JPH10310533A - ウイルス性疣贅及び癌の治療剤 - Google Patents
ウイルス性疣贅及び癌の治療剤Info
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- JPH10310533A JPH10310533A JP9154232A JP15423297A JPH10310533A JP H10310533 A JPH10310533 A JP H10310533A JP 9154232 A JP9154232 A JP 9154232A JP 15423297 A JP15423297 A JP 15423297A JP H10310533 A JPH10310533 A JP H10310533A
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- JP
- Japan
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- tumor
- cells
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- viral
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Abstract
(57)【要約】
【課題】 新規なウイルス性疣贅及び癌の治療剤を
提供する 【解決手段】 なす（特にへた部分）より抽出する生理
活性物質が、ウイルス性疣贅の治療剤として有効で、更
に強い癌細胞の増殖抑制作用を有し、これまでに無いタ
イプの抗癌剤となりうる。
提供する 【解決手段】 なす（特にへた部分）より抽出する生理
活性物質が、ウイルス性疣贅の治療剤として有効で、更
に強い癌細胞の増殖抑制作用を有し、これまでに無いタ
イプの抗癌剤となりうる。
Description
【０００１】本発明はウイルス性疣贅及び癌の治療に関
する本発明での生理活性物質は副作用を認めない有効物
質
する本発明での生理活性物質は副作用を認めない有効物
質
【０００２】ウイルス性疣贅に対する治療剤として液体
窒素による凍結療法、レーザーメスによる切除があり、
薬物療法としてはサリチル酸、三塩化酢酸の腐食療法、
又はブレオマイシン軟膏、５ＦＵ軟膏の外用法が用いら
れているが、いずれも治療は繰り返しが必要で、痛み、
周囲の健康な皮膚への影響がある。現在まで副作用のな
い効率的な治療法は実用化されていない。
窒素による凍結療法、レーザーメスによる切除があり、
薬物療法としてはサリチル酸、三塩化酢酸の腐食療法、
又はブレオマイシン軟膏、５ＦＵ軟膏の外用法が用いら
れているが、いずれも治療は繰り返しが必要で、痛み、
周囲の健康な皮膚への影響がある。現在まで副作用のな
い効率的な治療法は実用化されていない。
【０００３】抗癌剤としては既に多数の薬剤が臨床にお
いて実用化されている。多量の抗癌剤を癌患者に投与す
れば、癌の治癒も可能であるが、骨髄、肝臓、神経と消
化器の粘膜に対する副作用が投与量の増大とともに強く
なり、致死的になる。 そのため抗癌剤の投与量は人に
おいて第１相試験で厳密に定められ、厳しく制限されて
いるので、治癒可能な十分量の投与は出来ないのが現況
である。従って、副作用の少ない抗癌剤の開発は緊急な
課題である。
いて実用化されている。多量の抗癌剤を癌患者に投与す
れば、癌の治癒も可能であるが、骨髄、肝臓、神経と消
