン酸化の促進を検討したところ、すべての化合物がリ
ン酸化を促進した。この結果からｐ８２蛋白のチロシン
リン酸化による活性化はインスリンによるグリコーゲン
合成酵素活性化に必須であり、またインスリン受容体以
後のシグナル伝達に関与する蛋白であることが明かにな
った。
酸化度とグリコーゲン合成促進度の相関関係を種々の化
合物を用いて検討した。（±）−５−［４−（６−ヒド
ロキシ−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−２−
イルメトキシ）ベンジル］−２，４−チアゾリジンジオ
ン（ＣＳ−０４５）、ビタミンＫ5 およびバナジン酸は
肝においてグリコーゲン合成を促進することが報告され
ている。そこでこれらの化合物によるｐ８２のチロシン
リン酸化の促進を検討したところ、すべての化合物がリ
ン酸化を促進した。この結果からｐ８２蛋白のチロシン
リン酸化による活性化はインスリンによるグリコーゲン
合成酵素活性化に必須であり、またインスリン受容体以
後のシグナル伝達に関与する蛋白であることが明かにな
った。
【００２０】従って、本発明は蛋白質ｐ８２をチロシン
リン酸化することを特徴とする糖尿病、とりわけインス
リン非依存性糖尿病の治療方法に関する。さらに、本発
明は蛋白質ｐ８２をチロシンリン酸化することを特徴と
する糖尿病、とりわけインスリン非依存性糖尿病治療剤
に関する。ここで、蛋白質ｐ８２をチロシンリン酸化す
ることを特徴とする糖尿病治療方法および糖尿病治療剤
とは、蛋白質ｐ８２をチロシンリン酸化することを主た
る作用メカニズムとするすべての糖尿病治療方法および
糖尿病治療剤を含むものである。
リン酸化することを特徴とする糖尿病、とりわけインス
リン非依存性糖尿病の治療方法に関する。さらに、本発
明は蛋白質ｐ８２をチロシンリン酸化することを特徴と
する糖尿病、とりわけインスリン非依存性糖尿病治療剤
に関する。ここで、蛋白質ｐ８２をチロシンリン酸化す
ることを特徴とする糖尿病治療方法および糖尿病治療剤
とは、蛋白質ｐ８２をチロシンリン酸化することを主た
る作用メカニズムとするすべての糖尿病治療方法および
糖尿病治療剤を含むものである。
【００２１】また、本発明は、蛋白質ｐ８２をチロシン
リン酸化する物質を有効成分として含有する糖尿病治療
剤に関する。ここで、蛋白質ｐ８２をチロシンリン酸化
する物質とは、現在、その活性を有することが確認され
ている物質だけでなく、今後、新たに活性を有すること
が確認されるであろうすべての物質が含まれる。現在、
チロシンリン酸化活性を有することが確認されている物
質としては、例えば、（１）一般式（Ｉ）
リン酸化する物質を有効成分として含有する糖尿病治療
剤に関する。ここで、蛋白質ｐ８２をチロシンリン酸化
する物質とは、現在、その活性を有することが確認され
ている物質だけでなく、今後、新たに活性を有すること
が確認されるであろうすべての物質が含まれる。現在、
チロシンリン酸化活性を有することが確認されている物
質としては、例えば、（１）一般式（Ｉ）
【００２２】
【化３】
【００２３】（式中、Ｘは酸素原子、硫黄原子またはイ
ミノ基を表わし、ｎは１〜３の整数を表わし、Ｒ1 は水
素原子またはＣ１〜４のアルキル基を表わし、Ｒ2 、Ｒ
3 およびＲ5 はそれぞれ独立して、水素原子、Ｃ１〜４
のアルキル基またはＣ１〜４のアルコキシ基を表わし、
Ｒ4 は水素原子、Ｃ１〜４のアルキル基、
ミノ基を表わし、ｎは１〜３の整数を表わし、Ｒ1 は水
素原子またはＣ１〜４のアルキル基を表わし、Ｒ2 、Ｒ
3 およびＲ5 はそれぞれ独立して、水素原子、Ｃ１〜４
のアルキル基またはＣ１〜４のアルコキシ基を表わし、
Ｒ4 は水素原子、Ｃ１〜４のアルキル基、
【００２４】
【化４】
【００２５】（基中、Ｒ6 はＣ１〜６のアルキル基、Ｃ
２〜６のアルケニル基、Ｃ４〜７のシクロアルキル基、
フェニル基、ナフチル基、あるいはニトロ基、ハロゲン
原子、ＮＲ7 Ｒ8 基（基中、Ｒ7 およびＲ8 は水素原子
またはＣ１〜４のアルキル基を表わす。）、Ｃ１〜４の
アルキル基、Ｃ１〜４のアルコキシ基、水酸基から選ば
れる基１または２個で置換されているフェニル基または
ナフチル基、酸素原子、硫黄原子または窒素原子１個を
含有する４〜７員のヘテロ環、またはＣ６〜１１のアラ
