JPH08505365A - 自己免疫疾患および炎症性疾患の治療 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 抗ＣＤ抗体を抗ＴＮＦ抗体と同時または連続的に投与することによる、自己免疫疾患または炎症疾患の治療方法が開示されている。この方法は、各種の自己免疫疾患あるいは炎症疾患を有するヒトまたは他の哺乳動物の治療の助けとして使用することができる。

Description

【発明の詳細な説明】 自己免疫疾患および炎症性疾患の治療 発明の背景 自己免疫疾患の原因となっている自己抗原の性質については不明であり、自己 免疫応答を引き起こす作用についても知られていない。ウイルスタンパク質が自 己抗原と類似性を有しているので自己反応性Ｔ細胞やＢ細胞が自己抗原を認識す るようになるという説が広く支持されている。Ｂリンパ球が抗体を産生するのに 対し、胸腺由来細胞、すなわち「Ｔ細胞」は細胞性免疫機能と関連がある。Ｔ細 胞は、細胞表面提示される抗原を認識し、これらの「抗原提示」細胞とともにそ の機能を発現する。 ヒトＴ細胞群を判定するために様々なマーカーが使われている。たとえばＣＤ ４は、免疫グロブリンと配列が部分的に同一の非多形性表面糖タンパク質受容体 である。ＣＤ４受容体は、明確な成熟末梢Ｔ細胞サブセットを定義づける。一般 に、ヘルパー機能や調節機能を発現するＣＤ４Ｔ細胞は免疫応答においてＢ細胞 と相互作用を示すが、ＣＤ８表面抗原発現Ｔ細胞は細胞傷害性Ｔ細胞として機能 し、免疫応答を調節する作用を示す。Ｔ細胞受容体は、Ｔ細胞応答を強化または 調節する剌激の経路となっているので、免疫介入の標的となりうる。 細胞相互作用のうち、ＣＤ４＋Ｔ細胞と抗原提示細胞（ＡＰＣ）の相互作用は 免疫応答の根源に位置するものである。自己免疫応答は多くの点で正常免疫応答 と本質的に同様であ る。したがって、ＣＤ４＋自己免疫反応性Ｔ細胞は、結合グルーブに自己抗原と 結合したクラスＩＩを発現するＡＰＣによって再剌激される。ある種のヒトの疾 患においてこの現象が起きることを示す証拠が示されている。たとえば、甲状腺 のグレーブズ病では、難治の場合に摘出される甲状腺にイン・ビボ活性化Ｔ細胞 が存在し、これらの細胞の多くがクローニング後に、外部からいかなる抗原も付 与されていない自己甲状腺細胞（ＡＰＣとして）、あるいは甲状腺特異抗原であ る甲状腺ペルオキシダーゼやサイログロブリンが付与されているＡＰＣを認識す ることを示すことができる［ロンデイら（Londei，M．et al．）、Science 228 ： 85-89(1985)；デイアンら（Dayan，C.M．et al.）、Proc．Natl．Acad．Sci． USA 88： 7415-7419(1991)］。同様に、リウマチ様関節炎（ＲＡ）では、３年の 経過期間中の連続３回の手術においてＲＡ患者の関節からコラーゲンＩＩ型を認 識するイン・ビボ活性化Ｔ細胞が単離されている［ロンデイら（Londei，M．et al．）、Proc．Natl．Acad．Sci．86：636-640(1989)］。自己免疫特性を示すそ の他のヒトの疾患においては、重症筋無力症におけるアセチルコリン受容体［ホ ホルフェルドら（Hohlfeld，R．et al．）、Nature 310：224-246(1984)］、多 発性硬化症におけるミエリン基礎タンパク質［ハフラーら（Hafler，D.A．et al ．）、J．Immunol．139：68-72(1987)］、またはインスリン依存性糖尿病におけ る膵島細胞膜［デ・ベラルディニスら（De Berardinis，P．et al.）、Lancet I I： 823-824(1988)；コンティアイネンら（Kontiainen，S．et al．）、Autoimmunity 8：193-197(1991)］を認識するＣＤ４＋細胞などの血液 由来ＣＤ４＋Ｔ細胞がクローン化されている。 ＣＤ４特異性抗体による処理は様々な実験誘導自己免疫疾患および自然発生自 己免疫疾患の両者の予防に有効である。たとえば、抗ＣＤ４または抗ＭＨＣクラ スＩＩ抗体による処理は、ネズミのコラーゲン誘導関節炎ならびにネズミの連鎖 球菌細胞壁誘導関節炎を有効に予防することがわかった［ランゲスら（Ranges， G.E．et al．）、J．Exp．Med．162：1105-1110(1985)；ホムら（Hom，J.T．et al.）、Eur．J．Immunol．18：881-888(1988)；ウーリーら（Wooley，P.H．etal ．）、J．Immunol．134：2366-2374(1985)；クーパーら（Cooper，S.M．et al． ）、J．Immunol．141：1958-1962(1988)；バン・デン・ブロエクら（Van den Br oek，M.F．et al．）、Eur．J．Immunol．22：57-61(1992)］。抗ＣＤ４処理は 、ＮＺＢ／ＮＺＷ Ｆ１（Ｂ／Ｗ）マウスおよびＢＸＳＢマウスの全身性紅斑性 狼瘡も予防した［ウォフシーら（Wofsy，D．et al.）、J．Immunol．134：852-8 57(1985)；ウォフシーら（Wofsy，D．et al．）、J．Immunol．136：4554-4560( 1986)；エルマークら（Ermak，T.J．et al．）、Laboratory Investigation 61 ： 447-456(1989)］。ところが、抗Ｔ細胞／ＡＰＣ処理は確定した疾患（すなわ ち発症後）の重症度を下げる効果が低いか全く無効である。たとえば、抗ＣＤ４ 処理と抗ＭＨＣクラスＩＩ処理はいずれも、マウスの確定したコラーゲン誘導関 節炎の重症度を下げる効果がなかった［ホム ら（Hom，J.T．etal．）、Eur．J．Immunol．18：881-888(1988)；クーパーら（ Cooper，S.M．et al．）、J．Immunol.141：1958-1962(1988)］。ヒトにおける 実際の治療で求められるのは発症後の治療と予防である。したがって、ＣＤ４Ｔ 細胞／ＡＰＣ相互作用をブロックすること自体は最適な治療法ではないかもしれ ず、他の手段によってその効果を増強することができる可能性が示唆されている 。 ＣＤ４以外の因子も細胞性免疫応答に影響を及ぼす。サイトカインの１種であ る腫瘍壊死因子−α（ＴＮＦα、カケクチンともいう）は、炎症、組織傷害、免 疫応答、および病変部への細胞侵入に多様な影響を及ぼすので、リウマチ様関節 炎をはじめとする炎症性関節疾患の発生に何らかの役割を果たしている［ブレナ ンら（Brennan，F.M．et al．）、Lancet11，244-247(1989)；フェルドマンら（ Feldmann，M．