JPH09278658A - 新規ｉｆｎ インデューサー - Google Patents
新規ｉｆｎ インデューサーInfo
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- JPH09278658A JPH09278658A JP8112098A JP11209896A JPH09278658A JP H09278658 A JPH09278658 A JP H09278658A JP 8112098 A JP8112098 A JP 8112098A JP 11209896 A JP11209896 A JP 11209896A JP H09278658 A JPH09278658 A JP H09278658A
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- ifn
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Abstract
(57)【要約】
【課題】 本発明の課題は、新規なＩＦＮインデューサ
ーを見出すことにある。 【解決手段】 本発明によって、Ｍ１３ファージに由来
する一本鎖ＤＮＡがＩＦＮインデューサーとして格別に
有効であることが見出だされた。Ｍ１３ ファージに由
来する一本鎖ＤＮＡ（Ｍ１３ ＤＮＡ）を、投与した後
の４時間以内に、血清インターフェロン（ＩＦＮ、主と
してβ型）力価は、検出できないレベルから約７００Ｉ
Ｕ／ｍｌほどの多量にまで増加し、さらに投与した後の
１２時間の長時間にわたり、ＩＦＮが検出された。ま
た、Ｍ１３ ＤＮＡを脾臓培地に添加した場合に、検出
できないレベルから１０５０ＩＵ／ｍｌほどの多量のＩ
ＮＦの誘発がインビトロで検出された（図１参照）。従
って、Ｍ１３ＤＮＡは強力なＩＦＮインデューサーであ
ることが証明された。
ーを見出すことにある。 【解決手段】 本発明によって、Ｍ１３ファージに由来
する一本鎖ＤＮＡがＩＦＮインデューサーとして格別に
有効であることが見出だされた。Ｍ１３ ファージに由
来する一本鎖ＤＮＡ（Ｍ１３ ＤＮＡ）を、投与した後
の４時間以内に、血清インターフェロン（ＩＦＮ、主と
してβ型）力価は、検出できないレベルから約７００Ｉ
Ｕ／ｍｌほどの多量にまで増加し、さらに投与した後の
１２時間の長時間にわたり、ＩＦＮが検出された。ま
た、Ｍ１３ ＤＮＡを脾臓培地に添加した場合に、検出
できないレベルから１０５０ＩＵ／ｍｌほどの多量のＩ
ＮＦの誘発がインビトロで検出された（図１参照）。従
って、Ｍ１３ＤＮＡは強力なＩＦＮインデューサーであ
ることが証明された。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】 本発明は、新規なＩＦＮインデ
ューサーに関するものである。
ューサーに関するものである。
【０００２】
【背景技術】異種二重鎖ＲＮＡ（バンクス[Banks]ら，N
ature (1968) 218, 542〜545及びヒルマン[Hilleman]Ar
ch. Intern. Med.126, 109〜124(1970)など参照）また
は一重鎖ＲＮＡ（バロン[Baron] Proc. Natl. Acad. Sc
i. USA 64, 67〜74)及び；ダイアンザニ[Dianzani]らPr
oc. Soc. Exp. Biol. Med. 145, (1974) 428〜433など
参照）あるいは二重鎖ＤＮＡ（ホルステイン［Holstei
n］ら、Acta Virol. 15, 381〜386 (1971) 参照）が、
ほとんどそのインターフェロン（ＩＦＮ）誘発によって
インビトロまたはインビボで抗ウイルス活性を有するこ
とは公知である。天然核酸の抗ウイルス作用に基づい
て、合成二重鎖ＲＮＡ、例えばポリリボイノシン酸、ポ
リリボシチジル酸（ｐｏｌｙＩ：ｐｏｌｙＣ）または不
適正二重鎖ＲＮＡ（アンプリゲン[Ampligen])が、ヒト
免疫不全症候群ウイルス（モンテフィオリ[Montefiori]
ら、Proc. Natl. Acad. Sci. USA 84 (1987) 2985〜298
9参照)、ヘルペスシンプレックスウイルス（例えば、リ
ンド[Lindh]ら、Proc. Soci.Exp. Biol. Med. 132(196
9)83〜87参照）およびまたワクシニアウイルス（前掲リ
ンド[Lindh]らによる報文参照）を包含する各種ウイル
スに対するそれらの活性に係わり試験されている。抗ウ
イルス活性に加えて、これらの合成二重鎖ＲＮＡが抗腫
瘍活性を有することも証明されている（例えば、アダム
ソン[Adamson]ら、Antimicrob. Agents Chemother. 9
(1969) 148〜152)。他方で、一本鎖ＤＮＡの生物学的活
性に関しては、限られた数の実験が報告されているのみ
である（例えば、メッシーナ[Messina]ら、J. Immunol.
147 (1991) 1759〜1764参照）。
ature (1968) 218, 542〜545及びヒルマン[Hilleman]Ar
ch. Intern. Med.126, 109〜124(1970)など参照）また
は一重鎖ＲＮＡ（バロン[Baron] Proc. Natl. Acad. Sc
i. USA 64, 67〜74)及び；ダイアンザニ[Dianzani]らPr
oc. Soc. Exp. Biol. Med. 145, (1974) 428〜433など
参照）あるいは二重鎖ＤＮＡ（ホルステイン［Holstei
n］ら、Acta Virol. 15, 381〜386 (1971) 参照）が、
ほとんどそのインターフェロン（ＩＦＮ）誘発によって
インビトロまたはインビボで抗ウイルス活性を有するこ
とは公知である。天然核酸の抗ウイルス作用に基づい
て、合成二重鎖ＲＮＡ、例えばポリリボイノシン酸、ポ
リリボシチジル酸（ｐｏｌｙＩ：ｐｏｌｙＣ）または不
適正二重鎖ＲＮＡ（アンプリゲン[Ampligen])が、ヒト
免疫不全症候群ウイルス（モンテフィオリ[Montefiori]
ら、Proc. Natl. Acad. Sci. USA 84 (1987) 2985〜298
9参照)、ヘルペスシンプレックスウイルス（例えば、リ
ンド[Lindh]ら、Proc. Soci.Exp. Biol. Med. 132(196
9)83〜87参照）およびまたワクシニアウイルス（前掲リ
ンド[Lindh]らによる報文参照）を包含する各種ウイル
スに対するそれらの活性に係わり試験されている。抗ウ
イルス活性に加えて、これらの合成二重鎖ＲＮＡが抗腫
瘍活性を有することも証明されている（例えば、アダム
ソン[Adamson]ら、Antimicrob. Agents Chemother. 9
(1969) 148〜152)。他方で、一本鎖ＤＮＡの生物学的活
性に関しては、限られた数の実験が報告されているのみ
である（例えば、メッシーナ[Messina]ら、J. Immunol.
