JPH09504167A

JPH09504167A - ドクムギ花粉アレルゲンのｔ細胞エピトープ

Info

Publication number: JPH09504167A
Application number: JP7508127A
Authority: JP
Inventors: ジェイ．グリフィス，アーウィン; チャンクウォ，メイ; ルクマン，モハマド
Original assignee: イミュロジックファーマスーティカルコーポレイション
Priority date: 1993-08-13
Filing date: 1994-08-05
Publication date: 1997-04-28
Also published as: AU7559794A; EP0714440A1; CA2168565A1; FI960629A7; NZ271818A; WO1995006728A2; NO960553D0; FI960629A0; ZA946068B; IL110619A0; FI960629L; NO960553L; WO1995006728A3

Abstract

(57)【要約】本発明は、ドクムギ属のLolium perenne種の主要蛋白質アレルゲンであるLolｐＶの単離ペプチドを提供する。本発明の範囲内の治療用ペプチドは、LolｐＶの蛋白質アレルゲンの少なくとも１Ｔ細胞エピトープ、または、好ましくは、少なくとも２Ｔ細胞エピトープを含む。本発明の範囲内の診断用ペプチドは、IgEに結合する。本発明は、対応する天然に産するアレルゲンまたはその一部に類似の、または強化された治療特性もしくは他の望ましい特性を有する修飾されたペプチドも提供する。本発明は、更に、本発明のペプチドを暗号化している核酸配列を提供する。LolｐＶ、またはLolｐＶに免疫学的に近縁のアレルゲンに対する感受性の治療のため、あるいは個体の一般的なドクムギに対する感受性のための医薬の製造に、本発明の１種類またはそれ以上のペプチドを含む治療用組成物を用いることも提供される。本発明は、DacｇＶ蛋白質アレルゲンのアミノ酸配列はもとより、DacｇＶ蛋白質アレルゲンを暗号化している核酸配列も提供する。

Description

【発明の詳細な説明】ドクムギ花粉アレルゲンのＴ細胞エピトープ［発明の背景］アレルゲンは、草本花粉の最も豊富な蛋白質を構成し、温和な気候でのアレルギー疾患の主因である［Marsh（1975年）「アレルゲン、およびアレルギーの遺伝学（Allergens and the genetics of allergy）」：M．Sela編、The Antigens 第３巻271〜359ページ、Academic Press Inc．英国ロンドン、米国ニューヨークより；Hillら（1979年）：Med．J．Australia第１巻426〜429ページ］。ドクムギのアレルゲン性蛋白質の最初の記載は、それらが免疫化学的に明確であり、第１、第２、第３および第４群として公知であることを示した［Johnson およびMa rsh（1965年）：Nature第206 巻935〜942ページ；Johnson およびMarsh（1966年）：Immunochemistry 第３巻91〜100ページ］。国際免疫学会連合（IUIS）の命名法を用いて、これらのアレルゲンはLolｐＩ、 LolｐII、LolｐIIIおよびLolｐ IVと名付けられている。加えて、文献中で特定されているもう一つの重要なLoli um perenne L．のアレルゲンは、LolｐIXであって、LolｐＶまたはLolｐIbとしても公知である［Singhら（1991年）：Proc．Natl．Acad．Sci．USA第88巻1,384 〜1,388ページ］。これら５種類の蛋白質は、花粉ドクムギであるLolium perenne L．で特定されており、感受性のあるヒトに即時型（１型）過敏症を誘発する際の抗原として作用する。 LolｐＶはアレルゲンとして定義されるが、それは、それがドクムギ感受性患者の血清中の特異的IgEに結合し、IgG の応答の際に抗原として作用し、そしてＴ細胞の応答を誘発できるからである。アレルゲンとしての特性は、ドクムギ花粉感受性患者の80％が、LolｐＶイソ型蛋白質に結合する特異的IgE 抗体を有することを示す免疫ブロットの研究によって立証されている［ＰＣＴ出願公報第WO 93/04174号65ページ］。これらの結果は、LolｐＶが主要なドクムギアレルゲンであることを示す。草本花粉間の実質的なアレルゲン性交叉反応性は、例えば、Marshら（1970年）［J．Allergy第46巻107〜121ページ］、およびLowenstein（1978年）［Prog． Allergy 第25巻1〜62ページ（スイス国バーゼル）］が記載したとおり、一種のI gE 結合検定法である放射性アレルギー吸収試験（RAST）を用いて立証されている。 LolｐＶと他の草本花粉抗原との免疫化学的関係は、ポリクローナル抗体とモノクローナル抗体との双方を用いて立証されている［Zhang ら：Int．Arch．All ergy Appl．Immunol．第96巻28〜34ページ（1991年）；Roberts ら：Int．Arch. Allergy Appl．Immunol．第98巻178〜180ページ（1992年）；Mattheisenおよび Lowenstein：Clinical and Experimental Allergy 第21巻309〜320ページ（1991 年）；van Reeら：J．Allergy Clin．Immunol．第83巻144〜151ページ（1989年）］。抗体は、IgE の成分を結合させる精製蛋白質に対して調製された。これらのデータは、非常に近縁の草本の花粉中に存在する主要アレルゲンは、免疫化学的にLolｐＶに類似し、一般に、第５群アレルゲンとして特徴付けられることを証明する。ドクムギ花粉アレルゲンおよび近縁草本のアレルゲンの全世界的な普及を考慮すると、LolｐＶ、または他の免疫学的に近縁の草本アレルゲンに対する感受性を検出し、あるいはそのようなアレルゲンに対する感受性を治療し、あるいはそのような感受性を治療する医薬の製造を助けるのに用い得るような組成物もしくは方法の開発に対する差し迫った必要性が存在する。本発明は、これらの効用のうち一つまたはそれ以上を有する材料および方法を提供する。［発明の要約］本発明は、LolｐＶの単離ペプチドを提供する。本発明の範囲内のペプチドは、LolｐＶの少なくとも１Ｔ細胞エピトープ、好ましくは少なくとも２Ｔ細胞エピトープを含む。更に、本発明は、LolｐＶの少なくとも１Ｔ細胞エピトープをそれぞれ含む少なくとも２領域を含むペプチドを提供する。本発明は、対応する天然に産するアレルゲンまたはその部分として、類似の、または強化された治療特性を有するが、減殺された副作用を有する修飾されたペプチドはもとより、増大させた溶解度および安定性のような改良された特性を有する修飾されたペプチドも提供する。本発明の治療用ペプチドは、投与されるLo lｐＶ感受性の個人での、LolｐＶ、またはLolｐＶに免疫学的に交叉反応性であるアレルゲン、例えば、Dactylis glomerataのようなイネ科に属する花粉に由来するアレルゲンのDacｇＶに対する該個人のアレルギー性応答を変化させることができる。ドクムギ花粉蛋白質のLolｐＶ、またはDacｇＶのようなLolｐＶに免疫学的に近縁である花粉蛋白質に対する個人の感受性を治療もしくは診断する方法、ならびに本発明の１種類またはそれ以上のペプチドを含む治療用組成物も提供される。本発明は、LolｐＶに対して免疫学的に交叉反応性であるDacｇＶ蛋白質の核酸およびアミノ酸配列も提供する。本発明のその他の特徴は、本発明の好適実施態様の、添付の図面と結び付けての下記の詳細な説明から、より良く理解されるものと思われる。［図面の簡単な説明］図１は、ｃＤＮＡクローンである１２Ｒ（配列番号１）のヌクレオチド配列、および予測されるそのアミノ酸配列（配列番号２）を示す。クローン１２Ｒは、 λgtIIのライブラリーに由来するLolｐＶの完全な長さのクローンである（ＰＣＴ出願公報第WO93/04174号を参照のこと）。図２は、LolｐＶに由来する様々な長さの本発明のペプチド（配列番号３〜29 ）を示す。図３は、LolｐＩに由来する様々な長さのペプチド（配列番号30〜53）を示す。図４は、親和性で精製したLolｐＶで生体外で初回抗原刺激し、LolｐＶペプチド（LolｐＶ蛋白質アレルゲンに由来）に対する応答について分析した患者19名からのＴ細胞系統の応答を、平均Ｓ．Ｉ．が少なくとも２である応答の百分率（各棒の上に表示）によって示すグラフ表示であって、カッコで囲んだ数字が、個々のペプチドに応答した患者の百分率を表し、棒は、各ペプチドについての陽性度指数（平均Ｓ．Ｉ．を乗じた応答患者の％）を表す。図５は、各ペプチドについての順位付け和を示す、図４に示したのと同じデータから導かれたグラフ表示であって、棒は、試験した19患者の群でのペプチド応答の累積順位を表し、各棒の上には、各ペプチドに陽性に応答する患者の百分率をカッコ内に示し、Ｓ．Ｉ．も各棒の上に示す。図６は、直接ＥＬＩＳＡの結果のグラフ表示であって、IgE の採取源は、ＰＨＰ−Ａと名付けた貯留ヒト血漿（ＰＨＰ）の試料であり、抗原は、ドクムギ花粉の可溶性花粉抽出物（ＳＰＥ）、または細菌で発現させた組換えLolｐＶ（rLol ｐＶ）のいずれかである。図７は、直接ＥＬＩＳＡの結果のグラフ表示であって、IgE の採取源は、ＰＨＰ−Ｂと名付けた貯留ヒト血漿（ＰＨＰ）の試料であり、抗原は、ドクムギ花粉の可溶性花粉抽出物（ＳＰＥ）またはrLolｐＶのいずれかである。図８は、直接ＥＬＩＳＡの結果のグラフ表示であって、IgE の採取源は、＃11 18、＃1120、＃1125および＃1141という個人患者４名からの血漿であり、抗原は、ドクムギ花粉ＳＰＥである。図９は、直接ＥＬＩＳＡの結果のグラフ表示であって、IgE の採取源は、＃11 18、＃1120、＃1125および＃1141という個人患者４名からの血漿であり、抗原は、rLolｐＶである。図10は、競合ＥＬＩＳＡの結果のグラフ表示であって、IgE の採取源は、ＰＨＰ−Ａと名付けた貯留ヒト血漿の試料であり、IgE の結合は、ドクムギ花粉ＳＰＥ、親和性で精製した未変性LolｐＶまたはrLolｐＶの存在下で測定した。図11は、競合ＥＬＩＳＡの結果のグラフ表示であって、IgE の採取源は、IgE 採取源としての＃706という個人患者からの血漿であり、IgE の結合は、ドクムギ花粉ＳＰＥ、親和性で精製した未変性LolｐＶまたはrLolｐＶの存在下で測定した。図12は、ドクムギ花粉ＳＰＥおよびrLolｐＶに対するヒスタミン放出検定のグラフ表示である。図13aおよび図13bは、IgE 採取源としてＰＨＰ−Ｂと名付けた貯留ヒト血漿の試料を用い、抗原が、LolｐＶまたはrLolｐＶのいずれかに由来する選ばれたペプチドである直接ＥＬＩＳＡの結果のグラフ表示をそれぞれ示す。図14は、IgE 採取源としてＰＨＰ−Ｂと名付けた貯留ヒト血漿の試料を用い、抗原が、親和性で精製したLolｐＩとLolｐＶとの混合物、またはドクムギ花粉ＳＰＥに対するIgE の結合について競合させるための組換えLolｐＩ（rLolｐＩ）もしくはrLolｐＶの混合物である競合ＥＬＩＳＡのグラフ表示である。図15は、Ab1B9の親和性で精製した未変性LolｐＶのクーマシーブルー染色ＳＤＳ−ＰＡＧＥ（12.5％）分析の写真であって、試料を還元性条件下で処理し、分子量の標準を左に示してある。図16は、DacｇＶのクローン259番のヌクレオチド配列、および予測されたそのアミノ酸配列を示す。ヌクレオチド１〜699番のヌクレオチド配列は確認されているが、ヌクレオチド700〜1,181番のヌクレオチド配列は確認されていない。［発明の詳細な説明］本発明は、LolｐＶに由来する単離されたペプチドを提供する。本発明は、Lol ｐＶと免疫学的に交叉反応性であるDacｇＶという蛋白質アレルゲンも提供する。ここで用いられる限りで、「ペプチド」は、LolｐＶの免疫応答を誘導するいかなる蛋白質断片をも意味する。ここで用いられる限りでの用語「断片」および「抗原性断片」は、該断片が由来する蛋白質のアミノ酸配列全体より少数のアミノ酸残基を有し、免疫応答を誘導するアミノ酸配列を指す。ここで用いられる限りでの用語「単離（された）」および「精製（された）」は、組換えＤＮＡの手法を用いて生産されたときに、細胞性物質または培地を実質的に含まないか、または化学的に合成されたときに、化学的前駆体その他の化学物質を実質的に含まない、本発明のペプチドを指す。ここで用いられる限りで、本発明の「ペプチド」という用語は、LolｐＶに由来する、該アレルゲンの少なくとも１Ｔ細胞エピトープを含むペプチド、またはそのようなペプチドの少なくとも１Ｔ細胞エピトープを含む一部分を包含する。それぞれLolｐＶの少なくとも１Ｔ細胞エピトープを含む少なくとも２領域を含むペプチドも、本発明の範囲内にある。それぞれLolｐＶという蛋白質アレルゲンの少なくとも２Ｔ細胞エピトープを含む単離ペプチド、または単離ペプチドの領域は、治療効果の増大のためには特に望ましい。本発明のペプチドに免疫学的に（例えば、抗体またはＴ細胞の交叉反応性によって）類縁付けられるペプチド、例えばDacｇＶからのペプチドも、本発明の範囲内にある。抗体の交叉反応性によって免疫学的に類縁付けられるペプチドは、LolｐＶのペプチドに特異的な抗体によって結合される。Ｔ細胞の交叉反応性によって類縁付けられるペプチドは、本発明のペプチドと同じＴ細胞と反応できる。本発明の単離ペプチドは、そのようなペプチドを暗号化している配列を有する核酸で形質転換された宿主細胞での、組換えＤＮＡの手法によって生産できる。本発明の単離ペプチドは、化学的合成によっても生産できる。組換え手法によってペプチドを生産するときは、本発明のペプチドを暗号化している配列を有する核酸、または該核酸配列の機能的等価体で形質転換した宿主細胞を、該細胞に適した培地で培養し、イオン交換クロマトグラフィー、ゲル濾過クロマトグラフィー、限外瀘過、電気泳動、または該ペプチド、該ペプチドが由来する蛋白質アレルゲンまたはその一部による免疫精製法を包含する、ペプチドおよび蛋白質を精製するための当技術に公知の手法を用いて、該細胞培養の培地、該宿主細胞またはその双方からペプチドを精製することができる。本発明は、本発明の核酸配列を発現するよう形質転換された発現ベクターおよび宿主細胞を提供する。本発明のLolｐＶペプチドまたはその少なくとも１断片に対する核酸の暗号は、大腸菌のような細菌細胞、昆虫細胞、酵母、またはチャイニーズハムスター卵巣細胞（ＣＨＯ）のような哺乳類の細胞で発現させ得る。適切な発現ベクター、プロモーター、エンハンサーその他の発現制御要素は、Sa mbrookの「分子クローニング：研究室マニュアル（Molecular Cloning: A Labor atory Manual）」第２版、Cold Spring Harbor Laboratory Press、米国ニューヨーク州Cold Spring Harbor（1989年）に見出し得る。他の適切な発現ベクター、プロモーター、エンハンサーその他の発現要素は、当技術に公知である。酵母での発現に適したベクターは、YepSecl［Baldariら（1987年）：Embo J．第６巻 229〜234ページ］、pMFa［KurjanおよびHerskowitz（1982年）：Cell第30巻933 〜943ページ］、JRY88［Schultzら（1987年）：Gene第54巻113〜123ページ］およびpYES2（Invitrogen Corporation、米国カリフォルニア州サンディエゴ）を包含する。これらのベクターは無料で入手できる。バキュロウイルス系および哺乳類の発現系も入手できる。例えば、昆虫細胞での発現用には、バキュロウイルス系が商業的に入手でき（PharMingen、米国カリフォルニア州サンディエゴ）、哺乳類細胞での発現用には、pMSGベクターが商業的に入手できる（Phar macia、米国ニュージャージー州Piscataway）。大腸菌での発現用には、適切なベクターは、とりわけ、pTRC［Amannら（1988 年）：Gene第69巻301〜315ページ］；pGEX（Amrad Corp．、オーストラリア国メルボルン）；pMAL（N.E．Biolabs、米国マサチューセッツ州Beverly）；pRIT5（ Pharmacia、米国ニュージャージー州Piscataway）；pET-11d（Novagen、米国ウィスコンシン州Madison）［Jameelら（1990年）：J．Virol．、第64巻3,963〜3, 966ページ］およびpSEM［Knappら（1990年）：BioTechniques、第８巻280〜281 ページ］を包含する。例えばpTRCやpET-11dの利用は、融合していない蛋白質の発現に導くことになる。pMAL、pRIT5、pSEMおよびpGEXの利用は、マルトースＥ結合蛋白質（pMAL）、蛋白質Ａ（pRIT5）、断端β−ガラクトシダーゼ（PSEM）またはグルタチオンＳ−移転酵素（pGEX）に融合したアレルゲンの発現に導くことになる。本発明のLolｐＶペプチドを融合蛋白質として発現させると、担体蛋白質とLolｐＶペプチドとの間の融合接点で酵素の切断部位を導入するのに特に好都合である。そうして、蛋白質やペプチドの精製のための慣用の手法を用いて、この酵素部位での酵素的切断、および生化学的精製によって、LolｐＶペプチドを融合蛋白質から回収し得る。適切な酵素切断部位は、血液凝固因子Xaまたはトロンビンに対するそれらを包含し、これらに適した切断のための酵素および操作手順が、例えば、Sigma Chemical Company（米国ミズーリ州セントルイス）およびN.E．Biolabs（米国マサチューセッツ州Beverly）から商業的に入手できる。また、異なるベクターは、例えばＩＰＴＧ誘導（PRTC、Amannら（1988年）：前出；pET-11d、Novagen、米国ウィスコンシン州Madison）または温度誘導（pRI T5、Pharmacia、米国ニュージャージー州Piscataway）による構成的もしくは誘導可能な発現を許す異なるプロモーターを有する。組換えによって発現させた蛋白質を分解する変化した能力を有する異なる宿主の大腸菌で、組換えLolｐＶペプチドを発現させるのも（例えば米国特許第4,758,512号明細書）適切であり得る。これに代えて、大腸菌によって優先的に利用されるコドンを用いるために核酸配列を変化させるが、そのような核酸の変化が、発現させた蛋白質のアミノ酸配列に影響しないようにすることも好都合であり得る。リン酸カルシウムまたは塩化カルシウムの共沈、ＤＥＡＥ−デキストラン媒介トランスフェクション、または電気穿孔法のような慣用の手法を用い、宿主細胞を形質転換して、本発明の核酸配列を発現させることができる。宿主細胞を形質転換させるのに適した方法は、Sambrookら（前出）その他の研究室用教科書に見出し得る。本発明の核酸配列は、標準的手法（すなわち固相合成法）を用いて、化学的に合成してもよい。LolｐＶ（LolｐIb.1として記載されている）を暗号化しているクローン１２Ｒの単離およびクローニングの詳細は、引用によってそのままここに組み込まれるＰＣＴ出願第WO93/04174号公報に与えられている。誘導できる非融合発現ベクターは、pTrc［Amannら（1988年）：Gene第69巻30 １〜315ページ］およびpET11d［Studierら：Gene Expression Technology: Meth ods in Enzymology、Academic Press、米国カリフォルニア州サンディエゴ（199 0年）、第185巻60〜89ページ］を包含する。標的遺伝子の発現は、pTrcでは雑種 trp-lac融合プロモーターからの宿主ＲＮＡ重合酵素の転写に依存するのに対し、pET11dに挿入された標的遺伝子の発現は、同時発現させたウイルスＲＮＡ重合酵素が介在するＴ７ gn10-lac0融合プロモーター（Ｔ７ gnl）からの転写に依存する。このウイルス性重合酵素は、宿主系統のＢＬ２１（ＤＥ３）またはＨＭＳ１７４（ＤＥ３）によって、lac ＵＶ５というプロモーターの転写制御下で、Ｔ７ gnlを潜在させる常在性λプロファージから供給される。大腸菌での組換えLolｐＶペプチドの発現を最大化する一つの基本方針は、組換え蛋白質を蛋白質分解によって切断する能力が損なわれた宿主細菌中で、蛋白質を発現させることである［S．Gottesman：Gene Expression Technology: Meth ods in Enzymology、Academic Press、米国カリフォルニア州サンディエゴ（199 0年）、第185巻119〜128ページ］。もう一つの基本方針は、各アミノ酸に対する個々のコドンが、高度に発現された大腸菌蛋白質で優先的に利用されるものになるように、発現ベクターに挿入しようとする望みの遺伝子の核酸配列を変えることであると思われる［和田ら（1992年）：Nuc．Acids Res．第20巻2,111〜2,118 ページ］。本発明の核酸配列のそのような変化は、標準的なＤＮＡ合成手法によって実施できると思われる。本発明の核酸は、標準的手法を用いて、化学的にも合成できる。ペプチド合成のように、商業的に入手できるＤＮＡ合成装置で完全に自動化されている固相合成法をはじめ、ポリヌクレオチドを化学合成する各種の方法が公知である（例えば、引用によってここに組み込まれる板倉らの米国特許第4,598,049号明細書；C arutherらの米国特許第4,458,066号明細書；および板倉の米国特許第4,401,796 号および第4,373,071号明細書を参照のこと）。本発明は、本発明のペプチドを暗号化している核酸配列も提供する。本発明のいかなる実施態様に用いられる核酸配列も、図２（配列番号第３〜２９番）に示したような対応するペプチドを暗号化しているｃＤＮＡであることができる。そのようなオリゴデオキシヌクレオチド配列は、公知の手法を用いて、化学的または機械的に生産できる。オリゴヌクレオチドの機能的等価体は、（１）図１に示したようなLolｐＶの配列（もしくは対応する配列部分）またはその断片がそれとハイブリッド形成する相補的オリゴヌクレオチドとハイブリッド形成できる配列であるか、（２）図２に示したようなLolｐＶに由来するペプチド配列を暗号化している核酸配列と相補的な対応する配列部分であるか、および／または（３）図１に示したようなLolｐＶの配列（もしくは対応する配列部分）によって暗号化される生成物の同一の機能的特徴性を有する生成物（例えばポリペプチドもしくはペプチド）を暗号化した配列であるそれである。