JPH1036363A - マロン酸誘導体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 カテプシンＢ及びＬが関与する疾患の治療剤
として有用な化合物を提供する。 【解決手段】 一般式（Ｉ）で表されるマロン酸誘導体
と塩。 【化１】 ［Ｒ¹ 〜Ｒ³ は水酸基、Ｃ_1-30のアルコキシ、Ｃ_6-40の
アリールオキシ、Ｃ_7-40のアラルキルオキシ、Ｃ_3-12シ
クロアルキル置換のＣ_1-6 のアルコキシ、Ｃ_3-12複素環
置換のＣ_1-6 のアルコキシ、又は−ＮＲ⁴ Ｒ⁵ （Ｒ⁴ と
Ｒ⁵ とは、水素、Ｃ_1-30のアルキル、Ｃ_6-40のアリー
ル、Ｃ_7-40のアラルキル、Ｃ_3-12シクロアルキル置換の
Ｃ_1-6 のアルキル、またはＣ_3-12複素環置換のＣ_1-6 の
アルキル）：但し、Ｒ¹ 〜Ｒ⁵ に環状基がある場合に
は、置換基として、ハロゲン、水酸基、Ｃ_1-6 のアルキ
ル、又はＣ_1-6 のアルコキシを有していてもよい］。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、分子構造中にオキ
シラン環を有する新規なマロン酸誘導体及びその薬理学
的に許容される塩に関する。さらに詳しくは、本発明
は、カテプシンＬおよびカテプシンＢに対して阻害作用
を示す、分子構造中にオキシラン環を有する新規なマロ
ン酸誘導体及びその薬理学的に許容される塩に関する。

【０００２】

【従来の技術】骨組織は破骨細胞による骨吸収と骨芽細
胞による骨形成を繰り返しており、このバランスの上に
骨の構造および量が保持されている。しかし、骨吸収が
優位な状態になると骨粗鬆症、悪性高カルシウム血症、
骨ベーチェット病などの骨疾患を発症する。

【０００３】破骨細胞による骨吸収は、ミネラルの溶解
（脱灰）と骨基質の分解のステップに分けることがで
き、骨基質の分解はリソソーム酵素により起こると考え
られている。最近の研究では、リソソーム酵素の中で中
心的に働いているものはシステインプロテアーゼである
カテプシンＬや、カテプシンＬ類似の酵素であるといわ
れている（掛川、勝沼、Molecular Medicine, 30(10),
1310-1318(1993) および手塚ほか、J. Biol. Chem., 26
9, 1106-1109(1994)）。また、システインプロテアーゼ
阻害剤が骨吸収を抑制することが報告されている（J.M.
Delaisse ほか、Biochem. Biophys., Res. Commun., 1
25, 441-447(1984)）。そこで、カテプシンＬをはじめ
とするシステインプロテアーゼを阻害する化合物は、骨
粗鬆症などの骨疾患の治療に有望であると考えられてい
る。

【０００４】例えば、いくつかのエポキシコハク酸誘導
体を骨疾患の治療に用いることが既に提案されている
（特開昭６３−２８４１２７号、特開平２−２１８６１
０号各公報）。しかしながら、システインプロテアーゼ
阻害剤を臨床的に使用した例は殆どなく、その研究は緒
に就いたばかりである。

【０００５】

【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、骨粗
鬆症、悪性高カルシウム血症、骨ベーチェット病等の骨
疾患の予防または治療に有用な新規な化合物を提供する
ことである。本発明の目的はまた、カテプシンＬ活性の
異常亢進を伴なう骨関節炎やリウマチ性関節炎の治療に
有用な化合物を提供することにもある。本発明はまた、
カテプシンＢ及びＬが関与する筋ジストロフィーや筋萎
縮症などの疾患の治療剤として有用な化合物を提供する
こともその目的とする。

【０００６】

【課題を解決するための手段】本発明者は、上記の課題
の解決のために鋭意研究した結果、下記一般式（Ｉ）で
表わされる分子構造中にオキシラン環を有するマロン酸
誘導体またはその薬理学的に許容される塩が、強力なカ
テプシンＬ及びＢに対する阻害作用を有することを見出
し、本発明を完成した。

【０００７】

【化２】

【０００８】［上記式（Ｉ）において、Ｒ¹ 、Ｒ² およ
びＲ³ はそれぞれ独立に、水酸基、炭素原子数が１〜３
０のアルコキシ基、炭素原子数が６〜４０のアリールオ
キシ基、炭素原子数が７〜４０のアラルキルオキシ基、
炭素原子数３〜１２のシクロアルキル基で置換された炭
素原子数１〜６のアルコキシ基、炭素原子数３〜１２の
複素環基で置換された炭素原子数１〜６のアルコキシ
基、または−ＮＲ⁴ Ｒ⁵（Ｒ⁴ とＲ⁵ とはそれぞれ独立
に、水素原子、炭素原子数が１〜３０のアルキル基、炭
素原子数が６〜４０のアリール基、炭素原子数が７〜４
０のアラルキル基、炭素原子数３〜１２のシクロアルキ
ル基で置換された炭素原子数１〜６のアルキル基、また
は炭素原子数３〜１２の複素環基で置換された炭素原子
数１〜６のアルキル基である）：但し、Ｒ¹ 、Ｒ² 、Ｒ
³ 、Ｒ⁴ そしてＲ⁵ に、アリール基、シクロアルキル基
および複素環基からなる群より選ばれる環状基が含まれ
る場合、その環状基は、置換基として、ハロゲン原子、
水酸基、炭素原子数１〜６のアルキル基、または炭素原
子数１〜６のアルコキシ基を有していてもよい］。