147 (1991) 1759〜1764参照）。
【０００３】以前の研究において、本発明者はバクテリ
オファージＭ１３の一本鎖ＤＮＡ（以下Ｍ１３ ＤＮＡ
と略記する）が、感染したアヒルに静脈注入された場合
に、抗アヒルＢ型肝炎ウイルス（抗−ＤＨＢＶ）を有す
ることを証明した(Hepatology 19,(1994)1079〜1087参
照）。この薬剤の抗ウイルス作用のメカニズムに関し
て、２−５Ａシンテアーゼ活性が、アヒル血清で有意に
増加することが見出された。この発見は、ＩＦＮ誘発を
示唆している(同報文参照）。
オファージＭ１３の一本鎖ＤＮＡ（以下Ｍ１３ ＤＮＡ
と略記する）が、感染したアヒルに静脈注入された場合
に、抗アヒルＢ型肝炎ウイルス（抗−ＤＨＢＶ）を有す
ることを証明した(Hepatology 19,(1994)1079〜1087参
照）。この薬剤の抗ウイルス作用のメカニズムに関し
て、２−５Ａシンテアーゼ活性が、アヒル血清で有意に
増加することが見出された。この発見は、ＩＦＮ誘発を
示唆している(同報文参照）。
【０００４】
【発明の開示】本発明者は、上記予測に従いさらに研究
を進めた結果、Ｍ１３ファージに由来する一本鎖ＤＮＡ
を、ワクシニアウイルスに感染したマウスに投与したと
ころ、血清インターフェロン（ＩＦＮ、主としてβ型）
力値が、予測を超えて増加することを見出した。本発明
は、かかる知見に基づくものである。すなわち、本発明
は、Ｍ１３ファージに由来する一本鎖ＤＮＡを有効成分
として含有することを特徴とするＩＦＮ インデューサ
ーを提供するものである。
を進めた結果、Ｍ１３ファージに由来する一本鎖ＤＮＡ
を、ワクシニアウイルスに感染したマウスに投与したと
ころ、血清インターフェロン（ＩＦＮ、主としてβ型）
力値が、予測を超えて増加することを見出した。本発明
は、かかる知見に基づくものである。すなわち、本発明
は、Ｍ１３ファージに由来する一本鎖ＤＮＡを有効成分
として含有することを特徴とするＩＦＮ インデューサ
ーを提供するものである。
【０００５】以下、本発明を詳細に説明する。本発明
は、マウスに注入されたＭ１３ ＤＮＡが動物により異
物として認識され、これにより防衛機構が誘発されるこ
とに基づいて、ＩＦＮが誘発されることを発見したので
ある。本発明者のこの発見は、バクテリアシグナル鎖Ｄ
ＮＡがマウスリンパ球増殖を刺激するが、哺乳動物ＤＮ
Ａはこれを刺激しないというMessinaらによる最近の報
告（前掲報文参照）と類似している。さらにまた、真核
細胞ＤＮＡではなくて、原核細胞ＤＮＡが天然キラー細
胞を活性化し、ＩＦＮ活性を誘発させることが山本らに
より報告されている（Microbiol. Immunol. 36 (1992),
983〜997参照）。
は、マウスに注入されたＭ１３ ＤＮＡが動物により異
物として認識され、これにより防衛機構が誘発されるこ
とに基づいて、ＩＦＮが誘発されることを発見したので
ある。本発明者のこの発見は、バクテリアシグナル鎖Ｄ
ＮＡがマウスリンパ球増殖を刺激するが、哺乳動物ＤＮ
Ａはこれを刺激しないというMessinaらによる最近の報
告（前掲報文参照）と類似している。さらにまた、真核
細胞ＤＮＡではなくて、原核細胞ＤＮＡが天然キラー細
胞を活性化し、ＩＦＮ活性を誘発させることが山本らに
より報告されている（Microbiol. Immunol. 36 (1992),
983〜997参照）。
【０００６】真核細胞ＤＮＡ配列の回文構造（palindro
mic sequences）は重要であるように見做される。バク
テリア変性ＤＮＡに見出される９種の特異なヘキサマー
回文構造（ＡＡＣＧＴＴ、ＡＧＣＧＣＴ、ＡＴＣＧＡ
Ｔ、ＣＧＡＴＣＧ、ＣＧＴＡＣＧ、ＣＧＣＧＣＧ、ＧＡ
ＣＧＴＣ、ＧＣＧＣＧＣおよびＴＣＧＣＧＡ）は、天然
キラー細胞の活性化にとって重要である。本発明者はま
た、Ｍ１３ ＤＮＡがこのような配列、すなわち２個の
ＡＡＣＧＴＴ（４６３４−４６３９、５９３０−５９３
５）、２個のＡＧＣＧＣＴ（２７１０−２７１５、３０
３９−３０４４）および２個のＡＴＣＧＡＴ（２５２７
−２５３２、６０３９−６０４４）を含有していること
を見出した。さらにまた、複製原型および末端シグナル
領域には多くのヘアピン構造（hairpin structures）が
存在する。これらの回文構造およびヘアピン構造は、Ｍ
１３ ＤＮＡによるＩＦＮ誘発に重要な役割を演じる可
能性がある。
mic sequences）は重要であるように見做される。バク
テリア変性ＤＮＡに見出される９種の特異なヘキサマー
回文構造（ＡＡＣＧＴＴ、ＡＧＣＧＣＴ、ＡＴＣＧＡ
Ｔ、ＣＧＡＴＣＧ、ＣＧＴＡＣＧ、ＣＧＣＧＣＧ、ＧＡ
ＣＧＴＣ、ＧＣＧＣＧＣおよびＴＣＧＣＧＡ）は、天然
キラー細胞の活性化にとって重要である。本発明者はま
た、Ｍ１３ ＤＮＡがこのような配列、すなわち２個の
ＡＡＣＧＴＴ（４６３４−４６３９、５９３０−５９３
５）、２個のＡＧＣＧＣＴ（２７１０−２７１５、３０
３９−３０４４）および２個のＡＴＣＧＡＴ（２５２７
−２５３２、６０３９−６０４４）を含有していること
を見出した。さらにまた、複製原型および末端シグナル
領域には多くのヘアピン構造（hairpin structures）が
存在する。これらの回文構造およびヘアピン構造は、Ｍ
１３ ＤＮＡによるＩＦＮ誘発に重要な役割を演じる可
能性がある。
【０００７】核酸によるＩＦＮ誘発の分子メカニズムに
関して、細胞膜上にはｐｏｌｙＩ：ｐｏｌｙＣに対する