ある機能的等価体が一つまたはそれ以上の基準に合致しなければならないか否かは、その用途によるものと思われる（例えば、オリゴプローブとしてのみそれを用いようとするにすぎないならば、第一または第二の基準にのみ合致する必要があるにすぎず、本発明のLo lｐＶペプチドを生産するのに用いようとするならば、第三の基準にのみ合致する必要があるにすぎない）。本発明の核酸配列は、上記のとおりに調製されたＤＮＡから転写され得るＲＮＡも包含する。好適な核酸は、本発明のLolｐＶペプチドに対する約50％以上の相同性、より好ましくは約60％以上、最も好ましくは約70％以上の、本発明のLolｐＶペプチドとの相同性を有するペプチドを暗号化している。本発明のLolｐＶペプチドとの約90％以上、より好ましくは約95％以上、最も好ましくは約98〜99％以上の相同性を有するペプチドを暗号化している核酸も、本発明の範囲内にある。相同性とは、LolｐＶの２ペプチド間の、または２核酸分子間の配列の類似性を指す。相同性は、比較を目的として整列させ得る各配列中の位置を比較することによって決定することができる。比較された配列中の位置が、同じヌクレオチドまたはアミノ酸に占められているときは、分子はその位置で相同である。配列間の相同性の度合いは、配列が共有する、対合するか、または相同である位置の数の関数である。好適な核酸断片は、長さが７アミノ酸残基以上、好ましくは長さが13〜14アミノ酸残基、より好ましくは長さが16〜30アミノ酸残基以上のペプチドを暗号化している。長さが30アミノ酸残基以上、長さが40アミノ酸残基以上、長さが約80アミノ酸残基以上、長さが約100アミノ酸残基以上またはそれ以上のペプチドを暗号化している核酸断片も予期される。 LolｐＶと免疫学的に交叉反応性であるアレルゲン、例えば完全な長さのDacｇＶ蛋白質またはペプチトを暗号化している核酸配列（図16）も、本発明の範囲内にある。DacｇＶの蛋白質およびペプチドは、上記に考察したとおりに組換えによって、または合成によって生産してよい。DacｇＶ蛋白質またはそのペプチドを発現するよう形質転換させた発現ベクターおよび宿主細胞も、本発明の範囲内にある。DacｇＶのクローニングの詳細は、実施例中に与える。本発明は、本発明の単離LolｐＶペプチドまたはその一部を生産する方法であって、本発明のLolｐＶペプチドを暗号化している核酸配列で形質転換した宿主細胞を適切な培地で培養して、該LolｐＶペプチドを含有する細胞と培地との混合物を生産する段階と；該混合物を精製して、実質的に純粋なLolｐＶペプチドを生産する段階とを含む方法も提供する。本発明のLolｐＶペプチドまたはその一部を暗号化しているＤＮＡを含有する発現ベクターで形質転換した宿主細胞は、該宿主細胞に適した培地で培養する。本発明のLolｐＶペプチドは、イオン交換クロマトグラフィー、ゲル濾過クロマトグラフィー、限外濾過、電気泳動、および本発明のLolｐＶペプチドまたはその一部に特異的な抗体による免疫精製法を包含する、ペプチドおよび蛋白質を精製するための当技術に公知の手法を用いて、細胞培養の培地、宿主細胞またはその双方から精製することができる。本発明のもう一面は、LolｐＶペプチドと特異的に反応する抗体に関する。そのような抗体は、アレルゲン抽出物を規格化し、または天然に産するLolｐＶを単離するのに用い得る。また、本発明のLolｐＶペプチドは、アレルゲン抽出物を規格化するための「精製」アレルゲンとして用いることができる。例えば、マウスまたはウサギのような動物を、本発明の単離LolｐＶペプチドの、抗体応答を誘発できる免疫原の形態で免疫することができる。ペプチドに免疫原性を賦与する手法は、担体への接合その他の当技術に周知の手法を包含する。LolｐＶペプチドは、アジュバントの存在下で投与もできる。免疫処置の進捗は、血漿もしくは血清中の抗体価の検出によって監視でき、標準的ＥＬＩＳＡその他の免疫検定法を免疫原を抗原として用いて、抗体のレベルを評価することができる。免疫処置に続いて、抗LolｐＶペプチド抗血清を得ることができ、望まれるならば、ポリクローナル抗LolｐＶペプチド抗体を血清から得てもよい。モノクローナル抗体を生産するには、免疫した動物から抗体生産細胞（リンパ球）を採集し、標準的体細胞融合操作によって、骨髄腫細胞のような不死化細胞と融合させて、ハイブリドーマ細胞を生じさせることができる。ハイブリドーマ細胞は、免疫化学的にふるい分けして、本発明のLolｐＶペプチドと反応する抗体が生産できる。これらの血清またはモノクローナル抗体を、アレルゲン抽出物を規格化するのに用いることができる。本発明のペプチドや抗体の利用を通じて、一貫した、充分に確定された組成および生物学的活性を有する製剤が製造でき、治療を目的として（例えば、ドクムギ花粉に感受性である個人の、そのような草本の花粉、またはDacｇＶのような免疫学的に近縁の草本の花粉に対するアレルギー性応答を変更するために）投与できる。そのようなペプチドの投与は、例えば、LolｐＶアレルゲンに対するＢ細胞の応答、LolｐＶアレルゲンに対するＴ細胞の応答、またはその双方の応答を変更し得る。単離ペプチドは、ドクムギ花粉アレルギーの免疫療法の機序を研究し、免疫療法に役立つ修飾された誘導体または類似体を設計するのに用いることもできる。本発明は、本発明のLolｐＶペプチドを特異的に認識するＴ細胞クローンにも関する。これらのＴ細胞クローンは、本発明のペプチドに特異的に反応性であるＴ細胞受容体についての単離、および遺伝子の分子クローニングに適し得る。Ｔ細胞クローンは、Abdul K．Abbasらの「細胞および分子免疫学（Cellular and M olecular Immunology）」、W.B．Saunders Co．（1991年）139ページに記載のとおりに生産し得る。本発明は、可溶性Ｔ細胞受容体にも関する。これらの受容体は、LolｐＶに感受性である個人において、Ｔ細胞の適切な下位集団の抗原依存性活性化を阻害し得る。そのようなＴ細胞受容体と特異的に反応する抗体も、ここに記載の手法に従って生産できる。そのような抗体は、個人におけるＴ細胞− ＭＨＣ相互作用を遮断するのにも役立つ。可溶性Ｔ細胞受容体を生産する方法は、Edward S．Golubらの「免疫学；ある統合（Immunology；A Synthesis）」、Si naur Assoc．、米国マサチューセッツ州Sunderland（1991年）366〜369ページに記載されている。本発明の単離ペプチドを得るには、望みの長さの重複しないペプチド、または実施例２で検討したような望みの長さの重複ペプチドへと分割するが、これらは組換えにより、合成により、または、特定の状況では、アレルゲンの化学的切断によって生産できる。少なくとも１Ｔ細胞エピトープを含むペプチドは、Ｔ細胞の応答、例えば刺激（すなわち増殖またはリンホカイン分泌）を誘発でき、および／またはＴ細胞の不応答性を誘導できる。少なくとも１Ｔ細胞エピトープを含むペプチドを決定するには、単離ペプチドを、例えばＴ細胞の生物学の手法を用いて試験して、該ペプチドがＴ細胞の応答を誘発するか、またはＴ細胞の不応答性を誘導するか否かを決定する。Ｔ細胞の応答を誘発するか、またはＴ細胞の不応答性を誘導することが判明したペプチドは、Ｔ細胞刺激活性を有すると定義される。ヒトのＴ細胞刺激活性について本発明のペプチドをふるい分けることは、いくつかの異なる検定法のうち１種類またはそれ以上を用いて、達成できる。例えば、生体外では、本発明のペプチドを、培養Ｔ細胞中で適切なＭＨＣ分子を提示する抗原提示細胞に接触させることによって、Ｔ細胞刺激活性を検定する。必要な補助刺激と結合させた、適切なＭＨＣ分子を伴う本発明のペプチドのＴ細胞への提示は、上昇したレベルのサイトカイン類、特にインターロイキン２やインターロイキン４の生産を誘導するＴ細胞にシグナルを伝達する効果を有する。培養上清が得られ、インターロイキン２その他の公知サイトカイン類について検定することができる。例えば、インターロイキン２についてのいくつかの慣用の検定法のいずれか一つ、例えば、引用によってその適切な部分がここに組み込まれるPr oc．Natl．Acad．Sci．USA第86巻1,333ページ（1989年）に記載の検定法を用いることができる。インターフェロンの生産の検定用キットもGenzyme Corporatio n（米国マサチューセッツ州Cambridge）から入手できる。Ｔ細胞の増殖についての一般的な検定法は、トリチウムチミジン取り込みの測定を包含する。Ｔ細胞の増殖は、培養された細胞の複製中のＤＮＡに取り込まれた³H標識チミジンの量を決定することによって、生体外で測定できる。したがって、ＤＮＡ合成の速度、ひいては細胞分裂の速度が定量できる。Ｔ細胞の応答性を低下させる能力について、ペプチドをふるい分けてもよい。Ｔ細胞を刺激し、精製された未変性LolｐＶ蛋白質のアレルゲンまたはその一部の活性を阻害し、もしくは完全に遮断し、Ｔ細胞の不応答性、または低下したＴ細胞の応答性の状態を誘導することが知られているペプチドの能力は、その後の、本発明のペプチドへの曝露後の、未変性LolｐＶアレルゲンを提示する抗原提示細胞によるＴ細胞の刺激の試みを用いて、決定することができる。Ｔ細胞が、インターロイキン２合成およびＴ細胞増殖によって決定される限りで、その後の活性化の試みに不応答性であるならば、不応答性の状態が誘導されたことになる。本発明に従って、ある検定法の基盤に用い得る検定系については、例えば、Gi mmiら（1993年）：Proc．Natl．Acad．Sci．USA第90巻6,586〜6,590ページ、およびSchwartz（1990年）：Science第248巻1,349〜1,356ページを参照のこと。加えて、「潜在」エピトープを含むペプチドを決定してよく、本発明の範囲内にある。潜在エピトープは、蛋白質抗原中の、未変性抗原のプロセシング、および適切なＭＨＣ分子への提示に起因して免疫系に通常は現出されない決定基である。しかし、潜在エピトープを含むペプチドは、Ｔ細胞を不応答性にすることができ、被験者をこのペプチドで初回抗原刺激すると、該被験者から得られたＴ細胞は、そのペプチドが由来するペプチドまたは蛋白質の抗原に応答して、生体外で増殖することになる。蛋白質抗原に由来する少なくとも１個の潜在エピトープを含むペプチドを、ここでは「潜在ペプチド」と呼ぶ。上記のＴ細胞の増殖検定で潜在エピトープの存在を確認するには、抗原で初回剌激したＴ細胞を各ペプチドの個別の存在下で生体外で培養して、ペプチド反応性のＴ細胞系を確立する。あるＴ細胞系を与えられたペプチドで確立でき、Ｔ細胞が、そのペプチドが由来するペプチドや蛋白質の抗原で挑戦すると増殖できるならば、ペプチドは少なくとも１潜在エピトープを含むと考えられる。溶解度の増大、治療もしくは予防効果の強化、または安定性（例えば、生体外での棚保ち、および生体内での蛋白質分解への耐性）のような目的で、本発明のペプチドの構造を変えることも可能である。例えばアミノ酸の置換、削除もしくは追加によってアミノ酸配列を変えた、修飾されたペプチドを生産して、免疫原性を変化させ、および／またはアレルギー原性を低下させることができ、あるいは、ある成分を同じ目的でそれに追加できる。例えば、免疫原の形態で投与されたときに、ある種の強力な増殖の応答、または可能ならいかなる増殖の応答も誘導できる能力はなくとも、Ｔ細胞アネルギーを誘導し、ＭＨＣ蛋白質を結合させる能力を保持するように、ペプチドを修飾することができる。この場合、Ｔ細胞受容体にとって決定的な結合残基は、公知の手法（例えば、各残基の置換、およびＴ細胞の反応性の存否の決定）を用いて決定することができる。Ｔ細胞受容体と作用し合うのに不可欠であることが示された残基は、その不可欠なアミノ酸を、その存在がＴ細胞の反応性を強化し、減殺するが除去はせず、または左右しないことが示されているもう一つの、好ましくは類似のアミノ酸残基と置き換えること（保存性置換）によって、修飾することができる。加えて、Ｔ細胞受容体の相互作用に不可欠ではないアミノ酸残基は、その組込みが、Ｔ細胞の反応性を強化し、減殺し、または左右しないが、適切なＭＨＣとの結合は排除し得ないもう一つのアミノ酸で置き換えることによって、修飾することができる。更に、本発明のペプチドは、ＭＨＣ蛋白質複合体と作用し合うのに不可欠であることが示されているアミノ酸は、その存在がＴ細胞の反応性を強化し、減殺するが除去はせず、または左右しないことが示されているもう一つの、好ましくは類似のアミノ酸残基と置き換えること（保存性置換）によって、修飾できる。加えて、ＭＨＣ蛋白質複合体と作用し合うのに不可欠ではないが、なおＭＨＣ蛋白質複合体を結合させるアミノ酸残基は、その組込みが、Ｔ細胞の反応性を強化し、左右せず、または減殺するが除去はしないもう一つのアミノ酸で置き換えることによって、修飾できる。不可欠ではないアミノ酸に対する好適なアミノ酸置換は、アラニン、グルタミン酸またはメチルアミノ酸による置換を包含するが、それらに限定されない。安定性および／または反応性を強化するために、本発明のペプチドは、天然の対立性変異から得られる蛋白質アレルゲンのアミノ酸配列に一つまたはそれ以上の多形性を組み込むように修飾することもできる。更に、D-アミノ酸、非天然アミノ酸または非アミノ酸類似体を置き換え、または追加して、本発明の範囲内の修飾されたペプチドを形成することができる。その上、本発明のペプチドは、A. Sehonおよび共同研究者のポリエチレングリコール（ＰＥＧ）法［Wieら、前出］を用いて、ＰＥＧと結合した蛋白質またはペプチドを形成するよう修飾することができる。加えて、本発明の蛋白質またはペプチドの化学合成の際に、ＰＥＧを加えることができる。ペプチドまたはその一部の修飾は、還元／アルキル化［ Tarr：J．E．Silver編「蛋白質の微細特徴付けの方法（Methods of Protein Mic rocharacterization）」、Humana Press、米国ニュージャージー州Clifton、155 〜194ページ（1986年）］；アシル化［Tarr、前出］；適切な担体との化学的カップリング［MishellおよびShiigi編「精選細胞免疫学の方法（Selected Method s in Cellular Immunology）」、W.H．Freeman、米国カリフォルニア州サンフランシスコ（1980年）：米国特許第4,939,239号明細書］；または穏やかなホルマリン処理［Marsh：Int．Arch．Allergy Appl．Immunol．第41巻199〜215ページ（1971年）］も包含する。本発明のペプチドの精製を容易にし、できれば溶解度を増大させるために、リポーター基をペプチド骨格に加えることが可能である。例えば、ペプチドにポリヒスチジンを加えて、固定化金属イオンアフィニティークロマトグラフィーでペプチドを精製することができる［E．Hochuliら：Bio/Technology第６巻1,321〜1 ,325ページ（1988年）］。加えて、望まれるならば、ペプチドのリポーター基とアミノ酸配列との間に、特異的なエンドプロテアーゼ切断部位を導入して、不適当な配列を含まないペプチドの単離を容易にすることができる。個体を蛋白質抗原に脱感作して好結果を得るには、ペプチドに官能基を付加するか、あるいは疎水性のＴ細胞エピトープ、または疎水性エピトープを含む領域をペプチド、または蛋白質もしくはペプチドの疎水性領域に含めないことによって、ペプチドの溶解度を高めることが必要であり得る。荷電アミノ酸対（例えばＫＫまたはＲＲ）のような官能基は、ペプチドのアミノまたはカルボキシル末端に付加したときは、ペプチドの溶解度を高めるのに特に役立つ。ペプチド内のＴ細胞エピトープの抗原の適切なプロセシングをできれば助けるために、それぞれ少なくとも１Ｔ細胞エピトープを含む領域間で、規範的なプロテアーゼ感受性部位を組換えまたは合成によって加工することができる。例えば、ペプチドの組換え構成の際に、ペプチド内の領域間に、荷電アミノ酸対、例えばＫＫまたはＲＲが導入できる。得られるペプチドは、ペプチドの１個またはそれ以上のＴ細胞エピトープを有する部分を形成するためのカテプシンおよび／または他のトリプシン様酵素による切断に感受性となるようにできる。加えて、上記に考察のとおり、そのような荷電アミノ酸残基は、ペプチドのアミノまたはカルボキシル末端に付加することができ、ペプチドの溶解度の上昇を招くことができる。本発明のペプチドを暗号化しているＤＮＡの部位指向性突然変異誘発は、当技術に公知の方法を用いてペプチドの構造を修飾するのに用いることができる。そのような方法は、とりわけ、望みのアミノ酸を暗号化している配列を含むオリゴヌクレオチドによるＰＣＲ［Hoら：Gene第77巻51〜59ページ（1989年）］、または突然変異させた遺伝子の全合成［Z．Hosomskyら：Biochem．Biophys．Res．Co mm.第161巻1,056〜1,063ページ（1989年）］を包含する。細菌の発現を増強するために、前記の方法を他の操作と併用して、本発明の蛋白質またはペプチドを暗号化しているＤＮＡ構成体の真核コドンを、大腸菌、酵母、哺乳類細胞その他の真核細胞で優先的に用いられるものに変えることができる。本発明のペプチドまたは抗体は、ドクムギ花粉症を検出および診断するのに用いることもできる。例えば、これは、ドクムギ花粉、またはDacｇＶのような他の交叉反応性花粉に対する感受性について評価しようとする個体から得られた血液または血液生成物を、血液中の成分（例えば抗体、Ｔ細胞、Ｂ細胞）とペプチドとの結合、およびそのような結合が生じる度合いの決定に適切な条件下でLol ｐＶの単離ペプチドと組み合わせることによって、生体外で実施できると思われる。本発明の蛋白質、ペプチドまたは抗体が役立つと思われるアレルギー性疾患のその他の診断法は、放射性−アレルゲン吸収試験（ＲＡＳＴ）、ペーパー放射性免疫吸収試験（ＰＲＩＳＴ）、酵素結合免疫吸収検定法（ＥＬＩＳＡ）、放射線免疫検定法（ＲＩＡ）、免疫-放射能測定検定法（ＩＲＭＡ）、発光免疫検定法（ＬＩＡ）、ヒスタミン放出検定法およびIgE 免疫ブロット法を包含する。個体における少なくとも１種類の蛋白質アレルゲンに特異的なIgE の存在、および該個体のＴ細胞が該蛋白質アレルゲンのＴ細胞エピトープに応答できる能力は、即時型過敏症試験および遅延型過敏症試験を個体に施すことによって、決定できる。それぞれ該アレルゲンに特異的なIgE を結合する、蛋白質アレルゲンもしくはその一部、または該蛋白質アレルゲンもしくはその一部の修飾形態を利用して、個体に即時型過敏症試験を施す［例えば、I.M．Roitt，J．Brostoff，D.K ．Male編「免疫学（Immunology）」、C.V．Mosby Co.、Gower Medical Publishi ng、英国ロンドン、米国ニューヨーク、19.2〜19.18ページ；22.1〜22.10ページを参照のこと］。即時型過敏症試験の実施の以前、同時または以後に、同じ個体に遅延型過敏症試験を施す。言うまでもなく、遅延型過敏症試験を施す以前に即時型過敏症試験を施すならば、遅延型過敏症試験は、特異的な即時型過敏症の反応を示す個体に施すことになる。遅延型過敏症試験は、それぞれ、ヒトＴ細胞刺激活性を有し、それぞれ、アレルゲンに特異的なIgE を、該アレルゲン感受性である個体の集団の実質的な百分率（例えば、少なくとも約７５％）では結合しない、組換えによって形成された蛋白質アレルゲンもしくはその一部、または該蛋白質アレルゲンに由来するペプチドの修飾形態を利用する。特異的な即時型過敏症反応と特異的な遅延型過敏症反応の双方を有することが判明した個体には、それぞれ、遅延型過敏症試験で用いたのと同じ修飾された形態の蛋白質またはその一部、組換えによって生産された蛋白質アレルゲンまたはペプチドを含む治療用組成物を投与してよい。 LolｐＶ感受性の個体、またはDacｇＶのようなLolｐＶに交叉反応性であるアレルゲンにアレルギー性である個体に治療用投与方式で投与したときの本発明の単離ペプチドは、LolｐＶというドクムギ花粉のアレルゲン、またはそのような交叉反応性アレルゲンに対する個体のアレルギー性応答を変えることができ、好ましくは、該アレルゲンに対する個体のＢ細胞応答、Ｔ細胞応答、またはＢ細胞とＴ細胞との双方の応答を変えることができる。ここで用いられる限りで、ドクムギ花粉アレルゲンまたは交叉反応性アレルゲンに感受性である個体のアレルギー性応答の変更は、該アレルゲンに対する不応答性、またはドクムギ花粉で誘導される喘息症状の減退をはじめとする、標準的臨床操作によって決定される限りでの［例えば、Varneyら：Brit．Med．J．第302巻265〜269ページ（1990年）を参照のこと］該アレルゲンに対する症状の減退として定義できる。ここで言及される限りで、症状の減退は、本発明のペプチドまたは蛋白質による治療の投与方式を個体が完了した後の、アレルゲンに対する該個体のアレルギー性応答のいかなる低下をも包含する。この減退は主観的であり得る（すなわち、アレルゲンの存在下で患者はより快適に感じる）。症状の減退は、当技術に公知であるような標準的皮膚試験を用いて、臨床的にも決定できる。Ｔ細胞刺激活性を有し、したがって少なくとも１Ｔ細胞エピトープを含む本発明のLolｐＶペプチドは、治療の目的に特に望ましい。エピトープについて述べると、エピトープは、受容体、特に免疫グロブリン、組織適合性抗原およびＴ細胞受容体による認識の基本要素または最小単位であると思われ、エピトープは、受容体による認識に不可欠なアミノ酸を手組む。エピトープを模倣し、LolｐＶに対するアレルギー性応答を下方調節できるか、または低下させられるアミノ酸配列を用いることもできる。Ｔ細胞エピトープは、アレルギーの臨床的症状の原因となる蛋白質アレルゲンに対する免疫応答の開始および永続化に関与すると考えられる。これらのＴ細胞エピトープは、抗原提示細胞の表面の適切なＨＬＡ分子に結合し、関連するＴ細胞下位集団を刺激することによって、初期事象をＴヘルパー細胞の水準で誘発するものと考えられる。これらの事象は、Ｔ細胞の増殖、リンホカインの分泌、局所的炎症反応、該部位への追加の免疫細胞の補充、および抗体生産へと導くＢ細胞カスケードの活性化に導く。これらの抗体の１アイソタイプであるIgE は、アレルギー症状の発症に根本的に重要であり、その生産は、事象のカスケードの初期には、分泌されるリンホカインの性質にＴヘルパー細胞の水準で影響される。