JPH0940578A - 抗寄生虫剤 - Google Patents
抗寄生虫剤Info
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- JPH0940578A JPH0940578A JP7195218A JP19521895A JPH0940578A JP H0940578 A JPH0940578 A JP H0940578A JP 7195218 A JP7195218 A JP 7195218A JP 19521895 A JP19521895 A JP 19521895A JP H0940578 A JPH0940578 A JP H0940578A
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Abstract
(57)【要約】
【課題】 副作用が少なく、少量で有効な抗寄生虫剤を
提供する。 【解決手段】 配列番号１から配列番号３１のいずれか
に記載のアミノ酸配列を有するペプチド、薬学的に許容
されるこれらペプチドの誘導体、薬学的に許容されるこ
れらペプチドの塩、またはこれらの２種以上の混合物を
有効成分として含有する抗寄生虫剤。
提供する。 【解決手段】 配列番号１から配列番号３１のいずれか
に記載のアミノ酸配列を有するペプチド、薬学的に許容
されるこれらペプチドの誘導体、薬学的に許容されるこ
れらペプチドの塩、またはこれらの２種以上の混合物を
有効成分として含有する抗寄生虫剤。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】この発明は、抗寄生虫剤に関
するものである。さらに詳しくは、この発明は、ヒトお
よび家畜、ペット等の動物に寄生する蠕虫あるいは原虫
によってそれらの動物に発生する各種疾病を予防および
治療する薬剤に関するものである。なお、以下の記載に
おいて、寄生虫とは細菌、真菌、ウィルス等の微生物以
外の寄生性生物を意味し、抗菌活性という用語は、細
菌、真菌、ウィルス等の微生物を静菌または殺菌する作
用を意味する。
するものである。さらに詳しくは、この発明は、ヒトお
よび家畜、ペット等の動物に寄生する蠕虫あるいは原虫
によってそれらの動物に発生する各種疾病を予防および
治療する薬剤に関するものである。なお、以下の記載に
おいて、寄生虫とは細菌、真菌、ウィルス等の微生物以
外の寄生性生物を意味し、抗菌活性という用語は、細
菌、真菌、ウィルス等の微生物を静菌または殺菌する作
用を意味する。
【０００２】
【従来の技術】寄生虫症（原虫症、蠕虫症）は、世界的
視野より見れば、感染率も高く、特定の地域または衛生
設備の整っていない地域では、未だに多くの犠牲者を出
している。また、ウシ、ヒツジ、ブタ、ヤギ、ニワトリ
等の家畜、イヌ、ネコ等の愛玩動物も寄生虫による疾患
に罹患しやすい。寄生虫による疾患には、蛔虫、線虫、
鉤虫、蟯虫、鞭虫、線毛虫、条虫、吸虫等による蠕虫
症、またはマラリア、トキソプラズマ、ニューモシスチ
カリニ、アメーバ等による原虫症があり、それぞれの寄
生虫によって、その宿主または寄生場所には特徴があ
る。
視野より見れば、感染率も高く、特定の地域または衛生
設備の整っていない地域では、未だに多くの犠牲者を出
している。また、ウシ、ヒツジ、ブタ、ヤギ、ニワトリ
等の家畜、イヌ、ネコ等の愛玩動物も寄生虫による疾患
に罹患しやすい。寄生虫による疾患には、蛔虫、線虫、
鉤虫、蟯虫、鞭虫、線毛虫、条虫、吸虫等による蠕虫
症、またはマラリア、トキソプラズマ、ニューモシスチ
カリニ、アメーバ等による原虫症があり、それぞれの寄
生虫によって、その宿主または寄生場所には特徴があ
る。
【０００３】寄生虫が宿主にとって深刻な生命的危機を
与えないとしても、特に家畜業界等においては、動物の
飼料効率および成長速度が減少し、牛乳、羊毛等の生産
に打撃を与える等、経済的損害は甚大である。また、愛
玩動物への寄生虫の侵入は、愛玩動物と密接に関わる人
々にとって大きな問題である。現在これらの寄生虫症に
対して、パモ酸ピランテル等のピリミジン誘導体、アル
ベンダゾール、メベンダゾール等のベンツイミダゾール
誘導体、プラジカンテル等のイソキノリン誘導体、リン
酸ピペラジン、クエン酸ジメチルカルバマジン等のピペ
ラジン誘導体等の駆虫剤、メトロニダゾール等のニトロ
イミダゾール誘導体、スルファメトキサゾール・トリメ
トプリム等のピリミジン誘導体、キニーネ等のアルカロ
イド系物質、イセチオン酸ペンタミジン等のジアミジン
系物質、８−アミノキノリン等のキノリン系物質、テト
ラサイクリン等の抗生物質等の抗原虫剤が使用されてい
る（日本臨床、第５１３ページ〜第５２０ページ、１９
９１年および「１９９１年版動物用医薬品用具要覧」、
社団法人日本動物薬事協会、第２１７〜２１８ページ、
１９９１年）。しかしながら、これらの薬剤は腹痛、悪
心、下痢、嘔吐等の副作用、妊婦への使用厳禁等好まし
くない欠点を有している。
与えないとしても、特に家畜業界等においては、動物の
飼料効率および成長速度が減少し、牛乳、羊毛等の生産
に打撃を与える等、経済的損害は甚大である。また、愛
玩動物への寄生虫の侵入は、愛玩動物と密接に関わる人
々にとって大きな問題である。現在これらの寄生虫症に
対して、パモ酸ピランテル等のピリミジン誘導体、アル
ベンダゾール、メベンダゾール等のベンツイミダゾール
誘導体、プラジカンテル等のイソキノリン誘導体、リン
酸ピペラジン、クエン酸ジメチルカルバマジン等のピペ
ラジン誘導体等の駆虫剤、メトロニダゾール等のニトロ
イミダゾール誘導体、スルファメトキサゾール・トリメ
トプリム等のピリミジン誘導体、キニーネ等のアルカロ
イド系物質、イセチオン酸ペンタミジン等のジアミジン
系物質、８−アミノキノリン等のキノリン系物質、テト
ラサイクリン等の抗生物質等の抗原虫剤が使用されてい
る（日本臨床、第５１３ページ〜第５２０ページ、１９
９１年および「１９９１年版動物用医薬品用具要覧」、
社団法人日本動物薬事協会、第２１７〜２１８ページ、
１９９１年）。しかしながら、これらの薬剤は腹痛、悪
心、下痢、嘔吐等の副作用、妊婦への使用厳禁等好まし
くない欠点を有している。
【０００４】一方、ラクトフェリンは、乳汁および唾
液、涙、粘膜分泌液等のヒトを含む哺乳動物の体液に存
在する鉄結合性タンパク質であり、大腸菌、カンジタ
菌、クロストリジウム菌等の有害微生物に対して抗菌作
用を示すことが知られている［ジャーナル・オブ・ペデ
ィアトリクス(Journal of Pediatrics) 、第９４巻、第
１ページ、１９７９年］。また、ブドウ球菌および腸球
菌に対して、０．５〜３０ｍｇ／ｍｌの濃度で抗菌作用
を有することが知られている［ジャーナル・オブ・デイ
リー・サイエンス(Journal of Dairy Science)、第６７
巻、第６０６ページ、１９８４年］。
液、涙、粘膜分泌液等のヒトを含む哺乳動物の体液に存
在する鉄結合性タンパク質であり、大腸菌、カンジタ
菌、クロストリジウム菌等の有害微生物に対して抗菌作
用を示すことが知られている［ジャーナル・オブ・ペデ
ィアトリクス(Journal of Pediatrics) 、第９４巻、第
１ページ、１９７９年］。また、ブドウ球菌および腸球
菌に対して、０．５〜３０ｍｇ／ｍｌの濃度で抗菌作用
を有することが知られている［ジャーナル・オブ・デイ
リー・サイエンス(Journal of Dairy Science)、第６７
巻、第６０６ページ、１９８４年］。
【０００５】この発明の発明者らは、ラクトフェリンの
抗菌性に着目し、哺乳類のラクトフェリン、アポラクト
フェリン、または金属飽和ラクトフェリン（以下、これ
らをまとめて「ラクトフェリン類」と記載することがあ
る）を酸または酵素により加水分解した物質が、望まし
くない副作用（例えば抗原性）等がなく、しかも未分解
のラクトフェリン類よりも強い耐熱性および抗菌性を有
することを見い出し、既に特許出願を行った（特開平５
−３２００６８号公報）。
抗菌性に着目し、哺乳類のラクトフェリン、アポラクト
フェリン、または金属飽和ラクトフェリン（以下、これ
らをまとめて「ラクトフェリン類」と記載することがあ
る）を酸または酵素により加水分解した物質が、望まし
くない副作用（例えば抗原性）等がなく、しかも未分解
のラクトフェリン類よりも強い耐熱性および抗菌性を有
することを見い出し、既に特許出願を行った（特開平５
−３２００６８号公報）。
【０００６】また、この発明の発明者らは、ラクトフェ
リンの分解物から強い抗菌活性を有するペプチドを単離