特異レセプターが存在する（吉田ら、Acta Virol. 36,
347〜358）。このレセプターへのｐｏｌｙＩ：ｐｏｌｙ
Ｃの結合は、蛋白質キナーゼＣの活性化を経て、ＮＦ−
ＫＢのβＩＦＮプロモーターの一部への結合を活性化し
（ビスバナザン［Visvanathan］ら、The EMBO Journal
8、 (1989) 1129〜1138参照）、ＮＦ−ＫＢ／Ｉ−ＫＢ複
合体の解離およびＮＦ−ＫＢの核への移動（ゴーシュ
［Ghosh］ら、Nature 344, (1990) 678〜682参照）を導
くものと見做される。さらにまた、ＩＦＮの正転写因子
として知られている、インターフェロン調節因子（ＩＦ
Ｎ−１）は、レセプターへのｐｏｌｙＩ：ｐｏｌｙＣの
結合を誘発する（レイズ［Reis］ら、The EMBO Journal
11, (1992) 185〜193参照）。合成されたＩＲＦ−１
は、ＩＦＮプロモーターに結合したＩＦＮに係わる逆転
写因子であるＩＲＦ−２を復元する。ＩＦＮプロモータ
ーにはＩＲＦ−１およびＮＦ−ＫＢが存在することか
ら、ＩＦＮ ｍＲＮＡの転写が刺激される。本発明者
は、類似のメカニズムによって、Ｍ１３ ＤＮＡによる
ＩＦＮ誘発を操作しうるという知見を得たものである。
関して、細胞膜上にはｐｏｌｙＩ：ｐｏｌｙＣに対する
特異レセプターが存在する（吉田ら、Acta Virol. 36,
347〜358）。このレセプターへのｐｏｌｙＩ：ｐｏｌｙ
Ｃの結合は、蛋白質キナーゼＣの活性化を経て、ＮＦ−
ＫＢのβＩＦＮプロモーターの一部への結合を活性化し
（ビスバナザン［Visvanathan］ら、The EMBO Journal
8、 (1989) 1129〜1138参照）、ＮＦ−ＫＢ／Ｉ−ＫＢ複
合体の解離およびＮＦ−ＫＢの核への移動（ゴーシュ
［Ghosh］ら、Nature 344, (1990) 678〜682参照）を導
くものと見做される。さらにまた、ＩＦＮの正転写因子
として知られている、インターフェロン調節因子（ＩＦ
Ｎ−１）は、レセプターへのｐｏｌｙＩ：ｐｏｌｙＣの
結合を誘発する（レイズ［Reis］ら、The EMBO Journal
11, (1992) 185〜193参照）。合成されたＩＲＦ−１
は、ＩＦＮプロモーターに結合したＩＦＮに係わる逆転
写因子であるＩＲＦ−２を復元する。ＩＦＮプロモータ
ーにはＩＲＦ−１およびＮＦ−ＫＢが存在することか
ら、ＩＦＮ ｍＲＮＡの転写が刺激される。本発明者
は、類似のメカニズムによって、Ｍ１３ ＤＮＡによる
ＩＦＮ誘発を操作しうるという知見を得たものである。
【０００８】ＩＦＮはウイルス性疾患および癌に対する
最も有効な薬剤の１種として使用されているが、外因性
ＩＦＮの投与はいくつかの欠陥を有する。例えば、静脈
注射後のその半減期は１〜３分間にすぎないとされてい
る。その外にも、重篤な疲労感、発熱、頭痛および吐き
気を生じさせるとされている。ｐｏｌｙＩ：ｐｏｌｙＣ
はＩＦＮインデューサーとして開発されたけれども、こ
の化合物はまた、ＩＦＮに類似する各種の副作用を有す
るとされており、臨床的に使用することはできなかっ
た。これに対して、Ｍ１３ ＤＮＡは最高可能投与量
（単次静脈投与で、３００ｍｇ／ｋｇ）で副作用を有し
ていない。
最も有効な薬剤の１種として使用されているが、外因性
ＩＦＮの投与はいくつかの欠陥を有する。例えば、静脈
注射後のその半減期は１〜３分間にすぎないとされてい
る。その外にも、重篤な疲労感、発熱、頭痛および吐き
気を生じさせるとされている。ｐｏｌｙＩ：ｐｏｌｙＣ
はＩＦＮインデューサーとして開発されたけれども、こ
の化合物はまた、ＩＦＮに類似する各種の副作用を有す
るとされており、臨床的に使用することはできなかっ
た。これに対して、Ｍ１３ ＤＮＡは最高可能投与量
（単次静脈投与で、３００ｍｇ／ｋｇ）で副作用を有し
ていない。
【０００９】前記したように、Ｍ１３ ＤＮＡ投与は、
外部から注入されたＩＦＮに比較して、より長期間にわ
たりＩＦＮレベルを維持した。従って、Ｍ１３ ＤＮＡ
の臨床的使用は極めて有望であると結論される。
外部から注入されたＩＦＮに比較して、より長期間にわ
たりＩＦＮレベルを維持した。従って、Ｍ１３ ＤＮＡ
の臨床的使用は極めて有望であると結論される。
【００１０】本発明のＩＦＮインデューサーの有効成分
であるＭ１３ファージに由来する一本鎖ＤＮＡは、製剤
の調製に一般に用いられる適当な溶剤、賦形剤、補助剤
などの添加剤を使用して、製剤製造の常法に従って注射
剤、液剤、軟膏剤および坐剤などの製剤を製造すること
ができる。処方にあたっては、他の医薬活性成分との配
合剤とすることも可能である。次に実験例により、Ｍ１
３ファージに由来する一本鎖ＤＮＡが強力なＩＦＮイン
デューサーであることを説明する。
であるＭ１３ファージに由来する一本鎖ＤＮＡは、製剤
の調製に一般に用いられる適当な溶剤、賦形剤、補助剤
などの添加剤を使用して、製剤製造の常法に従って注射
剤、液剤、軟膏剤および坐剤などの製剤を製造すること
ができる。処方にあたっては、他の医薬活性成分との配
合剤とすることも可能である。次に実験例により、Ｍ１
３ファージに由来する一本鎖ＤＮＡが強力なＩＦＮイン
デューサーであることを説明する。
【００１１】
材料および方法 １．化学材料（Ｍ１３ ＤＮＡの調製） 指数増殖期に培養されたＥ．ｃｏｌｉ Ｋ−１２ ＪＭ
１０１に、Ｍ１３ファージ（ｍ．ｏ．ｉ．：１０）を感
