JPH08313524A - トロンビンレセプター発現量または活性化量の測定方法 - Google Patents
トロンビンレセプター発現量または活性化量の測定方法Info
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- JPH08313524A JPH08313524A JP12246495A JP12246495A JPH08313524A JP H08313524 A JPH08313524 A JP H08313524A JP 12246495 A JP12246495 A JP 12246495A JP 12246495 A JP12246495 A JP 12246495A JP H08313524 A JPH08313524 A JP H08313524A
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Abstract
(57)【要約】
【目的】 生体の細胞表面のトロンビンレセプターの発
現量及び／又は活性化量の測定方法を提供する 【構成】 トロンビンレセプターアゴニストペプチド
（ＴＲＡＰ）に対するモノクローナル抗体を用いるフロ
ーサイトメトリーや免疫染色法により、血小板上及び／
又は内皮細胞表面のトロンビンレセプターの発現量及び
／又は活性化量を測定する。
現量及び／又は活性化量の測定方法を提供する 【構成】 トロンビンレセプターアゴニストペプチド
（ＴＲＡＰ）に対するモノクローナル抗体を用いるフロ
ーサイトメトリーや免疫染色法により、血小板上及び／
又は内皮細胞表面のトロンビンレセプターの発現量及び
／又は活性化量を測定する。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、生体のトロンビンレセ
プターの測定方法に関する。さらに詳しくは、本発明
は、トロンビンレセプターに対する抗体または活性化ト
ロンビンレセプターに対する抗体を用いて、トロンビン
レセプターの発現量またはトロンビンレセプターの活性
化量を測定する方法に関する。
プターの測定方法に関する。さらに詳しくは、本発明
は、トロンビンレセプターに対する抗体または活性化ト
ロンビンレセプターに対する抗体を用いて、トロンビン
レセプターの発現量またはトロンビンレセプターの活性
化量を測定する方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】トロンビンレセプターは、Thien-Khai
H. Vuらにより１９９１年にヒトの血小板上のトロンビ
ンレセプターｃＤＮＡがクローニングされ、その構造が
決定された。そのなかで、彼らは、トロンビンレセプタ
ーはトロンビンによりそのＮ末端フラグメントが切断さ
れて活性化トロンビンレセプターとなり、それによりむ
きだしになる活性化トロンビンレセプターのＮ末端側の
１４個のペプチド（thrombin receptor agonist peptid
e:ＴＲＡＰ）が血小板を凝集させることを見いだした。
すなわち、トロンビンはこのトロンビンレセプターのＮ
末端部分を限定分解し、内在しているアゴニスト部分を
露出させて活性化トロンビンレセプターとし、このアゴ
ニストが血小板にシグナルを送り、血小板を活性化する
ことを明らかにした。血小板の活性化は血小板の粘着・
凝集、凝固系の活性化を誘導し、血栓の形成に繋がる。
以上からトロンビンによるトロンビンレセプターを介す
る血小板の活性化は血栓の直接の引金となり、種々の虚
血性疾患の成否に本質的意味を持っているということが
できる。
H. Vuらにより１９９１年にヒトの血小板上のトロンビ
ンレセプターｃＤＮＡがクローニングされ、その構造が
決定された。そのなかで、彼らは、トロンビンレセプタ
ーはトロンビンによりそのＮ末端フラグメントが切断さ
れて活性化トロンビンレセプターとなり、それによりむ
きだしになる活性化トロンビンレセプターのＮ末端側の
