JPH0926423A - 不活性担体分子に対して複合体形成された被検体もしくはその部分配列を含む免疫アツセイで使用するための合成キヤリブレーター - Google Patents

不活性担体分子に対して複合体形成された被検体もしくはその部分配列を含む免疫アツセイで使用するための合成キヤリブレーター

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JPH0926423A
JPH0926423A JP8189921A JP18992196A JPH0926423A JP H0926423 A JPH0926423 A JP H0926423A JP 8189921 A JP8189921 A JP 8189921A JP 18992196 A JP18992196 A JP 18992196A JP H0926423 A JPH0926423 A JP H0926423A
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moleculeor
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マルギト・ドト
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Abstract

(57)【要約】 【課題】 免疫アッセイの較正（または対照）として使
用できる安定なキャリブレータの提供。 【解決手段】 被検体特異的エピトープが他の蛋白質も
しくは合成キャリブレーターに対してカップリングされ
ている。

Description

【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、免疫アッセイで使
用するための合成キャリブレーターおよびそれを含んで
なる免疫学的試験キットに関する。
【０００２】
【従来技術】医学的診断目的で血清試料もしくは尿試料
中の蛋白質を検出するためには免疫アッセイが頻繁に用
いられるが、それは特に良好な特異性および感度のため
である。このような検出のためには一つもしくは二つの
特異的抗体に加えて、患者の試料の定量化のための相対
的標準として、および陽性対照として用いられるキャリ
ブレーターが必要とされる。大規模な分析検査室におけ
る自動化アッセイのためには特に、数週間〜数カ月間の
４℃下でのキャリブレーターの保存が望まれる。キャリ
ブレーター製剤の安定性についてのこれらの要求により
被検体に依存して困難性がもたらされる場合があり、そ
れは例えば生理学的な塩およびｐＨ条件下での溶解性が
保証されていない場合などである。ここで挙げることが
できる例はトロポニンＩおよびトロポニンＴであり、こ
れらは変性用溶液（６Ｍの尿素、０．０１Ｍのジチオス
レイトール）内でのみ十分な安定性および溶解性を示
す。しかしながらこの変性用製剤を用いることで、免疫
アッセイが成り立たなくなる場合があり、それは抗体が
この処理により損傷を受けてしまうからである。
【０００３】蛋白質は溶液中で制約された安定を示すこ
と、およびそれらを含む試薬は凍結乾燥化された形態で
頻繁に販売されることがあり、かつ使用前に適切な組成
の溶媒を用いて溶解しなければならないことが知られて
いる。このような方法で取得された溶液を４℃で保存す
る場合には、たとえ日毎の決定値によりその試薬濃度が
一定の変化を示したとしても、それらの溶液を数日間は
使用することが可能である。従って一般的に、−かつト
ロポニンＩおよびトロポニンＴの場合においてさえも
−、比較的長期の保存用の単位用量形態をとる凍結乾燥
物質から出発して取得された比較溶液を凍結することが
推奨される。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】安定なキャリブレータ
ーの開発のための一つの可能性は、全蛋白質もしくは部
分配列を担体分子に対して複合体形成させ、そしてその
ために溶解性および／または安定性を増加させることに
ある。担体分子はこの場合には免疫学的に非反応性では
あるが、化学的複合体形成は可能であるべきである。
【０００５】
【課題を解決するための手段】本発明は、血液、血漿、
血清、もしくは尿試料中の医学的に適切な被検体の決定
用の免疫アッセイにおける使用のための非常に良好な安
定性を有する合成キャリブレーターに関する。この製剤
は、被検体もしくはその部分配列の免疫学的に不活性な
複合体形成性担体分子に対する化学的カップリング部分
を含む。この合成キャリブレーター物質は、０．０１〜
５Ｍ、特に０．０５〜０．５Ｍの塩濃度、およびｐＨ２
とｐＨ１２との間、特にｐＨ６〜８のｐＨ条件を有する
生理学的緩衝液中に存在する。この緩衝液は、保存料
（例えば、アジ化ナトリウム、Ｐｒｏｃｌｉｎ １５
０）、安定化剤（例えば、ウシ血清アルブミン（ＢＳ
Ａ）、ヒトもしくはマウスの血清、マウスの免疫グロブ
