JPH10236970A

JPH10236970A - 抗ヒスタミン作用物質

Info

Publication number: JPH10236970A
Application number: JP9181681A
Authority: JP
Inventors: Takafumi Ishihara; 隆文石原; Hiromichi Okuda; 拓道奥田; Takeo Ishihara; 健夫石原
Original assignee: BIZEN KASEI KK
Current assignee: BIZEN KASEI KK
Priority date: 1996-06-03
Filing date: 1997-06-02
Publication date: 1998-09-08

Abstract

(57)【要約】【課題】アレルギーやアトピー症状の改善に有用な安
全かつ有用な抗ヒスタミン作用物質を提供する。【解決手段】グアバ葉を水、親水性溶媒又はこれらの
混合物を用いて加圧下に抽出処理して得られる抗ヒスタ
ミン作用物質。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、グアバ（学名：Ｐ
ｓｉｄｉｕｍＧｕａｊａｖａＬｉｎｎ；フトモモ科
に属する熱帯地方の常緑小高木）の葉から抽出して得ら
れる抗ヒスタミン作用を有するグアバ葉エキスに関し、
さらに詳しくは、強力な抗アレルギー又は抗アトピー作
用を有する、グアバ葉エキス及び該エキスを含有する組
成物に関する。

【０００２】

【従来技術と発明が解決すべき課題】生活様式の変化、
特に食生活の変化や大気汚染の進行に関連して花粉症、
アトピー性皮膚炎、食物性アレルギー等のアレルギー性
疾患が増大し、社会に深刻な影響を与えている。例え
ば、成人におけるアトピー性皮膚炎はしばしば重篤な症
状を呈し、正常な社会生活ができなくなる場合もあり、
また、花粉症に悩まされている人が余りに多く、花粉情
報が必要な程である。ところで、様々なアレルギー症状
は、花粉等のアレルゲンに感作した個体の肥満細胞上の
ＩｇＥにアレルゲンが結合した場合に肥満細胞から放出
されるヒスタミンが、周りの神経、血管及び筋肉等を刺
激することにより誘発される。アレルギー反応を抑制す
る方法としては、ステロイドホルモンや抗ヒスタミン剤
を用いる方法、ＩｇＥ抗体の産生を抑制する方法等があ
る。しかし、その原因が複雑であり、症状も様々である
アレルギー性の疾患を軽減するためには、医薬品はもと
より、食品、化粧品、医薬部外品等の様々な分野におい
て有用な製品の開発が必要である。

【０００３】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、有効かつ
安全な抗ヒスタミン作用物質を得ることを目的として鋭
意研究を重ねた結果、グアバ葉から抽出して得たエキス
に強力な抗ヒスタミン活性が存在することを見い出し、
本発明を完成するに至った。即ち、本発明は、グアバ葉
を水、親水性溶媒又はこれらの混合物を用いて加圧下に
抽出処理して得られる抗ヒスタミン作用物質を提供する
ものである。本発明はまた、グアバ葉を水、親水性溶媒
又はこれらの混合物を用いて１．１〜２気圧において室
温ないし加熱下に抽出することを特徴とする抗ヒスタミ
ン作用物質の製造法を提供するものである。さらに、本
発明は、上記の抗ヒスタミン作用物質を含有してなる組
成物を提供するものである。そのような組成物には食
品、化粧品、医薬品及び医薬部外品が含まれる。

【０００４】

【発明の実施の形態】グアバ葉から強力な抗ヒスタミン
作用物質を調製するには、グアバ葉に含まれるタンニ
ン、ポリフェノールやサポニン等の複雑な各種成分の抽
出効率が最も良くなる条件を選択して行う。親水性溶媒
としては、エタノールやアセトン等、当該技術分野で通
常用いられる溶媒を用いることができる。これらは単独
又は相互にあるいは水と組み合わせて用いることができ
る。特に好ましい溶媒は水、エタノール又はアセトン、
及びそれらの任意の混合溶媒である。抽出処理は、グア
バ葉エキス中の抗ヒスタミン作用物質の活性が損なわれ
ない限り任意である。抽出条件は選択した溶媒により変
化するが、通常、加圧下、即ち１気圧を超えて約２気圧
程度までの範囲で、室温又は加熱して行う。好ましくは
１．１〜２気圧、より好ましくは１．３〜１．７気圧の
下、使用する溶媒の沸点までの温度で行う。抽出時の圧
力が１気圧以下の場合には抽出エキスの収量が低下し、
該抽出エキスの抗ヒスタミン活性が弱くなる。また２気
圧を超えてもさしつかえないが、抽出効率及び本発明の
所望の効果の点でさらなる利点はない。水の場合、抽出
温度は約３０〜１３０℃、好ましくは４０〜１２０℃で
ある。このような条件下、数十分から数時間、一般に数
十分、具体的には３０〜４０分間で抽出は完了する。グ
アバ葉は、生でも乾燥したものでも良いが、いずれも、
適当な大きさ、約１ｍｍ〜数ｃｍ、平均５ｍｍ角の大き
さに切断する。これを、例えば、圧力式抽出釜に入れ
て、撹拌し、又は撹拌せずに、常法通り抽出する。

