JPH0987295A - ２’−デオキシ−２’−メチリデン−４’−チオピリミジンヌクレオシド及び抗ウイルス剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 抗ウイルス作用を有する新規な化合物及び
該化合物を有効成分として含有する抗ウイルス剤を提供
する。 【解決手段】 式［Ｉ］で表される２’−デオキシ−
２’−メチリデン−４’−チオピリミジンヌクレオシド
化合物及びそれを有効成分として含有する抗ウイルス剤
に関する。 【化１】 （式中、Ｒ₁はアミノ基または水酸基を示し、Ｒ₂は水
素、ハロゲン、アルキル、ハロゲン化アルキル、アルケ
ニル、ハロゲン化アルケニルまたはアルキニルを示し、
Ｒ₃は水素またはリン酸残基を示す。）

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術】本発明は、２’−デオキシ−２’
−メチリデン−４’−チオピリミジンヌクレオシドおよ
び該化合物を有効成分として含有する抗ウイルス剤に関
するものである。

【０００２】

【従来の技術】近年、ウイルス感染症に関し様々な研究
がなされ、その治療に用いられる薬剤が開発されてい
る。ウイルス感染症の１つであるヘルペスウイルスによ
る感染は、健常人に発症した場合は自然治癒する比較的
マイルドな疾患であるが、癌、臓器移植、エイズ患者な
ど免疫機能の低下している状態では重篤な症状に陥りや
すい。このようなヘルペスウイルスに対する治療薬とし
て、現在、アシクロビル、ガンシクロビル、ビダラビン
などが使われている。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】しかしながら、これら
の抗ウイルス剤は治療対象のウイルスに対する有効性や
選択性が充分であるとはいえず、免疫機能の低下してい
る患者にとっては、より有効性が高く、かつ選択性の高
い抗ウイルス剤の開発が望まれていた。すなわち、本願
発明の目的は、抗ウイルス作用を有する新規な化合物及
び該化合物を有効成分として含有する抗ウイルス剤を提
供することにある。

【０００４】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、上述の目
的を達成するために鋭意研究を重ねた結果、２’−デオ
キシ−２’−メチリデン−４’−チオピリミジンヌクレ
オシド化合物が優れた抗ヘルペスウイルス作用を有する
ことを見いだし、本発明を完成させた。すなわち、本発
明は、式［Ｉ］で表される２’−デオキシ−２’−メチ
リデン−４’−チオピリミジンヌクレオシド化合物に関
するものである。また、本発明は、上記２’−デオキシ
−２’−メチリデン−４’−チオピリミジンヌクレオシ
ド化合物を有効成分として含有する抗ウイルス剤に関す
るものである。

【０００５】

【化２】

【０００６】（式中、Ｒ₁はアミノ基または水酸基を示
し、Ｒ₂は水素、ハロゲン、アルキル、ハロゲン化アル
キル、アルケニル、ハロゲン化アルケニルまたはアルキ
ニルを示し、Ｒ₃は水素またはリン酸残基を示す。）

【０００７】

【発明の実施の形態】以下、本発明について詳述する。 （１）本発明化合物 本発明の化合物は、前記式［Ｉ］で表されるものであ
る。式中、Ｒ₂で表されるハロゲンとしては、フルオ
ロ、ヨード、ブロモ、クロロを、アルキルとしては、メ
チル、エチル、プロピル、イソプロピルなどの炭素数１
〜５程度の低級アルキルを、ハロゲン化アルキルとして
は、フルオロメチル、トリフルオロメチル、クロロエチ
ル、ブロモプロピルなどの炭素数１〜５程度のハロゲン
化低級アルキルを、アルケニルとしては、ビニル、アリ
ルなどの炭素数１〜５程度のアルケニルを、ハロゲン化
アルケニルとしては、ブロモビニル、クロロビニルなど
の炭素数１〜５程度のハロゲン化アルケニルを、アルキ
ニルとしては、エチニル、プロピニル、ブチニルなどの
炭素数１〜５程度のアルキニルをそれぞれ例示すること
ができる。Ｒ₃で表されるリン酸残基としては、通常の
モノリン酸残基、ジリン酸残基、トリリン酸残基を例示
することができる。

【０００８】式［Ｉ］で表される本発明化合物は、塩、
水和物または溶媒和物の形態であってもよい。そのよう
な塩としては、無機酸（塩酸、硫酸、リン酸）または有
機酸（フマル酸、酒石酸、コハク酸）との酸付加塩、ナ
トリウム塩、カリウム塩、リチウム塩、カルシウム塩な
どの金属塩またはアンモニウム塩などを例示することが
できる。水和物または溶媒和物としては、本発明化合物
またはその塩１分子に対し、０．１〜３．０分子の水ま
たは溶媒が付着したものを例示することができる。式
［Ｉ］の化合物において、Ｒ₁が水酸基である場合、そ
の互変異性体として、式［ＩＩ］で表される化合物も本
発明化合物に包含される。

【０００９】

【化３】

【００１０】（式中、Ｒ₂、Ｒ₃は前記と同意義。） 代表的な本発明化合物としては、以下のようなものを例
示することができる。 ２’−デオキシ−２’−メチリデン−４’−チオシチジ
ン ２’−デオキシ−２’−メチリデン−４’−チオウリジ
ン ２’−デオキシ−２’−メチリデン−４’−チオチミジ
ン ２’−デオキシ−２’−メチリデン−４’−チオ−５−
エチルウリジン ２’−デオキシ−２’−メチリデン−４’−チオ−５−
プロピルウリジン ２’−デオキシ−２’−メチリデン−４’−チオ−５−
フルオロウリジン ２’−デオキシ−２’−メチリデン−４’−チオ−５−
フルオロシチジン ２’−デオキシ−２’−メチリデン−４’−チオ−５−
ヨードウリジン ２’−デオキシ−２’−メチリデン−４’−チオ−５−
トリフルオロメチルウリジン ２’−デオキシ−２’−メチリデン−４’−チオ−５−
クロロエチルウリジン ２’−デオキシ−２’−メチリデン−４’−チオ−５−
ビニルウリジン ２’−デオキシ−２’−メチリデン−４’−チオ−５−
ブロモビニルウリジン ２’−デオキシ−２’−メチリデン−４’−チオ−５−
クロロビニルウリジン ２’−デオキシ−２’−メチリデン−４’−チオ−５−
プロピニルウリジン

【００１１】（２）本発明化合物の製造法 本発明の化合物は、以下に説明する４つの工程により製
造することができる。 第１工程；第１工程は、式［ＩＩＩ］で表される化合物
の２位および５位の水酸基にスルホニル基を導入後、硫
化物と反応させて式［ＩＶ］で表される化合物を得る工
程である。

【００１２】

【化４】

【００１３】（式中、Ｒ₄はアルキル基、Ｒ₅は水酸基の
保護基を示す。） 本発明化合物の製造における原料化合物は、式［ＩＩ
Ｉ］で表されるキシロース誘導体（以下、原料化合物と
称することもある）である。Ｒ₄で表されるアルキル基
としては、メチル、エチルなどの炭素数１〜３程度の低
級アルキル基およびベンジル、メトキシベンジルなどの
置換もしくは非置換のベンジル基を挙げることができ
る。Ｒ₅で表される水酸基の保護基としては、通常使用
されるものであればよく、アルキル基、シリル基、アシ
ル基などを例示することができる。より具体的に、アル
キル基としてはＲ₄と同様なものを挙げることができ
る。また、シリル基としてはｔ−ブチルジメチルシリ
ル、ｔ−ブチルジフェニルシリルなどを、アシル基とし
てはアセチル、ベンゾイル、ピバロイルなどをそれぞれ
例示することができる。このような原料化合物は、公知
の方法（Tetrahedron,37,2379-2382(1981)など）により
調製することができる。

【００１４】式［ＩＩＩ］で表される化合物の２位およ
び５位の水酸基に導入するスルホニル基としては、メシ
ル基またはトシル基を例示することができる。メシル化
およびトシル化反応は、常法に従って行えばよい。たと
えば、メシル化反応は、トリエチルアミンなどの塩基存
在下、塩化メチレン、アセトニトリル、ジメチルホルム
アミド、ピリジンなどの有機溶媒中（ただし、ピリジン
を使用する場合には、必ずしもトリエチルアミンなどの
塩基を共存させなくてもよい。）、原料化合物１モルに
対して２〜１０モル、好ましくは２〜４モルのハロゲン
化メシル（たとえば、塩化メシルなど）を用い、原料化
合物とハロゲン化メシルとを０〜１００℃で０．５〜５
時間程度攪拌反応させることにより実施することができ
る。また、反応は、アルゴン、窒素などの不活性ガス雰
囲気下で行うのが好ましい。

【００１５】引き続き、このようにして得られた化合物
と硫化物とを反応させ、式［ＩＶ］で表される化合物を
得る。反応に使用する硫化物としては、硫化ナトリウ
ム、硫化カリウム等の硫化金属（好ましくは、硫化アル
カリ金属）であれば特に限定されない。反応は、必要に
応じてアルゴンまたは窒素などの不活性ガス雰囲気下、
ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシドなどの有
機溶媒中、原料化合物１モルに対して１〜２０モルの硫
化物を使用し、室温〜１５０℃で０．５〜５時間程度攪
拌反応させることにより実施することができる。

