JPH11116597A

JPH11116597A - ペプチド誘導体および抗真菌剤

Info

Publication number: JPH11116597A
Application number: JP9282079A
Authority: JP
Inventors: Seiichi Shimamura; 誠一島村; Koichi Hashimoto; 弘一箸本; Hiroshi Matsumoto; 宏志松本
Original assignee: Morinaga Milk Industry Co Ltd
Current assignee: Morinaga Milk Industry Co Ltd
Priority date: 1997-10-15
Filing date: 1997-10-15
Publication date: 1999-04-27

Abstract

(57)【要約】（修正有）【課題】抗真菌性に優れ安全で新規な抗真菌性ペプチ
ド誘導体と、これを有効成分とする抗真菌剤を提供す
る。【解決手段】一般式１のＤ体又はＬ体のアミノ酸配列
を有するペプチド誘導体、その塩類およびそれらを有効
成分とする抗真菌剤。［ＲはＣ１〜１９、飽和または２重もしくは３重結合を
１個以上有する直鎖のアルキル基を示し、Ｘａａは一般
式２（Ａは低級アルキレン基または酸素若しくは硫黄を結合
する低級アルキレン基、Ｒ１およびＲ２は各々水素、ハ
ロゲン、低級アルキル基、低級アルコキシ基またはニト
ロ基を示す。）のアミノ酸残基を示す。］

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】この出願の発明は、新規なペ
プチド誘導体またはそれらの薬理学的に許容される塩
類、およびそれらの用途に関するものである。さらに詳
しくは、この出願の発明は、医薬品、特に抗真菌剤とし
て使用し得る安全なペプチド誘導体に関するものであ
る。

【０００２】

【従来の技術】侵襲性カンジダ症等の重篤な深在性真菌
症はしばしば致死的疾患となり、その発症率は全世界的
に上昇の傾向にある。本来、カンジダ等の真菌に対する
宿主生体側の主要な防御機構は、好中球による非特異免
疫によると考えられており、この防御機構が正常に機能
している場合には真菌に感染する危険性は少ない。しか
しながら、近年、この生体の免疫機能の低下をもたらす
悪性腫瘍（特に、急性白血病、悪性リンパ腫等の造血器
系悪性腫瘍）、ＡＩＤＳ等の基礎疾患の患者数が増加し
つつあり、このことが深在性真菌症の発症率上昇の一因
とされている。また、制癌剤、免疫抑制剤等の医療処置
の繁用等も真菌感染を容易にしている要因の一つである
と考えられている。さらに、抗菌抗生物質、ステロイド
ホルモンの多用、長期にわたる中心静脈栄養、静脈カテ
ーテルの使用等も深在性真菌症に罹患する危険因子とさ
れている（例えば、臨床と微生物、第17巻、第 265ペー
ジ、1990年）。

【０００３】このような深在性真菌症の治療に最も有効
な手段は抗真菌剤による化学療法であるが、現在、深在
性真菌症治療薬として実用化されている薬剤は、抗菌剤
と比較してはるかに少なく、アンホテリシン、フルシト
シン、ミコナゾール、フルコナゾール、イトラコナゾー
ル、およびケトコナゾールの６種類にすぎない。これら
の中で、アンホテリシンは１９６０年代から臨床応用さ
れており、真菌に対する殺菌作用は非常に強い反面、腎
毒性等の強い副作用の問題があるため、臨床的な使用に
は制約がある。また、フルシトシンは連用により早期に
耐性化する等の問題があるため、現在では単独で使用さ
れることは希である。その他の薬剤は、その構造的特徴
から、いずれもアゾール系抗真菌剤と総称されるが、そ
の真菌に対する殺菌作用は、アンホテリシンのそれに比
べて一般に劣る傾向にあるが、有効性と安全性の兼ね合
いから現在最も多用されている薬物群である（例えば、
臨床と微生物、第21巻、第 277ペ−ジ、1994年）。

【０００４】抗真菌剤に対する耐性真菌の出現について
は、抗菌剤に対する耐性菌の出現頻度に比べれば、はる
かに低く、従来フルシトシンを除き、ほとんど問題視さ
れていなかった。しかしながら、最近アゾール系抗真菌
剤を長期間投与されているＡＩＤＳ患者から分離される
真菌には薬物耐性を示すものが出現し始めていることが
報告されている（例えば、感染症、第24巻、第61ペ−
ジ、1994年）。

【０００５】アゾール系抗真菌剤は、深在性真菌症に限
らず、表在性真菌症の治療にも一般に広く使用されてい
る薬物群であり、現在真菌症治療薬として新たに開発が
進められている薬物の多くが、このアゾール系抗真菌剤
に属する。これらアゾール系抗真菌剤は、吸収性、代謝
安定性等の面で各々固有の特徴を有するが、抗真菌作用
を発現する機序の面では同一であると考えられている。

【０００６】従って、抗真菌活性に優れ、安全で、かつ
全く新しい機序に基づく新規な抗真菌剤の実用化の見込
みがたたない現在、アゾール系抗真菌剤全般にわたって
耐性を獲得し、既存の薬物では全く対処できない耐性菌
の蔓延が憂慮されている（例えば、臨床と微生物、第22
巻、第 575ペ−ジ、1995年）。一方、種々の微生物に対
して抗菌作用、抗真菌作用等を有するペプチドまたはそ
の誘導体については、多数の報告がなされており［例え
ば、ビオキミカ・エト・ビオフィジカ・アクタ（Biochi
mica et Biophysica Acta ）、第1197巻、第109 ペー
ジ、1994年］、その中の一つにラクトフェリンがある。

【０００７】ラクトフェリンは、涙、唾液、末梢血、乳
汁等に含まれている天然の鉄結合性蛋白質であり、大腸
菌、カンジダ菌、クロストリジウム菌等の有害微生物に
対して抗菌作用および抗真菌作用を示すことが知られて
いる［例えば、ジャーナル・オブ・ペディアトリクス
（Journal of Pediatrics ）、第94巻、第１ページ、19
79年；アーカイブズ・オブ・ディジーズ・イン・チャイ
ルドフッド（ Archivesof Disease in Childhood ）、
第67巻、第 657ページ、1992年］。

【０００８】また、ラクトフェリンの分解物、ラクトフ
ェリンに由来するペプチド類、これらとホモロジーを有
するペプチド類にも抗菌作用、抗真菌作用等のあること
が知られている。例えば、ラクトフェリン分解物を有効
成分とする抗菌剤（特開平５−３２００６８号公報）、
少なくとも２０個のアミノ酸残基からなる抗菌性ペプチ
ド（特開平５−９２９９４号公報）、５個のアミノ酸残
基からなる抗菌性ペプチド（特開平５−１４８２９６号
公報）、３〜６個のアミノ酸残基からなる抗菌性ペプチ
ド（特開平５−１４８２９７号公報）、ラクトフェリン
類の分解物、ラクトフェリン類の分解物から単離される
ペプチド、ラクトフェリン類の分解物から単離されるペ
プチドと同一のアミノ酸配列を有する合成されたペプチ
ドを有効成分とする抗酸化剤（特開平６−１９９６８７
号公報）、ペプチド誘導体と、その用途（特開平８−１
７６１９０号公報）等が知られている。

【０００９】

【発明が解決しようとする課題】前記のとおり、深在性
真菌症の治療に用いられる抗真菌剤は僅かに６種類のみ
であり、様々な種類の真菌感染に対して有効に対処し、
しかも連用による耐性菌の発生を防ぐためには、新しい
機序に基づく新規な抗真菌剤が待望されていた。この発
明は、以上のとおりの現状に鑑みてなされたものであ
り、抗真菌活性に優れ、安全であり、かつ全く新しい機
序に基づく新規な抗真菌性ペプチド誘導体と、この抗菌
性ペプチド誘導体を有効成分とする新規な抗真菌剤を提
供することを目的としている。