【０００５】抽出終了後、抽出液を分離し、残渣や不純
物を除去した後、例えば上昇缶式真空濃縮機にかけて濃
縮し、抽出溶媒を除去する。得られたグアバ葉エキス
は、グアバ葉に含まれる有効成分を高濃度で含有してい
るので、そのまま液状あるいはゲル状の食品に添加した
り、ペレット等の形に加工することができる。あるい
は、クロマトグラフィー等でさらに精製しても良い。本
発明方法で得られたグアバ葉エキスは、原料のグアバ葉
に存在し得る雑菌、特に耐熱芽胞菌の滅菌が完全であ
り、極めて安全性が高く、医薬組成物や食品に含有させ
る上で優れた特性を有する。

【０００６】上記のようにして得られたグアバ葉エキス
は、そのままでも用いることができるが、フリーズドラ
イ（高真空冷凍乾燥機）又はスプレードライヤーによっ
て乾燥して粉末化すると、様々な剤形の医薬組成物に含
有させることができ、また、食品としては、従来の菓
子、飲料、調味料、乳製品、麺類等の配合成分として利
用できる。本発明のエキスは携帯に便利で食し易いペレ
ット状、顆粒、錠剤又はカプセル状に成形するのに好都
合である。本発明方法で得られたグアバ葉エキスは、後
述する試験例に示すごとく、インビボ及びインビトロで
優れた抗ヒスタミン作用を有し、アレルゲンの刺激によ
る肥満細胞からのヒスタミンの遊離を強く抑制すること
が分かった。特に、アトピー性皮膚炎モデルマウスにグ
アバ葉エキスを投与したところ、濃度依存的に即時型反
応、遅発型反応のいずれをも抑制した。また、ヒトのア
トピー性皮膚炎に類似した怒張、発赤、掻痒行動等をも
抑制したことから、本発明のグアバ葉エキスは、食品の
みならず医薬品としても、アトピーの治療又は予防のた
めに有用と考えられる。従って、本発明は、グアバ葉を
水、親水性溶媒、又はこれらの混合物で抽出することを
特徴とする抗ヒスタミン作用物質の製造方法を提供する
ものである。なお、本明細書中、グアバ葉から抽出して
得られた抗ヒスタミン作用を有するグアバ葉エキスを、
抗ヒスタミン作用物質とも呼称する。

【０００７】さらに本発明は、グアバ葉由来の抗ヒスタ
ミン作用物質を含有する組成物を提供するものである。
そのような組成物は、抗アレルギー及び抗アトピー効果
のある、医薬組成物、食品、化粧品又は医薬部外品とし
て有用である。本発明の組成物が食品である場合、グア
バ葉由来の抗ヒスタミン作用物質を食品用の適当な基
剤、原材料と共にペレット、錠剤、カプセル等の形に成
形する。あるいは、チョコレート、クッキー、ゼリー、
キャンディー、グミキャンディー、スナック等の菓子類
や、ソース、だし、味噌、ケチャップ、マヨネーズ、ド
レッシング、ふりかけのような調味料、その他スープ、
漬物、ピザ、麺類、パン類、ヨーグルト、乳製品等の一
般食品にするとよい。また、例えば缶等の容器に入った
茶等のドリンク類に配合することもできる。本発明の組
成物が医薬組成物である場合、製薬的に許容される担
体、賦形剤、希釈剤、基剤、その他の添加剤を用いて、
当業者既知の方法で、経口又は非経口投与のための製剤
に製剤化される。例えば、錠剤、顆粒剤、粉末、カプセ
ル剤等の固形、溶液又は懸濁液等の液体製剤、クリー
ム、軟膏又はパップ剤等の外用剤として製剤化すること
ができる。また、本発明の組成物が化粧品や医薬部外品
である場合、適当な基剤等を用いてクリーム、液体状又
は個体状等の様々な態様の製品とすることができる。具
体的には、乳液、化粧水、口紅、白粉、シャンプー、浴
用剤、石鹸等が例示される。本発明の抗ヒスタミン作用
物質に同様の効果を有する物質を併用してもよく、その
ような物質として、抗アレルギー及び抗アトピー効果が
報告されているシソエキスが挙げられる。シソエキスは
シソの葉から水又は親水性溶媒を用いて常法により抽出
して得られるエキスである。