etal．）、Ann．Rheumatic Dis．51：480-486(1990)］。ＴＮＦα は、エンドトキシンやその他の刺激に反応して主に単核球とマクロファージによ って１７ｋＤのタンパク質サブユニットの可溶性ホモトリマーとして分泌される タンパク質である［スミスら（Smith，R.A．et al．）、J．Biol．Chem．262：6 951-6954(1987)］。膜に結合した２６ｋＤのＴＮＦ前駆体も記載されている［ク リーグラーら（Kriegler，M．et al．）、Cell 53：45-53(1988)］。ＴＮＦαを コードする遺伝子の発現は単核球／マクロファージファミリーの細胞に限定され ない。ＴＮＦはＣＤ４＋およびＣＤ８＋の末梢血Ｔリンパ球や様々な培養Ｔ細胞 系およびＢ細胞系によっても産生さ れる［クチュリら（Cuturi，M.C．et al．）、J．Exp．Med．165：1581(1987)； スングら（Sung，S.-S.J．et al．）、J．Exp．Med．168：1539(1988)；ターナ ーら（Turner，M．etal．）、Eur．J．Immunol．17：1807-1814(1987)］。最近 の証拠から、自己免疫病理および移植片対宿主病理におけるＴＮＦの関与が示唆 されている［ピグエットら（Piguet，P.-F．et al．）、J．Exp．Med．166：128 0(1987)］。ＴＮＦαと反応し、ＴＮＦβとも反応すると考えられるハムスター 抗ＴＮＦモノクローナル抗体ＴＮ３．１９．２は、処理を関節炎発症前に開始す るか後に開始するかに関わらず、ＤＢＡ／１マウスの関節破壊の程度を顕著に低 下させるとともに、コラーゲンＩＩ型誘導関節炎に伴う炎症を軽減しうることが 証明されている［ウイリアムスら（Williams，R.O．et al．）、Proc．Natl．Ac ad．Sci．USA 89： 9784-9788(1992)］。ところが、抗ＴＮＦ療法は関節炎を完全 には除去しなかったことから、ＴＮＦ以外の因子の病理への関与が示唆される。 これらをはじめとする進歩にも関わらず、依然として自己免疫疾患および炎症 性疾患のより良い治療が大いに求められている。発明の概要 本発明は、自己免疫疾患や炎症性疾患、とくにリウマチ様関節炎の治療におい て、抗ＣＤ４抗体と抗ＴＮＦ抗体を組み合わせて使用する併用療法が、各薬剤を 単独で使用する場合よりはるかに優れた結果が得られるという発見に関する。抗 ＣＤ４抗体は、抗ＴＮＦ抗体と同時または連続的に対象に投与される。抗体は薬 学的に許容されるビーイクルとともに投与することができ、投与は単回投与でも よいし、数日ないし数週の間隔をおいて連続的に投与してもよい。 併用療法は、ＣＤ４＋細胞の活性化や抗原提示細胞との相互作用に影響を及ぼ す抗ＣＤ４抗体以外の薬剤を、抗ＴＮＦ抗体以外の炎症メディエーターとともに 組み合わせて用いることもできる。 抗ＣＤ４抗体と抗ＴＮＦ抗体の併用療法の利点としては、各治療薬を別々に使 用する治療の効果より優れた結果が得られることなどが挙げられる。また、同程 度の免疫応答および炎症応答の低下をもたらすのに用量が少なくて済むので、治 療ウィンドウ（therapeutic window）が広がる。用量が少なくて済むということ は、患者の出費を減らし、副作用の発現も減る可能性がある。図面の簡単な説明 図１は、それぞれ図１Ａおよび図１Ｂとした１組のグラフであり、５０μｇの 抗ＴＮＦ（ハムスターＴＮ３．１９．２）および２００μｇの抗ＣＤ４をＤＢＡ ／１雄性マウスに投与後の臨床スコア（図１Ａ）および足蹠腫大測定値（図１Ｂ ）によって関節炎抑制を評価した実験結果を示す。白抜き四角＝対照、ダイアモ ンド＝抗ＣＤ４、三角＝抗ＴＮＦ（５０μｇ）、黒塗り四角＝抗ＣＤ４／抗ＴＮ Ｆ（５０μｇ）。 図２は、それぞれ図２Ａ、図２Ｂ、図２Ｃ、および図２Ｄ とした一連のグラフであり、臨床スコアおよび足蹠腫大測定値に対する低用量（ ５０μｇ）抗ＴＮＦまたは高用量（３００μｇ）抗ＴＮＦによる抗ＣＤ４の作用 の強化を評価した第２の実験結果を示す。図２Ａは低用量抗ＴＮＦの場合の臨床 スコアであり、図２Ｂは高用量抗ＴＮＦの場合の臨床スコア、図２Ｃは低用量抗 ＴＮＦの場合の足蹠腫大測定値、図２Ｄは高用量抗ＴＮＦの場合の足蹠腫大測定 値である。白抜き四角＝対照、ダイアモンド＝抗ＣＤ４、三角＝抗ＴＮＦ（５０ μｇ）、黒塗り四角＝抗ＣＤ４／抗ＴＮＦ（５０μｇ）。発明の詳細な説明 本発明は、抗ＣＤ４抗体を抗ＴＮＦ抗体と併用投与することによるリウマチ様 関節炎などの自己免疫疾患または炎症性疾患の治療に関する。抗体という用語は 、ポリクローナル抗体とモノクローナル抗体の両者を包含するものとする。抗体 という用語は、ＣＤ４またはＴＮＦと反応する２つ以上の抗体の混合物（たとえ ば異なるタイプのＣＤ４またはＴＮＦ反応性モノクローナル抗体の混合物）を包 含するものである。さらに、抗体という用語は、抗体全体、それらの生物学的機 能を持つ断片、および２つ以上の種、二重機能性抗体などの一部分を含んでなる キメラ抗体を包含する。使用可能な生物学的機能を持つ抗体断片とは、ＣＤ４ま たはＴＮＦへの抗体断片の結合に十分な断片である。 キメラ抗体は、２つの異なる種（たとえばヒトの定常領域とネズミの可変また は結合領域）に由来する部分からなるも のであってよい。２つの異なる種に由来する部分は、従来の方法によって化学的 に結合させてもよいし、遺伝子操作技術を用いて単一の連続タンパク質として調 製してもよい。キメラ抗体の軽鎖と重鎖の両部分のタンパク質をコードするＤＮ Ａを連続タンパク質として発現させることができる。 体細胞ハイブリダイゼーション技術［ケーラーとミルスタイン（Kohler and M ilstein）、Nature 256：495-497(1975)］やその他の技術により、ＣＤ４または ＴＮＦと反応するモノクローナル抗体を製造することができる。代表的なハイブ リダイゼーション法では、少なくともＣＤ４またはＴＮＦの一部分からなる粗製 または精製タンパク質またはペプチドを免疫原として使うことができる。動物に 免疫原を接種して、抗ＣＤ４抗体または抗ＴＮＦ抗体産生脾臓細胞を得る。免疫 される動物の種類は、目的のモノクローナル抗体の種類によって異なる。抗体産 生細胞を不滅化細胞（たとえば黒色腫細胞）と融合させて、抗ＣＤ４抗体または 抗ＴＮＦ抗体を分泌する能力を有するハイブリドーマを作成する。融合しなかっ た残りの抗体産生細胞と不滅化細胞は除去される。目的の抗体を産生するハイブ リドーマを従来の方法を用いて選択し、選んだハイブリドーマをクローン化し、 培養する。 