【００１６】第２工程；第２工程は、式［ＩＶ］で表さ
れる化合物のラクトール環を加水分解後、還元して式
［Ｖ］で表される化合物を得る工程である。

【００１７】

【化５】

【００１８】（式中、Ｒ₄、Ｒ₅は前記と同意義。） 加水分解法としては、式［ＩＶ］で表される化合物のラ
クトール環を加水分解できる方法であれば特に制限され
るものではないが、特に、酸触媒（塩酸、硫酸等の無機
酸、酢酸、トリフルオロ酢酸等の有機酸）を用いる加水
分解法が好ましい。加水分解反応は、テトラヒドロフラ
ン、ジオキサンなどの水溶性エーテル系溶媒中、上記酸
触媒存在下、室温〜１００℃で０．５〜５時間程度攪拌
反応させることにより実施することができる。

【００１９】次に、このようにして得られた化合物を還
元反応に付して式［Ｖ］で表される化合物を得る。還元
剤としては、テトラヒドロホウ酸ナトリウム（水素化ホ
ウ素ナトリウム）、テトラヒドロホウ酸カリウムなどの
テトラヒドロホウ酸塩を使用することができる。還元反
応は、メタノールなどのアルコール溶媒中、式［ＩＶ］
で表される化合物１モルに対し、還元剤０．２〜１０モ
ルを用い、０〜１００℃で０．５〜３時間程度攪拌反応
させることにより実施できる。

【００２０】第３工程；第３工程は、式［Ｖ］で表され
る化合物の５位水酸基を保護した後、酸化反応およびウ
ィッティッヒ反応に付して式［ＶＩ］で表される化合物
を得る工程である。

【００２１】

【化６】

【００２２】（式中、Ｒ₅は前記と同意義、Ｒ₆は水酸基
の保護基を示す。〕 ５位水酸基の保護基としては、水酸基の保護基として常
用されているものであればよく、ベンジル、メトキシベ
ンジル、ジメトキシベンジルなどのベンジル系保護基、
ｔ−ブチルジメチルシリル、ｔ−ブチルジフェニルシリ
ル、トリエチルシリルなどのシリル系保護基、メトキシ
メチル、メトキシエトキシエチル、テトラヒドロフラ
ン、テトラヒドロピランなどのエーテル系保護基、トリ
チル、モノメトキシトリチル、ジメトキシトリチルなど
のトリチル系保護基、アセチル、ベンゾイル、ピバロイ
ルなどのアシル基などを例示することができる。また、
３位水酸基の保護基を除去し、テトライソプロピルジシ
ロキシル基などの２つの水酸基を同時に保護できる保護
基を用いての３位および５位の水酸基を保護してもかま
わない。

【００２３】保護基の導入は、使用する保護基で汎用さ
れている方法に準じて行えばよい。たとえば、シリル系
保護基を導入する場合、ピリジン、ピコリン、ジメチル
アミノピリジン、ジメチルホルムアミド、アセトニトリ
ル、塩化メチレンなどの単独または混合溶媒中、式
［Ｖ］の化合物１モルに対し、t−ブチルジフェニルシ
リルクロリドなどのシリル化剤を１〜１０モル、必要に
応じてイミダゾールなどの塩基触媒を１〜５モル加え、
−１０〜５０℃で１〜３６時間反応させることにより保
護基を導入することができる。

【００２４】このようにして得られた化合物を酸化反応
およびウィッティッヒ反応に付して式［ＶＩ］で表され
る化合物を得る。酸化反応に使用する酸化剤としては、
無水クロム酸、ピリジンおよび無水酢酸の複合試薬、ピ
リジウムクロロクロメート、ピリジウムジクロメートな
どのクロム系酸化剤、デス−マーチン（Dess−Martin）
試薬などの高原子価ヨウ素酸化剤、ジメチルスルホキシ
ドと無水酢酸、塩化オキザリルまたはジシクロヘキシカ
ルボジイミドとを組み合わせて用いるジメチルスルホキ
シド（ＤＭＳＯ）系酸化剤などを列挙することができ
る。酸化反応は、たとえば、ジメチルスルホキシドと無
水酢酸とを用いて行なう場合、ジメチルスルホキシド
中、必要によりアルゴンまたは窒素などの不活性ガス気
流下、式［Ｖ］で表される化合物１モルに対して無水酢
酸２〜５００モル、好ましくは５〜５０モルを用い、反
応温度０〜５０℃で１〜２４時間程度攪拌反応させるこ
とにより実施できる。

【００２５】ウィッティッヒ反応に使用するイリドとし
ては、メチレントリフェニルホスホランを使用すること
ができる。このようなリンイリドは、トリフェニルホス
フィンから調製したトリフェニルホスホニウム塩（好ま
しくは、臭化物）とブチルリチウム、水素化ナトリウ
ム、カリウムt−ブトキシドなどの塩基（好ましくは、
ブチルリチウム）から常法に従って調製し、これを反応
に使用する。ウィッティヒ反応は、テトラヒドロフラ
ン、エーテル、ジメトキシメタン、ジメチルスルホキシ
ドなどの単独または混合溶媒中（好ましくはテトラヒド
ロフラン中）、必要によりアルゴンまたは窒素などの不
活性ガス気流下、式［Ｖ］で表される化合物１モルに対
して１〜１０モルのリンイリドを用い、反応温度−２０
〜１００℃で１〜２４時間程度攪拌反応させることによ
り実施できる。

【００２６】第４工程；本発明の第４工程は、式［Ｖ
Ｉ］で表される化合物と塩基類とを縮合反応に付し、糖
部水酸基の保護基を除去後、所望により糖部５’位水酸
基にリン酸残基を導入して式［Ｉ］で表される化合物を
得る工程である。

【００２７】

【化７】

【００２８】（式中、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₅およびＲ₆は
前記と同意義。） 式［ＶＩ］で表される化合物と塩基類との縮合は、式
［ＶＩ］の化合物を適当な酸化剤を用いてスルホキシド
に誘導後、ルイス酸触媒存在下、これをシリル化した塩
基類とのプンメラー（Pummerer）型グリコシル化反応に
付すことにより行うことができる。スルホキシドへの誘
導は常法に従って行えばよく、たとえば、塩化メチレ
ン、アルコール（たとえば、メタノールなど）などの有
機溶媒中、必要によりアルゴンあるいは窒素などの不活
性ガス気流下、式［ＶＩ］で表される化合物１モルに対
してｍ−クロロ過安息香酸、メタ過ヨウ素酸ナトリウム
などの酸化剤０．５〜５モル使用し、−１００〜１０℃
で１０分〜２時間程度反応させることにより実施でき
る。

【００２９】プンメラー型グリコシル化反応に使用する
ルイス酸としては、トリフルオロメタンスルホン酸トリ
メチルシリル（トリメチルシリルトリフラート）、四塩
化すず、四塩化チタン、塩化亜鉛、ヨウ化亜鉛、三フッ
化ホウ素などが例示される。プンメラー型グリコシル化
反応は、塩化メチレン、クロロホルム、ジクロロエタ
ン、アセトニトリル、ジメチルホルムアミドなどの有機
溶媒中、必要によりアルゴンあるいは窒素などの不活性
ガス気流下、上記スルホキシド１モルに対して常法によ
りシリル化した塩基類１〜１０モルとルイス酸０.１〜
１０モルとを用い、−５０〜１００℃で１０分〜２時間
程度反応させることにより実施することができる。

【００３０】次に、このようにして得られたヌクレオシ
ドの糖部３’位および５’位水酸基の保護基を除去して
Ｒ₃が水素の化合物を得る。水酸基の保護基の脱保護
は、使用した保護基に応じて酸性加水分解、アルカリ性
加水分解、フッ化テトラブチルアンモニウム処理、接触
還元などの通常の処理方法から適宜選択して行なえばよ
い。特に、保護基がベンジル系保護基の場合には、三塩
化ホウ素を用いる脱保護法が好ましく、たとえば、塩化
メチレンなどの有機溶媒中、必要によりアルゴンまたは
窒素などの不活性ガス気流下、−１００℃〜室温で０．
５〜２４時間程度反応させればよい。なお、Ｒ₅で表さ
れる保護基はプンメラー型グリコシル化反応においては
必ずしも必要ではないため、該反応を行なう前、たとえ
ば式［ＶＩ］の化合物をスルホキシドに誘導する前に脱
保護しておいても差し支えない。

【００３１】また、Ｒ₃がモノリン酸残基、ジリン酸残
基などのリン酸残基である化合物を得る場合、上記で得
られたＲ₃が水素の化合物とオキシ塩化リン、テトラク
ロロピロリン酸などのヌクレオシドの５’位の選択的な
リン酸化に使用されるリン酸化剤とを反応させて、常法
により遊離酸型または塩型の目的化合物を得ることがで
きる。本発明の目的化合物および合成中間体は、通常の
単離精製法（たとえば、イオン交換カラムクロマトグラ
フィー、吸着カラムクロマトグラフィーなどの各種クロ
マトグラフィー法再結晶法など）を適宜組み合せて単離
精製することができる。

【００３２】（３）用途 本発明化合物は、優れた抗ウイルス作用を有することか
ら、これらを有効成分とする本発明薬剤は、ウイルスに
感染したまたは感染する恐れのある人の予防または治療
に有用である。対象のウイルスとしては、例えばヘルペ
スウイルス科に属する単純ヘルペスウイルス１型（以
下、ＨＳＶ−１と称す）、単純ヘルペスウイルス２型
（以下、ＨＳＶ−２と称す）、ヒトサイトメガロウイル
ス（以下、ＨＣＭＶと称す）、水痘帯状庖疹ウイルス
（以下、ＶＺＶと称す）などをあげることができる。