染させた。上清中のＭ１３ファージを、ポリエチレング
リコール６０００および塩化ナトリウムで沈殿させた。
このＭ１３ ＤＮＡを次いで、フェノール／クロロホル
ム（１：１）で抽出した。エタノール−沈殿の後に、こ
のＭ１３ ＤＮＡをヒドロキシアパタイトカラムにより
さらに精製し、次いで限外濾過により濃縮した。リポポ
リサッカライド（ＬＰＳ）を、２％ナトリウムデオキシ
コレートの存在の下に、限外濾過により除去した。この
最終ＤＮＡ調製物のＬＰＳ含有量は、リムルス−テスト
により、１．９ｎｇ／ｍｇＤＮＡであった。このＭ１３
ＤＮＡの純度および完全性は、ゲル濾過により９５％
以上であった。ヒト胎盤ＤＮＡおよび子ウシ胸腺ＤＮＡ
は、シグマケミカル社製のものを用いた。これらの２組
のＤＮＡは、フェノール／クロロホルムによりさらに精
製し、エタノール−により沈殿させ、塩類溶液に対して
透析し、使用時まで−２０℃で保存した。これらのＤＮ
Ａ調製物のＬＰＳ含有量は、０．３ｎｇ／ｍｇＤＮＡ
（ヒト胎盤ＤＮＡ）および２．２ｎｇ／ｍｇＤＮＡ（子
ウシ胸腺ＤＮＡ）であった。ＬＰＳは、開示されている
とおりにして、Ｅ．ｃｏｌｉ Ｋ−１２ ＪＭ１０１か
ら調製した。
１０１に、Ｍ１３ファージ（ｍ．ｏ．ｉ．：１０）を感
染させた。上清中のＭ１３ファージを、ポリエチレング
リコール６０００および塩化ナトリウムで沈殿させた。
このＭ１３ ＤＮＡを次いで、フェノール／クロロホル
ム（１：１）で抽出した。エタノール−沈殿の後に、こ
のＭ１３ ＤＮＡをヒドロキシアパタイトカラムにより
さらに精製し、次いで限外濾過により濃縮した。リポポ
リサッカライド（ＬＰＳ）を、２％ナトリウムデオキシ
コレートの存在の下に、限外濾過により除去した。この
最終ＤＮＡ調製物のＬＰＳ含有量は、リムルス−テスト
により、１．９ｎｇ／ｍｇＤＮＡであった。このＭ１３
ＤＮＡの純度および完全性は、ゲル濾過により９５％
以上であった。ヒト胎盤ＤＮＡおよび子ウシ胸腺ＤＮＡ
は、シグマケミカル社製のものを用いた。これらの２組
のＤＮＡは、フェノール／クロロホルムによりさらに精
製し、エタノール−により沈殿させ、塩類溶液に対して
透析し、使用時まで−２０℃で保存した。これらのＤＮ
Ａ調製物のＬＰＳ含有量は、０．３ｎｇ／ｍｇＤＮＡ
（ヒト胎盤ＤＮＡ）および２．２ｎｇ／ｍｇＤＮＡ（子
ウシ胸腺ＤＮＡ）であった。ＬＰＳは、開示されている
とおりにして、Ｅ．ｃｏｌｉ Ｋ−１２ ＪＭ１０１か
ら調製した。
【００１２】ポリリボイノシン酸：ポリリボシチジル酸
（ｐｏｌｙＩ：ｐｏｌｙＣ）およびヌクレオチド（ＡＭ
Ｐ、ＴＭＰ、ＧＭＰ、およびＣＭＰ）は、ヤマサ醤油
（株）製を用いた。マウスインターフェロン（ＩＦＮ）
はジャパンケミカルリサーチ製を、抗−マウスＩＦＮ−
α／βおよび抗−マウスＩＦＮ−βは、パッセル プラ
ス ローレイ社製をそれぞれ用いた。
（ｐｏｌｙＩ：ｐｏｌｙＣ）およびヌクレオチド（ＡＭ
Ｐ、ＴＭＰ、ＧＭＰ、およびＣＭＰ）は、ヤマサ醤油
（株）製を用いた。マウスインターフェロン（ＩＦＮ）
はジャパンケミカルリサーチ製を、抗−マウスＩＦＮ−
α／βおよび抗−マウスＩＦＮ−βは、パッセル プラ
ス ローレイ社製をそれぞれ用いた。
【００１３】２． マウスのワクシニアウイルス感染 雌ｄｄＹマウスに、尾静脈を経てワクシニアウイルス
（Ｌｉｓｔｅｒ株）２．０×１０4 ＰＦＵ／マウスを静
脈接種した。感染後の７日目に、尾に出現した病巣の数
を、１％フルオレセイン、０．５％メチレンブルー溶液
による染色によって数えた。この方法は、ボイル（Ｂｏ
ｙｌｅ）らによる方法(Antimicrob. Agents Chermothe
r. 6,(1966) 536〜539)に従い行った。試料は、各実験
に記載のスケジュールに従い静脈投与した。対照として
は、動物に塩類溶液（０．１ｍｌ／体重１０ｇ）を静脈
投与した。
（Ｌｉｓｔｅｒ株）２．０×１０4 ＰＦＵ／マウスを静
脈接種した。感染後の７日目に、尾に出現した病巣の数
を、１％フルオレセイン、０．５％メチレンブルー溶液
による染色によって数えた。この方法は、ボイル（Ｂｏ
ｙｌｅ）らによる方法(Antimicrob. Agents Chermothe
r. 6,(1966) 536〜539)に従い行った。試料は、各実験
に記載のスケジュールに従い静脈投与した。対照として
は、動物に塩類溶液（０．１ｍｌ／体重１０ｇ）を静脈
投与した。
【００１４】実験１．インビトロ脾臓細胞におけるＭ１
３ ＤＮＡによるＩＦＮの誘発 脾臓細胞懸濁液を、マエハラ（Ｍａｅｈａｒａ）らによ
る方法（Infect. Immun.15, (1977) 78〜83）に従い、
５週齢マウスから調製した。この細胞（１×１０7）
を、２４個のウエルを有するプラスティックプレート
［ナンク社製（Nunc,Inc.）］の各ウエル（１ｍｌ）に
入れ、次いで３７℃において５％ＣＯ2 雰囲気中で２
４時間、種々の濃度のＭ１３ ＤＮＡとともにインキュ
ベートした。インキュベーション後に、これらの培養物
からの上清を収穫し、ＩＦＮ力価を評価するまで、−７
０℃で保存した。この上清のＩＦＮ力価は、公知の方法
（ルビンステイン［Rubinstein］ら、J. Viol. 37, (19
81) 755〜758）に従い、Ｌ−９２９細胞でＶＳＶの細胞
変性作用を抑制する能力を測定することによって評価し
た。ＮＩＨ標準対照ＩＦＮと均等である、市販マウスＩ
ＦＮを、各実験の標準として使用し、またＩＦＮ力価は
国際単位（ＩＵ）で表わした。