【０００８】医薬組成物として用いる場合、本発明のグ
アバ葉エキスの１日あたりの適用量は経口投与に際して
は、通常、約１０〜３０，０００ｍｇ、好ましくは約３
０〜３，０００ｍｇ、外用剤の場合には約１０〜３０，
０００ｍｇ、好ましくは約１００ｍｇとすることができ
る。また、食品に添加する場合、当該食品１〜５００ｇ
中に約１０〜３０，０００ｍｇ、好ましくは約５０〜
３，０００ｍｇを添加すればよい。更に、ファンデーシ
ヨン、リンス、石鹸等の化粧品、医薬部外品に添加する
場合、組成物全体の０．１ｗｔ％〜８０ｗｔ％とするこ
とができる。しかしながら、各種組成物中のグアバ葉エ
キスの投与量又は配合量は、対象とする患者又は使用者
の状態、体重又は年齢、或いは剤形製品の形態又は使用
方法等の様々な条件を考慮して調節されねばならず、前
記の数値に限定されるものではない。

【０００９】

【実施例】以下に実施例及び比較例を挙げて本発明をさ
らに詳細に説明する。実施例１乾燥グアバ葉約１２５ｋｇを平均５ｍｍ角に粉砕し、圧
力式抽出釜（容量１５００Ｌ）に入れた。水６００Ｌを
加え、加熱した。抽出釜の内温が１２０℃、圧力が１．
３〜１．５気圧に達した後、３０分間抽出を続けた。加
熱を止め、釜中でろ布を通し、ろ液をフィルタープレス
に通して不純物を除去した。次いで、分離した抽出液を
上昇缶式濃縮機にかけて水を除去し、濃縮グアバエキス
（ブリックス２５）９０Ｌを得た。このエキスをフリー
ズドライ（高真空冷凍乾燥機）又はスプレードライヤー
によって乾燥して粉末化し、薄茶色の粉末グアバ葉抽出
エキス約２２ｋｇを得た。

【００１０】実施例２乾燥グアバ葉約１２５ｋｇを平均５ｍｍ角に粉砕し、圧
力式抽出釜（容量１５００Ｌ）に入れた。９９％エタノ
ール６００Ｌを加え、６０℃、１．３〜１．７気圧下で
３０分間加熱した。加熱を止め、水６００Ｌを加えた。
実施例１と同様に、濃縮、凍結乾燥することにより、薄
茶色の粉末グアバ葉抽出エキス１９ｋｇを得た。

【００１１】実施例３乾燥グアバ葉約１２５ｋｇを平均５ｍｍ角に粉砕し、圧
力式抽出釜（容量１５００Ｌ）に入れた。水−エタノー
ル（１：１）混合物６００Ｌを加え、６０℃、１．３〜
１．７気圧下で３０分間抽出した。加熱を止め、実施例
１と同様に、濃縮、凍結乾燥することにより、薄茶色の
粉末グアバ葉抽出エキス約２１ｋｇを得た。

【００１２】比較例１乾燥グアバ葉約１２５ｋｇを平均５ｍｍ角に粉砕し、圧
力式抽出釜（容量１５００Ｌ）に入れた。９９％エタノ
ール６００Ｌを加え、６０℃、１．０気圧下で３０分間
抽出した。加熱を止め、実施例２と同様にし濃縮、凍結
乾燥することにより、薄茶色の粉末グアバ葉抽出エキス
約１５ｋｇを得た。

