JPH09503749A

JPH09503749A - アポトーシスおよび関連した状態の処置方法

Info

Publication number: JPH09503749A
Application number: JP7505327A
Authority: JP
Inventors: トメイ，エル．ディビッド
Original assignee: エルエックスアールバイオテクノロジーインコーポレイテッド
Priority date: 1993-07-23
Filing date: 1994-07-22
Publication date: 1997-04-15
Also published as: AU7370594A; CA2167805A1; EP0711168A1; WO1995003054A1; KR960703597A; BR9407145A; EP0711168A4

Abstract

(57)【要約】治療的に有効な量の生理的に受容可能なジオキソピペラジンを投与することによりアポトーシスを防止または遅延する方法が示される。

Description

【発明の詳細な説明】アポトーシスおよび関連した状態の処置方法発明の分野本発明は、組織および器官における急性で望ましくないアポトーシス細胞死に関連する医学的状態を処置する方法を指示する。発明の背景壊死(necrosis)およびアポトーシスという、２つの公知の細胞死のタイプがある。壊死は、周囲の組織への酵素および無傷のDNA（これは、その後ランダムなフラグメントに破壊される）の放出につながる外傷性の細胞の破壊である。壊死と異なり、アポトーシスは、個々の細胞の死および組織からの細胞の最終的な削除を決定する正常な生理学上のプロセスである。アポトーシスは、非外傷性であり、規則的であり、予測し得る細胞の破壊である。ここで、細胞は、まだ組織内にある間にその細胞膜中で萎縮し、そしてそれらのDNAは、白血球による安全な除去のためにヌクレオソーム中にパッケージされる。アポトーシス細胞死は、細胞性萎縮(cellular shrinkage)、染色質凝縮(chromatin condensation)、細胞質ブレビング(cytoplasmic blebbing)、細胞膜透過性の増大、および染色体間DNA 切断(interchromosomal DNA cleavage)によって特徴付けられる。Gerschensonら、(1992)FASEB J．6:2450-2455；およびCohenおよびDuke(1992)Ann.Rev.Immuno1 ．10:267-293。概説は、Apoptosis：The Molecular Basis of Cell Death、Tome iおよびCope編、Current Communications in Cell and Molecular Biology 3、C old Spring Harbor Laboratory Press、New York、1991；およびApoptosis II T he Molecular Basis of Apoptosis and Disease、TomeiおよびCope編、Current Communications in Cell and Molecu1ar Biology 8、Cold Spring Harbor Labor atory Press、New York、1994を参照されたい。アポトーシスは、種々の正常なおよび病原性の生物学的事象に関連し、そして多くの関連のない刺激によって誘導され得る。アポトーシスにおける生物学的調節の変化もまた、加齢の間に起こり、そして加齢に関係する多くの状態および疾患の原因である。最近のアポトーシスの研究は、細胞死につながる共通の代謝経路が、ホルモンレベルの変化、血清成長因子の欠乏、化学療法剤および電離性放射線を含む広範な種類のシグナルによって始動され得ることを、暗示した。Wyll ie（1980）Nature、284:555-556；Kanterら(1984)Biochem.Biophys.Res.Commun. 