し、それらのペプチドと同一のアミノ酸配列を有するペ
プチドまたはそれらのペプチドの誘導体を合成し２０個
のアミノ酸残基からなる抗菌性ペプチド（特開平５−９
２９９４号公報）、１１個のアミノ酸残基からなる抗菌
性ペプチド（特開平５−７８３９２号公報）、６個のア
ミノ酸残基からなる抗菌性ペプチド（特開平５−１４８
２９７号公報）、５個のアミノ酸残基からなる抗菌性ペ
プチド（特開平５−１４８２９６号公報）、３〜６個の
アミノ酸残基からなる抗菌性ペプチド（特開平５−１４
８２９５号公報）を、それぞれ既に特許出願した。
リンの分解物から強い抗菌活性を有するペプチドを単離
し、それらのペプチドと同一のアミノ酸配列を有するペ
プチドまたはそれらのペプチドの誘導体を合成し２０個
のアミノ酸残基からなる抗菌性ペプチド（特開平５−９
２９９４号公報）、１１個のアミノ酸残基からなる抗菌
性ペプチド（特開平５−７８３９２号公報）、６個のア
ミノ酸残基からなる抗菌性ペプチド（特開平５−１４８
２９７号公報）、５個のアミノ酸残基からなる抗菌性ペ
プチド（特開平５−１４８２９６号公報）、３〜６個の
アミノ酸残基からなる抗菌性ペプチド（特開平５−１４
８２９５号公報）を、それぞれ既に特許出願した。
【０００７】さらに、この発明の発明者らは、ラクトフ
ェリン類を酸または酵素により加水分解した物質と同一
のアミノ酸配列を有するペプチドまたはこれらペプチド
の誘導体に脳の保護作用（特願平４−３２７７３８号公
報）、ラクトフェリン加水分解物に上皮細胞増殖因子に
よる繊維芽細胞増殖を促進する作用（特開平６−４８９
５５号公報）および神経成長因子産生促進作用（特開平
５−２３５５７号公報）があることを見い出し、それぞ
れ既に特許出願した。また、ラクトフェリンがヘパリン
に結合する性質を利用して乳からラクトフェリンを分離
精製する方法（特願昭６３−２５５２９９号公報）も開
示されている。
ェリン類を酸または酵素により加水分解した物質と同一
のアミノ酸配列を有するペプチドまたはこれらペプチド
の誘導体に脳の保護作用（特願平４−３２７７３８号公
報）、ラクトフェリン加水分解物に上皮細胞増殖因子に
よる繊維芽細胞増殖を促進する作用（特開平６−４８９
５５号公報）および神経成長因子産生促進作用（特開平
５−２３５５７号公報）があることを見い出し、それぞ
れ既に特許出願した。また、ラクトフェリンがヘパリン
に結合する性質を利用して乳からラクトフェリンを分離
精製する方法（特願昭６３−２５５２９９号公報）も開
示されている。
【０００８】さらに、この発明の発明者らは、ラクトフ
ェリン類およびラクトフェリン類を酸または酵素により
加水分解した物質と同一のアミノ酸配列を有するペプチ
ドが、水生動物の寄生生物性疾患に対して予防および治
療効果を有することを見い出し既に特許出願した（特開
平７−１４５０６９号公報）。ただし、これらのラクト
フェリン類、その分解物および分解物と同一のアミノ酸
配列を有するペプチドが、ヒトおよびウシ、ヒツジ、ブ
タ、ヤギ、ニワトリ等の家畜、イヌ、ネコ等の愛玩動物
に寄生する原虫または蠕虫等による寄生虫疾患に有効で
あることは従来知られておらず、またそのような事実を
記載した刊行物も皆無である。
ェリン類およびラクトフェリン類を酸または酵素により
加水分解した物質と同一のアミノ酸配列を有するペプチ
ドが、水生動物の寄生生物性疾患に対して予防および治
療効果を有することを見い出し既に特許出願した（特開
平７−１４５０６９号公報）。ただし、これらのラクト
フェリン類、その分解物および分解物と同一のアミノ酸
配列を有するペプチドが、ヒトおよびウシ、ヒツジ、ブ
タ、ヤギ、ニワトリ等の家畜、イヌ、ネコ等の愛玩動物
に寄生する原虫または蠕虫等による寄生虫疾患に有効で
あることは従来知られておらず、またそのような事実を
記載した刊行物も皆無である。
【０００９】
【発明が解決しようとする課題】前記従来技術から明ら
かなように、副作用の少ない抗寄生虫剤が待望されてい
るが、未だ優れた物質は知られていないのが現状であっ
た。この発明は、以上のとおりの事情に鑑みてなされた
ものであり、ヒトおよび家畜、ペット等の寄生虫疾患に
対して、少量で有効な予防および治療効果を有し、かつ
副作用が少ない抗寄生虫剤を提供することを目的として
いる。
かなように、副作用の少ない抗寄生虫剤が待望されてい
るが、未だ優れた物質は知られていないのが現状であっ
た。この発明は、以上のとおりの事情に鑑みてなされた
ものであり、ヒトおよび家畜、ペット等の寄生虫疾患に
対して、少量で有効な予防および治療効果を有し、かつ
副作用が少ない抗寄生虫剤を提供することを目的として
いる。
【００１０】
【課題を解決するための手段】この発明は、前記の課題
を解決するものとして、配列番号１から配列番号３１の
いずれかに記載のアミノ酸配列を有するペプチド、薬学
的に許容されるこれらペプチドの誘導体、薬学的に許容
されるこれらペプチドの塩類（以下、これらをまとめて
「ペプチド類」と記載することがある）、またはこれら
の２種以上の混合物を有効成分として含有する抗寄生虫
剤を提供する。
を解決するものとして、配列番号１から配列番号３１の
いずれかに記載のアミノ酸配列を有するペプチド、薬学
的に許容されるこれらペプチドの誘導体、薬学的に許容
されるこれらペプチドの塩類（以下、これらをまとめて
「ペプチド類」と記載することがある）、またはこれら
の２種以上の混合物を有効成分として含有する抗寄生虫
剤を提供する。
【００１１】
【発明の実施の形態】この発明の抗寄生虫剤の有効成分
であるペプチド類をラクトフェリン類から製造する場
合、出発物質として使用するラクトフェリン類は、市販
のラクトフェリン、哺乳類（例えば、ヒト、ウシ、ヒツ
ジ、ヤギ、ウマ）の初乳、移行乳、常乳、末期乳等、ま
たはこれらの乳の処理物である脱脂乳、ホエー等から常
法（例えば、イオン交換クロマトグラフィー）により分
離したラクトフェリン、それらを塩酸、クエン酸等によ
り脱鉄したアポラクトフェリン、アポラクトフェリンを
鉄、銅、亜鉛、マンガン等の金属をキレートさせた金属
飽和または部分飽和ラクトフェリンであり、市販品また
は公知の方法により製造した調製品を使用することもで
きる。
であるペプチド類をラクトフェリン類から製造する場
合、出発物質として使用するラクトフェリン類は、市販
のラクトフェリン、哺乳類（例えば、ヒト、ウシ、ヒツ
ジ、ヤギ、ウマ）の初乳、移行乳、常乳、末期乳等、ま
たはこれらの乳の処理物である脱脂乳、ホエー等から常
法（例えば、イオン交換クロマトグラフィー）により分
離したラクトフェリン、それらを塩酸、クエン酸等によ
り脱鉄したアポラクトフェリン、アポラクトフェリンを
鉄、銅、亜鉛、マンガン等の金属をキレートさせた金属
飽和または部分飽和ラクトフェリンであり、市販品また
は公知の方法により製造した調製品を使用することもで
きる。
【００１２】この発明において使用するペプチド類は、
ラクトフェリン類の分解物から分離手段によって得られ
るペプチド、これらのペプチドと同一のアミノ酸配列、
相同なアミノ酸配列を有するペプチド、これらのペプチ
ドの誘導体、これらのペプチドの薬学的に許容される塩
類またはこれらの任意の混合物であり、公知の方法によ
り化学的に合成することもできる。これらのペプチド類
は、例えば、前記特開平５−９２９９４号公報、特開平
５−７８３９２号公報、特開平５−１４８２９７号公
報、特開平５−１４９８２９６号公報および特開平５−
１４８２９５号公報の各発明に記載された方法によって
得ることができる。
ラクトフェリン類の分解物から分離手段によって得られ
るペプチド、これらのペプチドと同一のアミノ酸配列、
相同なアミノ酸配列を有するペプチド、これらのペプチ
ドの誘導体、これらのペプチドの薬学的に許容される塩
類またはこれらの任意の混合物であり、公知の方法によ
り化学的に合成することもできる。これらのペプチド類
は、例えば、前記特開平５−９２９９４号公報、特開平
５−７８３９２号公報、特開平５−１４８２９７号公
報、特開平５−１４９８２９６号公報および特開平５−
１４８２９５号公報の各発明に記載された方法によって
得ることができる。
【００１３】前記の方法によって得られるペプチドは次
のアミノ酸配列を有するペプチド、その誘導体または塩
類を望ましい態様として例示できる。例えば、配列番号
１、２および２７のアミノ酸配列を有するペプチド、そ
の塩類またはその誘導体（特開平５−７８３９２号公
報）、配列番号３、４、５および６のアミノ酸配列を有
するペプチド、その塩類またはその誘導体（特開平５−