１４個のペプチド（thrombin receptor agonist peptid
e:ＴＲＡＰ）が血小板を凝集させることを見いだした。
すなわち、トロンビンはこのトロンビンレセプターのＮ
末端部分を限定分解し、内在しているアゴニスト部分を
露出させて活性化トロンビンレセプターとし、このアゴ
ニストが血小板にシグナルを送り、血小板を活性化する
ことを明らかにした。血小板の活性化は血小板の粘着・
凝集、凝固系の活性化を誘導し、血栓の形成に繋がる。
以上からトロンビンによるトロンビンレセプターを介す
る血小板の活性化は血栓の直接の引金となり、種々の虚
血性疾患の成否に本質的意味を持っているということが
できる。
【０００３】従って、このトロンビンレセプター量、す
なわちトロンビンレセプターの発現量および活性化トロ
ンビンレセプターの量を知ることは血栓性疾患の予知や
早期治療に繋がり、臨床上大きな意味をもっていると考
えられる。
なわちトロンビンレセプターの発現量および活性化トロ
ンビンレセプターの量を知ることは血栓性疾患の予知や
早期治療に繋がり、臨床上大きな意味をもっていると考
えられる。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】しかしながら、従来、
トロンビンレセプターの発現量や活性化トロンビンレセ
プターの量を臨床的に検出した報告はない。そこで、本
発明者らは、生体のトロンビンレセプターの発現量また
は活性化量を測定する方法を開発すべく鋭意研究した。
トロンビンレセプターの発現量や活性化トロンビンレセ
プターの量を臨床的に検出した報告はない。そこで、本
発明者らは、生体のトロンビンレセプターの発現量また
は活性化量を測定する方法を開発すべく鋭意研究した。
【０００５】
【課題を解決するための手段】その結果、 トロンビンレセプターに対する抗体を用いてトロンビ
ンレセプター発現量を測定しうること、および トロンビンレセプターの活性化後に出現するネオアン
チゲンに対する抗体を用いて活性化トロンビンレセプタ
ーの量を測定しうること を見いだし、本発明に到達した。
ンレセプター発現量を測定しうること、および トロンビンレセプターの活性化後に出現するネオアン
チゲンに対する抗体を用いて活性化トロンビンレセプタ
ーの量を測定しうること を見いだし、本発明に到達した。
【０００６】すなわち、本発明は、 項１〕生体の細胞表面のトロンビンレセプター及び活性
化トロンビンレセプターの両者を認識する抗体を用いて
免疫測定することを特徴とする生体の細胞表面のトロン
ビンレセプター発現量の測定方法、 項２〕生体の細胞表面の活性化トロンビンレセプターを
特異的に認識する抗体を用いて免疫測定することを特徴
とする生体の細胞表面のトロンビンレセプター活性化量
の測定方法、 項３〕上記生体の細胞が血小板及び／又は内皮細胞であ
る項１または２記載のトロンビンレセプター発現量また
は活性化量の測定方法、 項４〕上記抗体がトロンビンレセプターアゴニストペプ
チド（ＴＲＡＰ）に対する抗体である項１〜３のいずれ
か１項記載のトロンビンレセプター発現量または活性化
量の測定方法、 項５〕トロンビンレセプター発現量または活性化量を測
定することを特徴とする糖尿病の血栓傾向の予測方法、
および
化トロンビンレセプターの両者を認識する抗体を用いて
免疫測定することを特徴とする生体の細胞表面のトロン
ビンレセプター発現量の測定方法、 項２〕生体の細胞表面の活性化トロンビンレセプターを
特異的に認識する抗体を用いて免疫測定することを特徴
とする生体の細胞表面のトロンビンレセプター活性化量
の測定方法、 項３〕上記生体の細胞が血小板及び／又は内皮細胞であ
る項１または２記載のトロンビンレセプター発現量また
は活性化量の測定方法、 項４〕上記抗体がトロンビンレセプターアゴニストペプ
チド（ＴＲＡＰ）に対する抗体である項１〜３のいずれ
か１項記載のトロンビンレセプター発現量または活性化
量の測定方法、 項５〕トロンビンレセプター発現量または活性化量を測
定することを特徴とする糖尿病の血栓傾向の予測方法、