、118:392-3999;DukeおよびCohen(1986)Lymphokine Res.、5:289-299；Tomeiら、（1988）Biochem.Biophys.Res.Commun.、155:324-331;およびKrumanら(199l)J .Cell.Physiol.、148:267-273。アポトーシスの生物学的制御に影響を与える物質は、従って、広範な種類の状態に治療的有用性を有する。本明細書中に引用される全ての刊行物は、前出のものも後出のものもいずれも、参考として援用される。発明の要旨本発明は、急性の医学的状態に関連したアポトーシス細胞死を可逆的に阻害する方法を指示する。この方法は、被検体に、アポトーシス細胞死の出現を妨げるかまたは遅延させるのに十分な治療的有効量のジオキソピペラジン(dioxopipera zine)、例えば、デキスラゾキサン(dexrazoxane)、(DZR、ICRF187)を投与することを包含する。図面の簡単な説明図１は、C3H-10T1/2モデルによって測定した、ジオキソピペラジンのアポトーシスへの影響を示すグラフである。図１のＸ軸は、ビス（ジオキソピペラジン）濃度の対数で示した。結果は、表４に示しそして実施例３で検討される。発明の詳細な説明本発明は、アポトーシスの改善および防止の方法である。この方法は、被検体に、アポトーシスを妨げるかまたは遅延させるのに十分な治療的有効量のジオキソピペラジンを投与することを包含する。ジオキソピペラジンは、抗腫瘍剤(ant i-neoplastic agent)によって引き起こされる心臓性損傷(cardiac damage)を改善するために投与されるのではなく、むしろ、単独で、あるいは他の非抗腫瘍剤または薬学的に受容可能な物質と共に投与される。本明細書中の用語ジオキソピペラジンの使用は、広い範囲の任意の化合物を言う。用いられる特定のジオキソピペラジンは、特定の適応症に依存するであろう。一般に、抗アポトーシス活性を示し、かつ、実質的な毒性の副作用を持たないそれらのジオキソピペラジンは、本発明における使用に適切である。より好ましくは、ビス（ジオキソピペラジン）2,3；2,5；および2,6ビス（ジオキソピペラジン）と同様の薬理学的効果を示すそれらのジオキソピペラジンは、本発明における使用に適切である。より好ましくは、2,3；2,5；2,6ビス（ジオキソピペラジン）が本発明における使用に適切である。最も好ましくは、2,6ピペラジンジオン4,4'-(1-メチル-1,2-エタンジイル)ビス-,(S)(+)（化学式C₁₁H₁₆N₄o₄）が、本発明における使用に適切である。2,6ビス（ジオキソピペラジン）の場合、＋エナンチオマー(ICRF-187)が好ましい。米国特許第4,755,619号に記載された種々のプロドラッグもまた使用に適切である。ジオキソピペラジンは、幅広い種類の化合物を含む。これらの化合物の公知の治療的効力は、制限された臨床的使用に対するFDAの認可によって示されたように制限される。例えば、2,6ビス（ジオキソピペラジン）（デキスラゾキサン）および関連する化合物は、弱い抗腫瘍効果を有すること、および乾癬の治療において使用されてきたことが見出された。概説はWitiakおよびWei(1988)を参照されたい。ジオキソピペラジンの公知の適応症および薬学的組成物の記載に関しては、米国特許第4,275,063号；同第4,755,619号；同第4,902,714号；同第5,149,7 10号；同第3,941,790号；および英国特許第1,374,979号を参照されたい。新形成 (neoplasia)および乾癬のいずれも、制御されていない細胞増殖を含む。さらに、2,6ビス（ジオキソピペラジン）は、種々の化学療法剤の投与に関連する心筋症を改善することが見出された。例えば、Carlson（1992）Oncology、6:95-100 、104、107-1000を参照されたい。