【００１０】

【課題を解決するための手段】この出願の発明者らは、
前記従来技術の発明に開示されているラクトフェリンに
由来するペプチド類およびその誘導体の抗真菌作用につ
いて詳細に検討した結果、ウシラクトフェリンを構成す
るアミノ酸配列のうちの特定の６アミノ酸残基（Ａｒｇ
−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｎ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ）と同一の
アミノ酸配列を有し、Ｃ末端がアミド化された誘導体
が、強い抗真菌作用を有することを見い出した。

【００１１】さらに、この出願の発明者らは、この事実
を基礎としてより強力な抗真菌活性を発現するペプチド
誘導体を追及した結果、その配列の一部に、従来にない
非天然型のアミノ酸残基を組み込むことにより、顕著な
抗真菌活性を示す一連のペプチド誘導体の創製に成功
し、既に特許出願を行った（特願平８−２７２７５６
号。以下先願と記載する。）。

【００１２】そしてさらに、この出願の発明者らは、先
願発明のペプチド誘導体のＮ端部アシル化誘導体に関
し、それらの抗真菌活性を検討した結果、Ｎ端がある特
定の範囲の炭素数からなるアシル基により置換された誘
導体がさらに顕著な抗真菌活性を有することを見い出
し、この発明を完成した。すなわち、この出願は、前記
課題を解決する第１の発明として、次の式（１）

【００１３】

【化１５】

【００１４】［ただし、式中Ｒは炭素数１〜１９、飽和
または２重結合もしくは３重結合を１個以上有する直鎖
のアルキル基を示し、Ｘａａは次の式（２）

【００１５】

【化１６】

【００１６】（ただし、式中Ａは低級アルキレン基、ま
たは酸素原子もしくは硫黄原子を結合する低級アルキレ
ン基を示し、Ｒ１およびＲ２は、各々、水素原子、ハロ
ゲン原子、低級アルキル基、低級アルコキシ基またはニ
トロ基を示す。）で示されるアミノ酸残基を示す。］で
示されるＤ体またはＬ体のアミノ酸配列を有するペプチ
ド誘導体またはそれらの薬理学的に許容される塩類を提
供する。

【００１７】また、この第１の発明においては、次の
ａ）〜ｅ）を望ましい態様としてもいる。ａ）前記第１の発明における式（１）のＸａａが、次の
式（３）

【００１８】

【化１７】

【００１９】（ただし、式中ｎは整数１〜５を示し、Ｒ
１およびＲ２は、各々、水素原子、ハロゲン原子、低級
アルキル基、低級アルコキシ基またはニトロ基を示
す。）で示されるアミノ酸残基であること。ｂ）前記第１の発明における式（１）のＸａａが、次の
式（４）

【００２０】

【化１８】

【００２１】（ただし、式中ｍは整数０〜３を示し、Ｒ
１およびＲ２は、各々、水素原子、ハロゲン原子、低級
アルキル基、低級アルコキシ基またはニトロ基を示
す。）で示されるアミノ酸残基であること。ｃ）前記第１の発明における式（１）のＸａａが、次の
式（５）

【００２２】

【化１９】

【００２３】（ただし、式中ｐは整数０〜２を示し、Ｒ
１およびＲ２は、各々、水素原子、ハロゲン原子、低級
アルキル基、低級アルコキシ基またはニトロ基を示
す。）で示されるアミノ酸残基であること。ｄ）前記第１の発明における式（１）のＸａａが、次の
式（６）

【００２４】

【化２０】

【００２５】（ただし、式中ｍは整数０〜３を示し、Ｒ
１およびＲ２は、各々、水素原子、ハロゲン原子、低級
アルキル基、低級アルコキシ基またはニトロ基を示
す。）で示されるアミノ酸残基であること。ｅ）前記第１の発明における式（１）のＸａａが、次の
式（７）

【００２６】

【化２１】

【００２７】（ただし、式中ｐは整数０〜２を示し、Ｒ
１およびＲ２は、各々、水素原子、ハロゲン原子、低級
アルキル基、低級アルコキシ基またはニトロ基を示
す。）で示されるアミノ酸残基であること。この出願は
また、第２の発明として、次の式（１）

【００２８】

【化２２】

【００２９】［ただし、式中Ｒは炭素数１〜１９、飽和
または２重結合もしくは３重結合を１個以上有する直鎖
のアルキル基を示し、Ｘａａは次の式（２）

【００３０】

【化２３】

【００３１】（ただし、式中Ａは低級アルキレン基、ま
たは酸素原子もしくは硫黄原子を結合する低級アルキレ
ン基を示し、Ｒ１およびＲ２は、各々、水素原子、ハロ
ゲン原子、低級アルキル基、低級アルコキシ基またはニ
トロ基を示す。）で示されるアミノ酸残基を示す。］で
示されるＤ体またはＬ体のアミノ酸配列を有するペプチ
ド誘導体およびそれらの薬理学的に許容される塩類から
なる群より選択される化合物の１種または２種以上の混
合物を有効成分として含有する抗真菌剤を提供する。

【００３２】そして、この第２発明においては、次の
ｆ）〜ｊ）を望ましい態様としてもいる。ｆ）前記第２の発明における式（１）のＸａａが、次の
式（３）

【００３３】

【化２４】

【００３４】（ただし、式中ｎは整数１〜５を示し、Ｒ
１およびＲ２は、各々、水素原子、ハロゲン原子、低級
アルキル基、低級アルコキシ基またはニトロ基を示
す。）で示されるアミノ酸残基であること。ｇ）前記第２の発明における式（１）のＸａａが、次の
式（４）

【００３５】

【化２５】

【００３６】（ただし、式中ｍは整数０〜３を示し、Ｒ
１およびＲ２は、各々、水素原子、ハロゲン原子、低級
アルキル基、低級アルコキシ基またはニトロ基を示
す。）で示されるアミノ酸残基であること。ｈ）前記第２の発明における式（１）のＸａａが、次の
式（５）

【００３７】

【化２６】

【００３８】（ただし、式中ｐは整数０〜２を示し、Ｒ
１およびＲ２は、各々、水素原子、ハロゲン原子、低級
アルキル基、低級アルコキシ基またはニトロ基を示
す。）で示されること。ｉ）前記第２の発明における式（１）のＸａａが、次の
式（６）

【００３９】

【化２７】

【００４０】（ただし、式中ｍは整数０〜３を示し、Ｒ
１およびＲ２は、各々、水素原子、ハロゲン原子、低級
アルキル基、低級アルコキシ基またはニトロ基を示
す。）で示されるアミノ酸残基であること。ｊ）前記第２の発明における式（１）のＸａａが、次の
式（７）

【００４１】

【化２８】

【００４２】（ただし、式中ｐは整数０〜２を示し、Ｒ
１およびＲ２は、各々、水素原子、ハロゲン原子、低級
アルキル基、低級アルコキシ基またはニトロ基を示
す。）で示されるアミノ酸残基であること。

【００４３】

【発明の実施の形態】この出願の第１の発明に係るペプ
チド誘導体は、固相法、液相法等の公知の方法により合
成することができる。固相法による場合は、ペプチド合
成用固相樹脂を用いて、各アミノ酸ブロックを順次縮合
させ、ペプチド鎖を延長する。各アミノ酸ブロックはＮ
末端および側鎖の反応性基を適当な保護基で保護したア
ミノ酸誘導体を用い、Ｃ端側から縮合反応、Ｎ末端脱保
護基反応を反復して目的のペプチド鎖を構築する。