ルキルオキシ基を表わす。）で示されるチアゾリジン誘
導体、それらの非毒性塩および酸付加塩、（２）一般式
（II）
２〜６のアルケニル基、Ｃ４〜７のシクロアルキル基、
フェニル基、ナフチル基、あるいはニトロ基、ハロゲン
原子、ＮＲ7 Ｒ8 基（基中、Ｒ7 およびＲ8 は水素原子
またはＣ１〜４のアルキル基を表わす。）、Ｃ１〜４の
アルキル基、Ｃ１〜４のアルコキシ基、水酸基から選ば
れる基１または２個で置換されているフェニル基または
ナフチル基、酸素原子、硫黄原子または窒素原子１個を
含有する４〜７員のヘテロ環、またはＣ６〜１１のアラ
ルキルオキシ基を表わす。）で示されるチアゾリジン誘
導体、それらの非毒性塩および酸付加塩、（２）一般式
（II）
【００２６】
【化５】
【００２７】（式中、ｍ個のＲ9 はそれぞれ独立して、
水素原子、Ｃ１〜４のアルキル基、ヒドロキシ基、アミ
ノ基、またはＣＯＯＲ10基（基中、Ｒ10は水素原子また
はＣ１〜４のアルキル基を表わす。）を表わし、ｍは１
〜３の整数を表わす。）で示されるベンゼンまたはナフ
タレン誘導体、それらの非毒性塩および酸付加塩、
（３）バナジン酸が挙げられる。
水素原子、Ｃ１〜４のアルキル基、ヒドロキシ基、アミ
ノ基、またはＣＯＯＲ10基（基中、Ｒ10は水素原子また
はＣ１〜４のアルキル基を表わす。）を表わし、ｍは１
〜３の整数を表わす。）で示されるベンゼンまたはナフ
タレン誘導体、それらの非毒性塩および酸付加塩、
（３）バナジン酸が挙げられる。
【００２８】より具体的には、一般式（Ｉ）で示される
化合物としては、５−［４−（６−ヒドロキシ−２，
５，７，８−テトラメチルクロマン−２−イルメトキ
シ）ベンジル］−２，４−チアゾリジンジオン（ＣＳ−
０４５）、５−［４−［２−（６−ヒドロキシ−２，
５，７，８−テトラメチルクロマン−２−イル）エトキ
シ］ベンジル］−２，４−チアゾリジンジオン、５−
［４−（６−ヒドロキシ−２，５，７，８−テトラメチ
ルクロマン−２−イルメトキシ）ベンジル］−ロダニ
ン、５−［４−［２−（６−ヒドロキシ−２，５，７，
８−テトラメチルクロマン−２−イル）エトキシ］ベン
ジル］−ロダニン等が挙げられる。
化合物としては、５−［４−（６−ヒドロキシ−２，
５，７，８−テトラメチルクロマン−２−イルメトキ
シ）ベンジル］−２，４−チアゾリジンジオン（ＣＳ−
０４５）、５−［４−［２−（６−ヒドロキシ−２，
５，７，８−テトラメチルクロマン−２−イル）エトキ
シ］ベンジル］−２，４−チアゾリジンジオン、５−
［４−（６−ヒドロキシ−２，５，７，８−テトラメチ
ルクロマン−２−イルメトキシ）ベンジル］−ロダニ
ン、５−［４−［２−（６−ヒドロキシ−２，５，７，
８−テトラメチルクロマン−２−イル）エトキシ］ベン
ジル］−ロダニン等が挙げられる。
【００２９】一般式（II）で示される化合物としては、
４−アミノ−２−ヒドロキシ安息香酸、４−アミノ−１
−ナフトール、４−アミノ−２−ナフトール、１−アミ
ノナフタレン、１，４−ジヒドロキシナフタレン、４−
アミノ−２−メチル−１−ナフトール（以下、ビタミン
Ｋ5 と記す。）、１，４−ジヒドロキシ−２−ナフトエ
酸等が挙げられる。
４−アミノ−２−ヒドロキシ安息香酸、４−アミノ−１
−ナフトール、４−アミノ−２−ナフトール、１−アミ
ノナフタレン、１，４−ジヒドロキシナフタレン、４−
アミノ−２−メチル−１−ナフトール（以下、ビタミン
Ｋ5 と記す。）、１，４−ジヒドロキシ−２−ナフトエ
酸等が挙げられる。
【００３０】ここで、適当な非毒性塩としては、アルカ
リ金属（カリウム、ナトリウム等）の塩、アルカリ土類
金属（カルシウム、マグネシウム等）の塩、アンモニウ
ム塩、薬学的に許容される有機アミン（テトラメチルア
ンモニウム、トリエチルアミン、メチルアミン、ジメチ
ルアミン、シクロペチルアミン、ベンジルアミン、フェ
ネチルアミン、ピペリジン、モノエタノールアミン、ジ
エタノールアミン、トリス（ヒドロキシメチル）アミ
ン、リジン、アルギニン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン
等）の塩が挙げられる。
リ金属（カリウム、ナトリウム等）の塩、アルカリ土類
金属（カルシウム、マグネシウム等）の塩、アンモニウ
