JPH09505272A - テフロシア属、特にテフロシア属プルプレア種の抽出物を含有する化粧用又は薬用及び特に皮膚科用の組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 本発明は、化粧用又は薬用組成物、特に皮膚科用組成物に関する。上記組成物は、化粧品的に又は薬学的に、特に皮膚科学的に有効量のテフロシア属の、特にテフロシア属プルプレア種の植物の抽出物からなるところに特徴がある。本発明によれば、テフロシア属の植物の抽出物が、痩身、色素化、抗老化、又は抗炎症活性を発揮する化粧用、薬用、及び特に皮膚科用組成物の製造に有用であることが見出された。

Description

【発明の詳細な説明】 テフロシア属、特にテフロシア属プルプレア種の抽出物を含有する化粧用又は 薬用及び特に皮膚科用の組成物 本発明は、本質的に、テフロシア属、特にテフロシア属プルプレア種の抽出物 の、薬用組成物、特に皮膚科用組成物製造のための、又は化粧剤としての用途、 及びそれを適用してなる化粧トリートメント方法に関する。 テフロシア属の植物は、広く分布する亜熱帯植物であり、特に、インド及びス リランカに分布している。 テフロシア属に属する種であって、本発明に特に好適であるのは、テフロシア 属プルプレア種である。このものは、高さ３０〜１００ｃｍの多年生植物であっ て、一つのさやに４〜６個の種子を有し、赤色の花をつける。テフロシア属プル プレア種は、特にインドで知られており、このものは、アーユルベーダ医薬、す なわち、伝統的インド医薬として知られている。様々な部位が、各種疾患の治療 のために使用されてきた：気管支、肝臓、腎臓等の病気、及び血液浄化に使用さ れてきた（Ｐａｎｄｅｙ、Ｑｕａｒｔ．Ｊ．Ｃｒｕｄｅ Ｄｒｕｇ Ｒｅｓ．１ ３（１９７５）、ｐｐ．６５〜６８参照）。テフロシア属プルプレア種の種子は 、また、低血糖活性のゆえに使用されてきた（Ｒａｈｍａｎら、Ｉｎｄｉａｎ Ｊ．Ｍｅｄ．Ｒｅｓ．８１、１９８５年４月、ｐｐ．４１８〜４２１参照）。ソ ックスレー抽出器による根部の９０％アルコール抽出物を使用するテフロシア属 プルプレア種のインビトロ抗菌活性もまた知られている（Ａｇａｒｗａｌら、Ｉ ｎｄｉａｎ Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｐｈａｒｍａｃ．、Ｖｏｌ．３１、Ｎｏ．４ 、 １９８７年１０〜１２月、ｐｐ．２８４〜２８６参照）。 テフロシア属の植物を対象とする精力的研究の結果、及び特にテフロシア属プ ルプレア種を対象とする研究の結果、本発明者らは、予期せぬことに、テフロシ ア属の、特にテフロシア属プルプレア種の植物の抽出物、及び特に種子の抽出物 中に、酵素アデニル酸シクラーゼに対する強力な促進活性が存在することを見出 した。この酵素は、ＡＴＰをＡＭＰｃとピロりん酸に変換することが知られてい る。この活性のゆえに、テフロシア属の抽出物、特にテフロシア属プルプレア種 の植物の抽出物は、化粧品又は医薬、特に皮膚科、痩身活性、抗炎症活性、メラ ノサイトに作用することによる色素化活性、及び抗老化活性における応用に有用 である。 従って、第一の態様において、本発明は、テフロシア属の、特にテフロシア属 プルプレア種の植物の抽出物の、医薬組成物、特に、皮膚科用組成物の製造用の 活性物質としての用途を含むものであり、当該活性物質は、酵素アデニル酸シク ラーゼの促進活性、痩身活性、抗炎症活性、色素化活性、及び抗老化活性を、特 に局所的に、所望により薬理学的に及び特に皮膚科学的に許容しうる媒質、分散 媒、賦形剤中に含有させて、適用される場合に、発揮する。 本発明は、また、テフロシア属、特にテフロシア属プルプレア種の植物の抽出 物の、酵素アデニル酸シクラーゼを促進する化粧剤であって、特に局所的に適用 される場合に、痩身効果、色素化効果、又は、抗老化効果を得るものとしての用 途を含む。 