１４８２９７号公報）、配列番号７、８、９および３１
のアミノ酸配列を有するペプチド、その塩類またはその
誘導体（特開平５−１４８２９６号公報）、配列番号１
０から２１のアミノ酸配列を有するペプチド、その塩類
またはその誘導体（特開平５−１４８２９５号公報）、
配列番号２２から２６、２８、２９および３０のアミノ
酸配列を有するペプチド、その塩類またはその誘導体
（特開平５−９２９９４号公報）である。
のアミノ酸配列を有するペプチド、その誘導体または塩
類を望ましい態様として例示できる。例えば、配列番号
１、２および２７のアミノ酸配列を有するペプチド、そ
の塩類またはその誘導体（特開平５−７８３９２号公
報）、配列番号３、４、５および６のアミノ酸配列を有
するペプチド、その塩類またはその誘導体（特開平５−
１４８２９７号公報）、配列番号７、８、９および３１
のアミノ酸配列を有するペプチド、その塩類またはその
誘導体（特開平５−１４８２９６号公報）、配列番号１
０から２１のアミノ酸配列を有するペプチド、その塩類
またはその誘導体（特開平５−１４８２９５号公報）、
配列番号２２から２６、２８、２９および３０のアミノ
酸配列を有するペプチド、その塩類またはその誘導体
（特開平５−９２９９４号公報）である。
【００１４】前記ペプチドの薬学的に許容される塩類と
しては、塩酸塩、リン酸塩、硫酸塩、クエン酸塩、乳酸
塩、酒石酸塩等の酸付加塩を例示でき、誘導体として
は、カルボキシル基をアミド化またはアミノ基をアシル
化した誘導体を例示することができる。得られたペプチ
ド類は、試験例４に示すように毒性が極めて低く、公知
の方法により、錠剤、カプセル剤、トローチ剤、シロッ
プ剤、顆粒剤、散剤、注射剤等の薬剤として適宜使用す
ることができ、また軟膏剤、液状塗布剤、ローション
剤、エアゾール（スプレー）剤、座剤等としても使用で
きる。さらにまた、食品、飼料、飲料水等に適宜混合す
ることによっても投与可能である。
しては、塩酸塩、リン酸塩、硫酸塩、クエン酸塩、乳酸
塩、酒石酸塩等の酸付加塩を例示でき、誘導体として
は、カルボキシル基をアミド化またはアミノ基をアシル
化した誘導体を例示することができる。得られたペプチ
ド類は、試験例４に示すように毒性が極めて低く、公知
の方法により、錠剤、カプセル剤、トローチ剤、シロッ
プ剤、顆粒剤、散剤、注射剤等の薬剤として適宜使用す
ることができ、また軟膏剤、液状塗布剤、ローション
剤、エアゾール（スプレー）剤、座剤等としても使用で
きる。さらにまた、食品、飼料、飲料水等に適宜混合す
ることによっても投与可能である。
【００１５】この発明の抗寄生虫剤の有効成分であるペ
プチド類の配合量は、症状等により適宜選択できるが、
経口剤の場合体重１ｋｇ当たり少なくとも０．１ｍｇ、
望ましくは１ｍｇ以上、注射剤の場合体重１ｋｇ当たり
少なくとも０．０２ｍｇ、望ましくは０．２ｍｇ以上、
外用剤の場合１ｇ当たり０．０５〜１００ｍｇである。
プチド類の配合量は、症状等により適宜選択できるが、
経口剤の場合体重１ｋｇ当たり少なくとも０．１ｍｇ、
望ましくは１ｍｇ以上、注射剤の場合体重１ｋｇ当たり
少なくとも０．０２ｍｇ、望ましくは０．２ｍｇ以上、
外用剤の場合１ｇ当たり０．０５〜１００ｍｇである。
【００１６】次に試験例を示し、この発明の抗寄生虫剤
の有効成分であるペプチド類の効果等について詳しく説
明する。 試験例１ この試験は、ペプチド類の殺寄生虫効果を調べるために
行った。 １）試験方法 参考例１の方法により製造した配列番号２６のペプチド
を０μｇ／ｍｌ（対照）、１００μｇ／ｍｌ、１０００
μｇ／ｍｌの各濃度で含有するＤ−ＭＥＭ１％ＢＳＡ
（１％ＢＳＡを含むDulbeccoの改変最小必要培地）にト
キソプラズマ ゴンディー（Toxoplasma gondii)懸濁液
（Corrnelisen らの方法［パラサイトロジー（Parasito
logy）、第８３巻、第１０３ページ〜第１０８ページ、
１９８１年］により分離）を添加し、３７℃で、３０
分、または１時間、２時間、４時間培養を行った。培養
終了後、それぞれの培養液を１，２００×ｇ、１０分間
遠心分離して寄生虫を集め、リン酸緩衝液（ＰＢＳ）で
３回洗浄を行い、再びＤ−ＭＥＭ１％ＢＳＡに１×１０
6 個／ｍｌの寄生虫濃度で懸濁した。これらの懸濁液５
μｌに対し、等量の０．５％トリパンブルーを含有する
ＰＢＳを添加し、検鏡下トキソプラズマ ゴンディー
（Toxoplasma gondii)の生残率の計数を行った。 ２）試験結果 この試験の結果は、図１に示すとおりである。図１は、
トキソプラズマ ゴンディー（Toxoplasma gondii)の生
残率を示し、縦軸および横軸は、それぞれ寄生虫の生残
率（染色されない寄生虫の割合）および培養時間を示
し、○、●および▲は、それぞれ対照、配列番号２６の
ペプチドを１００μｇ／ｍｌ含む培養液および配列番号
２６のペプチドを１０００μｇ／ｍｌ含む培養液を示
す。
の有効成分であるペプチド類の効果等について詳しく説
明する。 試験例１ この試験は、ペプチド類の殺寄生虫効果を調べるために
行った。 １）試験方法 参考例１の方法により製造した配列番号２６のペプチド
を０μｇ／ｍｌ（対照）、１００μｇ／ｍｌ、１０００
μｇ／ｍｌの各濃度で含有するＤ−ＭＥＭ１％ＢＳＡ
（１％ＢＳＡを含むDulbeccoの改変最小必要培地）にト
キソプラズマ ゴンディー（Toxoplasma gondii)懸濁液
（Corrnelisen らの方法［パラサイトロジー（Parasito
logy）、第８３巻、第１０３ページ〜第１０８ページ、
１９８１年］により分離）を添加し、３７℃で、３０
分、または１時間、２時間、４時間培養を行った。培養
終了後、それぞれの培養液を１，２００×ｇ、１０分間
遠心分離して寄生虫を集め、リン酸緩衝液（ＰＢＳ）で
３回洗浄を行い、再びＤ−ＭＥＭ１％ＢＳＡに１×１０
6 個／ｍｌの寄生虫濃度で懸濁した。これらの懸濁液５
μｌに対し、等量の０．５％トリパンブルーを含有する
ＰＢＳを添加し、検鏡下トキソプラズマ ゴンディー
（Toxoplasma gondii)の生残率の計数を行った。 ２）試験結果 この試験の結果は、図１に示すとおりである。図１は、
トキソプラズマ ゴンディー（Toxoplasma gondii)の生
残率を示し、縦軸および横軸は、それぞれ寄生虫の生残
率（染色されない寄生虫の割合）および培養時間を示
し、○、●および▲は、それぞれ対照、配列番号２６の
ペプチドを１００μｇ／ｍｌ含む培養液および配列番号
２６のペプチドを１０００μｇ／ｍｌ含む培養液を示
す。
【００１７】図１から明らかなように、対照群では培養
４時間後まで寄生虫の生残率に変化がないのに対し、配
列番号２６のペプチドを１００μｇ／ｍｌ含む培養液中
では、１、２、および４時間後の寄生虫の生残率が、そ
れぞれ６４％、５１％、および５％であり、また配列番
号２６のペプチドを１０００μｇ／ｍｌ含む培養液中で
は、３０分後以上の寄生虫の生残率がいずれも５％以下
であった。この結果から、配列番号２６のペプチドに殺
寄生虫効果があることが認められた。なお、ペプチドの
種類を変更して試験したが、ほぼ同様な結果が得られ
た。 試験例２ この試験は、マウス胚細胞を用い、ペプチド類の寄生虫
細胞内侵入阻止効果を調べるために行った。 １）試験方法 マウス胚細胞（Omata らの方法［パラサイトロジー・リ
サーチ(ParasitologyResearch) 、第７５巻、第１８９
ページ〜第１９３ページ、１９９０年］により調製）を
Ｄ−ＭＥＭ１０％ＦＢＳ（１０％ＦＢＳを含むDulbecco
の改変最小必要培地）中で培養後、０．０２５％トリプ
シンを含むＰＢＳ中で保温し、８００×ｇ、１０分間の
遠心分離によって細胞を集め、再びＤ−ＭＥＭ１０％Ｆ
ＢＳに５×１０4 細胞／ｍｌの濃度で懸濁し、これをそ
れぞれ２００μｌずつ培養プレート（直径１５ｍｍ。松
波ガラス社製）にまき、３７℃で１昼夜培養した。この
マウス胚細胞の培養液中に、試験例１と同様の方法によ
り配列番号２６のペプチドで０時間、または１５分、３
０分、１時間、２時間、４時間処理を行ったトキソプラ
ズマ ゴンディー（Toxoplasma gondii)の培養液を０．
１ｍｌ添加し、さらに３７℃で培養を行った。この１８
時間後に、プレートをＰＢＳにて洗浄し、メタノールに
より固定化の後、ギムザ染色を行った。マウス胚細胞５
００個に対するトキソプラズマ ゴンディー（Toxoplas
ma gondii)寄生細胞の割合を計数し、感染率を求めた。 ２）試験結果 この試験の結果は、図２に示すとおりである。図２は、
