JPH09292570A - 透過型蛍光顕微鏡 - Google Patents
透過型蛍光顕微鏡Info
- Publication number
- JPH09292570A JPH09292570A JP8129003A JP12900396A JPH09292570A JP H09292570 A JPH09292570 A JP H09292570A JP 8129003 A JP8129003 A JP 8129003A JP 12900396 A JP12900396 A JP 12900396A JP H09292570 A JPH09292570 A JP H09292570A
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- JP
- Japan
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- fluorescence
- sample
- excitation light
- wavelength cut
- cut filter
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- Pending
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Abstract
(57)【要約】
【課題】コントラストの高い蛍光像を得ることができる
蛍光顕微鏡を提供する。 【解決手段】透過照明を用いる蛍光顕微鏡において、試
料６と対物レンズ９との間に励起光をカットする手段８
を介在させたことを特徴とする。
蛍光顕微鏡を提供する。 【解決手段】透過照明を用いる蛍光顕微鏡において、試
料６と対物レンズ９との間に励起光をカットする手段８
を介在させたことを特徴とする。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は蛍光顕微鏡に関し、
特に透過型の蛍光顕微鏡に関する。
特に透過型の蛍光顕微鏡に関する。
【０００２】
【発明が解決しようとする課題】試料に励起光を照射
し、試料から発生する励起光よりも長い波長の蛍光を観
察することにより、試料の特性を調べる蛍光顕微鏡が広
く用いられてきている。蛍光顕微鏡には、励起光の照射
の仕方によって、コンデンサーレンズを用いる透過型
と、対物レンズ自体を照明系として兼用する落射型があ
る。現在蛍光顕微鏡は落射型が主流であるが、どちらの
タイプにおいても、試料から発する長波長の蛍光のみの
像を結像させることが望ましい。しかしながら装置を構
成する光学部材（ガラス材料、接着剤等）にも、程度の
差があるにしても、励起光を照射すると蛍光を発する性
質がある。したがってこれらの光学部材から生ずる自発
蛍光が、試料からの蛍光像にノイズとしてのり、コント
ラストを低下させ、結像性能を悪化させる。
し、試料から発生する励起光よりも長い波長の蛍光を観
察することにより、試料の特性を調べる蛍光顕微鏡が広
く用いられてきている。蛍光顕微鏡には、励起光の照射
の仕方によって、コンデンサーレンズを用いる透過型
と、対物レンズ自体を照明系として兼用する落射型があ
る。現在蛍光顕微鏡は落射型が主流であるが、どちらの
タイプにおいても、試料から発する長波長の蛍光のみの
像を結像させることが望ましい。しかしながら装置を構
成する光学部材（ガラス材料、接着剤等）にも、程度の
差があるにしても、励起光を照射すると蛍光を発する性
質がある。したがってこれらの光学部材から生ずる自発
蛍光が、試料からの蛍光像にノイズとしてのり、コント
ラストを低下させ、結像性能を悪化させる。
【０００３】自発蛍光の低減のため、本発明者は、自発
蛍光の少ないガラス材料や接着剤を選択して使用し、限
られた条件の下で設計をしている。しかしながら特にガ
ラス材料の制限は、光学収差補正の設計自由度を減少さ
せ、設計自由度を確保するためには、レンズの構成枚数
を増やす傾向になり、コストアップにつながる問題を有
している。したがって本発明は、簡易な手段にてコント
ラストの高い蛍光像を得ることができる蛍光顕微鏡を提
供することを課題とする。
蛍光の少ないガラス材料や接着剤を選択して使用し、限
られた条件の下で設計をしている。しかしながら特にガ
ラス材料の制限は、光学収差補正の設計自由度を減少さ
せ、設計自由度を確保するためには、レンズの構成枚数
を増やす傾向になり、コストアップにつながる問題を有
している。したがって本発明は、簡易な手段にてコント
ラストの高い蛍光像を得ることができる蛍光顕微鏡を提
供することを課題とする。
【０００４】
【課題を解決するための手段】光学部材から生ずる自発
蛍光を低減するには、試料のみに励起光を照射すれば良
く、また試料からの蛍光のみを対物レンズに入射させれ