少なくとも１Ｔ細胞エピトープを含み、LolｐＶ蛋白質アレルゲンに由来する本発明の単離LolｐＶペプチドへの、ドクムギ花粉患者の曝露は、適切なＴ細胞下位集団を該蛋白質アレルゲンに不応答性にさせるか、または応答を低下させ、こうして、そのような曝露の際に免疫応答の刺激に参加させないことがある。加えて、少なくとも１Ｔ細胞エピトープを含む本発明のペプチドまたはその一部は、リンホカイン分泌の特性像を、天然に産するLolｐＶ蛋白質アレルゲンまたはその一部への曝露に匹敵するまでに変化させ得る（例えば、ＩＬ−４の減少および／またはＩＬ−２の増加を招く）。更に、本発明のそのようなペプチドの投与は、天然に産するアレルゲンに対する応答に通常は参加するＴ細胞下位集団に、該アレルゲンへの通常の曝露の部位（例えば鼻粘膜、皮膚および肺）から断片または蛋白質のアレルゲンの治療的投与の部位へと、これらのＴ細胞が引き揚げられるような影響を及ぼし得る。Ｔ細胞下位集団のこの再配分は、アレルゲンへの通常の曝露の部位での通常の免疫応答を刺激できる個体の免疫系の能力を改善または低下させて、アレルギー症状の減退を招き得る。本発明の単離LolｐＶペプチドは、LolｐＶアレルゲンまたは交叉反応性蛋白質アレルゲンに対するアレルギー反応を診断、治療および予防する方法に用いることができる。したがって、本発明は、アレルギーの診断に役立ち、そして／またはアレルギー療法に役立つ、単離LolｐＶペプチドまたはその一部を含む組成物を提供する。そのような組成物は、代表的には、生体内への投与が意図されたときに、製薬上許容され得る担体または希釈剤も含むことになる。本発明の治療用組成物は、合成によって製造されたLolｐＶペプチド、および製薬上許容され得る担体または希釈剤も含み得る。脱感作しようとする個体への本発明の治療用組成物の投与は、公知の手法を用いて実施できる。LolｐＶペプチドまたはその一部は、例えば適切な希釈剤、担体、および／またはアジュバントと併用して個体に投与し得る。製薬上許容され得る希釈剤は、食塩水および緩衝剤水溶液を包含する。製薬上許容され得る担体は、ポリエチレングリコール［Wieら（1981年）：Int．Arch．Allergy Appl．Ｉ mmunol．第64巻84〜99ページ］およびリポソーム［Strejanら（1984年）：J．Ne uroimmunol.第７巻27ページ］を包含する。本発明の治療用組成物は、ドクムギのアレルゲンに感受性である個体、またはイエドクムギ（すなわちDactylis glomerataまたはSorghum halepensisなど）のアレルゲンに免疫学的に交叉反応性であるアレルゲンに感受性である個体に投与する。Ｔ細胞の不応答性を誘導する目的には、本発明の治療用組成物を、免疫原性でない形態、例えばアジュバントを含有しない形態で投与するのが好ましい。いかなる理論も限定することを意図しないが、Ｔ細胞の不応答性、またはＴ細胞の応答性の低下は、「第二シグナル」と呼ばれることもある適切な補助刺激性シグナルを与えない結果として誘導されると考えられる。略述すると、Ｔ細胞の刺激は、２形式のシグナルを必要とし、第一のそれは、Ｔ細胞による、抗原提示細胞（ＡＰＣ）上の適切なＭＨＣに関連する加工された抗原の、Ｔ細胞受容体を介しての認識であり、第二の形式のシグナルは、補助刺激性シグナルまたは「第二シグナル」と呼ばれ、特定の適格なＡＰＣによって与えられ得る。本発明の組成物をアジュバントなしに投与すると、第二シグナルまたは補助刺激性シグナルを生成できる適格ＡＰＣは、適切なＴ細胞の刺激に従事しなくなり、そのために、Ｔ細胞の不応答性、またはＴ細胞の応答性の低下を招くと考えられる。加えて、「第二シグナル」のような補助刺激性シグナルの送達を遮断できる多数の抗体または他の試薬が存在し、それらはB7（B7-1，B7-2およびBB-1を包含する）、CD28 、CTLA4、CD40、CD40L、CD54およびCD11a/18を包含するが、それらに限定されない［JenkinsおよびJohnson：Current Opinion in Immunology第５巻361〜367ページ（1993年）、ならびにClarkおよびLedbetter：Nature第367巻425〜428ページ（1994年）］。したがって、本発明のペプチドは、上記のような非免疫原性形態で、Ｔ細胞の不応答性の水準が高められないように補助刺激性シグナルを遮断できる試薬と結合して投与し得る。脱感作しようとする個体への本発明の治療用組成物の投与は、公知の操作を用いて、アレルゲンに対する個体の感受性を低下させる（すなわち、アレルギー性応答を低下させる）のに有効な投与量および期間に実施することができる。治療用組成物の有効量は、ドクムギ花粉に対する個体の感受性の度合い、個体の年齢、性別および体重、ならびに個体に抗原性応答を誘発できる蛋白質またはその断片の能力のような因子に従って変化すると思われる。活性化合物（すなわち蛋白質またはその断片）は、注射（皮下、静脈内など）、経口投与、吸入、経皮塗布または直腸投与のような慣用の方式で投与し得る。投与の経路に応じて、活性化合物を、該化合物を不活性化し得る酵素、酸その他の自然条件の作用から該化合物を保護する材料内に被覆し得る。例えば、好ましくは１投与単位あたり約１μg〜３mg、より好ましくは約20〜7 50μgの活性化合物（すなわち蛋白質またはその断片）を、注射によって投与し得る。投与量の投与方式は、最適の治療応答を与えるように調製し得る。例えば、数回に分割した投与量を毎日投与するか、または治療状況の切迫によって指示されるとおりに、投与量を比例して減少もしくは増加させ得る。非経口投与以外でペプチドを投与するには、その不活性化を防ぐ材料で蛋白質を被覆するか、またはそれとともに蛋白質を同時投与する必要があり得る。例えば、ペプチドまたはその一部を酵素阻害剤とともに、またはリポソームとして同時投与し得る。酵素阻害剤は、膵臓トリプシン阻害剤、ジイソプロピルフルオロリン酸塩（ＤＥＰ）およびトラシロールを包含する。リポソームは、慣用のリポソームのみならず水中油中水型ＣＧＦ乳剤も包含する［Strejanら（1984年）：J．Neuroimmunol. 第７巻27ページ］。活性化合物は、非経口的に、または腹腔内にも投与し得る。分散も、グリセリン、液体ポリエチレングリコール類およびその混合物、ならびに油中に調製できる。貯蔵や使用の通常の条件下では、これらの製剤は、微生物の繁殖を防ぐための防腐剤を含有し得る。注射の用途に適した製剤組成物は、無菌水溶液（水溶性の場合）または分散、および注射できる分散の無菌溶液を即座に調製するための無菌粉末を包含する。すべての場合に、組成物は、無菌でなければならず、容易な注射可能性が存在する程度に流動的でなければならない。それは、製造および貯蔵の条件下で安定でなければならず、細菌や真菌のような微生物の汚染作用に抗して保存されなければならない。担体は、例えば水、エタノール、ポリオール（例えばグリセリン、プロピレングリコールおよび液体のポリエチレングリコールなど）、適切なそれらの混合物、および植物油を含有する溶媒または分散媒であることができる。例えば、レシチンのような被覆剤の利用、分散の場合の必要とされる粒度の維持、および界面活性剤の利用によって、適正な流動性が保てる。微生物の作用の防止は、様々な抗菌剤や抗真菌剤、例えばパラベン、クロロブタノール、フェノール、アスコルビン酸、チメロサールその他によって達成できる。多くの場合、等張剤、例えば、砂糖、マンニトールやソルビトールのような多価アルコール、または塩化ナトリウムを組成物に含ませるのが好ましいと思われる。注射できる組成物の吸収の遷延は、吸収を遅らせる薬剤、例えば一ステアリン酸アルミニウムやゼラチンを組成物に含ませて、実施できる。注射できる無菌溶液は、必要量の活性化合物（すなわち蛋白質またはペプチド）を、上記に列挙した成分のうち１種類またはそれらの組合せをとともに適切な溶媒に組み込み、次いで、必要に応じて、濾過して滅菌することによって調製することができる。一般に、分散は、活性化合物を、基本分散媒、および上記に列挙したものからの必要とされる他の成分を含有する無菌ビヒクルに組み込むことによって調製できる。注射できる無菌溶液を調製するための無菌粉末の場合は、好適な調製方法は、真空乾燥、および活性成分（すなわち蛋白質またはペプチド）と望みのいずれかの追加的成分との粉末を、予め滅菌濾過したそれらの溶液から生じる凍結乾燥である。本発明のペプチドを上記のとおり適切に保護したときは、該ペプチドは、例えば不活性の希釈剤、または同化できない摂食できる担体とともに、経口的に投与し得る。ペプチドおよびその他の成分は、硬殻または軟殻のゼラチンカプセルに封入するか、打錠するか、または個体の食事に直接組み込んでもよい。治療用経口投与のためには、活性化合物を賦形剤とともに組み込み、摂取できる錠剤、口中錠、トローチ、カプセル、エリキシル、懸濁液、シロップ、ウエハースなどの形態で用い得る。そのような組成物や製剤は、少なくとも１重量％の活性化合物を含有しなければならない。組成物および製剤の百分率は、言うまでもなく、変動させてよく、好都合には、単位重量の約５〜80重量％であり得る。そのような治療に役立つ組成物中の活性化合物の量は、適切な投与量が得られるようにする。本発明による好適な組成物または製剤は、１経口投与単位が、約10μg〜約200 mgの活性化合物を含有するように調製する。錠剤、トローチ、丸薬、カプセルなどは、下記のものも含有し得る：トラガカント、アラビアゴム、トウモロコシ澱粉またはゼラチンのような結合剤；リン酸二カルシウムののような賦形剤；トウモロコシ澱粉、バレイショ澱粉、アルギン酸などのような崩壊剤；ステアリン酸マグネシウムのような潤滑剤；およびショ糖、乳糖もしくはサッカリンのような甘味剤、またはペパーミント、冬緑油もしくは桜桃香味料のような香味料。投与単位形態がカプセルであるときは、上記形式の材料に加えて、液体担体を含有し得る。被覆剤として、さもなければ該投与単位の物理的形態を変えるために、他の様々な材料が存在し得る。例えば、シェラック、砂糖またはその双方で錠剤、丸薬またはカプセルを被覆し得る。シロップまたはエリキシルは、活性化合物、甘味剤としてのショ糖、防腐剤としてのメチルおよびプロピルパラベン、桜桃またはオレンジ香料のような染料および香昧料を含有し得る。言うまでもなく、何らかの投与単位形態を調製するのに用いられるいかなる材料も、製薬上純粋であり、用いられる量で実質的に無害でなければならない。加えて、活性化合物は、徐放性の製剤や配合物に組み込み得る。ここで用いられる限りで、「製薬上許容され得る担体」は、いかなる、かつすべての溶媒、分散媒、被覆剤、抗菌剤および抗真菌剤、等張剤および吸収遷延剤なども包含する。製薬上活性である物質にそのような媒体および薬剤を用いることは、当技術に公知である。いずれの慣用の媒体または薬剤も、活性化合物とは配合禁忌でない限り、治療用組成物へのそれらの使用が予測される。補助的な活性化合物も該組成物に組み込むことができる。投与を容易にし、投与量を均一にするためには、非経口組成物を投与単位形態で配合することが特に好都合である。ここで用いられる限りでの投与単位形態は、哺乳類被験者に投与するための一元的投与量として適合させた、物理的に独立した単位を指し、各単位は、望みの治療効果を生じるよう計算された所定量の活性化合物を、必要とされる製剤用担体とともに含有する。本発明の新規な投与単位形態の仕様は、（ａ）活性化合物と、達成しようとする特定の治療効果との独自の特徴性、ならびに（ｂ）そのような活性化合物を個体での感受性の治療のために複合させる技術に固有の限界に規定され、かつ直接的に依存する。ドクムギ花粉蛋白質LolｐＶに由来する本発明の様々な単離ペプチドを図２（配列番号３〜29）に示す。LolｐＶの、それぞれ少なくとも１Ｔ細胞エピトープを含む少なくとも２領域を含むペプチドも、本発明の範囲内にある。ここで用いられる限りで、領域は、図２に示した本発明のペプチドのアミノ酸配列、またはそのようなペプチドの一部のアミノ酸配列を含み得る。実施例２で考察されるとおり、ヒトＴ細胞刺激活性は、LolｐＶアレルゲン感受性の個体（すなわち、LolｐＶアレルゲンに対するIgE 介在免疫応答を有する個体）から得たＴ細胞を、該アレルゲンに由来するペプチドとともに培養し、例えば細胞によるトリチウムチミジンの取り込みによって測定された限りで、該ペプチドに応答してＴ細胞の増殖が生じるか否かを決定することによって、試験できる。ペプチドに対するＴ細胞による応答についての刺激指数は、対照cpm で除したペプチドに応答しての最高cpm として算出できる。背景レベルの２倍に等しいか、またはそれより高い刺激指数（S.I.）を「陽性」と考える。陽性の結果を用いて、試験した患者の群に対する各ペプチドについての平均刺激指数を算出する。図４および５では、Ｔ細胞による平均刺激指数を棒上に示す。本発明の好適なペプチドは、少なくとも１個のＴ細胞エピトープを含み、2.0 より大きいか、またはそれに等しいＴ細胞刺激指数を有する。試験した有意数のドクムギ花粉感受性患者で2.0より大きいか、またはそれに等しい平均Ｔ細胞刺激指数を有するペプチドは、治療剤として役立つと考えられる。好適なペプチドは、平均Ｔ細胞刺激指数が2.5以上、より好ましくは3.0以上、より好ましくは3.5以上、より好ましくは4.0以上、より好ましくは5.0以上、最も好ましくは約６以上である。例えば、図４および５に示したデータによって示されるとおり、５以上の平均Ｔ細胞刺激指数を有する本発明のペプチドは、ペプチドLPIX-4（配列番号６）、LPIX -5（配列番号７）、LPIX-8（配列番号10）、LPIX-17（配列番号19）およびLPIX- 19（配列番号21）を包含する。加えて、好適なペプチドは、陽性度指数（P.I.）が約60以上、より好ましくは約100、より好ましくは約200以上、最も好ましくは約300以上である。あるペプチドについての陽性度指数は、ドクムギ花粉感受性の個体集団（例えば、好ましくは15個体以上、より好ましくは30個体以上、またはそれ以上の集団）における、そのようなペプチドのＴ細胞刺激指数が2.0以上である個体の百分率を平均Ｔ細胞刺激指数に乗じることによって決定される。したがって、陽性度指数は、あるペプチドに対するＴ細胞の応答の強さ（S.I.）と、ドクムギ花粉感受性の個体集団におけるペプチドに対するＴ細胞の応答の頻度との双方を表す。図４では、棒は陽性度指数を表し、そのペプチドに対するＴ細胞刺激指数が2.0以上の被験個体の百分率は、各棒の上のカッコ内に示されている（平均Ｔ細胞刺激指数も各棒の上に示されている）。例えば、図４に示したとおり、LolｐＶペプチドのLPI X-5（配列番号７）は、平均S.I.が5.8であり、被験個体群中の陽性の応答が26.3 ％であって、152.54の陽性度指数となる。陽性度指数が約100以上で、平均Ｔ細胞刺激指数が約４以上であるLolｐＶペプチドは、LPIX-4（配列番号６）、LPIX- 5（配列番号７）およびLPIX-17配列番号19）を包含する。図５では、棒は、実施例２に示したとおりの被験患者群におけるペプチドの応答の累積順位を表す。累積順位を決定するために、各個体で最高のS.I.を有する５種類のペプチドを決定し、５が最も強い応答を表すよう降順に数字の順位に割り振った。次いで、各ペプチドの順位を被験患者群全体について合計して、ペプチドの累積順位を決定した。各棒の上に、各ペプチドについての平均S.I.、および被験患者群でのペプチドに対して２以上のS.I.を有する陽性の応答の百分率（カッコ内）がある。例えば精密なマッピングの手法によって、正確なＴ細胞エピトープを決定するためには、Ｔ細胞の生物学の手法によって決定されるようなＴ細胞刺激活性を有し、したがって少なくとも１個のＴ細胞エピトープを含むペプチドを、該ペプチドのアミノもしくはカルボキシル末端のいずれかでのアミノ酸残基の追加または削除によって修飾し、かつ試験して、該修飾されたペプチドに対するＴ細胞の活性の変化を決定する。この手法に従って、ペプチドを選択し、組換えによるか、または合成によって生成する。ペプチドは、ペプチドに対するＴ細胞応答の強さ（例えば刺激指数）、ドクムギ花粉に感受性である個体群でのペプチドに対するＴ細胞応答の頻度、および初めに考察したような別の草本種、すなわちDactylis glomerataからの別のアレルゲンとのペプチドのあり得る交叉反応性を包含する様々な因子に基づいて選択する。これらの選ばれたペプチドの物理的および化学的特性（例えば溶解度、安定性）を調べて、該ペプチドが治療用組成物の用途に適しているか否か、または該ペプチドが、ここに記載したような修飾を要するか否かを決定する。選ばれたペプチド、または選ばれた修飾されたペプチドの、ヒトＴ細胞を刺激し（例えば、増殖やリンホカイン分泌を誘導する）、または適切なＴ細胞の集団を、不応答性にするか、もしくは蛋白質アレルゲンに対する応答を低下させ得る能力を決定する。加えて、溶解度または安定性を増大させる目的のために、LPIX-4（配列番号６）、-5（配列番号７）、-6（配列番号８）、-11（配列番号13）、-12（配列番号 14）、-16（配列番号18）、-17（配列番号19）および-20（配列番号22）のようなペプチドを更に修飾するのが望ましいことがある。溶解度を改良する修飾は、 Val、Ile、Leu、Phe、TyrおよびTrpのような親水性アミノ酸を除去するための、ペプチドのアミノもしくはカルボキシル末端のいずれかまたは双方からの断端を包含する。断端によって除去された残基を、Asp、Glu、LysおよびArgのような荷電親水性アミノ酸、またはSer、Pro、Gly もしくはAlaのような中性親水性アミノ酸で置き換えてもよい。そのようなアミノ酸は、ＲまたはＳのいずれかの光学的立体配置のものであり得る。溶解度を改良するその他の修飾は、ペプチドのアミノ−もしくはカルボキシル −末端のいずれかまたは双方への親水性重合体の結合を包含する。そのような重合体は、ポリアニオン性、ポリカチオン性または（ポリオキシエチレンのように）中性であり得る。安定性を改良する修飾は、AsnおよびGln残基の削除または置換、ならびにAsn- Gly、Asp-GlyおよびAsp-Proという配列の除去を包含する。上記の修飾の具体的な例は、ペプチドLIX-12からのＮ末端のValおよびＣ末端のVal-His-Ala-Valの除去であろうと思われる。得られる断端ペプチドを直接用いるか、または削除された残基を極性アミノ酸のAsp、Glu、LysおよびArgの組合せで置換することができると思われる。同様に、Ｎ末端の配列Gly-PheおよびＣ末端の配列Phe-Lys-IleをペプチドLPIX-5（配列番号７）から除去できるものと思われる。その上、本発明の好適なＴ細胞エピトープ含有ペプチドは、免疫グロブリンＥ（IgE）と結合しないか、または該ペプチドが由来する蛋白質アレルゲンより実質的に少ない程度に（例えば少なくとも100倍、より好ましくは少なくとも1,000 倍少なく）IgE と結合する。標準的な免疫療法の主な合併症は、アナフィラキシーのようなIgE 介在応答である。免疫グロブリンＥは、マスト細胞または好塩基球のIgE との抗原の結合や架橋結合、ならびにメジエーター（例えばヒスタミン、セロトニン、好酸性走化性因子）の放出から生じるアナフィラキシー反応のメジエーターである。したがって、LolｐＶ感受性個体の集団の実質的な百分率でのアナフィラキシーは、LolｐＶアレルゲンに感受性である個体の集団の実質的な百分率（例えば約75％以上）でIgE と結合しないペプチドを免疫療法に用いることによって回避できると思われ、あるいは、ペプチドがIgE と結合するならば、そのような結合は、マスト細胞または好塩基球からのメジエーターの放出を招かない。アナフィラキシーの危険率は、IgE との結合が低下しているペプチドを免疫療法に用いることによって、減少させられると思われる。更に、最低のIgE 刺激活性を有するペプチドは、治療効果のために望ましい。最低のIgE 刺激活性とは、未変性のLolｐＶ蛋白質アレルゲンに剌激されたIgE の生産および／またはＩＬ−４の生産の量より少ないIgE 生産を指す。同様に、ＩＬ−４の生産は、低下したIgE 刺激活性を示す低下したＩＬ−４生産に匹敵できる。本発明のペプチドを診断用試薬として用いようとするならば、ペプチドまたは蛋白質が、未変性LolｐＶアレルゲンに匹敵する低下したIgE 結合活性を有することは不要である。ペプチドのIgE 結合活性は、例えば、各種の酵素結合免疫吸収検定法（ＥＬＩＳＡ）を用いることによって、決定できる。本発明の好適なＴ細胞エピトープ含有ペプチドは、ドクムギ花粉感受性個体、または、DacｇＩのような、ドクムギ花粉アレルゲンに免疫学的に近縁であるアレルゲンに感受性である個体に、治療的投与方式で投与したときは、該アレルゲンに対する個体のアレルギー性応答を変えることができる。特に、LolｐＶの少なくとも１Ｔ細胞エピトープ、または、少なくとも１Ｔ細胞エピトープをそれぞれ含む、LolｐＶに由来する少なくとも２領域を含む、本発明のそのような好適なLolｐＶペプチドは、ドクムギ花粉に感受性である個体に投与したときは、該アレルゲンに対する個体のＴ細胞応答を変えることができ、ドクムギに対する感受性を指向する治療法として役立つ。本発明の好適な単離LolｐＶペプチドは、LolｐＶの少なくとも１Ｔ細胞エピトープを含み、したがって、該ペプチドは少なくとも約７アミノ酸残基を含む。治療の効果性の目的のためには、本発明の好適な治療用組成物は、好ましくは、Lo lｐＶの少なくとも２Ｔ細胞エピトープを含み、したがって、好適なペプチドは、少なくとも約８アミノ酸残基、好ましくは少なくとも15アミノ酸残基を含む。その上、本発明の好適な単離ペプチドを含む治療用組成物は、好ましくは、ドクムギ花粉感受性個体への組成物の投与の治療用投与方式が蛋白質アレルゲンに寛容にされようとしている個体のＴ細胞を生じるのに充分な百分率の、花粉アレルゲン全体のＴ細胞エピトープ（すなわち、少なくとも約40％、より好ましくは約 60％の、花粉アレルゲン全体に対するＴ細胞活性）を含む。長さで約45アミノ酸残基まで、最も好ましくは長さで約30アミノ酸残基までを含む、合成によって生産された本発明のペプチドは、長さの増加がペプチド合成の困難を招き得ることから、特に望ましい。本発明のペプチドは、初めに述べたとおり、組換えによって生産してもよく、45アミノ酸の、またはそれより長いペプチドを組換えによって生産するのが好ましい。