これらの化合物およびそれら公知の生理学的効果の概説は、Hermanら、（1982）Advances in Pharmacology and Chemotherap y、19:249-290；およびWitiakおよびWei（1990）Progress in Drug Research、3 5:249-363を参照されたい。ジオキソピペラジンが抗腫瘍効果を作用させる能力の変遷にも関わらず、ジオキソピペラジンは、アポトーシスの防止または遅延に効果的であることが見出された。アポトーシスは、病的な状態および種々の生物学的障害（例えば、一過性の酸素欠乏、外傷、または有害な放射線への被曝）によっても誘導され得る正常な細胞事象である。増大したアポトーシスのレベルは、心筋症、梗塞、癌退行、免疫調節、ウイルス性疾患、貧血、神経障害および神経変性疾患、下痢および赤痢、筋肉消耗(muscular wastage)、腎不全、糖尿病、脱毛、臓器移植拒絶、細胞移植不全、および前立腺退縮を含むが、それらに限定されない幅広い種類の状態に含まれる。本明細書に記載される方法はこれらの任意の適応症における使用に適切である。本明細書中で用いられるように、心筋症は、抗腫瘍剤によって誘導されるものではなく、特にアントラシクリン(anthracycline)によって誘導されるものではない。深刻なアポトーシスを引き起こすウイルス性疾患は、AIDS（後天性免疫不全症候群）である。本発明は、従って、特にAIDSの処置における使用に適切である。一般に、生理学的に受容可能で、抗アポトーシス効果を及ぼすそれらのジオキソピペラジンは、本発明における使用に適切である。ジオキソピペラジンは、それらがインビボで抗アポトーシス効果を及ぼす場合、および／または任意の抗アポトーシスアッセイにおいてポジティブである場合に、抗アポトーシス効果を及ぼすと言われる。抗アポトーシス効果のインビボでの徴候は、適切な血液灌流の減少によってもたらされた一過性虚血または血液産生毒性物質への被曝の後の心筋層、脳、および腎臓におけるアポトーシス細胞死の減少を含むが、それらに限定されない。適切なインビトロのアッセイは、本明細書中に参考として援用される同時係属中の米国特許出願番号第08/056,439号に記載されたアッセイを含むがそれに限定されない。このアッセイは、以下の実施例にさらに記載される。アポトーシスが冠状動脈閉塞による灌流損傷；脊髄／頭部外傷およびそれに伴う重度の麻痺；ならびに凍傷のような他の傷害による灌流損傷の原因であることが現在ではわかっている。ジオキソピペラジンは、これらのアポトーシス関連状態の処置に特に有用である。ジオキソピペラジンはまた、以前にはスーパーオキシドジスムターゼ(SOD)または抗酸化剤によって処置可能と考えられていた適応症の処置に適している。冠状動脈閉塞に続く虚血性細胞性損傷は、急性心筋梗塞(AMI)となり得る。AMI は、塞栓、血栓、または肉眼的領域の巣状壊死の出現に結果的につながる低血圧による酸素リッチな血液の供給の突然の不全によって一般に引き起こされる；心臓、脳、脾臓、腎臓、腸、肺、および精巣が罹患すると考えられている。最近まで、梗塞に関連した細胞死は直接的に虚血によると考えられてきた。現在では、アポトーシスは、虚血の領域の組織、および酸素リッチな血液のその領域への灌流に起こることが見出された；従って、ジオキソピペラジン剤は、急性虚血の開始時、酸素リッチな血液の灌流中、またはそのすぐ後に投与される場合に効果的である。アポトーシス細胞は、身体の他の多くの組織から除去されるのと同じくらい迅速には心臓から除去されないということも見出された。その部分的な理由は、マクロファージが、身体の他の部分で自由に動き回るほど、心筋組織内では動き回らないからである。結果として、アポトーシス細胞は心臓組織内に蓄積しそして間もなく壊死細胞のコアとなる。次いで、この二次的な壊死は迅速に炎症およびさらなる損傷となり、そして心臓は機能し続けられなくなる。心臓が生き残った場合、心臓の能力を損なう永久的な傷となる。