【０００９】

【発明の実施の形態】次に、上記の一般式（Ｉ）で表わ
される分子構造中にオキシラン環を有するマロン酸誘導
体またはその薬理学的に許容される塩について説明す
る。一般式（Ｉ）において、Ｒ¹ 、Ｒ² およびＲ³ はそ
れぞれ互いに同一でも、異なっていてもよく、下記の基
から選ばれる基を表わす。

【００１０】１）水酸基 ２）炭素原子数が１〜３０のアルコキシ基、好ましくは
炭素原子数が１〜１２のアルコキシ基（例、メトキシ
基、エトキシ基、ｎ−プロポキシ基、イソプロポキシ
基、ｎ−ブトキシ基、ｎ−ペンチルオキシ基、イソペン
チルオキシ基） ３）炭素原子数が６〜４０のアリールオキシ基、好まし
くは炭素原子数が６〜１０のアリールオキシ基（例、フ
ェノキシ基、ナフチルオキシ基） ４）炭素原子数が７〜４０のアラルキルオキシ基、好ま
しくは炭素原子数が７〜１４のアラルキルオキシ基
（例、ベンジルオキシ基、フェネチルオキシ基、ナフチ
ルメチルオキシ基） ５）炭素原子数３〜１２のシクロアルキル基で置換され
た炭素原子数が１〜６のアルコキシ基、好ましくはシク
ロペンチルあるいはシクロヘキシル基の付いた炭素原子
数１〜４のアルコキシ基（例、シクロヘキシルメチルオ
キシ基） ６）炭素原子数３〜１２の複素環基で置換された炭素原
子数１〜６のアルコキシ基、好ましくは一個もしくは二
個の窒素原子、硫黄原子、及び／又は酸素原子を環形成
原子として含む５〜７員環の複素環基で置換された炭素
原子数が１〜４のアルコキシ基（例、ピリジルメチルオ
キシ基、フルフリルオキシ基、チエニルメトキシ基）

【００１１】７）−ＮＲ⁴ Ｒ⁵ ：ここで、Ｒ⁴ とＲ⁵ と
はそれぞれ独立に、水素原子、炭素原子数が１〜３０の
アルキル基、炭素原子数が６〜４０のアリール基、炭素
原子数が７〜４０のアラルキル基、炭素原子数が３〜１
２のシクロアルキル基で置換された炭素原子数１〜６の
アルキル基、もしくは炭素原子数が３〜１２の複素環基
で置換された炭素原子数が１〜６のアルキル基であり、
好ましいのは下記のものである： ７−１）水素原子 ７−２）炭素原子数が１〜３０のアルキル基、好ましく
は炭素原子数が１〜１２のアルキル基（例、メチル基、
エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチ
ル基、ｎ−ペンチル基、イソペンチル基、ｎ−ヘキシル
基） ７−３）炭素原子数が６〜４０のアリール基、好ましく
は炭素原子数６〜１０のアリール基（例、フェニル基、
ナフチル基） ７−４）炭素原子数が７〜４０のアラルキル基、好まし
くは炭素原子数が７〜１４のアラルキル基（例、ベンジ
ル基、フェネチル基、ナフチルメチル基） ７−５）炭素原子数３〜１２のシクロアルキル基で置換
された炭素原子数が１〜６のアルキル基、好ましくはシ
クロペンチルあるいはシクロヘキシル基の付いた炭素原
子数１〜４のアルキル基（例、シクロヘキシルメチル
基） ７−６）炭素原子数が３〜１２の複素環基で置換された
炭素原子数１〜６のアルキル基、好ましくは一個もしく
は二個の窒素原子、硫黄原子、及び／又は酸素原子を環
形成原子として含む５〜７員環の複素環基で置換された
炭素原子数１〜４のアルキル基（例、ピリジルメチル
基、フルフリル基、チエニルメチル基）

【００１２】なお、一般式（Ｉ）で、Ｒ¹ 、Ｒ² 、Ｒ
³ 、Ｒ⁴ 、Ｒ⁵ に、アリール基、シクロアルキル基及び
複素環基からなる群より選ばれる環状基が含まれる場合
には、その環状基は置換基として、ハロゲン原子（例、
弗素、塩素、臭素）、水酸基、炭素原子数１〜６のアル
キル基（例、メチル基、エチル基）、または炭素原子数
１〜６のアルコキシ基（例、メトキシ基、エトキシ基）
を有していてもよい。

【００１３】一般式（Ｉ）において、好ましい基を次に
示す。 （１）Ｒ¹ が水酸基もしくは炭素原子数１〜６のアルコ
キシ基である。 （２）Ｒ² 及びＲ³ はそれぞれ独立に、水酸基、炭素原
子数が１〜８のアルコキシ基、もしくは−ＮＲ⁴ Ｒ⁵
（Ｒ⁴ とＲ⁵ とはそれぞれ独立に、水素原子、炭素原子
数が１〜３０のアルキル基、炭素原子数が６〜４０のア
リール基、炭素原子数が７〜４０のアラルキル基、炭素
原子数３〜１２のシクロアルキル基で置換された炭素原
子数１〜６のアルキル基、もしくは炭素原子数３〜１２
の複素環基で置換された炭素原子数１〜６のアルキル基
である）である。 （３）Ｒ² およびＲ³ はそれぞれ独立に、−ＮＲ⁴ Ｒ⁵
（Ｒ⁴ は水素原子であり、Ｒ⁵ は、炭素原子数が１〜３
０のアルキル基、炭素原子数が６〜４０のアリール基、
炭素原子数が７〜４０のアラルキル基、炭素原子数３〜
１２のシクロアルキル基で置換された炭素原子数１〜６
のアルキル基、もしくは炭素原子数３〜１２の複素環基
で置換された炭素原子数１〜６のアルキル基である）で
ある。