治療の目的に用いることができる、LolｐＶ蛋白質アレルゲンに由来するペプチドは、LolｐＶの少なくとも１Ｔ細胞エピトープを含み、下記のペプチドの全部または一部を含む：LPIX-1（配列番号３）、LPIX-1.1（配列番号３）、LPIX-2 （配列番号４）、LPIX-2.1（配列番号４）、LPIX-3（配列番号５）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-7（配列番号９）、LPIX-8（配列番号10）、LPIX-9（配列番号11）、LPIX-10（配列番号12）、LPIX-11（配列番号13）、LPIX-12（配列番号14）、LPIX-13（配列番号15）、L PIX-14（配列番号16）、LPIX-15（配列番号17）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX -17（配列番号19）、LPIX-18（配列番号20）、LPIX-19（配列番号21）、LPIX-20 （配列番号22）、LPIX-21（配列番号23）、LPIX-22（配列番号24）、LPIX-23（配列番号25）、LPIX-24（配列番号26）、LPIX-26（配列番号28）およびLPIX-27 （配列番号29）（その配列は図２に示す）、ここで、ペプチドの一部は、好ましくは、それが由来するペプチドの平均Ｔ細胞刺激指数に等しいか、またはそれより大きい平均Ｔ細胞刺激指数（S.I.）を有する（例えば、図５に示すとおり、LP IX-16（配列番号18）についてのS.I.は、棒の上に3.7 と示され、したがって、LPIX-16のいかなる部分も、好ましくは、平均S.I.が3.7 である）。治療の目的に用いることができる、LolｐＶ蛋白質アレルゲンに由来するはるかに好ましいペプチドは、下記のペプチドの全部または一部を含む：LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-8（配列番号10）、LPIX-9（配列番号11）、LPIX-11（配列番号13）、LPIX-12（配列番号14 ）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）、LPIX-19（配列番号21）、LPIX-20（配列番号22）、LPIX-23（配列番号25）、およびLPIX-26（配列番号2 8）。治療の目的に用いることができる、LolｐＶ蛋白質アレルゲンに由来するはるかに好ましいペプチドは、下記のペプチドの全部または一部を含む： LPIX-1（配列番号３）、LPIX-2（配列番号４）、LPIX-3（配列番号５）、LPIX-4 （配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-7（配列番号９）、LPIX-8（配列番号10）、LPIX-9（配列番号11）、LPIX-10（配列番号1 2）、LPIX-11（配列番号13）、LPIX-12（配列番号14）、LPIX-13（配列番号15）、LPIX-14（配列番号16）、LPIX-15（配列番号17）、LPIX-16（配列番号18）,LP IX-17（配列番号19）、LPIX-18（配列番号20）、LPIX-19（配列番号21）、LPIX- 20（配列番号22）、LPIX-21（配列番号23）、LPIX-22（配列番号24）、LPIX-23 （配列番号25）、LPIX-24（配列番号26）、LPIX-26（配列番号28）、およびLPIX -27（配列番号29）。本発明の一実施態様は、LolｐＶというペプチド、または該蛋白質アレルゲンの少なくとも１Ｔ細胞エピトープを含むその一部を特徴とし、式X_n-Y-Z_mを有する。この式によれば、Ｙは下記のものからなる群から選ばれるアミノ酸配列である：LPIX-1（配列番号３）、LPIX-1.1（配列番号３）、LPIX-2（配列番号４）、 LPIX-2.1（配列番号４）、LPIX-3（配列番号５）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX -5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-7（配列番号９）、LPIX-8（配列番号10）、LPIX-9（配列番号11）、LPIX-10 （配列番号12）、LPIX-11（配列番号13）、LPIX-12（配列番号14）、LPIX-13（配列番号15）、LPIX-14（配列番号16）、LPIX-15（配列番号17）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号1 9）、LPIX-18（配列番号20）、LPIX-19（配列番号21）、LPIX-20（配列番号22）、LPIX-21（配列番号23）、LPIX-22（配列番号24）、LPIX-23（配列番号25）、L PIX-24（配列番号26）、LPIX-26（配列番号28）、およびLPIX-27（配列番号29）（その配列は図２に示す）。加えて、Ｘ_nは、蛋白質アレルゲンのアミノ酸配列中のＹのアミノ末端に隣接するアミノ酸残基であり、Ｚ_mは、蛋白質アレルゲンのアミノ酸配列中のＹのカルボキシル末端に隣接するアミノ酸残基である。式中、ｎは０〜30、かつｍは０〜30である。好ましくは、ペプチドまたはその一部は、図４に示したＹの平均Ｔ細胞刺激指数に等しいか、またはそれより大きい平均Ｔ細胞刺激指数を有する。好ましくは、Ｘのアミノ末端およびＺのカルボキシル末端を含むアミノ酸は、荷電アミノ酸、すなわちアルギニン（Ｒ）、リシン（Ｋ）、ヒスチジン（Ｈ）、グルタミン酸（Ｅ）もしくはアスパラギン酸（Ｄ）；反応性側鎖を有するアミノ酸、例えばシステイン（Ｃ）、アスパラギン（Ｎ）もしくはグルタミン（Ｑ）；または立体的に小さい側鎖を有するアミノ酸、例えばアラニン（Ａ）もしくはグリシン（Ｇ）から選ばれる。好ましくは、ｎおよびｍは０〜５、最も好ましくは、ｎ＋ｍは10未満である。本発明のもう一つの実施態様は、LolｐＶの少なくとも１個のＴ細胞エピトープをそれぞれ含む少なくとも２領域を含むペプチドを提供し、したがって、各領域は、少なくとも約７個のアミノ酸残基を含む。少なくとも２領域を含むこれらのペプチドは、LolｐＶアレルゲンの100またはそれ以上までのアミノ酸残基を含むことができるが、好ましくは少なくとも約15、はるかに好ましくは少なくとも約20、最も好ましくは少なくとも約30のアミノ酸残基を含む。望まれるならば、該領域のアミノ酸配列は、抗原提示細胞によるプロセシングに対する感受性を増大させるためのリンカーによって形成し、結合することができる。そのようなリンカーは、いかなる非エピトープアミノ酸配列であることも、あるいは他の適切な連結剤または結合剤であることもできる。少なくとも１個のＴ細胞エピトープをそれぞれ含む少なくとも２領域を含む好適なペプチドを得るためには、該領域を、アレルゲンの領域の天然に見出される立体配置と同じか、または異なる立体配置に配置する。例えば、Ｔ細胞エピトープを含む領域は、隣接しない立体配置に配置でき、好ましくは、同じ蛋白質アレルゲンから由来できる。隣接しないとは、Ｔ細胞エピトープを含む領域の配置であって、該領域が由来する蛋白質アレルゲンの未変性アミノ酸配列のそれとは異なる配置として定義される。更に、Ｔ細胞エピトープを含む隣接しない領域は、不連続の順序で（例えば、Ｔ細胞エピトープを含む領域が由来する未変性の蛋白質アレルゲンのアミノ酸の順序とは異なる、アミノ酸がアミノ末端からカルボキシル末端へと配置される順序で）配置できる。本発明のペプチドは、LolｐＶのＴ細胞エピトープの少なくとも15％、少なくとも30％、少なくとも50％または100％までを含むことができるが、LolｐＶのアミノ酸配列全体は含まない。個々のペプチド領域は、どの領域がLolｐＶに特異的な免疫グロブリンＥと結合し、そのような領域のどれがマスト細胞または好塩基球からのメジエーター（例えばヒスタミン）の放出を生起するかを決定するために形成かつ試験できる。免疫グロブリンＥと結合し、マスト細胞または好塩基球からのメジエーターの放出を、試験したアレルギー性血清の約10〜15％を越えて生起することが判明したペプチド領域は、好ましくは、本発明の好適なペプチドを形成するように配置したペプチド領域に含めない。予備的なIgE 結合データの研究（実施例３）でIgE と結合しないと思われる好適なペプチド領域の例は、図２に示されている、そのような領域のアミノ酸配列（配列番号３〜29）、または該領域の、少なくとも１個のＴ細胞エピトープを含む部分を包含する。好適なペプチドは、上記に考察した好適な領域のうち２領域もしくはそれ以上、またはそれらの一部の様々な組合せを含む。２領域またはそれ以上（各領域は図２に示したようなアミノ酸配列を有する）の組合せを含む好適なペプチドは、下記を包含する： LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-1 6（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）およびLPIX-20（配列番号22）； LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-1 2（配列番号14）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）およびLPIX- 20（配列番号22）； LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-1 7（配列番号19）およびLPIX-20（配列番号22）； LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）およびLP IX-20（配列番号22）； LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-1 1（配列番号13）、LPIX-12（配列番号14）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）およびLPIX-20（配列番号22）； LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-8 （配列番号10）、LPIX-9（配列番号11）、LPIX-11（配列番号13）、LPIX-12（配列番号14）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）、LPIX-19（配列番号21）、LPIX-20（配列番号22）、LPIX-23（配列番号25）およびLPIX-26（配列番号28）； LPIX-4（配列番号６）、LPIX-11（配列番号13）、LPIX-16（配列番号18）および LPIX-20（配列番号22）； LPIX-4（配列番号６）、LPIX-11（配列番号13）、LPIX-17（配列番号19）および LPIX-20（配列番号22）； LPIX-4（配列番号６）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）および LPIX-20（配列番号22）； LPIX-5（配列番号７）、LPIX-11（配列番号13）、LPIX-16（配列番号18）および LPIX-20（配列番号22）； LPIX-5（配列番号７）、LPIX-11（配列番号13）、LPIX-17（配列番号19）および LPIX-20（配列番号22）； LPIX-5（配列番号７）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）および LPIX-20（配列番号22）； LPIX-11（配列番号13）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）およびLPIX-20（配列番号22）； LPIX-4（配列番号６）、LPIX-11（配列番号13）およびLPIX-20（配列番号22）； LPIX-4（配列番号６）、LPIX-16（配列番号18）およびLPIX-20（配列番号22）； LPIX-4（配列番号６）、LPIX-17（配列番号19）およびLPIX-20（配列番号22）； LPIX-5（配列番号７）、LPIX-11（配列番号13）およびLPIX-20（配列番号22）； LPIX-5（配列番号７）、LPIX-16（配列番号18）およびLPIX-20（配列番号22）； LPIX-11（配列番号13）、LPIX-16（配列番号18）およびLPIX-20（配列番号22）； LPIX-11（配列番号13）、LPIX-17（配列番号19）およびLPIX-20（配列番号22）； LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）およびLPIX-20（配列番号22）。本発明の更にもう一面では、LolｐＶの少なくとも１個のＴ細胞エピトープをそれぞれ含む、少なくとも２ペプチドを含む組成物（例えば、少なくとも２ペプチドの物理的混合物）が与えられる。そのような組成物は、治療の用途のための製薬上許容され得る希釈剤の担体を有するか、または試薬の用途のための慣用の非製剤用賦形剤を更に有する組成物の形態であることができる。治療用に用いるときは、有効量の１種類またはそれ以上のそのような組成物を、ドクムギ花粉感受性の個体に同時にか、または順次に投与できる。本発明のもう一面では、LolｐＶペプチドの同時にか、または順次に投与できる組合せが与えられる。そのような組合せは、ただ１種類のみのペプチドか、または、望まれるならば、より多くのペプチドを含む治療用組成物を含む。そのような組成物は、好適な組合せで同時にか、または順次に投与してよい。同時にか、または順次に投与できるか、さもなければ利用できるLolｐＶペプチドの好適な組成物および好適な組合せ（図２に示したアミノ酸配列を有するペプチドを含む）は、下記の組合せを包含する： LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-1 6（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）およびLPIX-20（配列番号22）； LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-1 2（配列番号14）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）およびLPIX- 20（配列番号22）； LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-1 7（配列番号19）およびLPIX-20（配列番号22）； LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）およびLP IX-20（配列番号22）； LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-1 1（配列番号13）、LPIX-12（配列番号14）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）およびLPIX-20（配列番号22）； LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-8 （配列番号10）、LPIX-9（配列番号11）、LPIX-11（配列番号13）、LPIX-12（配列番号14）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）、LPIX-19（配列番号21）、LPIX-20（配列番号22）、LPIX-23（配列番号25）およびLPIX-26（配列番号28）； LPIX-4（配列番号６）、LPIX-11（配列番号13）、LPIX-16（配列番号18）および LPIX-20（配列番号22）； LPIX-4（配列番号６）、LPIX-11（配列番号13）、LPIX-17（配列番号19）、LPIX -20（配列番号22）； LPIX-4（配列番号６）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）および LPIX-20（配列番号22）； LPIX-5（配列番号７）、LPIX-11（配列番号13）、LPIX-16（配列番号18）および LPIX-20（配列番号22）； LPIX-5（配列番号７）、LPIX-11（配列番号13）、LPIX-17（配列番号19）および LPIX-20（配列番号22）； LPIX-5（配列番号７）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）および LPIX-20（配列番号22）； LPIX-11（配列番号13）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）およびLPIX-20（配列番号22）； LPIX-4（配列番号６）、LPIX-11（配列番号13）およびLPIX-20（配列番号22）； LPIX-4（配列番号６）、LPIX-16（配列番号18）およびLPIX-20（配列番号22）； LPIX-4（配列番号６）、LPIX-17（配列番号19）およびLPIX-20（配列番号22）； LPIX-5（配列番号７）、LPIX-11（配列番号13）およびLPIX-20（配列番号22）； LPIX-5（配列番号７）、LPIX-16（配列番号18）およびLPIX-20（配列番号22）； LPIX-11（配列番号13）、LPIX-16（配列番号18）およびLPIX-2 （配列番号22 ）： LPIX-11（配列番号13）、LPIX-17（配列番号19）およびLPIX-20（配列番号22）； LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）およびLPIX-2 （配列番号22）。本発明のもう一面では、少なくとも２ペプチドを含む治療用組成物（例えば、少なくとも１個のエピトープをそれぞれ含む少なくとも２ペプチドの物理的混合物）であって、少なくとも一方のペプチドが、下記の群から選ばれるLolｐＶに由来するアミノ酸またはその一部を含み：LPIX-1（配列番号３）、LPIX-2（配列番号４）、LPIX-3（配列番号５）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号7 ）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-7（配列番号９）、LPIX-8（配列番号10）、LP IX-9（配列番号11）、LPIX-10（配列番号12）、LPIX-11（配列番号13）、LPIX-1 2（配列番号14）、LPIX-13（配列番号15）、LPIX-14（配列番号16）、LPIX-15（配列番号17）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）、LPIX-18（配列番号20）、LPIX-19（配列番号21）、LPIX-20（配列番号22）、LPIX-21（配列番号23）、LPIX-22（配列番号24）、LPIX-23（配列番号25）、LPIX-24（配列番号26）、LPIX-26（配列番号28）およびLPIX-27（配列番号29）（図２に示したとおり）、少なくとも一方のペプチドが、下記の群から選ばれるLolｐｌに由来するアミノ酸またはその一部を含む治療用組成物が与えられる： LPI-1（配列番号30）、LPI-1.1（配列番号31）、LPI-2（配列番号32）、LPI-3（配列番号55）、LPI-4（配列番号33）、LPI-4.1（配列番号34）、LPI-5（配列番号35）、LPI-6（配列番号36）、LPI-7（配列番号37）、LPI-8（配列番号38）、L PI-9（配列番号39）、LPI-10（配列番号40）、LPI-11（配列番号41）、LPI-12（配列番号42）、LPI-13（配列番号43）、LPI-14（配列番号44）、LPI-15（配列番号45）、LPI-16（配列番号46）、LPI-16.1（配列番号47）、LPI-17（配列番号48 ）、LPI-18（配列番号49）、LPI-19（配列番号50）、LPI-20（配列番号56）、LP I-21（配列番号51）、LPI-22（配列番号52）およびLPI-23（配列番号53）。図３に示した様々なLolｐＩの合成はもとより、LolｐＩを暗号化しているクローンの単離およびクローニングも、LolｐＩを用い、かつLolｐＩに由来する様々なペプチドを用いたヒトＴ細胞の研究とともにＰＣＴ公開特許第US94/02537号公報に記載されており、引用によってその全体がここに組み込まれる。好ましくは、該治療用組成物は、少なくとも５、６、７または８ペプチドを含み、ここで、少なくとも３または４ペプチドは、LolｐＶに由来し、かつ下記の群から選ばれ：LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-11（配列番号13）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）およびLPIX-20（配列番号22）、少なくとも２、３または４ペプチドは、LolｐＩに由来し、かつ下記の群から選ばれる：LPI-16（配列番号46）、LPI-18（配列番号49）、LPI-20 （配列番号56）およびLPI-23（配列番号53）。例えば、好適な治療用組成物は、 LolｐＩからの少なくとも２ペプチドとLolｐＶからの３ペプチドと、またはLol ｐＩからの３ペプチドとLolｐＶからの３ペプチドと、またはLolｐＩからの３ペプチドとLolｐＶからの４ペプチドと、またはLolｐＩからの４ペプチドとLolｐＶからの４ペプチドと、またはLolｐＩからの４ペプチドとLolｐＶからの３ペプチドとを含む。本発明のもう一面では、同時にか、または順次に投与できる、LolｐＶおよびL olｐＩに由来するペプチドもしくはその一部の組合せを投与する段階を含む方法が提供されるが、そのようなペプチドは、製薬上許容され得る担体または希釈剤との治療用組成物の形態であることができる。