【００３３】本発明薬剤の有効成分である式［Ｉ］の化
合物の投与量は、患者の年齢、体重、疾病、患者の重篤
度、薬物による忍容性、投与方法などにより異なり、こ
れらの条件を総合した上で適宜決定されるものである
が、通常１日当たり０．００１〜１０００ｍｇ／ｋｇ体
重、好ましくは０．１〜１００ｍｇ／ｋｇ体重の範囲内
から選ばれ、一回または複数回に分けて投与される。投
与方法は、経口、非経口、経腸、局所投与などのいずれ
の経路によっても投与することができる。

【００３４】本発明の化合物の製剤化に際しては、通常
使用される製剤用担体、賦形剤、その他の添加剤を含む
組成物として使用するのが普通である。担体としては、
乳糖、カオリン、ショ糖、結晶セルロース、コーンスタ
ーチ、タルク、寒天、ペクチン、ステアリン酸、ステア
リン酸マグネシウム、レシチン、塩化ナトリウムなどの
個体状担体、グリセリン、落花生油、ポリビニルピロリ
ドン、オリーブ油、エタノール、ベンジルアルコール、
プロピレングリコール、水などの液状担体を例示するこ
とができる。剤型としては任意の形態を採ることがで
き、たとえば個体状担体を使用する場合には錠剤、散
剤、顆粒剤、カプセル化剤、座剤、トローチ剤などを、
液状担体を使用する場合にはシロップ、乳液、軟ゼラチ
ンカプセル、クリーム、ゲル、ペースト、スプレー、注
射などをそれぞれ例示することができる。

【００３５】

【発明の効果】本発明化合物は、ヘルペスウイルス科に
属するウイルスに対して優れた抗ウイルス作用を示し、
これらを有効成分とする本発明薬剤はウイルス感染症の
治療に有用である。

【００３６】

【実施例】以下、本発明を実施例、試験例、製剤例など
をあげて具体的に説明するが、本発明はこれらによって
何等限定されるものではない。 実施例１：２’−デオキシ−２’−メチリデン−４’−
チオシチジン［化合物１：式［Ｉ］Ｒ₁＝ＮＨ₂，Ｒ₂＝
Ｈ，Ｒ₃＝Ｈ］の合成

【００３７】１）２，５−アンヒドロ−３−Ｏ−ベンジ
ル−１−Ｏ−メチル−２−チオ−β−Ｄ−アラビノフラ
ノース［式［ＩＶ］、Ｒ₄＝Ｍｅ、Ｒ₅＝Ｂｎ］の合成 ３−Ｏ−ベンジル−１−Ｏ−メチル−β−Ｄ−キシロフ
ラノース［式［ＩＩＩ］、Ｒ₄＝Ｍｅ、Ｒ₅＝Ｂｎ］６．
９３ｇを溶解したピリジン溶液８０ｍｌに氷冷下、塩化
メタンスルホニル６．３３ｍｌを加え、アルゴン気流
下、室温で１時間攪拌した。氷水を加えて反応を停止
後、溶媒を留去した。残渣を酢酸エチル−水により分配
後、有機層を乾燥した。溶媒を留去後、残渣をジメチル
ホルムアミド（ＤＭＦ）１００ｍｌに溶解し、硫化ナト
リウム９．８４ｇを加え、アルゴン気流下、１００℃で
１時間攪拌した。溶媒を留去後、残渣を酢酸エチル−水
で分配し、有機層を更に水で洗浄した後、乾燥した。溶
媒を留去後、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィ
ーにより精製し、５〜１０％酢酸エチル−ｎ−ヘキサン
で溶出された部分を集めて濃縮し、目的物５．０５ｇ
（収率７３％）を得た。

【００３８】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ ７．３６−
７．２９（５Ｈ，ｍ，Ｃ₆Ｈ₅ ＣＨ₂），４．８９（１
Ｈ，ｓ，Ｈ−１），４．６２（１Ｈ，ｄ，Ｃ₆Ｈ₅ Ｃ
Ｈ₂ ，Ｊ＝１１．７Ｈｚ），４．５２−４．４８（２
Ｈ，ｍ，Ｃ₆Ｈ₅ ＣＨ₂ ａｎｄ Ｈ−３），４．３７−
４．３６（１Ｈ，ｍ，Ｈ−４），３．３４（４Ｈ，ｓ，
ＯＭｅａｎｄ Ｈ−２），３．０４（１Ｈ，ｄｄ，Ｈ−
５ａ，Ｊ＝１０．３，２．０Ｈｚ），２．７７（１Ｈ，
ｄｄ，Ｈ−５ｂ，Ｊ＝１０．３，１．５Ｈｚ）

【００３９】２）２，５−アンヒドロ−３−Ｏ−ベンジ
ル−１−Ｏ−メチル−２−チオ−α−Ｄ−アラビノフラ
ノース［式［ＩＶ］、Ｒ₄＝Ｍｅ、Ｒ₅＝Ｂｎ］の合成 ３−Ｏ−ベンジル−１−Ｏ−メチル−α−Ｄ−キシロフ
ラノース［式［ＩＩＩ］、Ｒ₄＝Ｍｅ、Ｒ₅＝Ｂｎ］６．
１３ｇを上記１）と同様の操作を行ない、目的物４．７
５ｇ（収率７８％）を得た。¹ Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ７．３９−７．３０（５
Ｈ，ｍ，Ｃ₆Ｈ ₅ＣＨ₂），５．１３（１Ｈ，ｄ，Ｈ−
１，Ｊ＝２．４Ｈｚ），４．６６（１Ｈ，ｄ，Ｃ₆Ｈ₅ Ｃ
Ｈ₂ ，Ｊ＝１１．７Ｈｚ），４．５３（１Ｈ，ｄ，Ｃ₆Ｈ
₅ ＣＨ₂ ），４．３６−４．３５（１Ｈ，ｂｒｍ，Ｈ−
４），４．２９（１Ｈ，ｔ，Ｈ−３，Ｊ＝２．４Ｈ
ｚ），３．５１（１Ｈ，ｔ，Ｈ−２，Ｊ＝２．４Ｈ
ｚ），３．４７（３Ｈ，ｓ，ＯＭｅ），３．０４（１
Ｈ，ｄｄ，Ｈ−５ａ，Ｊ＝１０．５，２．２Ｈｚ），
２．９５（１Ｈ，ｄｄ，Ｈ−５ｂ，Ｊ＝１０．５，１．
２Ｈｚ）

【００４０】３）３−Ｏ−ベンジル−１−デオキシ−４
−チオ−Ｄ−アラビノフラノース［式［Ｖ］、Ｒ₅＝Ｂ
ｎ］の合成 ２，５−アンヒドロ−３−Ｏ−ベンジル−１−Ｏ−メチ
ル−２−チオ−Ｄ−アラビノフラノース９．５０ｇ
（α：β＝１：１）をテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）２
００ｍｌに溶解し、これに４ＮＨＣｌ １００ｍｌを加
え、室温で１時間攪拌した。固体の炭酸水素ナトリウム
を用いて反応液を中和し、不溶物をろ去した後、減圧下
ＴＨＦを留去した。クロロホルムで３回抽出操作を行な
い、有機層を乾燥した。溶媒を留去した後、残渣をメタ
ノール１５０ｍｌに溶解し、氷冷下、水素化ホウ素ナト
リウム１．４３ｇを含むメタノール溶液を滴下、滴下後
氷冷下４５分攪拌した。反応液を酢酸により中和した
後、溶媒を留去し、クロロホルム−水で分配した。水層
をクロロホルムで２回抽出し、有機層を乾燥した。溶媒
を留去した後、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマ
トグラフィーに付し、３３〜５０％酢酸エチル−ｎ−ヘ
キサンにより溶出された部分を濃縮し、３−Ｏ−ベンジ
ル−１−デオキシ−４−チオ−Ｄ−アラビノフラノース
８．１８ｇ（収率９０％）を得た。

【００４１】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃−Ｄ₂Ｏ）δ７．
３８−７．２７（５Ｈ，ｍ，Ｃ₆Ｈ₅ ＣＨ₂），４．６４
（２Ｈ，ｓ，Ｃ₆Ｈ₅ ＣＨ ₂），４．３８（１Ｈ，ｄｔ，
Ｈ−２，Ｊ＝２．９，４．４Ｈｚ），３．９６（１Ｈ，
ｔ，Ｈ−３，Ｊ＝２．９Ｈｚ），３．７８（１Ｈ，ｄ
ｄ，Ｈ−５ａ，Ｊ＝２．９，１１．７Ｈｚ），３．６６
（１Ｈ，ｄｄ，Ｈ−５ｂ，Ｊ＝３．９，１１．７Ｈ
ｚ），３．６０（１Ｈ，ｄｔ，Ｈ−４，Ｊ＝２．９，
３．９Ｈｚ），３．２１（１Ｈ，ｄｄ，Ｈ−１ａ，Ｊ＝
４．４，１１．２Ｈｚ），２．９０（１Ｈ，ｄｄ，Ｈ−
１ｂ，Ｊ＝２．９，１１．２Ｈｚ）