【００１４】前記式（Ｉ）に示すオキシラン環の二つの
炭素は共に不斉炭素原子である。そして、式（Ｉ）は、
そのオキシラン環に結合した二つのカルボニル基がトラ
ンス型であることを示す。即ち、本発明のマロン酸誘導
体は下記の式（Ｔ₁ ）または式（Ｔ₂ ）で示される光学
異性体の何れか、あるいはこれらの混合物である。

【００１５】

【化３】

【００１６】本発明のマロン酸誘導体の具体例を表１及
び表２に示す。表１と表２に記載のＲ¹ 、Ｒ² およびＲ
³ が、一般式（Ｉ）に示す各基に相当する。

【００１７】

【表１】

【００１８】

【表２】

【００１９】本発明のマロン酸誘導体は、薬理学的に許
容される塩（例えば、無機または有機の塩基との塩）と
して用いてもよい。塩基の例としては、アルカリ金属
（例、ナトリウム、カリウム）およびアルカリ土類金属
（例、カルシウム）を挙げることができる。本発明のマ
ロン酸誘導体は、特公昭６１−５５５０９号公報及び特
公平１−５４３４８号公報に記載の合成方法に類似する
方法、或いは後述する実施例に記載の合成方法及びそれ
に類似する方法に基づいて容易に合成することができ
る。

【００２０】次に本発明のマロン酸誘導体の薬理作用に
ついて説明する。本発明のマロン酸誘導体は、チオール
プロテアーゼ阻害作用を有する化合物である。チオール
プロテアーゼには、カテプシンＬやＢあるいはカルパイ
ン等が含まれる。従って、本発明のマロン酸誘導体及び
その生理学的に許容できる塩は、これらのプロテアーゼ
が関与する疾患に対して、薬理作用が期待できる。カテ
プシンＬが関与する疾患には、従来の技術で述べたよう
に、骨粗鬆症、悪性高カルシウム血症や骨ベーチェット
病のような骨疾患が含まれる。従って、本発明のマロン
酸誘導体およびその生理学的に許容できる塩は、これら
の骨疾患の予防薬あるいは治療薬として有用である。カ
テプシンＬが関節軟骨を構成するコラーゲンのII型、IX
型およびXI型を中性領域で分解することが報告されてい
る（FEBS Lett. 269, 189-193(1990））。従って、本発
明のマロン酸誘導体及びその薬理学的に許容できる塩
は、カテプシンＬ活性の異常亢進を伴う骨疾患である骨
関節炎症あるいはリウマチ性関節炎に対しても有効であ
ることが期待できる（特開平５−１７８７５７号公報参
照）。

【００２１】本発明のマロン酸誘導体はカテプシンＢ阻
害剤としても優れた作用を示す。すなわち、カテプシン
Ｂなどの、カテプシンＬ以外のチオールプロテアーゼが
関与する疾患としては、筋ジストロフィーや筋萎縮症
（カテプシンＢ、カルパインが関与）、アルツハイマー
病（カルパインが関与）、神経細胞の脱髄によって起こ
るとされる疾患、例えば多発性硬化症や末端神経のニュ
ーロパシー（カルパインが関与）、白内障（カルパイン
が関与）、アレルギー疾患（チオールプロテアーゼが関
与）、劇症肝炎（カルパインが関与）、乳癌、前立腺癌
や前立腺肥大症（カルパインが関与）、癌の増殖や転移
（カテプシンＢ、カルパインが関与）あるいは血小板の
凝集（カルパインが関与）がある（特開平６−２３９８
３５号参照）ところから、本発明のマロン酸誘導体は、
これらの疾患の治療剤および予防薬として有効であると
考えられる。本発明のマロン酸誘導体およびその薬理学
的に許容できる塩は、以上の疾患の予防薬あるいは治療
薬としても有用であることが期待できる。特に、骨粗鬆
症、悪性高カルシウム血症や骨ベーチェット病のような
骨疾患の予防または治療薬として有用である。

【００２２】本発明のマロン酸誘導体の投与方法は、経
口投与でも非経口投与でもよい。経口投与剤の剤型とし
ては、錠剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤およびシロップ
剤が挙げられる。非経口投与の方法としては、粘膜投
与、体表投与、血管投与および組織内投与がある。粘膜
投与の場合は、点眼剤、吸入剤、噴霧剤あるいは座剤と
して使用する。体表投与の場合は、軟膏剤として使用す
る。血管投与および組織内投与の場合は、注射剤として
使用する。上記経口投与剤の製造は、通常の賦形剤、崩
壊剤、結合剤、滑沢剤、色素や希釈剤を用いて行なうこ
とができる。賦形剤としては、ブドウ糖や乳糖が一般に
使用される。崩壊剤の例には、澱粉およびカルボキシメ
チルセルロースカルシウムが含まれる。滑沢剤として
は、ステアリン酸マグネシウムおよびタルクが挙げられ
る。結合剤としては、ヒドロキシプロピルセルロース、
ゼラチンおよびポリビニルアルコールが用いられる。