動物に少なくともＣＤ４またはＴＮＦの一部分からなる粗製または精製タンパ ク質またはペプチドを免疫投与することによって、ポリクローナル抗体を製造す ることができる。動物は、ＣＤ４またはＴＮＦと反応する抗体が産生される条件 下で飼育される。目標の抗体値に達したら、動物から採血す る。ポリクローナル抗体含有血清（抗血清）を他の血液成分から分離する。ポリ クローナル抗体含有血清をさらに分離して、特定タイプの抗体（たとえばＩｇＧ 、ＩｇＭ）の画分に分けることができる。 抗ＣＤ４抗体およびそれらの疾患治療用途に関するさらに詳細な説明が下記文 献に記載されており、それらの記載内容は引例として本発明に含まれるものとす る。［米国特許出願第０７／８６７，１００号、１９９２年６月２５日出願；グ レイヘブら（Grayheb，J．et al．）、J．of Autoimmunity 2：627-642(1989)； ランゲスら（Ranges，G.E．et al．）、J．Exp．Med．162：1105-1110(1985)； ホムら（Hom，J.T．et al．）、Eur．J．Immunol．18：881-888(1988)；ウーリ ーら（Wooley，P.H．et al．）、J. Immunol. 134：2366-2374(1985)；クーパー ら（Cooper，S.M．et al．）、J．Immunol．141：1958-1962(1988)；バン・デン ・ブロエクら（Van den Broek，M.F．et al．）、Eur．J．Immunol．22：57-61( 1992)；ウォフシーら（Wofsy，D．et al．）、J． Immunol．134：852-857(1985 )；ウォフシーら（Wofsy，D．et al．）、J．Immunol．136：4554-4560(1986)； エルマークら（Ermak，T.J．et al．）、Laboratory Investigation 61：447-45 6(1989)；レイテルら（Reiter，C．et al．）、34：525-532(1991)；ヘルゾーグ ら（Herzog，C．et al．）、J．Autoimmun．2：627(1989)；オウヤンら（Ouyang ，Q．et al．）、Dig．Dis．Sci．33：1528-1536(1988)；ヘルトゾーグら（Hert zog，C．et al．）、Lancet，p．1461（December 19，1987）；エム リッヒら（Emmrich，J．et al．）、Lancet 338：570-571（August 31，1991） ］。 抗ＴＮＦ抗体およびそれらの疾患治療用途に関するさらに詳細な説明が下記文 献に記載されており、それらの記載内容は引例として本発明に含まれるものとす る。［米国特許出願第０７／９４３，８５２号、１９９２年９月１１日出願；ル ビンら（Rubin et al．）、ＥＰＯ特許公開第０２１８８６８号、１９８７年４ 月２２日公開：ヨネら（Yone et al．）、ＥＰＯ特許公開第０２８８０８８号、 １９８８年１０月２６日公開；リアングら（Liang，C.-M．et al．）、Biochem ．Biophys．Res．Comm． 137：847-854(1986)；ミーガーら（Meager，A．et al． ）、Hybridoma 6：305-311(1987)；フェンドリーら（Fendly et al．）、Hybrid oma 6：359-369(1987)；ブリングマンら（Bringman，T.S．et al．）、Hybridom a 6：489-507(1987)；ブリングマンら（Bringman T.S．et al．）、Hybridoma 6 ：489-507(1987)；ヒライら（Hirai，M．et al．）、J．Immunol．Meth．96：57 -62(1987)；モラーら（Moller，A．et al．）、Cytokine 2：162-169(1990)；マ ティソンら（Mathison，J.C．et al．）、J．Clin．Invest．81：1925-1937(198 8)；べウトラーら（Beutler，B．et al．）、Science 229：869-871(1985)；ト レーシーら（Tracey，K.J．et al．）、Nature 330：662-664(1987)；シマモト ら（Shimamoto，Y．et al．）、Immunol．Lett．17：311-318(1988)；シルバら （Silva，A.T．et al．）、J．Infect．Dis．162：421-427(1990)；オパールら （Opal，S.M．et al．）、J． Infect．Dis． 161：1148-1152(1990)；ヒンショーら（Hinshaw，L.B．et al.） 、Circ．Shock 30：279-292(1990)］。 抗体は、従来の無毒の薬学的に許容される担体、アジュバント、およびビーイ クルを含む処方として、皮下投与、静脈内投与、筋肉内投与、局所投与、経口投 与、直腸内投与、経鼻的投与、経頬的投与、経膣的投与、吸入噴霧投与、または 留置片（implanted reservoir）投与することができる。抗体が投与される剤形 （たとえばカプセル、錠剤、溶液、乳剤）は、少なくとも部分的には投与経路に よって決まる。 抗ＣＤ４抗体と抗ＴＮＦ抗体を組み合わせたものの治療有効量とは、ある自己 免疫疾患または炎症性疾患に伴う症状を有意に抑制または除去するのに要する量 をいう。好ましい治療有効量とは、各抗体について投与１回あたり０．１〜１０ ｍｇ／ｋｇである。治療有効量は個体ベースで決定され、少なくとも一部はその 個体のサイズ、治療しようとする症状の程度、目標とする効果などを考慮して決 められる。したがって、治療有効量は、通常の技術を有する者であれば上記因子 を用いて常法による実験を行なうことによって決定することができる。 治療有効量は、単回投与または数日ないし数週の間隔を置いて連続投与するこ とができる。治療有効量を投与したら、維持量の抗ＣＤ４抗体または抗ＴＮＦ抗 体または抗ＣＤ４抗体と抗ＴＮＦ抗体の組み合わせを投与することができる。維 持量とは、治療有効量によって達成された症状の抑制または除去を維持するのに 要する抗ＣＤ４抗体、抗ＴＮＦ抗体、ま たは抗ＣＤ４抗体と抗ＴＮＦ抗体の組み合わせの量をいう。この維持量は、単回 投与または数日ないし数週の間隔を置いて連続投与することができる。治療有効 量と同様に、維持量も個体ベースで決定される。 抗リウマチ薬のメトトレキセートやシクロスポリンＡなどその他の抗炎症薬を 抗ＣＤ４抗体または抗ＴＮＦ抗体と併用投与することができる。 