ム塩、薬学的に許容される有機アミン（テトラメチルア
ンモニウム、トリエチルアミン、メチルアミン、ジメチ
ルアミン、シクロペチルアミン、ベンジルアミン、フェ
ネチルアミン、ピペリジン、モノエタノールアミン、ジ
エタノールアミン、トリス（ヒドロキシメチル）アミ
ン、リジン、アルギニン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン
等）の塩が挙げられる。
【００３１】また、適当な酸付加塩としては、塩酸塩、
臭化水素酸塩、硫酸塩、リン酸塩、硝酸塩のような無機
酸塩、または酢酸塩、トルフルオロ酢酸塩、乳酸塩、酒
石酸塩、シュウ酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、クエ
ン酸塩、安息香酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスル
ホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、トルエンスルホン酸
塩、イセチオン酸塩、グルクロン酸塩、グルコン酸塩の
ような有機酸塩が挙げられる。一般式（Ｉ）および（I
I）で示される化合物は、それ自身公知であるか、また
は公知の方法により容易に製造することができる。
臭化水素酸塩、硫酸塩、リン酸塩、硝酸塩のような無機
酸塩、または酢酸塩、トルフルオロ酢酸塩、乳酸塩、酒
石酸塩、シュウ酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、クエ
ン酸塩、安息香酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスル
ホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、トルエンスルホン酸
塩、イセチオン酸塩、グルクロン酸塩、グルコン酸塩の
ような有機酸塩が挙げられる。一般式（Ｉ）および（I
I）で示される化合物は、それ自身公知であるか、また
は公知の方法により容易に製造することができる。
【００３２】本発明に用いられる蛋白質ｐ８２をチロシ
ンリン酸化する物質は、高血糖状態の改善、糖尿病、特
にインスリン非依存性糖尿病の予防および／または治療
に有用である。本発明による蛋白質ｐ８２をチロシンリ
ン酸化する物質の各有効成分およびそれらの非毒性の塩
および酸付加塩を上記の目的で用いるには、通常、全身
的または局所的に、経口または非経口の形で投与され
る。投与量は、年齢、体重、症状、治療効果、投与方
法、処理時間等により異なるが、通常、一日一回から数
回経口投与されるか、または非経口投与（好ましくは、
静脈内投与）されるか、または一日１時間から２４時間
の範囲で静脈内に持続投与される。
ンリン酸化する物質は、高血糖状態の改善、糖尿病、特
にインスリン非依存性糖尿病の予防および／または治療
に有用である。本発明による蛋白質ｐ８２をチロシンリ
ン酸化する物質の各有効成分およびそれらの非毒性の塩
および酸付加塩を上記の目的で用いるには、通常、全身
的または局所的に、経口または非経口の形で投与され
る。投与量は、年齢、体重、症状、治療効果、投与方
法、処理時間等により異なるが、通常、一日一回から数
回経口投与されるか、または非経口投与（好ましくは、
静脈内投与）されるか、または一日１時間から２４時間
の範囲で静脈内に持続投与される。
【００３３】本発明化合物を投与する際には、経口投与
のための固体組成物、液体組成物およびその他の組成
物、非経口投与のための注射剤、外用剤、坐剤等として
用いられる。経口投与のための固体組成物には、錠剤、
丸剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤等が含まれる。カプセ
ル剤には、ハードカプセルおよびソフトカプセルが含ま
れる。
のための固体組成物、液体組成物およびその他の組成
物、非経口投与のための注射剤、外用剤、坐剤等として
用いられる。経口投与のための固体組成物には、錠剤、
丸剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤等が含まれる。カプセ
ル剤には、ハードカプセルおよびソフトカプセルが含ま
れる。