【００２３】非経口投与製剤も通常の方法で製造でき
る。例えば、注射剤の場合、通常の注射用蒸留水、生理
食塩水あるいはリンゲル液を用いればよい。本発明のマ
ロン酸誘導体の投与量は、通常成人では、注射剤で一日
０．０１乃至１００ｍｇ、経口投与で一日０．１乃至１
ｇである。もちろん、投与量は、年齢、人種、症状など
に応じて増減する。

【００２４】

【実施例】

［実施例１］ （２Ｓ，３Ｓ）−３−［［ビス（ベンジルカルバモイ
ル）メチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン
酸エチルの合成

【００２５】

【化４】

【００２６】（１）２−アミノ−Ｎ，Ｎ’−ジベンジル
−１，３−プロパンジアミドの合成 アミノマロン酸ジエチル塩酸塩（２．１２ｇ，１０．０
ミリモル）を９５％エタノール（７．０ｍＬ）に懸濁さ
せ、ベンジルアミン（７．５０ｇ，７０．０ミリモル）
のエタノール（１７ｍＬ）溶液を添加し、６０℃で一晩
撹拌した。溶媒を減圧留去した後、クロロホルム（１０
ｍＬ）を添加し、不溶物を濾別し、クロロホルム（１０
ｍＬ）で洗浄した。洗液と濾液とを合わせ、溶媒を減圧
にて留去し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマト
グラフィー（クロロホルム／メタノール＝５０／１、体
積比）で精製し、白色結晶として標題化合物を得た
（１．０９ｇ）。

【００２７】¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δ ２．２１（２Ｈ，ｂｒ ｓ） ４．１２（１Ｈ，ｂｒ ｓ） ４．４４，４．４９（４Ｈ，各々ｄｄ，Ｊ＝６，１５Ｈ
ｚ） ７．２〜７．３（１０Ｈ，ｍ） ８．２０（２Ｈ，ｂｒ ｓ）

【００２８】（２）（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［ビス（ベ
ンジルカルバモイル）メチル］カルバモイル］オキシラ
ン−２−カルボン酸エチルの合成 （２Ｓ，３Ｓ）−３−エトキシカルボニルオキシラン−
２−カルボン酸カリウム（６０６ｍｇ，３．０６ミリモ
ル）を乾燥ベンゼン（６．０ｍＬ）に懸濁させて、塩化
チオニル（０．２７ｍＬ，３．６７ミリモル）を滴下
し、３時間加熱還流した。溶媒約２ｍＬを減圧にて留去
し、酸クロライドのベンゼン溶液を得た。上記（１）で
得た２−アミノ−Ｎ，Ｎ’−ジベンジル−１，３−プロ
パンジアミド（１．０９ｇ，３．６７ミリモル）とトリ
エチルアミン（０．５１ｍＬ，３．６７ミリモル）の乾
燥ベンゼン（６ｍＬ）懸濁液に、氷冷下、上記酸クロラ
イドのベンゼン溶液を滴下し、室温で４時間撹拌した。
反応溶液を水（２０ｍＬ）と酢酸エチル（５０ｍＬ）と
で希釈したのち、有機層を分取した。この有機層を、１
０％クエン酸水溶液、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、
そして飽和食塩水で順次洗浄し、不溶物を濾取した。濾
液を無水硫酸ナトリウムで乾燥したのち、溶媒を減圧留
去し、その残渣を濾取した不溶物と合わせた。次いで、
これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン
／酢酸エチル＝１／１、体積比）で精製し、白色結晶と
して標題化合物を得た（０．６１ｇ）。

【００２９】¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δ １．３１（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ） ３．６１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２Ｈｚ） ３．７４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２Ｈｚ） ４．２〜４．３（２Ｈ，ｍ） ４．４〜４．５（４Ｈ，ｍ） ４．９４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６Ｈｚ） ６．９４（１Ｈ，ｂｒ） ７．２〜７．４（１０Ｈ，ｍ） ７．４２（１Ｈ，ｂｒ ｄ，Ｊ＝６Ｈｚ）

【００３０】［実施例２］ （２Ｓ，３Ｓ）−３−［［ビス（ベンジルカルバモイ
ル）メチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン
酸の合成

【００３１】

【化５】

【００３２】実施例１で合成した（２Ｓ，３Ｓ）−３−
［［ビス（ベンジルカルバモイル）メチル］カルバモイ
ル］オキシラン−２−カルボン酸エチル（０．６１ｇ，
１．３９ミリモル）をエタノール（３０ｍＬ）に懸濁さ
せ、氷冷下、０．５Ｎ水酸化カリウム／エタノール溶液
（３．３４ｍＬ，１．６７ミリモル）を加え、室温で５
時間撹拌した。溶媒を減圧留去（浴温３５℃以下）し、
水（３０ｍＬ）で希釈したのち、エーテル（１０ｍＬ×
２）で洗浄した。水層に２Ｎ塩酸を加えてｐＨ１〜２と
し、酢酸エチル（３０ｍＬ×３）で抽出した。有機層を
飽和食塩水で洗浄したのち、無水硫酸ナトリウムで乾燥
した。溶媒を減圧留去し、微褐色非晶質体として標題化
合物を得た（５１３ｍｇ）。

【００３３】¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ₃ ＯＤ）δ ３．６４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２Ｈｚ） ３．７５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２Ｈｚ） ４．３〜４．５（４Ｈ，ｍ） ５．０４（１Ｈ，ｓ） ７．２〜７．４（１０Ｈ，ｍ）

