JPH11230937A

JPH11230937A - 分離分析検査データ処理装置

Info

Publication number: JPH11230937A
Application number: JP10036281A
Authority: JP
Inventors: Tokitsugu Nakazato; 時亜中里
Original assignee: HERENA KENKYUSHO KK
Current assignee: HERENA KENKYUSHO KK
Priority date: 1998-02-18
Filing date: 1998-02-18
Publication date: 1999-08-27
Anticipated expiration: 2018-02-18
Also published as: US6963822B1; JP3091176B2

Abstract

(57)【要約】【課題】デンシトメータ等で得られた血清（血漿）中
の脂質の複数の波形図を定量的に比較できるようにす
る。【解決手段】電気泳動で得られた、例えばコレステロ
ールとトリグリセライドの波形図を重ねて表示してい
る。このように、２つの波形図を比較したり、重ねて表
示するために、絶対濃度の１単位を波形の大きさの１単
位に関連づけて正規化することにより解決している。こ
のようにすると、脂質の型分類が容易に行うことができ
る。また、型分類も２つの波形図から定量的に自動的に
行うことができる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は血清（血漿）脂質分
離分析を電気泳動、液体クロマトグラフィー等で分離し
た試料の濃度を波形に反映させるデンシトメータや液体
クロマトグラフィの検出器、キャピラリ電気泳動の検出
器で行われる検査結果の処理に関する。

【０００２】

【従来の技術】血清脂質の分離分析は、比重で分離する
ことにより脂質代謝の解析がなされ、今や、高脂血症の
治療に大切な検査となっている。

【０００３】血清脂質は、遠心機で比重によって分離す
ると、ＨＤＬ（高比重リポ蛋白）、ＬＤＬ（低比重リポ
蛋白）、ＩＤＬ（中間比重リポ蛋白）、ＶＬＤＬ（超低
比重リポ蛋白）およびＣＭ（カイロミクロン）に分離で
きる。超遠心機で行うので、手間と時間が掛ることと、
分離間での状況を把握しようとすると、もっと細かく分
離しなければならないので、臨床で使用するのには困難
といえる。電気泳動法で血清脂質を分離すると超遠心法
と良い相関を示し、分離の状況も視覚的に捕らえること
ができるので、電気泳動のリポ蛋白分画が日常の検査に
使用されている。

【０００４】図１は、脂質分析に用いる自動電気泳動装
置、デンシトメータおよびコンピュータ・システムを示
している。

【０００５】図１において、電気泳動装置１１０は、試
料台１１４、アプリケータ１１２、試薬瓶立て１１８、
電気泳動槽１１６を有している。

【０００６】デンシトメータ１２０はコンピュータ・シ
ステムに接続されており、コンピュータ・システムによ
り、デンシトメータ１２０の処理・制御が行われてい
る。コンピュータ・システムは、コンピュータ本体１４
０、キーボード１４２、表示装置（ＣＲＴ）１４４、プ
リンタ１４６等で構成されている。

【０００７】また、電源１５０は電気泳動用の電源であ
り電気泳動装置１１０に電力を供給している。

【０００８】図２は電気泳動を行う手順を示すフローで
あり、図３は、図１に示した電気泳動装置１１０を上か
ら見た図である。図４（ａ）および（ｂ）は、図３の電
気泳動装置の電気泳動槽１１６および試料台１１４の拡
大図である。

【０００９】図１に示されているこれらの装置を用いて
行う脂質分析における電気泳動の手順について、図２
（ａ）のフローおよび図３，図４を用いて説明する。

【００１０】まず、電気泳動を行うための準備を行う。
図４（ａ）の泳動槽１１６において、分析に用いるアガ
ロース薄膜の２個所のセットピン穴１１５−１を、泳動
槽のセットピン１１６−４に差し込む。両端が磁性体の
試薬展開棒１１６−１と電極棒１１６−３をアガロース
に触れるようにして、磁石である電極１１６−２に吸着
させて置く。そして、泳動槽のスライドカバー１１７を
横に引き、閉める。試薬瓶立て１１８（図３参照）には
機械前面より１、２、３と付した３本の穴が有り、１項
目の検査では穴２に試薬をたてる。たとえば、コレステ
ロールとトリグリセライドの２項目を同時に検査を行う
ためには、コレステロールの試薬を穴１に、トリグリセ
ライドの試薬を穴３にたてる。

【００１１】試料台１１４（図４（ｂ）参照）のサンプ
ルカップ１１９は、１項目の検査では１５検体の２列で
最大３０試料の電気泳動を行うことができる。前述の
ような２項目を行うときは１と１１、２と１２、３と１
３、４と１４、５と１５に同じ試料をとる。

【００１２】試料台１１４には、アプリケータチップの
洗浄のために、洗浄液と、それを洗う精製水を入れてお
く。１１４−１はアプリケータチップの水分を拭き取る
ためのろ紙である。