リン）、他の添加物（例えば、β−メルカプトエタノー
ル、ＥＤＴＡ）、あるいは洗剤（例えば、Ｔｗｅｅｎ
２０、ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）、もしくはＴ
ｒｉｔｏｎ Ｘ １００）を含むことが可能である。
【０００６】この化学的複合体形成方法は既知の方法に
従って進行させ、この方法は刊行物において記載されて
いる（Ｓ．Ｓ．Ｗｏｎｇ、Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｏｆ
ｐｒｏｔｅｉｎ ｃｏｎｊｕｇａｔｉｏｎ ａｎｄ ｃ
ｒｏｓｓ−ｌｉｎｋｉｎｇ、１９９１、ＣＲＣ Ｐｒｅ
ｓｓ Ｉｎｃ．社）。
【０００７】架橋剤は、ホモ二官能価もしくはヘテロ二
官能価であることが可能である。前者は、アミノ基と反
応するもの、例えば、リシンのε−アミノ基と反応する
グルタルアルデヒド、スルフヒドリル基と反応するも
の、例えば、ビスマレイミドもしくはアルキル化剤、ジ
アミンまたはフェノールおよびイミダゾリル基と組み合
わさったカルボキシル基と反応するもの、例えばカルボ
ジイミド、チロシンまたはヒスチジンのような芳香族性
アミノ酸と反応するジアゾニウム塩が挙げられる。ヘテ
ロ二官能性架橋剤はペプチドを担体分子に対してカップ
リングさせるのに一層適している。例えば、Ｎ−スクシ
ンイミジル−４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキ
サン−１−カルボキシレート（ＳＭＣＣ）は、一つの腕
でアミノ基との反応し、かつもう一つの腕でスルフヒド
リル基と反応する。例えば、ピリジル−２，２’−ジチ
オベンジルジアゾアセテート（ＰＤＤ）もしくはｐ−ニ
トフェニルジアゾアセテートは、カルボキシルおよびス
ルフヒドリル、あるいはアミノ基と反応する。例えば、
１−アミノオキシ−４−｛（３−ニトロ−２−ピリジ
ル）ジチオ｝ブタンは、カルボニルおよびスルフヒドリ
ル基に結合する試薬である。目的とする蛋白質もしくは
ペプチド内、あるいは担体分子内にスルフヒドリル基が
全く存在しない場合には、これらを例えばリシンのアミ
ノ基に、塩酸２−イミノチオラン（２−ＩＴ）もしくは
類似試薬を用いて連結させることが可能である。
【０００８】担体分子は、複合体形成性の基を含む蛋白
質もしくはポリマーから構成することができる。適切な
担体分子は巨大蛋白質（ＭＷ＞１００ｋＤ）であること
が好ましく、この例は、フェリチン、α1−マクログロ
ブリン、もしくはチログロブリンであり、これらの担体
分子ではサンドイッチアッセイの場合に、２つの抗体の
立体障害が全く存在しないことが予期される。しかしな
がら小さめの蛋白質（例えば、ＢＳＡ）も担体物質とし
て用いることが可能である。カップリングに適する蛋白
質内の反応基は例えば側鎖のアミノ基（例えば、リシン
中のアミノ基）、もしくはシステインのスルフヒドリル
基である。
【０００９】適切な合成担体物質はポリマー、例えば、
ポリビニルアルコール、ポリアクリレート、もしくはポ
リスルホネートであるが、ポリアミド、ポリエステル、
およびポリエーテルもまた適切である。これらの化合物
に対するペプチドのカップリングは、対応する官能基
（ヒドロキシル、カルボキシル、もしくはアミノ基）を
用いて実施される。
【００１０】その上記蛋白質に加えて、天然物（例え
ば、キチン）、およびキトサンもしくはゼラチンも担体
物質として用いることができる。
【００１１】複合体形成される予定の物質には医学的診
断法に適する蛋白質が含まれ、これらはその全配列とし
て、あるいは部分配列としてのいずれかで結合される。
適切な部分配列は生来の分子のプロテアーゼ開裂により
形成される断片もしくは合成ペプチドであり、後者は市
販品として入手可能な合成機の助けを借りて製造され
る。この場合、異なる配列の数は１と２０との間となり
得る。サンドイッチアッセイでは、すなわち被検体に特
異的な２つの抗体を用いるアッセイについては、十分な
長さがあるペプチドか、もしくはより好ましくは２種の
ペプチドが支持体に結合される必要がある。
【００１２】複合体形成される予定の合成ペプチドが改
変された（被検体）配列（例えば、システインもしくは
リシンのＣ−末端連結配列）を有する場合には、恐らく
一層容易なカップリングが可能となる。このようなペプ
チドは被検体特異的抗体のためのエピトープを含むはず
であり；概してそれらのエピトープは分子の表面に由来
する蛋白質配列である。
【００１３】本発明は具体的には、心臓のトロポニンＩ
（これは、急性心筋梗塞の診断において、ある役割を担
う心臓特異的蛋白質である）のための合成キャリブレー
ター物質に関する。このキャリブレーターは、担体とし
てのＢＳＡに対して予め複合体形成させてあるこの被検
体の２つの合成ペプチドから構成されている。
【００１４】
【実施例】