トキソプラズマ ゴンディー（Toxoplasma gondii)によ
るマウス胚細胞の感染率を示し、縦軸および横軸は、そ
れぞれマウス胚細胞の感染率および寄生虫の配列番号２
６のペプチドによる処理時間を示し、○、●および▲
は、それぞれ対照、配列番号２６のペプチドを１００μ
ｇ／ｍｌ含む培養液および配列番号２６のペプチドを１
０００μｇ／ｍｌ含む培養液を示す。
４時間後まで寄生虫の生残率に変化がないのに対し、配
列番号２６のペプチドを１００μｇ／ｍｌ含む培養液中
では、１、２、および４時間後の寄生虫の生残率が、そ
れぞれ６４％、５１％、および５％であり、また配列番
号２６のペプチドを１０００μｇ／ｍｌ含む培養液中で
は、３０分後以上の寄生虫の生残率がいずれも５％以下
であった。この結果から、配列番号２６のペプチドに殺
寄生虫効果があることが認められた。なお、ペプチドの
種類を変更して試験したが、ほぼ同様な結果が得られ
た。 試験例２ この試験は、マウス胚細胞を用い、ペプチド類の寄生虫
細胞内侵入阻止効果を調べるために行った。 １）試験方法 マウス胚細胞（Omata らの方法［パラサイトロジー・リ
サーチ(ParasitologyResearch) 、第７５巻、第１８９
ページ〜第１９３ページ、１９９０年］により調製）を
Ｄ−ＭＥＭ１０％ＦＢＳ（１０％ＦＢＳを含むDulbecco
の改変最小必要培地）中で培養後、０．０２５％トリプ
シンを含むＰＢＳ中で保温し、８００×ｇ、１０分間の
遠心分離によって細胞を集め、再びＤ−ＭＥＭ１０％Ｆ
ＢＳに５×１０4 細胞／ｍｌの濃度で懸濁し、これをそ
れぞれ２００μｌずつ培養プレート（直径１５ｍｍ。松
波ガラス社製）にまき、３７℃で１昼夜培養した。この
マウス胚細胞の培養液中に、試験例１と同様の方法によ
り配列番号２６のペプチドで０時間、または１５分、３
０分、１時間、２時間、４時間処理を行ったトキソプラ
ズマ ゴンディー（Toxoplasma gondii)の培養液を０．
１ｍｌ添加し、さらに３７℃で培養を行った。この１８
時間後に、プレートをＰＢＳにて洗浄し、メタノールに
より固定化の後、ギムザ染色を行った。マウス胚細胞５
００個に対するトキソプラズマ ゴンディー（Toxoplas
ma gondii)寄生細胞の割合を計数し、感染率を求めた。 ２）試験結果 この試験の結果は、図２に示すとおりである。図２は、
トキソプラズマ ゴンディー（Toxoplasma gondii)によ
るマウス胚細胞の感染率を示し、縦軸および横軸は、そ
れぞれマウス胚細胞の感染率および寄生虫の配列番号２
６のペプチドによる処理時間を示し、○、●および▲
は、それぞれ対照、配列番号２６のペプチドを１００μ
ｇ／ｍｌ含む培養液および配列番号２６のペプチドを１
０００μｇ／ｍｌ含む培養液を示す。
【００１８】図２から明らかなように、対照群では処理
時間４時間まで寄生虫の感染率が７８％以上であるのに
対し、配列番号２６のペプチド１００μｇ／ｍｌで、１
５分、３０分、１、２、および４時間処理した後の寄生
虫による感染率は、それぞれ８０％、５８％、３５％、
２０％および８％であり、また配列番号２６のペプチド
１０００μｇ／ｍｌで、３０分、および１時間以上処理
した後の寄生虫による感染率は、それぞれ１６％、およ
び１０％以下であった。この結果から、配列番号２６の
ペプチドに、寄生虫の細胞内侵入阻止効果があることが
認められた。なお、ペプチドの種類を変更して試験した
が、ほぼ同様な結果が得られた。 試験例３ この試験は、マウスを用い、試験例２と同様にペプチド
類の寄生虫感染防止効果を調べるために行った。 １）試験方法 試験例１の試験方法と同様の方法で、トキソプラズマ
ゴンディー（Toxoplasma gondii)懸濁液を配列番号２６
のペプチド０μｇ／ｍｌ（対照）、１００μｇ／ｍｌ、
１０００μｇ／ｍｌで４時間処置した後、各群５匹のマ
ウスの腹腔に、それぞれ１００個のトキソプラズマ ゴ
ンディー（Toxoplasmagondii)を注入した。その後、３
０日間にわたりマウスの生存をモニターした。 ２）試験結果 この試験の結果は、表１に示すとおりである。表１は、
寄生虫注入後のマウスの生存数の変化を示す。
時間４時間まで寄生虫の感染率が７８％以上であるのに
対し、配列番号２６のペプチド１００μｇ／ｍｌで、１
５分、３０分、１、２、および４時間処理した後の寄生
虫による感染率は、それぞれ８０％、５８％、３５％、
２０％および８％であり、また配列番号２６のペプチド
１０００μｇ／ｍｌで、３０分、および１時間以上処理
した後の寄生虫による感染率は、それぞれ１６％、およ
び１０％以下であった。この結果から、配列番号２６の
ペプチドに、寄生虫の細胞内侵入阻止効果があることが
認められた。なお、ペプチドの種類を変更して試験した
が、ほぼ同様な結果が得られた。 試験例３ この試験は、マウスを用い、試験例２と同様にペプチド
類の寄生虫感染防止効果を調べるために行った。 １）試験方法 試験例１の試験方法と同様の方法で、トキソプラズマ
ゴンディー（Toxoplasma gondii)懸濁液を配列番号２６
のペプチド０μｇ／ｍｌ（対照）、１００μｇ／ｍｌ、
１０００μｇ／ｍｌで４時間処置した後、各群５匹のマ
ウスの腹腔に、それぞれ１００個のトキソプラズマ ゴ
ンディー（Toxoplasmagondii)を注入した。その後、３
０日間にわたりマウスの生存をモニターした。 ２）試験結果 この試験の結果は、表１に示すとおりである。表１は、
寄生虫注入後のマウスの生存数の変化を示す。
【００１９】表１から明らかなように、ペプチド無処理
の寄生虫を注入した群（対照群）では注入９日後までに
５匹全例が死亡したのに対し、配列番号２６のペプチド
１００μｇ／ｍｌ、１０００μｇ／ｍｌで４時間処置し
た寄生虫を注入した群では、注入９日後までそれぞれ全
例が生存しており、さらに１０００μｇ／ｍｌ処置群で
は、注入３０日後まで５例中４例が生存していた。この
結果から、配列番号２６のペプチドに、殺寄生虫効果が
あることが、実際の生体を用いて確認された。なお、ペ
プチドの種類を変更して試験したが、ほぼ同様な結果が
得られた。
の寄生虫を注入した群（対照群）では注入９日後までに
５匹全例が死亡したのに対し、配列番号２６のペプチド
１００μｇ／ｍｌ、１０００μｇ／ｍｌで４時間処置し
た寄生虫を注入した群では、注入９日後までそれぞれ全
例が生存しており、さらに１０００μｇ／ｍｌ処置群で
は、注入３０日後まで５例中４例が生存していた。この
結果から、配列番号２６のペプチドに、殺寄生虫効果が
あることが、実際の生体を用いて確認された。なお、ペ
プチドの種類を変更して試験したが、ほぼ同様な結果が
得られた。
【００２０】
【表１】
【００２１】試験例４ この試験は、ペプチド類の急性毒性を調べるために行っ
た。 １）試験方法 ６週齢のＣＤ（ＳＤ）系のラット（日本ＳＬＣから購
入）の両性を用い、雄および雌を無作為にそれぞれ４群
（１群５匹）に分けた。
た。 １）試験方法 ６週齢のＣＤ（ＳＤ）系のラット（日本ＳＬＣから購
入）の両性を用い、雄および雌を無作為にそれぞれ４群
（１群５匹）に分けた。
【００２２】体重１ｋｇ当り１０００または２０００ｍ
ｇの割合で参考例１と同一の方法で製造した配列番号２
６のペプチドを注射用水（大塚製薬社製）に溶解し、体
重１００ｇ当たり４ｍｌの割合で金属製玉付き針を用い
て単回強制経口投与し、急性毒性を試験した。 ２）試験結果 この試験の結果、このペプチドを１０００ｍｇ／ｋｇ体
重または２０００ｍｇ／ｋｇ体重の割合で投与した群に
死亡例は認められなかった。従って、このペプチドのＬ
Ｄ50は、２０００ｍｇ／ｋｇ体重以上であり、毒性は極
めて低いことが判明した。なお、他のペプチド類につい
ても同様の試験を行ったが、ほぼ同様な結果が得られ
た。 参考例１ 市販のウシ・ラクトフェリン（シグマ社製）５０ｍｇを
精製水０．９ｍｌに溶解し、０．１規定の塩酸でｐＨを
２．５に調整し、のち市販のブタペプシン（シグマ社
製）１ｍｇを添加し、３７℃で６時間加水分解した。次
いで０．１規定の水酸化ナトリウムでｐＨを７．０に調
整し、８０℃で１０分間加熱して酵素を失活させ、室温
に冷却し、１５，０００ｒｐｍで３０分間遠心分離し、
透明な上清を得た。この上清１００μｌをＴＳＫゲルＯ
ＤＳ−１２０Ｔ（東ソ−社製）を用いた高速液体クロマ
トグラフィーにかけ、０．８ｍｌ／分の流速で試料注入
後１０分間０．０５％ＴＦＡ（トリフルオロ酢酸）を含
む２０％アセトニトリルで溶出し、のち３０分間０．０
５％ＴＦＡを含む２０〜６０％のアセトニトリルのグラ