本明細書で検討する実験データは抗ＣＤ４抗体と抗ＴＮＦ抗体の組み合わせに 関しているが、抗ＣＤ４抗体以外の薬剤でＣＤ４＋細胞の活性化または抗原提示 細胞（ＡＰＣ）との相互作用に影響を及ぼすものあるいはこれをさらに抗ＣＤ４ 抗体に加えて、抗ＴＮＦ抗体以外の炎症メディエーターあるいはこれを抗ＴＮＦ 抗体にさらに加えたものと組み合わせて使用する併用療法も、自己免疫疾患や炎 症性疾患の治療に使うことができる。 ＣＤ４＋に影響を及ぼす薬剤としては、抗ＣＤ４、抗ＣＤ２８、抗ＣＤ５２（ たとえばＣＡＭＰＡＴＨ−１Ｈ）、抗ＩＬ−２ＲなどＴ細胞またはそれらの受容 体に対する抗体；抗クラスＩＩ、抗ＩＣＡＭ−１、抗ＬＦＡ−３、抗ＬＦＡ−１ などＡＰＣまたはそれらの受容体に対する抗体；シクロスポリンやＦＫ−５０６ などＨＬＡクラスＩＩグルーブをブロックするかＴ細胞活性化におけるシグナル 伝達をブロックするものをはじめとするＴ細胞／ＡＰＣ相互作用をブロックする ペプチドおよび小型分子；およびＣＤ１９、２０、２１、２３、およびＢＢ／７ またはＢ１、ＣＤ２８リガンドなどのＣ Ｄ５＋Ｂ細胞などのＢ細胞に対する抗体が挙げられる。ＣＤ５＋Ｂ細胞などのＢ 細胞は、疾患進行において重要なタイプのＡＰＣであると考えられている［プラ ター−ザイベルクら（Plater-Zyberk，C．et al.）、Ann．N.Y．Acad．Sci．651 ：540-555(1992)］。したがって、本発明においては抗Ｂ細胞抗体がとくに有用 である。 炎症メディエーターとしては、ＴＮＦを阻害する抗ＴＮＦ抗体、可溶性ＴＮＦ −Ｒ（モノマー性、ＩｇＧ融合タンパク質など）、ペントキシフィリンやサリド マイドなどＴＮＦ受容体シグナル化またはＴＮＦ合成を阻害するブロッキングペ プチドおよび小型分子；ＩＬ−１を阻害する抗ＩＬ−１抗体、可溶性ＩＬ−１Ｒ 、ＩＬ−１受容体拮抗剤、またはＩＬ−１合成またはＩＬ−１受容体シグナル化 に影響を及ぼすブロッキングペプチドおよび小型分子；ＩＬ−６を阻害する抗Ｉ Ｌ−６抗体、抗ｇｐ１３０、またはＩＬ−６の合成または受容体シグナル化に影 響を及ぼすブロッキングペプチドおよび小型分子；ＧＭ−ＣＳＦおよびヘモカイ ン（ＩＬ−８）ファミリーのメンバーなどその他の炎症メディエーターに影響を 及ぼす薬剤；およびＩＬ−４、ＩＬ−１０、ＴＧＦβなど抗炎症性を有するサイ トカインなどが挙げられる。 したがって、本発明の併用療法はヒトおよび動物の多くの自己免疫疾患や炎症 性疾患の治療に有用である。ヒトにおいては、本療法が適している疾患としては 、リウマチ様関節炎（ＲＡ）および若年性慢性関節炎（ＪＣＡ）などが挙げられ る。併用療法に適したその他の疾患としては、強直性脊椎炎 、乾癬性関節炎、炎症性腹症関連関節炎などの脊椎関節症；結節性多発性動脈炎 、ベーゲナー肉芽腫症、巨細胞性動脈炎、ヘーノホーシェーンライン紫斑病、腎 臓の顕微脈管炎などの脈管障害；シェーグレン症候群；全身性狼瘡；クローン病 および潰瘍性大腸炎などの炎症性腹症；慢性活動性肝炎；原発性胆汁性肝硬変； 原因不明繊維形成肺胞炎およびその他の繊維形成肺疾患；ブドウ膜炎；多発性硬 化症；重症筋無力症；溶血性貧血；強皮症；移植片対宿主疾患（graft versus h ost disease）；アレルギー；および腎臓、肝臓、心臓、肺、骨髄、皮膚、その 他器官の移植などが挙げられる。 以下、実施例により本発明をさらに詳細かつ具体的に説明する。実施例 ：ネズミモデルにおける誘導関節炎の治療 コラーゲンＩＩ型誘導関節炎のネズミモデルは、顕著なＭＨＣクラスＩＩ素因 、ならびに組織学的特徴、免疫組織学的特徴、軟骨および骨の侵食、および抗Ｔ ＮＦ療法応答性の点でリウマチ様関節炎（ＲＡ）と類似性がある。したがって、 この動物モデルはヒトの疾患によく近似したモデルとして使用することができる 。本実施例で使用したリウマチ様関節炎モデルは、ウイリアムスら［（Williams ，R.0．et al．）、PNAS 89：9784-9788(1992)］によって記載されているＤＢＡ ／１マウスのコラーゲンＩＩ型誘導関節炎である。ＩＩ型コラーゲンは、ミラー が述べるように［Miller、Biochemistry 11：4903-4909(1972)］、限定的ペプシ ン可溶化と塩分画法 によってウシ関節軟骨から精製した。試験１ ８〜１２週齢の雄性ＤＢＡ／１マウスに、フロインドの完全アジュバントに乳 化した１００μｇのウシＩＩ型コラーゲンを免疫投与し、２１日後に１００μｇ のコラーゲンを腹腔内（ｉ．ｐ．）に免疫投与した。最初の注射から約３５日目 に臨床的に明白な関節炎症状（１肢以上に赤変と腫脹の両方または一方が見られ る）が発現した直後に、マウスに抗ＣＤ４、抗ＴＮＦ、抗ＣＤ４と抗ＴＮＦの両 方、またはイソタイプ対照をi.p.注射した。関節炎の臨床スコアと足蹠腫大測定 値を１０日間モニターした。抗体投与は１日目（発症時）、４日目、および７日 目に行なった。 ２つの実験を行ない、臨床スコアと足蹠腫大を評価した。各実験では、注射１ 回あたり２００μｇの抗ＣＤ４（ラットＹＴＳ１９１およびＹＴＡ３．１）を使 用した。臨床スコアは以下の基準で評価した。０＝正常、１＝軽度の腫大と紅斑 の両方または一方、２＝顕著な水腫、３＝関節硬直。各肢について等級評価し、 マウス１匹あたり最高１２点のスコアを与えた。足蹠腫脹は、障害を有する後足 蹠の厚みをキャリパーで測定することによってモニターした。結果は、関節炎発 症前の足蹠幅に対する足蹠幅の増大率で示した。 第１の実験では、注射１回あたり５０μｇの抗ＴＮＦ（ハムスターＴＮ３．１ ９．２）を１群あたり５匹のマウスそれぞれに単回投与した。抗ＣＤ４または抗 ＴＮＦ（ＴＮ３．１ ９を５０μｇ／マウスの用量で３回投与）の有意な作用はみられなかった。臨床 スコアと足蹠腫脹のいずれについても併用療法の利点が明白に認められる（図１ Ａと図１Ｂ参照）。 第２の実験では、５０μｇまたは３００μｇの抗ＴＮＦを１群あたり７匹のマ ウスそれぞれに投与した。抗ＣＤ４と低濃度（５０μｇ）の抗ＴＮＦはいずれも いくらかの作用を示し、この２つの濃度の併用療法の利点は、足蹠腫脹について は認められたが、臨床スコアでは認められなかった。しかし、抗ＴＮＦを３００ μｇ／マウスの用量で投与したところ、抗ＣＤ４との併用療法の利点が臨床スコ アと足蹠腫脹の両方で見られ、足蹠腫脹でより明白であった（図２Ａ、図２Ｂ、 図２Ｃ、図２Ｄ参照）。 上記実験の結果は、抗ＴＮＦ抗体と抗ＣＤ４抗体を組み合わせて用いる併用療 法は臨床スコアと足蹠腫脹で評価できる明白な利点があることを示すものである 。試験２ ８〜１２週齢の雄性ＤＢＡ／１マウスに、フロインドの完全アジュバントに乳 化した１００μｇのＩＩ型コラーゲンを皮内免疫投与した。