【００４２】４）３−Ｏ−ベンジル−５−Ｏ−ｔ−ブチ
ルジフェニルシリル−１−デオキシ−２−メチレン−４
−チオ−Ｄ−エリスロペントフラノース［式［ＶＩ］、
Ｒ₅＝Ｂｎ、Ｒ₆＝ｔ−Ｂｕ（Ｐｈ）₂Ｓｉ］の合成 ３−Ｏ−ベンジル−１−デオキシ−４−チオ−Ｄ−アラ
ビノフラノース１．１１ｇとイミダゾール３３０ｍｇを
ＤＭＦ３０ｍｌに溶解し、氷冷下、ｔ−ブチルジフェニ
ルシリルクロリド（ＴＢＤＰＳＣｌ）１．２６ｍｌを加
え、アルゴン気流下０℃で一晩攪拌した。水を加えしば
らく室温で攪拌した後、溶媒を留去し、残渣を酢酸エチ
ル−水で分配後、有機層を更に水で洗浄し、乾燥した。
溶媒を濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフ
ィーにより精製し、２〜４〜１０％酢酸エチル−ｎ−ヘ
キサンにより溶出された部分を濃縮し、５−シリル体
１．９２ｇ（収率８６％）を得た。

【００４３】この５−シリル体１．７９ｇをＤＭＳＯ
２０ｍｌに溶解し、これに無水酢酸１０ｍｌを加え、室
温で一晩間攪拌した。この溶液を水で希釈し、エーテル
で抽出後、有機層を３回水洗し、更に飽和炭酸水素ナト
リウム溶液で２回分配し、乾燥した。溶媒を留去した
後、残渣を３回トルエンで共沸し、ＴＨＦ２０ｍｌに溶
解した。この溶液をメチレントリメチルホスホランの溶
液（ＴＨＦ２０ｍｌ中、メチルトリフェニルホスホニウ
ムブロミド３．３当量、ブチルリチウム３当量より調
製）に滴下し、アルゴン気流下０℃で２時間、室温で一
晩攪拌した。１Ｎ塩化アンモニウム溶液で中和し、酢酸
エチルにより抽出し、有機層を乾燥した。減圧下溶媒を
留去後、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーに
より精製し、２％酢酸エチル−ｎ−ヘキサンにより溶出
された部分を濃縮し、目的物１．０１ｇ（収率５７％）
を得た。

【００４４】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ７．６０−
７．２７（１５Ｈ，ｍ，Ｃ₆Ｈ₅），５．１３，４．９４
（ｅａｃｈ １Ｈ，ｓ，２−ＣＨ₂），４．６４（１
Ｈ，ｄ，Ｃ₆Ｈ₅ ＣＨ₂ ，Ｊ＝１２．７Ｈｚ），４．４４
（１Ｈ，ｄ，Ｃ₆Ｈ₅ ＣＨ₂ ），４．３５（１Ｈ，ｓ，Ｈ
−３），３．６２−３．３１（４Ｈ，ｍ，Ｈ−４，５，
１ａ），３．２１（１Ｈ，ｄ，Ｈ−１ｂ，Ｊ＝１２．７
Ｈｚ），０．９９（９Ｈ，ｓ，ｔＢｕ）

【００４５】５）２’−デオキシ−２’−メチリデン−
４’−チオシチジン［式［Ｉ］Ｒ₁＝ＮＨ₂，Ｒ₂＝Ｈ，
Ｒ₃＝Ｈ］の合成 ３−Ｏ−ベンジル−５−Ｏ−ｔ−ブチルジフェニルシリ
ル−１−デオキシ−２−メチレン−４−チオ−Ｄ−エリ
スロペントフラノース１．３７ｇを塩化メチレン２０ｍ
ｌに溶解し、これにアルゴン気流下−７８℃において１
Ｍトリクロロボラン５．７８ｍｌを滴下し、−７８℃で
１時間攪拌した。ピリジン５ｍｌ、メタノール１０ｍｌ
を加え−７８℃で更に３０分間攪拌し、室温に戻した。
溶媒を留去後、残渣をメタノールで３回共沸し、酢酸エ
チルに溶解し、水および０．５Ｎ塩酸（２回）、飽和炭
酸水素ナトリウムおよび飽和食塩水で分配し、有機層を
乾燥した。溶媒を留去後、残渣をシリカゲルカラムクロ
マトグラフィーにより精製し、７５０ｍｇ（７０％）の
脱ベンジル体を得た。

【００４６】この脱ベンジル体５２３ｍｇを塩化メチレ
ン１５ｍｌに溶解し、アルゴン気流下−７８℃に冷却
し、８０％ｍ−クロロ過安息香酸２７１ｍｇを溶解した
塩化メチレン溶液を滴下した。３０分間攪拌した後、飽
和炭酸水素ナトリウム溶液を加え反応を停止後、室温に
戻しクロロホルムで抽出、有機層を乾燥した。溶媒を留
去し、残渣をアセトニトリル１０ｍｌに溶解し、シリル
化したＮ⁴−アセチルシトシン（Ｎ⁴−アセチルシトシン
６４４ｍｇを触媒量の硫酸アンモニウムとともにヘキサ
メチルジシラザン中、５時間還流することにより調
製）、トリメチルシリルトリフレート０．５６ｍｌを加
え０℃で３０分間攪拌した。飽和炭酸水素ナトリウム溶
液を加え、不溶物をセライトろ過し、クロロホルムで３
回抽出し有機層を乾燥した。ろ液を減圧下濃縮し、残渣
をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、
１％メタノール−ｎ−クロロホルムで溶出された部分を
集め、濃縮し、目的物２００ｍｇ（収率２３％）を得
た。

【００４７】得られた化合物２３８ｍｇをＴＨＦ１０ｍ
ｌに溶解し１Ｍテトラブチルアンモニウムフルオライド
０．７８ｍｌを加え室温で１５分間攪拌した。溶媒を留
去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーによ
り精製し、１％メタノール−クロロホルムで溶出された
部分を集め、濃縮し、得られた化合物をメタノール５ｍ
ｌに溶解し、濃アンモニア水５ｍｌを加え室温で一晩攪
拌した。溶媒を留去し、残渣をＯＤＳクロマトグラフィ
ーにより精製し、更に、α体とβ体をＨＰＬＣにより分
取、精製したα体３４ｍｇ（３４％）、β体１３ｍｇ
（１３％）をそれぞれ得た。

【００４８】α体：¹Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）δ
７．６１（１Ｈ，Ｈ−６，Ｊ＝７．２Ｈｚ），７．２４
（２Ｈ，ｂｓ，ＮＨ₂），６．６４（１Ｈ，ｓ，Ｈ−
１’），５．８５（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−５），５．７９
（１Ｈ，ｄ，３’−ＯＨ，Ｊ＝５．９Ｈｚ），５．３２
（１Ｈ，ｓ，２’−ＣＨ₂ａ），４．９８（１Ｈ，ｔ，
５’−ＯＨ，Ｊ＝５．４Ｈｚ），４．８０（１Ｈ，ｓ，
２’−ＣＨ₂ｂ），４．２８（１Ｈ，ｂｔ，Ｈ−３’，
Ｊ＝７．８Ｈｚ），３．８１（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｈ−５’
ａ，Ｊ＝３．９，１０．７Ｈｚ），３．４５（１Ｈ，ｄ
ｄｄ，Ｈ−５’ｂ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），３．３７（１
Ｈ，ｂｔ，Ｈ−４’）

【００４９】β体：¹Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）δ
７．５７（１Ｈ，ｄ，Ｈ−６，Ｊ＝７．３Ｈｚ），７．
２４，７．２０（ｔｏｔａｌ ２Ｈ，ｂｓ，ＮＨ₂），
６．６６（１Ｈ，ｓ，Ｈ−１’），５．７９（１Ｈ，ｂ
ｄ，Ｈ−５），５．６２（１Ｈ，ｓ，２’−ＣＨ
₂ａ），５．３２（１Ｈ，ｄ，３’−ＯＨ，Ｊ＝４．９
Ｈｚ），５．０７（１Ｈ，ｔ，５’−ＯＨ，Ｊ＝５．４
Ｈｚ），４．９２（１Ｈ，ｓ，２’−ＣＨ₂ｂ），４．
４９（１Ｈ，ｂｔ，Ｈ−３’，Ｊ＝４．９Ｈｚ），３．
６０（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｈ−５’ａ，Ｊ＝６．４，１１．
２Ｈｚ），３．４９（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｈ−５’ｂ，Ｊ＝
６．４Ｈｚ），３．１２（１Ｈ，ｄｔ，Ｈ−４’）．

【００５０】実施例２：２’−デオキシ−２’−メチリ
デン−４’−チオ−５−フルオロシチジン［化合物２：
式［Ｉ］Ｒ₁＝ＮＨ₂，Ｒ₂＝Ｆ，Ｒ₃＝Ｈ］の合成 実施例１の５）のＮ⁴−アセチルシトシンの代わりに５
−フルオロシトシンを用い、同様の方法にて表記化合物
を得た。 α体：¹Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）δ７．８８（２
Ｈ，ｂｄ，Ｈ−６，ＮＨ₂，Ｊ＝７．３Ｈｚ），７．６
１（１Ｈ，ｂｓ，ＮＨ₂），６．５５（１Ｈ，ｄ，Ｈ−
１’，Ｊ＝２．０Ｈｚ），５．７９（１Ｈ，ｄ，３’−
ＯＨ，Ｊ＝５．９Ｈｚ），５．３７（１Ｈ，ｓ，２’−
ＣＨ₂ａ），４．９９（１Ｈ，ｔ，５’−ＯＨ，Ｊ＝
５．１Ｈｚ），４．９５（１Ｈ，ｓ，２’−ＣＨ
₂ｂ），４．３３（１Ｈ，ｍ，Ｈ−３’），３．７２
（１Ｈ，ｍ，Ｈ−４’），３．４７〜３．４２（２Ｈ，
ｍ，Ｈ−５’ａ，Ｈ−５’ｂ）