ジエントで溶出し、２４〜２５分の間に溶出する画分を
集め、真空乾燥した。この乾燥物を２％（Ｗ／Ｖ）の濃
度で精製水に溶解し、再度ＴＳＫゲルＯＤＳ−１２０Ｔ
（東ソー社製）を用いた高速液体クロマトグラフィーに
かけ、０．８ｍｌ／分の流速で試料注入後１０分間０．
０５％ＴＦＡを含む２４％アセトニトリルで溶出し、の
ち３０分間０．０５％ＴＦＡを含む２４〜３２％のアセ
トニトリルのグラジエントで溶出し、３３．５〜３５．
５分の間に溶出する画分を集めた。上記の操作を２５回
反復し、真空乾燥し、ペプチド約１．５ｍｇを得た。
ｇの割合で参考例１と同一の方法で製造した配列番号２
６のペプチドを注射用水（大塚製薬社製）に溶解し、体
重１００ｇ当たり４ｍｌの割合で金属製玉付き針を用い
て単回強制経口投与し、急性毒性を試験した。 ２）試験結果 この試験の結果、このペプチドを１０００ｍｇ／ｋｇ体
重または２０００ｍｇ／ｋｇ体重の割合で投与した群に
死亡例は認められなかった。従って、このペプチドのＬ
Ｄ50は、２０００ｍｇ／ｋｇ体重以上であり、毒性は極
めて低いことが判明した。なお、他のペプチド類につい
ても同様の試験を行ったが、ほぼ同様な結果が得られ
た。 参考例１ 市販のウシ・ラクトフェリン（シグマ社製）５０ｍｇを
精製水０．９ｍｌに溶解し、０．１規定の塩酸でｐＨを
２．５に調整し、のち市販のブタペプシン（シグマ社
製）１ｍｇを添加し、３７℃で６時間加水分解した。次
いで０．１規定の水酸化ナトリウムでｐＨを７．０に調
整し、８０℃で１０分間加熱して酵素を失活させ、室温
に冷却し、１５，０００ｒｐｍで３０分間遠心分離し、
透明な上清を得た。この上清１００μｌをＴＳＫゲルＯ
ＤＳ−１２０Ｔ（東ソ−社製）を用いた高速液体クロマ
トグラフィーにかけ、０．８ｍｌ／分の流速で試料注入
後１０分間０．０５％ＴＦＡ（トリフルオロ酢酸）を含
む２０％アセトニトリルで溶出し、のち３０分間０．０
５％ＴＦＡを含む２０〜６０％のアセトニトリルのグラ
ジエントで溶出し、２４〜２５分の間に溶出する画分を
集め、真空乾燥した。この乾燥物を２％（Ｗ／Ｖ）の濃
度で精製水に溶解し、再度ＴＳＫゲルＯＤＳ−１２０Ｔ
（東ソー社製）を用いた高速液体クロマトグラフィーに
かけ、０．８ｍｌ／分の流速で試料注入後１０分間０．
０５％ＴＦＡを含む２４％アセトニトリルで溶出し、の
ち３０分間０．０５％ＴＦＡを含む２４〜３２％のアセ
トニトリルのグラジエントで溶出し、３３．５〜３５．
５分の間に溶出する画分を集めた。上記の操作を２５回
反復し、真空乾燥し、ペプチド約１．５ｍｇを得た。
【００２３】上記のペプチドを６Ｎ塩酸で加水分解し、
アミノ酸分析計を用いて常法によりアミノ酸組成を分析
した。同一の試料を気相シークェンサー（アプライド・
バイオシステムズ社製）を用いて２５回のエドマン分解
を行ない、２５個のアミノ酸残基の配列を決定した。ま
たＤＴＮＢ［５，５−ジチオ−ビス（２−ニトロベンゾ
イック・アシド）］を用いたジスルフィド結合分析法
［アナリティカル・バイオケミストリー（Analytical B
iochemistry ）、第６７巻、第４９３頁、１９７５年］
によりジスルフィド結合が存在することを確認した。
アミノ酸分析計を用いて常法によりアミノ酸組成を分析
した。同一の試料を気相シークェンサー（アプライド・
バイオシステムズ社製）を用いて２５回のエドマン分解
を行ない、２５個のアミノ酸残基の配列を決定した。ま
たＤＴＮＢ［５，５−ジチオ−ビス（２−ニトロベンゾ
イック・アシド）］を用いたジスルフィド結合分析法
［アナリティカル・バイオケミストリー（Analytical B
iochemistry ）、第６７巻、第４９３頁、１９７５年］
によりジスルフィド結合が存在することを確認した。
【００２４】その結果、このペプチドは、２５個のアミ
ノ酸残基からなり、３番目と２０番目のシステイン残基
がジスルフィド結合し、３番目のシステイン残基からＮ
−末端側に２個のアミノ酸残基が、２０番目のシステイ
ン残基からＣ−末端側に５個のアミノ酸がそれぞれ結合
した、配列番号２６に記載のアミノ酸配列を有している
ことが確認された。 参考例２ ペプチド自動合成装置（ファルマシアＬＫＢバイオテク
ノロジー社製。ＬＫＢＢｉｏｌｙｎｘ４１７０）を用
い、シェパード等による固相ペプチド合成法［ジャーナ
ル・オブ・ケミカル・ソサイエティー・パーキンＩ（Jo
urnal of Chemical Society Perkin Ｉ）、第５３８
頁、１９８１年］に基づいてペプチドを次のようにして
合成した。
ノ酸残基からなり、３番目と２０番目のシステイン残基
がジスルフィド結合し、３番目のシステイン残基からＮ
−末端側に２個のアミノ酸残基が、２０番目のシステイ
ン残基からＣ−末端側に５個のアミノ酸がそれぞれ結合
した、配列番号２６に記載のアミノ酸配列を有している
ことが確認された。 参考例２ ペプチド自動合成装置（ファルマシアＬＫＢバイオテク
ノロジー社製。ＬＫＢＢｉｏｌｙｎｘ４１７０）を用
い、シェパード等による固相ペプチド合成法［ジャーナ
ル・オブ・ケミカル・ソサイエティー・パーキンＩ（Jo
urnal of Chemical Society Perkin Ｉ）、第５３８
頁、１９８１年］に基づいてペプチドを次のようにして
合成した。
【００２５】アミン官能基を９−フルオレニルメトキシ
カルボニル基で保護したアミノ酸［以下Fmoc−アミノ酸
またはFmoc−固有のアミノ酸の名称（例えば、Fmoc−ア
スパラギン）と記載することがある］に、Ｎ，Ｎ−ジシ
クロヘキシルカルボジイミドを添加して所望のアミノ酸
の無水物を生成させ、このFmoc−アミノ酸無水物を合成
に用いた。ペプチド鎖を製造するためにＣ−末端のアス
パラギン残基に相当するFmoc−アスパラギン無水物を、
そのカルボキシル基を介し、ジメチルアミノピリジンを
触媒としてウルトロシンＡ樹脂（ファルマシアＬＫＢバ
イオテクノロジー社製）に固定する。次いでこの樹脂を
ピペリジンを含むジメチルホルムアミドで洗浄し、Ｃ−
末端アミノ酸のアミン官能基の保護基を除去する。のち
アミノ酸配列のＣ−末端から２番目に相当するFmoc−ア
ルギニン無水物を前記Ｃ−末端アミノ酸残基を介して樹
脂に固定されたアルギニンの脱保護アミン官能基にカッ
プリングさせた。以下同様にして順次グルタミン、トリ
プトファン、グルタミン、およびフェニルアラニンを固
定した。全部のアミノ酸のカップリングが終了し、所望
のアミノ酸配列のペプチド鎖が形成された後、９４％Ｔ
ＦＡ、５％フェノール、および１％エタンジオールから
なる溶媒でアセトアミドメチル以外の保護基の除去およ
びペプチドの脱離を行ない、高速液体クロマトグラフイ
ーによりペプチドを精製し、この溶液を濃縮し、乾燥し
て、ペプチド粉末を得た。
カルボニル基で保護したアミノ酸［以下Fmoc−アミノ酸
またはFmoc−固有のアミノ酸の名称（例えば、Fmoc−ア
スパラギン）と記載することがある］に、Ｎ，Ｎ−ジシ
クロヘキシルカルボジイミドを添加して所望のアミノ酸
の無水物を生成させ、このFmoc−アミノ酸無水物を合成
に用いた。ペプチド鎖を製造するためにＣ−末端のアス
パラギン残基に相当するFmoc−アスパラギン無水物を、
そのカルボキシル基を介し、ジメチルアミノピリジンを
触媒としてウルトロシンＡ樹脂（ファルマシアＬＫＢバ
イオテクノロジー社製）に固定する。次いでこの樹脂を
ピペリジンを含むジメチルホルムアミドで洗浄し、Ｃ−
末端アミノ酸のアミン官能基の保護基を除去する。のち
アミノ酸配列のＣ−末端から２番目に相当するFmoc−ア
ルギニン無水物を前記Ｃ−末端アミノ酸残基を介して樹
脂に固定されたアルギニンの脱保護アミン官能基にカッ
プリングさせた。以下同様にして順次グルタミン、トリ
プトファン、グルタミン、およびフェニルアラニンを固
定した。全部のアミノ酸のカップリングが終了し、所望
のアミノ酸配列のペプチド鎖が形成された後、９４％Ｔ
ＦＡ、５％フェノール、および１％エタンジオールから
なる溶媒でアセトアミドメチル以外の保護基の除去およ
びペプチドの脱離を行ない、高速液体クロマトグラフイ
ーによりペプチドを精製し、この溶液を濃縮し、乾燥し
て、ペプチド粉末を得た。
【００２６】前記のペプチドについてアミノ酸分析計を
用いて常法によりアミノ酸組成を分析し、配列番号１０
に記載のアミノ酸配列を有することを確認した。次に実
施例を示してこの発明をさらに詳細かつ具体的に説明す
るが、この発明は以下の例に限定されるものではない。
用いて常法によりアミノ酸組成を分析し、配列番号１０
に記載のアミノ酸配列を有することを確認した。次に実