【００３４】［実施例３］ （２Ｓ，３Ｓ）−３−［［ビス（ベンジルカルバモイ
ル）メチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン
酸ナトリウムの合成

【００３５】

【化６】

【００３６】実施例２で得た（２Ｓ，３Ｓ）−３−
［［ビス（ベンジルカルバモイル）メチル］カルバモイ
ル］オキシラン−２−カルボン酸（５１０ｍｇ，１．２
４ミリモル）を酢酸エチル（２０ｍＬ）に溶解させ、炭
酸水素ナトリウム（１０４ｍｇ，１．２４ミリモル）の
水（２０ｍＬ）溶液を加え、分液ロート内で激しく振盪
させた。水層を分取し、溶媒を減圧留去（浴温４０℃以
下）して、微褐色非晶質体として標題化合物を得た（４
５４ｍｇ）。

【００３７】¹Ｈ ＮＭＲ（Ｄ₂ Ｏ）δ ３．５０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２Ｈｚ） ３．７０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２Ｈｚ） ４．３８，４．４９（４Ｈ，各々ｄ，Ｊ＝１５Ｈｚ） ７．２〜７．４（１０Ｈ，ｍ） ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ^-1：３５２９，３３２７，３０６
２，３０３０，２９４５，１６８２，１６３５，１５４
７，１４９７，１４５２，１３９６，１３２１，１３０
０，１２４６，１２３０，１１４６，１１４４，１０８
０，１０５３，１０３０，９９１，９６２，９０１，８
５２，７９８，７５４，７２７，６９６，６１９，５８
０，５５７，４９９，４６３．

【００３８】［実施例４］ （２Ｓ，３Ｓ）−３−［［ビス［（３−メチルブチル）
カルバモイル］メチル］カルバモイル］オキシラン−２
−カルボン酸エチルの合成

【００３９】

【化７】

【００４０】（１）２−アミノ−Ｎ，Ｎ’−ビス（３−
メチルブチル）−１，３−プロパンジアミドの合成 アミノマロン酸ジエチル塩酸塩（２．１２ｇ，１０．０
ミリモル）とイソアミルアミン（６．１０ｇ，７０．０
ミリモル）とを用い、実施例１の（１）に記載の方法と
同様の反応及び処理を行なって、標題化合物を黄色非晶
質体として得た（１．８２ｇ）。

【００４１】¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δ ０．９１（１２Ｈ，ｄ，Ｊ＝６Ｈｚ） １．４１（４Ｈ，ｑ，Ｊ＝７Ｈｚ） １．５〜１．７（２Ｈ，ｍ） ３．２〜３．３（４Ｈ，ｍ） ３．９８（１Ｈ，ｓ） ７．８０（２Ｈ，ｂｒ）

【００４２】（２）（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［ビス
［（３−メチルブチル）カルバモイル］メチル］カルバ
モイル］オキシラン−２−カルボン酸エチルの合成 （２Ｓ，３Ｓ）−３−エトキシカルボニルオキシラン−
２−カルボン酸カリウム（６０６ｍｇ，３．０６ミリモ
ル）、塩化チオニル（０．２７ｍＬ，３．６７ミリモ
ル）、上記（１）で得た２−アミノ−Ｎ，Ｎ’−ビス
（３−メチルブチル）−１，３−プロパンジアミド（９
９５ｍｇ，３．６７ミリモル）、そしてトリエチルアミ
ン（０．５１ｍＬ，３．６７ミリモル）を用い、実施例
１の（２）の方法と同様の反応及び処理を行なって、標
題化合物を黄褐色非晶質体として得た（１．２８ｇ）。

【００４３】¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δ ０．９１（１２Ｈ，ｄ，Ｊ＝６Ｈｚ） １．３２（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ） １．４〜１．５（４Ｈ，ｍ） １．５〜１．７（２Ｈ，ｍ） ３．２〜３．３（４Ｈ，ｍ） ３．６４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２Ｈｚ） ３．７６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２Ｈｚ） ４．２〜４．３（２Ｈ，ｍ） ４．７８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６Ｈｚ） ６．５６（１Ｈ，ｂｒ） ６．８７（１Ｈ，ｂｒ） ７．４４（１Ｈ，ｂｒ ｄ，Ｊ＝６Ｈｚ）

【００４４】［実施例５］ （２Ｓ，３Ｓ）−３−［［ビス［（３−メチルブチル）
カルバモイル］メチル］カルバモイル］オキシラン−２
−カルボン酸の合成

【００４５】

【化８】

【００４６】実施例４で合成した（２Ｓ，３Ｓ）−３−
［［ビス［（３−メチルブチル）カルバモイル］メチ
ル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸エチル
（１．２２ｇ，３．０６ミリモル）と０．５Ｎ水酸化カ
リウム／エタノール溶液（７．３４ｍＬ，３．６７ミリ
モル）とを用い、実施例２の方法と同様の反応及び処理
を行なって、標題化合物を淡黄色結晶として得た（９６
８ｍｇ）。

【００４７】¹Ｈ ＮＭＲ（Ｄ₂ Ｏ）δ ０．８８（１２Ｈ，ｄ，Ｊ＝６Ｈｚ） １．３〜１．５（４Ｈ，ｍ） １．５〜１．６（２Ｈ，ｍ） ３．１〜３．３（４Ｈ，ｍ） ３．４９（１Ｈ，ｓ） ３．６８（１Ｈ，ｓ） ４．９２（１Ｈ，ｓ）