および
【０００７】項６〕トロンビンレセプター発現量または
活性化量を測定することを特徴とする経皮的冠状動脈形
成術（ＰＴＣＡ）後の血管再閉塞の予測方法である。
活性化量を測定することを特徴とする経皮的冠状動脈形
成術（ＰＴＣＡ）後の血管再閉塞の予測方法である。
【０００８】本発明において、トロンビンレセプターお
よび活性化トロンビンレセプターの両者を認識する抗体
としては、特に限定されないが、例えばトロンビンレセ
プターアゴニストペプチド（ＴＲＡＰ；thrombin recep
tor agonist peptide)に対する抗体を挙げることができ
る。
よび活性化トロンビンレセプターの両者を認識する抗体
としては、特に限定されないが、例えばトロンビンレセ
プターアゴニストペプチド（ＴＲＡＰ；thrombin recep
tor agonist peptide)に対する抗体を挙げることができ
る。
【０００９】また、活性化トロンビンレセプターを特異
的に認識する抗体としては、トロンビンレセプターの活
性化後に出現するＴＲＡＰのネオアンチゲンに対する抗
体を挙げることができる。
的に認識する抗体としては、トロンビンレセプターの活
性化後に出現するＴＲＡＰのネオアンチゲンに対する抗
体を挙げることができる。
【００１０】従って、ＴＲＡＰに対する抗体を用いるこ
とによりトロンビンレセプター発現量（ａ）を測定する
ことができ、ＴＲＡＰのネオアンチゲンに対する抗体を
用いることによりトロンビンレセプターの活性化量
（ｂ）を測定することができる。また、トロンビンレセ
プター遊離フラグメント（ＴＲＲＦ；thrombin recepto
rreleasing fragment) に対する抗体は、トロンビンレ
セプターのＮ末端ＴＲＲＦ領域を認識することができ、
この抗体を用いると、活性化されていないトロンビンレ
セプター量（ｃ）を測定できるので、（ａ）から（ｃ）
を引くことにより（ｂ）を測定しうることになる。
とによりトロンビンレセプター発現量（ａ）を測定する
ことができ、ＴＲＡＰのネオアンチゲンに対する抗体を
用いることによりトロンビンレセプターの活性化量
（ｂ）を測定することができる。また、トロンビンレセ
プター遊離フラグメント（ＴＲＲＦ；thrombin recepto
rreleasing fragment) に対する抗体は、トロンビンレ
セプターのＮ末端ＴＲＲＦ領域を認識することができ、
この抗体を用いると、活性化されていないトロンビンレ
セプター量（ｃ）を測定できるので、（ａ）から（ｃ）
を引くことにより（ｂ）を測定しうることになる。
【００１１】トロンビンレセプターの測定対象は、生体
の細胞であり、例えば、血小板、内皮細胞などが挙げら
れる。
の細胞であり、例えば、血小板、内皮細胞などが挙げら
れる。
【００１２】測定する検体は、例えば血小板において
は、血液を遠心分離等により血小板に富む血漿を分画
し、必要に応じて生理食塩水等で置換し、細胞懸濁液と
して得ることができる。また、内皮細胞においては、生
体組織から摘出した細胞を培養することによって得るこ
とができる。
は、血液を遠心分離等により血小板に富む血漿を分画
し、必要に応じて生理食塩水等で置換し、細胞懸濁液と
して得ることができる。また、内皮細胞においては、生
体組織から摘出した細胞を培養することによって得るこ
とができる。
【００１３】また、測定法としては、フローサイトメト
リー、または免疫染色法が好適であるが、ラテックスを
用いる凝集法も採用されうる。
リー、または免疫染色法が好適であるが、ラテックスを
用いる凝集法も採用されうる。
【００１４】フローサイトメトリーにおいては、例えば
抗体を蛍光標識し、細胞表面に目的のトロンビンレセプ
ターの発現が多い場合には、強い蛍光シグナルとなって
測定される。
抗体を蛍光標識し、細胞表面に目的のトロンビンレセプ
ターの発現が多い場合には、強い蛍光シグナルとなって
測定される。
【００１５】また、免疫染色法においては、例えば抗体