本発明に従うキャリブレーターの製造法 ウシ血清アルブミンを担体分子として選択し、そしてヒ
トの心臓ＴｎＩのペプチドは以下に示す配列を有してい
た： ペプチド１：ＴｎＩ配列の内のアミノ酸２７〜４０、お
よびペプチド２：ＴｎＩ配列の内のアミノ酸６９〜８
５。
【００１５】システインをペプチド１のＣ−末端に連結
させ、そしてアラニンおよびリシンをペプチド２に連結
させて複合体形成を容易にさせた。カップリングのため
には蛋白質の複合体形成について知られる方法を選択し
た（Ｓ．Ｙｏｓｈｉｔａｋｅら、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃ
ｈｅｍ．、１０１、３９５、１９７９）。担体蛋白質Ｂ
ＳＡをＳＭＣＣを用い、ＤＭＦ中に２０ｍＭのＳＭＣＣ
を溶解することにより活性化させ、そしてＢＳＡに対し
て２５倍過剰溶液として添加した。この混合物を２５℃
で２５分間インキュベートした。この反応を１μＭのグ
リシン溶液の添加（１０分、２５℃）により終了させ
た。これらのペプチドを、活性化させたＢＳＡに対し
て、それらの配列中のスルフヒドリル基を介するか、あ
るいは２−ＩＴを用いることでスルフヒドリル基を導入
することによるかのいずれかにより結合させた。
【００１６】このキャリブレーター物質を精製するた
め、すなわち低分子量の活性化物質を除去するために、
ゲルクロマトグラフィー（Ｓｕｐｅｒｄｅｘ ２００）
を実施した。その後、ＵＶ分光分析による濃度決定およ
び０．５％ ＢＳＡ／０．１％アジ化ナトリウムを用い
る安定化を実施した。更に、免疫アッセイにおいても利
用される配列特異的抗体を用いるアフィニティークロマ
トグラフィー精製、あるいは蛋白質精製のための他の一
般的な方法を行うことも可能である。
【００１７】免疫アッセイの実施 １． ＥＬＩＳＡ 本発明に従う既述のキャリブレーターを用いて、サンド
イッチＥＬＩＳＡ（この方法により、そのキャリブレー
ター物質を天然の被検体の代用物として用いることが可
能であることが示される）を、一般的な方法に従って実
施した。
【００１８】ＴｎＩの配列１に対する抗体（これを前記
合成キャリブレーターに複合体形成させた）をマイクロ
タイタープレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ社）に適用した。そ
の後にキャリブレーターが添加された状態でのインキュ
ベーションを実施した。用いられた検出抗体はＴｎＩの
第２ペプチドに対してヤギにおいて産生された抗体であ
り、これをその合成キャリブレーターにカップリングさ
せた。この抗体の、合成キャリブレーターに対する結合
を、アルカリ性ホスファタターゼと複合体形成させてあ
る抗−ヤギＩｇＧ抗体を用いて検出した。この酵素は呈
色反応の触媒作用を行い、この呈色反応の強度がサンド
イッチ構造で結合した被検体の量に比例する。このＥＬ
ＩＳＡを用いることで、この複合体が少なくとも２４時
間は３７℃下で安定であることを示すことが可能となっ
た。
【００１９】２． 自動化サンドイッチアッセイ 前記合成キャリブレーターを自動化Ｉｍｍｕｎｏ １
分析機（ＭｉｌｅｓＤｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ社）に利用
した。アッセイフォーマットはサンドイッチ法に類似し
ており、１に記載されるＥＬＩＳＡにおけるものと同一
の抗体を用いる。このサンドイッチ法での第１抗体がこ
の合成キャリブレーター上の配列１に結合する。この抗
体をＦＩＴＣでラベルし、そして抗−ＦＩＴＣを介して
磁性粒子上に固定化させる。このサンドイッチ法の第２
抗体はアルカリ性ホスファターゼを担持しており、そし
て呈色反応の触媒反応を行う。抗体のインキュベーショ
ンは連続的に実施した。この検査方法でも、このキャリ
ブレーター物質の濃度に比例した色の強度の増加を示す
ことが可能であった。
【００２０】本発明の主な特徴または態様は以下のとう
りである。
【００２１】１． 担体物質およびそれに対してカップ
リングさせてある１種以上の被検体特異的エピトープを
含んでなる免疫アッセイ用の合成キャリブレーター。
【００２２】２． 担体分子が蛋白質もしくはポリマー
である、前記１に記載の合成キャリブレーター。
【００２３】３． 担体分子が、ウシ血清アルブミン、
フェリチン、α1−マクログロブリン、チログロブリ
ン、あるいはポリビニルアルコール、ポリアクリレー
ト、ポリスルホネート、ポリアミド、ポリエステル、も
しくはポリエーテルである、前記２に記載の合成キャリ
ブレーター。
【００２４】４． エピトープとしてヒト心臓トロポニ
ンＩのペプチドを含む、前記１〜３に記載の合成キャリ
ブレーター。
【００２５】５． ヒト心臓トロポニンＩのアミノ酸２
７〜４０および６９〜８５を含むペプチドを含む、前記
４に記載の合成キャリブレーター。
【００２６】６． 前記１〜５に記載されるキャリブレ
ーターを含んでなる免疫学的試験キット。