【００１３】上述の泳動準備が終了したら、キーボード
１４２から開始の指示をコンピュータに入力して、コン
ピュータシステムから泳動装置に開始の指示ができる。
電気泳動装置１１０は、試料の塗布を行い（Ｓ２０
２）、電気泳動を開始（Ｓ２０４）。電気泳動が終了す
ると試薬の展開が行われ（Ｓ２０６）、アガロース膜に
試薬を含ませる。所定の時間および所定の温度で反応が
行われ（Ｓ２０８）、５パーセント酢酸で固定して（Ｓ
２１０）、乾燥を行う（Ｓ２１２）。このような電気泳
動の結果、図２（ｂ）に示すような泳動図が得られる。

【００１４】得られた泳動図をデンシトメータ１２０お
よびコンピュータ・システムを用いて分析を行う。図５
では、デンシトメータ等の動作とデンシトメータおよび
コンピュータ・システムのブロック図を示しており、こ
れを用いてデンシトメータ等の動作の説明をする。

【００１５】図２（ｂ）で示す泳動図を、デンシトメー
タ１２０の泳動図送り１２２に乗せて測定をする。脂質
のコレステロールとトリグリセライドは試薬により特定
の吸光波長を有している。この検査での試薬はホルマザ
ンを形成する試薬で、５７０ｎｍの波長を吸光するの
で、５７０ｎｍの波長で測定をする。光学系１２４から
発する測定光は泳動図を通って、受光素子１２６に当た
り、起電力が生じている。測定を開始すると、泳動図送
り１２２が走査して泳動図が測定光をとおり、試料部分
の吸光された光量が起電力の変化となる。この変化量を
受光素子１２６で捕らえることにより測定している。受
光素子１２６で捕らえた変化量を対数増幅器１２８で対
数増幅して、Ａ／Ｄ変換器１３０でデジタル値に変換
し、コンピュータ・システムの記憶媒体（例えば、ハー
ドディスク）に登録される。検査結果の出力を指示する
と、スキャン方向の横軸に対して積分値を縦軸としたグ
ラフ１３２を、ＣＲＴ１４４上に表示したり、プリンタ
１４６に出力する。また、コンピュータは、波形の積分
値より、各分画を百分率に変換して、すでに求められて
いる総濃度から各分画の濃度を求めることも行われてい
る。しかしながら、項目ごとに表示されることから、こ
の測定結果を理解するのが難しい。

【００１６】

【発明が解決しようとする課題】リポ蛋白の基本構造
は、トリグリセライドとコレステロールエステルで芯の
部分を形成し、それをリン脂質と遊離コレステロールか
らなる一層の被膜が覆う形になっており、表面に一種か
ら数種のアポ蛋白がついている。すなわち、リポ蛋白分
画のα（ＨＤＬ）、pre β（ＶＬＤＬ）、pre βとβ間
（ＩＤＬ）、β（ＬＤＬ）、カイロミクロンの部分のコ
レステロールとトリグリセライドとリン脂質を測定すれ
ば、それぞれの分画における成分の割合が分かる。

【００１７】脂質の代謝はアポ蛋白、酵素とコレステロ
ール転送蛋白等が関与して変化し、リポ蛋白はトリグリ
セライドの含有量により粒子サイズが微妙に変化するこ
とから、これ等の状況を把握することは、代謝の異常を
検出するのに役立つ。

【００１８】電気泳動で脂質は、α位（ＨＤＬ）、pre
β位（ＶＬＤＬ）、β位（ＬＤＬ）、試料塗布位置（カ
イロミクロン）、pre βとβの間（ＩＤＬ）に分離さ
れ、fat red 7Bなどで脂質染色をして測定を行ってい
る。ＷＨＯでは高脂血症を表現型として、Ｉ，IIa ，II
b ，III ，IV，Ｖの６種類の型に分類している。しかし
ながら、この分類をリポ蛋白分画、総コレステロール
値、総トリグリセライド値、および、カイロミクロンの
有無を、１２時間冷蔵庫に放置した血清試料の目視検査
で行う従来法では、時間が掛ると共に、判別が非常に難
しい試料も有り、熟練者でも分類に迷う場合もあった。

【００１９】高脂血症の表現型の分類は、pre β（ＶＬ
ＤＬ＋ＩＤＬ）、β（ＬＤＬ）とカイロミクロンの増減
で行われており、pre β（ＶＬＤＬ＋ＩＤＬ）は主にト
リグリセライドが多く、β（ＬＤＬ）はコレステロール
が多い。

【００２０】カイロミクロンは、そのほとんどがトリグ
リセライドであることから一般的に総トリグリセライド
値からで高脂血症の表現型の判別をしている（以下超遠
法の分画名で説明する）。すなわち、ＶＬＤＬ＋ＩＤＬ
は総トリグリセライド値、ＬＤＬは総コレステロール値
を使用して行う。カイロミクロンは血清を１２時間冷蔵
保存して目視検査を行い存在を決める。ＷＨＯの分類の
判別では、以下のイ〜ホのように分けられている。