を酵素標識し、細胞と反応させて不溶性の酵素基質を用
いることにより目的のトロンビンレセプターの発現して
いる細胞が染色されることになる。
を酵素標識し、細胞と反応させて不溶性の酵素基質を用
いることにより目的のトロンビンレセプターの発現して
いる細胞が染色されることになる。
【００１６】上記の抗体としては、モノクローナル抗体
またはポリクローナルが用いられる。抗トロンビンレセ
プターモノクローナル抗体または抗活性化トロンビンレ
セプターモノクローナル抗体の製造方法について説明す
る。
またはポリクローナルが用いられる。抗トロンビンレセ
プターモノクローナル抗体または抗活性化トロンビンレ
セプターモノクローナル抗体の製造方法について説明す
る。
【００１７】本発明に用いられるモノクローナル抗体を
産生するハイブリドーマ細胞は、ケーラー＆ミルシュタ
インの方法として知られた方法によって得られる。すな
わち、ヒトトロンビンレセプター、そのアゴニストペプ
チド、活性化トロンビンレセプターのネオアンチゲン、
トロンビンレセプター遊離フラグメント等をマウスに免
疫した後、このマウスの脾細胞をマウスミエローマ細胞
と融合させる。得られたハイブリドーマ細胞を、それが
産生する抗体がマイクロタイタープレートに固定された
トロンビンレセプター部分ペプチド等の目的とする抗原
と反応するかどうか調べることにより、系統的に検査し
選択される。
産生するハイブリドーマ細胞は、ケーラー＆ミルシュタ
インの方法として知られた方法によって得られる。すな
わち、ヒトトロンビンレセプター、そのアゴニストペプ
チド、活性化トロンビンレセプターのネオアンチゲン、
トロンビンレセプター遊離フラグメント等をマウスに免
疫した後、このマウスの脾細胞をマウスミエローマ細胞
と融合させる。得られたハイブリドーマ細胞を、それが
産生する抗体がマイクロタイタープレートに固定された
トロンビンレセプター部分ペプチド等の目的とする抗原
と反応するかどうか調べることにより、系統的に検査し
選択される。
【００１８】
【実施例】以下に実施例を挙げ、本発明をさらに詳細に
説明する。しかしながら、本発明は、以下の実施例に限
定されるものではない。
説明する。しかしながら、本発明は、以下の実施例に限
定されるものではない。
【００１９】〔実施例１〕トロンビンレセプター部分ペ
プチド等の合成 トロンビンレセプターアゴニストペプチド（ＴＲＡ
Ｐ） ＡＢＩ（Applied Biosystems Inc）社製のペプチド合成
機４３０Ａ型を用いて、下記アミノ酸配列（配列番号
１）よりなるペプチドを得た。
プチド等の合成 トロンビンレセプターアゴニストペプチド（ＴＲＡ
Ｐ） ＡＢＩ（Applied Biosystems Inc）社製のペプチド合成
機４３０Ａ型を用いて、下記アミノ酸配列（配列番号
１）よりなるペプチドを得た。
【００２０】
【化１】アミノ酸配列：Ser Phe Leu Leu Arg Asn Pro
Asn Asp Lys Tyr Glu Pro Phe ＴＲＡＰネオアンチゲン ＡＢＩ（Applied Biosystems Inc）社製のペプチド合成
機４３０Ａ型を用いて、下記アミノ酸配列のＴＲＡＰの
Ｎ末端５残基のＣ末端側にシステインを付加したペプチ
ド（配列番号２）を合成した。
Asn Asp Lys Tyr Glu Pro Phe ＴＲＡＰネオアンチゲン ＡＢＩ（Applied Biosystems Inc）社製のペプチド合成
機４３０Ａ型を用いて、下記アミノ酸配列のＴＲＡＰの
Ｎ末端５残基のＣ末端側にシステインを付加したペプチ
ド（配列番号２）を合成した。
【００２１】
【化２】アミノ酸配列：Ser Phe Leu Leu Arg Cys トロンビンレセプター遊離フラグメント（ＴＲＲＦ） ＡＢＩ（Applied Biosystems Inc）社製のペプチド合成
機４３０Ａ型を用いて下記アミノ酸配列（配列番号３）
よりなるペプチドを合成した。
機４３０Ａ型を用いて下記アミノ酸配列（配列番号３）
よりなるペプチドを合成した。