Claims (2)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】 担体分子およびそれに対してカップリン
    グさせてある１種以上の被検体特異的エピトープを含ん
    でなる免疫アッセイ用の合成キャリブレーター。
  2. 【請求項２】 請求項１記載のキャリブレーターを含む
    免疫学的試験キット。
JP8189921A 1995-07-06 1996-07-02 不活性担体分子に対して複合体形成された被検体もしくはその部分配列を含む免疫アツセイで使用するための合成キヤリブレーター Pending JPH0926423A (ja)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE19524572.5 1995-07-06
DE19524572A DE19524572A1 (de) 1995-07-06 1995-07-06 Verfahren zur Herstellung eines synthetischen Kalibrators für den Einsatz in Immunoassays, bestehend aus den Analyten oder Teilsequenzen davon, die an inerten Trägermoleküle konjugiert sind

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JPH0926423A true JPH0926423A (ja) 1997-01-28

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JP8189921A Pending JPH0926423A (ja) 1995-07-06 1996-07-02 不活性担体分子に対して複合体形成された被検体もしくはその部分配列を含む免疫アツセイで使用するための合成キヤリブレーター

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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2008539434A (ja) * 2005-04-28 2008-11-13 アボット・ラボラトリーズ 心臓トロポニンの安定化
JP2012513586A (ja) * 2008-12-22 2012-06-14 コーニンクレッカ フィリップス エレクトロニクス エヌ ヴィ 磁気ラベルを使用するトロポニンｉに関するアッセイ