化器の粘膜に対する副作用が投与量の増大とともに強く
なり、致死的になる。 そのため抗癌剤の投与量は人に
おいて第１相試験で厳密に定められ、厳しく制限されて
いるので、治癒可能な十分量の投与は出来ないのが現況
である。従って、副作用の少ない抗癌剤の開発は緊急な
課題である。
【０００４】植物中には種々の生理活性物質が含まれ、
抗癌効果を示す物質も報告されている。 ＶＰ−１６は
アメリカにおいて見出された抗癌物質であり、ウイルス
性疣贅の治療剤としても実用化されている。 最近我が
国において開発されたＣＰ−１１は中国原産植“喜樹”
などに含有される植物性アルカロイドの一種であるカン
プトテシンの半合成誘導体出ある。またＴａｘｏｌは
“いちい”の植物樹皮抽出液から単離された新しい抗癌
効果を示す物質で臨床に導入され、優れた抗癌効果が認
められている。 この様に植物中には抗癌効果を示す生
理活性物質が存在しているが、通常人間が食する野菜の
部分より抽出されたなす（特にへた部分）の中の生理活
性物質は低分子量の化合物である。生体に投 与する薬
物は、高分子量のものは血中での分解、標的への到達の
困難さ、アレルギー反応などのため効果を発揮しがた
く、低分子量の物質が薬物として適している。 更に本
物質はみるべき副作用なく既成薬物を打破する新規薬剤
となりうる。 〔発明の詳細な説明〕
抗癌効果を示す物質も報告されている。 ＶＰ−１６は
アメリカにおいて見出された抗癌物質であり、ウイルス
性疣贅の治療剤としても実用化されている。 最近我が
国において開発されたＣＰ−１１は中国原産植“喜樹”
などに含有される植物性アルカロイドの一種であるカン
プトテシンの半合成誘導体出ある。またＴａｘｏｌは
“いちい”の植物樹皮抽出液から単離された新しい抗癌
効果を示す物質で臨床に導入され、優れた抗癌効果が認
められている。 この様に植物中には抗癌効果を示す生
理活性物質が存在しているが、通常人間が食する野菜の
部分より抽出されたなす（特にへた部分）の中の生理活
性物質は低分子量の化合物である。生体に投 与する薬
物は、高分子量のものは血中での分解、標的への到達の
困難さ、アレルギー反応などのため効果を発揮しがた
く、低分子量の物質が薬物として適している。 更に本
物質はみるべき副作用なく既成薬物を打破する新規薬剤
となりうる。 〔発明の詳細な説明〕
【０００５】なす（特にへた部分）をジューサーにてホ
モゲイナイズした後、ガーゼを用いてエキスを採集す
る。 このエキスを５０００ｒｐｍ（Ｋｕｂｏｔａ Ｋ
Ｒ２０００Ｔ）で遠心し沈殿物を除去し、その上清を−
８０℃のＤｅｅｐ ｆｒｅｅｚｅｒに保存し、再度１０
０００ｒｐｍの遠心操作を加え沈殿物を除去し、上清
（抽出液ＥＸとする）を作製する。 実験に際してこの
上清を限外濾過膜（分画分子量３０００、アミコン社
製）を用いて分子量３０００Ｄａｌｔｏｎ以下の抽出液
（ＥＸ−３０００）をＩＮ ＮａＯＨでｐＨ７．０に調
整する。 ｓｐｅｃｔｒａ／ｐｏｒ社製透析機Ｍａｃｒ
ｏ Ｄｉａｌｙｚｅｒ １３２３７９にＣＥＡＭｅｍｂ
ｒａｎｅ ＭＷＣＯ：１００を用い、ＥＸ−３０００を
透析し分子量１００Ｄａｌｔｏｎ以下の物質を除去す
る。 従ってこの抽出液は分子量１００〜３０００Ｄａ
ｌｔｏｎの物質を含有しＥＸ−３０００−１００とす
る。 ＥＸ−３０００とＥＸ−３０００−１００はＭＴ
Ｔ ａｓｓａｙを用いて癌細胞での増殖抑制率より抗癌
効果を検討する。 抽出液の蛋白量はＭｉｃｒｏ ＢＣ