【００４４】Ｎ末端を所望のアシル基でアシル化する方
法としては、前記のペプチド鎖構築工程において、最後のアミノ酸
ブロックとして、予めＮ末端がアシル基でアシル化され
た誘導体を用いる方法；一旦、ペプチド鎖を構築した後、Ｎ末端の脱保護を行
い、次いで対応するカルボン酸との縮合反応を行うか、
または酸クロライド、酸無水物等のアシル化剤を反応さ
せる方法；等を例示することができる。

【００４５】次いで、Ｎ末端および側鎖の反応性基が保
護されたままのペプチドを樹脂から切断して取出し、Ｃ
末端のアミド化を行い、さらに脱保護反応を行うことに
より、目的とするペプチド誘導体を得ることができる。
この発明のペプチド誘導体は、全てＣ末端がアミド化さ
れた誘導体であるので、通常の固相樹脂の代わりに、Ｃ
末端アミドペプチド合成用固相樹脂を用いることもでき
る。この場合は、工程を簡略化できる上に、保護基の選
び方によっては脱樹脂、脱保護を同時に行うこともでき
るので便利である。

【００４６】以上の操作を機械化または自動化した、い
わゆるペプチド自動合成装置を利用することもできる。
液相法による場合も、通常の公知のペプチド合成法によ
り、基本的にはＮ末端、またはＣ末端および側鎖の反応
性基を適当な保護基で保護したアミノ酸誘導体を各アミ
ノ酸ブロックとし、これを用いて縮合反応、Ｎ末端また
はＣ末端の脱保護基反応を反復しながら、目的のペプチ
ド鎖を構築することができる。Ｎ末端を所望のアシル基
でアシル化する方法については、上記の固相法による場
合で述べたのと同様である。

【００４７】液相法においては、Ｃ末端側またはＮ末端
側から順次ペプチド鎖の延長を行う逐次鎖長延長法、さ
らに目的のペプチド鎖を適当なフラグメントに分けて、
各々のフラグメント鎖を合成し、各々を縮合させて最終
的なペプチド鎖を構築する、いわゆるフラグメント縮合
法を適用することもできる。この発明のペプチド誘導体
は、非天然型のアミノ酸残基を含むことを特徴としてい
るが、このアミノ酸残基部分に相当するアミノ酸、また
はその保護化された誘導体は、いずれも先願に記載した
のと同様の方法により合成することができる。

【００４８】この発明のペプチド誘導体は、液体クロマ
トグラフィー、カラムクロマトグラフィー、再結晶等の
公知の方法によって精製することができる。また、この
発明のペプチド誘導体の製造に使用する合成中間体、合
成原料等も同様の方法により精製することができる。な
お、以下の実施例等の説明においては、アミノ酸配列
で、ホモシステインおよびホモセリンを、それぞれＨｃ
ｙおよびＨｓｅと記載する。また、この発明のペプチド
誘導体を構成する各アミノ酸残基は、Ｌ体のみならずＤ
体を含むものである。すなわち、この発明のペプチド誘
導体の抗真菌作用は、この発明化合物を構成するアミノ
酸残基がＬ体であるか、またはＤ体であるかには影響さ
れない。

【００４９】なお、後記の実施例では、ペプチド誘導体
は、ペプチド合成機を用いて、９−フルオレニルメトキ
シカルボニル基（以下、Ｆｍｏｃと記載する。）を結合
したアミノ酸を合成原料として合成しているが、個々の
Ｆｍｏｃアミノ酸は合成目的に応じて、Ｌ体、Ｄ体また
はＤＬ体のものを用いているので、これらの区別を明示
する必要がある場合にはＬ、ＤまたはＤＬの記号をアミ
ノ酸を示す記号の前に記載している。

【００５０】また、不斉中心が１つあるアミノ酸残基を
もう１個結合している化合物に対してアミノ酸残基のＤ
Ｌとしての表示を使用するのは本来適切ではないが、原
料として用いた個々のＦｍｏｃアミノ酸に対応して得ら
れる実施例のペプチド誘導体について、これを特定表示
する手段として、例えば、次式に示すとおり表示する。

【００５１】

【化２９】

【００５２】（ただし、式中Ｒは炭素数１〜１９、飽和
または２重結合若しくは３重結合を１個以上有する直鎖
のアルキル基を示す。）この例の場合は、Ｘａａ部分についてはＤＬ体のＦｍｏ
ｃアミノ酸を、他の５つのアミノ酸残基相当部分につい
てはＤ体のＦｍｏｃアミノ酸を用いて合成されたペプチ
ド誘導体であることを示し、次式に示す２つのこの発明
のペプチド誘導体の等量混合物である。

【００５３】

【化３０】

【００５４】（ただし、式中Ｒは炭素数１〜１９、飽和
または２重結合若しくは３重結合を１個以上有する直鎖
のアルキル基を示す。）この発明のペプチド誘導体は、非天然型のアミノ酸残基
を含有することを特徴としているが、これらのアミノ酸
残基は形式的にはアラニン、システイン、ホモシステイ
ン、ホモセリン、セリン残基等の側鎖末端原子上の水素
原子がフェニル基、ベンジル基、またはフェネチル基等
（いずれもベンゼン環上に置換基を有している場合があ
る。）で置換されたものと考えることができるので、例
えば、次式に各々例示するとおり略記法を用いて表示す
る。

【００５５】

【化３１】

【００５６】（ただし、式中Ｒ１およびＲ２は、各々、
水素原子、ハロゲン原子、低級アルキル基、低級アルコ
キシ基またはニトロ基を示す。）また、これらの具体的な構造式を示せば各々次のとおり
である。

【００５７】

【化３２】

【００５８】（ただし、式中Ｒ１およびＲ２は、各々、
水素原子、ハロゲン原子、低級アルキル基、低級アルコ
キシ基またはニトロ基を示す。）なお、上記のアミノ酸残基の中で、左端の構造式のもの
であって、置換基Ｒ１およびＲ２がともに水素原子であ
るものは、天然に産するアミノ酸の１つであるフェニル
アラニン残基であり、通常Ｐｈｅで表示されるが、便宜
上次のように表示する。

【００５９】

【化３３】

【００６０】次に、この発明のペプチド誘導体の薬理学
的に許容される塩類について説明する。塩類は無毒性の
塩、例えば、酸付加塩、金属錯体等である。金錯体属と
しては、例えば亜鉛、鉄、カルシウム、マグネシウムま
たはアルミニウム等の錯体である。酸付加塩としては、
塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、リン酸塩、タンニン酸
塩、シュウ酸塩、フマール酸塩、グルコン酸塩、アルギ
ン酸塩、マレイン酸塩、酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、
クエン酸塩、安息香酸塩、コハク酸塩、リンゴ酸塩、ア
スコルビン酸塩、酒石酸塩等を例示することができる。
さらに、カルボン酸塩、例えばアルカリ金属とのナトリ
ウム塩、カリウム塩等、アルカリ土類金属とのカルシウ
ム塩、マグネシウム塩等、アンモニウム塩であってもよ
い。

【００６１】次にこの発明の第２の発明に係る抗真菌剤
ついて詳しく説明する。この発明の抗真菌剤は、前記の
ペプチド誘導体およびそれらの薬理学的に許容される塩
類からなる群より選択された任意の１種の化合物または
２種以上の混合物を有効成分として含有している。ま
た、この発明の抗真菌剤は、前記の有効成分の他に、公
知の抗真菌剤を含有していてもよい。