【００２１】イ．Ｉ型は、ＶＬＤＬ＋ＩＤＬとＬＤＬが
正常でカイロミク４ロンのみ高い。

【００２２】ロ．IIa 型は、ＬＤＬのみ高く、ＶＬＤＬ
＋ＩＤＬとカイロミクロンは正常。

【００２３】ハ．IIb 型は、ＶＬＤＬ＋ＩＤＬとＬＤＬ
が高く、カイロミクロンは正常。

【００２４】ニ．III 型は、リポ蛋白分画でＶＬＤＬ＋
ＩＤＬとＬＤＬが近付きブロードβを形成しており、リ
ポ蛋白分画を行わないと判断できない。

【００２５】ホ．IV型は、ＶＬＤＬ＋ＩＤＬが高く、Ｌ
ＤＬとカイロミクロンは正常。

【００２６】ヘ．Ｖ型は、カイロミクロンとＶＬＤＬ＋
ＩＤＬが高く、ＬＤＬは正常。

【００２７】このような分類を行うためには一般的に、
動脈硬化学会の高脂血症のガイドラインの値を参考にし
て判別している。しかしながら、上記方法では、リポ蛋
白分画は割合でしか求められず、カイロミクロンは定性
分析なので、自動的に表現型の判別を行うことは困難で
ある。また、ＶＬＤＬ＋ＩＤＬに多量のコレステロール
を含んでいたり、ＬＤＬにトリグラセライドを多量に含
む検体があり、上記の分類ではこのような異常検体を検
出することはできない。コレステロール分画値とトリグ
リセライド分画値、そしてコレステロールとトリグリセ
ライドの総濃度で高脂血症の表現型の分類を行うと、カ
イロミクロンのために行う血清の目視検査や、リポ蛋白
分画を行わずに判別が合理的に行え、コンピュータで判
断させることが可能となる。また今までの分類で分から
なかった異常検体が分かり、代謝異常の診断、治療方法
と治療効果の観察に役立つ。

【００２８】本発明の目的は、高脂血症の表現型の分類
を、検査結果より判定できるようにすることである。

【００２９】

【課題を解決するための手段】上記目的を達成するため
に、本発明は、血液中の脂質の分離分析検査を行うため
に、電気泳動して得られた所定の試料をスキャンして波
形を得て、その波形を処理する装置において、スキャン
して得られたそれぞれの波形を積分する手段と、積分し
て得られた波形の積分値と試料の絶対量とから波形を正
規化する手段と、正規化された波形を複数記憶する手段
と、記憶された波形を複数同時に出力する手段とを有す
ることを特徴とする。

【００３０】本発明の検査データ処理装置では、正規化
された波形を複数同時に出力することにより、脂質の分
析の把握、例えば表現型の分類等がより容易に行うこと
ができる。

【００３１】前記波形を複数同時に出力する手段は、複
数の波形におなじ係数をかけて、別々の場所に出力して
もよく、また、同じ場所に重ねて出力してもよい。特
に、重ねて出力することにより、表現型の分類の特徴の
把握が容易となる。

【００３２】また、前記同時に出力する波形は、同一検
体・同一検査項目の時系列の波形であってもよく、同一
検体の異なる検査項目の波形であってもよい。これら
は、目的に応じて出力するようにしている。

【００３３】同一検体の異なる検査項目の複数の波形に
よる検査結果を用いると、脂質の表現型の判別を自動的
に行うことができる。これらの複数の波形の検査結果
は、コレステロールとトリグリセライドに対する検査結
果だけでもよい。自動的に表現型の分類を行うようにし
ているので、個人差がなく診断等が行える。

【００３４】上述の機能をコンピュータに実現させるた
めのプログラムを格納した記録媒体も本発明である。

【００３５】

【発明の実施の形態】本発明の実施形態を、血清の脂質
検査を例として用いて詳しく説明する。

【００３６】本発明の実施形態として、上述の図１のデ
ンシトメータ１２０の処理を行っているコンピュータ・
システムのソフトウェアとして実現した場合で、以下説
明する。

【００３７】図６に電気泳動装置１１０を用いて作成し
た泳動図を示している。図６は、コレステロールとトリ
グリセライド（中性脂肪）の泳動図である。これを上述
のデンシトメータ１２０でスキャンを行い、得られた泳
動の波形をハードディスク等の記録媒体に格納する。こ
のスキャン結果である波形を本発明の実施形態であるソ
フトウェアを用いて処理を行う。

【００３８】図７〜図９は、コンピュータ・システムに
おけるＣＲＴ１４４上に表示されるウィンドウ（画面）
であり、スキャンの条件やスキャン対象（試料）につい
てのデータの入力を行うためのものである。

【００３９】図７においては、下部のパラメータ設定部
６０２でスキャンのパラメータ（条件）を設定する。デ
フォルトで設定されているものを用いることができ、変
更する必要がない場合は、スキャンＳｅｑ．６０３を入
力するだけでよく、スキャン・ボタン６０１をクリック
する。

【００４０】また、試料（検体）についての属性を入力
するためのウィンドウが図８および図９に示されてい
る。図８で検査項目にコレステロールを選択すると図９
のウィンドウが開かれる。ここで、受付日(scanned dat
e)８０２、シーケンス番号(sequence No.)８１０、ＩＤ
番号８０８、患者名(Patient Name)８０４等と他で測定
したコレステロールの活性値（総濃度：絶対濃度）８０
６を入力する。また、トリグリセライドに対しても同様
に入力する。これで図６の泳動図のスキャンを行い、得
られたコレステロールおよびトリグリセライドの２項目
の波形はハードディスク等に格納される。