Ａ法でＥＸ３０００の電解物質はＡＵＴＯＭＡＴＥＤ
ＥＬＥＣＴＲＯＬＹＴＥ ＡＮＡＬＹＺＥＲ ＰＶＡ−
αＩＩＡ＆Ｔを用いて測定する。
モゲイナイズした後、ガーゼを用いてエキスを採集す
る。 このエキスを５０００ｒｐｍ（Ｋｕｂｏｔａ Ｋ
Ｒ２０００Ｔ）で遠心し沈殿物を除去し、その上清を−
８０℃のＤｅｅｐ ｆｒｅｅｚｅｒに保存し、再度１０
０００ｒｐｍの遠心操作を加え沈殿物を除去し、上清
（抽出液ＥＸとする）を作製する。 実験に際してこの
上清を限外濾過膜（分画分子量３０００、アミコン社
製）を用いて分子量３０００Ｄａｌｔｏｎ以下の抽出液
（ＥＸ−３０００）をＩＮ ＮａＯＨでｐＨ７．０に調
整する。 ｓｐｅｃｔｒａ／ｐｏｒ社製透析機Ｍａｃｒ
ｏ Ｄｉａｌｙｚｅｒ １３２３７９にＣＥＡＭｅｍｂ
ｒａｎｅ ＭＷＣＯ：１００を用い、ＥＸ−３０００を
透析し分子量１００Ｄａｌｔｏｎ以下の物質を除去す
る。 従ってこの抽出液は分子量１００〜３０００Ｄａ
ｌｔｏｎの物質を含有しＥＸ−３０００−１００とす
る。 ＥＸ−３０００とＥＸ−３０００−１００はＭＴ
Ｔ ａｓｓａｙを用いて癌細胞での増殖抑制率より抗癌
効果を検討する。 抽出液の蛋白量はＭｉｃｒｏ ＢＣ
Ａ法でＥＸ３０００の電解物質はＡＵＴＯＭＡＴＥＤ
ＥＬＥＣＴＲＯＬＹＴＥ ＡＮＡＬＹＺＥＲ ＰＶＡ−
αＩＩＡ＆Ｔを用いて測定する。
【０００６】
【表１】
【０００７】表１は、実験に用いた癌細胞株と培養液で
ある。 それぞれの培養液に１０％ＦＣＳ、１００単位
ペニシリン、１００ｕｇストレプトマイシンを添加す
る。
ある。 それぞれの培養液に１０％ＦＣＳ、１００単位
ペニシリン、１００ｕｇストレプトマイシンを添加す
る。
【０００８】癌細胞の培養とＥＸ−３０００添加による
増殖抑制実験 ２４穴プレート（ＣＯＲＮＩＮＧ Ｃｅｌｌ ＷｅＬＬ
Ｓ ２５８０）に癌細胞を１ｗｅｌｌにつき、５０００
づつ、３７℃、５％ＣＯ２下にて２４時間後ＥＸ−３０
００を添加し、７２時間後にＥＸ−３０００を含む培養
液に交換する。実験はＴｒｉｐｌｉｃａｔｅにて行う。
ＤＭＥＭ、ＲＰＭＩ−１６４０培養液の１０倍濃度の
濃縮培養液を作製する。 ＥＸ−３０００の濃度を蒸留
水にて調整し培養液中に１０倍濃縮液とＦＣＳが常に１
０％存在するようにし、１２０時間培養する。 ＭＴＴ Ａｓｓａｙ ＳＩＧＭＡ（３−［４．５−Ｄｉｍｅｔｈｙｌｔｈｉａ
ｇｏｌ−２−ｙｌ］−２．５−ｄｉｐｈｅｎｙｌｔｅｔ
ｒａｚｏｌｉｕｍ）２ｇを２０００ｍｌのＰＢＳに溶解
し、各Ｗｅｌｌに２５０ｕｌを加え、さらに４時間培養
する。 培養液を吸引後（ＣＨ３）２ＳＯを１ｗｅｌｌ
につき１ｍｌに添加しＭＩＣＲＯＰＯＴＩＴＥＲ ＳＹ
ＳＹＴＥＭ ｍｉｃｒｏ ｍｉｘｔｅｒ ＭＯＤＥＬ
ＭＸ−４を用いて５分間混合する。 ９６穴プレート
（ＦＡＬＣＯＮ ＭＩＣＲＯＴＥＳＴＩＩＩ Ｔｉｓｓ
ｕｅ ｃｕｌｔｕｒｅ ｐｌａｔｅ ９６ ｗｅｌｌ
３０７２）２００ｕｌずつ混合したものを移す。 対照
群、各濃度の抽出液を添加した群、バックグランドの吸
光度の平均値を求め、抽出液添加の細胞の増殖抑制率は
以下の式によって算出する。 Ａ 対照群 吸光度平均値−バックグランド吸光度の平
均値 Ｂ 各濃度のＥＸ−３０００を添加した群の吸光度平均
値−バックグランドの吸光度平均値
増殖抑制実験 ２４穴プレート（ＣＯＲＮＩＮＧ Ｃｅｌｌ ＷｅＬＬ
Ｓ ２５８０）に癌細胞を１ｗｅｌｌにつき、５０００
づつ、３７℃、５％ＣＯ２下にて２４時間後ＥＸ−３０