【００６２】この発明の抗真菌剤は、常法により例え
ば、軟膏、ゲル、ペースト、クリーム、噴霧剤、懸濁
剤、乳剤、シロップ剤、錠剤、糖剤、カプセル剤、粒
剤、粉剤等として加工することもできる。この発明のペ
プチド誘導体を有効成分とする抗真菌剤の投与量は、治
療対象、症状、年齢等により異なるが、好適には通常１
回につき、約０．１〜５０ｍｇを１日１〜３回程度投与
する。表在性真菌症を対象とする場合には、０．０１〜
５％（重量。以下、特に断りのない限り同じ。）含有軟
膏として１日１〜３回程度局所に塗布することもでき
る。

【００６３】なお、この出願の明細書においては、抗菌
活性（抗菌剤）と、抗真菌活性（抗真菌剤）の意味を区
別して用いている。次に、試験例を示し、この発明の抗
真菌性ペプチド誘導体の作用効果についてさらに詳しく
説明する。試験例１この試験は、この発明のペプチド誘導体の真菌に対する
感受性を調べるために行った。（１）試験菌株試験菌株として次の４菌株を使用した。

【００６４】 Candida albicans ATCC 90028 Candida tropicalis ATCC 750 Candida parapsilosis ATCC 90018 Candida glabrata ATCC 90030 なお、これらの菌株は、いずれもアメリカン・タイプ・
カルチャー・コレクション（ＡＴＣＣ）から容易に入手
することができる。（２）試験方法１）培地の調製バクト・ペプトン（ディフコ社製）２ｇおよびＤ−グル
コース（和光純薬工業社製）４ｇを注射用蒸留水（大塚
製薬社製。以下、蒸留水と記載する。）に溶解して全量
を２００ｍｌに調整し、１２１℃で１５分間オートクレ
ーブにより滅菌し、使用するまで４℃に保存した。２）被検物質の調製実施例１、実施例３、実施例５、実施例６、実施例１
１、実施例１２および実施例１７と同一の方法により製
造したこの発明のペプチド誘導体、比較例１、比較例２
および比較例３と同一の方法により製造した化合物は、
全て蒸留水に溶解し、１ｍｇ／ｍｌ濃度の溶液を調製
し、これを基準液とした。この基準液は、使用するまで
−２０℃以下で凍結して保存した。３）陽性対照薬の調製陽性対照薬として用いたアンホテリシンＢ（シグマ社
製）、ミコナゾール（シグマ社製）およびフルコナゾー
ル（ファイザー社製。ジフルカンカプセルの内容物をエ
タノール抽出し、その減圧濃縮残渣を酢酸エチル−ヘキ
サンから再結晶して得た。）は、ジメチルスルホキシド
（シグマ社製；細胞培養用）に溶解し、１０ｍｇ／ｍｌ
濃度の溶液を調製し、これを保存液とした。この保存液
は、使用するまで−２０℃以下で凍結して保存し、使用
時に蒸留水で１０倍希釈（１ｍｇ／ｍｌ）し、これを基
準液とした。４）接種菌液の調製培養液中の菌数の算定スラントからの一かきを前記培地（２ｍｌ）に接種し、
３５℃で１９時間培養し、分光光度計を用いて波長６６
０ｎｍのＯＤ値を測定した。一方、培地の一部（５０μ
ｌ）を新しい前記培地（５ｍｌ）に植え継ぎ、３５℃で
６時間培養し、菌液のＯＤ値と生菌数の測定を行った。
生菌数の測定は、菌液を１０³、１０⁴、１０⁵および
１０⁶倍希釈し、各々の０．１ｍｌをＳＤＡ寒天培地に
塗抹して培養し、翌日出現したコロニー数を測定し、Ｏ
Ｄ値／菌数濃度の検量線を求め、菌液１ｍｌ当たりの菌
数を算定した。接種菌液の調製スラントからの一かきを前記培地（２ｍｌ）に接種し、
３５℃にて１９時間培養し、その一部を無菌的に採取
し、分光光度計で波長６６０ｎｍのＯＤ値を測定した
（ＯＤ値が約１．０で、菌数は約１×１０⁷個／ｍｌで
あった。）。この菌液の１／１００量の菌液を、新しい
前記培地（１０〜１５ｍｌ）に接種し、３５℃にて６時
間培養し、波長６６０ｎｍのＯＤ値を測定した結果、
０．１〜０．２で、菌数が約１×１０⁶個／ｍｌと算定
された。この培養物を前記培地を用いて初め５０倍希
釈、次いで１０倍希釈して接種菌液（２×１０³個／ｍ
ｌ）を調製した。調製後１５分以内に使用できない場合
は、４℃で保存し、２時間以内には使用した。５）薬剤希釈液の調製培地を、９６穴平底マイクロプレートにマルチピペッ
トを用いて、１列目には１６０μｌを、２列目から１０
列目までは１００μｌずつ分注した。１１列目の上４段
（発育対照）には１００μｌずつ、また下４段（陰性対
照）には２００μｌずつ分注した。前記２）および３）で調製した被検物質および対照薬
物の希釈液（濃度：１ｍｇ／ｍｌ）４０μｌを１列目に
添加して混合し、そのうち１００μｌを２列目に添加し
た。この操作を順次１０列目まで行って２倍系列希釈し
た。なお、最後の１０列目は１００μｌを分取して廃棄
した。６）菌接種と培養前記４）において調製した接種菌液を１列目から１０列
目および１１列目上４段の全穴に１００μｌずつ分注
し、３５℃で２日間培養した。７）判定終末点は、マイクロプレートビュアーで肉眼的に発育が
完全阻止されている濃度を最小生育阻止濃度（以下、Ｍ
ＩＣ値と記載する。）とした。（３）試験結果この試験の結果は表１に示すとおりである。表中各実施
例と同一の方法により製造された試料は、この発明のペ
プチド誘導体である。

【００６５】表中比較例１と同一の方法により製造され
た試料は、ウシラクトフェリンを構成するアミノ酸配列
のうちの特定の６つのアミノ酸残基からなる配列を有
し、Ｃ末端がアミド化された誘導体であり、６つのアミ
ノ酸残基はすべてＬ体のものからなっており、次式

【００６６】

【化３４】

【００６７】に示され、かつ抗菌作用または抗真菌作用
を有するペプチド誘導体として公知の化合物である。表
中比較例２の化合物は、前記比較例１の鏡像体であり、
６つのアミノ酸残基がすべてＤ体のものからなってお
り、次式

【００６８】

【化３５】

【００６９】に示される化合物である。この発明のペプ
チド誘導体は、先願のペプチド誘導体のＮ端部アシル化
誘導体であるが、比較例３の化合物は、先願のペプチド
誘導体のうちの代表的な化合物の一つであり、次式

【００７０】

【化３６】

【００７１】に示される化合物である。

【００７２】

【表１】

【００７３】公知化合物である比較例１の化合物および
その鏡像体である比較例２の化合物の抗真菌活性は、Ｌ
体およびＤ体間での差は認められず、いずれの真菌に対
しても同一のＭＩＣ値を示し、Candida albicans ATCC
90028 に対しては１２．５μｇ／ｍｌ、Candida trop
icalis ATCC 750 に対しては３．１３μｇ／ｍｌ、Ca
ndida parapsilosis ATCC 90018 およびCandida glab
r ata ATCC 90030に対してはいずれも５０μｇ／ｍｌ
であった。

【００７４】先願のペプチド誘導体のうちの代表的な化
合物の一つである比較例３の化合物は、Candida albica
ns ATCC 90028 に対しては６．２５μｇ／ｍｌ、Cand
idatropicalis ATCC 750 に対しては１．５６μｇ／
ｍｌ、Candida parapsilosisATCC 90018 に対しては
６．２５μｇ／ｍｌ、Candida glabrata ATCC 90030
に対しては１２．５μｇ／ｍｌであった。