１肢以上で紅斑と腫 脹の両方または一方が初めて見られた日を関節炎発症１日目とした。関節炎は、 ＩＩ型コラーゲン免疫後３０日目ごろに臨床的に明白となった。各マウスにつき 、関節炎が初めて見られた日に処理を開始し、１０日にわたり処理を続け、その 後マウスを屠殺し、関節を組織検査用に処理した。１日目、４日目、および７日 目にモノクローナル抗体処理を行なった。まず、５０μｇという最適用量以下（ sub-optimal dose）の抗ＴＮＦ（ＴＮ３−１９．１２、ハムスターＩｇＧ１抗Ｔ ＮＦα／βｍＡｂ）を単独で投与した場合を、同用量で２００μｇの抗ＣＤ４（ ラットＩｇＧ２ｂ、ＹＴＳ１９１．１．２とＹＴＡ３．１．２の混合物）と併用 投与した場合と比較した。結果を確認するために、上記と同一内容の２つの実験 を別に行なった（それぞれマウス１１〜１２匹／群および７〜８匹／群）。抗Ｃ Ｄ４単独でも最適用量以下の抗ＴＮＦ単独でも、足蹠腫大を有意に低下させるこ とはできなかった（データは示さない）。抗ＴＮＦと抗ＣＤ４の併用処理は、対 照ｍＡｂを投与された群と比べて、足蹠腫大が一貫して統計的に有意な低下を引 き起こした（Ｐ＜０．００１）。さらに、いずれの実験においても、抗ＴＮＦ／ 抗ＣＤ４併用処理（本明細書では抗ＣＤ４／抗ＴＮＦ処理ともいう）は、抗ＣＤ ４単独および抗ＴＮＦ単独と比べて足蹠腫大を有意に低下させた（Ｐ＜０．０５ ）。 次に、最適用量の抗ＴＮＦ（３００μｇ）を単独投与した場合と、同用量で抗 ＣＤ４と併用投与した場合を、同一内容の別の２つの実験（それぞれマウス７〜 ７匹／群およびマウス６〜７匹／群）と比較した。前記試験同様、抗ＴＮＦ／抗 ＣＤ４併用処理は、対照ｍＡｂを投与された群と比べて足蹠腫大を有意に低下さ せた（Ｐ＜０．００５、データは示さない）。第１の実験では、抗ＣＤ４単独ま たは抗ＴＮＦ単独を投与された群と比べても、足蹠腫大は抗ＣＤ４／抗ＴＮＦ併 用処理群で有意に低下した（Ｐ＜０．０５）。有意差はなか ったが、抗ＴＮＦ単独または抗ＣＤ４単独の投与を受けたマウスで足蹠腫大があ る程度低下したが、これはおそらく群サイズが小さいことによるものであろう（ １群あたり６匹）。第２の実験では、抗ＣＤ４／抗ＴＮＦ併用投与は抗ＣＤ４単 独投与と比べて足蹠腫大を有意に低下させたが（Ｐ＜０．０５）、抗ＴＮＦ単独 と比べると有意な低下はなかった。これは、過去の研究［ウイリアムスら（Will iams，R.O．et al.）、PNAS 89：9784-9788(1992)］から予想されたように、抗 ＴＮＦ自体が足蹠腫大の有意な低下を引き起こしたからである。実験では、抗Ｔ ＮＦ単独に起因する足蹠腫大低下率はそれぞれ２３％と３３％であった。したが って、抗ＴＮＦ処理による足蹠腫脹低下は、ＴＮ３−１１９．１２（３００μｇ ／マウス）による処理が処理期間を通じて対照と比べて平均約３４％の足蹠腫大 測定値の低下をもたらした既報の知見にほぼ匹敵するものである［ウイリアムス ら（Williams，R.O．et al．）、PNAS 89：9784-9788(1992)］。四肢への影響 コラーゲン誘導関節炎では、ＲＡの場合と同様に、臨床疾患が最初に発現して から新たに別の四肢が影響を受けるのが普通であり、新たな四肢への影響はこの 疾患の進行の重要な指標である。新たな四肢への影響に及ぼす抗ＣＤ４抗／ＴＮ Ｆ処理の影響を調べるために、10日間の処理期間の最終日に臨床的に検出可能な 関節炎を有する四肢の数を処理前の関節炎四肢数と比較した。対照ｍＡｂを投与 されたマウスでは、 症状を有する肢が１０日間に約５０％増加した。上記２つの実験の結果をまとめ て表１に示す。 抗ＣＤ４単独および最適用量以下の抗ＴＮＦ単独の投与を受けた群において四 肢への新たな影響が減ったが、その差は有意でなかった。最適用量の抗ＴＮＦを 投与された群では、四肢への影響の増加率は１０％未満であった（Ｐ＜０．０５ ）。しかし、さらに注目すべき点は、抗ＣＤ４／抗ＴＮＦの併用投与を受けた群 で四肢への新たな影響がほとんどなかったことである。新たな四肢への影響の増 加は、抗ＣＤ４と最適用量以下の抗ＴＮＦの投与を受けたマウスではわずか３％ であり（Ｐ＜０．０５）、抗ＣＤ４と最適用量の抗ＴＮＦの投与を受けたマウス では０％（Ｐ＜０．００５）であった。組織学的特徴 １０日後、マウスを屠殺し、最初に関節炎の臨床症状を示した四肢を各マウス から切除し、ホルマリン固定し、脱カルシウム化し、ワックス埋入した後、切片 を作成し、ヘマトキシリンとエオジンで染色した。中指近位指節間（ＰＩＰ）関 節の矢状切片について、軟骨と骨のいずれかに侵食があるかどうかを盲検的に調 べた（炎症組織が充満した軟骨または骨の分界欠損（demarcated defects）とし て判定）。比較は同一関節についてのみ行ない、関節炎は同一継続期間のものと した。侵食は対照群のＰＩＰ関節のほぼ１００％で見られ、抗ＣＤ４単独または 最適用量以下の抗ＴＮＦ単独の投与を受けた関節の約７０〜８０％で見られた。 上記２つの実験の結果をまとめ、表２に示す。 最適用量の抗ＴＮＦ単独を投与した場合、既報［ウイリアムスら（Williams， R.O．et al．）、PNAS 89：9784-9788(1992)］の通り病変が有意に低下した。し たがって、最適用量の抗ＴＮＦ単独の投与を受けたマウスでは、侵食変化を示し た関節の割合は５４％に低下し（Ｐ＜０．００１）、抗ＣＤ４と最適用量以下ま たは最適用量の抗ＴＮＦを投与された群ではそれぞれ関節の２２％（Ｐ＜０．０ １）と３１％（Ｐ＞０．０１）のみが侵食された。このように、３００μｇの 抗ＴＮＦ単独投与により関節侵食からある程度保護されたか、抗ＣＤ４／抗ＴＮ Ｆを併用投与すると保護の程度が有意に高くなった。ＣＤ４＋Ｔ細胞の減少 抗ＣＤ４処理がどの程度まで末梢ＣＤ４＋Ｔ細胞を減少させるかをフローサイ トメトリー法によって測定した。解離牌臓細胞または末梢血におけるＣＤ４＋リ ンパ球の比率を計算するために、細胞をフィコエリスリン−コンジュゲート化抗 ＣＤ４（Becton Dickinson，Oxford，UK）とともにインキュベーシヨンした後、 リンパ球画分上にスキャッターゲートを設定するフローサイトメトリー法（FACS can，Becton Dickinson）によって分析した。抗ＣＤ４処理によって、牌臓のＣ Ｄ４＋細胞は９８％（±１％）減少し、血液中のＣＤ４＋Ｔ細胞は９６％（±３ ％）減少した。免疫組織化学 末梢ＣＤ４＋Ｔ細胞が実質的に全て除去されても関節内にＣＤ４＋Ｔ細胞が残 存している可能性があるかどうか、処理済み関節炎マウスから採取した切片の免 疫組織化学的分析によって調べた。ワックス埋入切片を脱ワックス処理し、トリ プシン消化した後、抗ＣＤ４ｍＡｂ（ＹＴＳ１９１．１．