Families Citing this family (29)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1998016255A2 (en) 1996-10-15 1998-04-23 Navix, Inc. Stabilized conjugates of uncomplexed subunits of multimeric proteins
DE19647927A1 (de) * 1996-11-20 1998-05-28 Bayer Ag Verfahren zur Herstellung einer stabilen Troponin I Präparation und dessen Verwendung als Kalibrator in Immunoassays
FR2756827B1 (fr) * 1996-12-05 1999-01-29 Pasteur Sanofi Diagnostics Composes synthetiques biepitopiques utilisables comme etalons dans les dosages biologiques de la troponine i
US6248869B1 (en) 1997-05-29 2001-06-19 Medical Analysis Systems, Inc. Troponin I forms and use of the same
FR2779526A1 (fr) * 1998-06-09 1999-12-10 Pasteur Sanofi Diagnostics Nouveau procede de dosage de la troponine i cardiaque
AU6117099A (en) 1998-10-21 2000-05-08 Spectral Diagnostics Inc. Cardiac troponin i polypeptide fragments and uses in diagnostics
FR2797689B1 (fr) * 1999-08-16 2003-06-27 Pasteur Sanofi Diagnostics Utilisation de composes synthetiques pour des immunodosages
US20040018577A1 (en) 2002-07-29 2004-01-29 Emerson Campbell John Lewis Multiple hybrid immunoassay
WO2004092214A2 (en) * 2003-04-10 2004-10-28 Aristex Affinity purification system using troponin molecules as affinity ligands
FI20030652A0 (fi) 2003-04-30 2003-04-30 Susann Eriksson Parannettu immunomääritys
US20050048468A1 (en) * 2003-08-27 2005-03-03 Bio-Rad Laboratories, Inc. Multiconstituent liquid lgG and IgM calibrators
US20050136542A1 (en) * 2003-12-19 2005-06-23 Beckman Coulter, Inc. Stabilized liquid reference solutions
US9040305B2 (en) * 2004-09-28 2015-05-26 Singulex, Inc. Method of analysis for determining a specific protein in blood samples using fluorescence spectrometry
US20060078998A1 (en) * 2004-09-28 2006-04-13 Singulex, Inc. System and methods for sample analysis
US8685711B2 (en) 2004-09-28 2014-04-01 Singulex, Inc. Methods and compositions for highly sensitive detection of molecules
US7572640B2 (en) * 2004-09-28 2009-08-11 Singulex, Inc. Method for highly sensitive detection of single protein molecules labeled with fluorescent moieties
US20070141710A1 (en) * 2005-12-20 2007-06-21 Beckman Coulter, Inc. Stable calibrators for immunoassays
US7838250B1 (en) 2006-04-04 2010-11-23 Singulex, Inc. Highly sensitive system and methods for analysis of troponin
AU2007233320B2 (en) 2006-04-04 2013-12-12 Singulex, Inc. Highly sensitive system and methods for analysis of troponin
FR2919611B1 (fr) 2007-08-03 2009-10-23 Bio Rad Pasteur Sa Nouvel epitope du bnp (1-32) et anticorps diriges contre cet epitope
CA2709217C (en) 2007-12-19 2021-01-05 Singulex, Inc. Scanning analyzer for single molecule detection and methods of use
JP2011513753A (ja) * 2008-03-05 2011-04-28 シンギュレックス・インコーポレイテッド 分子の高感度検出の方法および組成物
GB2464183A (en) * 2008-09-19 2010-04-14 Singulex Inc Sandwich assay
WO2010144358A1 (en) * 2009-06-08 2010-12-16 Singulex, Inc. Highly sensitive biomarker panels
AU2011249908A1 (en) 2010-05-06 2012-11-22 Singulex, Inc. Methods for diagnosing, staging, predicting risk for developing and identifying treatment responders for rheumatoid arthritis
US20110306148A1 (en) 2010-06-14 2011-12-15 Siemens Healthcare Diagnostics Inc. Composition for use as an assay reagent
EP3233896A1 (fr) 2014-12-18 2017-10-25 Biomérieux Composé synthétique biépitopique
CN105628941B (zh) * 2015-12-22 2017-09-22 北京康彻思坦生物技术有限公司 一种IgM血清学检测质控物的制备方法
TW201812300A (zh) * 2016-09-13 2018-04-01 日商富士麗比歐股份有限公司 心肌肌鈣蛋白之測定方法及測定試藥

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DK130991D0 (da) * 1991-07-04 1991-07-04 Immunodex K S Polymere konjugater
FR2701954B1 (fr) * 1993-02-23 1995-07-07 Pasteur Sanofi Diagnostics Composition stabilisée de troponine pour immunoessais et procédé de stabilisation de troponine pour immunoessais.
CA2130280C (en) * 1993-08-24 1999-08-31 Lilian Lee Method for purification of cardiac troponin i
DE4420742A1 (de) * 1993-10-20 1995-04-27 Boehringer Mannheim Gmbh Synthetischer Standard für Immunoassays

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2008539434A (ja) * 2005-04-28 2008-11-13 アボット・ラボラトリーズ 心臓トロポニンの安定化
JP2012513586A (ja) * 2008-12-22 2012-06-14 コーニンクレッカ フィリップス エレクトロニクス エヌ ヴィ 磁気ラベルを使用するトロポニンｉに関するアッセイ

Also Published As

Publication number Publication date
EP0752426A3 (de) 1998-07-08
US6114180A (en) 2000-09-05
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DE19524572A1 (de) 1997-01-09

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