【００７５】これに対して、この発明のペプチド誘導体
は、Candida albicans ATCC 90028 に対しては１２．
５〜２５μｇ／ｍｌ、Candida tropicalis ATCC 750
に対しては３．１３〜６．２５μｇ／ｍｌ、Candida pa
rapsilosis ATCC 90018 に対しては１２．５μｇ／ｍ
ｌ、Candida glabrata ATCC 90030 に対しては６．２
５〜１２．５μｇ／ｍｌであった。

【００７６】この結果から明らかなとおり、この発明の
ペプチド誘導体はいずれも、先願のペプチド誘導体に比
較して、その抗真菌活性は若干劣るが、公知化合物であ
る比較例１の化合物およびその鏡像体である比較例２の
化合物に比較して、同等ないし４倍の抗真菌活性を示
し、特に、Candida parapsilosis ATCC 90018およびCa
ndida glabrata ATCC 90030に対する抗真菌活性におけ
る優位性が認められた。

【００７７】なお、他のペプチド誘導体についても同様
の試験を実施したが、ほぼ同等の結果が得られた。試験例２この試験は、この発明のペプチド誘導体の急性毒性を調
べる目的で行った。（１）試験動物４週齢のｄｄＹ系雄性マウス（日本ＳＬＣより購入）を
１週間以上馴化し、のち４群（１群５匹）に分けて使用
した。（２）試験方法実施例１と同一の方法により製造したこの発明のペプチ
ド誘導体を体重１ｋｇ当り１００ｍｇまたは５００ｍｇ
の割合で、注射用水（大塚製薬社製）に溶解し、単回強
制経口投与し、急性毒性を試験した。（３）試験結果１００ｍｇ／ｋｇ体重、および５００ｍｇ／ｋｇ体重の
割合で投与した群に、死亡例は認められなかった。従っ
て、この発明のペプチド誘導体のＬＤ₅₀値は５００ｍｇ
／ｋｇ体重以上であり、毒性は極めて低いことが判明し
た。なお、この発明の他のペプチド誘導体についても同
様の試験を行ったが、ほぼ同様の結果が得られた。

【００７８】次に、実施例を示してこの発明をさらに詳
細かつ具体的に説明するが、この発明は以下の実施例に
限定されるものではない。また、実施例中で使用する試
薬類について、以下の略号を用いる。ＮＭＰ：Ｎ−メチルピロリドン（ＰＥ社製）ＨＢＴＵ：２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イ
ル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキ
サフルオロホスフェート（島津製作所製）ＨＯＢｔ：１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（島津製
作所製）ＤＩＥＡ：ジイソプロピルエチルアミン（渡辺化学工業
社製）ＴＰＡ：ｔｅｒｔ−ペンチルアルコール（関東化学社
製）ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸（渡辺化学工業社製）なお、酢酸は関東化学社製のものを、無水ジエチルエー
テルは国産化学社製のものを、エタンジチオール、メタ
クレゾール、チオアニソールおよびトリメチルシリルブ
ロミドはいずれも渡辺化学工業社製のものを用いた。実施例１参考例１と同一の方法により製造した保護ペプチド樹脂
０．１ｍｍｏｌ相当量をＮＭＰで膨潤させ、ウンデカン
酸（東京化成工業社製。n-Undecanoic Acid)１８６ｍｇ
（１．０ｍｍｏｌ），ＨＢＴＵ３７９ｍｇ（１．０ｍｍ
ｏｌ），ＨＯＢｔ１５３ｍｇ（１．０ｍｍｏｌ）および
ＤＩＥＡ１７３μｌ（１．０ｍｍｏｌ相当）のＮＭＰ５
ｍｌ溶液を添加し、室温で２時間撹拌した。カイザーテ
ストにより反応が完結していることを確認した後、ＮＭ
Ｐ、ＴＰＡ、酢酸、ＴＰＡ、ＮＭＰ、および無水ジエチ
ルエーテルの順序で洗浄し、真空乾燥し、Ｎ端部ウンデ
カノイル化保護ペプチド樹脂を得た。

【００７９】前記のウンデカノイル化保護ペプチド樹脂
の全量（０．１ｍｍｏｌ）にエタンジチオール１．２ｍ
ｌ、メタクレゾール０．４ｍｌおよびチオアニソール
２．４ｍｌを添加して、アルゴン気流下室温で１５分
間、次いで氷冷下で１０分間撹拌した。これにＴＦＡ１
５ｍｌを添加して１０分間撹拌し、さらにトリメチルシ
リルブロミド２．７ｍｌを添加して５０分間撹拌した。
グラスフィルターで樹脂を濾別し、濾液を直ちに減圧濃
縮した。残渣に予め冷却した無水ジエチルエーテルを添
加し、ペプチドを白色粉末化した。次いで遠沈管に移
し、遠心分離（２５００ｒｐｍ、１０分間）し、上清を
廃棄し、冷ジエチルエーテルを新たに添加し、充分撹拌
して再び遠心分離する操作を４回反復した。のち、ペプ
チド沈殿物を真空乾燥し、水に溶解して凍結乾燥し、目
的とするＮ端部ウンデカノイル化ペプチド誘導体の粗体
約２６ｍｇを得た。

【００８０】前記粗ペプチド誘導体の全量を水に溶解
し、遠心分離（１５０００ｒｐｍ、５分間）し、上清を
０. ４５μｍフィルターで濾過し、次の条件により高速
液体クロマトグラフィーで精製した。カラムは、逆相系
のLichrospher 100 RP-18(e)２５０×１０ｍｍ（メルク
社製）を用いた。溶離液は０. １％ＴＦＡ／水をＡ液、
８０％アセトニトリル／Ａ液をＢ液として、Ａ液からＢ
液への濃度直線勾配により溶出した。クロマトグラムの
ピークは、アミノ酸ブロックとして一箇所のみＤＬ体を
用いたことに由来する２つの立体異性体の混合物である
ことを反映して、２つのピークから成っていたが、この
２つを分離することは困難であったので、合わせて分取
し、再度凍結乾燥し、次式

【００８１】

【化３７】

【００８２】に示される白色粉末のこの発明のペプチド
誘導体約２１．５ｍｇ（収率約１７％）を得た。実施例２ウンデカン酸の代わりに、ブタン酸（東京化成工業社
製。n-Butyric Acid）８８ｍｇ（１．０ｍｍｏｌ）を用
いたことを除き、実施例１と同一の方法により、次式

【００８３】

【化３８】

【００８４】に示される白色粉末のこの発明のペプチド
誘導体約２０．６ｍｇ（収率約１８％）を得た。実施例３ウンデカン酸の代わりに、ヘキサン酸（東京化成工業社
製。n-Caproic Acid）１１６ｍｇ（１．０ｍｍｏｌ）を
用いたことを除き、実施例１と同一の方法により、次式

【００８５】

【化３９】

【００８６】に示される白色粉末のこの発明のペプチド
誘導体約２２．９ｍｇ（収率約２０％）を得た。実施例４ウンデカン酸の代わりに、オクタン酸（東京化成工業社
製。n-Caprylic Acid）１４４ｍｇ（１．０ｍｍｏｌ）
を用いたことを除き、実施例１と同一の方法により、次
式

【００８７】

【化４０】

【００８８】に示される白色粉末のこの発明のペプチド
誘導体約２４．０ｍｇ（収率約２０％）を得た。実施例５ウンデカン酸の代わりに、デカン酸（東京化成工業社
製。n-Capric Acid ）１７２ｍｇ（１．０ｍｍｏｌ）を
用いたことを除き、実施例１と同一の方法により、次式

【００８９】

【化４１】

【００９０】に示される白色粉末のこの発明のペプチド
誘導体約３４．７ｍｇ（収率約２８％）を得た。実施例６ウンデカン酸の代わりに、ドデカン酸（東京化成工業社
製。Lauric Acid ）２００ｍｇ（１．０ｍｍｏｌ）を用
いたことを除き、実施例１と同一の方法により、次式