【００３４】このような固体組成物においては、一つま
たはそれ以上の活性物質が、少なくとも一つの不活性な
希釈剤、例えばラクトース、マンニトール、マンニッ
ト、グルコース、ヒドロキシプロピルセルロース、微結
晶セルロース、デンプン、ポリビニルピロリドン、メタ
ケイ酸アルミン酸マグネシウムと混合される。組成物
は、常法に従って、不活性な希釈剤以外の添加剤、例え
ばステアリン酸マグネシウムのような潤滑剤、繊維素グ
リコール酸カルシウムのような崩壊剤、グルタミン酸ま
たはアスパラギン酸のような溶解補助剤を含有していて
もよい。
たはそれ以上の活性物質が、少なくとも一つの不活性な
希釈剤、例えばラクトース、マンニトール、マンニッ
ト、グルコース、ヒドロキシプロピルセルロース、微結
晶セルロース、デンプン、ポリビニルピロリドン、メタ
ケイ酸アルミン酸マグネシウムと混合される。組成物
は、常法に従って、不活性な希釈剤以外の添加剤、例え
ばステアリン酸マグネシウムのような潤滑剤、繊維素グ
リコール酸カルシウムのような崩壊剤、グルタミン酸ま
たはアスパラギン酸のような溶解補助剤を含有していて
もよい。
【００３５】錠剤または丸剤は必要により白糖、ゼラチ
ン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピ
ルメチルセルロースフタレートなどの胃溶性あるいは腸
溶性物質のフィルムで被覆していてもよいし、また２以
上の層で被覆していてもよい。さらにゼラチンのような
吸収されうる物質のカプセルも包含される。経口投与の
ための液体組成物は、薬学的に許容される乳濁剤、溶液
剤、シロップ剤、エリキシル剤等を含む。このような液
体組成物においては、一つまたはそれ以上の活性物質
が、一般的に用いられる不活性な希釈剤（例えば精製
水、エタノール）に含有される。この組成物は、不活性
な希釈剤以外に湿潤剤、懸濁剤のような補助剤、甘味
剤、風味剤、芳香剤、防腐剤を含有していてもよい。
ン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピ
ルメチルセルロースフタレートなどの胃溶性あるいは腸
溶性物質のフィルムで被覆していてもよいし、また２以
上の層で被覆していてもよい。さらにゼラチンのような
吸収されうる物質のカプセルも包含される。経口投与の
ための液体組成物は、薬学的に許容される乳濁剤、溶液
剤、シロップ剤、エリキシル剤等を含む。このような液
体組成物においては、一つまたはそれ以上の活性物質
が、一般的に用いられる不活性な希釈剤（例えば精製
水、エタノール）に含有される。この組成物は、不活性
な希釈剤以外に湿潤剤、懸濁剤のような補助剤、甘味
剤、風味剤、芳香剤、防腐剤を含有していてもよい。
【００３６】経口投与のためのその他の組成物として
は、一つまたはそれ以上の活性物質を含み、それ自体公
知の方法により処方されるスプレー剤が含まれる。この
組成物は不活性な希釈剤以外に亜硫酸水素ナトリウムの
ような安定剤と等張性を与えるような安定化剤、塩化ナ
トリウム、クエン酸ナトリウムあるいはクエン酸のよう
な等張剤を含有していてもよい。スプレー剤の製造方法
は、例えば米国特許第 2,868,691号および同第 3,095,3
55号明細書に詳しく記載されている。
は、一つまたはそれ以上の活性物質を含み、それ自体公
知の方法により処方されるスプレー剤が含まれる。この
組成物は不活性な希釈剤以外に亜硫酸水素ナトリウムの
ような安定剤と等張性を与えるような安定化剤、塩化ナ
トリウム、クエン酸ナトリウムあるいはクエン酸のよう
な等張剤を含有していてもよい。スプレー剤の製造方法
は、例えば米国特許第 2,868,691号および同第 3,095,3
55号明細書に詳しく記載されている。
【００３７】本発明による非経口投与のための注射剤と
しては、無菌の水性または非水性の溶液剤、懸濁剤、乳
濁剤を包含する。水性の溶液剤、懸濁剤としては、例え
ば注射用蒸留水および生理食塩水が含まれる。非水溶性
の溶液剤、懸濁剤としては、例えばプロピレングリコー
ル、ポリエチレングリコール、オリーブ油のような植物
油、エタノールのようなアルコール類、ポリソルベート
８０（登録商標）等がある。このような組成物は、さら
に防腐剤、湿潤剤、乳化剤、分散剤、安定化剤、溶解補