【００１３】上記実施例２及び比較例１で調製した各抽
出エキスの抗ヒスタミン活性を下記の方法で試験した。試験例１通常、抗アレルギー性物質の効果を評価するには、Ｉｇ
Ｅを定量してＩｇＥ抗体の産生抑制効果を調べる方法、
あるいはＣｏｍｐｏｕｎｄ４８／８０等を用いて肥満細
胞を刺激し、遊離されるヒスタミンの量を測定する方法
が用いられる。本試験例では、後者の方法を用いた。１．試薬１）ＳｙｒａｇａｉｎｉａｎＢｕｆｆｅｒ：２５ｍＭ
ＰＩＰＥＳ，１１９ｍＭＮａＣｌ，５ｍＭＫＣ
ｌ，５．６ｍＭＧｌｕｃｏｓｅ，０．４ｍＭＭｇＣｌ
_２，４０ｍＭＮａＯＨ（ｐＨ７．２）２）ＳｙｒａｇａｉｎｉａｎＢｕｆｆｅｒＡ：Ｓｙ
ｒａｇａｉｎｉａｎＢｕｆｆｅｒ５０ｍｌ＋１０％
ＢＳＡ０．５ｍｌ＋１ＭＣａＣｌ_２５０μｌ３）ＳｙｒａｇａｉｎｉａｎＢｕｆｆｅｒＢ：Ｓｙ
ｒａｇａｉｎｉａｎＢｕｆｆｅｒ５０ｍｌ＋１ＭＣ
ａＣｌ_２５０μｌ＋ジメチルスルホキシド２５０μｌ４）ＳｙｒａｇａｉｎｉａｎＢｕｆｆｅｒＣ：Ｓｙ
ｒａｇａｉｎｉａｎＢｕｆｆｅｒ５０ｍｌ＋１ＭＣ
ａＣｌ_２５０μｌ５）ＳｙｒａｇａｉｎｉａｎＢｕｆｆｅｒＤ：Ｓｙ
ｒａｇａｉｎｉａｎＢｕｆｆｅｒ５０ｍｌ＋１ＭＣ
ａＣｌ_２５０μｌ＋Ｃｏｍｐｏｕｎｄ４８／８０
（５ｍｇ／ｍｌ）５０μｌ

【００１４】２．肥満細胞の調製１）２５０ｇのラットをエーテル麻酔し、断頭し頚動脈
切断により脱血死させる。２）ＳｙｒａｇａｉｎｉａｎＢｕｆｆｅｒＡ１５
ｍｌを腹腔内に注射する。３）腹部の両側から中心に向けて軽くマッサージを９０
秒間行う。４）腹部を縦に切開し、腹水液をプラスチックの駒込ピ
ペットで採取し、３０ｍｌプラスチック遠心管に回収す
る（３匹分をまとめる）。５）遠心管を２８０×ｇ，１分間遠心し、腹水細胞を沈
殿させて上清を除去する（６〜８％は肥満細胞）。６）沈殿した腹水細胞に２ｍｌのＳｙｒａｇａｉｎｉａ
ｎＢｕｆｆｅｒＡを加え、均一な懸濁液にする。７）別の１０ｍｌプラスチック遠心管に３８％アルブミ
ン溶液４ｍｌを入れ、６）の操作で作成した腹水細胞の
ＳｙｒａｇａｉｎｉａｎＢｕｆｆｅｒＡ懸濁液を重
層する。８）２５分間室温で放置する。９）遠心管を３５０×ｇ、２０分間遠心し、肥満細胞を
沈殿させ上清を除去する。１０）ＳｙｒａｇａｉｎｉａｎＢｕｆｆｅｒＡ３
ｍｌを回収した肥満細胞に加え、３５０×ｇ、２０分間
遠心し、洗浄する（２回）。１１）洗浄した肥満細胞をＳｙｒａｇａｉｎｉａｎＢ
ｕｆｆｅｒＡ１ｍｌに懸濁して実験に用いる。

【００１５】３．肥満細胞の細胞純度及び損傷程度の確
認１）肥満細胞の細胞純度の確認上記２．で調製した肥満細胞を含む溶液０．０５ｍｌに
０．５％トルイジンブルー液（０．１Ｍクエン酸緩衝
液、ｐＨ４．８）０．４５ｍｌを加え、１０分後に赤紫
色に濃染する肥満細胞を血球計算盤を用いて数える。そ
の結果、肥満細胞の数は４．９７×１０^７／ｍｌであっ
た。２）肥満細胞の損傷程度の確認肥満細胞を含む溶液０．０５ｍｌに０．２５％ニグロシ
ン（ＰＢＳ溶液、用時調製）０．４５ｍｌを加え、５分
後に青染する壊死した細胞を血球計算盤を用いて数え
る。その結果、壊死肥満細胞の数は３．０×１０^５／ｍ
ｌであった。上記１）及び２）から生存肥満細胞数は
４．９４×１０^７／ｍｌであることが分かった。