【００５１】β体：¹Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）δ
７．８６（１Ｈ，ｄ，Ｈ−６，Ｊ＝６．８Ｈｚ），７．
６２（２Ｈ，ｂｓ，ＮＨ₂），６．６０（１Ｈ，ｓ，Ｈ
−１’），５．６４（１Ｈ，ｄ，３’−ＯＨ，Ｊ＝４．
９Ｈｚ），５．３２（１Ｈ，ｓ，２’−ＣＨ₂ａ），
５．１６（１Ｈ，ｔ，５’−ＯＨ，Ｊ＝５．４Ｈｚ），
５．０１（１Ｈ，ｓ，２’−ＣＨ₂ｂ），４．５３（１
Ｈ，ｔ，Ｈ−３’，Ｊ_3',_4'＝４．４Ｈｚ），３．６８
〜３．５６（２Ｈ，ｄｄｘ２，Ｈ−５’ａ，Ｈ−５’
ｂ，Ｊ_4',_5'a＝Ｊ_4',_5'b＝５．９Ｈｚ，Ｊ_5'a,_5'b＝１
１．７Ｈｚ），３．１９（１Ｈ，ｄｔ，Ｈ−４’，
Ｊ_4',_5'a＝Ｊ_4',_5'b＝５．９Ｈｚ，Ｊ_4',_3'＝４．９Ｈ
ｚ）．

【００５２】実施例３：２’−デオキシ−２’−メチリ
デン−４’−チオ−５−メチルウリジン［化合物３：式
［Ｉ］Ｒ₁＝ＯＨ，Ｒ₂＝ＣＨ₃，Ｒ₃＝Ｈ］の合成 実施例１の５）のＮ⁴−アセチルシトシンの代わりにチ
ミンを用い、同様の方法にて表記化合物を得た。 α体：¹Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）δ１１．３８（１
Ｈ，ｂｓ，ＮＨ），７．４５（１Ｈ，ｄ，Ｈ−６，ＮＨ
₂，Ｊ＝１．０Ｈｚ），６．５３（１Ｈ，ｓ，Ｈ−
１’），５．８４（１Ｈ，ｄ，３’−ＯＨ，Ｊ＝５．９
Ｈｚ），５．３６（１Ｈ，ｔ，２’−ＣＨ₂ａ，Ｊ＝
２．０Ｈｚ），５．０２（１Ｈ，ｔ，５’−ＯＨ，Ｊ＝
５．４Ｈｚ），４．９４（１Ｈ，ｔ，２’−ＣＨ₂ｂ，
Ｊ＝２．０Ｈｚ），４．２７（１Ｈ，ｍ，Ｈ−３’），
３．５０〜３．４０（２Ｈ，ｍ，Ｈ−５’ａ，Ｈ−５’
ｂ），１．７９（３Ｈ，ｄ，ＣＨ₃，Ｊ＝１．０Ｈｚ）

【００５３】β体：¹Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）δ
７．４５（１Ｈ，ｄ，Ｈ−６，Ｊ＝１．０Ｈｚ），６．
５９（１Ｈ，ｓ，Ｈ−１’），５．６９（１Ｈ，ｄ，
３’−ＯＨ，Ｊ＝４．４Ｈｚ），５．３６（１Ｈ，ｓ，
２’−ＣＨ₂ａ），５．２０（１Ｈ，ｂｓ，５’−Ｏ
Ｈ），５．０３（１Ｈ，ｓ，２’−ＣＨ₂ｂ），４．５
７（１Ｈ，ｄ，Ｈ−３’，Ｊ_3',_4'＝３．９Ｈｚ），
３．６８〜３．５６（２Ｈ，ｄｄｘ２，Ｈ−５’ａ，Ｈ
−５’ｂ，Ｊ_4',_5'a＝５．９Ｈｚ，Ｊ_4',_5'b＝６．４Ｈ
ｚ，Ｊ_5'a,_{5' b}＝１１．５Ｈｚ），３．２１（１Ｈ，ｄ
ｔ，Ｈ−４’，Ｊ_4',_5'a＝５．９Ｈｚ，Ｊ_4',_5'b＝６．
４Ｈｚ，Ｊ_4',_3'＝３．９Ｈｚ），１．７９（３Ｈ，
ｄ，ＣＨ₃，Ｊ＝１．０Ｈｚ）

【００５４】実施例４：２’−デオキシ−２’−メチリ
デン−４’−チオ−５−エチルウリジン［化合物４：式
［Ｉ］Ｒ₁＝ＯＨ，Ｒ₂＝ＣＨ₂ＣＨ₃，Ｒ₃＝Ｈ］の合成 実施例１の５）のＮ⁴−アセチルシトシンの代わりに５
−エチルウラシルを用い、同様の方法にて表記化合物を
得た。 α体：¹Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）δ１１．３６（１
Ｈ，ｂｓ，３−ＮＨ），７．４３（１Ｈ，ｓ，Ｈ−
６），６．５３（１Ｈ，ｓ，Ｈ−１’），５．８５（１
Ｈ，ｄ，３’−ＯＨ，Ｊ＝５．９Ｈｚ），５．３７（１
Ｈ，ｄ，２’−ＣＨ₂ａ，Ｊ＝２．０Ｈｚ），５．０２
（１Ｈ，ｔ，５’−ＯＨ,Ｊ＝５．１Ｈｚ），４．９６
（１Ｈ，ｂｓ，２’−ＣＨ₂ｂ），４．３０（１Ｈ，ｂ
ｓ，Ｈ−３’）,３．８０（１Ｈ，ｍ，Ｈ−５’ａ），
３．４４（２Ｈ，ｍ，Ｈ−４’，５’ｂ），２．２３
（２Ｈ，ｑ，５−ＣＨ₂ ＣＨ₃，Ｊ＝７．３Ｈｚ），１．
０２（３Ｈ，ｔ，５−ＣＨ₂ ＣＨ₃ ，Ｊ＝７．６Ｈｚ） 質量分析（ＦＡＢ）：ｍ／ｚ＝２８５（Ｍ＋Ｈ） 元素分析値：Ｃ₁₂Ｈ₁₆Ｎ₂Ｏ₄Ｓ・１／４Ｈ₂Ｏとして Ｃ ： Ｈ ： Ｎ 理論値（％）；４９．９０：５．７６：９．７０ 測定値（％）；４９．９１：５．７５：９．３６

【００５５】β体：¹Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）δ１
１．３８（１Ｈ，ｂｓ，３−ＮＨ），７．７７（１Ｈ，
ｓ，Ｈ−６），６．５９（１Ｈ，ｓ，Ｈ−１’），５．
６５（１Ｈ，ｄ，３’−ＯＨ，Ｊ＝４．９Ｈｚ），５．
３４（１Ｈ，ｓ，２’−ＣＨ₂ａ），５．１７（１Ｈ，
ｔ，５’−ＯＨ，Ｊ＝５．１Ｈｚ），５．０２（１Ｈ，
ｂｓ，２’−ＣＨ₂ｂ），４．５４（１Ｈ，ｂｔ，Ｈ−
３’Ｊ＝４．６Ｈｚ），３．５６（２Ｈ，ｍ，Ｈ−５’
ａ，ｂ），３．１７（１Ｈ，ｍ，Ｈ−４’），２．２１
（２Ｈ，ｑ，５−ＣＨ₂ ＣＨ₃，Ｊ＝７．６Ｈｚ），１．
００（３Ｈ，ｔ，５−ＣＨ₂ ＣＨ₃ ，Ｊ＝７．３Ｈｚ） 質量分析（ＦＡＢ）：ｍ／ｚ＝２８５（Ｍ＋Ｈ） 元素分析値：Ｃ₁₂Ｈ₁₆Ｎ₂Ｏ₄Ｓ・０．６Ｈ₂Ｏとして Ｃ ： Ｈ ： Ｎ 理論値（％）；４８．８３：５．８７：９．４９ 測定値（％）；４９．２３：６．０２：９．０９

【００５６】実施例５：２’−デオキシ−２’−メチリ
デン−４’−チオウリジン［化合物５：式［Ｉ］Ｒ₁＝
ＯＨ，Ｒ₂＝Ｈ，Ｒ₃＝Ｈ］の合成 実施例１の５）のＮ⁴−アセチルシトシンの代わりにウ
ラシルを用い、同様の方法にて表記化合物を得た。 α体：¹Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）δ１１．３８（１
Ｈ，ｂｓ，３−ＮＨ），７．６５（１Ｈ，ｄ，Ｈ−６，
Ｊ＝８．３Ｈｚ），６．５２（１Ｈ，ｓ，Ｈ−１’），
５．８６（１Ｈ，ｂｄ，３’−ＯＨ，Ｊ＝４．９Ｈ
ｚ），５．７１（１Ｈ，ｄ，Ｈ−５，Ｊ＝８．３Ｈ
ｚ），５．３８（１Ｈ，ｓ，２−ＣＨ₂ａ），５．０２
（１Ｈ，ｂｓ，５’−ＯＨ），４．９９（１Ｈ，ｓ，
２’−ＣＨ₂ｂ），４．３０（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−
３’），３．８１（１Ｈ，ｍ，Ｈ−５’ａ），３．４５
（２Ｈ，ｍ，Ｈ−４’，５’ｂ） 質量分析（ＦＡＢ）：ｍ／ｚ＝２５７（Ｍ＋Ｈ） 元素分析値：Ｃ₁₀Ｈ₁₂Ｎ₂Ｏ₄Ｓ・１／２Ｈ₂Ｏとして Ｃ ： Ｈ ： Ｎ 理論値（％）；４５．２７：４．９４：１０．５６ 測定値（％）；４５．１６：４．６９：１０．３２