【００４１】このようにしてハードディスクに格納され
たコレステロールおよびトリグリセライドの２項目の波
形の例として、図１０（ａ）および（ｂ）がある。

【００４２】そして、このハードディスク等に格納され
ている同一検体の２項目に対するスキャン結果を同一画
面に呼び出して観察するために、波形編集ＩＩのウィン
ドウを開く。これが図１１である。これでＩＤや患者名
等が同一のコレステロールとトリグリセライドに対応し
た波形を指定することができる。

【００４３】これを行うために、日付（９０２）、シー
ケンス番号９１０、ＩＤ番号９０８、患者名９０４等で
患者等を特定することができる項目を入力する。また、
検査項目１としてコレステロール９１２を指定し、検査
項目２としてトリグリセライド９１４を指定する。ゲイ
ン(Gain)として指定する数字は、表示される波形の大き
さを決定する係数である。これは２つの波形に対して共
通に用いられる。

【００４４】必要項目の入力が終了して、作業ボタン９
１８をクリックすると、図１２および図１３のような波
形図を表示することができる。図１２は、図１０（ａ）
および図１０（ｂ）のような個別の波形図を、コレステ
ロールの波形図１００２とトリグリセライドの波形図１
００４として同じ画面に並べて表示している。図１３
は、コレステロールとトリグリセライドの両波形図を重
ねた波形図１１０２を表示したものである。

【００４５】このように、２つの波形図を比較したり、
重ねて表示するためには、従来例のようなスキャン条件
等で波形図が変化してはならない。

【００４６】このため、この発明においては、絶対濃度
の１単位を波形の大きさの１単位に関連づけることによ
り解決している。例えば、測定で求められたアナログデ
ータの総積分値を絶対濃度で除すると絶対濃度１単位当
たりの積分値が求められ、その積分値を波形の１単位と
して波形表示すれば、濃度に対応した波形が得られる。
すなわち、波形の面積（積分値）と絶対濃度（総濃度）
とを一定の比例関係とする。このように補正された波形
がハードディスク等の記録媒体に記録される。または、
測定で求められたアナログデータの積分値をそのまま記
録媒体に記録し、その都度処理をされても良い。これを
読み出してグラフとして表示すると、相互に比較できる
波形となる。

【００４７】波形の面積（積分値）と絶対濃度（総濃
度）とを一定の比例関係とするように正規化して求めた
波形が、図１２および図１３に示されているものであ
る。図１２と図１３は、例えば、特定のキーボード上の
ボタンを押下することで表示の切り替えができるように
してもよい。

【００４８】図１２において、波形図１００２および１
００４の下部には、波形図の分画数（１）ないし（４）
および総濃度から求めた分析結果が表示されている。１
０１０にはコレステロールにおけるＨＤＬ（高比重リポ
蛋白）、ＶＬＤＬ（超低比重リポ蛋白）、ＬＤＬ（低比
重リポ蛋白）、ＣＭ（カイロミクロン）が表示されてい
る。１０１２にはトリグリセライドに対する同様の分析
結果が表示されている。１０１４にはコレステロールと
トリグリセライド双方を合計したものが表示されてい
る。１０１８および１０１９には、ＷＨＯの表現型分類
および高ＨＤＬ血症が示されている。ＷＨＯ分類は、前
述のように、リポ蛋白のうちどれが増えているかを分類
したものである。

【００４９】このＷＨＯ分類の決定について、図１４の
フローチャートを用いて説明する。ここで、このフロー
チャートで用いている符号は以下の通りである。

【００５０】Ｔ．ＣＨ：総コレステロールＨＤＬ．ＣＨ：ＨＤＬコレステロールＶＬＤＬ．ＣＨ：ＶＬＤＬコレステロールＩＤＬ．ＣＨ：ＩＤＬコレステロールＬＤＬ．ＣＨ：ＬＤＬコレステロールＣＭ．ＣＨ：カイロミクロン・コレステロールＴ．ＴＧ：総トリグリセライドＨＤＬ．ＴＧ：ＨＤＬトリグリセライドＶＬＤＬ．ＴＧ：ＶＬＤＬトリグリセライドＩＤＬ．ＴＧ：ＩＤＬトリグリセライドＬＤＬ．ＴＧ：ＬＤＬトリグリセライドＣＭ．ＴＧ：カイロミクロン・トリグリセライドまた、判別に使用している基準値の一例として、以下に
示すものを用いている。