有利な態様においては、上記抽出物は、テフロシア属の植物の種子抽出物、特 にテフロシア属プルプレア種の種子抽出物である。 テフロシア属プルプレア種の植物は、また、特にナプララート（Ｎａｐｒａｌｅ ｒｔ、登録商標）データベースによれば、以下の同義 的名称のもとに知られていることに注意すべきである：クラッカ属プルプレア種 、ガレドウバ属ランシエフオリア種、ガレドウバ属プルプレア種、ガレパ属チン クトリア種、テフロシア属ガレゴイデス種、テフロシア属インジゴフエラ種、テ フロシア属ロバタ種、及びテフロシア属マキシマ種であり、これらの全ては、当 然に本発明に含まれる。 有利な態様においては、該種子抽出物は、直鎖又は環状分枝のＣ₁〜Ｃ₆のアル コールで抽出されたヒドロアルコール抽出物である。特に好ましいアルコールと しては、メタノール又はエタノールである。水とアルコールとの量比は、広い範 囲にわたって設定することができる。しかしながら、実質的に等量であることが 好ましい。 第二の態様においては、本発明は、また、痩身効果、色素化効果、又は抗老化 効果を目的として、酵素アデニル酸シクラーゼの促進を獲得するための化粧トリ ートメント方法であって、患部の領域、特に表皮又は毛髪に、テフロシア属、特 にテフロシア属プルプレア種の植物の抽出物の化粧用に有効な量を、所望により 化粧用途に許容しうる媒質、分散媒、賦形剤中に含有させて、局所的に適用する ことに特徴がある化粧トリートメント方法を含む。 有利には、上述のいかなる態様においても、組成物全量に対して抽出物は、０ ．００１〜５重量％、及び好ましくは０．０１〜５重量％使用される。 本発明の他の目的及び利点は、以下に掲げる、もっぱら説明のためのみに記載 されたものであって、本発明の範囲をいかなる意味においても限定するものでは ない、本発明の各種の実施例を参照しつつなされる説明によって明らかとなる。 特に断らないかぎり、詳細な説明中及びクレーム中の％は、重量％である。 実施例１ テフロシア属プルプレア種からの植物抽出物の調製 市販のテフロシア属プルプレア種の種子１０００ｇを粉砕し、１ｍｍの篩にか けた。篩を通過したものを２４時間、５Ｌの５０／５０Ｖ／Ｖメタノール−水混 合物からなるヒドロアルコール抽出溶媒中に浸漬した。 これを１時間、還流した。 その後、これを濾紙で濾過した（この際、必要なら圧力を加えることも可能で あった）。そして、冷メタノールで洗った。 その後、アルコールと水を、濾液から完全になくなるまで真空中で蒸発させた 。 残渣を秤量すると、８０．１１ｇのきれいな結晶質と黒っぽいペーストからな る不均一な外観を呈する抽出物を得た。 粗抽出物は、約５０％の乾燥物と５０％の残余溶媒を含んでいた。 このものは、そのままで使用することができたし、又は、必要なら当業者に周 知の方法により更に精製することも可能であった。 実施例２ ２．３６５ｋｇの市販のテフロシア属プルプレア種の種子を粉砕し、１ｍｍの 篩に通し、その後、石油エーテルで脱脂した。 粉砕され、脱脂された種子は、その後、約１０Ｌのエタノールでソックスレー 抽出器により抽出を２時間行った。 溶媒を留去後、残渣を約５８ｇの褐色ガムとして得た。 実施例３ テフロシア属プルプレア種抽出物によるアデニレートシクラーゼ活性の促進の ための使用 ある種の物質は、細胞内メッセンジャーとして働き、従って、細胞の機能を生 体の要求に適合させるための、細胞の必須構成物質である。このようなメッセン ジャーとしては、例えば、環状モノホスフェートである３′，５′−アデノシン （ＡＭＰｃ）が含まれる。この分子は、アデノシン３′，５′−三りん酸からア デニル酸シクラーゼとよばれる酵素によって合成される。 その理論的反応は以下のとおりである： 理論 細胞膜は、最初、フローラボラトリーズから入手可能の３Ｔ３株Ｆ４４２Ａ系 統を繊維芽細胞集合まで培養することにより得る。 