【００１６】４．ヒスタミン遊離阻害活性の測定以下の方法で、実施例２及び比較例１で得た各グアバ葉
エキスの、肥満細胞からのヒスタミン遊離阻害活性を測
定した。１）実施例２で得られたグアバ葉エキス（被検物質）を
ＳｙｒａｇａｉｎｉａｎＢｕｆｆｅｒＢに溶解し
て、エキス濃度１２．５μｇ／ｍｌ、５０．０μｇ／ｍ
ｌ及び２００．０μｇ／ｍｌの試料溶液を調製する。２）別々の試験官に各濃度の試料溶液１００μｌと２．
で調製した細胞浮遊液１００μｌを加え、３７℃で５分
間プレインキュベートする。３）別の２本の試験官にそれぞれＳｙｒａｇａｉｎｉａ
ｎＢｕｆｆｅｒＣ１０μｌ及びＳｙｒａｇａｉｎｉ
ａｎＢｕｆｆｅｒＤ［Ｃｏｍｐｏｕｎｄ４８／８０
（５ｍｇ／ｍｌ）含有］１０μｌを入れる。４）上記３）の２本の試験官に２）の溶液をそれぞれ４
０μｌづつ加えて３７℃で１０分間インキュベートした
後、氷水中に浸して反応を停止する。５）４℃で１，５００×ｇ、４分間遠心し、上清を３０
μｌ分取して０．１Ｍ塩酸溶液を３０μｌ加えて撹拌し
た後、その２０μｌをＨＰＬＣに注入し、ヒスタミン標
準液［５０ｎｇ／２０μｌ（０．１ＮＨＣｌ）］を標
準物質として用い、以下の条件で測定してヒスタミンを
定量する。カラム：ＳｈｏｄｅｘＡｓａｈｉｐａｋＯＤＳ−５
０４Ｅ，２５０ｍｍｘ４．６ｍｍＩ．Ｄ．移動相：アセトニトリル＋５０ｍＭホウ酸緩衝液（四ホ
ウ酸ナトリウム，ｐＨ９．９）（１８：８２，ｖ／ｖ，
１ｍＭｏ−フタルアルデヒド／Ｎ−アセチルシステイ
ン含有）カラム温度：４０℃ 流量：０．５ｍｌ／ｍｉｎ検出：ＥＸ：３３０ｎｍ，ＥＭ：４３０ｎｍインジェクション量：２０μｌ上記の工程において、試料溶液を添加せずに同様に測定
し、対照１及び対照２とする。次いで、下記の数式に従
って、各濃度のグアバ葉エキス溶液につき、肥満細胞か
らのヒスタミン遊離阻害（％）を算出した。

【数１】遊離阻害率（％）＝１００×［（Ｃ−Ｄ）−
（Ａ−Ｂ）］／（Ａ−Ｂ）Ａ：被検物質非添加、Ｃｏｍｐｏｕｎｄ４８／８０添加Ｂ：被検物質非添加、Ｃｏｍｐｏｕｎｄ４８／８０非添
加Ｃ：被検物質添加、Ｃｏｍｐｏｕｎｄ４８／８０添加Ｄ：被検物質添加、Ｃｏｍｐｏｕｎｄ４８／８０非添加結果を表１及び図１に示す。なお比較例１で得られたグ
アバ葉エキスについても前記同様の方法で試験し、ヒス
タミン遊離阻害（％）を算出した。この結果を表２に示
す。

【００１７】表１グアバ葉エキス（実施例２）のヒス
タミン遊離阻害活性 ☆

【表１】

【００１８】表２グアバ葉エキス（比較例１）のヒス
タミン遊離阻害活性 ☆

【表２】これらの結果から、本発明のグアバ葉エキスが、強力な
ヒスタミン遊離阻害活性を有することが明らかとなっ
た。

【００１９】試験例２実施例３で調製したグアバ葉エキスのインビボでの抗ヒ
スタミン活性を以下の方法で調べた。［条件］１．動物：４週令雌性ＢＡＬＢ／ｃマウス（日本クレ
ア）２．飼育条件：設定温度２５±１℃、５５±５％；空調
７０％リターンエア方式；照明時間１２時間自動点灯・
消灯（Ａ．Ｍ．８：００〜Ｐ．Ｍ．８：００）；飼育設
備プラスチックケージ；飼料滅菌した固形飼料ＣＡ−１
（日本クレア（株））；給水水道水をフィルター濾過
後、自動給水装置で給水。