【００２２】
【化３】アミノ酸配列：Pro Glu Ser Lys Ala Thr Asn
Ala Thr Leu Asp Pro Arg 〔実施例２〕各種抗体の採取 抗ＴＲＡＰモノクローナル抗体（トロンビンレセプタ
ー及び活性化トロンビンレセプターの両方に反応する抗
体）の採取 実施例１で得たＴＲＡＰをカルボジイミド（ＤＣＣ）
を用いて、ＫＬＨ（keyhole lympet haemocyanin) に架
橋したＴＲＡＰ−ＫＬＨ接合体を、フロイントの完全ア
ジュバントと混合して、マウスに５回免疫した。最終免
疫後、脾臓を取り出し、脾細胞をマウスミエローマ細胞
と細胞融合させ、ハイブリドーマを作成した。ＴＲＡ
Ｐ、メガカリオサイトから抽出したトロンビンレセプタ
ーをそれぞれ固相に固定したマイクロプレートにて、培
養上清中の抗体が双方の抗原に反応するハイブリドーマ
を選択した。該ハイブリドーマから１クローンを採取
し、その培養上清から抗ＴＲＡＰ抗体（Ｂ１１−Ａ３）
を採取した。
Ala Thr Leu Asp Pro Arg 〔実施例２〕各種抗体の採取 抗ＴＲＡＰモノクローナル抗体（トロンビンレセプタ
ー及び活性化トロンビンレセプターの両方に反応する抗
体）の採取 実施例１で得たＴＲＡＰをカルボジイミド（ＤＣＣ）
を用いて、ＫＬＨ（keyhole lympet haemocyanin) に架
橋したＴＲＡＰ−ＫＬＨ接合体を、フロイントの完全ア
ジュバントと混合して、マウスに５回免疫した。最終免
疫後、脾臓を取り出し、脾細胞をマウスミエローマ細胞
と細胞融合させ、ハイブリドーマを作成した。ＴＲＡ
Ｐ、メガカリオサイトから抽出したトロンビンレセプタ
ーをそれぞれ固相に固定したマイクロプレートにて、培
養上清中の抗体が双方の抗原に反応するハイブリドーマ
を選択した。該ハイブリドーマから１クローンを採取
し、その培養上清から抗ＴＲＡＰ抗体（Ｂ１１−Ａ３）
を採取した。
【００２３】抗ＴＲＡＰネオアンチゲンポリクローナ
ル抗体の採取 実施例１で得たＴＲＡＰネオアンチゲンをマレイミド
化したＫＬＨに架橋し、家兎に４回免疫した。最終免疫
１０日後全採血し、ポリクローナル抗体を採取した。こ
のポリクローナル抗体はトロンビンレセプターには反応
しなかったが、活性化トロンビンレセプターには反応し
た。
ル抗体の採取 実施例１で得たＴＲＡＰネオアンチゲンをマレイミド
化したＫＬＨに架橋し、家兎に４回免疫した。最終免疫
１０日後全採血し、ポリクローナル抗体を採取した。こ
のポリクローナル抗体はトロンビンレセプターには反応
しなかったが、活性化トロンビンレセプターには反応し
た。
【００２４】抗ＴＲＲＦモノクローナル抗体の採取 実施例１で得たＴＲＲＦを用いるほかは、と全く同
様にして、抗ＴＲＲＦ抗体産生ハイブリドーマ５クロー
ンを採取した。
様にして、抗ＴＲＲＦ抗体産生ハイブリドーマ５クロー
ンを採取した。
【００２５】抗ＴＲＲＦポリクローナル抗体の採取 と同じ抗原を家兎に免疫し、と同様にしてポリクロ
ーナル抗体を得た。
ーナル抗体を得た。
【００２６】〔実施例３〕血小板上のトロンビンレセプ
ター量の測定 健常人および糖尿病患者のクエン酸血から、血小板に富
む血漿（ＰＲＰ）を分離した。血小板５×１０5 個／チ
ューブに調整し、上記抗ＴＲＡＰモノクローナル抗体
（Ｂ１１−Ａ３）を濃度１０μｇ／ｍｌで反応させ、２
次抗体としてＦＩＴＣ標識抗マウスＩｇＧ抗体Ｆａｂ′
分画を反応させ、フローサイトメトリーにて解析した。
ター量の測定 健常人および糖尿病患者のクエン酸血から、血小板に富
む血漿（ＰＲＰ）を分離した。血小板５×１０5 個／チ
ューブに調整し、上記抗ＴＲＡＰモノクローナル抗体
（Ｂ１１−Ａ３）を濃度１０μｇ／ｍｌで反応させ、２
次抗体としてＦＩＴＣ標識抗マウスＩｇＧ抗体Ｆａｂ′
分画を反応させ、フローサイトメトリーにて解析した。
【００２７】その結果を図１に示す。（ａ）は健常人、
（ｂ）は糖尿病患者の結果である。糖尿病患者血小板で
トロンビンレセプター発現量が上昇していることが明ら