これらの酵素源となる繊維芽細胞膜は、ＡＴＰ存在下、３７℃で予め定められ た時間、反応溶液中でインキュベートされる。 得られるＡＭＰｃは、ラジオイムノアッセイ法によって測定される。基準活性 、すなわち、エフェクターを含まない場合の活性を１００％とすることにより、 エフェクターの酵素系に対する影響を決定することができる。活性が１００％を 超える場合は、アデニル酸シクラーゼの活性化効果があることになり、活性が１ ００％未満である場合は、その反対に阻害効果が示されることになる。実施 細胞膜は、培養した繊維芽細胞から精製される。 この場合、細胞膜の精製は、多くの酵素をアッセイ媒体中に放出することに注 意すべきである。これらのうち二つの酵素は、試験の実施には望ましくない。こ れらは、第一に、ＡＴＰをアデノシン二りん酸に変換するＮａ⁺、Ｋ⁺ＡＴＰａｓ ｅであって、第二に、環状ＡＭＰをＡＭＰに分解する３′，５′−ＡＭＰｃホス ホジエステラーゼである。従って、試験によって信頼性のある結果を得るために は、これら二つの酵素を阻害することが必須となる。前者は、ウアベインによっ て、後者は、テオフィリンによって、それぞれ阻害される。 反応溶液は、従って、以下の配合によって構成される： ・基質として、５ｍＭアデノシン３′，５′−三りん酸（ＡＴＰ）溶液５０μ ｌ； ・ＡＴＰａｓｅ阻害剤として、２０ｍＭウアベイン溶液１００μｌ； ・ホスホジエステラーゼの阻害剤として、２０ｍＭテオフィリン溶液１００μ ｌ； ・エフェクター乾燥物を０．０５ｇ／ｌ含有する溶液１００μｌ； インキュベーションの後、反応は、１００℃、１０分間の加熱によって停止さ れ、遠心分離し、そして上澄みを集めて、ＡＭＰｃをラジオイムノアッセイ法（ キット番号１１１７、フランス、イミュノテック社製）によって測定する。結果 試験の結果は、以下の表に示される。 上記結果から、テフロシア属プルプレア種の植物からの抽出物は、酵素アデニ ル酸シクラーゼを促進する大きな有意の活性を有することが明らかである。この 活性は、植物抽出物がその分子を含有していないにもかかわらず、フォルスコリ ンからなる正の対照の活性に比較的近似している。 従って、テフロシア属抽出物、特にテフロシア属プルプレア種の抽出物は、化 粧用又は薬用組成物の製造に使用する際の、フォルスコリンの興味ある代替物を なしている。 本発明の応用は、特に、ＡＭＰｃが作用する生物学的過程から由来するもので ある。このような応用としては、本発明において好ましくは、痩身用組成物、皮 膚や毛髪の色素化用組成物、抗炎症組成物、及び老化の影響を抑制するための組 成物の製造が挙げられる。 実施例４ 本発明の組成物の脂肪動員活性 ・本発明の組成物の培養脂肪細胞に対する作用の評価 本発明の組成物の脂肪動員剤としての有効性を、マウスの前脂肪細胞、例えば 、フローラボラトリーズ社から入手可能な３Ｔ３株Ｆ４４２系統等の細胞を用い て、評価することにした。３Ｔ３株Ｆ４４２系統等のマウスの前脂肪細胞は、培 養条件がそれを可能とするならば、脂肪細胞に 変化する能力を有するので選択された。 （Ｈ．Ｇｒｅｅｎ及びＣ．Ｋｅｈｉｎｄｅ、Ｃｅｌｌ、１（１９７４）、１１３ 記載の方法の応用） この系統は、インビトロにおいて脂肪細胞の分化を調べるためのモデルを構成 するものであって、脂肪細胞の表現型が完成されると、本発明における細胞機能 の細胞外調節を調べる可能性を提供するものである。この分化及びその調節は、 幾つかの形態的及び生化学的変化を伴っており、特に、脂肪分解におけるグリセ ロールの放出に関する生化学的変化を伴っている。 従って、試験対象化合物の有効性を、下記式で表される脂質生成反応に含まれ るグリセロール−３−りん酸デヒドロゲナーゼ（Ｇ３ＰＤＨという）の活性を測 定することによって、評価することが便利である： 従って、酵素活性は、ジェイ．ペロー（Ｊ．Ｐａｉｒａｕｌｔ）らによるＰｒ ｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．