【００２０】［方法］（１）動物の体重測定後、１群あたり８頭づつ、４群に
分け、試験群の３群（Ｇ５０群、Ｇ２００群及びＧ５０
０群）の各動物には、体重測定をした後、被検物質とし
て、実施例３で調製したグアバ葉エキス粉末２５ｍｇ、
１００ｍｇ、及び２５０ｍｇを蒸留水５ｍｌに加えて撹
拌して得た懸濁液（０．１ｍｌ／１０ｇ体重）を３０日
間連続投与した。即ち、Ｇ５０群の投与量は５０ｍｇ／
ｋｇ、Ｇ２００群の投与量は２００ｍｇ／ｋｇ、そして
Ｇ５００群の投与量は５００ｍｇ／ｋｇである。対照群
のマウスには、蒸留水を同様に投与した。なお、投与期
間中の給餌、給水は自由摂取とした。（２）ＩｇＥ抗体による皮膚反応の誘発上記（１）に記載のごとく処理した各群のマウスに、抗
ＤＮＰＩｇＥモノクローナル抗体（ＰＣＡ力価×
２，５６０）０．５ｍｌを尾静脈内投与し、受動的に感
作した。１時間後、耳介に０．１５％ＤＮＦＢアセ
トン−オリーブ油（４：１）溶液を塗布して反応を惹起
させ、その１、４、２４、４８時間後に耳介の厚さを測
定した。成績は、耳介の反応前データに対する測定時の
耳介の厚さの増加率で示した。なお、耳介測定期間中、
グアバ葉エキスは投与しない。（３）試験終了時における生化学検査（血清ＬＤＨ，Ｌ
ＤＨアイソザイム）並びに剖検上記（２）において、４８時間目の耳介測定終了後、２
４時間絶食させて血液を採取し、剖検を行った。血液は
血清分離して測定した。

【００２１】［結果］結果は、平均値±標準偏差（平均
値±ＳＥＭ）で表し、有意差検定はＳｔｕｄｅｎｔ’ｓ
−ｔを用いた。（１）グアバ葉投与期間中、Ｇ５０，Ｇ２００，Ｇ５０
０群では、１５日目以降から、対照群に比較して、体重
増加の抑制効果が観察された。特にＧ５００群では、２
５、３０日目に対照群に比較して有意な体重増加の抑制
効果が認められた（表３参照）。表３グアバ葉エキス投与マウスの体重変化 ☆

【表３】＊：ｐ＜０．０５試験終了時の剖検の結果、対照群との比較でＧ５００群
に明らかな腎周囲及び子宮周囲脂肪の減少が観察され
た。このように、対照群の動物に比較して臓器付着脂肪
量が少なかったことから、表３の結果は、グアバ葉エキ
ス中に、脂質代謝に影響を及ぼす成分が含まれているこ
とを示唆するものである。

【００２２】（２）耳介の厚さ測定の結果を表４及び図
２に示す。図２において、縦軸は耳介の厚み（×１０−
^２ｍｍ±ＳＥＭ）、横軸は時間を表す。表４グアバ葉
エキス投与マウスの耳介厚の変化（耳介厚＝ｍｍ（±Ｓ
ＥＭ）） ☆

【表４】＊：ｐ＜０．０５対照群では、１時間後の即時型反応と２４時間後の遅発
型反応とを示した（二峰性反応）が、Ｇ５０群及びＧ２
００群では４時間、Ｇ５００群では１時間を各々ピーク
とする単峰性反応が観察され、遅発型に相当する反応は
認められなかった（図２参照）。特に、Ｇ５００群で
は、即時型反応としての初期障害も軽度で、２４時間後
には回復が確認された。状態観察からは、各群に尾静脈
の怒張、前肢並びに後肢の発赤、掻痒行動の症状が現れ
たものの、症状の程度には、明らかに群間差が見られ
た。対照群、Ｇ５０群では全ての症状が投与直後より顕
著に現れ、四肢の発赤、強い掻痒行動はＤＮＦＢ塗布４
時間後まで、尾静脈の怒張については２４時間後まで持
続していた。一方、Ｇ２００群及びＧ５００群の両群で
は、同様の症状を観察したが、尾静脈の怒張、四肢の発
赤症状は軽度で、強い掻痒行動は見られず、ＤＮＦＢ塗
布約３０分後には回復していた。