【００９１】

【化４２】

【００９２】に示される白色粉末のこの発明のペプチド
誘導体約２２．８ｍｇ（収率約１８％）を得た。実施例７ウンデカン酸の代わりに、テトラデカン酸（東京化成工
業社製。Myristic Acid ）２２８ｍｇ（１．０ｍｍｏ
ｌ）を用いたことを除き、実施例１と同一の方法によ
り、次式

【００９３】

【化４３】

【００９４】に示される白色粉末のこの発明のペプチド
誘導体約３０．８ｍｇ（収率約２４％）を得た。実施例８ウンデカン酸の代わりに、ヘキサデカン酸（東京化成工
業社製。Palmitic Acid ）２５６ｍｇ（１．０ｍｍｏ
ｌ）を用いたことを除き、実施例１と同一の方法によ
り、次式

【００９５】

【化４４】

【００９６】に示される白色粉末のこの発明のペプチド
誘導体約２７．０ｍｇ（収率約２１％）を得た。実施例９ウンデカン酸の代わりに、オクタデカン酸（東京化成工
業社製。Stearic Acid）２８４ｍｇ（１．０ｍｍｏｌ）
を用いたことを除き、実施例１と同一の方法により、次
式

【００９７】

【化４５】

【００９８】に示される白色粉末のこの発明のペプチド
誘導体約２６．８ｍｇ（収率約２０％）を得た。実施例１０ウンデカン酸の代わりに、エイコサン酸（東京化成工業
社製。Arachidic Acid）３１３ｍｇ（１．０ｍｍｏｌ）
を用いたことを除き、実施例１と同一の方法により、次
式

【００９９】

【化４６】

【０１００】に示される白色粉末のこの発明のペプチド
誘導体約３３．４ｍｇ（収率約２５％）を得た。実施例１１ウンデカン酸の代わりに、１０−ウンデセン酸（東京化
成工業製。10-Undecenoic Acid）１８４ｍｇ（１．０ｍ
ｍｏｌ）を用いたことを除き、実施例１と同一の方法に
より、次式

【０１０１】

【化４７】

【０１０２】に示される白色粉末のこの発明のペプチド
誘導体約２７．０ｍｇ（収率約２２％）を得た。実施例１２ウンデカン酸の代わりに、１０−ウンデシン酸（東京化
成工業製。10-Undecynoic Acid）１８２ｍｇ（１．０ｍ
ｍｏｌ）を用いたことを除き、実施例１と同一の方法に
より、次式

【０１０３】

【化４８】

【０１０４】に示される白色粉末のこの発明のペプチド
誘導体約３８．３ｍｇ（収率約３１％）を得た。実施例１３参考例１記載の保護ペプチド樹脂の代わりに、参考例２
記載の保護ペプチド樹脂０．１ｍｍｏｌ相当量を用いた
ことを除き、実施例１と同一の方法により、次式

【０１０５】

【化４９】

【０１０６】に示される白色粉末のこの発明のペプチド
誘導体約２０．６ｍｇ（収率約１６％）を得た。実施例１４参考例１記載の保護ペプチド樹脂の代わりに、参考例３
記載の保護ペプチド樹脂０．１ｍｍｏｌ相当量を用いた
ことを除き、実施例１と同一の方法により、次式

【０１０７】

【化５０】

【０１０８】に示される白色粉末のこの発明のペプチド
誘導体約２３．２ｍｇ（収率約１９％）を得た。実施例１５参考例１記載の保護ペプチド樹脂の代わりに、参考例４
記載の保護ペプチド樹脂０．１ｍｍｏｌ相当量を用いた
ことを除き、実施例１と同一の方法により、次式

【０１０９】

【化５１】

【０１１０】に示される白色粉末のこの発明のペプチド
誘導体約３４．６ｍｇ（収率約２８％）を得た。実施例１６参考例１記載の保護ペプチド樹脂の代わりに、参考例５
記載の保護ペプチド樹脂０．１ｍｍｏｌ相当量を用いた
ことを除き、実施例１と同一の方法により、次式

【０１１１】

【化５２】

【０１１２】に示される白色粉末のこの発明のペプチド
誘導体約１８．９ｍｇ（収率約１５％）を得た。実施例１７参考例１記載の保護ペプチド樹脂の代わりに、参考例６
記載の保護ペプチド樹脂０．１ｍｍｏｌ相当量を用いた
ことを除き、実施例１と同一の方法により、次式

【０１１３】

【化５３】

【０１１４】に示される白色粉末のこの発明のペプチド
誘導体約３１．４ｍｇ（収率約２５％）を得た。実施例１８参考例１記載の保護ペプチド樹脂の代わりに、参考例７
記載の保護ペプチド樹脂０．１ｍｍｏｌ相当量を用いた
ことを除き、実施例１と同一の方法により、次式

【０１１５】

【化５４】

【０１１６】に示される白色粉末のこの発明のペプチド
誘導体約３０．４ｍｇ（収率約２４％）を得た。実施例１９参考例１記載の保護ペプチド樹脂の代わりに、参考例８
記載の保護ペプチド樹脂０．１ｍｍｏｌ相当量を用いた
ことを除き、実施例１と同一の方法により、次式

【０１１７】

【化５５】

【０１１８】に示される白色粉末のこの発明のペプチド
誘導体約２７．９ｍｇ（収率約２２％）を得た。実施例２０参考例１記載の保護ペプチド樹脂の代わりに、参考例９
記載の保護ペプチド樹脂０．１ｍｍｏｌ相当量を用いた
ことを除き、実施例１と同一の方法により、次式

【０１１９】

【化５６】

【０１２０】に示される白色粉末のこの発明のペプチド
誘導体約３１．４ｍｇ（収率約２６％）を得た。実施例２１実施例１と同一の方法により得たペプチド誘導体約１０
ｍｇを、０．０２ｍｏｌ／ｌの塩酸５ｍｌに溶解し、さ
らに水で２０ｍｌに希釈し、そのまま凍結乾燥し、この
発明のペプチド誘導体の白色粉末状塩酸塩を約１０ｍｇ
得た。実施例２２常法により、次の組成の錠剤を製造した。

【０１２１】乳糖（和光純薬工業社製）７８．２（％）実施例１と同一の方法により得たペプチド誘導体１．２ステアリン酸マグネシウム（和光純薬工業社製）２０．０実施例２３常法により、次の組成の注射剤を製造した。実施例３と
同一の方法により製造したペプチド誘導体を生理食塩水
（大塚製薬社製）に６．０ｍｇ／ｍｌの割合で溶解し、
滅菌濾過フィルターにより濾過し、注射剤を製造した。実施例２４常法により、次の組成の軟膏を製造した。なお、ペプチ
ド誘導体を除き、全て市販品を使用した。

【０１２２】ワセリン２６．３（％）パラフィン５．３セトステアリルアルコール２．１プロピレングリコール１０．５ポリオキシエチレン・ポリオキシプロピレングリコールエーテル３．２実施例１と同一の方法により得たペプチド誘導体０．５精製水５２．１実施例２５常法により、次の組成の皮膚外用剤を製造した。なお、
ペプチド誘導体を除き、全て市販品を使用した。

【０１２３】パラオキシ安息香酸エチル０．１（％）パラオキシ安息香酸ブチル０．１ラウロマクロゴール０．５セタノール２０．０白色ワセリン４０．０精製水３４．３実施例２と同一の方法により得たペプチド誘導体５．０次に、本発明のペプチド誘導体と比較するための化合物
の製造例を、比較例として示す。使用した試薬類の略号
等は、実施例の記載と同一である。比較例１ Fmoc-DL-Cys(4Cl-Ph)-OHの代わりに、Fmoc-L-Gln(Trt)-
OH（渡辺化学工業社製）５９７ｍｇ（１．０ｍｍｏｌ）
を用いたことを除き、後記の参考例１と同一の方法によ
り、対応するアミノ酸配列を有する保護ペプチド樹脂８
４４ｍｇ（収率１００％）を得た。