同時にか、または順次に投与できる、LolｐＶおよびLolｐＩのペプチドを含む好適な組成物および好適な組合せの例は、下記の組合せである： LPI-16.1（配列番号47）、LPI-18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）、LPI- 23（配列番号53）、LPI-3（配列番号55）、LPI-4.1（配列番号34）、LPI-10（配列番号40）、LPI-11（配列番号41）、LPI-15（配列番号45）、LPI-22（配列番号 52）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、 LPIX-8（配列番号10）、LPIX-9（配列番号11）、LPIX-11（配列番号13）、LPIX- 12（配列番号14）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）、LPIX-19 （配列番号21）、LPIX-20（配列番号22）、LPIX-23（配列番号25）、LPIX-26（配列番号28）； LPI-16.1（配列番号47）、LPI-18（配列番号49）、LPI-20、LPI-23（配列番号53 ）、LPI-3（配列番号55）、LPI-4.1（配列番号34）、LPI-10（配列番号40）、LP I-11（配列番号41）、LPI-15（配列番号45）、LPI-22（配列番号52）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-8（配列番号10）、LPIX-9（配列番号11）、LPIX-11（配列番号13）、LPIX-12（配列番号14 ）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）、LPIX-19（配列番号21）、LPIX-20（配列番号22）、LPIX-23（配列番号25）、LPIX-26（配列番号28）、L PIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-9 （配列番号11）、LPIX-11（配列番号13）、LPIX-12（配列番号14）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）、LPIX-19（配列番号21）、LPIX-20（配列番号22）； LPI-16.1（配列番号47）、LPI-18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）、LPI- 23（配列番号53）、LPI-3（配列番号55）、LPI-4.1（配列番号34）、LPI-10（配列番号40）、LPI-11（配列番号41）、LPI-15（配列番号45）、LPI-22（配列番号52）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-9（配列番号11）、LPIX-12（配列番号14）、LPIX-16（配列番号18）、LP IX-17（配列番号19）、LPIX-19（配列番号21）、LPIX-20（配列番号22）、LPIX- 23（配列番号25）； LPI-16.1（配列番号47）、LPI-18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）、LPI- 23（配列番号53）、LPI-3（配列番号55）、LPI-4.1（配列番号34）、LPI-10（配列番号40）、LPI-11（配列番号41）、LPI-15（配列番号45）、LPI-22（配列番号 52）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、 LPIX-12（配列番号14）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）、LPI X-19（配列番号21）、LPIX-20（配列番号22）； LPI-16.1（配列番号47）、LPI-18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）、LPI- 23（配列番号53）、LPI-3（配列番号55）、LPI-4.1（配列番号34）、LPI-10（配列番号40）、LPI-11（配列番号41）、LPI-15（配列番号45）、LPI-22（配列番号 52）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、 LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）、LPIX-19（配列番号21）、LPI X-20（配列番号22）； LPI-16.1（配列番号47）、LPI-18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）、LPI- 23（配列番号53）、LPI-3（配列番号55）、LPI-4.1（配列番号34）、LPI-10（配列番号40）、LPI-11（配列番号41）、LPI-15（配列番号45）、LPI-22（配列番号 52）； LPI-16.1（配列番号47）、LPI-18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）、LPI- 23（配列番号53）、LPI-3（配列番号55）、LPI-4.1（配列番号34）、LPI-10（配列番号40）、LPI-11（配列番号41）、LPI-15（配列番号45）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-8（配列番号10）、 LPIX-9（配列番号11）、LPIX-11（配列番号13）、LPIX-12（配列番号14）、LPIX -16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）、LPIX-19（配列番号21）、LPIX-20 （配列番号22）、LPIX-23（配列番号25）、LPIX-26（配列番号28）； LPI-16.1（配列番号47）、LPI-18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）、LPI- 23（配列番号53）、LPI-3（配列番号55）、LPI-4.1（配列番号34）、LPI-10（配列番号40）、LPI-11（配列番号41）、LPI-15（配列番号45）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-9（配列番号11）、 LPIX-11（配列番号13）、LPIX-12（配列番号14）、LPIX-16（配列番号18）、LPI X-17（配列番号19）、LPIX-19（配列番号21）、LPIX-20（配列番号22）； LPI-16.1（配列番号47）、LPI-18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）、LPI- 23（配列番号53）、LPI-3（配列番号55）、LPI-4.1（配列番号34）、LPI-10（配列番号40）、LPI-11（配列番号41）、LPI-15（配列番号45）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-9（配列番号11）、 LPIX-12（配列番号14）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）、LPI X-19（配列番号21）、LPIX-20（配列番号22）； LPI-16.1（配列番号47）、LPI-18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）、LPI- 23（配列番号53）、LPI-3（配列番号55）、LPI-4.1（配列番号34）、LPI-10（配列番号40）、LPI-11（配列番号41）、LPI-15（配列番号45）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-12（配列番号14）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）、LPIX-19（配列番号21）、L PIX-20（配列番号22）； LPI-16.1（配列番号47）、LPI-18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）、LPI- 23（配列番号53）、LPI-3（配列番号55）、LPI-4.1（配列番号34）、LPI-10（配列番号40）、LPI-11（配列番号41）、LPI-15（配列番号45）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-1 （配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）、LPIX-19（配列番号21）、LPIX-20（配列番号22）； LPI-16.1（配列番号47）、LPI-18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）、LPI- 23（配列番号53）、LPI-3（配列番号55）、LPI-4.1（配列番号34）、LPI-10（配列番号40）、LPI-11（配列番号41）、LPI-15（配列番号45）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）、LPIX-20（配列番号22）； LPI-16.1（配列番号47）、LPI-18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）、LPI- 23（配列番号53）、LPI-3（配列番号55）、LPI-4.1（配列番号34）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-8（配列番号 10）、LPIX-9（配列番号11）、LPIX-11（配列番号13）、LPIX-12（配列番号14）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）、LPIX-19（配列番号21）、L PIX-20（配列番号22）；LPIX-23（配列番号25）、LPIX-26（配列番号28）； LPI-16.1（配列番号47）、LPI-18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）、LPI- 23（配列番号53）、LPI-3（配列番号55）、LPI-4.1（配列番号34）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-9（配列番号 11）、LPIX-11（配列番号13）、LPIX-12（配列番号14）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）、LPIX-19（配列番号21）、LPIX-20（配列番号2 2）； LPI-16.1（配列番号47）、LPI-18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）、LPI- 23（配列番号53）、LPI-3（配列番号55）、LPI-4.1（配列番号34）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-9（配列番号 11）、LPIX-12（配列番号14）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19 ）、LPIX-19（配列番号21）、LPIX-20（配列番号22）、LPIX-23（配列番号25）； LPI- 16.1（配列番号47）、LPI-18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）、LPI -23（配列番号53）、LPI-3（配列番号55）、LPI-4.1（配列番号34）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８、LPIX-12（配列番号14）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）、LPIX-19（配列番号2 1）、LPIX-20（配列番号22）； LPI- 16.1（配列番号47）、LPI-18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）、LPI -23（配列番号53）、LPI-3（配列番号55）、LPI-4.1（配列番号34）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）、LPIX-9（配列番号21）、LPIX-20（配列番号 22）； LPI- 16.1（配列番号47）、LPI-18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）、LPI -23（配列番号53）、LPI-3（配列番号55）、LPI-4.1（配列番号34）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）、LPIX-20（配列番号22）； LPI-16.1（配列番号47）、LPI-18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）、LPI- 23（配列番号53）、LPI-3（配列番号55）、LPI-4.1（配列番号34）、LPI-22（配列番号52）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-8（配列番号10）、LPIX-9（配列番号11）、LPIX-11（配列番号13）、LPIX-12（配列番号14）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）、L PIX-19（配列番号21）、LPIX-20（配列番号22）、LPIX-23（配列番号25）、LPIX -26（配列番号28）； LPI-16.1（配列番号47）、LPI-18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）、LPI- 23（配列番号53）、LPI-3（配列番号55）、LPI-4.1（配列番号34）、LPI-22（配列番号52）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-8（配列番号10）、LPIX-9（配列番号11）、LPIX-11（配列番号13）、LPIX-12（配列番号14）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）、L PIX-19（配列番号21）、LPIX-20（配列番号22）； LPI-16.1（配列番号47）、LPI-18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）、LPI- 23（配列番号53）、LPI-3（配列番号55）、LPI-4.1（配列番号34）、LPI-22（配列番号52）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-9（配列番号11）、LPIX-12（配列番号14）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）、LPIX-19（配列番号21）、LPIX-20（配列番号22）、L PIX-23（配列番号25）； LPI-16.1（配列番号47）、LPI-18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）、LPI- 23（配列番号53）、LPI-3（配列番号55）、LPI-4.1（配列番号34）、LPI-22（配列番号52）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-12（配列番号14）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19 ）、LPIX-19（配列番号21）、LPIX-20（配列番号22）； LPI-16.1（配列番号47）、LPI-18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）、LPI- 23（配列番号53）、LPI-3（配列番号55）、LPI-4.1（配列番号34）、LPI-22（配列番号52）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）、LPIX-19（配列番号21 ）、LPIX-20（配列番号22）； LPI-16.1（配列番号47）、LPI-18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）、LPI- 23（配列番号53）、LPI-3（配列番号55）、LPI-4.1（配列番号34）、LPI-22（配列番号52）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）、LPIX-20（配列番号22 ）； LPI-16.1（配列番号47）、LPI-18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）、LPI- 23（配列番号53）、LPI-3（配列番号55）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-8（配列番号10）、LPIX-9（配列番号 11）、LPIX-11（配列番号13）、LPIX-12（配列番号14）、LPIX-16（配列番号18 ）、LPIX-17（配列番号19）、LPIX-19（配列番号21）、LPIX-20（配列番号22）、LPIX-23（配列番号25）、LPIX-26（配列番号28）； LPI-16.1（配列番号47）、LPI- 18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）、LPI -23（配列番号53）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-9（配列番号11）、LPIX-11（配列番号13）、LPIX-12（配列番号14）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）、LPIX-19（配列番号21）、LPIX-20（配列番号22）； LPI-16.1（配列番号47）、LPI-18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）、LPI- 23（配列番号53）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-9（配列番号11）、LPIX-12（配列番号14）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）、LPIX-19（配列番号21）、LPIX-20（配列番号22）、LPIX-23（配列番号25）； LPI-16.1（配列番号47）、LPI-18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）、LPI- 23（配列番号53）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-12（配列番号14）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）、LPIX-19（配列番号21）、LPIX-20（配列番号22）； LPI-16.1（配列番号47）、LPI-18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）、LPI- 23（配列番号53）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）、LPIX-19（配列番号21）、LPIX-20（配列番号22）；および LPI-16.1、LPI-18、LPI-20、LPI-23、LPIX-4、LPIX-5、LPIX-6、LPIX-16、LPIX- 17、LPIX-20とLPI-16.1（配列番号47）、LPI-18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）、LPI-23（配列番号53）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）、 LPIX-20（配列番号22）と。加えて、LolｐＩの少なくとも１Ｔ細胞エピトープをそれぞれ含む、少なくとも２LolｐＩペプチドを含む組成物（例えば、少なくとも２ペプチドの物理的混合物）が与えられる。そのような組成物は、製薬上許容され得る担体または希釈剤との治療用組成物の形態で投与して、ドクムギ感受性、および、特にLolｐＩ蛋白質アレルゲンに対する感受性を治療することができる。LolｐＩペプチドの、同時にか、または順次に投与できる（図３に示したアミノ酸配列を有するペプチドを含む）好適な組成物および好適な組合せは、下記の組合せを包含する： LPI-16（配列番号46）およびLPI-20（配列番号56）； LPI-18（配列番号49）およびLPI-20（配列番号56）； LPI-20（配列番号56）およびLPI-23（配列番号53）； LPI-16（配列番号46）、LPI-18（配列番号49）およびLPI-20（配列番号56）； LPI-16（配列番号46）、LPI-20（配列番号56）およびLPI-23（配列番号53）； LPI-18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）およびLPI-23（配列番号53）； LPI-16（配列番号46）、LPI-18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）およびLP I-23（配列番号53）。ここに記載の組成物はいずれも、個体の、ドクムギ花粉アレルゲンまたは免疫学的交叉反応性アレルゲンに対する感受性を治療する医薬の製造に役立つ。下記の非限定的な図および実施例によって、本発明を更に説明する。実施例１ドクムギ花粉からの未変性LolｐＶの精製Ａ．モノクローナル抗体（mAb）1B9の生産および精製 Dactylis glomerata（カモガヤ）の未精製花粉抽出物でBalb/c系マウスを免疫し、記載のとおり抗体分泌クローンを生成した［Walshら、Int．Arch．Allergy Appl．Immunol．（1990年）第91巻419〜425ページ］。