２／ＹＴＡ３．１．２ ）とともにインキュベーションした。ＣＤ４＋細胞のＴ細胞同一性（T cell ide ntity）を確認するために、一連の切片を抗Ｔｈｙ−１ｍＡｂ（ＹＴＳ１５４． ７ ）で染色した［コッブボルドら（Cobbold，S.P．et al.）、Nature 312：548-55 1(1984)］。対照切片は、ＨＲＰＮ１１／１２ａとともにインキュベーションし た。結合抗体の検出は、既報［デレウランら（Deleuran，B.W．et al．）、Arth ritis ＆ Rheumatism 34： 1125-1132(1991)］に従い、アルカリホスファターゼ ／ラット抗アルカリホスファターゼ複合体（ＡＰＡＡＰ、Dako，High Wycombe， UK）および高速赤色基質（fast red substrate）によっておこなった。対照ｍＡ ｂ投与マウスだけでなく、抗ＣＤ４処理マウスの関節からも少数のＣＤ４＋細胞 が検出された（データは示さない）。さらに、調べた少数のマウス（１処理群あ たり４匹）の範囲内では、抗ＣＤ４単独投与または抗ＣＤ４と抗ＴＮＦの併用投 与を受けた群にＣＤ４＋Ｔ細胞数の有意な減少は見られなかった（データは示さ ない）。したがって、抗ＣＤ４処理は関節からＣＤ４＋Ｔ細胞を除去しなかった ことになる。抗コラーゲンＩｇＧ値 酵素結合免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）によって血清抗コラーゲンＩｇＧ値を 測定した。マイクロタイタープレートにウシＩＩ型コラーゲン（２μｇ／ｍｌ） を被覆し、ブロックした後、段階的に希釈した一連の試験血清とともにインキュ ベーションした。結合ＩｇＧの検出は、アルカリホスファターゼ−コンジュゲー ト化ヤギ抗マウスＩｇＧとともにインキュベーションし、次いで基質（ジニトロ フェニルホスフェート）を加えることによって行なった。４０５ｎｍで光学密度 を読み取った。アフィニティー精製マウス抗ＩＩ型コラーゲン抗体からなる参照 試料を各プレートに加えた。抗ＣＤ４単独、抗ＴＮＦ単独、あるいは抗ＣＤ４と 抗ＴＮＦを組み合わせたものを投与しても、１０日間の処理期間中に抗ＩＩ型コ ラーゲンＩｇＧの血清値は有意な変化を示さなかった（表３）。 抗グロブリン応答 抗ＣＤ４処理が抗ＴＮＦｍＡｂに対する中和性抗グロブリ ン応答を防止するかどうかを調べるために、ＥＬＩＳＡで測定した１０日目のＩ ｇＭ抗ＴＮ４−１９．１２値を比較した。この時点では、ＩｇＧ抗ＴＮ３−１９ ．１２応答は検出されなかった。マイクロタイタープレートにＴＮ３−１９．１ ２（５μｇ／ｍｌ）を被覆し、ブロックした後、一連の希釈試験血清とともにイ ンキュベーションした。ヤギ抗マウスＩｇＭアルカリホスファターゼコンジュゲ ートを加え、次いで基質を加えることによって、結合ＩｇＭを検出した。その結 果、抗ＣＤ４は、抗ＴＮ３−１９．１２抗体応答の発現の防止に非常に有効であ ることがわかった（表４）。次に、抗ＣＤ４処理が循環抗ＴＮＦ−α値の上昇を もたらす（ハムスター抗ＴＮＦに対する抗体応答を低下させることによって）か どうかを調べるために、実験１０日目に組替えネズミＴＮＦ−αを用いて、マウ ス血清中遊離ＴＮ３−１９．１２を検出するＥＬＩＳＡを行なった。マイクロタ イタープレートに組替えネズミＴＮＦ−αを被覆し、ブロックした後、試験血清 とともにインキュベーションした。次いで、ヤギ抗ハムスターＩｇＧアルカリホ スファターゼコンジュゲート（ネズミＩｇＧに吸着させたもの）を加え、次いで 基質を加えた。既知濃度のＴＮ３−１９．１２試料と比較することで定量を行な った。ＴＮ３−１９．１２値は、抗ＴＮＦ単独投与の場合と比べて、抗ＣＤ４と 抗ＴＮＦを併用投与した群でやや上昇したが、その差は統計的に有意ではなかっ た（表４）。 均等物 当業者であれば、単に常識的実験手法を用いて、ここに述べた発明の具体的態 様に対する多くの均等物を認識しまた確認し得るであろう。そのような均等物は 、下記のクレームの範晴に含まれるものである。産業の利用分野 本発明は、特にリウマチ様関節炎のような自己免疫疾患あるいは炎症性疾患の 治療における併用療法に有用な物質および薬剤に主として利用される。

【手続補正書】特許法第１８４条の８ 【提出日】１９９４年１０月７日 【補正内容】 原文明細書４ページ補正 膜に結合した２６ｋＤのＴＮＦ前駆体も記載されている［クリーグラーら（Krie gler，M．et al．）、Cell 53：45-53(1988)］。ＴＮＦαをコードする遺伝子の 発現は単核球／マクロファージファミリーの細胞に限定されない。ＴＮＦはＣＤ ４＋およびＣＤ８＋の末梢血Ｔリンパ球や様々な培養Ｔ細胞系およびＢ細胞系に よっても産生される［クチュリら（Cuturi，M.C．et al．）、J．Exp．Med．165 ：1581(1987)；スングら（Sung，S.-S.J．et al．）、J．Exp．Med．168：1539( 1988)；ターナーら（Turner，M．et al．）、Eur．J．Immunol．17：1807-1814( 1987)］。最近の証拠から、自己免疫病理および移植片対宿主病理におけるＴＮ Ｆの関与が示唆されている［ピグエットら（Piguet，P.-F．et al．）、J．Exp ．Med．166 ：1280(1987)］。ＴＮＦαと反応し、ＴＮＦβとも反応すると考えら れるハムスター抗ＴＮＦモノクローナル抗体ＴＮ３．１９．２は、処理を関節炎 発症前に開始するか後に開始するかに関わらず、ＤＢＡ／１マウスの関節破壊の 程度を顕著に低下させるとともに、コラーゲンＩＩ型誘導関節炎に伴う炎症を軽 減しうることが証明されている［ウイリアムスら（Williams，R.O．et al．）、Proc．Natl．Acad．Sci．USA 89： 9784-9788(1992)］。ところが、抗ＴＮＦ療法 は関節炎を完全には除去しなかったことから、ＴＮＦ以外の因子の病理への関与 が示唆される。 ＷＯ ８９／０８４６０は、ショック関連状態を予防また は治療する、抗ＴＮＦ抗体と抗リンパ球抗体の混合物を記載している。 これらをはじめとする進歩にも関わらず、依然として自己免疫疾患および炎症 性疾患のより良い治療が大いに求められている。発明の概要 本発明は、自己免疫疾患や炎症性疾患、とくにリウマチ様関節炎の治療におい て、抗ＣＤ４抗体と抗ＴＮＦ抗体を組み合わせて使用する併用療法か、各薬剤を 単独で使用する場合よりはるかに優れた結果が得られるという発見に関する。抗 ＣＤ４抗体は、抗ＴＮＦ抗体と同時または連続的に対象に投与される。 原文明細書２３ページ補正 実験１０日目に組替えネズミＴＮＦ−αを用いて、マウス血清中遊離ＴＮ３−１ ９．