助剤（例えば、グルタミン酸、アスパラギン酸）のよう
な補助剤を含んでいてもよい。
しては、無菌の水性または非水性の溶液剤、懸濁剤、乳
濁剤を包含する。水性の溶液剤、懸濁剤としては、例え
ば注射用蒸留水および生理食塩水が含まれる。非水溶性
の溶液剤、懸濁剤としては、例えばプロピレングリコー
ル、ポリエチレングリコール、オリーブ油のような植物
油、エタノールのようなアルコール類、ポリソルベート
８０（登録商標）等がある。このような組成物は、さら
に防腐剤、湿潤剤、乳化剤、分散剤、安定化剤、溶解補
助剤（例えば、グルタミン酸、アスパラギン酸）のよう
な補助剤を含んでいてもよい。
【００３８】これらはバクテリア保留フィルターを通す
ろ過、殺菌剤の配合または照射によって無菌化される。
これらはまた無菌の固体組成物を製造し、使用前に無菌
化または無菌の注射用蒸留水または他の溶媒に溶解して
使用することもできる。非経口投与のためのその他の組
成物としては、一つまたはそれ以上の活性物質を含み、
常法により処方される外用液剤、軟コウ、塗布剤、直腸
内投与のための坐剤および腟内投与のためのペッサリー
等が含まれる。さらに本発明は、蛋白質ｐ８２を用いる
ことを特徴とする糖尿病治療剤のスクリーニング方法に
関する。
ろ過、殺菌剤の配合または照射によって無菌化される。
これらはまた無菌の固体組成物を製造し、使用前に無菌
化または無菌の注射用蒸留水または他の溶媒に溶解して
使用することもできる。非経口投与のためのその他の組
成物としては、一つまたはそれ以上の活性物質を含み、
常法により処方される外用液剤、軟コウ、塗布剤、直腸
内投与のための坐剤および腟内投与のためのペッサリー
等が含まれる。さらに本発明は、蛋白質ｐ８２を用いる
ことを特徴とする糖尿病治療剤のスクリーニング方法に
関する。
【００３９】上記の情報伝達メカニズムから、ｐ８２蛋
白のチロシンリン酸化度を指標にした化合物スクリーニ
ングによってグリコーゲン合成活性の一次的な評価が行
なうことができる。例えば、Ｆａｏラット肝細胞をダル
ベッコ変法イーグル培地（１０％牛胎児血清含有）を用
い、５％ＣＯ2 培養器中、３７℃で８〜１０日間培養す
る。その後、血清を含まないダルベッコ変法イーグル培
地で１８時間処理した後、アミリンを添加し、さらに３
０分間培養する。そこにインスリンを添加し、一定時間
培養した後、氷冷したリン酸緩衝液で洗浄する。細胞を
ホモジナイズした後、遠心にてサイトゾル分画を回収す
る。この分画に抗ホスホチロシン抗体を添加し、反応さ
せ、プロテインＧセファロースで回収する。ｐｐ８２蛋
白をフェニルホスフェート溶液で溶出後、ＳＤＳサンプ
ル緩衝液に可溶化し、電気泳動させる。蛋白は、ニトロ
セルロース膜に転写後、抗ホスホチロシン抗体を用いた
ウエスタンブッロト法にて検出し、ｐ８２蛋白のリン酸
化度を定量する。従って、本発明によれば、蛋白質ｐ８
２を用いることにより糖尿病、とりわけインスリン非依
存性糖尿病の治療剤のスクリーニングを行うことができ
る。さらに、本発明によれば、蛋白質ｐ８２を用いるこ
とにより糖尿病の診断をも行うことができる。
白のチロシンリン酸化度を指標にした化合物スクリーニ
ングによってグリコーゲン合成活性の一次的な評価が行
なうことができる。例えば、Ｆａｏラット肝細胞をダル
ベッコ変法イーグル培地（１０％牛胎児血清含有）を用
い、５％ＣＯ2 培養器中、３７℃で８〜１０日間培養す
る。その後、血清を含まないダルベッコ変法イーグル培
地で１８時間処理した後、アミリンを添加し、さらに３
０分間培養する。そこにインスリンを添加し、一定時間
培養した後、氷冷したリン酸緩衝液で洗浄する。細胞を
ホモジナイズした後、遠心にてサイトゾル分画を回収す
る。この分画に抗ホスホチロシン抗体を添加し、反応さ
せ、プロテインＧセファロースで回収する。ｐｐ８２蛋
白をフェニルホスフェート溶液で溶出後、ＳＤＳサンプ
ル緩衝液に可溶化し、電気泳動させる。蛋白は、ニトロ
セルロース膜に転写後、抗ホスホチロシン抗体を用いた
ウエスタンブッロト法にて検出し、ｐ８２蛋白のリン酸
化度を定量する。従って、本発明によれば、蛋白質ｐ８
２を用いることにより糖尿病、とりわけインスリン非依
存性糖尿病の治療剤のスクリーニングを行うことができ
る。さらに、本発明によれば、蛋白質ｐ８２を用いるこ