００を添加し、７２時間後にＥＸ−３０００を含む培養
液に交換する。実験はＴｒｉｐｌｉｃａｔｅにて行う。
ＤＭＥＭ、ＲＰＭＩ−１６４０培養液の１０倍濃度の
濃縮培養液を作製する。 ＥＸ−３０００の濃度を蒸留
水にて調整し培養液中に１０倍濃縮液とＦＣＳが常に１
０％存在するようにし、１２０時間培養する。 ＭＴＴ Ａｓｓａｙ ＳＩＧＭＡ（３−［４．５−Ｄｉｍｅｔｈｙｌｔｈｉａ
ｇｏｌ−２−ｙｌ］−２．５−ｄｉｐｈｅｎｙｌｔｅｔ
ｒａｚｏｌｉｕｍ）２ｇを２０００ｍｌのＰＢＳに溶解
し、各Ｗｅｌｌに２５０ｕｌを加え、さらに４時間培養
する。 培養液を吸引後（ＣＨ３）２ＳＯを１ｗｅｌｌ
につき１ｍｌに添加しＭＩＣＲＯＰＯＴＩＴＥＲ ＳＹ
ＳＹＴＥＭ ｍｉｃｒｏ ｍｉｘｔｅｒ ＭＯＤＥＬ
ＭＸ−４を用いて５分間混合する。 ９６穴プレート
（ＦＡＬＣＯＮ ＭＩＣＲＯＴＥＳＴＩＩＩ Ｔｉｓｓ
ｕｅ ｃｕｌｔｕｒｅ ｐｌａｔｅ ９６ ｗｅｌｌ
３０７２）２００ｕｌずつ混合したものを移す。 対照
群、各濃度の抽出液を添加した群、バックグランドの吸
光度の平均値を求め、抽出液添加の細胞の増殖抑制率は
以下の式によって算出する。 Ａ 対照群 吸光度平均値−バックグランド吸光度の平
均値 Ｂ 各濃度のＥＸ−３０００を添加した群の吸光度平均
値−バックグランドの吸光度平均値
【０００９】ＥＸ−３０００の性格 なす（特にへた部分）１０ｇより６ｍｌのＥＸ−３００
０が抽出される。 ＥＸ−３０００における電解質（１
ｍＥｑ／ｌ）はＮａ２．０、 Ｋ８９．０、Ｃｌ１６．
０でｐＨ５．６と酸性を示す。 蛋白質量はＥＸ ７ｍ
ｇ／ｍｌ、ＥＸ３０００ ４ｍｇ／ｍｌである。
０が抽出される。 ＥＸ−３０００における電解質（１
ｍＥｑ／ｌ）はＮａ２．０、 Ｋ８９．０、Ｃｌ１６．
０でｐＨ５．６と酸性を示す。 蛋白質量はＥＸ ７ｍ
ｇ／ｍｌ、ＥＸ３０００ ４ｍｇ／ｍｌである。
【００１０】ＥＸ−３０００を３人のｖｏｌｕｎｔｉｅ
ｒにおいて２週間の間隔で３回ウイルス性疣贅の病変部
に湿布すると３ヵ月〜６ヵ月以内に治癒する。
ｒにおいて２週間の間隔で３回ウイルス性疣贅の病変部
に湿布すると３ヵ月〜６ヵ月以内に治癒する。
【００１１】
【表２】
【００１２】表２はＥＸ−３０００の各種癌細胞株に及
ぼす抗癌効果を示す。子宮頚癌由来Ｈｅｌａ細胞、Ｓｈ
ｉｈａ細胞、Ｉｓｈｉｋａ細胞においてＥＸ−３０００
はほぼ濃度依存的に抗癌効果を認め、感受性の高い細胞
株はＨｅｌａ細胞である。 卵巣癌由来ｈＲＡ細胞は感
受性が高く含有率１０％の濃度においても生存率はきわ
めて低値である。 更に胃癌由来ＳＷ４８０とＮＵＧ
２、大腸癌由来Ｃｏｌｏｎ２１肝臓癌ＨｅｐＧ２のそれ
ぞれの癌細胞も高い感受性を示す。ＥＸ−３０００はＫ
濃度が高いため等量のＫＣｌ溶液のＨｅｌａ細胞に対す
る影響を検討したがＫＣｌ溶液には抗癌効果を認めな
い。
ぼす抗癌効果を示す。子宮頚癌由来Ｈｅｌａ細胞、Ｓｈ
ｉｈａ細胞、Ｉｓｈｉｋａ細胞においてＥＸ−３０００
はほぼ濃度依存的に抗癌効果を認め、感受性の高い細胞
株はＨｅｌａ細胞である。 卵巣癌由来ｈＲＡ細胞は感
受性が高く含有率１０％の濃度においても生存率はきわ
めて低値である。 更に胃癌由来ＳＷ４８０とＮＵＧ
２、大腸癌由来Ｃｏｌｏｎ２１肝臓癌ＨｅｐＧ２のそれ
ぞれの癌細胞も高い感受性を示す。ＥＸ−３０００はＫ
濃度が高いため等量のＫＣｌ溶液のＨｅｌａ細胞に対す
る影響を検討したがＫＣｌ溶液には抗癌効果を認めな
い。
【００１３】