LolｐＶに対して交叉反応するMAb 1B9というハイブリドーマクローンをWalker博士（Birmingham 大学Wol fson Research Lab．、英国バーミンガム）から得た。Balb/c系マウスから形成される腹水液は、契約によって生産された（Babco、米国カリフォルニア州Richm ond）。(NH₄)₂SO₄沈澱（50％飽和）によって、腹水液から抗体を生成した。ペレットを10ミリモルのリン酸緩衝液、pH7.5に再懸濁させ、同じ緩衝液に対して４ ℃で一晩透析し、次いで、０〜0.5モルのNaClの線形勾配を用いた、FPLC Q-Seph arose（Pharmacia、米国ニュージャージー州Piscataway）でのイオン交換クロマトグラフィーによって分画した。IgE は、0.15〜0.2モルのNaClの濃度で溶出された。Ｂ．1B9免疫親和性カラムの調製生成した1B9を、メーカーの使用説明書に従い、蛋白質３〜４mg/mlのを用いて、Affigel-10（Biorad、米国カリフォルニア州Richmond）に結合させた。略述すると、PFLC Q-Sepharoseで生成したmAb 1B9を0.1モルのMOPS緩衝液、pH7.5に対して、２〜３回交換しつつ４℃で一晩透析した。Affigel-10樹脂を、振盪したガラス漏斗内で冷脱イオン水で洗浄した。洗浄した樹脂を、1B9抗体と４℃で４時間混合し、次いで、１モルのエタノールアミン、pH8.0で１時間遮断した。樹脂をカラムに充填し、ＰＢＳで洗浄し、次いで、ＰＢＳ＋0.05％アジ化ナトリウム中で貯蔵した。Ｃ．ドクムギ花粉からのLolｐＶの親和精製脱脂したドクムギ花粉100ｇ（Green Laboratories、米国ノースカロライナ州L enoir）を、0.05モルリン酸緩衝液、pH7.2、0.15モルNaCl、臭化フェニルメチルスルホニル（170μg/ml）、ロイペプチン（１μg/ml）、ペプスタチン（１μg/m l）およびダイズトリプシン阻害剤（１μg/ml）を含有する抽出緩衝液１リットルで抽出した。溶液を４℃で一晩撹拌し、次いで、12,000ｘｇで100分間遠心分離することによって、花粉を抽出した。不溶性物質は、抽出緩衝液0.5〜1.0 １で再抽出し、次いで、上清を併せ、0.05モルリン酸緩衝液＋0.3モルNaCl pH7.2 で平衡させた DE-52 セルロース（Whatman、英国Maidstone）100mlへのバッチ吸収によって、色素除去した。未結合材料は、0.5ml／秒の流速で1B9-Affigel-10のカラムに装荷した。次いで、ＰＢＳ、ＰＢＳ＋0.5 モルNaCl、そしてもう一度ＰＢＳでカラムを徹底的に洗浄してから、0.1モルのグリシン、pH2.7でLolｐＶアレルゲンを溶出させた。分画を直ちに１モルのトリクレン、pH11.0で中和した。これらの親和精製した材料は、IgE の研究およびＴ細胞エピトープのマッピングに用いた。親和精製したLolｐＶの物理化学的特性 1B9で親和精製した材料を、ＳＤＳ−ＰＡＧＥによって分析した。図15に示したとおり、LolｐＶは、分子量が29,000〜22,000の範囲の多重帯域として存在する。これらの成分はすべて、ウエスタンブロット分析によって、1B9に対して反応性であった（データは示さず）。これらの成分を、ProBlott膜（Applied Bios ystems、米国カリフォルニア州Foster City）で電気ブロットし、クーマシーブルーで染色し、３条の主帯域を切り出し、Beckman ＬＦ−３０００（Beckman In struments、米国カリフォルニア州Carlsbad）という配列決定装置で配列決定した。３帯域のＮ末端配列を表１に示す。この配列決定データは、中間および低分子量の帯域は、より高分子量の成分のＮ末端切断生成物を表すことを示す。Ｎ末端の配列は、クローン化されたLolｐＶ（１２Ｒ）と同一である（ＰＣＴ出願公開第WO93/04174号公報を参照のこと）。Ｎ末端の５個のプロリン残基は、すべてヒドロキシプロリンであることが判明したが、これは、米国北部の草本からの第５群のアレルゲンに共通であるように思われた［F．Matthiesenら（1991年）：C lin．Exp．Allergy、第21巻297〜307ページ］。発明者らは、1B9で親和精製した材料をアミノ酸分析によっても決定し（表２）、データは、Klysnerら［Clin．E xp．Allergy（1992年）：第22巻491〜497ページ］が報告した米国北部の草本からのLolｐＶその他の第５群のアレルゲンに酷似した。更に、特異的な抗第１群m Ab を用いたウエスタンブロット分析（データは示さず）は、第１群の蛋白質は標本中に検出できないことを立証した。したがって、考え合わせると、これらのデータは、1B9で親和精製した標本は、第５群のアレルゲンのみを含むにすぎないことを示唆する。実施例２−LolｐＶを用いたヒトＴ細胞の研究重複ペプチドの合成図１に示したクローン１２Ｒ（配列番号２）、ＡＴＣＣ番号69475のｃＤＮＡ配列から、LolｐＶのアミノ酸配列を推理した。LolｐＶを暗号化しているクローン１２Ｒ（LolｐIb.1として記載）の単離およびクローニングの詳細は、引用によってその全体がここに組み込まれるＰＣＴ出願公開第WO93/04174号公報に与えられている。クローン１２Ｒによって暗号化されている組換えによって生産されたLolｐＶの発現の一実施例は、下記の実施例４で与えられる。標準的Fmoc/tBoc合成化学を用いて、ドクムギLolｐＶの重複ペプチドを合成し、逆相ＨＰＬＣによって精製した。図２は、これらの研究に用いたLolｐＶペプチドを示す。ペプチド名は、一貫して整合している。ドクムギの抗原ペプチドに対するＴ細胞の応答季節性鼻炎の臨床的症状を示し、草本について皮膚試験陽性であった草本アレルギー患者からのヘパリン処理血液60mlのリンパ球分離培地（ＬＳＭ）の遠心分離によって、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を精製した。10μg/mlの親和精製した未変性LolｐＶを有する、５％の熱不活性化ヒトAB血清で強化した完全培地（ＩＲＰＭＩ−１６４）、２モルのＬ−グルタミン、100単位／mlのペニシリン／ストレプトマイシン、５ｘ10^-5モルの2-メルカプトエタノール、および10ミリモルＨＥＰＥＳの、加湿した５％CO₂の恒温器中で37℃で６日間の大量培養での２ｘ1 0⁶ ＰＢＬ／mlの刺激によって、長期Ｔ細胞系統を確立した。この量の開始抗原が、大部分の草本アレルギーの患者からのＴ細胞の活性化に最適であると決定された。ＬＳＭ遠心分離によって、生存できる細胞を精製し、５単位の組換えヒトＩＬ−２／ml、および５単位の組換えヒトＩＬ−４／mlで強化した完全培地で、望みの細胞数が達成されるまで最高３週間培養した。細胞は、４〜６週間休ませた。次いで、選ばれたペプチド、すなわち組換えLolｐＩ（rLolｐＩ）、精製した未変性LolｐＶ、精製したrLolｏＶ、または組換えFelｄＩ（rFelｄＩ）（Ｉ鎖）、あるいは破傷風トキソイド（TT）に対してＴ細胞が増殖できる能力を評価した。検定のために、エプスタイン・バーウイルス（ＥＢＶ）で形質転換した２ｘ10⁴ 個の自己Ｂ細胞（下記のとおり調製した）、または５ｘ10⁴個の照射ＰＢＬの存在下で、２ｘ10⁴個の休止細胞を２〜50mg/mlのrLolｐＩ、精製した未変性LolｐＶ、rFelｄＩ（Ｉ鎖）またはrLolｐＩで、96穴丸底プレートのウエルを二重に用いて、200mlの堆積の完全培地中で３日間再剌激した。次いで、各ウエルに１mCi のトリチウム化チミジンを16〜20時間与えた。取り込まれたカウントをガラス繊維のフィルターマットに捕集し、液体シンチレーションによる計数の処理をした。rLolｏＶ、精製した未変性LolｐＶおよび組換えLolｐＩ、ならびに上記のとおり合成した抗原性ペプチドによる検定中の変動する抗原の線量を決定した。力価測定は、Ｔ細胞検定でのペプチドの線量を最適化するために用いた。各ペプチドの力価測定での最大の応答を刺激指数（S.I.）として表した。S.I.は、ペプチドに対する応答の際に細胞によって取り込まれた毎分カウント数（cpm）を培地のみの中で細胞によって取り込まれたcpmで除したものである。背景レベルの２倍に等しいか、またはそれより高いS.I.値は、「陽性」と考えられ、ペプチドがＴ細胞エピトープを含むことを示す。陽性の結果を、被験患者群についての各ペプチドの平均刺激指数を算出するのに用いた。結果（示さず）は、一人の患者が、LolｐＶペプチドはもとより、組換えLolｐＶや精製した未変性LolｐＶにも充分に応答するが、rFelｄＩ（Ｉ鎖）またはTTには応答しないことを立証する。このことは、LolｐＶのＴ細胞エピトープは、この特定のアレルギー性患者からのＴ細胞によって認識されること、およびrLolｐＶは、そのようなＴ細胞エピトープを含むことを示す。上記の操作を、全部で19名の患者で追行した。個々の患者の結果を、その患者が、精製した未変性LolｐＶ蛋白質に2.0に等しいか、またはそれより高いS.I.で応答し、かつその患者が、精製した未変性LolｐＩにに由来する少なくとも１ペプチドに2.0 またはそれ以上のS.I.で応答したならば、各ペプチドについての平均S.I.を算出するのに用いた。患者19名からの陽性の実験の要約を図４に示す。各棒の上の数字は、そのペプチドに対する平均S.I.を示す。カッコで括った数字は、その特定のペプチドに応答する患者の百分率を表す。棒は、各ペプチドについての陽性度指数（平均S.I.を乗じた応答する患者の百分率）を表す。図５は、上記と同じデータから導いた、各ペプチドについての順位和を示す。棒は、被験患者19名の群でのペプチドに対する応答の累積和を表す。累積和を決定するために、各個体でS.I.が最高である５種類のペプチドを決定し、５が最も強い応答を表すように、順位の数字を降順に割り振った。次いで、患者群全体について、各ペプチドについての順位を合計して、そのペプチドについての累積順位を決定した。各棒の上は、試験した19患者の群での平均S.I.、およびペプチドに対する、S.I.が少なくとも２である陽性の応答の百分率（カッコ内）である。陽性の百分率、および平均細胞刺激指数が与えられると、この２数字を乗じることによって、各ペプチドについての陽性度指数（P.I.）が算出できる。図５は、この研究では、LPIX-20がペプチドの最高の順位付け和を有することを示す。実施例３主要なドクムギ花粉アレルゲンとしてのLolｐＶＡ）ＥＬＩＳＡ分析 LolｐＶの重要性を調べるために、直接と競合との双方のＥＬＩＳＡ検定法を実施した。直接ＥＬＩＳＡでは、リン酸緩衝食塩水、pH7.4（ＰＢＳ）への10μg ／mlの抗原100μlを用いて、Immulon II（Dynatech、米国バージニア州Chantill y）という96穴プレートを室温（ＲＴ）で４時間、または４℃で一晩（Ｏ／Ｎ）被覆した。各段階の間に、ＰＢＳ−Ｔで３回プレートを洗浄した。過剰な被覆抗原は除去し、ＲＴで１時間、ＰＢＳに溶かした0.5％ゼラチン＋１mg／mlＰＶＰの１ウエルあたり300μlで穴を遮断した。系統希釈した患者血漿、または希釈剤のＰＢＳ＋0.05％のTween^-20を、ウエルを二重に用い、１ウエルあたり100μlとして４℃で一晩温置した。未結合抗体を除去し、ウエルを100μg／ウエルの第二のAb（１：1,000、ビオチニル化したヤギ抗ヒトIgE、KPL Inc.、米国メリーランド州Gaithersburg）とともにＲＴで１時間温置した。この溶液を除去し、ストレプトアビジン−セイヨウワサビペルオキシダーゼ（ＨＲＰＯ）（１：10,000）を 100μl／ウエル（SBA Inc．米国アラバマ州Birmingham）で加え、ＲＴで１時間温置した。3,3',5,5'-テトラメチルベンジジン（ＴＭＢ）である基質（KPL Inc. 、米国メリーランド州Gaithersburg）を直前に混合し、100μg／ウエルで加え、１〜５分間で発色させた。100μg／ウエルの１モルリン酸の添加によって反応を停止させた。MR7000プレート読取り装置（Dynatech、米国バージニア州Chantill y）で450nmフィルターを用いて、プレートを読取った。二重のウエルの吸光度レベルを平均した。結果を、吸光度対希釈としてグラフ化した。競合ＥＬＩＳＡは、同じ操作手順に下記の変化を加えて実施した：IgE の最終源として一回希釈の患者血漿（またはプールしたヒト血漿（ＰＨＰ））を用いた；系統希釈した抗原を血漿と混合し、Ｏ／Ｎ４℃で温置した。次いで、この血漿をウエルを二重に用いて温置した。結果を吸光度対競合抗原の濃度の対数としてプロットした。直接ＥＬＩＳＡのために、ドクムギ花粉の可溶性花粉抽出物（ＳＰＥ）または rLolｐＶ（精製した未変性LolｐＶは少量のLolｐＩを有することがあるので、組換え材料の使用が、IgE がLolｐＶのみと結合することを確実にする）のいずれかでウエルを被覆し、これらの抗原とのヒトIgE 抗体の結合を分析した。ドクムギ穿刺試験の評点が３＋またはそれ以上の患者20名からの等量の血漿からなるＰＨＰ（ＰＨＰ−Ａ）、または直接ＥＬＩＳＡによって測定した限りで高いIgE 結合性を有する、草本皮膚試験で反応性である患者40名からの等アリコートの血漿からなるＰＨＰ（ＰＨＰ−Ｂ）、または個々の患者からの血漿を、この研究で比較した。ＰＨＰ−Ａ（図６）、ＰＨＰ−Ｂ（図７）、ドクムギ花粉ＳＰＥでの個々の患者４名（図８）、および精製したrLolｐＶ（図９）によるＳＰＥまたはrL olｏＶに対する結合反応性の結果は、花粉抽出物と組換え蛋白質との双方に対しては、高いIgE の結合性が存在することを示す。競合検定では、ＥＬＩＳＡのウエルをドクムギ花粉ＳＰＥで被覆し、次いで、競合するドクムギ花粉ＳＰＥ、精製した未変性LolｐＶ、またはrLolｐＶの存在下でアレルギー患者のIgE の結合を測定した。この検定でのアレルギー性IgE の採集源は、ＰＨＰ−Ａ（図10）、または個々の患者の血漿（図11）であった。競合検定は、LolｐＳＰＥに対するIgE の少なからぬ部分がLolｐＶに特異的であることを確認した。Ｂ）ヒスタミン放出分析ドクムギアレルギーの患者１名で、LolｐＳＰＥおよびrLolｐＶを追加抗原として用いて、ヒスタミン放出検定を実施した。この検定は、ヒト好塩基球というメジエーターの放出を通じてのIgE の反応性の尺度であり、特異的モノクローナル抗体を用いたヒスタミンのアシル化誘導体の検出に基づく［A.M．Morelおよび M.A．Delaage（1988年）：J．Allergy Clin．Immunol．第82巻646〜654ページ］。この放射線免疫検定法の試薬は、Amac Inc．（米国メイン州Westbrook）によって、キットとして販売されている。ヘパリン処理した全血を草本アレルギーの個体から吸引し、次いで、アリコート200μlを、様々な濃度の当量の草本抗原のＳＰＥおよびrLolｐＶと、またはポリプロピレン1.5mlに溶かした希釈剤であるＰＡＣＭ緩衝液（25ミリモルＰＩＰＥＳ、100ミリモルNaCl、５ミリモルKCl、４ミリモルCaCl₂、１ミリモルMgCl₂、0.003％ＨＳＡ、pH7.3）と混合した。放出反応は、37℃で30分間実施した。この温置後に、試料を1,500rpmで３分間遠心分離し、上清を取り出した。全ヒスタミン放出については、ＰＡＣＭ緩衝液0.9mlに血液0.1mlを加え、渦流撹拌し、次いで３分間沸騰させた。試料を13,000rpmで回転させ、分析のために上清を取り出した。二重にした試料を用いて、全放出を測定した。すべての上清をアシル化緩衝液で１：４に希釈し、検定の残余は、メーカーの操作説明書に従って実施した。この検定の結果は、図12に示したが、抽出物と組換え蛋白質との双方に対する広い濃度範囲にわたる強いヒスタミン放出を立証する。Ｃ）LolｐＶペプチドに対する反応性 LolｐＶペプチドに対するIgE の反応性を評価するために、直接ＥＬＩＳＡを実施した。この検定では、ＥＬＩＳＡのプレートを合成LolｐＶペプチド（図２に示す）およびrLolｐＶ蛋白質のセットで被覆した。ウエル上でＰＨＰ−ＢのヒトIgE との結合を温置し、得られる結合を分析した。図13aおよび図13bに証拠付けられるとおり、この予備検定では、LolｐＶ蛋白質との非常に高いIgE の結合が存在するものの、LolｐＶペプチドのいずれとの有意な結合も検出されない。Ｄ）LolｐＩおよびLolｐＶはドクムギ花粉の主要なアレルゲンを構成する。 LolｐエおよびLolｐＶは、一体となって、ドクムギ花粉ＳＰＥの主要なIgE 結合蛋白質を構成することを示すために、別個の競合ＥＬＩＳＡを実施した。この検定では（図14）、精製した未変性LolｐＩとLolｐＶの混合物、またはrLolｐＩとrLolｐＶの混合物が、ドクムギ花粉ＳＰＥとのIgE の結合に競合できる能力を調べるために、ＰＨＰ−Ｂを用いた。精製した未変性蛋白質は、ドクムギ花粉ＳＰＥとのIgE の結合に背景レベルまで競合する。rLolｐＩとrLolｐＶの混合物も、プレートを被覆するＳＰＥとの結合に利用できるIgE の量を実質的に減少させることができる。すべてのドクムギ花粉蛋白質に対して仕向けられたヒトIgE の大多数は、ドクムギ花粉のＳＰＥ蛋白質の複雑な混合で見出される僅か２種類の蛋白質（LolｐＩおよびLolｐＶ）の混合によって、結合された。このデータは、これら２種類のペプチドがドクムギ花粉の主要アレルゲンであることを意昧する。実施例４ LolｐＶの発現 LolｐＶの発現を下記のとおり実施した。λgtIIクローンの１２ＲをEcoRIで消化した。LolｐＶを暗号化している挿入断片をpGEXに結合した。LolｐＶを含むpG EXベクター（クローン１２Ｒ）をEcoRIで消化した。LolｐＶの挿入断片（図１に示したヌクレオチド配列を有する）を、１％のSeaPlaqueという低融点アガロースゲル中でのこの消化物の電気泳動によって、単離した。次いで、挿入断片を、独自のEcoRIエンドヌクレアーゼ制限部位に続く、ATG という開始コドンの３’ 直近の６個のヒスチジン（His6）を暗号化している配列を含むように修飾した、 EcoRIで消化した発現ベクターのpET-11d（Novagen、米国ウィスコンシン州Madis on、Jmeelら（1990年）：J．Virol．第64巻3,963〜3,966ページ）に結合した。ベクター中の第二のEcoRIエンドヌクレアーゼ制限部位は、隣接するClaＩおよび Hind IIIエンドヌクレアーゼ制限部位とともに、EcoRIおよびHind IIIによる消化、平滑断端化および再結合によって、予め除去しておく。Ni²⁺キレート化カラム［Hochuliら（1987年）：J．Chromatog．第411巻177〜184ページ；Hochuliら（1988年）：Bio/Tech．第６巻1,321〜1,325ページ］での組換え蛋白質（rLolｐＶ）の親和精製のために、このヒスチジン（His6）配列を追加した。組換えクローンを用いて、T7ポリメラーゼを暗号化している遺伝子に先行するイソプロピル −β−Ｄ−チオガラクトピラノシド（ＩＰＴＧ）で誘導できるプロモーターを有するプラスミドを潜伏させている大腸菌株のＢＬ２１−ＤＥ３を形質転換したＩＰＴＧによる誘導は、高レベルのT7ポリメラーゼの発現へと導くが、これは、T7 のプロモーターを有するpET-11dでの組換え蛋白質の発現に必要である。LolｐＶ（クローン１２Ｒ）を含有するpET-11dは、ジデオキシ配列決定法［Sangerら（1977年）：Proc．Natl．Acad．Sci．USA第74巻5,460〜5,4 63ページ］によって、発現の正確な読み枠内のLolｐＶクローンであることが確認された。組換え蛋白質の発現および精製のために、pET-11d LolｐＶクローンを大規模に増殖させた。組換えプラスミドを含有する細菌の２mlの培養体を８時間増殖させ、次いで、固体培地（例えば、200μg／mlのアンピシリンを含有するＬＢ培地（Gibco-BRL、米国メリーランド州Gaithersburg）への1.5％アガロースを有する６枚のペトリプレート（100ｘ15mm））に画線し、融合まで一晩増殖させ、次いで、アンピシリン(200μg／ml)を含有する液体培地（脳心臓インフュージョン培地、Difco）９１に掻き取って入れた。培養体を、Ａ₆₀₀が1.0になるまで増殖させ、ＩＰＴＧを加え（１ミリモルの最終濃度）、培養体を更に２時間増殖させた。遠心分離（7,930ｘｇ、10分）によって細菌を回収し、６モルのグアニジン−H Cl 90mL、0.1モルのNa₂HPO₄、pH8.0中で１時間、激しく撹拌しつつ溶菌させた。不溶性材料は、遠心分離（11,000ｘｇ、10分、４℃）。溶解物のpHをpH8.0に調整し、溶解物を、６モルのグアニジン-HCl、100ミリモルのNa₂HPO₄、pH8.0で平衡させておいた80ml入りニッケルＮＴＡアガロースカラム（Qiagen、米国カリフォルニア州Chatsworth）に掛けた。６モルのグアニジン−HCl、100ミリモルのNa₂ HPO₄、10ミリモルのトリス−HCl、pH8.0、次いで、８モルの尿素、100ミリモルのNa₂HPO₄、pH8.0、そして最終的に８モルの尿素、100ミリモルの酢酸ナトリウム、10ミリモルのトリス−HCl、pH6.3で順次に洗浄する。流過物がＡ₂₈₀≦0.05 を有するまで、カラムを各緩衝液で洗浄した。組換え蛋白質のrLolｐＶを８モルの尿素、100ミリモルの酢酸ナトリウム、10 ミリモルのトリス−HCl、pH4.5で溶離させ、10mlのアリコートとして捕集した。各分画の蛋白質の濃度を、Ａ₂₈₀の吸光度によって決定し、ピーク分画をプールした。捕集した組換え蛋白質のアリコートを、Sambrookら、前出の方法に従って、ＳＤＳ−ＰＡＧＥで分析した（データは示さず）最初の９リットルの標本は、約60〜70％の純度を有するrLolｐＶ12mgを生じた。標本の純度は、クーマシーブルーで染色したＳＤＳ−ＰＡＧＥゲルの濃度測定（Shimazu Flying Spot Scanner、Shimazu Scientific Instruments Inc．、米国メリーランド州Braintree）によって決定した。実施例５−DacｇＶのクローニングおよび発現 Greer Laboratories（米国ノースカロライナ州Lenoir）からDactylis glomera ta の花粉を購入した。ＰＣＴ出願公開第US92/05661(WO93/01213）号公報に前記のとおり、ＲＮＡを単離し、Invitrogen（米国カリフォルニア州サンディエゴ）からのMICRO-FAST TRACK（商品名）というｍＲＮＡ単離キットを用いて、ポリＡ＋ＲＮＡを単離した。