施例を示してこの発明をさらに詳細かつ具体的に説明す
るが、この発明は以下の例に限定されるものではない。
【００２７】
実施例１ １錠当たり次の配合割合の錠剤を製造した。参考例２と
同一の方法により製造した 配列番号１０のペプチド １０．０（ｍｇ） 乳糖一水和物 ３０．０ トウモロコシデンプン １９．８ 結晶セルロース ２８．０ ケイ酸マグネシウム五水和物 ２．０ ステアリン酸マグネシウム ０．２ 配列番号１０のペプチド、乳糖一水和物、トウモロコシ
デンプンおよび結晶セルロースの混合物に滅菌水を適宜
添加しながら均一に混練し、５０℃で３時間乾燥し、得
られた乾燥物にケイ酸マグネシウム五水和物およびステ
アリン酸マグネシウムを添加して混合し、常法により打
錠機で打錠した。なお、ペプチド以外の原料はいずれも
市販品を用いた。 実施例２ 注射用水（大塚製薬社製）１ｍｌに、参考例１と同一の
方法により製造した配例番号２６のペプチド粉末１０ｍ
ｇおよび塩化ナトリウム（和光純薬工業社製）９ｍｇの
割合で溶解し、水酸化ナトリウム（和光純薬工業社製）
および塩酸（和光純薬工業社製）でｐＨを約７に調整
し、濾過滅菌し、常法により１ｍｌずつアンプルに充填
し、注射用の抗寄生虫剤を製造した。 実施例３ 注射用水（大塚製薬社製）１０ｍｌに、参考例２と同一
の方法により製造した配例番号１０のペプチド粉末１ｍ
ｇおよびＤ−マンニット（和光純薬工業社製）４９．５
ｍｇの割合で溶解し、リン酸緩衝剤粉末（和光純薬工業
社製）の水溶液でｐＨを約７に調整し、濾過滅菌し、常
法により１ｍｌずつバイアル瓶に充填し、凍結乾燥し、
注射用の抗寄生虫剤を製造した。 実施例４ １００ｇ当たり次の配合割合の軟膏を常法により製造し
た。なお、ペプチド以外の原料はいずれも市販品を用い
た。
同一の方法により製造した 配列番号１０のペプチド １０．０（ｍｇ） 乳糖一水和物 ３０．０ トウモロコシデンプン １９．８ 結晶セルロース ２８．０ ケイ酸マグネシウム五水和物 ２．０ ステアリン酸マグネシウム ０．２ 配列番号１０のペプチド、乳糖一水和物、トウモロコシ
デンプンおよび結晶セルロースの混合物に滅菌水を適宜
添加しながら均一に混練し、５０℃で３時間乾燥し、得
られた乾燥物にケイ酸マグネシウム五水和物およびステ
アリン酸マグネシウムを添加して混合し、常法により打
錠機で打錠した。なお、ペプチド以外の原料はいずれも
市販品を用いた。 実施例２ 注射用水（大塚製薬社製）１ｍｌに、参考例１と同一の
方法により製造した配例番号２６のペプチド粉末１０ｍ
ｇおよび塩化ナトリウム（和光純薬工業社製）９ｍｇの
割合で溶解し、水酸化ナトリウム（和光純薬工業社製）
および塩酸（和光純薬工業社製）でｐＨを約７に調整
し、濾過滅菌し、常法により１ｍｌずつアンプルに充填
し、注射用の抗寄生虫剤を製造した。 実施例３ 注射用水（大塚製薬社製）１０ｍｌに、参考例２と同一
の方法により製造した配例番号１０のペプチド粉末１ｍ
ｇおよびＤ−マンニット（和光純薬工業社製）４９．５
ｍｇの割合で溶解し、リン酸緩衝剤粉末（和光純薬工業
社製）の水溶液でｐＨを約７に調整し、濾過滅菌し、常
法により１ｍｌずつバイアル瓶に充填し、凍結乾燥し、
注射用の抗寄生虫剤を製造した。 実施例４ １００ｇ当たり次の配合割合の軟膏を常法により製造し
た。なお、ペプチド以外の原料はいずれも市販品を用い
た。
【００２８】参考例１と同一の方法により製造した 配列番号２６のペプチド ０．１（ｇ） スクワラン １０．０ 白色ワセリン ８．０ セトステアリルアルコール ８．０ グリセリンモノステアレート ２．０ ポリオキシエチレンモノステアレート １．０ パラオキシ安息香酸メチル ０．２ パラオキシ安息香酸プロピル ０．１ １，３−ブチレングリコール ２．５ 滅菌精製水 ６８．１
【００２９】
【発明の効果】以上詳しく説明したとおり、この発明
は、ペプチド類を有効成分として含有する抗寄生虫剤に
係るものであり、この発明によって秦せられる効果は次
のとおりである。 （１）副作用が少ない。 （２）耐熱性があり、水に可溶性で、水溶液中で安定な
ため、薬剤として安定である。 （３）ペプチドは抗菌作用を有するので、製剤化に当た
り防腐剤を使用する必要がない。 （４）正常細胞に対しては細胞毒性を示さず、寄生虫に
対してのみ毒性を示す。
は、ペプチド類を有効成分として含有する抗寄生虫剤に
係るものであり、この発明によって秦せられる効果は次
のとおりである。 （１）副作用が少ない。 （２）耐熱性があり、水に可溶性で、水溶液中で安定な
ため、薬剤として安定である。 （３）ペプチドは抗菌作用を有するので、製剤化に当た
り防腐剤を使用する必要がない。 （４）正常細胞に対しては細胞毒性を示さず、寄生虫に
対してのみ毒性を示す。
【００３０】
【配列表】配列番号：１ 配列の長さ：１１ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列の特徴：このペプチド、およびこのペプチドをフラ
グメントとして含むペプチド。下記配列において、R01
はCys を除く任意のアミノ酸残基を示す。
グメントとして含むペプチド。下記配列において、R01
はCys を除く任意のアミノ酸残基を示す。
【００３１】配列： Lys R01 R01 R01 R01 Gln R01 R01 Met Lys Lys 1 5 10 配列番号：２ 配列の長さ：１１ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列の特徴：このペプチド、およびこのペプチドをフラ
グメントとして含むペプチド。下記配列において、R01
はCys を除く任意のアミノ酸残基を示す。
グメントとして含むペプチド。下記配列において、R01
はCys を除く任意のアミノ酸残基を示す。
【００３２】配列： Lys R01 R01 R01 R01 Gln R01 R01 Met Arg Lys 1 5 10 配列番号：３ 配列の長さ：６ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列の特徴：このペプチド、およびこのペプチドをフラ
グメントとして含むペプチド。下記配列において、R01
はCys を除く任意のアミノ酸残基を示す。
グメントとして含むペプチド。下記配列において、R01
はCys を除く任意のアミノ酸残基を示す。
【００３３】配列： Arg R01 R01 R01 R01 Arg 1 5 配列番号：４ 配列の長さ：６ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列の特徴：このペプチド、およびこのペプチドをフラ
グメントとして含むペプチド。下記配列において、R01
はCys を除く任意のアミノ酸残基を示す。
グメントとして含むペプチド。下記配列において、R01
はCys を除く任意のアミノ酸残基を示す。
【００３４】配列： Lys R01 R01 R01 R01 Arg 1 5 配列番号：５ 配列の長さ：６ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列の特徴：このペプチド、およびこのペプチドをフラ
グメントとして含むペプチド。下記配列において、R01
はCys を除く任意のアミノ酸残基を示す。
グメントとして含むペプチド。下記配列において、R01
はCys を除く任意のアミノ酸残基を示す。
【００３５】配列： Lys R01 R01 R01 R01 Lys 1 5 配列番号：６ 配列の長さ：６ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列の特徴：このペプチド、およびこのペプチドをフラ
グメントとして含むペプチド。下記配列において、R01
はCys を除く任意のアミノ酸残基を示す。
グメントとして含むペプチド。下記配列において、R01
はCys を除く任意のアミノ酸残基を示す。
【００３６】配列： Arg R01 R01 R01 R01 Lys 1 5 配列番号：７ 配列の長さ：５ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列の特徴：このペプチド、およびこのペプチドをフラ
グメントとして含むペプチド。下記配列において、R01
はCys を除く任意のアミノ酸残基を示す。
グメントとして含むペプチド。下記配列において、R01
はCys を除く任意のアミノ酸残基を示す。