【００５７】β体：¹Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）δ１
１．３９（１Ｈ，ｂｓ，３−ＮＨ），７．６０（１Ｈ，
ｄ，Ｈ−６，Ｊ＝８．３Ｈｚ），６．５７（１Ｈ，ｓ，
Ｈ−１’），５．６７（１Ｈ，ｍ，３’−ＯＨ，Ｈ−
５），５．３６（１Ｈ，ｄ，２’−ＣＨ₂ａ，Ｊ＝１．
５Ｈｚ），５．１２（１Ｈ，ｂｔ，５’−ＯＨ，Ｊ＝
５．４Ｈｚ），５．０４（１Ｈ，ｂｓ，２’−ＣＨ
₂ｂ），４．５２（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−３’），３．５７
（１Ｈ，ｍ，Ｈ−５’ａ），３．５１（１Ｈ，ｍ，Ｈ−
５’ｂ），３．１５（１Ｈ，ｍ，Ｈ−４’） 質量分析（ＦＡＢ）：ｍ／ｚ＝２５７（Ｍ＋Ｈ） 元素分析値：Ｃ₁₀Ｈ₁₂Ｎ₂Ｏ₄Ｓ・１／４Ｈ₂Ｏとして Ｃ ： Ｈ ： Ｎ 理論値（％）；４６．０６：４．８３：１０．７４ 測定値（％）；４６．２３：４．６５：１０．５８

【００５８】実施例６：２’−デオキシ−２’−メチリ
デン−４’−チオ−５−ヒドロキシエチルウリジン［化
合物６：式［Ｉ］Ｒ₁＝ＯＨ，Ｒ₂＝ＣＨ₂ＣＨ₂ＯＨ，Ｒ
₃＝Ｈ］の合成 実施例１の５）のＮ⁴−アセチルシトシンの代わりに５
−ヒドロキシエチルウラシルを用い、同様の方法にて表
記化合物を得た。 α体：¹Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）δ１１．３７（１
Ｈ，ｂｓ，３−ＮＨ），７．４３（１Ｈ，ｓ，Ｈ−
６），６．５３（１Ｈ，ｓ，Ｈ−１’），５．８３（１
Ｈ，ｄ，３’−ＯＨ，Ｊ＝５．９Ｈｚ），５．３６（１
Ｈ，ｄ，２’−ＣＨ₂ａ，Ｊ＝２．０Ｈｚ），５．０３
（１Ｈ，ｂｔ，５’−ＯＨ，Ｊ＝５．１Ｈｚ），４．９
５（１Ｈ，ｔ，２’−ＣＨ₂ｂ，Ｊ＝２．０Ｈｚ），
４．５５（１Ｈ，ｔ，５−ＣＨ₂ＣＨ₂ ＯＨ，Ｊ＝５．４
Ｈｚ）,４．２８（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−３’），３．８５
（１Ｈ，ｍ，Ｈ−５’ａ），３．４５（４Ｈ，ｍ，５−
ＣＨ₂ ＣＨ₂ ＯＨ，Ｈ−４’，５’ｂ），２．３６（２
Ｈ，ｔ，５−ＣＨ₂ ＣＨ₂ＯＨ，Ｊ＝６．３Ｈｚ） 質量分析（ＦＡＢ）：ｍ／ｚ＝３０１（Ｍ＋Ｈ） 元素分析値：Ｃ₁₂Ｈ₁₆Ｎ₂Ｏ₅Ｓとして Ｃ ： Ｈ ： Ｎ 理論値（％）；４７．９９：５．３７：９．３３ 測定値（％）；４７．７７：５．３２：９．３０

【００５９】β体：¹Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）δ１
１．３９（１Ｈ，ｂｓ，３−ＮＨ），７．４３（１Ｈ，
ｓ，Ｈ−６），６．５９（１Ｈ，ｓ，Ｈ−１’），５．
６５（１Ｈ，ｄ，３’−ＯＨ，Ｊ＝５．４Ｈｚ），５．
３５（１Ｈ，ｓ，２’−ＣＨ₂ａ），５．１４（１Ｈ，
ｔ，５’−ＯＨ，Ｊ＝５．４Ｈｚ），５．０５（１Ｈ，
ｓ，２’−ＣＨ₂ｂ），４．５４（２Ｈ，ｍ，５−ＣＨ₂
ＣＨ₂ ＯＨ，Ｈ−３’），３．５６（２Ｈ，ｍ，Ｈ−
５’ａ，ｂ），３．４４（２Ｈ，ｍ，−ＣＨ₂ ＣＨ₂ Ｏ
Ｈ），３．１６（１Ｈ，ｍ，Ｈ−４’），２．３５（２
Ｈ，ｍ，−ＣＨ₂ ＣＨ₂ＯＨ，Ｊ＝７．３Ｈｚ） 質量分析（ＦＡＢ）：ｍ／ｚ＝３０１（Ｍ＋Ｈ） 元素分析値：Ｃ₁₂Ｈ₁₆Ｎ₂Ｏ₄Ｓとして Ｃ ： Ｈ ： Ｎ 理論値（％）；４７．９９：５．３７：９．３３ 測定値（％）；４８．０３：５．５６：９．２７

【００６０】実施例７：２’−デオキシ−２’−メチリ
デン−４’−チオ−５−ブロモビニルウリジン［化合物
７：式［Ｉ］Ｒ₁＝ＯＨ，Ｒ₂＝ＣＨ＝ＣＨＢｒ，Ｒ₃＝
Ｈ］の合成 実施例１の５）のＮ⁴−アセチルシトシンの代わりに５
−ブロモビニルウラシルを用い、同様の方法にて表記化
合物を得た。 α体：¹Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）δ１１．６７（１
Ｈ，ｂｓ，−ＮＨ），７．８９（１Ｈ，ｓ，Ｈ−６），
７．３０（１Ｈ，ｄ，５−ＣＨ＝ＣＨＢｒ，Ｊ＝１３．
７Ｈｚ），６．９８（１Ｈ，ｄ，５−ＣＨ＝ＣＨＢｒ，
Ｊ＝１３．７），６．５３（１Ｈ，ｓ，Ｈ−１’），
５．８４（１Ｈ，ｂｄ，３’−ＯＨ，Ｊ＝５．９Ｈ
ｚ）,５．３６（１Ｈ，ｔ，２−ＣＨ₂ａ，Ｊ＝２．０Ｈ
ｚ），５．００（２Ｈ，ｍ，２−ＣＨ₂ｂ，５’−Ｏ
Ｈ），４．２８（１Ｈ，ｔ，Ｈ−３’）,３．８６（１
Ｈ，ｍ，Ｈ−５’ａ），３．５６（１Ｈ，ｍ，Ｈ−
４’），３．４６（１Ｈ，ｍ，Ｈ−５’ｂ） 質量分析（ＦＡＢ）：ｍ／ｚ＝３６１（Ｍ＋Ｈ），３６
３（Ｍ＋Ｈ） 元素分析値：Ｃ₁₂Ｈ₁₃Ｎ₂Ｏ₄ＳＢｒとして Ｃ ： Ｈ ： Ｎ 理論値（％）；３９．９０：３．６３：７．７６ 測定値（％）；３９．７９：３．６４：７．３９

【００６１】β体：¹Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）δ１
１．６９（１Ｈ，ｂｓ，３−ＮＨ），７．８９（１Ｈ，
ｓ，Ｈ−６），７．３０（１Ｈ，ｄ，５−ＣＨ＝ＣＨＢ
ｒ，Ｊ＝１３．７Ｈｚ），７．００（１Ｈ，ｄ，５−Ｃ
Ｈ＝ＣＨＢｒ，Ｊ＝１３．２Ｈｚ），６．５７（１Ｈ，
ｓ，Ｈ−１’），５．６５（１Ｈ，ｄ，３’−ＯＨ，Ｊ
＝５．４Ｈｚ）,５．３６（１Ｈ，ｓ，２−ＣＨ₂ａ），
５．１７（１Ｈ，ｂｔ，５’−ＯＨ,Ｊ＝５．６Ｈ
ｚ），５．１２（１Ｈ，ｓ，２−ＣＨ₂ｂ），４．５７
（１Ｈ，ｂｔ，Ｈ−３’，Ｊ＝４．９Ｈｚ）,３．７０
（１Ｈ，ｍ，Ｈ−５’ａ），３．５７（１Ｈ，ｍ，Ｈ−
５’ｂ），３．１７（１Ｈ，ｍ，Ｈ−４’） 質量分析（ＦＡＢ）：ｍ／ｚ＝３６１（Ｍ＋Ｈ），３６
３（Ｍ＋Ｈ） 元素分析値：Ｃ₁₂Ｈ₁₃Ｎ₂Ｏ₄ＳＢｒとして Ｃ ： Ｈ ： Ｎ 理論値（％）；３９．９０：３．６３：７．７６ 測定値（％）；３９．７９：３．７３：７．６５