、第６巻（１９７９）、ｐｐ．５１３８〜４ ２に記載の方法によって、放出ＮＡＤＨを検定する方法を用いることによって測 定することができる。 これらの実験は、以下のようにして実施された。 １）培養条件 ５％子牛血清、プラス５％牛胎児血清を含有するダルベッコモディファイドイ ーグル培地（ＤＭＥＭ）の存在下、前脂肪細胞は、直径３５ｍｍのペトリ皿に蒔 かれた（２００００細胞／皿）。 培養液は、ＤＭＥＭ培地プラス１０％牛胎児血清によって２度更新さ れた。 この条件下に、培養は、１週間（Ｄ＝Ｄ０）で集合状態に達した。この段階で 、培養液に対して１重量％の濃度でインシュリンを添加することにより、脂肪細 胞分化が活性化された。更にＤＭＥＭ培地プラス１０％牛胎児血清及び１％イン シュリンの２回の交換をした。 細胞は、集合状態に達してから１週間後（Ｄ＝Ｄ７）に、更なる分化状態を呈 した。 ２）処理−生育力 細胞は、段階Ｄ７において、試験物質によって処理された。 処理は、対照として培養液を、溶媒のみによって、又は、同じ溶媒であってし かし各濃度の試験物質を含んだものによって、置き換えることによって行われた 。 Ｇ３ＰＤＨ活性を検定するために、培養液を処理後７日（Ｄ＝Ｄ１４）に集めた 。 ３）Ｄ１４の日におけるＧ３ＰＤＨ酵素活性の検定 一層の細胞をはぎ取って集め、これを２５ｍＭトリスＨＣｌ緩衝液中、ｐＨ７ ．４で１ｍＭのＥＤＴＡ存在下、４℃にて激しくホモジェナイズした。Ｇ３ＰＤ Ｈ活性は、遠心分離後、細胞顆粒上澄みについて検定した。 検定は、上記ペローアッセイ法により行い、ｍｇタンパク質あたりのＧ３ＰＤ Ｈ酵素活性を測定した。タンパク質含量は、ジェイ．ローリー（Ｊ．Ｌｏｗｒｙ ）によるＢｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、１９３（１９５１）、ｐｐ．２６５〜７５、記 載のタンパク質検定方法によって測定し、酵素活性は、ナノモル／分／ｍｇタン パク質で表した。 これらの試験は、各サンプル毎、各対照毎に行った。 以下の物質を試験に供した： ａ）最初の対照物質としてＤＭＥＭ培地に、６ｍｌの培地に対して７．５μｌ のエタノールを添加したもの； ｂ）同一の培地であって、しかし、６０μｌのＤＭＳＯ（ジメチルスルホキシ ド）を６ｍｌの培地に添加したもの； ｃ）同一の培地であって、しかし、フォルスコリンを含有するコレウス属フォ ルスコリイ種の、市販の抽出物を、７．５μｌエタノール中に乾燥物を０．０２ ５ｇ／ｌの濃度で希釈したものを６ｍｌの培地に添加したもの； ｄ）上記ＤＭＥＭ培地に、６ｍｌの培地に対して、実施例２で得たテフロシア 属プルプレア種乾燥抽出物を０．２ｇ／ｌで６０μｌのＤＭＳＯによって希釈し たものを添加したもの； ｅ）ＤＭＥＭ培地に、６ｍｌの培地に対して、実施例２で得たテフロシア属プ ルプレア種乾燥抽出物を０．１ｇ／ｌで６０μｌのＤＭＳＯによって希釈したも のを添加したもの；及び ｆ）ＤＭＥＭ培地に、６ｍｌの培地に対して、実施例２で得たテフロシア属プ ルプレア種乾燥抽出物を０．０５ｇ／ｌで６０μｌのＤＭＳＯによって希釈した ものを添加したもの。 得られた結果を下記表２に示す： 表２の結果から、テフロシア属プルプレア種の植物の抽出物は、少量のＮＡＤ Ｈ放出によって示されているように、Ｇ３ＰＤＨ活性のかなり有意な阻害活性を 有していることが明らかである。更に、濃度０．０２ｇ／１から、この活性は、 アデニル酸シクラーゼを促進する活性及び脂肪分解に対する効果によって知られ ているフォルスコリンを含有するコレウス属フオルコリイ種の抽出物によって得 られる活性に比べて同一程度か又は若干大きいことが判る。 フォルスコリンを含有せず、従って上述した活性のための化粧用又は薬用の組 成物を製造するための用途において、フォルスコリンに対する興味深い代替物を 提供する物質を用いて、Ｇ３ＰＤＨ活性を阻害することは有利である。 