BRL cDNA SYNTHESIS PLUS（商品名）キット（米国メリーランド州Gaithersburg）を用いて、二本鎖ｃＤＮＡを作製した。cDNA CLONING S YSTEM 1GT10（商品名）（Amersham、米国イリノイ州Arlington Heights）を用いて、1gt10にｃＤＮＡライブラリーを作製した。メーカーの示唆する操作手順を用いて、EcoRI、BamHI、KpnIおよびNcoIの制限部位を含むD. glomerataの二本鎖ｃＤＮＡをアダプターアームに結合し、（ラムダ）gt10内に結合した。やはりメーカーの示唆する操作手順を用いて、ライブラリーをパッケージし、力価測定した。ライブラリーを展開培養し、ランダムプライムによるプローブ（RANDOM PRI MED DNA LABELING KIT（商品名）、Boehringer Mannheim Corporation、米国インディアナ州Indianapolis）、またはニックトランスレーションによるプローブ［J．Sambrook ら：Molecular Cloning: A Laboratory Manual、Cold Spring Ha rbor Laboratory（1989年）］を用いて、100,000を越える独立したファージのプラークをふるい分けした。ライブラリーは、1.2キロベースのLolｐＶクローン１２ＲのｃＤＮＡでふるい分けした［M.B．Singh：Proc．Natl．Acad．Sci．USA（ 1991年）第88巻1,384〜1,388ページ］。多くの陽性のクローンが、最初のふるいの中に特定された。いくつかのクローンを、標準的手法［J．Sambrookら：Molecular Cloning: A Laboratory Manual 、Cold Spring Harbor Laboratory（1989年）］を用いて回収し、同じLolｐＶクローンの１２Ｒのプローブを用いて、高力価のファージストックの希釈物を再ふるい分けした。ファージストックは、標準的手法［J．Sambrookら：Molecular C loning: A Laboratory Manual、Cold Spring Harbor Laboratory（1989年）］を用いて調製した。陽性のクローンを再び回収し、前と同じように高力価のストックを調製し、LolｐＶクローンの１２Ｒのプローブによる第三のふるい分けのために系統希釈物を調製した。この第三のふるい分けの後では、228、235、236、2 59、267および285番の６ファージクローンが陽性であり、記載のとおり［J.Samb rookら:Molecular Cloning: A Laboratory Manual、Cold Spring Harbor Labora tory（1989年）］高力価のストックを調製した。標準的手法［J．Sambrookら：M olecular Cloning: A Laboratory Manual、Cold Spring Harbor Laboratory（19 89年）］を用いて、選ばれたファージからｃＤＮＡ挿入断片を単離した。クローン228番からの挿入断片は、約500塩基対（bp）であった。クローン235番からの挿入断片は、約1,000bpであった。クローン236番からの挿入断片は、約1,200bp であった。クローン259番からの挿入断片は、約1,200bpであった。クローン267 番からの挿入断片は、約1,000bpであった。クローン28 5番からの挿入断片は、約800bpであった。単離した挿入断片は、それに続く分析のために、適切に消化されたpUC18および／またはpUC19中にクローニングした。 Sangerらの標準的なジデオキシ鎖末端法［F．Sangerら：Proc．Natl．Acad．Sci ．USA（1977年）第74巻5,460〜5,463ページ］に基づくSEQUENASE（商品名）というキット（ＵＳＢ、米国オハイオ州クリーブランド）を用いて、ｃＤＮＡ挿入断片を配列決定した。クローンのすべてについての部分的配列を決定した。LolｐＶクローンの１２Ｒの配列（配列番号２）［E.K．Ongら：Gene（1993年）第134巻235〜240ページ］との比較によって、すべてがDacｇＶの配列を含むことが判明した。クローン2 35番および236番の部分的に翻訳された配列は、互いに酷似してはいたが、その配列（示していない）の異なる部位で始まり、DacｇＶの一つのイソ型を表すように思われる。クローン259番の部分的に翻訳された配列は、クローン235番および236番のそれとは異なり、DacｇＶの第二のイソ型を表すように思われる。クローン259番の部分的に翻訳された配列は、LolｐＶのクローン１２Ｒの配列（配列番号２）［E.K．Ongら：Gene（1993年）第134巻235〜240ページ］と最も相同である。クローン235番および236番の部分的に翻訳された配列は、LolｐＶのクローン１９Ｒの配列［E.K．Ongら：Gene（1993年）第134巻235〜240ページ］と最も厳密に相同である。クローン259番を全体的に配列決定した。標準的な前進後退プライマー（New E ngland Biolabs、米国マサチューセッツ州Beverly）を用いて、両端から配列決定した。EcoRIおよびPstＩでの単離挿入断片の消化によって、下位構成体を調製し、適切に消化したpUC18中に断片をクローニングして、内部配列を決定した。D acｇＶ遺伝子の５’位に対応するEcoRI／PstＩ挿入断片を単離し、StuＩまたはS au3AおよびXhoＩで更に消化し、適切に消化したpUC19中に結合させて、以後の配列分析を実施した。クローン259番のヌクレオチド（配列番号57）および推理されるアミノ酸配列（配列番号58）を図16に示す。ヌクレオチド１〜25番はアダプター配列に相当する。この配列はポリＡ鎖で終る、すなわちアダプター配列は、この配列の３’末端では示されない。700〜1,181番のヌクレオチド配列は、予備的であるにすぎず、誤って特定され得るものもある。例えば、ヌクレオチド712 番は、仮に「Ｃ」として特定されている。しかし、これは、Gly196を暗号化しているコドンの第三位であり、残基712番での別なヌクレオチドの存在は、予測されるアミノ酸を変えない。第５群の草本アレルゲンを配列決定することは、それらの高いＧＣ含量のために困難である。クローン236番および259番は、ＡＴＣＣに寄託してある。第５群のアレルゲンは、非常に保存的な領域を有することから、ここに記載の LolｐＶの主要なＴ細胞エピトープ含有ペプチドは、特に該領域が近縁草本間で強固に保存されている場合は、DacｇＶの主要Ｔ細胞エピトープである可能性が高い。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号庁内整理番号ＦＩＣ１２Ｎ 15/02 9637−4ＢＣ１２Ｐ 21/02 ＣＣ１２Ｐ 21/02 9358−4Ｂ 21/08 21/08 0276−2ＪＧ０１Ｎ 33/53 ＱＧ０１Ｎ 33/53 0276−2ＪＫ 0276−2Ｊ 33/577 Ｂ 33/577 9284−4ＣＡ６１Ｋ 39/395 Ｎ // Ａ６１Ｋ 39/395 9162−4ＢＣ１２Ｎ 15/00 Ｃ (Ｃ１２Ｎ 1/21 Ｃ１２Ｒ 1:19） (Ｃ１２Ｐ 21/02 Ｃ１２Ｒ 1:19） (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＴ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＨＵ，ＪＰ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＧ，ＭＮ，ＭＷ，ＮＬ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＫ，ＵＡ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ (72)発明者ルクマン，モハマドアメリカ合衆国 01720 マサチューセッツ，アクトン，キャリッジドライブ 13

Claims

【特許請求の範囲】１．LolｐＶの少なくとも１Ｔ細胞エピトープを含み、少なくとも７個の、但し1 00を越えないアミノ酸残基を有する、LolｐＶの単離ペプチドであって、ペプチド： LPIX-1（配列番号３）、LPIX-1.1（配列番号３）、LPIX-2（配列番号４）、LPIX -2.1（配列番号４）、LPIX-3（配列番号５）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-7（配列番号９）、LPIX-8（配列番号10）、LPIX-9（配列番号11）、LPIX-10（配列番号12）、LPIX-11（配列番号13 ）、LPIX-12（配列番号14）、LPIX-13（配列番号15）、LPIX-14（配列番号16）、LPIX-15（配列番号17）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）、L PIX-18（配列番号20）、LPIX-19（配列番号21）、LPIX-20（配列番号22）、LPIX -21（配列番号23）、LPIX-22（配列番号24）、LPIX-23（配列番号25）、LPIX-24 （配列番号26）、LPIX-26（配列番号28）およびLPIX-27（配列番号29）の図２に示されるアミノ酸配列からなる群から選ばれるアミノ酸配列を含む単離ペプチド。２．少なくとも７個の、但し100 を越えないアミノ酸残基を有し、ペプチド：LP IX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-8（配列番号10）、LPIX-9（配列番号11）、LPIX-11（配列番号13）、LPIX-12（配列番号14）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）、LPIX-19（配列番号21）、LPIX-20（配列番号22）、LPIX-23（配列番号25）、およびLPIX-26（配列番号28）の図２に示されるアミノ酸配列からなる群から選ばれるアミノ酸配列を含む請求項１記載の単離ペプチド。３．少なくとも2.0のＴ細胞刺激指数を有する請求項１の単離ペプチドの一部を含むペプチド。４．それが由来する該単離ペプチドのＴ細胞刺激指数にほぼ等しいか、またはそれより大きいＴ細胞刺激指数を有する請求項１の単離ペプチドの一部を含むペプチド。５．LolｐＶアレルゲンに感受性である個体に投与したときに、Ｔ細胞を不応答性になるよう誘導し、または該個体のＴ細胞のリンホカイン分泌特性像を変化させる請求項１の単離ペプチド。６．未変性LolｐＶが免疫グロブリンＥに結合するより実質的に少ない程度に免疫グロブリンＥに結合する請求項２の単離ペプチド。７．請求項１のペプチドを暗号化している配列を有する単離された核酸配列。８．請求項１のペプチドを暗号化している核酸配列の機能的等価体。９．請求項２のペプチドと反応するＴ細胞に対して免疫学的に交叉反応性である単離ペプチド。 10．該ペプチドが、少なくとも約3.5のＴ細胞刺激指数を有するLo1ｐＶの単離ペプチド。 11．該Ｔ細胞刺激指数が、少なくとも約５である請求項10の単離ペプチド。 12．溶解度を改良するよう修飾された請求項１のペプチド。 13．溶解度を改良するよう修飾された請求項２のペプチド。 14．LolｐＶに特異的な免疫グロブリンＥと、LolｐＶに感受性である個体の実質的な百分率では結合しないか、または、該免疫グロブリンＥのペプチドの結合が生じるならば、そのような結合が、LolｐＶに感受性である個体の実質的な百分率でのマスト細胞または好塩基球からのメジエーターの放出を招かない請求項13 の修飾されたペプチド。 15．それを投与されたLolｐＶ感受性の個体において、LolｐＶアレルゲンに対する個体のアレルギー応答を変化させる請求項12の修飾されたペプチド。 16．請求項１のペプチドに特異的に反応するモノクローナル抗体。 17．請求項７の核酸で形質転換された宿主細胞で生産された単離ペプチド。 18．請求項８の核酸で形質転換された宿主細胞で生産された単離ペプチド。 19．請求項１のペプチドを暗号化している核酸配列を含む発現ベクター。 20．請求項１のペプチドを暗号化している核酸配列の機能的等価体を含む発現ベクター。 21．請求項１の少なくとも１単離ペプチド、および製薬上許容され得る担体または希釈剤を含む組成物。 22．LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LP IX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）およびLPIX-20（配列番号22）LPI X-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-12（配列番号14）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）およびLPIX-20 （配列番号22）； LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-1 7（配列番号19）およびLPIX-20（配列番号22）； LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）およびLP IX-20（配列番号22）； LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-1 1（配列番号13）、LPIX-12（配列番号14）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）およびLPIX-20（配列番号22）； LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-8 （配列番号10）、LPIX-9（配列番号11）、LPIX-11（配列番号13）、LPIX-12（配列番号14）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）、LPIX-19（配列番号21）、LPIX-20（配列番号22）、LPIX-23（配列番号25）およびLPIX-26（配列番号28）； LPIX-4（配列番号６）、LPIX-11（配列番号13）、LPIX-16（配列番号18）および LPIX-20（配列番号22）； LPIX-4（配列番号６）、LPIX-11（配列番号13）、LPIX-17（配列番号19）および LPIX-2（配列番号22）； LPIX-4（配列番号６）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）および LPIX-20（配列番号22）； LPIX-5（配列番号７）、LPIX-11（配列番号13）、LPIX-16（配列番号18）および LPIX-20（配列番号22）； LPIX-5（配列番号７）、LPIX-11（配列番号13）、LPIX-17（配列番号19）およびLPIX-20（配列番号22）； LPIX-5（配列番号７）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）および LPIX-20（配列番号22）； LPIX-11（配列番号13）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）およびLPIX-20（配列番号22）； LPIX-4（配列番号６）、LPIX-11（配列番号13）およびLPIX-20（配列番号22）； LPIX-4（配列番号６）、LPIX-16（配列番号18）およびLPIX-20（配列番号22）； LPIX-4（配列番号６）、LPIX-17（配列番号19）およびLPIX-20（配列番号22）； LPIX-5（配列番号７）、LPIX-11（配列番号13）およびLPIX-20（配列番号22）； LPIX-5（配列番号７）、LPIX-16（配列番号18）およびLPIX-20（配列番号22）； LPIX-11（配列番号13）、LPIX-16（配列番号18）およびLPIX-20（配列番号22）； LPIX-11（配列番号13）、LPIX-17（配列番号19）およびLPIX-20（配列番号22）； LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）およびLPIX-20（配列番号22）からなる組合せの群から選ばれるペプチドの組合せを含む請求項21の組成物。 23．請求項13の少なくとも１単離ペプチド、および製薬上許容され得る担体または希釈剤を含む組成物。 24．個体のLolｐＶに対する感受性を生体外で検出する方法であって、該個体から得られた血液試料を、血液成分とペプチドとの結合に適切な条件下で、請求項１の少なくとも１ペプチドと組合せる段階、およびそのような結合が生じる度合いを、ドクムギ花粉に対する個体の感受性を示すとして決定する段階を含む検出方法。 25．結合が生じる度合いを、Ｂ細胞の機能、Ｔ細胞の機能、Ｔ細胞の増殖、またはＴ細胞の増殖とＢ細胞の機能との組合せを評価することによって決定する請求項24の方法。 26．製薬上許容され得る担体または希釈剤、および請求項１の少なくとも２ペプチドを含む組成物であって、該組成物が、LolｐＶに感受性である個体への組成物の投与に際して、該個体のＴ細胞が該LolｐＶ蛋白質アレルゲンに不応答性になるのに充分な百分率のLolｐＶ蛋白質アレルゲンのＴ細胞エピトープを含む組成物。 27．溶解度を改良するよう修飾された請求項４のペプチド。 28．請求項27の少なくとも１単離ペプチドを含む組成物。 29．製薬上許容され得る担体または希釈剤と、少なくとも１Ｔ細胞エピトープをそれぞれ含む少なくとも２ペプチドとを含む組成物であって、少なくとも１ペプチドが、LolｐＶに由来する、LPIX-1（配列番号３）、LPIX-1.1（配列番号３）、LPIX-2（配列番号４）、LPIX-2.1（配列番号４）、LPIX-3（配列番号５）、LP IX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-7（配列番号９）、LPIX-8（配列番号10）、LPIX-9（配列番号11）、LPIX-10（配列番号12）、LPIX-11（配列番号13）、LPIX-12（配列番号14）、LPIX-13（配列番号15）、LPIX-14（配列番号16）、LPIX-15（配列番号17）、LPIX-16（配列番号1 8）、LPIX-17（配列番号19）、LPIX-18（配列番号20）、LPIX-19（配列番号21）、LPIX-20（配列番号22）、LPIX-21（配列番号23）、LPIX-22（配列番号24）、L PIX-23（配列番号25）、LPIX-24（配列番号26）、LPIX-26（配列番号28）および LPIX-27（配列番号29）（図２に示したとおり）からなる群から選ばれるアミノ酸配列またはその一部を含み、かつ少なくとも１ペプチドが、LolｐＩに由来する、LPI-1（配列番号30）、LPI-1.1（配列番号31）、LPI-2（配列番号32）、LPI -3（配列番号55）、LPI-4（配列番号33）、LPI-4.1（配列番号34）、LPI-5（配列番号35）、LPI-6（配列番号36）、LPI-7（配列番号37）、LPI-8（配列番号38 ）、LPI-9（配列番号39）、LPI-10（配列番号40）、LPI-11（配列番号41）、LPI -12（配列番号42）、LPI-13（配列番号43）、LPI-14（配列番号44）、LPI-15（配列番号45）、LPI-16（配列番号46）、LPI-16.1（配列番号47）、LPI-17（配列番号48）、LPI-18（配列番号49）、LPI-19（配列番号50）、LPI-20（配列番号56 ）、LPI-21（配列番号51）、LPI-22（配列番号52）およびLPI-23（配列番号53）（図３に示したとおり）からなる群から選ばれるアミノ酸配列またはその一部を含む組成物。 30．