この二次的な壊死は、現在では、心臓発作後１時間と６時間との間に起こることがわかっている。従って、ジオキソピペラジンは、この永久的な心臓機能の損傷または心臓機能の停止の防止に用いるのに適切である。従って、本発明は、心臓発作の後、および好ましくは、心臓発作後１時間と６時間との間に、治療的有効量のジオキソピペラジンを投与することを包含する。従って、本発明は、抗腫瘍剤により起こる心筋症に関連しない心臓状態の処置および改善における使用に適切である。これらの心臓状態は、心筋梗塞損傷または心臓が蘇生されるように試みがなされる場合の心肺バイパスの後のような心臓の他の急病の発生およびその後の損傷を含むが、これに限定されない。心筋梗塞の場合において、有効量のジオキソピペラジンは、急性胸痛または狭心症の襲撃にしばしば関連した冠動脈不全の最初の徴候で静脈内に投与され得る。ジオキソピペラジンはまた、梗塞の発生後に投与され得る。好ましくは、有効量のジオキソピペラジンの投与は、心臓発作の６時間以内に行う。さらに好ましくは、投与は、心臓発作の１時間以内に行う。他の適切な投与方法は、腹腔内および心臓への直接投与を含むが、これらに限定されない。ジオキソピペラジンの投与方法は、当該分野で公知であり、詳細に記載される必要がない。投与の全ての型において、治療的に有効量のジオキソピペラジンは、等張生理食塩水を含むが、これに限定されない等張で、生理学的に受容可能な滅菌液体に懸濁または溶解される。静脈内および腹腔内投与において、ジオキソピペラジンは、大静脈への注射、ポンプを介する注入、または直接的な静脈内注射を含むが、これに限定されない当該分野で公知な方法により導入される。心臓への直接的な投与は、直接的な心臓内注射を含むが、これに限定されない。このような直接的な注射のための装置は当該分野で公知である；例えば、Aboject心臓用注射器。有効な濃度のジオキソピペラジンは、用いる特定のジオキソピペラジンおよび投与方法に依存し得る。例えば、静脈内に投与する場合、ジオキソピペラジン濃度は、心臓内に投与する場合より低い。梗塞部位で有効濃度を達成するように静脈内に投与される場合、患者に投与されるジオキソピペラジンの総量は、数倍多くあり得る。種々の化学療法の心臓毒性副作用を改善するための有効濃度は、50 0mg/m²の2,6ビス(ジオキソピペラジン)である；従って、これは、好ましい投与量である。広範囲な投与量が有効であり、代表的には、この範囲は、アポトーシス効果を働かせるのに必要な濃度から副作用が起こり始める濃度までである。適切な投与量の決定は、当業者の技術の範囲内にある。ジオキソピペラジンの投与は、アポトーシスを防ぐために有効な時間の長さの間持続される。一般に、アポトーシスは、活発な正常な心筋において酸素の急激な欠乏により開始される。従って、ジオキソピペラジンの投与は、酸素欠乏時またはその直後に開始され得る。アポトーシスの開始を24〜72時間遅延することは、細胞死を付随せずに、冒された心筋の再灌流が起こり得るようにする。ジオキソピペラジンは、単独で、または毒性交差反応がない場合には他の非抗腫瘍剤、治療剤との組合せで投与され得る。例えば、心筋梗塞の処置において、ジオキソピペラジンは、組織プラスミノーゲン活性化因子(t-PA)、ウロキナーゼ、またはストレプトキナーゼと共に投与され得る。他のアポトーシスの徴候の場合では、ジオキソピペラジンは、抗炎症剤；抗酸化剤、SOD阻害剤、免疫抑制剤、および抗ウイルス剤を含むがこれらに限定されない種々の他の治療剤と共に投与され得る。以下の実施例は、本発明を示すが、これに限定されないことを意図する。実施例１細胞培養技術以下は、C3H-10T1/2クローン８のマウス胚細胞を用いて行われる抗アポトーシス薬剤スクリーニングアッセイの詳細な説明である。細胞を、好ましくはレベル11未満の、最も低い利用可能性である一連の継代レベルで得る。細胞の表現型の特徴は、以下の基準に合うことによって証明される。標準細胞培養技術を用いる。１．