【００３７】配列： Arg R01 R01 R01 Arg 1 5 配列番号：８ 配列の長さ：５ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列の特徴：このペプチド、およびこのペプチドをフラ
グメントとして含むペプチド。下記配列において、R01
はCys を除く任意のアミノ酸残基を示す。
グメントとして含むペプチド。下記配列において、R01
はCys を除く任意のアミノ酸残基を示す。
【００３８】配列： Lys R01 R01 R01 Arg 1 5 配列番号：９ 配列の長さ：５ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列の特徴：このペプチド、およびこのペプチドをフラ
グメントとして含むペプチド。下記配列において、R01
はCys を除く任意のアミノ酸残基を示す。
グメントとして含むペプチド。下記配列において、R01
はCys を除く任意のアミノ酸残基を示す。
【００３９】配列： Arg R01 R01 R01 Lys 1 5 配列番号：１０ 配列の長さ：６ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列の特徴：このペプチド、およびこのペプチドをフラ
グメントとして含むペプチド。
グメントとして含むペプチド。
【００４０】配列： Phe Gln Trp Gln Arg Asn 1 5 配列番号：１１ 配列の長さ：５ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列の特徴：このペプチド、およびこのペプチドをフラ
グメントとして含むペプチド。
グメントとして含むペプチド。
【００４１】配列： Phe Gln Trp Gln Arg 1 5 配列番号：１２ 配列の長さ：４ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列の特徴：このペプチド、およびこのペプチドをフラ
グメントとして含むペプチド。
グメントとして含むペプチド。
【００４２】配列： Gln Trp Gln Arg 1 配列番号：１３ 配列の長さ：３ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列の特徴：このペプチド、およびこのペプチドをフラ
グメントとして含むペプチド。
グメントとして含むペプチド。
【００４３】配列： Trp Gln Arg 1 配列番号：１４ 配列の長さ：５ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列の特徴：このペプチド、およびこのペプチドをフラ
グメントとして含むペプチド。
グメントとして含むペプチド。
【００４４】配列： Arg Arg Trp Gln Trp 1 5 配列番号：１５ 配列の長さ：４ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列の特徴：このペプチド、およびこのペプチドをフラ
グメントとして含むペプチド。
グメントとして含むペプチド。
【００４５】配列： Arg Arg Trp Gln 1 配列番号：１６ 配列の長さ：４ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列の特徴：このペプチド、およびこのペプチドをフラ
グメントとして含むペプチド。
グメントとして含むペプチド。
【００４６】配列： Trp Gln Trp Arg 1 配列番号：１７ 配列の長さ：３ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列の特徴：このペプチド、およびこのペプチドをフラ
グメントとして含むペプチド。
グメントとして含むペプチド。
【００４７】配列： Gln Trp Arg 1 配列番号：１８ 配列の長さ：６ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列の特徴：このペプチド、およびこのペプチドをフラ
グメントとして含むペプチド。
グメントとして含むペプチド。
【００４８】配列： Leu Arg Trp Gln Asn Asp 1 5 配列番号：１９ 配列の長さ：５ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列の特徴：このペプチド、およびこのペプチドをフラ
グメントとして含むペプチド。
グメントとして含むペプチド。
【００４９】配列： Leu Arg Trp Gln Asn 1 5 配列番号：２０ 配列の長さ：４ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列の特徴：このペプチド、およびこのペプチドをフラ
グメントとして含むペプチド。
グメントとして含むペプチド。
【００５０】配列： Leu Arg Trp Gln 1 配列番号：２１ 配列の長さ：３ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列の特徴：このペプチド、およびこのペプチドをフラ
グメントとして含むペプチド。
グメントとして含むペプチド。
【００５１】配列： Arg Trp Gln 1 配列番号：２２ 配列の長さ：２０ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列の特徴：このペプチド、およびこのペプチドをフラ
グメントとして含むペプチド。下記配列において、２番
の Cysと１９番の Cysがジスルフィド結合している。
グメントとして含むペプチド。下記配列において、２番
の Cysと１９番の Cysがジスルフィド結合している。
【００５２】 配列： Lys Cys Arg Arg Trp Gln Trp Arg Met Lys Lys Leu Gly Ala Pro 1 5 10 15 Ser Ile Thr Cys Val 20 配列番号：２３ 配列の長さ：２０ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列の特徴：このペプチド、およびこのペプチドをフラ
グメントとして含むペプチド。下記配列においてCys*
は、ジスルフィド結合の形成を防止するため、チオール
基を化学的に修飾したシステインを示す。
グメントとして含むペプチド。下記配列においてCys*
は、ジスルフィド結合の形成を防止するため、チオール
基を化学的に修飾したシステインを示す。
【００５３】 配列： Lys Cys* Arg Arg Trp Gln Trp Arg Met Lys Lys Leu Gly Ala Pro 1 5 10 15 Ser Ile Thr Cys* Val 20 配列番号：２４ 配列の長さ：２０ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列の特徴：このペプチド、およびこのペプチドをフラ
グメントとして含むペプチド。下記配列において、２番
の Cysと１９番の Cysがジスルフィド結合している。
グメントとして含むペプチド。下記配列において、２番
の Cysと１９番の Cysがジスルフィド結合している。
【００５４】 配列： Lys Cys Phe Gln Trp Gln Arg Asn Met Arg Lys Val Arg Gly Pro 1 5 10 15 Pro Val Ser Cys Ile 20 配列番号：２５ 配列の長さ：２０ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列の特徴：このペプチド、およびこのペプチドをフラ
グメントとして含むペプチド。下記配列においてCys*
は、ジスルフィド結合の形成を防止するため、チオール
基を化学的に修飾したシステインを示す。
グメントとして含むペプチド。下記配列においてCys*
は、ジスルフィド結合の形成を防止するため、チオール
基を化学的に修飾したシステインを示す。
【００５５】 配列： Lys Cys* Phe Gln Trp Gln Arg Asn Met Arg Lys Val Arg Gly Pro 1 5 10 15 Pro Val Ser Cys* Ile 20 配列番号：２６ 配列の長さ：２５ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列の特徴：このペプチド、およびこのペプチドをフラ
グメントとして含むペプチド。下記配列において、３番
の Cysと２０番の Cysがジスルフィド結合している。
グメントとして含むペプチド。下記配列において、３番