ば良い。したがって自発蛍光によるフレアーに関して
は、対物レンズを結像系としてのみ使用する透過型の方
が、落射型よりも有利である。本発明はこのような考察
のもとになされたものであり、すなわち、透過照明を用
いる蛍光顕微鏡において、試料と対物レンズとの間に励
起光をカットする手段を介在させたことを特徴とする透
過型蛍光顕微鏡である。
蛍光を低減するには、試料のみに励起光を照射すれば良
く、また試料からの蛍光のみを対物レンズに入射させれ
ば良い。したがって自発蛍光によるフレアーに関して
は、対物レンズを結像系としてのみ使用する透過型の方
が、落射型よりも有利である。本発明はこのような考察
のもとになされたものであり、すなわち、透過照明を用
いる蛍光顕微鏡において、試料と対物レンズとの間に励
起光をカットする手段を介在させたことを特徴とする透
過型蛍光顕微鏡である。
【０００５】
【発明の実施の形態】本発明の実施の形態を図面によっ
て説明する。図１は本発明の第１実施例を示し、光源１
からの励起光は、コレクタレンズ２とコンデンサーレン
ズ３とを透過し、長波長カットフィルター４を透過した
後、スライドガラス５上に載せられた試料６に至る。試
料６は励起光を受けて蛍光を発する。試料６にはカバー
ガラス７がかぶせられており、試料６から発した蛍光は
このカバーガラス７を透過し、短波長カットフィルター
８を透過し、対物レンズ９によって蛍光像１０として結
像する。
て説明する。図１は本発明の第１実施例を示し、光源１
からの励起光は、コレクタレンズ２とコンデンサーレン
ズ３とを透過し、長波長カットフィルター４を透過した
後、スライドガラス５上に載せられた試料６に至る。試
料６は励起光を受けて蛍光を発する。試料６にはカバー
ガラス７がかぶせられており、試料６から発した蛍光は
このカバーガラス７を透過し、短波長カットフィルター
８を透過し、対物レンズ９によって蛍光像１０として結
像する。
【０００６】長波長カットフィルター４と短波長カット
フィルター８は、共に平行平面板に蒸着膜を塗布して形
成されている。試料６などで発する蛍光は、励起光より
も波長が長いが、長波長カットフィルター４は、図２に
示すように、励起光は透過し蛍光はカットする特性に形
成されている。また短波長カットフィルター８は、図３
に示すように、励起光はカットし蛍光は透過する特性に
形成されている。
フィルター８は、共に平行平面板に蒸着膜を塗布して形
成されている。試料６などで発する蛍光は、励起光より
も波長が長いが、長波長カットフィルター４は、図２に
示すように、励起光は透過し蛍光はカットする特性に形
成されている。また短波長カットフィルター８は、図３
に示すように、励起光はカットし蛍光は透過する特性に
形成されている。
【０００７】本実施例は以上のように構成されており、
光源１からの励起光は、コレクタレンズ２とコンデンサ
ーレンズ３とを透過するから、これらのレンズ２，３に
よって自発蛍光が生じるが、この自発蛍光は長波長カッ
トフィルター４によってカットされるから、蛍光像１０
に重畳することがない。他方、励起光はカバーガラス７
までは到達するが、それ以降は短波長カットフィルター
８によってカットされる。すなわち励起光は対物レンズ
９には入射せず、対物レンズ９による自発蛍光は生じな
い。
光源１からの励起光は、コレクタレンズ２とコンデンサ
ーレンズ３とを透過するから、これらのレンズ２，３に
よって自発蛍光が生じるが、この自発蛍光は長波長カッ
トフィルター４によってカットされるから、蛍光像１０
に重畳することがない。他方、励起光はカバーガラス７
までは到達するが、それ以降は短波長カットフィルター
８によってカットされる。すなわち励起光は対物レンズ
９には入射せず、対物レンズ９による自発蛍光は生じな
い。
【０００８】以上のように本実施例によれば、試料の蛍
光像１０に重畳するのは、スライドガラス５とカバーガ
ラス７内での自発蛍光だけとなるから、コントラストの
高い蛍光像１０を得ることができる。またコレクタレン
ズ２とコンデンサーレンズ３とによる自発蛍光は蛍光像
１０には重畳せず、且つ対物レンズ９による自発蛍光は
生じないから、コレクタレンズ２、コンデンサーレンズ
３及び対物レンズ９の設計の自由度が高くなる。すなわ
ち低自発蛍光のガラス材料を用いる必要がなくなり、通
常のガラス材料で設計することができるから、安価で高
コントラストの蛍光像を得ることができる。
光像１０に重畳するのは、スライドガラス５とカバーガ
ラス７内での自発蛍光だけとなるから、コントラストの
高い蛍光像１０を得ることができる。またコレクタレン
ズ２とコンデンサーレンズ３とによる自発蛍光は蛍光像
１０には重畳せず、且つ対物レンズ９による自発蛍光は
生じないから、コレクタレンズ２、コンデンサーレンズ
３及び対物レンズ９の設計の自由度が高くなる。すなわ