３ ＤＮＡによるＩＦＮの誘発 脾臓細胞懸濁液を、マエハラ（Ｍａｅｈａｒａ）らによ
る方法（Infect. Immun.15, (1977) 78〜83）に従い、
５週齢マウスから調製した。この細胞（１×１０7）
を、２４個のウエルを有するプラスティックプレート
［ナンク社製（Nunc,Inc.）］の各ウエル（１ｍｌ）に
入れ、次いで３７℃において５％ＣＯ2 雰囲気中で２
４時間、種々の濃度のＭ１３ ＤＮＡとともにインキュ
ベートした。インキュベーション後に、これらの培養物
からの上清を収穫し、ＩＦＮ力価を評価するまで、−７
０℃で保存した。この上清のＩＦＮ力価は、公知の方法
（ルビンステイン［Rubinstein］ら、J. Viol. 37, (19
81) 755〜758）に従い、Ｌ−９２９細胞でＶＳＶの細胞
変性作用を抑制する能力を測定することによって評価し
た。ＮＩＨ標準対照ＩＦＮと均等である、市販マウスＩ
ＦＮを、各実験の標準として使用し、またＩＦＮ力価は
国際単位（ＩＵ）で表わした。
【００１５】実験２． 血清中におけるＩＦＮ生産の動
力学的考察 ４０匹のマウスに、Ｍ１３ ＤＮＡを５０．０ｍｇ／ｋ
ｇの量で、１度に投与した。各時間のポイントで５匹の
マウスから、投与後の０時間、２時間、４時間、６時
間、８時間、１０時間、１２時間および２４時間の時点
で、心臓穿刺によって採血した。遠心分離により血清を
採取し、次いでＩＦＮ分析法（前掲Rubinsteinらによる
方法）によりＩＦＮ力価を評価するまで、−７０℃で保
存した。
力学的考察 ４０匹のマウスに、Ｍ１３ ＤＮＡを５０．０ｍｇ／ｋ
ｇの量で、１度に投与した。各時間のポイントで５匹の
マウスから、投与後の０時間、２時間、４時間、６時
間、８時間、１０時間、１２時間および２４時間の時点
で、心臓穿刺によって採血した。遠心分離により血清を
採取し、次いでＩＦＮ分析法（前掲Rubinsteinらによる
方法）によりＩＦＮ力価を評価するまで、−７０℃で保
存した。
【００１６】〔実験結果〕 １． ワクシニアウイルスにより発現された尾病巣の数
に対するＭ１３ ＤＮＡの効果 ワクシニアウイルスにより発現された尾病巣の数に対す
るＭ１３ ＤＮＡの効果を下記のとおりに測定した。こ
の結果を下記表１に示す。この表の注釈文に記載されて
いるスケジュールの下に、各種量のＭ１３ ＤＮＡを、
静脈投与した。この試験系において、ワクシニアウイル
ス感染による疾患の進行は、ワクシニアウイルスにより
発現した典型的尾病巣の出現によって観察することがで
きる。Ｍ１３ ＤＮＡは、５．７ｍｇ／ｋｇ／日ほどの
少量で、ウイルス感染後の７日目に病巣の出現を約８０
％抑制した。最高投与量（５０ｍｇ／ｋｇ／日）では、
尾病巣の出現をほぼ完全に（９０％以上）抑制した。公
知のＩＦＮインデューサーであるｐｏｌｙＩ：ｐｏｌｙ
Ｃは、少量（０．６ｍｇ／ｋｇ／日）で有効であった
が、極めて高い毒性を示した。
に対するＭ１３ ＤＮＡの効果 ワクシニアウイルスにより発現された尾病巣の数に対す
るＭ１３ ＤＮＡの効果を下記のとおりに測定した。こ
の結果を下記表１に示す。この表の注釈文に記載されて
いるスケジュールの下に、各種量のＭ１３ ＤＮＡを、
静脈投与した。この試験系において、ワクシニアウイル
ス感染による疾患の進行は、ワクシニアウイルスにより
発現した典型的尾病巣の出現によって観察することがで
きる。Ｍ１３ ＤＮＡは、５．７ｍｇ／ｋｇ／日ほどの
少量で、ウイルス感染後の７日目に病巣の出現を約８０
％抑制した。最高投与量（５０ｍｇ／ｋｇ／日）では、
尾病巣の出現をほぼ完全に（９０％以上）抑制した。公
知のＩＦＮインデューサーであるｐｏｌｙＩ：ｐｏｌｙ
Ｃは、少量（０．６ｍｇ／ｋｇ／日）で有効であった
が、極めて高い毒性を示した。
【００１７】
【表１】 表１：ワクシニアウイルスにより発症した尾病巣の形成
に対するＭ１３ ＤＮＡの効果
に対するＭ１３ ＤＮＡの効果
【００１８】註 ａ： 試料は、０．６〜５０．０ｍｇ／ｋｇ／日の用量
で、静脈投与した。この投与は、ワクシニアウイルスに
よる感染前の３日の時点で開始し、引き続いて７日間継
続した。 ｂ： 塩類溶液と比較したＰ＜０．００１。Ｐ値はスチ
ューデントｔ−テストにより決定した。
で、静脈投与した。この投与は、ワクシニアウイルスに
よる感染前の３日の時点で開始し、引き続いて７日間継
続した。 ｂ： 塩類溶液と比較したＰ＜０．００１。Ｐ値はスチ
ューデントｔ−テストにより決定した。
【００１９】他の実験において、感染前の１日の時点
で、Ｍ１３ ＤＮＡを単次投与した場合に（５０ｍｇ／
ｋｇ）、尾病巣は対照値（２９．９±３．２）から３．
７±２．３に減少された。この効果は、Ｍ１３ ＤＮＡ
を毎日（７日間）静脈投与した場合と同様であり、この
７日間の処置は尾病巣の数を２．３±０．８にまで減少
させた。この薬剤の７回投与、５回投与、３回投与およ
び単次投与の間で、Ｍ１３ ＤＮＡの効力に有意の差異
は認められなかった。Ｍ１３ ＤＮＡをワクシニアウイ
ルス感染日の２日前、または１日前、または当日に投与
した場合に、この抗ウイルス効果が観察された。
で、Ｍ１３ ＤＮＡを単次投与した場合に（５０ｍｇ／
ｋｇ）、尾病巣は対照値（２９．９±３．２）から３．
７±２．３に減少された。この効果は、Ｍ１３ ＤＮＡ
を毎日（７日間）静脈投与した場合と同様であり、この
７日間の処置は尾病巣の数を２．３±０．８にまで減少
させた。この薬剤の７回投与、５回投与、３回投与およ