本発明を、以下に、化粧用又は薬用、特に皮膚科用組成物の各種配合実施例を 掲げつつ説明する。 実施例５ 痩身用クリーム ・実施例１のテフロシア属プルプレア種の種子抽出物 １％ ・クリーム用賦形剤 ｑ．ｓ．ｐ． １００％ このクリームは、望ましい痩身効果が得られるまで、少なくとも１日１回、２ 〜３週間の間、脂肪のついた身体の領域に適用される。 実施例６ 色素化用化粧用組成物 この組成物は、下記成分からなる： ・実施例１のテフロシア属プルプレア種の種子抽出物 ０．５％ ・通常の化粧用ゲル賦形剤 ｑ．ｓ．ｐ． １００％ このゲルは、望ましい効果が得られるまで、色素化すべき皮膚の領域に適用さ れる。 実施例７ 抗炎症用医薬組成物、特に皮膚科用組成物 この組成物は、下記成分からなる： ・実施例１のテフロシア属プルプレア種の種子抽出物 ０．２％ ・薬理学的に許容しうる賦形剤 ｑ．ｓ．ｐ． １００％ 実施例８ 抗老化用化粧用組成物 この組成物は、下記成分からなる： ・実施例１のテフロシア属プルプレア種の種子抽出物 ０．１％ ・常用の化粧用賦形剤 ｑ．ｓ．ｐ． １００％ この組成物は、皮膚の、抗老化効果が求めれる領域に適用され、このものは、 充分な期間にわたって、条件にもよるが、通常、数週間から数 カ月にわたって適用される。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．テフロシア属の、特にテフロシア属プルプレア種の植物の抽出物の使用であ って、特に局所的に、所望により薬理学的に及び特に皮膚科学的に許容しうる媒 質、分散媒、又は賦形剤中に含有させて、適用された場合に、酵素アデニル酸シ クラーゼを促進する活性、痩身活性、抗炎症活性、色素化活性及び抗老化活性を 示す薬用組成物、特に皮膚科用組成物を製造するための活性物質としての使用。 ２．テフロシア属の、特にテフロシア属プルプレア種の植物の抽出物の使用であ って、特に局所的に適用された場合に、痩身効果、色素化効果又は抗老化効果を 得るための、酵素アデニル酸シクラーゼを促進する化粧剤としての使用。 ３．前記抽出物が、種子抽出物であることを特徴とする請求の範囲第１項又は第 ２項記載の使用。 ４．前記抽出物が、テフロシア属プルプレア種の種子抽出物であることを特徴と する請求の範囲第１項又は第３項記載の使用。 ５．テフロシア属抽出物が、組成物全量に対して０．００１〜５重量％、好まし くは０．０１〜５重量％の範囲の濃度で組成物中に存在することを特徴とする先 行するいずれかの請求の範囲に記載の使用。 ６．上記抽出物が、Ｃ₁〜Ｃ₆のアルコール又はＣ₁〜Ｃ₆のヒドロアルコール抽出 溶媒から得られたものであり；アルコール溶媒は、特にメ タノール及びエタノールから選択されたものであることを特徴とする先行するい ずれかの特許請求の範囲に記載の使用。 ７．酵素アデニル酸シクラーゼの促進によって、痩身効果、色素化効果、又は抗 老化効果を得るための化粧用トリートメントの方法であって、患部に、特に表皮 又は毛髪に、局所的に、テフロシア属の、特にテフロシア属プルプレア種の植物 の抽出物の化粧用に有効な量を、所望により化粧用に許容しうる媒質、分散媒、 又は賦形剤中に含有させて、適用することを特徴とする方法。 ８．抽出物が、組成物全量に対して、乾燥重量として０．００１〜５重量％、好 ましくは０．０１〜５重量％の濃度で含有される組成物として適用されることを 特徴とする請求の範囲第７項記載の方法。 ９．テフロシア属抽出物が、痩身が要求される表皮の領域に適用されることを特 徴とする請求の範囲第７項又は第８項記載の方法。 １０．テフロシア属抽出物が、色素化が要求される表皮又は毛髪の領域に適用さ れることを特徴とする請求の範囲第７項又は第８項記載の方法。 １１．テフロシア属抽出物が、抗老化活性が要求される場合に、表皮の領域に適 用されることを特徴とする請求の範囲第７項又は第８項記載の方法。