【００５１】総コレステロール（Ｘ）：２２０ｍｇ／ｄｌＬＤＬコレステロール（Ｙ）：１５０ｍｇ／ｄｌＨＤＬコレステロール（Ｂ）：７０ｍｇ／ｄｌ（ＶＬＤＬ．ＣＨ＋ＩＤＬ．ＣＨ）／Ｔ．ＴＧ（Ｅ）：０．２５ＶＬＤＬ．ＴＧ＋ＩＤＬ．ＴＧ（Ｆ）：１５０ｍｇ／ｄｌ総トリグリセライド（Ｚ）：１５０ｍｇ／ｄｌ総トリグリセライド（Ｚ１）：４００ｍｇ／ｄｌＣＭ．ＣＨ＋ＣＭ．ＴＧ（Ａ）：１００ｍｇ／ｄｌ（ＶＬＤＬ．ＣＨ＋ＩＤＬ．ＣＨ）／（ＶＬＤＬ．ＴＧ＋ＩＤＬ．ＴＧ）（Ｄ）：０．４２（ＶＬＤＬ．ＣＨ＋ＩＤＬ．ＣＨ）／ＬＤＬ．ＣＨ（Ｃ１）：０．８（ＶＬＤＬ．ＣＨ＋ＩＤＬ．ＣＨ）／ＬＤＬ．ＣＨ（Ｃ２）：１．３さて、図１４のフローチャートにおいて、型判別は、ま
ず、カイロミクロンコレステロール（ＣＭ．ＣＨ）とカ
イロミクロン・トリグリセライド（ＣＭ．ＴＧ）との和
を調べる（Ｓ１４０２）ことから始める。この和が基準
値Ａより大きいとき（Ｓ１４０２でＹＥＳ）は、他の検
査で調べた総トリグリセライド（Ｔ．ＴＧ）が基準値Ｚ
１より大きいかを調べる（Ｓ１４０４）。総トリグリセ
ライド（Ｔ．ＴＧ）がＺ１より大きくないとき（Ｓ１４
０４でＮＯ）は要検査である（Ｓ１４１０）。大きいと
き（Ｓ１４０４でＹＥＳ）は、低比重リポ蛋白コレステ
ロール（ＬＤＬ．ＣＨ）を調べる（Ｓ１４０６）。低比
重リポ蛋白コレステロール（ＬＤＬ．ＣＨ）が基準値Ｙ
より大きいとき（Ｓ１４０６でＹＥＳ）は、要検査であ
る（Ｓ１４０８）。小さいとき（Ｓ１４０６でＮＯ）は
さらに、超低比重リポ蛋白トリグリセライドと中間比重
リポ蛋白トリグリセライドの和（ＶＬＤＬ．ＴＧ＋ＩＤ
Ｌ．ＴＧ）が基準値Ｆより大きいかを調べる（Ｓ１４１
２）。超低比重リポ蛋白トリグリセライドと中間比重リ
ポ蛋白トリグリセライドの和（ＶＬＤＬ．ＴＧ＋ＩＤ
Ｌ．ＴＧ）が基準値Ｆより大きいとき（Ｓ１４１２でＹ
ＥＳ）のときは、表現型は「Ｖ型」であるとする（Ｓ１
４１４）。

【００５２】基準値Ｆより小さい場合（Ｓ１４１２でＮ
Ｏ）は、低比重リポ蛋白コレステロール（ＬＤＬ．Ｃ
Ｈ）が基準値Ｙより大きいかを調べる（Ｓ１４１６）。
低比重リポ蛋白コレステロール（ＬＤＬ．ＣＨ）が基準
値Ｙより大きいとき（Ｓ１４１６でＹＥＳ）は、要検査
である（Ｓ１４１８）。小さいとき（Ｓ１４１６でＮ
Ｏ）は、検査対象の脂質の表現型は「Ｉ型」である（Ｓ
１４２０）。

【００５３】さて、前述のカイロミクロンコレステロー
ル（ＣＭ．ＣＨ）とカイロミクロン・トリグリセライド
（ＣＭ．ＴＧ）との和を調べたとき（Ｓ１４０２）に、
基準値Ａより小さい場合（Ｓ１４０２でＮＯ）は、さら
に、超低比重リポ蛋白コレステロールと中間比重リポ蛋
白コレステロールの和（ＶＬＤＬ．ＣＨ＋ＩＤＬ．Ｃ
Ｈ）と低比重リポ蛋白コレステロール（ＬＤＬ．ＣＨ）
との比を求めて、これと基準値Ｃ１とを比較する（Ｓ１
４２２）。比が基準値Ｃ１より大きいとき（Ｓ１４２２
でＹＥＳ）は、総コレステロール（Ｔ．ＣＨ）と基準値
Ｘとを比較する（Ｓ１４２４）。大きいとき（Ｓ１４２
４でＹＥＳ）はさらに、総トリグリセライド（Ｔ．Ｔ
Ｇ）と基準値Ｚとを比較する（Ｓ１４２６）。基準値Ｚ
より大きいときは超低比重および中間比重リポ蛋白のコ
レステロールの和（ＶＬＤＬ．ＣＨ＋ＩＤＬ．ＣＨ）と
超低比重および中間比重リポ蛋白のトリグリセライドの
和（ＶＬＤＬ．ＴＧ＋ＩＤＬ．ＴＧ）の比を、基準値Ｄ
と比較する（Ｓ１４２８）。比が基準値Ｄより大きいと
き（Ｓ１４２８でＹＥＳ）は表現型III と判定する（Ｓ
１４３４）。同様に、Ｓ１４２８でＮＯのときは、超低
比重リポ蛋白コレステロールと中間比重リポ蛋白コレス
テロールの和（ＶＬＤＬ．ＣＨ＋ＩＤＬ．ＣＨ）と総ト
リグリセライド（Ｔ．ＴＧ）との比と、基準値Ｅとを比
較する（Ｓ１４３０）。基準値Ｅより大きいとき（Ｓ１
４３０でＹＥＳ）は、また、表現型「III型」とする。
Ｓ１４３０でＮＯのときは、超低比重リポ蛋白コレステ
ロールと中間比重コレステロールの和（ＶＬＤＬ．ＣＨ
＋ＩＤＬ．ＣＨ）と低比重リポ蛋白コレステロール（Ｌ
ＤＬ．ＣＨ）との比と、基準値Ｃ２とを比較する（Ｓ１
４３２）。基準値Ｃ２より大きいとき（Ｓ１４３２でＹ
ＥＳ）は、さらにまた、表現型「III 型」とする。