び単次投与の間で、Ｍ１３ ＤＮＡの効力に有意の差異
は認められなかった。Ｍ１３ ＤＮＡをワクシニアウイ
ルス感染日の２日前、または１日前、または当日に投与
した場合に、この抗ウイルス効果が観察された。
【００２０】投与が感染後の１日目に遅延された場合に
は、その有効性は失なわれた。下記表２に示されている
ように、Ｍ１３ ＤＮＡの組成に従い調製したヌクレオ
チド混合物および真核細胞ＤＮＡは、尾病巣の出現の防
止には無効であった。従って、ＩＦＮ誘発に基づく抗ウ
イルス効果はＭ１３ ＤＮＡに特異であって、他のどの
ＤＮＡもこの活性を有してはいないことは明白である。
は、その有効性は失なわれた。下記表２に示されている
ように、Ｍ１３ ＤＮＡの組成に従い調製したヌクレオ
チド混合物および真核細胞ＤＮＡは、尾病巣の出現の防
止には無効であった。従って、ＩＦＮ誘発に基づく抗ウ
イルス効果はＭ１３ ＤＮＡに特異であって、他のどの
ＤＮＡもこの活性を有してはいないことは明白である。
【００２１】
【表２】 表２：ワクシニアウイルスにより発現した尾病巣の形成
に対する数種のＤＮＡ調製物またはＬＰＳの抗ウイルス
効果の比較
に対する数種のＤＮＡ調製物またはＬＰＳの抗ウイルス
効果の比較
【００２２】註 ａ： 各試料は、ワクシニアウイルスによる感染前の１
日の時点で一度に静脈投与した。 ｂ： ＡＴＧＣ混合物は、Ｍ１３ ＤＮＡの組成に従い
調製されたＡＭＰ、ＴＭＰ、ＧＭＰおよびＣＭＰの混合
物である。 ｃ： 塩類溶液と比較したＰ＜０．００１。Ｐ値はスチ
ューデントｔ−テストにより決定した。 ｄ： 塩類溶液と比較したＰ＜０．０１。Ｐ値はスチュ
ーデントｔ−テストにより決定した。
日の時点で一度に静脈投与した。 ｂ： ＡＴＧＣ混合物は、Ｍ１３ ＤＮＡの組成に従い
調製されたＡＭＰ、ＴＭＰ、ＧＭＰおよびＣＭＰの混合
物である。 ｃ： 塩類溶液と比較したＰ＜０．００１。Ｐ値はスチ
ューデントｔ−テストにより決定した。 ｄ： 塩類溶液と比較したＰ＜０．０１。Ｐ値はスチュ
ーデントｔ−テストにより決定した。
【００２３】２． Ｍ１３ ＤＮＡのＩＦＮ誘発効果
は、Ｍ１３ ＤＮＡ調製物中の夾雑ＬＰＳによるもので
はないことの証明 ＬＰＳがＩＦＮを誘発させること、および感染に対して
非特異的に抵抗すること、およびまたマクロファージを
活性化することは公知である（ウェストファル［Westph
al]ら、 Adv. Immunopharmacol. 3, (1986) 13〜34)。従
って、上記表２および下記表３に記載の各実験におい
て、Ｍ１３ ＤＮＡの抗ウイルス効果が夾雑ＬＰＳによ
るものである可能性について試験した。上記表２に示さ
れているように、ＬＰＳの量は、０．０１μｇ／Ｍ１３
ＤＮＡ ５０ｍｇほどの少量に減少されていた。この
Ｍ１３ ＤＮＡ調製物は、１０倍多い量（Ｍ１３ ＤＮ
Ａ５０ｍｇ中、ＬＰＳ０．１μｇ）のＬＰＳを含有する
Ｍ１３ ＤＮＡ調製物とほとんど同一の抗ウイルス活性
を有していた。さらにまた、Ｍ１３ ＤＮＡ調製物中に
存在する量（０．０１μｇ／５０ｍｇおよび０．１μｇ
／５０ｍｇ）のＬＰＳは、これらを単独でマウスに注入
した場合には、いかなる抗ウイルス活性も示さなかっ
た。ＬＰＳは、多量（Ｍ１３ ＤＮＡとともに注入され
る量よりも１０〜１００倍多い量）で投与した場合に、
その抗ウイルス活性を示した。この実験結果から、Ｍ１
３ ＤＮＡ調製物中に夾雑する量のＬＰＳは、この量で
ＬＰＳを単独使用した場合に抗ウイルス効果を示すには
充分ではないものと結論することができる。
は、Ｍ１３ ＤＮＡ調製物中の夾雑ＬＰＳによるもので
はないことの証明 ＬＰＳがＩＦＮを誘発させること、および感染に対して
非特異的に抵抗すること、およびまたマクロファージを
活性化することは公知である（ウェストファル［Westph
al]ら、 Adv. Immunopharmacol. 3, (1986) 13〜34)。従
って、上記表２および下記表３に記載の各実験におい
て、Ｍ１３ ＤＮＡの抗ウイルス効果が夾雑ＬＰＳによ
るものである可能性について試験した。上記表２に示さ
れているように、ＬＰＳの量は、０．０１μｇ／Ｍ１３
ＤＮＡ ５０ｍｇほどの少量に減少されていた。この
Ｍ１３ ＤＮＡ調製物は、１０倍多い量（Ｍ１３ ＤＮ
Ａ５０ｍｇ中、ＬＰＳ０．１μｇ）のＬＰＳを含有する
Ｍ１３ ＤＮＡ調製物とほとんど同一の抗ウイルス活性
を有していた。さらにまた、Ｍ１３ ＤＮＡ調製物中に
存在する量（０．０１μｇ／５０ｍｇおよび０．１μｇ
／５０ｍｇ）のＬＰＳは、これらを単独でマウスに注入
した場合には、いかなる抗ウイルス活性も示さなかっ
た。ＬＰＳは、多量（Ｍ１３ ＤＮＡとともに注入され
る量よりも１０〜１００倍多い量）で投与した場合に、
その抗ウイルス活性を示した。この実験結果から、Ｍ１
３ ＤＮＡ調製物中に夾雑する量のＬＰＳは、この量で
ＬＰＳを単独使用した場合に抗ウイルス効果を示すには
充分ではないものと結論することができる。
【００２４】下記表３に示されているように、ＬＰＳ低
応答性マウスにおいてさえも、Ｍ１３ ＤＮＡは有意の
抗ウイルス活性を有していた。これらのマウスがＬＰＳ
に対して確実に無感受性であるという事実は、１０μｇ
／ｋｇほど多量のＬＰＳがいかなる有意の抗ウイルス活
性も示さないという観察結果から見ることができる。従
って、Ｍ１３ ＤＮＡのＩＦＮ誘発効果はＬＰＳによる
ものではないものと結論することができる。
応答性マウスにおいてさえも、Ｍ１３ ＤＮＡは有意の