【０１２４】前記の保護ペプチド樹脂３３８ｍｇ（０．
１ｍｍｏｌ）にエタンジチオール１．２ｍｌ、メタクレ
ゾール０．４ｍｌ及びチオアニソール２．４ｍｌを添加
して、室温でアルゴン気流下１５分間、次いで氷冷下で
１０分間撹拌した。これにＴＦＡ１５ｍｌを添加して１
０分間撹拌し、更にトリメチルシリルブロミド２．７ｍ
ｌを添加して５０分間撹拌した。グラスフィルターで樹
脂を濾別し、濾液を直ちに減圧濃縮した。残渣に予め冷
却した無水ジエチルエーテルを添加し、ペプチドを白色
粉末化した。

【０１２５】次いで遠沈管に移し、遠心分離（２５００
ｒｐｍ、１０分間）し、上清を廃棄し、冷ジエチルエー
テルを新たに添加し、充分撹拌して再び遠心分離する操
作を４回反復した。のち、ペプチド沈殿物を真空乾燥
し、水に溶解して凍結乾燥し、目的とするペプチド誘導
体の粗体約４３ｍｇを得た。前記粗ペプチド誘導体の全
量を水に溶解し、遠心分離（１５０００ｒｐｍ、５分
間）し、上清を０. ４５μｍフィルターで濾過し、次の
条件により高速液体クロマトグラフィーにより精製し
た。カラムは、逆相系のLichrospher 100 RP-18(e) ２
５０×１０ｍｍ（メルク社製）を用いた。溶離液は０.
１％ＴＦＡ／水をＡ液、８０％アセトニトリル／Ａ液を
Ｂ液として、Ａ液からＢ液への濃度直線勾配により溶出
した。精製画分を再度凍結乾燥し、次の化５７

【０１２６】

【化５７】

【０１２７】に示される白色粉末状の化合物約２４．５
ｍｇ（収率約２５％）を得た。比較例２ Fmoc-DL-Cys(4Cl-Ph)-OHの代わりに、Fmoc-D-Gln(Trt)-
OH（渡辺化学工業社製）５９７ｍｇ（１．０ｍｍｏｌ）
を用いたこと及びその他のアミノ酸ブロックを全てＤ体
のものの代わりに、Ｌ体のもの（全てＰＥ社製）を用い
たことを除き、後述の比較例１と同一の方法により、次
の化５８

【０１２８】

【化５８】

【０１２９】に示される白色粉末状の化合物約２６．６
ｍｇ（収率約２７％）を得た。比較例３後記参考例１と同一の方法により得た保護ペプチド樹脂
３２２ｍｇ（１．０ｍｍｏｌ）を用いたことを除き、比
較例１と同一の方法により、次の化５９

【０１３０】

【化５９】

【０１３１】に示される白色粉末状の化合物約１２．５
ｍｇ（収率約１２％）を得た。ただし、高速液体クロマ
トグラムのピークは、アミノ酸ブロックとして一箇所の
みDL体を用いたことに由来する２つの立体異性体の混合
物であることを反映して、二つのピークから成っていた
が、この二つを分離することは困難であったので、合わ
せて分取した。

【０１３２】次に、本発明のペプチド誘導体を製造する
ための中間体の製造例を参考例として記載する。参考例１ペプチド合成装置（パーキン・エルマー社アプライド・
バイオシステムズ事業部製４３３Ａ型。以下、ＰＥ社製
と略記する）を使用し、同装置の使用説明書及びシェパ
ード等による固相ペプチド合成法［ジャーナル・オブ・
ケミカル・ソサイエティー・パーキンＩ（Journal of C
hemical Society Perkin Ｉ）、第５３８ページ、１９
８１年］に基づいて次のようにして合成した。

【０１３３】即ち、まず、Ｃ末端アミドペプチド合成用
固相樹脂であるＦｍｏｃアミドレジン（ＰＥ社製）３９
７ｍｇ（０．２５ｍｍｏｌ）を用いて、前記ペプチド合
成装置の合成プログラムにより脱保護基反応及び縮合反
応を反復してペプチド鎖を延長した。つまり、最初に２
０％（体積）ピペリジン含有ＮＭＰ（ＰＥ社製）によ
り、前記固相樹脂のアミノ基の保護基であるＦｍｏｃを
切断除去し、ＮＭＰで洗浄した。次いで、Ｆｍｏｃアミ
ノ酸［Fmoc-D-Arg(Pmc)-OH（渡辺化学工業社製）６６３
ｍｇ（１．０ｍｍｏｌ）］をFastMoc （登録商標）リー
ジェントキット（ＰＥ社製）を用いて縮合させ、ＮＭＰ
で洗浄した。以下、前記Ｆｍｏｃ基の切断からＦｍｏｃ
アミノ酸の縮合洗浄までの操作を反復した。

【０１３４】ただし、次工程以降、Ｆｍｏｃアミノ酸は
工程順に、Fmoc-D-Trp(Boc)-OH（渡辺化学工業社製）５
２７ｍｇ（１．０ｍｍｏｌ）、Fmoc-DL-Cys(4Cl-Ph)-OH
（先願に記載してあるのと同一の方法により合成）４５
４ｍｇ（１．０ｍｍｏｌ）、Fmoc-D-Trp(Boc)-OH５２７
ｍｇ（１．０ｍｍｏｌ）、Fmoc-D-Arg(Pmc)-OH６６３ｍ
ｇ（１．０ｍｍｏｌ）及びFmoc-D-Arg(Pmc)-OH６６３ｍ
ｇ（１．０ｍｍｏｌ）を用いた。