とにより糖尿病の診断をも行うことができる。
【００４０】
【実施例】以下、実施例によって本発明を詳述するが、
これらは本発明を限定するものではない。
これらは本発明を限定するものではない。
【００４１】実施例１：ｐ８２の精製方法 Ｆａｏラット肝細胞をセルトレイ（２２５ｃｍ2 ）を用
い、５％ＣＯ2 培養器中、３７℃で７〜１０日間培養し
た。培地はダルベッコ変法イーグル培地（１０％牛胎児
血清含有）を用い、３日ごとに培地を変えた。細胞を、
血清を含まないダルベッコ変法イーグル培地で２時間処
理した後、２００ｍＭバナジン酸および１００ｎＭイン
スリンを添加し、１０分間反応した。細胞を２５ｍＭト
リス緩衝液（バナジン酸２００ｍＭ，プロテアーゼ阻害
剤を含む）に懸濁後、可溶化し、遠心にて上清を回収し
た。終濃度 0.1％オクタ（エチレングリコール）エーテ
ル(C12E8)を添加し、ミリポア膜ろ過をした。
い、５％ＣＯ2 培養器中、３７℃で７〜１０日間培養し
た。培地はダルベッコ変法イーグル培地（１０％牛胎児
血清含有）を用い、３日ごとに培地を変えた。細胞を、
血清を含まないダルベッコ変法イーグル培地で２時間処
理した後、２００ｍＭバナジン酸および１００ｎＭイン
スリンを添加し、１０分間反応した。細胞を２５ｍＭト
リス緩衝液（バナジン酸２００ｍＭ，プロテアーゼ阻害
剤を含む）に懸濁後、可溶化し、遠心にて上清を回収し
た。終濃度 0.1％オクタ（エチレングリコール）エーテ
ル(C12E8)を添加し、ミリポア膜ろ過をした。
【００４２】抗ホスホチロシン抗体を結合させたプロテ
インＧセファロースゲルを作成し、上記処理したサンプ
ル液を充填した。チロシンリン酸化蛋白（ｐｐ８２）は
ゲルに吸着した。カラムを２５ｍＭトリス緩衝液で洗浄
後、１０ｍＭフェニルホスフェート液にてｐｐ８２を溶
出した。溶出液をセントリコン３０で濃縮後、アセトン
沈殿法にて析出させた。精製ｐｐ８２を電気泳動法にて
分離後、ＰＶＤＦ膜に転写し、トリプシン処理を行い、
液体クロマトグラフィーで分離した。このようにして精
製されたｐｐ８２から、公知の方法によってリン酸を除
去し、精製されたｐ８２を得た。
インＧセファロースゲルを作成し、上記処理したサンプ
ル液を充填した。チロシンリン酸化蛋白（ｐｐ８２）は
ゲルに吸着した。カラムを２５ｍＭトリス緩衝液で洗浄
後、１０ｍＭフェニルホスフェート液にてｐｐ８２を溶
出した。溶出液をセントリコン３０で濃縮後、アセトン
沈殿法にて析出させた。精製ｐｐ８２を電気泳動法にて
分離後、ＰＶＤＦ膜に転写し、トリプシン処理を行い、
液体クロマトグラフィーで分離した。このようにして精
製されたｐｐ８２から、公知の方法によってリン酸を除
去し、精製されたｐ８２を得た。
【００４３】実施例２：Ｆａｏ肝細胞におけるグリコー
ゲン合成 Ｆａｏラット肝細胞（１０５個／ｄｉｓｈ）をダルベッ
コ変法イーグル培地（１０％牛胎児血清含有）を用い、
５％ＣＯ2 培養器中、３７℃で８日間培養した。その
後、血清を含まないダルベッコ変法イーグル培地で１８
時間処理した後、Ｋｒｅｂｓ−Ｒｉｎｇｅｒ緩衝液で洗
浄した。続いてアミリンを添加し、さらに３０分間培養
した。そこにインスリンを添加して１０分間培養し、１
４Ｃ−Ｇｌｕｃｏｓｅ（５ｍＭ、0.25μＣｉ）を添加し
て１時間、３７℃で培養した。その後、細胞を同緩衝液
で洗浄し、１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液で１時間処理を
した。遠心にて細胞を回収し、７５％エタノールで一夜
放置し、回収したグリコーゲンを液体シンチレーション
カウンターで測定した。その結果を表１に示す。
ゲン合成 Ｆａｏラット肝細胞（１０５個／ｄｉｓｈ）をダルベッ
コ変法イーグル培地（１０％牛胎児血清含有）を用い、
５％ＣＯ2 培養器中、３７℃で８日間培養した。その
後、血清を含まないダルベッコ変法イーグル培地で１８
時間処理した後、Ｋｒｅｂｓ−Ｒｉｎｇｅｒ緩衝液で洗
浄した。続いてアミリンを添加し、さらに３０分間培養
した。そこにインスリンを添加して１０分間培養し、１
４Ｃ−Ｇｌｕｃｏｓｅ（５ｍＭ、0.25μＣｉ）を添加し
て１時間、３７℃で培養した。その後、細胞を同緩衝液
で洗浄し、１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液で１時間処理を