抗ウイルス活性を有していた。これらのマウスがＬＰＳ
に対して確実に無感受性であるという事実は、１０μｇ
／ｋｇほど多量のＬＰＳがいかなる有意の抗ウイルス活
性も示さないという観察結果から見ることができる。従
って、Ｍ１３ ＤＮＡのＩＦＮ誘発効果はＬＰＳによる
ものではないものと結論することができる。
【００２５】
【表３】 表３：Ｃ３Ｈ／ＨｅＪマウス（ＬＰＳ低応答性マウス）
aにおいてワクシニアウイルスにより発現した尾病巣に
対するＭ１３ ＤＮＡの効果
aにおいてワクシニアウイルスにより発現した尾病巣に
対するＭ１３ ＤＮＡの効果
【００２６】註 ａ： 雌のＣ３Ｈ／ＨｅＪマウスに、その尾静脈を経て
ワクシニアウイルスを１．０×１０5ＰＦＵ／マウスの
量で静脈接種した。ＬＰＳ低応答性マウスの使用は技術
的に困難を伴うことから、これらのデータは各群で２４
匹のマウスから誘導した。。 ｂ： 各試料は、ワクシニアウイルスによる感染前の１
日の時点で静脈投与した。 ｃ： 塩類溶液と比較したＰ＜０．０１。Ｐ値はスチュ
ーデントｔ−テストにより決定した。
ワクシニアウイルスを１．０×１０5ＰＦＵ／マウスの
量で静脈接種した。ＬＰＳ低応答性マウスの使用は技術
的に困難を伴うことから、これらのデータは各群で２４
匹のマウスから誘導した。。 ｂ： 各試料は、ワクシニアウイルスによる感染前の１
日の時点で静脈投与した。 ｃ： 塩類溶液と比較したＰ＜０．０１。Ｐ値はスチュ
ーデントｔ−テストにより決定した。
【００２７】３． Ｍ１３ ＤＮＡによるＩＦＮの誘発 前記の結果から、Ｍ１３ ＤＮＡのワクシニアウイルス
に対する強力な抗ウイルス活性が確立された。次に、こ
の薬剤によるＩＦＮの誘発可能性について試験をした。
この結果を下記表４示す。この試験は新しく調製した脾
臓細胞を、インビトロで種々の量のＭ１３ ＤＮＡとと
もに処理することによって行い、用量依存様相でＩＦＮ
が誘発されることが見出された。０．１μｇ／ｍｌほど
の少量のＭ１３ ＤＮＡが有意の量のＩＦＮを誘発させ
た。Ｍ１３ ＤＮＡ（１μｇ／ｍｌ）は、１００μｇ／
ｍｌのｐｏｌｙＩ：ｐｏｌｙＣにより誘発されるＩＦＮ
と同等のＩＦＮを誘発させた。従って、このインビトロ
試験において、Ｍ１３ ＤＮＡのＩＦＮ誘発能力は、ｐ
ｏｌｙＩ：ｐｏｌｙＣに比較した優れていることが証明
された。
に対する強力な抗ウイルス活性が確立された。次に、こ
の薬剤によるＩＦＮの誘発可能性について試験をした。
この結果を下記表４示す。この試験は新しく調製した脾
臓細胞を、インビトロで種々の量のＭ１３ ＤＮＡとと
もに処理することによって行い、用量依存様相でＩＦＮ
が誘発されることが見出された。０．１μｇ／ｍｌほど
の少量のＭ１３ ＤＮＡが有意の量のＩＦＮを誘発させ
た。Ｍ１３ ＤＮＡ（１μｇ／ｍｌ）は、１００μｇ／
ｍｌのｐｏｌｙＩ：ｐｏｌｙＣにより誘発されるＩＦＮ
と同等のＩＦＮを誘発させた。従って、このインビトロ
試験において、Ｍ１３ ＤＮＡのＩＦＮ誘発能力は、ｐ
ｏｌｙＩ：ｐｏｌｙＣに比較した優れていることが証明
された。
【００２８】
【表４】 表４：マウス脾臓細胞培地におけるＭ１３ ＤＮＡによ
るＩＦＮ誘発
るＩＦＮ誘発
【００２９】４． マウス血清中のＩＦＮ誘発に係る動
力学的試験 マウスにＭ１３ ＤＮＡを単次静脈注射し、Ｍ１３ Ｄ
ＮＡ投与後の種々の時点で、血液試料を採取して、ＩＦ
Ｎ分析を行った。この結果を図１に示す。血清中のＩＦ
Ｎの量は、Ｍ１３ ＤＮＡ投与後の４時間の時点で、検
出できないレベルから７００ＩＵ／ｍｌほどの多量に上
昇した。この血清中のＩＦＮ濃度は、Ｍ１３ ＤＮＡ投
与後の１２時間にもわたる長時間にわたりピークレベル
の１／６に維持された。誘発されたＩＦＮの量は、レオ
ウイルスなどのウイルスに感染したマウスによって観察
されている量に匹敵する（Tytellら、Proc. Natl. Aca
d.Sci. USA 58, (1967) 1719〜1722）。他方、測定され
たＩＦＮレベルは、５ｍｇ／ｋｇのｐｏｌｙＩ：ｐｏｌ
ｙＣの静脈投与後の４時間の時点で達成されたレベル
（３８，４００ＩＵ／ｍｌ）よりもそれほど少なくな
い。この結果は、Ｍ１３ＤＮＡがインビトロでのＩＦＮ
誘発に係わりｐｏｌｙＩ：ｐｏｌｙＣよりも優れている
ことを示しているインビトロ実験（表４）で得られた結
果とは対照的である。
力学的試験 マウスにＭ１３ ＤＮＡを単次静脈注射し、Ｍ１３ Ｄ
ＮＡ投与後の種々の時点で、血液試料を採取して、ＩＦ
Ｎ分析を行った。この結果を図１に示す。血清中のＩＦ
Ｎの量は、Ｍ１３ ＤＮＡ投与後の４時間の時点で、検
出できないレベルから７００ＩＵ／ｍｌほどの多量に上
昇した。この血清中のＩＦＮ濃度は、Ｍ１３ ＤＮＡ投
与後の１２時間にもわたる長時間にわたりピークレベル
の１／６に維持された。誘発されたＩＦＮの量は、レオ
ウイルスなどのウイルスに感染したマウスによって観察
されている量に匹敵する（Tytellら、Proc. Natl. Aca
d.Sci. USA 58, (1967) 1719〜1722）。他方、測定され
たＩＦＮレベルは、５ｍｇ／ｋｇのｐｏｌｙＩ：ｐｏｌ
ｙＣの静脈投与後の４時間の時点で達成されたレベル
（３８，４００ＩＵ／ｍｌ）よりもそれほど少なくな
い。この結果は、Ｍ１３ＤＮＡがインビトロでのＩＦＮ
誘発に係わりｐｏｌｙＩ：ｐｏｌｙＣよりも優れている
ことを示しているインビトロ実験（表４）で得られた結
果とは対照的である。
【００３０】図１は、Ｍ１３ ＤＮＡを投与したマウス