【００６２】実施例８：２’−デオキシ−２’−メチリ
デン−４’−チオ−５−ヨードウリジン［化合物８：式
［Ｉ］Ｒ₁＝ＯＨ，Ｒ₂＝Ｉ，Ｒ₃＝Ｈ］の合成 実施例１の５）のＮ⁴−アセチルシトシンの代わりに５
−ヨードウラシルを用い、同様の方法にて表記化合物を
得た。 α体：¹Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）δ１１．７７（１
Ｈ，ｂｓ，３−ＮＨ），８．０８（１Ｈ，ｄ，Ｈ−
６），６．４６（１Ｈ，ｓ，Ｈ−１’），５．８４（１
Ｈ，ｂｄ，３’−ＯＨ，Ｊ＝５．９Ｈｚ），５．４０
（１Ｈ，ｓ，２’−ＣＨ₂ａ），５．１１（１Ｈ，ｓ，
２’−ＣＨ₂ｂ），５．０２（１Ｈ，ｔ，５’−ＯＨ,Ｊ
＝５．１Ｈｚ），４．３２（１Ｈ，ｂｔ，Ｈ−３’，Ｊ
＝６．４Ｈｚ），３．７０（１Ｈ，ｍ，Ｈ−５’ａ），
３．４３（２Ｈ，ｍ，Ｈ−４’，５’ｂ） 質量分析
（ＦＡＢ）：ｍ／ｚ＝３８３（Ｍ＋Ｈ） 元素分析値：Ｃ₁₀Ｈ₁₁Ｎ₂Ｏ₄ＩＳとして Ｃ ： Ｈ ： Ｎ 理論値（％）；３１．４３：２．９０：７．３３ 測定値（％）；３１．４５：２．７７：７．３８

【００６３】β体：¹Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）δ１
１．７８（１Ｈ，ｂｓ，３−ＮＨ），８．１０（１Ｈ，
ｓ，Ｈ−６），６．５０（１Ｈ，ｓ，Ｈ−１’），５．
６７（１Ｈ，ｄ，３’−ＯＨ，Ｊ＝４．９Ｈｚ），５．
３４（１Ｈ，ｓ，ＣＨ₂ａ），５．２５（１Ｈ，ｂｔ，
５’−ＯＨ,Ｊ＝５．３Ｈｚ），５．１１（１Ｈ，ｓ，
ＣＨ₂ｂ），４．５３（１Ｈ，ｂｔ，Ｈ−３’，Ｊ＝
４．９Ｈｚ），３．５８（２Ｈ，ｍ，Ｈ−５’ａ，５’
ｂ），３．１７（２Ｈ，ｍ，Ｈ−４’） 質量分析（ＦＡＢ）：ｍ／ｚ＝３８３（Ｍ＋Ｈ） 元素分析値：Ｃ₁₀Ｈ₁₁Ｎ₂Ｏ₄ＩＳとして Ｃ ： Ｈ ： Ｎ 理論値（％）；３１．４３：２．９０：７．３３ 測定値（％）；３１．４２：２．９５：７．３０

【００６４】実施例９：２’−デオキシ−２’−メチリ
デン−４’−チオ−５−クロロエチルウリジン［化合物
９：式［Ｉ］Ｒ₁＝ＯＨ，Ｒ₂＝ＣＨ₂ＣＨ₂Ｃｌ，Ｒ₃＝
Ｈ］の合成 実施例６で得られた２’−デオキシ−２’−メチリデン
−４’−チオ−５−ヒドロキシエチルウリジン（５−ヒ
ドロキシエチル体）から次の方法で表記化合物を誘導し
た。すなわち、５−ヒドロキシエチル体の混合物（α：
β＝２．４：１）１８０ｍｇにトリフェニルホスフィン
３１２ｍｇ及びジメチルホルムアミド１０ｍｌを加えて
アルゴン気流下、室温で２０分間反応させた。その後、
四塩化炭素のピリジン溶液（３３ｖ／ｖ％）０．２６ｍ
ｌを加えて一晩反応させた。その後、トリフェニルホス
フィン１８７ｍｇを加えて１５分間反応させた後に四塩
化炭素のピリジン溶液（３３ｖ／ｖ％）０．１６ｍｌを
加えて更に５時間反応させた。反応後、溶媒を留去し、
シリカゲルカラムで精製し、５％メタノール−クロロホ
ルムで溶出されてくる部分を集めて溶媒を留去し、更に
順相ＨＰＬＣ（ヘキサン：ジクロロメタン：エタノール
＝１０：２０：３）で精製し、目的物のα体８２ｍｇ
（４４％）とβ体４０ｍｇ（２１％）を得た。

【００６５】α体：¹Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）δ１
１．５２（１Ｈ，ｂｓ，３−ＮＨ），７．５９（１Ｈ，
ｓ，Ｈ−６），６．５３（１Ｈ，ｓ，Ｈ−１’），５．
８５（１Ｈ，ｄ，３’−ＯＨ，Ｊ＝５．９Ｈｚ），５．
３６（１Ｈ，ｔ，２’−ＣＨ₂ａ，Ｊ＝２．２Ｈｚ），
５．０２（１Ｈ，ｔ，５’−ＯＨ,Ｊ＝４．４Ｈｚ），
４．９３（１Ｈ，ｔ，２’−ＣＨ₂ｂ，Ｊ＝２．０Ｈ
ｚ），４．２８（１Ｈ，ｂｔ，Ｈ−３’，Ｊ＝６．６Ｈ
ｚ），３．８５（１Ｈ，ｍ，Ｈ−５’ａ），３．６９
（２Ｈ，ｍ，５−ＣＨ₂ ＣＨ₂ Ｃｌ，），３．４８，（２
Ｈ，ｍ，Ｈ−４，５’ｂ），２．６９（２Ｈ，ｔ，５−
ＣＨ₂ ＣＨＣｌ，Ｊ＝６．８Ｈｚ） 質量分析（ＦＡＢ）：ｍ／ｚ＝３１９（Ｍ＋Ｈ） 元素分析値：Ｃ₁₂Ｈ₁₅Ｎ₂Ｏ₅ＳＣｌとして Ｃ ： Ｈ ： Ｎ 理論値（％）；４５．２１：４．７４：８．７９ 測定値（％）；４５．４４：４．７９：８．６３

【００６６】β体：¹Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）δ１
１．５４（１Ｈ，ｂｓ，３−ＮＨ），７．５８（１Ｈ，
ｓ，Ｈ−６），６．５８（１Ｈ，ｓ，Ｈ−１’），５．
６７（１Ｈ，ｄ，３’−ＯＨ，Ｊ＝５．４Ｈｚ），５．
３６（１Ｈ，ｓ，２’−ＣＨ₂ａ），５．１６（１Ｈ，
ｔ，５’−ＯＨ，Ｊ＝５．６Ｈｚ），５．０６（１Ｈ，
ｓ，２’−ＣＨ₂ｂ），４．５６（１Ｈ，ｂｔ，Ｈ−
３’），３．６８（２Ｈ，ｍ，５−ＣＨ₂ ＣＨ₂ Ｃｌ），
３．６２（１Ｈ，ｍ，Ｈ−５’ａ），３．５４（１Ｈ，
ｍ，Ｈ−５’ｂ），３．１７（１Ｈ，ｍ，Ｈ−４’），
２．７０（２Ｈ，ｍ，５−ＣＨ₂ ＣＨ₂Ｃｌ） 質量分析（ＦＡＢ）：ｍ／ｚ＝３１９（Ｍ＋Ｈ） 元素分析値：Ｃ₁₂Ｈ₁₅Ｎ₂Ｏ₄ＳＣｌとして Ｃ ： Ｈ ： Ｎ 理論値（％）；４５．２１：４．７４：８．７９ 測定値（％）；４４．９７：４．７６：８．５６

【００６７】製剤例１：錠剤 本発明化合物 ３０．０ｍｇ 微粉末セルロース ２５．０ｍｇ 乳糖 ３９．５ｍｇ スターチ ４０．０ｍｇ タルク ５．０ｍｇ ステアリン酸マグネシム Ｏ．５ｍｇ 上記組成から常法によって錠剤を調製する。

【００６８】製剤例２：カプセル剤 本発明化合物 ３０．０ｍｇ 乳糖 ４０．０ｍｇ スターチ １５．０ｍｇ タルク ５．０ｍｇ 上記組成から常法によってカプセル剤を調製する。