５％ CO₂の加湿された雰囲気中で37℃にて維持されるプラスチック培養フラスコ中で、10％(v/v)ウシ胎児血清を追加した基礎のEag1e成長培地の標準条件下での平均倍加時間が22(±２)時間であるという確認。２．クローニング能率は、標準成長条件下では200細胞/20cm²の密度で25％(± ２)であると決定した。３．飽和細胞密度は、標準成長条件下では５×10⁵(±２×10⁵)細胞/20cm²のプラスチックペトリ皿であると確認した。４．飽和細胞密度では、98％以上の細胞が、細胞周期のＧ₁期であることが確認される。５．指数関数的な増殖培養物の形態は、飽和濃度で根本的に変化し、その結果、対数増殖期の間、広範囲な重なり、および並行方向の欠損を有する紡錘状の細胞は、はっきりとした細胞間の境界がなくかつ重ならない、大きく、平らな上皮に似た単層へと変化する。６．細胞は、化学的発ガン物質、代表的には、３−メチルコラントレン、または形質転換病巣を生じる紫外線照射により、悪性形質転換に感受性である。７．細胞は、10⁵細胞のレベルで同系の動物の肩甲骨上の領域に皮下注射する場合、遷移肉腫腫瘍を形成しないが、インビトロの悪性形質転換の後では、同様の条件下で、腫瘍が観察される。次いで、細胞を、動物細胞培養のために特別に準備された代表的には直径60mm のプラスチックペトリ皿であり、かついくつかの販売元から一般に市販されている容器で培養する。反復培養のための細胞を、細胞が細胞周期のＧ₁期に抑えられていないことを確実にするために、対数増殖期にあり、かつ密集後の飽和密度でない保存培養物から得る。細胞を、標準化された細胞数を懸濁している完全成長培地を5mlの容量で各プレートに接種する。標準化された数は、10³未満でなく、10⁴細胞より多くない。その後の細胞成長の間に各培養皿で限られた領域内での不均一な細胞密度の増加および成熟前飽和密度につながる細胞の集合を妨げるように、細胞が各培養皿の表面上に一様に分布することを確実にするために特別な手入れをしなければならない。限られた領域内の成熟前の飽和密度は、アッセイの結果に深刻な間違いを生じる。成長培地は、48時間毎に更新する。細胞密度が、各皿表面で一様に約70％に達する場合、それは、代表的には、１ ×10⁵から３×10⁵細胞／皿の密度に相当し、完全成長培地を吸引により除去し、そして新鮮な無血清成長培地と交換する。アッセイされるべき薬物または物質を、無血清培地に予め混合し得るか、または培地交換直後に、適切な少量で添加し得る。代表的には、統計学上の信頼度を確実にするために、各薬剤または特別な処置を少なくとも４回繰り返し培養において行い、そして適切なコントロールもまた取り込まれる。５％CO₂の加湿された雰囲気中37℃で３時間と72時間との間、代表的には24時間のインキュベーションの標準化期間の後、各プレートを応答の測定のために調製する。以下の測定を行う：１．全ての非付着性または緩い付着性細胞を培養皿から取り出し、そして適切な技術により測定する(代表的には電気粒子測定装置(electric particle counti ng instrument)による測定)。２．残っている付着細胞を、標準化濃度の酵素トリプシンを含有するHanks Ba lanced Salt Solutionのような緩衝化(代表的にはpH7.3)平衡化塩溶液に曝す。このトリプシン濃度は、代表的には、0.1mg/mlであるが、１と0.001mg/mlとの間であり、代表的には１mlの容量中である。各培養は、ロッキングプラットフォーム上で周囲の温度または37℃のいずれかでインキュベートし、培養表面上のトリプシン試薬の一様な分布を確認する。代表的には、10分間の標準化期間の後、離れた細胞を各皿から取り出し、そして上記と同じ方法、典型的には電気粒子測定により測定する。この測定は、血清欠乏放出またはＳＤＲ数を意味し、そして代表的には少なくとも98％アポトーシス細胞を含む。次いで、各皿に残っている付着細胞を、カルシウムイオンキレート剤(代表的にはEDTA、代表的には２mg/mlの濃度)を含む緩衝化溶液に曝すことにより剥がす。