１２を検出するＥＬＩＳＡを行なった。マイクロタイタープレートに組替え ネズミＴＮＦ−αを被覆し、ブロックした後、試験血清とともにインキュベーシ ョンした。次いで、ヤギ抗ハムスターＩｇＧアルカリホスファターゼコンジュゲ ート（ネズミＩｇＧに吸着させたもの）を加え、次いで基質を加えた。既知濃度 のＴＮ３−１９．１２試料と比較することで定量を行なった。ＴＮ３−１９．１ ２値は、抗ＴＮＦ単独投与の場合と比べて、抗ＣＤ４と抗ＴＮＦを併用投与した 群でやや上昇したか、その差は統計的に有意ではなかった（表４）。 請求の範囲 １．リウマチ様関節炎の治療など、哺乳動物における自己免疫疾患または炎症性 疾患の治療のための、抗ＣＤ４抗体を抗腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）抗体とともに含 む組成物。 ２．哺乳動物における自己免疫疾患または炎症性疾患の治療のための治療薬剤を 製造するための抗ＣＤ４抗体および抗腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）抗体の使用。 ３．抗ＣＤ４抗体および抗ＴＮＦ抗体が、同時あるいは連続投与に適している、 請求項１の組成物又は請求項２の使用。 ４．抗ＣＤ４抗体および抗ＴＮＦ抗体か、皮下、静脈内、あるいは筋肉内投与に 適している、請求項１の組成物又は請求項２の使用。 ５．抗ＣＤ４抗体および抗ＴＮＦ抗体が、薬学的に許容されるビーイクルと配合 された、請求項１の組成物又は請求項２の使用。 ６．抗炎症剤と配合された請求項１又は請求項５の組成物、あるいは請求項２又 は請求項５の使用。 ７．哺乳動物におけるリウマチ様関節炎の治療薬の製造のた めの、抗ＴＮＦ抗体とともに使用する抗ＣＤ４抗体の使用。 ８．哺乳動物における自己免疫疾患または炎症性疾患の治療のための、ＣＤ４＋ 細胞の活性化または抗原提示細胞との相互作用に影響する薬剤（agent）を炎症 メディエーターとともに含む組成物。 ９．哺乳動物における自己免疫疾患または炎症性疾患の治療のための薬剤を製造 するための、炎症メディエーターとともに使用するＣＤ４＋細胞の活性化または 抗原提示細胞との相互作用に影響する薬剤の使用。 １０．該薬剤がＴ細胞に対するあるいはＴ細胞受容体に対する抗体である、請求 項８の組成物又は請求項９の使用。 １１．該薬剤が抗原提示細胞に対する抗体または抗原提示細胞の受容体に対する 抗体である、請求項８の組成物又は請求項９の使用。 １２．該薬剤が抗原提示細胞とＴ細胞との相互作用をブロックするペプチドまた は小型分子である、請求項８の組成物又は請求項９の使用。 １３．炎症メディエーターが、ＴＮＦの活性または合成を阻害する能力がある薬 剤、ＩＬ−１またはＩＬ−６のいづれか の活性または合成を阻害する能力がある薬剤、あるいは抗炎症特性を持つサイト カインである、請求項８、１０、１１又は１２の組成物、あるいは請求項９、１ ０、１１又は１２の使用。 １４．抗ＴＮＦ抗体とともに抗ＣＤ４抗体を哺乳動物に治療有効量投与すること から成る、哺乳動物における自己免疫疾患あるいは炎症性疾患を治療する方法。 １５．抗ＣＤ４抗体が抗ＴＮＦ抗体と同時に投与される、請求項１４の方法。 １６．抗ＣＤ４抗体か抗ＴＮＦ抗体に連続して投与される、請求項１４の方法。 １７．抗ＣＤ４抗体と抗ＴＮＦ抗体が皮下投与される、請求項１４の方法。 １８．抗ＣＤ４抗体と抗ＴＮＦ抗体が静脈内投与される、請求項１４の方法。 １９．抗ＣＤ４抗体と抗ＴＮＦ抗体が筋肉内投与される、請求項１４の方法。 ２０．抗ＣＤ４抗体と抗ＴＮＦ抗体が薬学的に許容されるビ ーイクルを用いて投与される、請求項１５の方法。 ２１．抗炎症剤が、抗ＣＤ４抗体および、抗ＴＮＦ抗体とともに投与される、請 求項１４の方法。 ２２．抗ＴＮＦ抗体とともに抗ＣＤ４抗体を哺乳動物に治療有効量投与すること から成る、哺乳動物におけるリウマチ様関節炎を治療する方法。 ２３．ＣＤ４＋細胞の活性化または抗原提示細胞との相互作用に影響する薬剤（ agent）を炎症メディエーターとともに哺乳動物に治療有効量投与することから なる、哺乳動物における自己免疫疾患または炎症性疾患の治療方法。 ２４．ＣＤ４＋細胞の活性化または抗原提示細胞との相互作用に影響する薬剤が 、Ｔ細胞に対するあるいはＴ細胞受容体に対する抗体である、請求項２３の方法 。 ２５．ＣＤ４＋細胞の活性化または抗原提示細胞との相互作用に影響する薬剤が 、抗原提示細胞に対する抗体あるいは抗原提示細胞の受容体に対する抗体である 、請求項２３の方法。 ２６．ＣＤ４＋細胞の活性化または抗原提示細胞との相互作用に影響する薬剤が 、Ｔ細胞と抗原提示細胞の相互作用をブロックするペプチドまたは小型分子であ る、請求項２３の方 法。 ２７．炎症メディエーターがＴＮＦの活性または合成を阻害する薬剤（agent） である、請求項２１の方法。 ２８．炎症メディエーターがＩＬ−１の活性または合成を阻害する薬剤である、 請求項２１の方法。 ２９．炎症メディエーターがＩＬ−６の活性または合成を阻害する薬剤である、 請求項２１の方法。 ３０．炎症メディエーターが抗炎症特性を持つサイトカインである、請求項２１ の方法。 ３１．炎症メディエーターがＴＮＦの活性または合成を阻害する薬剤である、請 求項２４の方法。 ３２．炎症メディエーターがＩＬ−１の活性または合成を阻害する薬剤である、 請求項２４の方法。 ３３．炎症メディエーターがＩＬ−６の活性または合成を阻害する薬剤である、 請求項２４の方法。 ３４．炎症メディエーターが抗炎症特性を持つサイトカインである、請求項２４ の方法。 ３５．炎症メディエーターがＴＮＦの活性または合成を阻害する薬剤である、請 求項２５の方法。 ３６．炎症メディエーターがＩＬ−１の活性または合成を阻害する薬剤である、 請求項２５の方法。 ３７．炎症メディエーターがＩＬ−６の活性または合成を阻害する薬剤である、 請求項２５の方法。 ３８．炎症メディエーターが抗炎症特性を持つサイトカインである、請求項２５ の方法。 ３９．炎症メディエーターがＴＮＦの活性または合成を阻害する薬剤である、請 求項２６の方法。 ４０．炎症メディエーターがＩＬ−１の活性または合成を阻害する薬剤である、 請求項２６の方法。 ４１．炎症メディエーターがＩＬ−６の活性または合成を阻害する薬剤である、 請求項２６の方法。 ４２．炎症メディエーターが抗炎症特性を持つサイトカインである、請求項２６ の方法。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ， ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，Ｍ Ｃ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ， ＴＤ，ＴＧ)，ＡＴ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ， ＣＡ，ＣＨ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，Ｈ Ｕ，ＪＰ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＵ，ＭＧ，ＭＮ ，ＭＷ，ＮＬ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ， ＳＤ，ＳＥ，ＳＫ，ＵＡ，ＵＳ，ＶＮ (72)発明者 ウィリアムス，リチャード オーエン 英国，ロンドン イー２ ９ビーエヌ プ リチャーズ ロード，シェベレル ハウス 60 【要約の続き】