ち低自発蛍光のガラス材料を用いる必要がなくなり、通
常のガラス材料で設計することができるから、安価で高
コントラストの蛍光像を得ることができる。
【０００９】なお長波長カットフィルター４内での自発
蛍光が蛍光像１０に重畳するのを避け、あるいは短波長
カットフィルター８内での自発蛍光の発生を避けるため
に、いずれのフィルター４，８の蒸着膜も、試料６側の
面に設けることが好ましい。またフレア光が主にコレク
タレンズ２又はコンデンサーレンズ３のみで生じるとき
には、長波長カットフィルター４だけを設ければ良く、
同様にフレア光が主に対物レンズ９のみで生じるときに
は、短波長カットフィルター８だけを設ければ良い。ま
た短波長カットフィルター８は、光学収差補正上、出来
るだけ薄い平行平面板であることが好ましい。
蛍光が蛍光像１０に重畳するのを避け、あるいは短波長
カットフィルター８内での自発蛍光の発生を避けるため
に、いずれのフィルター４，８の蒸着膜も、試料６側の
面に設けることが好ましい。またフレア光が主にコレク
タレンズ２又はコンデンサーレンズ３のみで生じるとき
には、長波長カットフィルター４だけを設ければ良く、
同様にフレア光が主に対物レンズ９のみで生じるときに
は、短波長カットフィルター８だけを設ければ良い。ま
た短波長カットフィルター８は、光学収差補正上、出来
るだけ薄い平行平面板であることが好ましい。
【００１０】次に図４は第２実施例を示し、この実施例
では長波長カットフィルター４と短波長カットフィルタ
ー８を削除し、代わりにスライドガラスの表面に蒸着膜
を形成した長波長カットスライドガラス５ａと、カバー
ガラスの表面に蒸着膜を形成した短波長カットカバーガ
ラス７を用いたものである。このように構成すれば、従
来の対物レンズがそのまま使用できて有利である。長波
長カットスライドガラス５ａ内での自発蛍光が蛍光像１
０に重畳するのを避け、あるいは短波長カットカバーガ
ラス７ａ内での自発蛍光の発生を避けるために、いずれ
のガラス５ａ，７ａの蒸着膜も、試料６側の面に設ける
ことが好ましい。
では長波長カットフィルター４と短波長カットフィルタ
ー８を削除し、代わりにスライドガラスの表面に蒸着膜
を形成した長波長カットスライドガラス５ａと、カバー
ガラスの表面に蒸着膜を形成した短波長カットカバーガ
ラス７を用いたものである。このように構成すれば、従
来の対物レンズがそのまま使用できて有利である。長波
長カットスライドガラス５ａ内での自発蛍光が蛍光像１
０に重畳するのを避け、あるいは短波長カットカバーガ
ラス７ａ内での自発蛍光の発生を避けるために、いずれ
のガラス５ａ，７ａの蒸着膜も、試料６側の面に設ける
ことが好ましい。
【００１１】次に、試料６の種類により、使用する励起
光の波長は３６０ｎｍ、４００ｎｍ、４４０ｎｍ等種々
ある。したがって図５及び図６に示すように、長波長カ
ットフィルター４と短波長カットフィルター８の光透過
率特性を、複数種類の励起光とそれらによる蛍光とを弁
別できるように形成すれば、同一のフィルター４，８を
異なる試料に共用することができて好ましい。なお複数
種類の励起光とそれらによる蛍光とを弁別できないとき
には、フィルター４，８を交換すれば良い。
光の波長は３６０ｎｍ、４００ｎｍ、４４０ｎｍ等種々
ある。したがって図５及び図６に示すように、長波長カ
ットフィルター４と短波長カットフィルター８の光透過
率特性を、複数種類の励起光とそれらによる蛍光とを弁
別できるように形成すれば、同一のフィルター４，８を
異なる試料に共用することができて好ましい。なお複数
種類の励起光とそれらによる蛍光とを弁別できないとき
には、フィルター４，８を交換すれば良い。
【００１２】
【発明の効果】以上のように本発明によれば、従来と同
じ設計自由度を有しかつ安価で、対物レンズや照明光学
系から発生する自発蛍光に起因するフレアーを除去する
ことができて、コントラストの良い蛍光像を得ることが
できる。
じ設計自由度を有しかつ安価で、対物レンズや照明光学
系から発生する自発蛍光に起因するフレアーを除去する
ことができて、コントラストの良い蛍光像を得ることが
できる。
【図１】本発明の第１実施例を示す構成図
【図２】長波長カットフィルターの光透過率特性の一例
を示す図
を示す図
【図３】短波長カットフィルターの光透過率特性の一例
を示す図
を示す図
【図４】第２実施例を示す構成図
【図５】長波長カットフィルターを複数の励起光につい
て共用するときの光透過率特性の一例を示す図
て共用するときの光透過率特性の一例を示す図
【図６】短波長カットフィルターを複数の励起光につい
て共用するときの光透過率特性の一例を示す図
て共用するときの光透過率特性の一例を示す図
１…光源 ２…コレクタレンズ ３…コンデンサーレンズ ４…長波長カットフ
ィルター ５…スライドガラス ５ａ…長波長カット