【００２３】試験終了時における生化学検査測定結果を
表５に示す。表５血清ＬＤＨ濃度 ☆

【表５】＊：ｐ＜０．０１対照群及びＧ５０群では正常値より高いが、Ｇ２００群
及びＧ５００群では３０５．４±３５．５ＩＵ／Ｌ，２
６０．０±３８．２ＩＵ／Ｌと正常範囲であったことか
ら、両群ともにＩｇＥ抗体による炎症の広がりを抑制し
たものと考えられる。また、アトピー性皮膚炎で特異的
に上昇すると言われているＬＤＨ_５（アイソザイム）の
分画比では、対照群＞Ｇ５０群＞Ｇ２００群＞Ｇ５００
群と明らかなグアバ葉エキスの濃度依存性が認められ
た。（データ図示せず。）このグアバ葉エキスの抗アトピー効果は、明らかに濃度
依存性であり、その持続時間は、およそ４８時間と推定
された。対照動物で観察された二峰性皮膚反応は、ｌａ
ｔｅｐｈａｓｅｒｅａｃｔｉｏｎ（ＬＰＲ）に相当
し、ＩｇＥ特異的かつ肥満細胞依存性である（Ｋａｔａ
ｙａｍａ，Ｉ．ら、Ｉｎｔ．Ａｒｃｈ．Ａｌｌｅｒｇｙ
Ｉｍｍｕｎｏｌ．９３：１４８−１５４（１９９
０）；片山一郎外、ＢＩＯＴＨＥＲＡＰＹ７（７）：１
０２９−１０３５（１９９３））。ＬＰＲの誘因機序に
ついては、マウスに投与されたＩｇＥ抗体が組織中の肥
満細胞のＦｃ受容体と結合して抗原により架橋され、ケ
ミカルメディエーターや炎症細胞遊走因子を放出するこ
とで、炎症細胞の浸潤を引き起こすと考えられている
（音山数宣外、北里医学、２５：２４−３０（１９９
５）；西岡清、アトピー性皮膚炎、医薬ジャーナル社、
ｐ５３，ｐ５７−Ｐ６３（１９９４））。このことか
ら、グアバ葉エキスは上記のカスケードのどこかをブロ
ックする作用を有することが予測される。さらに、即時
型、遅発型ともに抑制していることから、グアバ葉エキ
スは、アトピー性皮膚炎の初期段階のみならず炎症が進
行した状態での治療にも有用であることが期待される。
また、ヒトアトピー性皮膚炎の場合、具体的な病変形成
における細胞間相互作用、伝達物質の解析は十分になさ
れていないが、その発症にはＩ型とＩＶ型のアレルギー
反応の関与、つまりＩｇＥ抗体、肥満細胞、リンパ球の
関与が認められている（山村優一、最新内科学大系２
３、中山書店、ｐ３−ｐ１５；Ｍｉｈｍ，Ｍ．Ｃ．Ｊ
ｒ．ら、Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．，６
７：３０５−３１２（１９７６）；Ｕｅｈａｒａ，Ｍ．
ら、Ａｒｃｈ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．，１１２：９５０−
９５４（１９７６）；Ｂｒｕｙｎｚｅｅｌ−Ｋｏｏｍｅ
ｎ，Ｃ．Ａ．Ｆ．Ｍ．ら、Ｊ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．，１
１８：２２９−２３８（１９８８））。従って、マウス
で得られた上記の結果はヒトにも適用可能であると考え
られる。

【００２４】実施例４抗アレルギー用食品１成分量実施例１で得たグアバ葉抽出エキス末３．３３４ｋｇビタミンＢ_１０．２ｋｇビタミンＢ_２０．２ｋｇビタミンＢ_６０．２ｋｇデキストリン（基剤）^１）５．７６６ｋｇ第３りん酸カルシウム（基剤）０．３ｋｇ注１）：松谷化学製、商品名パインフロー上記成分を配合機に入れ、１０分間撹拌し、取り出した
後、直打式打錠機にかけて直径６ｍｍ、長さ４ｍｍ、重
量１５０ｍｇのペレットを作った。これにセラックコー
ティングマシーンでセラックによる薄い膜でコーティン
グし、製品とした。このペレット１個あたりグアバ葉エ
キス末５０ｍｇを含有する。なお、この配合物は、造粒
機にかけて顆粒にしてもよい。

【００２５】実施例５抗アレルギー用食品２成分量実施例１で得たグアバ葉抽出エキス末４．０ｋｇシソの葉エキス^１）１．０ｋｇビタミンＢ_１０．２ｋｇビタミンＢ_２０．２ｋｇビタミンＢ_６０．２ｋｇデキストリン（基剤）^２）４．１ｋｇ第３りん酸カルシウム（基剤）０．３ｋｇ注１）：アミノアップ社製、商品名シソ抽出液注２）：松谷化学製、商品名パインフロー上記成分を実施例４と同様に処理し直径６ｍｍ、長さ４
ｍｍ、重量１５０ｍｇのペレット製品とした。このペレ
ット１個あたりグアバ葉エキス末６０ｍｇ、シソエキス
１５ｍｇ、ビタミンＢ_１３ｍｇ、ビタミンＢ_２３ｍｇ及
びビタミンＢ_６３ｍｇを含有する。この配合物も顆粒に
することができる。