【０１３５】いずれのＦｍｏｃアミノ酸も専用カートリ
ッジに詰めて使用し、縮合反応の条件及び脱保護条件
は、同装置に付随するフィードバックモニタリングシス
テムにより自動的に制御させた。ペプチド鎖の伸張反応
が全て終了した後、２０％ピペリジン含有ＮＭＰにより
Ｎ末端のＦｍｏｃ基を切断し、ＮＭＰ及びジクロロメタ
ン（ＰＥ社製）で洗浄し、真空乾燥し、対応するアミノ
酸配列を有する保護ペプチド樹脂７５８ｍｇ（収率９４
％）を得た。参考例２ Fmoc-DL-Cys(4Cl-Ph)-OHの代わりに、Fmoc-DL-Cys(3Br-
Ph)-OH（先願と同一の方法により合成）４９８ｍｇ
（１．０ｍｍｏｌ）を用いたことを除き、参考例１と同
一の方法により、対応するアミノ酸配列を有する保護ペ
プチド樹脂７７８ｍｇ（収率９５％）を得た。参考例３ Fmoc-DL-Cys(4Cl-Ph)-OHの代わりに、Fmoc-DL-Cys(4Me-
Ph)-OH（先願と同一の方法により合成）４３４ｍｇ
（１．０ｍｍｏｌ）を用いたことを除き、参考例１と同
一の方法により、対応するアミノ酸配列を有する保護ペ
プチド樹脂７５２ｍｇ（収率９４％）を得た。参考例４ Fmoc-DL-Cys(4Cl-Ph)-OHの代わりに、Fmoc-DL-Cys(4OMe
-Ph)-OH （先願と同一の方法により合成）４５０ｍｇ
（１．０ｍｍｏｌ）を用いたことを除き、参考例１と同
一の方法により、対応するアミノ酸配列を有する保護ペ
プチド樹脂８０６ｍｇ（収率１００％）を得た。参考例５ Fmoc-DL-Cys(4Cl-Ph)-OHの代わりに、F moc-DL-Cys(4NO
2-Ph)-OH（先願と同一の方法により合成）４６４ｍｇ
（１．０ｍｍｏｌ）を用いたことを除き、参考例１と同
一の方法により、対応するアミノ酸配列を有する保護ペ
プチド樹脂６９１ｍｇ（収率８６％）を得た。参考例６ Fmoc-DL-Cys(4Cl-Ph)-OHの代わりに、Fmoc-DL-Cys(4Cl-
Bzl)-OH （先願と同一の方法により合成）４６８ｍｇ
（１．０ｍｍｏｌ）を用いたことを除き、参考例１と同
一の方法により、対応するアミノ酸配列を有する保護ペ
プチド樹脂８０９ｍｇ（収率１００％）を得た。参考例７ Fmoc-DL-Cys(4Cl -Ph)-OH の代わりに、Fmoc-DL-Cys(4C
l-Phet)-OH（先願と同一の方法により合成）４８２ｍｇ
（１．０ｍｍｏｌ）を用いたことを除き、参考例１と同
一の方法により、対応するアミノ酸配列を有する保護ペ
プチド樹脂７９５ｍｇ（収率９８％）を得た。参考例８ Fmoc- DL-Cys(4Cl-Ph)-OH の代わりに、Fmoc-DL-Hcy(4C
l-Bzl)-OH （先願と同一の方法により合成）４８２ｍｇ
（１．０ｍｍｏｌ）を用いたことを除き、参考例１と同
一の方法により、対応するアミノ酸配列を有する保護ペ
プチド樹脂８０８ｍｇ（収率１００％）を得た。参考例９ Fmoc-DL-Cys(4Cl-Ph)-OHの代わりに、Fmoc-D-Phe(4Cl)-
OH（渡辺化学工業社製）４２２ｍｇ（１．０ｍｍｏｌ）
を用いたことを除き、参考例１と同一の方法により、対
応するアミノ酸配列を有する保護ペプチド樹脂７６７ｍ
ｇ（収率９６％）を得た。

【０１３６】

【発明の効果】以上、詳しく説明したとおり、この出願
の発明によって、抗真菌活性に優れ、しかも安全である
新規ペプチド誘導体と、これを有効成分とする抗真菌剤
が提供される。

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】次の式（１）【化１】［ただし、式中Ｒは炭素数１〜１９、飽和または２重結
合もしくは３重結合を１個以上有する直鎖のアルキル基
を示し、Ｘａａは次の式（２）【化２】（ただし、式中Ａは低級アルキレン基、または酸素原子
若しくは硫黄原子を結合する低級アルキレン基を示し、
Ｒ１およびＲ２は、各々、水素原子、ハロゲン原子、低
級アルキル基、低級アルコキシ基またはニトロ基を示
す。）で示されるアミノ酸残基を示す。］で示されるＤ
体またはＬ体のアミノ酸配列を有するペプチド誘導体ま
たはそれらの薬理学的に許容される塩類。
【請求項２】式（１）におけるＸａａが、次の式
（３）【化３】（ただし、式中ｎは整数１〜５を示し、Ｒ１およびＲ２
は、各々、水素原子、ハロゲン原子、低級アルキル基、
低級アルコキシ基またはニトロ基を示す。）で示される
アミノ酸残基である請求項１のペプチド誘導体またはそ
れらの薬理学的に許容される塩類。
【請求項３】式（１）におけるＸａａが、次の式
（４）【化４】（ただし、式中ｍは整数０〜３を示し、Ｒ１およびＲ２
は、各々、水素原子、ハロゲン原子、低級アルキル基、
低級アルコキシ基またはニトロ基を示す。）で示される
アミノ酸残基である請求項１のペプチド誘導体またはそ
れらの薬理学的に許容される塩類。
【請求項４】式（１）におけるＸａａが、次の式
（５）【化５】（ただし、式中ｐは整数０〜２を示し、Ｒ１およびＲ２
は、各々、水素原子、ハロゲン原子、低級アルキル基、
低級アルコキシ基またはニトロ基を示す。）で示される
アミノ酸残基である請求項１のペプチド誘導体またはそ
れらの薬理学的に許容される塩類。
【請求項５】式（１）におけるＸａａが、次の式
（６）【化６】（ただし、式中ｍは整数０〜３を示し、Ｒ１およびＲ２
は、各々、水素原子、ハロゲン原子、低級アルキル基、
低級アルコキシ基またはニトロ基を示す。）で示される
アミノ酸残基である請求項１のペプチド誘導体またはそ
れらの薬理学的に許容される塩類。
【請求項６】式（１）におけるＸａａが、次の式
（７）【化７】（ただし、式中ｐは整数０〜２を示し、Ｒ１およびＲ２
は、各々、水素原子、ハロゲン原子、低級アルキル基、
低級アルコキシ基またはニトロ基を示す。）で示される
アミノ酸残基である請求項１のペプチド誘導体またはそ
れらの薬理学的に許容される塩類。
【請求項７】次の式（１）【化８】［ただし、式中Ｒは炭素数１〜１９、飽和または２重結
合もしくは３重結合を１個以上有する直鎖のアルキル基
を示し、Ｘａａは次の式（２）【化９】（ただし、式中Ａは低級アルキレン基、または酸素原子
もしくは硫黄原子を結合する低級アルキレン基を示し、
Ｒ１およびＲ２は、各々、水素原子、ハロゲン原子、低
級アルキル基、低級アルコキシ基またはニトロ基を示
す。）で示されるアミノ酸残基を示す。］で示されるＤ
体またはＬ体のアミノ酸配列を有するペプチド誘導体お
よびそれらの薬理学的に許容される塩類からなる群より
選択される化合物の１種または２種以上の混合物を有効
成分として含有する抗真菌剤。
【請求項８】式（１）におけるＸａａが、次の式
（３）【化１０】（ただし、式中ｎは整数１〜５を示し、Ｒ１およびＲ２
は、各々、水素原子、ハロゲン原子、低級アルキル基、
低級アルコキシ基またはニトロ基を示す。）で示される
アミノ酸残基である請求項７の抗真菌剤。
【請求項９】式（１）におけるＸａａが、次の式
（４）【化１１】（ただし、式中ｍは整数０〜３を示し、Ｒ１およびＲ２
は、各々、水素原子、ハロゲン原子、低級アルキル基、
低級アルコキシ基またはニトロ基を示す。）で示される
アミノ酸残基である請求項７の抗真菌剤。
【請求項１０】式（１）におけるＸａａが、次の式
（５）【化１２】（ただし、式中ｐは整数０〜２を示し、Ｒ１およびＲ２
は、各々、水素原子、ハロゲン原子、低級アルキル基、
低級アルコキシ基またはニトロ基を示す。）で示される
アミノ酸残基である請求項７の抗真菌剤。
【請求項１１】式（１）におけるＸａａが、次の式
（６）【化１３】（ただし、式中ｍは整数０〜３を示し、Ｒ１およびＲ２
は、各々、水素原子、ハロゲン原子、低級アルキル基、
低級アルコキシ基またはニトロ基を示す。）で示される
アミノ酸残基である請求項７の抗真菌剤。
【請求項１２】式（１）におけるＸａａが、次の式
（７）【化１４】（ただし、式中ｐは整数０〜２を示し、Ｒ１およびＲ２
は、各々、水素原子、ハロゲン原子、低級アルキル基、
低級アルコキシ基またはニトロ基を示す。）で示される
アミノ酸残基である請求項７の抗真菌剤。