した。遠心にて細胞を回収し、７５％エタノールで一夜
放置し、回収したグリコーゲンを液体シンチレーション
カウンターで測定した。その結果を表１に示す。
【００４４】
【表１】
【００４５】表１より、アミリンがインスリンによるグ
リコーゲン合成促進作用を濃度依存的に抑制することが
確認された。
リコーゲン合成促進作用を濃度依存的に抑制することが
確認された。
【００４６】実施例３：ｐ８２蛋白のチロシンリン酸化
作用 Ｆａｏラット肝細胞（１０５個／ｄｉｓｈ）をダルベッ
コ変法イーグル培地（１０％牛胎児血清含有）を用い、
５％ＣＯ2 培養器中、３７℃で８日間培養した。その
後、血清を含まないダルベッコ変法イーグル培地で１８
時間処理した後、アミリンを添加し、さらに３０分間培
養した。そこにインスリンを添加してから１０分間培養
し、氷冷したリン酸緩衝液で洗浄した。細胞をホモジナ
イズした後、遠心にてサイトゾル分画を回収した。ｐ８
２蛋白は、抗ホスホロチロシン抗体の結合したセファロ
ースビーズで回収後、フェニルホスフェートで溶出し、
ウエスタンブロッティング法で検出した。精製ｐｐ８２
をスタンダードとして、バンドのｐｐ８２量をデンシト
メーターで測定した。その結果を表２に示す。
作用 Ｆａｏラット肝細胞（１０５個／ｄｉｓｈ）をダルベッ
コ変法イーグル培地（１０％牛胎児血清含有）を用い、
５％ＣＯ2 培養器中、３７℃で８日間培養した。その
後、血清を含まないダルベッコ変法イーグル培地で１８
時間処理した後、アミリンを添加し、さらに３０分間培
養した。そこにインスリンを添加してから１０分間培養
し、氷冷したリン酸緩衝液で洗浄した。細胞をホモジナ
イズした後、遠心にてサイトゾル分画を回収した。ｐ８
２蛋白は、抗ホスホロチロシン抗体の結合したセファロ
ースビーズで回収後、フェニルホスフェートで溶出し、
ウエスタンブロッティング法で検出した。精製ｐｐ８２
をスタンダードとして、バンドのｐｐ８２量をデンシト
メーターで測定した。その結果を表２に示す。
【００４７】
【表２】
【００４８】表２より、アミリンがインスリンによるｐ
８２蛋白のチロシンリン酸化促進作用を抑制することが
確認された。
８２蛋白のチロシンリン酸化促進作用を抑制することが
確認された。
【００４９】実施例４：ｐ８２蛋白のリン酸化度とグリ
コーゲン合成活性との相関性 ＣＳ−０４５、ビタミンＫ5 、バナジン酸について実施
例２および実施例３と同様に行い、表３に示す結果を得
た。
コーゲン合成活性との相関性 ＣＳ−０４５、ビタミンＫ5 、バナジン酸について実施
例２および実施例３と同様に行い、表３に示す結果を得
た。
【００５０】
【表３】
【００５１】表３より、ｐ８２蛋白のチロシンリン酸化
を促進する化合物は、グリコーゲン合成を促進すること
が確認された。
を促進する化合物は、グリコーゲン合成を促進すること
が確認された。
【００５２】製剤実施例１ 以下の各成分を常法により混合した後、打錠して一錠中
に５ｍｇの活性成分を含有する錠剤１００錠を得た。 ・（±）−５−［４−（６−ヒドロキシ−２，５，７，８−テトラメチルクロマ ン−２−イルメトキシ）ベンジル］−２，４−チアゾリジンジオン ……５００ｍｇ ・カルボキシメチルセルロースカルシウム ……２００ｍｇ ・ステアリン酸マグネシウム ……１００ｍｇ ・微結晶セルロース …… 9.2ｇ
に５ｍｇの活性成分を含有する錠剤１００錠を得た。 ・（±）−５−［４−（６−ヒドロキシ−２，５，７，８−テトラメチルクロマ ン−２−イルメトキシ）ベンジル］−２，４−チアゾリジンジオン ……５００ｍｇ ・カルボキシメチルセルロースカルシウム ……２００ｍｇ ・ステアリン酸マグネシウム ……１００ｍｇ ・微結晶セルロース …… 9.2ｇ
【００５３】製剤実施例２ 以下の各成分を常法により混合した後、打錠して一錠中
に５ｍｇの活性成分を含有する錠剤１００錠を得た。 ・ビタミンＫ5 ……５００ｍｇ ・カルボキシメチルセルロースカルシウム ……２００ｍｇ ・ステアリン酸マグネシウム ……１００ｍｇ ・微結晶セルロース …… 9.2ｇ
に５ｍｇの活性成分を含有する錠剤１００錠を得た。 ・ビタミンＫ5 ……５００ｍｇ ・カルボキシメチルセルロースカルシウム ……２００ｍｇ ・ステアリン酸マグネシウム ……１００ｍｇ ・微結晶セルロース …… 9.2ｇ
フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 ＦＩ Ａ６１Ｋ 33/24 Ａ６１Ｋ 33/24 Ｃ０７Ｃ 39/14 Ｃ０７Ｃ 39/14 215/86 215/86 229/64 229/64 229/70 229/70 Ｃ０７Ｄ 417/12 ３１１ Ｃ０７Ｄ 417/12 ３１１ Ｇ０１Ｎ 33/68 Ｇ０１Ｎ 33/68 //(Ｃ０７Ｄ 417/12 277:32 311:72）
Claims (4)
- 【請求項１】 蛋白質ｐ８２をチロシンリン酸化するこ
とを特徴とする糖尿病治療方法。 - 【請求項２】 蛋白質ｐ８２をチロシンリン酸化するこ
とを特徴とする糖尿病治療剤。 - 【請求項３】 蛋白質ｐ８２をチロシンリン酸化する物
質を有効成分として含有する糖尿病治療剤。 - 【請求項４】 蛋白質ｐ８２を用いることを特徴とする
糖尿病治療剤のスクリーニング方法。
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP6194870A JPH1135479A (ja) | 1994-07-27 | 1994-07-27 | 蛋白質ｐ８２をチロシンリン酸化することを特徴とする糖尿病治療方法および糖尿病治療剤 |
| PCT/JP1995/001484 WO1996003148A1 (fr) | 1994-07-27 | 1995-07-26 | Procede et medicament destines au traitement des diabetes |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP6194870A JPH1135479A (ja) | 1994-07-27 | 1994-07-27 | 蛋白質ｐ８２をチロシンリン酸化することを特徴とする糖尿病治療方法および糖尿病治療剤 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH1135479A true JPH1135479A (ja) | 1999-02-09 |
Family
ID=16331680
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP6194870A Pending JPH1135479A (ja) | 1994-07-27 | 1994-07-27 | 蛋白質ｐ８２をチロシンリン酸化することを特徴とする糖尿病治療方法および糖尿病治療剤 |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH1135479A (ja) |
| WO (1) | WO1996003148A1 (ja) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
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Family Cites Families (3)
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| FR2509724B1 (fr) * | 1981-07-15 | 1985-10-25 | Centre Nat Rech Scient | Nouvelles guanidines a fort encombrement sterique et procedes pour leur preparation |
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-
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1995
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Also Published As
| Publication number | Publication date |
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