【００５４】ステップＳ１４２２〜ステップＳ１４３２
で表現型「III 型」とならない場合は、すべて、総コレ
ステロール（Ｔ．ＣＨ）が基準値Ｘより大きいかを調べ
る（Ｓ１４３６）。総コレステロール（Ｔ．ＣＨ）が基
準値Ｘより小さいとき（Ｓ１４３６でＮＯ）は、さらに
低比重リポ蛋白コレステロール（ＬＤＬ．ＣＨ）が基準
値Ｙより大きいかを調べる（Ｓ１４３８）。基準値Ｙよ
り大きいとき（Ｓ１４３８でＹＥＳ）は、総トリグリセ
ライド（Ｔ．ＴＧ）が基準値Ｚより大きいかを調べ（Ｓ
１４４０）、大きいとき（Ｓ１４４０でＹＥＳ）は「II
b 型」であり、小さいとき（Ｓ１４４０でＮＯ）は「II
a 型」である。

【００５５】前述のステップＳ１４３８においてＮＯの
場合は同様に、総トリグリセライド（Ｔ．ＴＧ）が基準
値Ｚより大きいかを調べ（Ｓ１４４６）、大きいとき
（Ｓ１４４６でＹＥＳ）は「IV型」であり、小さいとき
（Ｓ１４４６でＮＯ）は「正脂血症（正常）」である。

【００５６】また、図１５は、高ＨＤＬ血症を表示する
ための判断を示している。高比重リポ蛋白コレステロー
ル（ＨＤＬ．ＣＨ）が基準値Ｂより大きい（Ｓ１５０２
でＹＥＳ）と、高ＨＤＬ血症（Ｓ１５０６）と判断して
いる。

【００５７】このようにコレステロールとトリグリセラ
イドの分析結果を用いて、自動的に分類を行うと、診断
やそれに応じた食事療法や薬物療法の方針がたてやす
い。

【００５８】また、コレステロールとトリグリセライド
の波形を図１３のように、正規化して重ねることによ
り、このＷＨＯ分類の各パターンを顕著に示すことがで
きる。

【００５９】これを示したのが図１６から図１８であ
る。この図１６から図１８に示されているように、コレ
ステロールとトリグリセライドの電気泳動図を正規化し
て重ねることにより、型判別を容易に行うことができ
る。

【００６０】また、図１９は、正常者の波形図である。
図１６〜図１９で分かるように、２つの波形をかさねる
と、それぞれの型の特徴がはっきりとして、明確な判断
ができる。

【００６１】上記の画面に表示された波形図は、指示に
より上記図１におけるプリンタ１４６から出力すること
ができる。例えば、図１９の波形図をプリント・アウト
した結果を示したのが図２０である。

【００６２】上述の説明では、血液中の脂質の検査をコ
レステロールとトリグリセライドの２つを用いて説明し
た。しかし、本発明はこの２つの検査に制限されるもの
ではない。例えば、リン脂質の検査とコレステロールの
検査等、２項目以上の異なる検査を組み合わせることで
分類等ができるものであればよい。

【００６３】このように、これまでは、波形の大きさ
と、濃度が一定の比例関係で表示できなかったために、
波形図は、割合の変化の状況と分画濃度だけしかほとん
ど利用されていない。本発明においては、波形と濃度を
一定の比例関係で表示できるので、２つの測定を重ね合
わせて比較することができ、脂質代謝の状況をより正確
に把握することが可能となる。

【００６４】この発明の長所は、試料間の検体量のばら
つき、発色量の違いによる影響を受けないことである。
このため、デンシトメータによる波形図をもちいて、同
一検体の時系列で検出した波形図どうしや、異なる検体
間の波形図の比較も同様にできる。

【００６５】本発明による波形図の時系列でデータを見
るとき、細かい変化が変化量として捕えることができ、
経過観察に役立てることができる。その上、変化の状況
を把握できるので、代謝の研究に役立つ。また、患者に
状況の変化を波形の変化で、容易に説明できる。

【００６６】出力される波形の高さが高すぎたり、低す
ぎたりするときは、図１１のGain９１６として設定した
係数を変更する。この結果、濃度単位には比例する適切
な大きさの出力波形を得ることができる。