【００６９】製剤例３：注射剤 本発明化合物 ３０．０ｍｇ グルコース １００．０ｍｇ 上記組成を注射用精製水に溶解して注射剤を調製する。

【００７０】試験例 以下の各試験に用いた本発明化合物は、特に断らない限
りβ体である。また、試験例１及び２において、試験薬
剤としては、本発明化合物の２’−デオキシ−２’−メ
チリデン−４’−チオチミジン（以下、４’−Ｓ−ＤＭ
ＤＴと称す）および２’−デオキシ−２’−メチリデン
−４’−チオシチジン（以下、４’−Ｓ−ＤＭＤＣと称
す）、公知化合物の２’−デオキシ−２’−メチリデン
チオチミジン（以下、ＤＭＤＴと称す）および２’−デ
オキシ−２’−メチリデンチオシチジン（以下、ＤＭＤ
Ｃと称す）、陽性対照薬剤としてアシクロビル、ガンシ
クロビル、構造類似対照薬剤として１−β−Ｄ−アラビ
ノフラノシルチミン（以下、アラＴと称す）をそれぞれ
使用した。宿主細胞として、ヒト胎児肺由来線維芽細胞
を用いた。ウイルスとしては、ＨＳＶ−１はＶＲ−３／
Ｎ−３４株、ＨＣＭＶはＡＤ１６９株を用いた。また、
試験方法は、既報のプラーク減少法（Machida, H. et a
l.,1993, Antiviral Chem. Chemother., 4, p11-17、町
田治彦，1990，化学療法学会誌，38，p256-261）に準じ
て行った。

【００７１】試験例１；４’−Ｓ−ＤＭＤＴのＨＳＶ−
１に対する抗ウイルス活性試験 （試験方法） １．ヒト胎児肺由来線維芽細胞を１０％準胎児牛血清
（三菱化学）に添加、イーグルＭＥＭ中で４日毎に１：
２〜４スプリット継代培養する。 ２．親細胞から１：２のスプリットで得た細胞浮遊液を
２ｍｌ／ｗｅｌｌの割合で１２穴マルチウェルに播き、
炭酸ガスインキュベーター内で３７℃４日間培養する。 ３．培養液を捨て、５０〜１００ＰＦＵのウイルス（Ｈ
ＳＶ−１）を含む２５０μｌの血清無添加イーグルＭＥ
Ｍを接種し、３７℃で１時間ウイルスを吸着させる。

【００７２】４．ウイルスを除去し、被検薬（４’−Ｓ
−ＤＭＤＴ、ＤＭＤＴ、アラＴ、アシクロビル）を含む
２．５％血清添加イーグルＭＥＭ、０．４％メチルセル
ロース含有培地を加え、炭酸ガスインキュベーター内に
て３７℃で４日間培養する。通常、被検薬は１／２ｌｏ
ｇ₁₀段階希釈し、濃度は最大３２μｇ／ｍｌとする。 ５．同じ濃度の被検薬を含む２．５％血清添加イーグル
ＭＥＭ、０．４％メチルセルロース含有培地に交換し、
さらに４〜５日間培養する。 ６．培養液を捨て０．５％クリスタルバイオレット液で
染色し、透過型実体顕微鏡下で各ｗｅｌｌのプラーク数
を数え、下記式によりプラーク形成阻害率を求める。 ７．プラーク形成阻害率を被検薬の濃度（対数表示）に
対してグラフ上にプロットし、用量−プラーク形成阻害
曲線から、５０％および９０％阻害率を示す被検薬の濃
度（ＥＤ₅₀およびＥＤ₉₀）を求める。

【００７３】

【式１】

【００７４】（試験結果）試験結果をＣＣＲＦ−ＨＳＢ
−２細胞を用いた細胞増殖阻害作用とともに表１に示
す。表１より、４’−Ｓ−ＤＭＤＴに強い抗ＨＳＶ−１
活性が認められ、ＤＭＤＴと比較して細胞増殖抑制作用
が減弱し、ＨＳＶ−１に対する選択性が著しく高まった
ことが示された。なお、表中、ＩＤ₅₀は細胞の増殖を５
０％阻止する濃度を表す。

【００７５】

【表１】

【００７６】試験例２；４’−Ｓ−ＤＭＤＣのＨＣＭＶ
に対する抗ウイルス活性試験 （試験方法） １．ＨＳＶ−１に対する抗ウイルス活性試験と同様にヒ
ト胎児肺由来線維芽細胞を１２穴マルチウェルに播き、
炭酸ガスインキュベーター内で３７℃４日間培養する。 ２．培養液を捨て、５０〜１００ＰＦＵのウイルス（Ｈ
ＣＭＶ）を含む７５０μｌの５％血清添加イーグルＭＥ
Ｍを接種し、３７℃で１時間ウイルスを吸着させる。

【００７７】３．ウイルスを除くことなく、等量の被検
薬（４’−Ｓ−ＤＭＤＣ、ＤＭＤＣ、ガンシクロビル）
を含むハンクスＭＥＭを加え、炭酸ガスインキュベータ
ー内にて３７℃で４日間培養する。通常、被検薬は１／
２ｌｏｇ₁₀段階希釈し、濃度は最大５０μｇ／ｍｌとす
る。 ４．同じ濃度の被検薬を含む２．５％血清添加イーグル
ＭＥＭ、０．４％メチルセルロース含有培地に交換し、
さらに４〜５日間培養する。 ５．培養液を捨てMay-Gruenwald's-Giemsa(×10)で染色
し、透過型実体顕微鏡下で各ｗｅｌｌのプラーク数を数
え、ＨＳＶ−１に対する抗ウイルス活性試験と同様にプ
ラーク形成阻害率を求める。

【００７８】（試験結果）試験の結果、４’−Ｓ−ＤＭ
ＤＣ、ＤＭＤＣおよびガンシクロビルのＥＤ₅₀はそれぞ
れ０．００３６μｇ／ｍｌ、０．０４μｇ／ｍｌ、０．
４９μｇ／ｍｌであり、４’−Ｓ−ＤＭＤＣに強い抗Ｈ
ＣＭＶ活性が認められた。

【００７９】試験例３：各種化合物の抗ウイルス活性 （１）抗ＨＳＶ−１活性および抗ＨＳＶ−２活性 １．ヒト胎児肺由来線維芽細胞を１０％準胎児牛血清
（三菱化学）に添加、イーグルＭＥＭ中で４日毎に１：
２〜４スプリット継代培養する。 ２．親細胞から１：２のスプリットで得た細胞浮遊液を
２ｍｌ／ｗｅｌｌの割合で１２穴マルチプレートに播
き、炭酸ガスインキュベーター内で３７℃４〜５日間培
養する。 ３．培養液を捨て、５０〜１５０ＰＦＵのＨＳＶ−１
ＶＲ−３株またはＨＳＶ−２ ＭＳ株を含むハンクスＭ
ＥＭ（２５０μｌ）を接種し、３７℃で３０分間ウイル
スを吸着させた後、ウイルス液を捨てる。

【００８０】４．被検薬を含む２．５％血清添加イーグ
ルＭＥＭ、０．８％メチルセルロース含有培地を加え、
炭酸ガスインキュベーター内にて３７℃で２〜３日間培
養する。通常、被検薬は１／２ｌｏｇ₁₀段階希釈し、濃
度は最大１０μｇ／ｍｌとする。 ５．培養液を捨て、０．５％クリスタルバイオレット液
で染色し、透過型実体顕微鏡下で各ウエルのプラーク数
を数え、試験例１と同じ式によりプラーク形成阻害率を
求める。 ６．プラーク形成阻害率を被検薬の濃度（対数表示）に
対してグラフ上にプロットし、用量−プラーク形成阻害
曲線から５０％阻害率を示す被検薬の濃度（ＥＤ₅₀）を
求める。その結果を対照化合物の結果と併せて下記表に
示す。

【００８１】

【表２】

【００８２】（２）抗水痘−帯状疱疹ウイルス（ＶＺ
Ｖ）活性 １．ヒト胎児肺由来線維芽細胞を１０％準胎児牛血清
（三菱化学）に添加、イーグルＭＥＭ中で４日毎に１：
２〜４スプリット継代培養する。 ２．親細胞から１：２のスプリットで得た細胞浮遊液を
２ｍｌ／ｗｅｌｌの割合で１２穴マルチプレートに播
き、炭酸ガスインキュベーター内で３７℃４〜５日間培
養する。 ３．培養液を捨て、５０〜１００ＰＦＵのＶＺＶ Ｏｋ
ａ株を含む７５０μｌの５％血清添加イーグルＭＥＭを
接種し、３７℃で１時間ウイルスを吸着させた。

【００８３】４．ウイルスを除くことなく、等量の被検
薬を含むハンクスＭＥＭを加え、炭酸ガスインキュベー
ター内にて３７℃で培養する。通常、被検薬は１／２ｌ
ｏｇ ₁₀段階希釈し、濃度は最大５０μｇ／ｍｌとする。 ５．４〜５日間培養後、培養液を捨て、０．５％クリス
タルバイオレット液で染色し、透過型実体顕微鏡下で各
ウエルのプラーク数を数え、試験例１と同じ式によりプ
ラーク形成阻害率を求める。 ６．プラーク形成阻害率を被検薬の濃度（対数表示）に
対してグラフ上にプロットし、用量−プラーク形成阻害
曲線から５０％阻害率を示す被検薬の濃度（ＥＤ₅₀）を
求める。その結果を対照化合物の結果と併せて下記表に
示す。

【００８４】

【表３】

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 式［Ｉ］で表される２’−デオキシ−
   ２’−メチリデン−４’−チオピリミジンヌクレオシド
   化合物。 【化１】 （式中、Ｒ₁はアミノ基または水酸基を示し、Ｒ₂は水
   素、ハロゲン、アルキル、ハロゲン化アルキル、アルケ
   ニル、ハロゲン化アルケニルまたはアルキニルを示し、
   Ｒ₃は水素またはリン酸残基を示す。）
2. 【請求項２】 請求項１記載の化合物を有効成分として
   含有する抗ウイルス剤。