かになった。
（ｂ）は糖尿病患者の結果である。糖尿病患者血小板で
トロンビンレセプター発現量が上昇していることが明ら
かになった。
【００２８】また、そのトロンビンレセプター量を健常
人群（ｎ＝１６）と糖尿病患者群（ｎ＝２４）で比較し
た結果を図２に示す。統計学的に後者が有意に高値を示
している。
人群（ｎ＝１６）と糖尿病患者群（ｎ＝２４）で比較し
た結果を図２に示す。統計学的に後者が有意に高値を示
している。
【００２９】〔実施例４〕心筋梗塞患者の狭窄部から摘
出した内皮細胞におけるトロンビンレセプター量の測定 経皮的冠状動脈形成術（ＰＴＣＡ）を施行した心筋梗塞
患者の狭窄部から摘出した内皮細胞を培養し、抗ＴＲＡ
Ｐ抗体（Ｂ１１−Ａ３）を反応させた後、さらに該抗体
に対する抗体を酵素標識した２次抗体〔西洋ワサビパー
オキシダーゼ（Horseradish peroxidase) 標識抗マウス
抗体〕を反応させ、免疫染色を行った。得られた免疫染
色像において、細胞が茶褐色に染色されており、細胞表
面上にトロンビンレセプター及び／又は活性化トロンビ
ンレセプターの発現が明らかに亢進していることが判断
された。
出した内皮細胞におけるトロンビンレセプター量の測定 経皮的冠状動脈形成術（ＰＴＣＡ）を施行した心筋梗塞
患者の狭窄部から摘出した内皮細胞を培養し、抗ＴＲＡ
Ｐ抗体（Ｂ１１−Ａ３）を反応させた後、さらに該抗体
に対する抗体を酵素標識した２次抗体〔西洋ワサビパー
オキシダーゼ（Horseradish peroxidase) 標識抗マウス
抗体〕を反応させ、免疫染色を行った。得られた免疫染
色像において、細胞が茶褐色に染色されており、細胞表
面上にトロンビンレセプター及び／又は活性化トロンビ
ンレセプターの発現が明らかに亢進していることが判断
された。
【００３０】
【発明の効果】上記のように生体の細胞表面のトロンビ
ンレセプターまたは活性化トロンビンレセプターを測定
することにより、血栓準備状態を検知することができ
る。従って、本発明は、糖尿病などの早期血栓傾向、動
脈硬化、経皮的冠状動脈形成術（ＰＴＣＡ）後の再狭窄
などの予知、早期診断に有用である。
ンレセプターまたは活性化トロンビンレセプターを測定
することにより、血栓準備状態を検知することができ
る。従って、本発明は、糖尿病などの早期血栓傾向、動
脈硬化、経皮的冠状動脈形成術（ＰＴＣＡ）後の再狭窄
などの予知、早期診断に有用である。
【００３１】
【００３２】配列番号：１ 配列の長さ：１４ 配列の型：アミノ酸 配列の種類：ペプチド 配列 Ser Phe Leu Leu Arg Asn Pro Asn Asp Lys Tyr Glu Pro Phe 1 5 10
【００３３】配列番号：２ 配列の長さ：６ 配列の型：アミノ酸 配列の種類：ペプチド 配列 Ser Phe Leu Leu Arg Cys 1 5
【００３４】配列番号：３ 配列の長さ：１３ 配列の型：アミノ酸 配列の種類：ペプチド フラグメント型：Ｎ末端フラグメント 配列 Pro Glu Ser Lys Ala Thr Asn Ala Thr Leu Asp Pro Arg 1 5 10
【図１】実施例３において、フローサイトメトリーの結
果得られた健常人および糖尿病患者由来の血小板上のト
ロンビンレセプター発現量を示す蛍光強度（横軸）およ
び細胞数（縦軸）である。
果得られた健常人および糖尿病患者由来の血小板上のト
ロンビンレセプター発現量を示す蛍光強度（横軸）およ
び細胞数（縦軸）である。
【図２】実施例３で得られた健常人および糖尿病患者由
来の血小板上のトロンビンレセプター発現量を示す蛍光
強度である。
来の血小板上のトロンビンレセプター発現量を示す蛍光
強度である。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 窪田 貴明 東京都日野市旭が丘４丁目３番２号 帝人 株式会社東京研究センター内 (72)発明者 丸山 征郎 鹿児島市桜ケ丘８丁目35番１号
Claims (6)