【００４８】［実施例６］ （２Ｓ，３Ｓ）−３−［［ビス［（３−メチルブチル）
カルバモイル］メチル］カルバモイル］オキシラン−２
−カルボン酸ナトリウムの合成

【００４９】

【化９】

【００５０】実施例５で合成した（２Ｓ，３Ｓ）−３−
［［ビス［（３−メチルブチル）カルバモイル］メチ
ル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸（９６
８ｍｇ，２．６１ミリモル）と炭酸水素ナトリウム（２
１９ｍｇ，２．６１ミリモル）とを用い、実施例３の方
法と同様の反応及び処理を行なって、標題化合物を微褐
色非晶質体として得た（９７３ｍｇ）。

【００５１】¹Ｈ ＮＭＲ（Ｄ₂ Ｏ）δ ０．８９（１２Ｈ，ｄ，Ｊ＝６Ｈｚ） １．３〜１．５（４Ｈ，ｍ） １．５〜１．６（２Ｈ，ｍ） ３．２〜３．４（４Ｈ，ｍ） ３．５０（１Ｈ，ｓ） ３．６８（１Ｈ，ｓ） ４．９３（１Ｈ，ｓ） ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ^-1：３３２３，３０７４，２９５
６，２８７２，１６７０，１５４１，１４６８，１４３
９，１３８７，１３０４，１２３４，１１７３，１１７
１，１０８８，１０１６，９５７，８９９，８４９，７
６４，６８１，６０６，４９８．

【００５２】［実施例７］ （２Ｓ，３Ｓ）−３−［［ビス［（１−ナフチルメチ
ル）カルバモイル］メチル］カルバモイル］オキシラン
−２−カルボン酸エチルの合成

【００５３】

【化１０】

【００５４】（１）２−アミノ−Ｎ，Ｎ’−ビス（１−
ナフチルメチル）−１，３−プロパンジアミドの合成 アミノマロン酸ジエチル塩酸塩（９６１ｍｇ，４．５４
ミリモル）と１−ナフチルメチルアミン（５．０ｇ，３
１．８ミリモル）とを用い、実施例１の（１）に記載の
方法と同様の反応及び処理を行なって、標題化合物を淡
茶色非晶質体として得た（８６４ｍｇ）。

【００５５】（２）（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［ビス
［（１−ナフチルメチル）カルバモイル］メチル］カル
バモイル］オキシラン−２−カルボン酸エチルの合成 （２Ｓ，３Ｓ）−３−エトキシカルボニルオキシラン−
２−カルボン酸カリウム（３５７ｍｇ，１．８０ミリモ
ル）、塩化チオニル（０．１６ｍＬ，２．１７ミリモ
ル）、上記（１）で得た２−アミノ−Ｎ，Ｎ’−ビス
（１−ナフチルメチル）−１，３−プロパンジアミド
（８６４ｍｇ，２．１７ミリモル）、そしてトリエチル
アミン（０．３０ｍＬ，２．１７ミリモル）を用い、実
施例１の（２）の方法と同様の反応及び処理を行なっ
て、標題化合物を茶色非晶質体として得た（２８５ｍ
ｇ）。

【００５６】［実施例８］ （２Ｓ，３Ｓ）−３−［［ビス［（１−ナフチルメチ
ル）カルバモイル］メチル］カルバモイル］オキシラン
−２−カルボン酸の合成

【００５７】

【化１１】

【００５８】実施例７で合成した（２Ｓ，３Ｓ）−３−
［［ビス［（１−ナフチルメチル）カルバモイル］メチ
ル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸エチル
（２８５ｍｇ，０．５２８ミリモル）と０．５Ｎ水酸化
カリウム／エタノール溶液（１．２７ｍＬ，０．６３５
ミリモル）とを用い、実施例２の方法と同様の反応及び
処理を行なって、標題化合物を淡黄色非晶質体として得
た（６８ｍｇ）。

【００５９】［実施例９］ （２Ｓ，３Ｓ）−３−［［ビス［（１−ナフチルメチ
ル）カルバモイル］メチル］カルバモイル］オキシラン
−２−カルボン酸ナトリウムの合成

【００６０】

【化１２】

【００６１】実施例８で合成した（２Ｓ，３Ｓ）−３−
［［ビス［（１−ナフチルメチル）カルバモイル］メチ
ル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸（６
５．４ｍｇ，０．１３３ミリモル）と炭酸水素ナトリウ
ム（１１．２ｍｇ，０．１３３ミリモル）とを用い、実
施例３の方法と同様の反応及び処理を行なって、標題化
合物を微褐色非晶質体として得た（６３．６ｍｇ）。

【００６２】¹Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆ ）δ ３．０８（１Ｈ，ｓ） ３．３７（１Ｈ，ｓ） ４．７〜４．８（４Ｈ，ｍ） ５．０６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ） ７．３〜８．０（１４Ｈ，ｍ） ８．１８（１Ｈ，ｂｒ） ８．６３（１Ｈ，ｂｒ） ８．７５（１Ｈ，ｂｒ） ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ^-1：３３９８，３２９０，３０４
９，１６５５，１６３７，１５２９，１４２５，１３９
４，１２３８，１２１３，１０２６，９０３，８９７，
８５４，７９３，７７７，４５１．