スライドガラス ６…試料 ７…カバーガラス ７ａ…短波長カットカバーガラス ８…短波長カットフ
ィルター ９…対物レンズ １０…蛍光像
ィルター ５…スライドガラス ５ａ…長波長カット
スライドガラス ６…試料 ７…カバーガラス ７ａ…短波長カットカバーガラス ８…短波長カットフ
ィルター ９…対物レンズ １０…蛍光像
Claims (3)
- 【請求項１】透過照明を用いる蛍光顕微鏡において、試
料と対物レンズとの間に励起光をカットする手段を介在
させたことを特徴とする透過型蛍光顕微鏡。 - 【請求項２】試料に載せるカバーガラスと前記対物レン
ズとの間に平行平面板を配置し、この平行平面板に、前
記励起光をカットする蒸着膜を形成した、請求項１記載
の透過型蛍光顕微鏡。 - 【請求項３】試料に載せるカバーガラスに、前記励起光
をカットする蒸着膜を形成した、請求項１記載の透過型
蛍光顕微鏡。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP8129003A JPH09292570A (ja) | 1996-04-24 | 1996-04-24 | 透過型蛍光顕微鏡 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP8129003A JPH09292570A (ja) | 1996-04-24 | 1996-04-24 | 透過型蛍光顕微鏡 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH09292570A true JPH09292570A (ja) | 1997-11-11 |
Family
ID=14998753
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP8129003A Pending JPH09292570A (ja) | 1996-04-24 | 1996-04-24 | 透過型蛍光顕微鏡 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH09292570A (ja) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH11218690A (ja) * | 1998-02-04 | 1999-08-10 | Olympus Optical Co Ltd | 落射蛍光照明光学系を備えた顕微鏡 |
| WO2007058205A1 (ja) * | 2005-11-16 | 2007-05-24 | Nippon Sheet Glass Company, Limited | ガラス組成物およびガラス基板 |
| CN108279492A (zh) * | 2018-03-23 | 2018-07-13 | 广西民族大学 | 一种简易荧光显微镜 |
| US10649186B2 (en) | 2015-08-28 | 2020-05-12 | Helsingin Yliopisto | Mobile microscope |
-
1996
- 1996-04-24 JP JP8129003A patent/JPH09292570A/ja active Pending
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH11218690A (ja) * | 1998-02-04 | 1999-08-10 | Olympus Optical Co Ltd | 落射蛍光照明光学系を備えた顕微鏡 |
| US6040940A (en) * | 1998-02-04 | 2000-03-21 | Olympus Optical Co., Ltd. | Reflecting fluorescence microscope |
| WO2007058205A1 (ja) * | 2005-11-16 | 2007-05-24 | Nippon Sheet Glass Company, Limited | ガラス組成物およびガラス基板 |
| JP2007137705A (ja) * | 2005-11-16 | 2007-06-07 | Nippon Sheet Glass Co Ltd | ガラス組成物 |
| US10649186B2 (en) | 2015-08-28 | 2020-05-12 | Helsingin Yliopisto | Mobile microscope |
| CN108279492A (zh) * | 2018-03-23 | 2018-07-13 | 广西民族大学 | 一种简易荧光显微镜 |
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