- 【請求項１】 生体の細胞表面のトロンビンレセプター
及び活性化トロンビンレセプターの両者を認識する抗体
を用いて免疫測定することを特徴とする生体の細胞表面
のトロンビンレセプター発現量の測定方法。 - 【請求項２】 生体の細胞表面の活性化トロンビンレセ
プターを特異的に認識する抗体を用いて免疫測定するこ
とを特徴とする生体の細胞表面のトロンビンレセプター
活性化量の測定方法。 - 【請求項３】 上記生体の細胞が血小板及び／又は内皮
細胞である請求項１または２記載のトロンビンレセプタ
ー発現量または活性化量の測定方法。 - 【請求項４】 上記抗体がトロンビンレセプターアゴニ
ストペプチド（ＴＲＡＰ）に対する抗体である請求項１
〜３のいずれか１項記載のトロンビンレセプター発現量
または活性化量の測定方法。 - 【請求項５】 トロンビンレセプター発現量または活性
化量を測定することを特徴とする糖尿病の血栓傾向の予
測方法。 - 【請求項６】 トロンビンレセプター発現量または活性
化量を測定することを特徴とする経皮的冠状動脈形成術
（ＰＴＣＡ）後の血管再閉塞の予測方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP12246495A JPH08313524A (ja) | 1995-05-22 | 1995-05-22 | トロンビンレセプター発現量または活性化量の測定方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP12246495A JPH08313524A (ja) | 1995-05-22 | 1995-05-22 | トロンビンレセプター発現量または活性化量の測定方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH08313524A true JPH08313524A (ja) | 1996-11-29 |
Family
ID=14836510
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP12246495A Pending JPH08313524A (ja) | 1995-05-22 | 1995-05-22 | トロンビンレセプター発現量または活性化量の測定方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH08313524A (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2006123789A1 (ja) * | 2005-05-20 | 2006-11-23 | Mitsubishi Kagaku Iatron, Inc. | 酵素分析方法 |
| JP2011080883A (ja) * | 2009-10-07 | 2011-04-21 | Seishin Enterprise Co Ltd | 粒子性状の測定方法及び装置並びに測定試料の調製装置 |
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1995
- 1995-05-22 JP JP12246495A patent/JPH08313524A/ja active Pending
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2006123789A1 (ja) * | 2005-05-20 | 2006-11-23 | Mitsubishi Kagaku Iatron, Inc. | 酵素分析方法 |
| JP2011080883A (ja) * | 2009-10-07 | 2011-04-21 | Seishin Enterprise Co Ltd | 粒子性状の測定方法及び装置並びに測定試料の調製装置 |
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