の血清中のＩＦＮ誘発に係る動力学的試験結果を示すも
のである。この試験では、マウスにＭ１３ ＤＮＡを５
０．０ｍｇ／ｋｇの用量で単次静脈投与した。Ｍ１３
ＤＮＡ投与後の０時間、２時間、４時間、６時間、８時
間、１０時間、１２時間および２４時間の時点で、５匹
のマウスを採血した。ＩＦＮ力値は、前記材料および方
法の項に記載のとおりに、Ｌ−９２９細胞におけるＶＳ
Ｖの細胞変性作用の抑制を測定することによって評価し
た。誤差棒印は、各数値の標準誤差を示すものである。
の血清中のＩＦＮ誘発に係る動力学的試験結果を示すも
のである。この試験では、マウスにＭ１３ ＤＮＡを５
０．０ｍｇ／ｋｇの用量で単次静脈投与した。Ｍ１３
ＤＮＡ投与後の０時間、２時間、４時間、６時間、８時
間、１０時間、１２時間および２４時間の時点で、５匹
のマウスを採血した。ＩＦＮ力値は、前記材料および方
法の項に記載のとおりに、Ｌ−９２９細胞におけるＶＳ
Ｖの細胞変性作用の抑制を測定することによって評価し
た。誤差棒印は、各数値の標準誤差を示すものである。
【００３１】５． Ｍ１３ ＤＮＡにより誘発されるＩ
ＦＮ Ｍ１３ ＤＮＡにより誘発されるＩＦＮの種類を測定す
る目的で、Ｍ１３ ＤＮＡをマウスに投与後４時間の時
点で血液試料を採取した。この結果を下記表５に示す。
表５に示されているように、この血清中のＩＦＮ活性
は、抗−ＩＦＮ−α／β抗体により完全に中和され、か
つまた抗−ＩＦＮ−β抗体によりほとんど完全に中和さ
れた。さらにまた、このＩＦＮ活性は、ｐＨ２における
処理では有意に減少されないが、５６℃で加熱すると失
われた。低ｐＨに対して、ＩＦＮ−γは感受性を有する
が、ＩＦＮ−βおよびＩＦＮ−αは無感受性であること
が知られている。さらにまた、５６℃における１時間の
加熱に対して、ＩＦＮ−βは感受性であるが、ＩＦＮ−
αは無感受性であることも公知である。従って、Ｍ１３
ＤＮＡにより誘発されるＩＦＮは主として、ＩＦＮ−
βであると結論することができる。
ＦＮ Ｍ１３ ＤＮＡにより誘発されるＩＦＮの種類を測定す
る目的で、Ｍ１３ ＤＮＡをマウスに投与後４時間の時
点で血液試料を採取した。この結果を下記表５に示す。
表５に示されているように、この血清中のＩＦＮ活性
は、抗−ＩＦＮ−α／β抗体により完全に中和され、か
つまた抗−ＩＦＮ−β抗体によりほとんど完全に中和さ
れた。さらにまた、このＩＦＮ活性は、ｐＨ２における
処理では有意に減少されないが、５６℃で加熱すると失
われた。低ｐＨに対して、ＩＦＮ−γは感受性を有する
が、ＩＦＮ−βおよびＩＦＮ−αは無感受性であること
が知られている。さらにまた、５６℃における１時間の
加熱に対して、ＩＦＮ−βは感受性であるが、ＩＦＮ−
αは無感受性であることも公知である。従って、Ｍ１３
ＤＮＡにより誘発されるＩＦＮは主として、ＩＦＮ−
βであると結論することができる。
【００３２】
【表５】 表５：Ｍ１３ ＤＮＡ誘発マウスインターフェロンの特
徴
徴
【図１】Ｍ１３ ＤＮＡを投与したマウスの血清中のＩ
ＦＮ誘発に係わる動力学的試験結果を示すグラフ。
ＦＮ誘発に係わる動力学的試験結果を示すグラフ。
Claims (1)
- 【請求項１】 Ｍ１３ファージに由来する一本鎖ＤＮＡ
を有効成分として含有することを特徴とするＩＦＮ イ
ンデューサー。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP8112098A JPH09278658A (ja) | 1996-04-10 | 1996-04-10 | 新規ｉｆｎ インデューサー |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP8112098A JPH09278658A (ja) | 1996-04-10 | 1996-04-10 | 新規ｉｆｎ インデューサー |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH09278658A true JPH09278658A (ja) | 1997-10-28 |
Family
ID=14578086
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP8112098A Pending JPH09278658A (ja) | 1996-04-10 | 1996-04-10 | 新規ｉｆｎ インデューサー |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH09278658A (ja) |
-
1996
- 1996-04-10 JP JP8112098A patent/JPH09278658A/ja active Pending
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20040909 |
|
| A977 | Report on retrieval |
Effective date: 20060412 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20060829 |
|
| A02 | Decision of refusal |
Effective date: 20061226 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 |