この測定は、プロテイナーゼ感受性またはＰＳ数を意味し、そして有効なインヒビターの非存在下でアポトーシスによって死んだ細胞を代表的に含む。次いで、固体支持体に接着したままの最後の細胞を直ぐに分散させ、そして先の測定で用いた同じ手法、代表的には電気粒子測定による測定のために、皿から取り出す。この測定は、プロテイナーゼ耐性またはＰＲ数を意味し、そしてアポトーシスの制御に関係する重要な特異的な発現であると同定されたプロテイナーゼによって誘導される形の変化に対して耐性の特性を発現する細胞を含む。各細胞の測定を、代表的には、各実験の処理群およびコントロールについて、４つの繰り返しの皿それぞれで２回行う。最終データは、従来の統計学的なデータ分析による細胞数の平均および平均の標準偏差として最初に表される。統計学的な分析を、Daniel、Biostatistics: A Foundation in the Health Sc iences 、第２版、John WileyおよびSons(1978)に記載のように行う。得られた結果を表１に示す。太字で印刷された表１の数字は、実施例２に記載のような表２で用いる数を表す。表１では、データは、細胞／プレート×10,000として報告される。用いた略語は、以下のとおりである：ＳＤ、標準偏差；ＰＲ、プロテイナーゼ耐性細胞；およびＰＳ、プロテイナーゼ感受性。アッセイ信頼性のための初期データ分析は、３回測定のいずれもについての反復培養皿間の変動が７％標準偏差より大きくはないことを明らかにした。データは、SDR、PS、およびPRの個々の数を、コントロール皿で決定された対応値に対する比として表すように標準化され得る。好ましいポジティブ結果は、典型的には、PR細胞の統計学的に有意な増加と合わせて、SDR細胞の統計学的に有意な減少に依存する。しかし、推定のアポトーシス調整剤は、SDR細胞の減少またはPR細胞の増加のいずれかを生じ得るので、ポジティブでありさらなる考察を認めると考えられるべきである。SDRの増加または全細胞数（すなわち、SDR＋PS＋PR）の減少のいずれかを生じる物質は、適用された濃度ではおそらく細胞毒性であると考えられるべきである。ネガティブ結果は、非毒性であると決定された濃度でSDR数またはPR数のいずれかの変化を認めることができない。実施例２ウシ血清スクリーニング試験細胞培養成長培地の合成部分への添加物として用いられたウシ血清のスクリーニングの目的は、至適アッセイの遂行によって最良の製造業者（会社）の製造バッチを決定することである。アッセイのこの局面は、当業者により用いられる従来の血清スクリーニング試験のほとんどが、動物血清の種々の製造バッチが種々の参照細胞培養物の高い生存性または生存率を維持する相対的な能力の決定に主に基づくのとは直に反する。その理論的解釈に反して、アポトーシスアッセイ血清スクリーニング試験は、種々の血清製造バッチが、成長培地から回収した際にアポトーシス細胞、または死につつある細胞および死んだ細胞をもたらす相対的な能力を決定する。一例として、表１および２は、市販により得られた５つの異なるウシ血清製造バッチのスクリーニングプロセスにおいて得られた典型的なデータを示す。これらをロット１〜５として表記する。壊死細胞とアポトーシス細胞とを区別するために、細胞をTPAで処理する。測定される２つの独立変数は、TPAで処理した反復培養物と比較した未処理コントロール培養物のアポトーシス細胞の数である。これらの変数は、表１に示すように、遊離細胞またはアポトーシス数、およびプロテイナーゼ耐性またはPR細胞数である。結果を以下のようにして求めた：アポトーシスおよびPR応答を、未処理の反復培養物で得られた対応する応答の比または百分率によって表す。望ましい応答は、アポトーシス細胞数の最大減少とPR細胞数の増大とが同時に起こる。従って、次いで応答を、表２に示すように、各変数について各ロットのそれぞれの応答に従ってランクづける。表２に示す結果は、ロット番号３のアポトーシス細胞の抑制が２位であり、かつトリプシン耐性の誘導が１位であることを示す。