LPI-16.1（配列番号47）、LPI-18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）、 LPI-23（配列番号53）、LPI-3（配列番号55）、LPI-4.1（配列番号34）、LPI-10 （配列番号40）、LPI-11（配列番号41）、LPI-15（配列番号45）、LPI-22（配列番号52）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-8（配列番号10）、LPIX-9（配列番号11）、LPIX-11（配列番号13）、L PIX-12（配列番号14）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）、LPIX -19（配列番号21）、LPIX-20（配列番号22）、LPIX-23（配列番号25）、LPIX-26 （配列番号28）； LPI-16.1（配列番号47）、LPI-18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）、LPI- 23（配列番号53）、LPI-3（配列番号55）、LPI-4.1（配列番号34）、LPI-10（配列番号40）、LPI-11（配列番号41）、LPI-15（配列番号45）、LPI-22（配列番号 52）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、 LPIX-8（配列番号10）、LPIX-9（配列番号11）、LPIX-11（配列番号13）、LPIX- 12（配列番号14）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）、LPIX-19 （配列番号21）、LPIX-20（配列番号22）、LPIX-23（配列番号25）、LPIX-26（配列番号28）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-9（配列番号11）、LPIX-11（配列番号13）、LPIX-12（配列番号14 ）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）、LPIX-19（配列番号21）、LPIX-20（配列番号22）； LPI-16.1（配列番号47）、LPI-18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）、LPI- 23（配列番号53）、LPI-3（配列番号55）、LPI-4.1（配列番号34）、LPI-10（配列番号40）、LPI-11（配列番号41）、LPI-15（配列番号45）、LPI-22（配列番号 52）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、 LPIX-9（配列番号11）、LPIX-12（配列番号14）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX -17（配列番号19）、LPIX-19（配列番号21）、LPIX-20（配列番号22）、LPIX-23 （配列番号25）； LPI-16.1（配列番号47）、LPI-18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）、LPI- 23（配列番号53）、LPI-3（配列番号55）、LPI-4.1（配列番号34）、LPI-10（配列番号40）、LPI-11（配列番号41）、LPI-15（配列番号45）、LPI-22（配列番号 52）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、 LPIX-12（配列番号14）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）、LPI X-19（配列番号21）、LPIX-20（配列番号22）； LPI-16.1（配列番号47）、LPI-18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）、LPI- 23（配列番号53）、LPI-3（配列番号55）、LPI-4.1（配列番号34）、LPI-10（配列番号40）、LPI-11（配列番号41）、LPI-15（配列番号45）、LPI-22（配列番号 52）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）、LPIX-19（配列番号21）、L PIX-20（配列番号22）； LPI-16.1（配列番号47）、LPI-18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）、LPI- 23（配列番号53）、LPI-3（配列番号55）、LPI-4.1（配列番号34）、LPI-10（配列番号40）、LPI-11（配列番号41）、LPI-15（配列番号45）、LPI-22（配列番号 52）； LPI-16.1（配列番号47）、LPI-18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）、LPI- 23（配列番号53）、LPI-3（配列番号55）、LPI-4.1（配列番号34）、LPI-10（配列番号40）、LPI-11（配列番号41）、LPI-15（配列番号45）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-8（配列番号10）、 LPIX-9（配列番号11）、LPIX-11（配列番号13）、LPIX-12（配列番号14）、LPIX -16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）、LPIX-19（配列番号21）、LPIX-20 （配列番号22）、LPIX-23（配列番号25）、LPIX-26（配列番号28）； LPI-16.1（配列番号47）、LPI-18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）、LPI- 23（配列番号53）、LPI-3（配列番号55）、LPI-4.1（配列番号34）、LPI-10（配列番号40）、LPI-11（配列番号41）、LPI-15（配列番号45）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-9（配列番号11）、 LPIX-11（配列番号13）、LPIX-12（配列番号14）、LPIX-16（配列番号18）、LPI X-17（配列番号19）、LPIX-19（配列番号21）、LPIX-20（配列番号22）； LPI-16.1（配列番号47）、LPI-18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）、LPI- 23（配列番号53）、LPI-3（配列番号55）、LPI-4.1（配列番号34）、LPI-10（配列番号40）、LPI-11（配列番号41）、LPI-15（配列番号45）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-9（配列番号11）、 LPIX-12（配列番号14）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）、LPI X-19（配列番号21）、LPIX-20（配列番号22）、LPIX-23（配列番号25）； LPI-16.1（配列番号47）、LPI-18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）、LPI- 23（配列番号53）、LPI-3（配列番号55）、LPI-4.1（配列番号34）、LPI-10（配列番号40）、LPI-11（配列番号41）、LPI-15（配列番号45）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-12（配列番号14）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）、LPIX-19（配列番号21）、L PIX-20（配列番号22）； LPI-16.1（配列番号47）、LPI-18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）、LPI- 23（配列番号53）、LPI-3（配列番号55）、LPI-4.1（配列番号34）、LPI-10（配列番号40）、LPI-11（配列番号41）、LPI-15（配列番号45）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-16（配列番号18 ）、LPIX-17（配列番号19）、LPIX-19（配列番号21）、LPIX-20（配列番号22）； LPI-16.1（配列番号47）、LPI-18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）、LPI- 23（配列番号53）、LPI-3（配列番号55）、LPI-4.1（配列番号34）、LPI-10（配列番号40）、LPI-11（配列番号41）、LPI-15（配列番号45）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）、LPIX-20（配列番号22）； LPI-16.1（配列番号47）、LPI-18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）、LPI- 23（配列番号53）、LPI-3（配列番号55）、LPI-4.1（配列番号34）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-8（配列番号 10）、LPIX-9（配列番号11）、LPIX-11（配列番号13）、LPIX-12（配列番号14）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）、LPIX-1 （配列番号21）、 LPIX-20（配列番号22）；LPIX-23（配列番号25）、LPIX-26（配列番号28）； LPI-16.1（配列番号47）、LPI-18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）、LPI- 23（配列番号53）、LPI-3（配列番号55）、LPI-4.1（配列番号34）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-9（配列番号 11）、LPIX-11（配列番号13）、LPIX-12（配列番号14）、LPIX-16（配列番号18 ）、LPIX-17（配列番号19）、LPIX-19（配列番号21）、LPIX-20（配列番号22）； LPI-16.1（配列番号47）、LPI-18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）、LP-2 3（配列番号53）、LPI-3（配列番号55）、LPI-4.1（配列番号34）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-9（配列番号 11）、LPIX-12（配列番号14）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19 ）、LPIX-19（配列番号21）、LPIX-20（配列番号22）、LPIX-23（配列番号25）； LPI- 16.1（配列番号47）、LPI-18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）、LPI -23（配列番号53）、LPI-3（配列番号55）、LPI-4.1（配列番号34）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８、LPIX-12（配列番号14）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）、LPIX-19（配列番号2 1）、LPIX-20（配列番号22）； LPI- 16.1（配列番号47）、LPI-18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）、LPI -23（配列番号53）、LPI-3（配列番号55）、LPI-4.1（配列番号34）、LPIX-4 （配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）、LPIX-9（配列番号21）、LPIX-20（配列番号22）； LPI- 16.1（配列番号47）、LPI-18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）、LPI -23（配列番号53）、LPI-3（配列番号55）、LPI-4.1（配列番号34）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）、LPIX-20（配列番号22）； LPI-16.1（配列番号47）、LPI-18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）、LPI- 23（配列番号53）、LPI-3（配列番号55）、LPI-4.1（配列番号34）、LPI-22（配列番号52）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-8（配列番号10）、LPIX-9（配列番号11）、LPIX-11（配列番号13）、LPIX-12（配列番号14）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）、L PIX-19（配列番号21）、LPIX-20（配列番号22）、LPIX-2（配列番号25）、LPIX- 26（配列番号28）； LPI-16.1（配列番号47）、LPI-18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）、LPI- 23（配列番号53）、LPI-3（配列番号55）、LPI-4.1（配列番号34）、LPI-22（配列番号52）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-9（配列番号11）、LPIX-11（配列番号13）、LPIX-12（配列番号14）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）、LPIX-19（配列番号21）、L PIX-20（配列番号22）； LPI-16.1（配列番号47）、LPI-18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）、LPI- 23（配列番号53）、LPI-3（配列番号55）、LPI-4.1（配列番号34）、LPI-22（配列番号52）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-9（配列番号11）、LPIX-12（配列番号14）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）、LPIX-19（配列番号21）、LPIX-20（配列番号22）、L PIX-23（配列番号25）； LPI-16.1（配列番号47）、LPI-18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）、LPI- 23（配列番号53）、LPI-3（配列番号55）、LPI-4.1（配列番号34）、LPI-22（配列番号52）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-12（配列番号14）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19 ）、LPIX-19（配列番号21）、LPIX-20（配列番号22）； LPI-16.1（配列番号47）、LPI-18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）、LPI- 23（配列番号53）、LPI-3（配列番号55）、LPI-4.1（配列番号34）、LPI-22（配列番号52）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）、LPIX-19（配列番号21）、LPIX-20（配列番号22）； LPI-16.1（配列番号47）、LPI-18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）、LPI- 23（配列番号53）、LPI-3（配列番号55）、LPI-4.1（配列番号34）、LPI-22（配列番号52）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）、LPIX-20（配列番号22 ）； LPI-16.1（配列番号47）、LPI-18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）、LPI- 23（配列番号53）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-8（配列番号10）、LPIX-9（配列番号11）、LPIX-11（配列番号13）、LPIX-12（配列番号14）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号1 9）、LPIX-19（配列番号21）、LPIX-20（配列番号22）、LPIX-23（配列番号25）、LPIX-26（配列番号28）； LPI-16.1（配列番号47）、LPI- 18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）、LPI -23（配列番号53）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-9（配列番号11）、LPIX-11（配列番号13）、LPIX-12（配列番号14）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）、LPIX-19（配列番号21）、LPIX-20（配列番号22）； LPI-16.1（配列番号47）、LPI-18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）、LPI- 23（配列番号53）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-9（配列番号11）、LPIX-12（配列番号14）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）、LPIX-19（配列番号21）、LPIX-20（配列番号2 2）、LPIX-23（配列番号25）； LPI-16.1（配列番号47）、LPI-18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）、LPI- 23（配列番号53）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-12（配列番号14）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）、LPIX-19（配列番号21）、LPIX-20（配列番号22）； LPI-16.1（配列番号47）、LPI-18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）、LPI- 23（配列番号53）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）、LPIX-19（配列番号21）、LPIX-20（配列番号22）；および LPI-16.1（配列番号47）、LPI-18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）、LPI- 23（配列番号53）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）、LPIX-20（配列番号22）からなる組合せの群から選ばれるペプチドの組合せを含む請求項29の組成物。 31．５以上かつ８以下のペプチドを含む組成物であって、３以上かつ４以下のペプチドが、LolｐＶに由来し、かつ下記のLolｐＶペプチドの群：LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-11（配列番号13）、LPIX-16（配列番号18 ）、LPIX-17（配列番号19）およびLPIX-20（配列番号22）から選ばれ、２以上かつ４以下のペプチドがLolｐＩに由来し、かつ下記のLolｐＩペプチドの群：LPI- 16（配列番号46）、LPI-18（配列番号49）、LPI-20（配列番号56）およびLPI-23 （配列番号53）から選ばれる組成物。 32．２ペプチドがLolｐＩに由来し、３ペプチドがLolｐＶに由来する請求項31の組成物。 33．３ペプチドがLolｐＩに由来し、３ペプチドがLolｐＶに由来する請求項31の組成物。 34．３ペプチドがLolｐＩに由来し、４ペプチドがLolｐＶに由来する請求項31の組成物。 35．４ペプチドがLolｐＩに由来し、４ペプチドがLolｐＶに由来する請求項31の組成物。 36．４ペプチドがLolｐＩに由来し、３ペプチドがLolｐＶに由来する請求項31の組成物。 37．LolｐＶアレルゲン、または免疫学的に交叉反応するアレルゲンに対する感受性を治療する際に用いる医薬の製造に用いられる請求項21、22、23、26、28、 29、30または31〜36の組成物。 38．LolｐＶの少なくとも１Ｔ細胞エピトープを含み、LolｐＶに感受性である個体の集団で決定される少なくとも60の陽性度指数、および少なくとも約2.5の平均Ｔ細胞剌激指数を有するLolｐＶの単離ペプチド。 39．該個体の成員数が、少なくとも15個体である請求項38の単離ペプチド。 40．LolｐＶの単離ペプチドの一部であって、LolｐＶに感受性である個体の集団で決定される少なくとも60の陽性度指数、および少なくとも約2.5の平均Ｔ細胞刺激指数を有する請求項38の単離ペプチドの一部。 41．該個体の成員数が、少なくとも15個体である請求項40の単離ペプチド。 42．該ペプチドまたはその一部が該蛋白質アレルゲンの少なくとも１Ｔ細胞エピトープを含み、かつ該ペプチドが式Ｘ_n−Ｙ−Ｚ_mを有するLolｐＶの単離ペプチドの全部または一部であって、Ｙは、LPIX-1（配列番号３）、LPIX-1.1（配列番号３）、LPIX-2（配列番号４）、LPIX-2.1（配列番号４）、LPIX-3（配列番号５）、LPIX-4（配列番号６）、LPIX-5（配列番号７）、LPIX-6（配列番号８）、LP IX-7（配列番号９）、LPIX-8（配列番号10）、LPIX-9（配列番号11）、LPIX-10 （配列番号12）、LPIX-11（配列番号13）、LPIX-12（配列番号14）、LPIX-13（配列番号15）、LPIX-14（配列番号16）、LPIX-15（配列番号17）、LPIX-16（配列番号18）、LPIX-17（配列番号19）、LPIX-18（配列番号20）、LPIX-19（配列番号21）、LPIX-20（配列番号22）、LPIX-21（配列番号23）、LPIX-22（配列番号24）、LPIX-23（配列番号25）、LPIX-24（配列番号26）、LPIX-26（配列番号2 8）、およびLPIX-27（配列番号29）からなる群から選ばれるアミノ酸配列であり、Ｘ_nは、該蛋白質アレルゲンのアミノ酸配列中のＹのアミノ末端に隣接するアミノ酸残基であり、Ｚ_mは、該蛋白質アレルゲンのアミノ酸配列中のＹのカルボキシル末端に隣接するアミノ酸残基であり、ｎは０〜30、かつｍは０〜30である単離ペプチドの全部または一部。 43．該一部が少なくとも15アミノ酸残基を含む請求項42の単離ペプチドの一部。 44．Dac ｇＩを暗号化しているヌクレオチド配列、または該ヌクレオチド配列の機能的等価体を有する単離核酸。 45．該ヌクレオチド配列が、図16のヌクレオチド配列を含む請求項44の単離核酸。 46．Dac ｇＩを暗号化しているヌクレオチド配列、または該ヌクレオチド配列の機能的等価体を含む発現ベクター。 47．請求項44の核酸によって暗号化されている蛋白質を発現するよう形質転換された宿主細胞。 48．請求項44の核酸で形質転換された宿主細胞で生産される単離DacｇＩ蛋白質。