【００６７】上述の説明においては、総濃度等を設定す
る入力はキーボード１４２から行うように説明したが、
図５のＩ／Ｏインタフェース１４８等を介して、外部か
ら入力するようにしてもよい。

【００６８】図５においては、デンシトメータの値は、
対数増幅器１２８のあとにアナログ・デジタル変換して
コンピュータ１４０に入力されている。しかし、受光素
子１２６からのアナログ信号をデジタルに変えてコンピ
ュータに取り込み、コンピュータで対数をとる演算を行
うこともできる。

【００６９】また、上述の説明においては、血清脂質の
電気泳動による試料に対する事例で説明した。しかし、
本発明は、キャピラリ電気泳動、およびセルロース・ア
セテート、アガロース、寒天、ポリアクリルアミドゲ
ル、澱粉等の支持体薄膜に電気泳動で分離した試料や薄
層クロマトグラフィーに展開された試料等に対しても用
いることができる。

【００７０】電気泳動ばかりではなく、液体クロマトグ
ラフィー、およびガスクロマトグラフィー装置による試
料に対しても用いることができる。

【００７１】

【発明の効果】本発明は、上述のように、コレステロー
ルおよびトリグリセライドの検査結果から高脂血症の表
現型と高ＨＤＬ血症の判別を自動的に行うことができる
ことから、判断の個人差をなくすことができる。そし
て、この表現型等の判断結果を用いると、治療方針が立
て易くなる。

【００７２】また、コレステロールおよびトリグリセラ
イドの波形図を重ねてみることができるため、表現型の
特徴の把握が容易となる。また、検査結果を時系列でみ
ると、各分画の変化即ち分画成分の増減がわかり、治療
効果特に薬効の観察に役立つとともに、患者への説明が
容易となる。

【図面の簡単な説明】

【図１】電気泳動装置およびデンシトメータ等の装置を
示す図である。

【図２】電気泳動法による試料作成過程を示すフローチ
ャートおよび作成された試料（泳動図）を示す図であ
る。

【図３】電気泳動槽を上から見た図である。

【図４】図３の電気泳動槽の一部の拡大図である。

【図５】デンシトメータおよびコンピュータ・システム
の構成を説明するブロック図である。

【図６】電気泳動法により得られた血清中の脂質の泳動
図である。

【図７】スキャン条件を設定するための表示を示す図で
ある。

【図８】検査項目を設定するための表示を示す図であ
る。

【図９】属性を設定するための表示を示す図である。

【図１０】デンシトメータにより得られた波形図であ
る。

【図１１】２つの波形を表示を指定するための表示を示
す図である。

【図１２】２つの波形を同時に異なる場所に表示してい
る図である。

【図１３】２つの波形を同時に重ねて表示している図で
ある。

【図１４】ＷＨＯの型判別の処理を示すフローチャート
である。

【図１５】高脂血症の判別の処理を示すフローチャート
である。

【図１６】コレステロールとトリグリセライドの波形と
ＷＨＯの型との関係を示す図である。（Ｉ型およびIIa
型）

【図１７】コレステロールとトリグリセライドの波形と
ＷＨＯの型との関係を示す図である。（IIb 型およびII
I 型）

【図１８】コレステロールとトリグリセライドの波形と
ＷＨＯの型との関係を示す図である。（IV型およびＶ
型）

【図１９】正常な脂質を示す波形図である。

【図２０】図１９のプリント・アウトされた帳票を示す
図である。

【符号の説明】

１１０電気泳動装置１１２アプリケータ１１４試料台１１５アガロース薄膜１１５−１アガロース薄膜の穴１１６泳動槽１１６−１試薬展開棒１１６−２電極１１６−３電極棒１１６−４セットピン１１７スライドカバー１１８試薬瓶立て１２０デンシトメータ１４０コンピュータ１４２キーボード１４４表示装置（ＣＲＴ）１４６プリンタ１５０電源１２２泳動図送り１２４光学系１２６受光素子１２８対数増幅器１３０Ａ／Ｄ変換器１３２波形図

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【手続補正書】

【提出日】平成１１年４月２０日

【手続補正１】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】特許請求の範囲

【補正方法】変更

【補正内容】

【特許請求の範囲】

【手続補正２】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】０００１

【補正方法】変更

【補正内容】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、検体血液試料の血
清（血漿）中の脂質成分を、電気泳動法により分離し、
得られた各脂質成分の電気泳動図をデンシトメータによ
り光学密度波形に変換し、各脂質成分の光学密度波形を
数学的に処理して、検体血液試料中の脂質の検査を実現
する分離分析検査データ処理装置に関する。