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．リウマチ様関節炎の治療など、哺乳動物における自己免疫疾患または炎症性 疾患の治療のための、抗ＣＤ４抗体および抗腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）抗体の併用 。 ２．哺乳動物における自己免疫疾患または炎症性疾患の治療のための治療薬剤を 製造するための抗ＣＤ４抗体および抗腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）抗体の使用。 ３．抗ＣＤ４抗体および抗ＴＮＦ抗体を、同時あるいは連続投与に適応させた、 請求項１又は請求項２の発明。 ４．抗ＣＤ４抗体および抗ＴＮＦ抗体が、皮下、静脈内、あるいは筋肉内投与に 適している、請求項１又は請求項２の発明。 ５．抗ＣＤ４抗体および抗ＴＮＦ抗体が、薬学的に許容されるビーイクルと配合 された、請求項１又は請求項２の発明。 ６．抗炎症剤と配合された請求項１、２、又は５の発明。 ７．哺乳動物におけるリウマチ様関節炎の治療薬の製造のための抗ＣＤ４抗体お よび抗ＴＮＦ抗体の組み合わせの使用。 ８．哺乳動物における自己免疫疾患または炎症性疾患の治療のための、ＣＤ４＋ 細胞の活性化または抗原提示細胞との相互作用に影響する薬剤（agent）と炎症 メディエーターの併用。 ９．哺乳動物における自己免疫疾患または炎症性疾患の治療のための薬剤を製造 するための、ＣＤ４＋細胞の活性化または抗原提示細胞との相互作用に影響する 薬剤の炎症メディエーターとの併用。 １０．該薬剤がＴ細胞に対するあるいはＴ細胞受容体に対する抗体である、請求 項８又は９の発明。 １１．該薬剤が抗原提示細胞に対する抗体または抗体提示細胞の受容体に対する 抗体である、請求項８又は９の発明。 １２．該薬剤が抗原提示細胞とＴ細胞との相互作用をブロックするペプチドまた は小型分子である、請求項８又は９の発明。 １３．炎症メディエーターが、ＴＮＦの活性または合成を阻害する能力がある薬 剤、ＩＬ−１またはＩＬ−６のいづれかの活性または合成を阻害する能力がある 薬剤、あるいは抗炎症特性を持つサイトカインである、請求項６又は８−９の発 明。 １４．抗ＣＤ４抗体と抗ＴＮＦ抗体の組み合わせを哺乳動物に治療有効量投与す ることから成る、哺乳動物における自己免疫疾患あるいは炎症性疾患を治療する 方法。 １５．抗ＣＤ４抗体が抗ＴＮＦ抗体と同時に投与される、請求項１４の方法。 １６．抗ＣＤ４抗体が抗ＴＮＦ抗体に連続して投与される、請求項１４の方法。 １７．抗ＣＤ４抗体と抗ＴＮＦ抗体が皮下投与される、請求項１４の方法。 １８．抗ＣＤ４抗体と抗ＴＮＦ抗体が静脈内投与される、請求項１４の方法。 １９．抗ＣＤ４抗体と抗ＴＮＦ抗体が筋肉内投与される、請求項１４の方法。 ２０．抗ＣＤ４抗体と抗ＴＮＦ抗体が薬学的に許容されるビーイクルを用いて投 与される、請求項１５の方法。 ２１．抗炎症剤が、抗ＣＤ４抗体および、抗ＴＮＦ抗体とともに投与される、請 求項１４の方法。 ２２．抗ＣＤ４抗体と抗ＴＮＦ抗体の組み合わせを哺乳動物に治療有効量投与す ることから成る、哺乳動物におけるリウマチ様関節炎を治療する方法。 ２３．ＣＤ４＋細胞の活性化または抗原提示細胞との相互作用に影響する薬剤（ agent）と炎症メディエーターとの組み合わせを哺乳動物に治療有効量投与する ことからなる、哺乳動物における自己免疫疾患または炎症性疾患の治療方法。 ２４．ＣＤ４＋細胞の活性化または抗原提示細胞との相互作用に影響する薬剤が 、Ｔ細胞に対するあるいはＴ細胞受容体に対する抗体である、請求項２３の発明 。 ２５．ＣＤ４＋細胞の活性化または抗原提示細胞との相互作用に影響する薬剤が 、抗原提示細胞に対するあるいは抗原提示細胞の受容体に対する抗体である、請 求項２３の発明。 ２６．ＣＤ４＋細胞の活性化または抗原提示細胞との相互作用に影響する薬剤が 、Ｔ細胞と抗原提示細胞の相互作用をブロックするペプチドまたは小型分子であ る、請求項２３の発明。 ２７．炎症メディエーターがＴＮＦの活性または合成を阻害する薬剤（agent） である、請求項２１の方法。 ２８．炎症メディエーターがＩＬ−１の活性または合成を阻害する薬剤である、 請求項２１の方法。 ２９．炎症メディエーターがＩＬ−６の活性または合成を阻害する薬剤である、 請求項２１の方法。 ３０．炎症メディエーターが抗炎症特性を持つサイトカインである、請求項２１ の方法。 ３１．炎症メディエーターがＴＮＦの活性または合成を阻害する薬剤である、請 求項２４の方法。 ３２．炎症メディエーターがＩＬ−１の活性または合成を阻害する薬剤である、 請求項２４の方法。 ３３．炎症メディエーターがＩＬ−６の活性または合成を阻害する薬剤である、 請求項２４の方法。 ３４．炎症メディエーターが抗炎症特性を持つサイトカインである、請求項２４ の方法。 ３５．炎症メディエーターがＴＮＦの活性または合成を阻害する薬剤である、請 求項２５の方法。 ３６．炎症メディエーターがＩＬ−１の活性または合成を阻 害する薬剤である、請求項２５の方法。 ３７．炎症メディエーターがＩＬ−６の活性または合成を阻害する薬剤である、 請求項２５の方法。 ３８．炎症メディエーターが抗炎症特性を持つサイトカインである、請求項２５ の方法。 ３９．炎症メディエーターがＴＮＦの活性または合成を阻害する薬剤である、請 求項２６の方法。 ４０．炎症メディエーターがＩＬ−１の活性または合成を阻害する薬剤である、 請求項２６の方法。 ４１．炎症メディエーターがＩＬ−６の活性または合成を阻害する薬剤である、 請求項２６の方法。 ４２．炎症メディエーターが抗炎症特性を持つサイトカインである、請求項２６ の方法。