【表３】
【００１４】表３はＥＸ−３０００−１００の各種癌細
胞に及ぼす抗癌効果を示す。Ｈｅｌａ細胞、Ｓｈｉｈａ
細胞、Ｉｓｈｉｋａ細胞でＥＸ−３０００の抗癌効果と
ほぼ同様の傾向を示し、濃度依存的に生存率の低下を認
めたが、その効果はＥＸ−３０００に比較して減弱す
る。 ＥＸ−３０００−１００はＥＸ−３０００に対す
る感受性が高いＨＲＡ細胞においてなお強い抗癌効果を
示す。Ｈｅｌａ細胞を使用し１００℃１０分間加熱され
たＥＸ−３０００の抗癌効果を検討したがＥＸ−３００
０と同等の効果を保持する。
胞に及ぼす抗癌効果を示す。Ｈｅｌａ細胞、Ｓｈｉｈａ
細胞、Ｉｓｈｉｋａ細胞でＥＸ−３０００の抗癌効果と
ほぼ同様の傾向を示し、濃度依存的に生存率の低下を認
めたが、その効果はＥＸ−３０００に比較して減弱す
る。 ＥＸ−３０００−１００はＥＸ−３０００に対す
る感受性が高いＨＲＡ細胞においてなお強い抗癌効果を
示す。Ｈｅｌａ細胞を使用し１００℃１０分間加熱され
たＥＸ−３０００の抗癌効果を検討したがＥＸ−３００
０と同等の効果を保持する。
Claims (2)
- 【請求項１】 なす（特にへた部分）より粗精製された
生理活性物質のウイルス性疣贅に対する治療剤 - 【請求項２】 なす（特にへた部分）より粗精製された
生理活性物質の抗癌剤
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9154232A JPH10310533A (ja) | 1997-05-09 | 1997-05-09 | ウイルス性疣贅及び癌の治療剤 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9154232A JPH10310533A (ja) | 1997-05-09 | 1997-05-09 | ウイルス性疣贅及び癌の治療剤 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH10310533A true JPH10310533A (ja) | 1998-11-24 |
Family
ID=15579745
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP9154232A Pending JPH10310533A (ja) | 1997-05-09 | 1997-05-09 | ウイルス性疣贅及び癌の治療剤 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH10310533A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20040038401A (ko) * | 2002-10-31 | 2004-05-08 | 강경숙 | 구내 종양 예방 및 조직 재생 분말 |
-
1997
- 1997-05-09 JP JP9154232A patent/JPH10310533A/ja active Pending
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20040038401A (ko) * | 2002-10-31 | 2004-05-08 | 강경숙 | 구내 종양 예방 및 조직 재생 분말 |
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