【００６３】［実施例１０］ ２−［（２Ｓ，３Ｓ）−３−エトキシカルボニルオキシ
ラン−２−カルボニル］アミノマロン酸ジエチルの合成

【００６４】

【化１３】

【００６５】（２Ｓ，３Ｓ）−３−エトキシカルボニル
オキシラン−２−カルボン酸（２００ｍｇ，１．２５ミ
リモル）とＮ−ヒドロキシコハク酸イミド（１４４ｍ
ｇ，１．２５ミリモル）とを酢酸エチル（２ｍＬ）に溶
解させ、氷冷下、この溶液に、Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキ
シルカルボジイミド（２５８ｍｇ，１．２５ミリモル）
の酢酸エチル（２ｍＬ）溶液を添加し、そのままの温度
で３０分間撹拌した。これに、アミノマロン酸ジエチル
の塩酸塩（３４５ｍｇ，１．６３ミリモル）とトリエチ
ルアミン（０．２３ｍＬ，１．６３ミリモル）の酢酸エ
チル（２ｍＬ）懸濁液を氷冷下で加え、次いで室温下で
ジクロロメタン（１０ｍＬ）を加えて、一晩撹拌した。
溶媒のジクロロメタンを減圧留去し、析出したＮ，Ｎ’
−ジシクロヘキシル尿素をセライト濾過で濾別し、酢酸
エチルで洗浄した。濾液と洗液とを合わせ、１０％クエ
ン酸水溶液、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、そして飽
和食塩水で順次洗浄したのち、無水硫酸ナトリウムで乾
燥した。この乾燥液から溶媒を減圧留去し、その残渣を
シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸
エチル＝１／１、体積比）で精製し、白色結晶として標
題化合物を得た（１９４ｍｇ）。

【００６６】¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δ １．２〜１．４（９Ｈ，ｍ） ３．６０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２Ｈｚ） ３．７４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２Ｈｚ） ４．２〜４．４（６Ｈ，ｍ） ５．１４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ） ６．９８（１Ｈ，ｂｒ ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ） ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ^-1：３２９８，３０８２，２９９
３，２９４９，２９１０，１７４９，１６６８，１５５
４，１４７１，１４５０，１３７７，１３５６，１３５
２，１２８４，１２６７，１２２５，１２００，１１４
６，１１１３，１０２０，１０１４，９０３，８６８，
８４３，８１２，７６６，６９０，６６９，６３６，５
９８，５５７，４０１．

【００６７】［薬理実験例１］カテプシンＬ阻害作用 （１）ラット肝臓リソソーム分画の調製 ウイスター系雄性ラットを脱血致死させ、門脈より氷冷
した生理食塩水を注入して還流後、肝臓を摘出した。以
下の操作は４℃で行なった。はさみで細切後、５ｇを計
りとり、９倍量の０．２５Ｍスクロース液を加えてホモ
ジナイズ（ポッター型テフロンホモジナイザー）した。
ホモジネートを８００×ｇで１０分間遠心分離して得た
上清を、さらに１２０００×ｇで２０分間遠心分離し
た。得られた沈澱に０．２５Ｍスクロース液２５ｍＬを
加えてホモジナイズした後、１２０００×ｇで２０分間
遠心分離した。得られた沈澱に０．２５Ｍスクロース液
１０ｍＬを加えてホモジナイズしたものをリソソーム分
画とした。次いで、この分画を０．３３％トリトンＸ−
１００を含む０．２５Ｍスクロース液で希釈してカテプ
シンＬ活性の測定に供した。

【００６８】（２）カテプシンＬ活性の測定 ３４０ｍＭ酢酸ナトリウム、６０ｍＭ酢酸、４ｍＭＥＤ
ＴＡ及び８ｍＭジチオスレイトールを含む溶液（ｐＨ：
５．５）０．２５ｍＬに、リソソーム分画０．１ｍＬ、
被検化合物溶液５μＬおよび蒸留水０．５４５ｍＬを加
えて３０℃で１５分間プレインキュベートした後、基質
として５０μＭカルボベンゾキシ−Ｌ−フェニルアラニ
ル−Ｌ−アルギニン−４−メチルクマリル−７−アミド
(Z-Phe-Arg-MCA) 溶液０．１ｍＬを加えて反応を開始し
た。３０℃で２０分間反応させた後、１００ｍＭモノク
ロル酢酸ナトリウム、３０ｍＭ酢酸ナトリウムおよび７
０ｍＭ酢酸を含む溶液（ｐＨ：４．３）１ｍＬを加えて
反応を停止させた。最終溶液の蛍光強度を励起波長３８
０ｎｍ、蛍光波長４６０ｎｍで測定した。なお、Ｚ−Ｐ
ｈｅ−Ａｒｇ−ＭＣＡは、リソソーム分画に含まれるカ
テプシンＢによっても分解されるため、カテプシンＢの
特異的阻害剤であるＣＡ−０７４［村田他、FEBS Lett.
280, 307-310(1991) ］を反応溶液に１０^-7Ｍ添加して
カテプシンＢを完全に阻害した条件下で測定を行なっ
た。結果を表３に示す。

【００６９】

【表３】 表３ ──────────────────────────────────── 被検化合物 カテプシンＬ阻害 ＩＣ₅₀（Ｍ） ──────────────────────────────────── 実施例３ １．２×１０^-9 ────────────────────────────────────