次いで、３のこの合計を、評価した５つのロットのうち最良であると決定し、そして次いでこれを、実施例３に記載のペプチドアッセイに使用するために選択した。実施例３ジオキソピペラジン抗アポトーシスアッセイ実施例１および２に記載の方法を用いて、ジオキソピペラジン、2,6 ピペラジンジオン4,4'-(1-メチル-1,2-エタンジイル)ビス-,(S)(+)をC3H-10T1/2アッセイにおいて試験し、抗アポトーシス活性を決定した。このアッセイは、表３および４に示されるジオキソピペラジン濃度を用いて、上記のように行った。得られた結果を表３および４；および図１に示す。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号庁内整理番号ＦＩＡ６１Ｋ 31/495 ＡＤＴ 9454−4ＣＡ６１Ｋ 31/495 ＡＤＴＡＤＵ 9454−4ＣＡＤＵＡＤＹ 9454−4ＣＡＤＹＣ０７Ｄ 241/08 8615−4ＣＣ０７Ｄ 241/08 (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＨＵ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＮ，ＭＷ，ＮＬ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ

Claims

【特許請求の範囲】１．アポトーシスを遅延または防止する方法であって、アポトーシスを受ける患者に、治療的に有効で生理的に受容可能なジオキソピペラジンを、アポトーシス細胞死を防止または遅延するに十分な量で投与する工程を包含する、方法。２．前記アポトーシスが急性病理学的事象により誘導される、請求項１に記載の方法。３．前記アポトーシス事象が、心筋症、梗塞、癌退行、免疫調節、ウイルス性疾患、貧血、神経障害、神経変性疾患、下痢および赤痢、糖尿病、筋肉消耗、腎不全、腎毒性、前立腺退縮、臓器移植拒絶、および細胞移植不全からなる群から選択される、請求項２に記載の方法。４．前記ウイルス性疾患がヒト免疫不全ウイルスにより引き起こされる、請求項３に記載の方法。５．前記アポトーシス事象が心筋梗塞に関連する、請求項３に記載の方法。６．前記急性病理学的事象が一過性虚血であり、そして前記アポトーシスが心筋、脳、または腎臓で引き起こされる、請求項２に記載の方法。７．前記アポトーシスが、冠状動脈閉塞による灌流損傷、脊髄／頭部外傷およびそれに伴う重度の麻痺、ならびに他の生理的傷害による灌流損傷に関連する、請求項１に記載の方法。８．前記ジオキソピペラジンが、2,3；2,5；および2,6 ビス（ジオキソピペラジン）からなる群から選択される、請求項１に記載の方法。９．前記アポトーシス事象が急性心筋梗塞に関連し、そして前記ジオキソピペラジンが2,6ビス（ジオキソピペラジン）である、請求項１に記載の方法。１０．前記2,6ビス（ジオキソピペラジン）が2,6 ピペラジンジオン4,4'-(1- メチル-1,2-エタンジイル)ビス-，(S)(+)である、請求項９に記載の方法。１１．心筋梗塞後のアポトーシスを処置する方法であって、被検体に、治療的に有効で生理的に受容可能なジオキソピペラジンを、アポトーシス細胞死を防止または遅延するに十分な量で投与する工程を包含する、方法。１２．前記ジオキソピペラジンが、冠状動脈不全の最初の徴候で投与される、請求項１１に記載の方法。１３．前記ジオキソピペラジンが、心臓発作の少なくとも１時間後に投与される、請求項１１に記載の方法。１４．前記ジオキソピペラジンが、心臓発作後６時間以内に投与される、請求項１１に記載の方法。１５．前記ジオキソピペラジンが、2,3；2,5；および2,6 ビス（ジオキソピペラジン）からなる群から選択される、請求項１１に記載の方法。１６．前記2,6 ビス（ジオキソピペラジン）が2,6 ピペラジンジオン4,4'-(l- メチル-1,2-エタンジイル)ビス-，(S)(+)である、請求項１５に記載の方法。