の Cysと２０番の Cysがジスルフィド結合している。
【００５６】 配列： Phe Lys Cys Arg Arg Trp Gln Trp Arg Met Lys Lys Leu Gly Ala 1 5 10 15 Pro Ser Ile Thr Cys Val Arg Arg Ala Phe 20 25 配列番号：２７ 配列の長さ：１１ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列の特徴：このペプチド、およびこのペプチドをフラ
グメントとして含むペプチド。
グメントとして含むペプチド。
【００５７】 配列： Lys Thr Arg Arg Trp Gln Trp Arg Met Lys Lys 1 5 10 配列番号：２８ 配列の長さ：３８ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列の特徴：このペプチド、およびこのペプチドをフラ
グメントとして含むペプチド。下記配列において、１６
番の Cysと３３番の Cysとがジスルフィド結合してい
る。
グメントとして含むペプチド。下記配列において、１６
番の Cysと３３番の Cysとがジスルフィド結合してい
る。
【００５８】 配列： Lys Asn Val Arg Trp Cys Thr Ile Ser Gln Pro Glu Trp Phe Lys 1 5 10 15 Cys Arg Arg Trp Gln Trp Arg Met Lys Lys Leu Gly Ala Pro Ser 20 25 30 Ile Thr Cys Val Arg Arg Ala Phe 35 配列番号：２９ 配列の長さ：３２ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列の特徴：このペプチド、およびこのペプチドをフラ
グメントとして含むペプチド。下記配列において、１０
番の Cysと２７番の Cysとがジスルフィド結合してい
る。
グメントとして含むペプチド。下記配列において、１０
番の Cysと２７番の Cysとがジスルフィド結合してい
る。
【００５９】 配列： Thr Ile Ser Gln Pro Glu Trp Phe Lys Cys Arg Arg Trp Gln Trp 1 5 10 15 Arg Met Lys Lys Leu Gly Ala Pro Ser Ile Thr Cys Val Arg Arg 20 25 30 Ala Phe 配列番号：３０ 配列の長さ：４７ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列の特徴：このペプチド、およびこのペプチドをフラ
グメントとして含むペプチド。下記配列において、配列
の長さ３６であって９番、２６番、及び３５番に Cysを
有するペプチドの、９番の Cysと２６番の Cysとがジス
ルフィド結合し、上記配列の長さ３６のペプチドの３５
番の Cysが、配列の長さ１１であって１０番にCysを有
するペプチドの１０番の Cysとがジスルフィド結合して
いる。
グメントとして含むペプチド。下記配列において、配列
の長さ３６であって９番、２６番、及び３５番に Cysを
有するペプチドの、９番の Cysと２６番の Cysとがジス
ルフィド結合し、上記配列の長さ３６のペプチドの３５
番の Cysが、配列の長さ１１であって１０番にCysを有
するペプチドの１０番の Cysとがジスルフィド結合して
いる。
【００６０】 配列： Val Ser Gln Pro Glu Ala Thr Lys Cys Phe Gln Trp Gln Arg Asn 1 5 10 15 Met Arg Lys Val Arg Gly Pro Pro Val Ser Cys Ile Lys Arg Asp 20 25 30 Ser Pro Ile Gln Cys Ile 35 Gly Arg Arg Arg Arg Ser Val Gln Trp Cys Ala 1 5 10 配列番号：３１ 配列の長さ：５ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列の特徴：このペプチド、およびこのペプチドをフラ
グメントとして含むペプチド。下記配列において、R01
は Cysを除く任意のアミノ酸残基を示す。
グメントとして含むペプチド。下記配列において、R01
は Cysを除く任意のアミノ酸残基を示す。
【００６１】配列： Lys R01 R01 R01 Lys 1 5
【図１】図１は、寄生虫の生残率と培養時間との関係を
示す。
示す。
【図２】図２は、トキソプラズマよるマウス胚細胞の感
染率と処理時間との関係を示す。
染率と処理時間との関係を示す。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ０７Ｋ 5/10 8517−4Ｈ Ｃ０７Ｋ 5/103 5/103 8517−4Ｈ 5/11 5/11 8517−4Ｈ 5/117 5/117 8517−4Ｈ 7/06 7/06 8517−4Ｈ 7/08 7/08 8517−4Ｈ 14/46 14/46 Ａ６１Ｋ 37/02 ＡＦＪ
Claims (1)
- 【請求項１】 配列番号１から配列番号３１のいずれか
に記載のアミノ酸配列を有するペプチド、薬学的に許容
されるこれらペプチドの誘導体、薬学的に許容されるこ
れらペプチドの塩、またはこれらの２種以上の混合物を
有効成分として含有する抗寄生虫剤。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP19521895A JP3830179B2 (ja) | 1995-07-31 | 1995-07-31 | 抗寄生虫剤 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP19521895A JP3830179B2 (ja) | 1995-07-31 | 1995-07-31 | 抗寄生虫剤 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0940578A true JPH0940578A (ja) | 1997-02-10 |
| JP3830179B2 JP3830179B2 (ja) | 2006-10-04 |
Family
ID=16337435
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP19521895A Expired - Fee Related JP3830179B2 (ja) | 1995-07-31 | 1995-07-31 | 抗寄生虫剤 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3830179B2 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7253143B1 (en) * | 1998-07-06 | 2007-08-07 | Pharmasurgics In Sweden Ab | Peptides based on the sequence of human lactoferrin and their use |
-
1995
- 1995-07-31 JP JP19521895A patent/JP3830179B2/ja not_active Expired - Fee Related
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7253143B1 (en) * | 1998-07-06 | 2007-08-07 | Pharmasurgics In Sweden Ab | Peptides based on the sequence of human lactoferrin and their use |
| US7803757B2 (en) | 1998-07-06 | 2010-09-28 | Pharmasurgics In Sweden Ab | Peptides based on the sequence of human lactoferrin and their use |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP3830179B2 (ja) | 2006-10-04 |
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