【００２６】実施例６抗アレルギー用食品３ショートニング３００ｇ、牛乳２０ｇ、砂糖５０ｇを泡
立て器でよく混合し、これに卵６０ｇを少しずつ加えて
さらによく混ぜ合わせた。別に小麦粉３００ｇ、ベーキ
ングパウダー１ｇ及び実施例１で得られたグアバ葉エキ
ス末１０．５ｇをよく混合し、先の混ぜ合わせたものに
加えてさらによく混合した。冷蔵庫で３０分放置した
後、約７０に分割して適当な型に成型し、約１７０℃の
オーブンで１８〜２５分間焼きクッキーを作成した。こ
のクッキーは、グアバ葉エキス末を配合せずに同様に作
成したクッキーに比べて風味及び食感になんら遜色ない
ものであった。このクッキーを１個を食することで、グ
アバ葉エキス１５０ｍｇを食したことになる。

【００２７】実施例７抗アレルキー用浴用剤（粉末タ
イプ）硫酸ナトリウム８ｇ、炭酸水素ナトリウム１０ｇ、ホウ
砂０．４ｇ、色素及び香料を適量配合し、実施例３で得
られたグアバ葉エキス１．６ｇを加えて十分混合し、袋
に入れ、通常の家庭用浴槽１回分の浴用剤とした。

【００２８】実施例８抗アレルギー用クリーム精製水６９．５ｇに、プロピレングリコール１０ｇ及び
実施例２で得られたグアバ葉エキス１ｇを加え、７０℃
まで加熱した。これにステアリン酸１４ｇ、ワセリン２
ｇ、ステアリン酸モノグリセリド２．５ｇ、ポリオキシ
エチレンソルビタンモノステアリン酸（２０ＥＯ）１．
５ｇ、香料０．５ｇを加え、７０℃でホモミキサーで十
分に撹拌し、均一に乳化した後、撹拌しながら３０℃に
冷却してクリームを得た。

【００２９】実施例９錠剤成分重量（ｍｇ／錠）実施例３で得たグアバ葉エキス末９５無水乳糖５０粉末還元麦芽糖水飴４０蔗糖脂肪酸エステル１０第三リン酸カルシウム５上記成分を混合し、それぞれ２００ｍｇの錠剤に打錠し
た。

【００３０】実施例１０カプセル剤成分重量（ｍｇ／カプセル）実施例３で得たグアバ葉エキス末６０ビタミンＥ３０サフラワー油１８０ミツロウ３０上記成分の混合物を通常の封入機を用いて、サイズ５の
オバール型ゼラチンカプセルに充填し、各々最終混合物
３００ｍｇを含有するゼラチン軟カプセル剤を得た。

【００３１】

【発明の効果】本発明によれば、グアバ葉を原料とし
て、簡便な手段によって強力な抗ヒスタミン作用物質を
含むグアバ葉エキスを高収量で製造できる。また、本発
明の抗ヒスタミン作用物質物質を配合したアレルギー症
状やアトピー症状の改善に有用な食品、化粧品、医薬
品、医薬部外品等の組成物を提供できる。

【図面の簡単な説明】

【図１】グアバエキスのラット肥満細胞脱顆粒に伴う
ヒスタミン遊離に及ぼす影響を示すグラフ。

【図２】グアバエキス投与マウスの耳介の厚さの変化
を示すグラフ。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号ＦＩＡ２３Ｌ 2/52 Ａ２３Ｌ 2/38 Ｃ 2/38 Ａ６１Ｋ 7/00 ＫＡ６１Ｋ 7/00 7/48 7/48 Ｃ０７Ｇ 17/00 ＺＣ０７Ｇ 17/00 Ａ２１Ｄ 2/00 // Ａ２１Ｄ 2/00 Ａ２３Ｌ 2/00 Ｆ

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】グアバ葉を水、親水性溶媒又はこれらの
混合物を用いて加圧下に抽出処理して得られる抗ヒスタ
ミン作用物質。
【請求項２】抽出処理が、１．１〜２気圧、かつ室温
ないし加熱下で行われるものである請求項１に記載の抗
ヒスタミン作用物質。
【請求項３】グアバ葉を水、親水性溶媒又はこれらの
混合物を用いて１．１〜２気圧において室温ないし加熱
下に抽出することを特徴とする抗ヒスタミン作用物質の
製造法。
【請求項４】抽出時の気圧が、１．３〜１．７気圧、
温度が室温〜１３０℃である請求項３に記載の製造法。
【請求項５】請求項１又は２に記載の抗ヒスタミン作
用物質を含有してなる組成物。
【請求項６】さらにシソ葉のエキスを併せ含有してな
るものである請求項５に記載の組成物。
【請求項７】組成物が食品、化粧品、医薬品及び医薬
部外品からなる群から選択されるものである請求項５に
記載の組成物。
【請求項８】食品が菓子、飲料、調味料、乳製品及び
麺類からなる群から選択されるものである請求項７に記
載の組成物。