【００７０】以上の結果から、本発明のマロン酸誘導体
は強力なカテプシンＬ阻害作用を持つことが明らかにな
った。

【００７１】［実施例１２］カテプシンＢ阻害作用 ３５２ｍＭのＫＨ₂ ＰＯ₄ 、４８ｍＭのＮａ₂ ＨＰＯ
₄ 、５．３２ｍＭのＥＤＴＡ・２Ｎａおよび１０ｍＭの
Ｌ−システインを含む溶液（ｐＨ６．０）０．２５ｍＬ
にリソソーム分画０．１ｍＬ、被検薬物５μＬおよび蒸
留水０．５４５ｍＬを加えて、３０℃で１５分間プレイ
ンキュベ−ションした後、基質として、５０μＭのカル
ボベンゾキシ−Ｌ−アルギニン−Ｌ−アルギニン−４−
メチルクマリル−７−アミド（Z-Arg-Arg-MCA)溶液０．
１ｍＬを加えて反応を開始させた。３０℃で２０分間反
応させた後、その反応液に１００ｍＭのモノクロル酢酸
ナトリウム、３０ｍＭの酢酸ナトリウム及び７０ｍＭの
酢酸を含む水溶液（ｐＨ４．３）１ｍＬを加えて、反応
を停止させた。最終容量の蛍光強度を励起波長３８０ｎ
ｍ、蛍光波長４６０ｎｍで測定した。その結果を下記の
表４に記す。

【００７２】

【表４】 表４ ──────────────────────────────────── 被検化合物 カテプシンＢ阻害（ＩＣ₅₀） ──────────────────────────────────── 実施例３ １．３×１０^-7 ────────────────────────────────────

【００７３】以上の結果から、本発明のマロン酸誘導体
がカテプシンＬ阻害作用に加えて、カテプシンＢ阻害作
用を有することが分る。

【００７４】

【発明の効果】本発明のマロン酸誘導体は新規化合物で
あり、強力なカテプシンＬ阻害作用及びカテプシンＢ阻
害作用を示す。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ａ６１Ｋ 31/335 ＡＤＵ Ａ６１Ｋ 31/335 ＡＤＵ ＡＥＤ ＡＥＤ ＡＧＺ ＡＧＺ 31/38 ＡＤＤ 31/38 ＡＤＤ Ｃ０７Ｄ 409/12 ３０３ Ｃ０７Ｄ 409/12 ３０３

Claims (4)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 次の一般式（Ｉ）で表されるマロン酸誘
   導体、及びその薬理学的に許容される塩。 【化１】 ［上記式（Ｉ）において、Ｒ¹ 、Ｒ² およびＲ³ はそれ
   ぞれ独立に、水酸基、炭素原子数が１〜３０のアルコキ
   シ基、炭素原子数が６〜４０のアリールオキシ基、炭素
   原子数が７〜４０のアラルキルオキシ基、炭素原子数３
   〜１２のシクロアルキル基で置換された炭素原子数１〜
   ６のアルコキシ基、炭素原子数３〜１２の複素環基で置
   換された炭素原子数１〜６のアルコキシ基、または−Ｎ
   Ｒ⁴ Ｒ⁵（Ｒ⁴ とＲ⁵ とはそれぞれ独立に、水素原子、
   炭素原子数が１〜３０のアルキル基、炭素原子数が６〜
   ４０のアリール基、炭素原子数が７〜４０のアラルキル
   基、炭素原子数３〜１２のシクロアルキル基で置換され
   た炭素原子数１〜６のアルキル基、または炭素原子数３
   〜１２の複素環基で置換された炭素原子数１〜６のアル
   キル基である）：但し、Ｒ¹ 、Ｒ² 、Ｒ³ 、Ｒ⁴ そして
   Ｒ⁵ に、アリール基、シクロアルキル基および複素環基
   からなる群より選ばれる環状基が含まれる場合、その環
   状基は、置換基として、ハロゲン原子、水酸基、炭素原
   子数１〜６のアルキル基、または炭素原子数１〜６のア
   ルコキシ基を有していてもよい］。
2. 【請求項２】 一般式（Ｉ）において、Ｒ¹ が水酸基も
   しくは炭素原子数１〜６のアルコキシ基である、請求項
   １に記載のマロン酸誘導体、及びその薬理学的に許容さ
   れる塩。
3. 【請求項３】 一般式（Ｉ）において、Ｒ² とＲ³ はそ
   れぞれ独立に、水酸基、炭素原子数が１〜８のアルコキ
   シ基、または−ＮＲ⁴ Ｒ⁵ （Ｒ⁴ とＲ⁵ とはそれぞれ独
   立に、水素原子、炭素原子数が１〜３０のアルキル基、
   炭素原子数が６〜４０のアリール基、炭素原子数が７〜
   ４０のアラルキル基、炭素原子数３〜１２のシクロアル
   キル基で置換された炭素原子数１〜６のアルキル基、も
   しくは炭素原子数３〜１２の複素環基で置換された炭素
   原子数１〜６のアルキル基である）である、請求項１も
   しくは２に記載のマロン酸誘導体、及びその薬理学的に
   許容される塩。
4. 【請求項４】 一般式（Ｉ）において、Ｒ² およびＲ³
   はそれぞれ独立に、−ＮＲ⁴ Ｒ⁵ （Ｒ⁴ は水素原子であ
   り、Ｒ⁵ は、炭素原子数が１〜３０のアルキル基、炭素
   原子数が６〜４０のアリール基、炭素原子数が７〜４０
   のアラルキル基、炭素原子数３〜１２のシクロアルキル
   基で置換された炭素原子数１〜６のアルキル基、もしく
   は炭素原子数３〜１２の複素環基で置換された炭素原子
   数１〜６のアルキル基である）である、請求項１もしく
   は２に記載のマロン酸誘導体、及びその薬理学的に許容
   される塩。