【手続補正３】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】００１６

【補正方法】変更

【補正内容】

【００１６】

【発明が解決しようとする課題】周知のように、生体内
の脂質は、血液中ではリポ蛋白の形態で存在している。
リポ蛋白とは、前記脂質と蛋白質との複合体である。リ
ポ蛋白の基本構造は、トリグリセライドとコレステロー
ルエステルで芯の部分を形成し、それをリン脂質と遊離
コレステロールからなる一層の被膜が覆う形になってお
り、表面に一種から数種のアポ蛋白がついている。した
がって、脂質を分離分析するために、まず、その脂質を
複合しているリポ蛋白の蛋白質成分（アポ蛋白）に注目
して、これら蛋白質成分を電気泳動法により分離すれ
ば、それに伴って、各アポ蛋白に複合しているそれぞれ
の脂質成分も分離されることになる。つづいて、各分画
蛋白質に複合している所要の脂質成分を分離して測定す
れば、各分画中の各所要脂質成分量が判明し、各所要脂
質成分の総量も決定できる。すなわち、リポ蛋白分画の
α（ＨＤＬ）、pre β（ＶＬＤＬ）、pre βとβ間（Ｉ
ＤＬ）、β（ＬＤＬ）、カイロミクロンの部分のコレス
テロールとトリグリセライドとリン脂質を測定すれば、
それぞれの分画における成分の割合が分かる。

【手続補正４】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】００１８

【補正方法】変更

【補正内容】

【００１８】前記アポ蛋白の電気泳動を行って分離した
アポ蛋白中の脂質に対する電気泳動により、脂質は、α
位（ＨＤＬ）、pre β位（ＶＬＤＬ）、β位（ＬＤ
Ｌ）、試料塗布位置（カイロミクロン）、pre βとβの
間（ＩＤＬ）に分離され、fat red 7B などで脂質染色
をして測定を行っている。ＷＨＯでは高脂血症を表現型
として、Ｉ，IIａ，IIｂ，III，ＩＶ，Ｖの６種類の型
に分類している。しかしながら、この分類をリポ蛋白分
画、総コレステロール値、総トリグリセライド値、およ
び、カイロミクロンの有無を、１２時間冷蔵庫に放置し
た血清試料の目視検査で行う従来法では、時間が掛かる
と共に、判別が非常に難しい試料も有り、熟練者でも分
類に迷う場合もあった。

【手続補正５】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】００２９

【補正方法】変更

【補正内容】

【００２９】

【課題を解決するための手段】上記目的を達成するため
に、本発明は、血液中で脂質が蛋白質と複合してなるリ
ポ蛋白に対してその構成蛋白質成分の電気泳動を行っ
て、各蛋白質成分を分離し、各分画蛋白質成分に対して
これら蛋白質成分に複合している所要の脂質成分を電気
泳動により分離し、得られた各所要脂質成分の電気泳動
図を光学的にスキャンして光学密度の波形を得て、得ら
れた各所要脂質成分の光学密度波形を数学的に処理し
て、前記血液中の脂質成分の分離分析を行う分離分析検
査データ処理装置であって、前記各所要脂質成分の光学
密度波形を積分する手段と、前記積分して得られた波形
の積分値と前記所要脂質成分の総量濃度とから前記波形
を正規化する手段と、前記正規化された波形を複数記憶
する手段と、前記記憶された波形を複数同時に出力する
手段と、を有することを特徴とする。

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】血液中の脂質の分離分析検査を行うため
に、電気泳動して得られた所定の試料をスキャンして波
形を得て、その波形を処理する装置において、スキャンして得られたそれぞれの波形を積分する手段
と、積分して得られた波形の積分値と試料の絶対量とから波
形を正規化する手段と、正規化された波形を複数記憶する手段と、記憶された波形を複数同時に出力する手段とを有するこ
とを特徴とする検査データ処理装置。
【請求項２】請求項１記載の検査データ処理装置にお
いて、前記波形を複数同時に出力する手段は、複数の波
形におなじ係数をかけて、別々の場所に出力することを
特徴とする検査データ処理装置。
【請求項３】請求項１記載の検査データ処理装置にお
いて、前記波形を複数同時に出力する手段は、複数の波
形におなじ係数をかけ、同じ場所に重ねて出力すること
を特徴とする検査データ処理装置。
【請求項４】請求項１〜３いずれか記載の検査データ
処理装置において、前記同時に出力する波形は、同一検
体・同一検査項目の時系列の波形であることを特徴とす
る検査データ処理装置。
【請求項５】請求項１〜３いずれか記載の検査データ
処理装置において、前記同時に出力する波形は、同一検
体の異なる検査項目の波形であることを特徴とする検査
データ処理装置。
【請求項６】請求項５記載の検査データ処理装置にお
いて、複数の波形からの検査結果を用いて、脂質の表現
型の判別を行うことを特徴とする検査データ処理装置。
【請求項７】請求項６記載の検査データ処理装置にお
いて、前記複数の波形の検査結果は、コレステロールと
トリグリセライドに対する検査結果であることを特徴と
する検査データ処理装置。
【請求項８】血液中の脂質の分離分析検査を行うため
に、電気泳動して得られた同一検体の異なる検査項目の
試料をスキャンして波形を得て、その波形を処理する装
置において、スキャンして得られたそれぞれの波形を積分する手段
と、積分された複数の波形を記憶する手段と、複数の波形からの検査結果を用いて、脂質の表現型の判
別を行う手段と、判別した脂質の表現型を出力する手段とを有することを
特徴とする検査データ処理装置。
【請求項９】請求項１〜８いずれか記載の検査データ
処理装置の機能をコンピュータに実現させるためのプロ
グラムを格納した記録媒体。