JPH08217776A - Ａｈｐｂａ含有トリペプチド誘導体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】本発明は、優れたＨＩＶプロテアーゼ阻害作用
を有し、ＨＩＶ感染予防若しくは感染治療剤として有用
な新規なＡＨＰＢＡ含有トリペプチド誘導体を提供する
ことを目的とする。 【解決手段】一般式 【化１】 ［式中、Ｒ¹ はキノリン−２−カルボニル又はキノキサ
リン−２−カルボニル；Ｒ² はＨ、アルキル、アセチ
ル、メトキシメチル、メチルチオメチル、アセトキシメ
チル、ピバロイルオキシメチル、ＨＯＯＣ（ＣＨ₂ ）n
ＣＯ−基（ｎは、２乃至４の整数を示す）又はＨＯＯＣ
ＣＨ₂ ＯＣＨ₂ ＣＯ−基］で表わされる化合物。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、優れたヒト後天性
免疫不全症症候群発症ウイルス（以下、ＨＩＶ）由来の
プロテアーゼ（以下、ＨＩＶプロテアーゼ）阻害活性を
有する新規な３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニ
ルブタン酸（以下、ＡＨＰＢＡ）含有トリペプチド誘導
体に関する。

【０００２】

【従来の技術】ＡＩＤＳはレンチウイルスの一つである
ＨＩＶと称するレトロウイルスにより引き起こされる病
気である。ＷＨＯの見積りによれば、今日、世界中で約
１０００万人がこの病気にかかっており、その患者数は
さらに増加の一途をたどっている。この病気は致死的で
あり、治癒に至る有効な治療法は現在のところまだない
と考えられる。

【０００３】レトロウイルス複製の一般的な特徴は、ウ
イルスの産生するプロテアーゼがウイルスの前駆体たん
白をプロセシングすることによって、ウイルスの構成及
び機能に必要なウイルスたん白を生成することである。
このプロセシングを阻害すれば、通常は感染性のウイル
ス産生を防止することができる。例えば、 Proc. Natl.
Acad. Sci. 85, 4686 (1988) に記載されたKohl, N.E.
らの論文は、ＨＩＶでコードされたプロテアーゼが遺伝
的に不活性になると成熟した感染性ウイルス粒子は産生
されないことを明らかにしている。このことは、ＨＩＶ
プロテアーゼを阻害することが、ＨＩＶ感染の予防もし
くは治療およびＡＩＤＳの治療に有効であることを示す
ものである。

【０００４】この考えに基づき、すでに数多くのＨＩＶ
プロテアーゼ阻害物質が合成され、また、自然界から見
出され、in vitroで抗ＨＩＶ活性を示す物質も報告され
ている［Lang M., Rosel J. Arch. Pharm. 326, 921 (1
993);Martin, J. A., Antiviral Ros., 17, 265 (199
2); Meek, T. D., J. of Enzyme Inhibition,６, 65(1
992); 特開平 5−222020号、J. Med. Chem.1993,36,29
2) ］。

【０００５】しかし、一般に生体内にこれらＨＩＶプロ
テアーゼ阻害剤を経口または非経口投与したとき、体内
の感染細胞におけるウイルスの複製を抑制するのに十分
な血中濃度を維持することは困難であるため、実際に臨
床試験段階にあるＨＩＶプロテアーゼ阻害剤は少ない。

【０００６】

【発明が解決しようとする課題】本発明は、ＨＩＶプロ
テアーゼによって切断されない遷移状態アナローグを含
み、ＨＩＶプロテアーゼに対して特異的で、優れた酵素
阻害活性を有し、感染細胞に低濃度でも有効であり、生
体内での有効性が期待できる血中濃度を経口または非経
口投与により達成する低分子のＨＩＶプロテアーゼ阻害
剤を提供する。

【０００７】

【課題を解決するための手段】本発明の新規なＡＨＰＢ
Ａ含有トリペプチド誘導体は、一般式

【０００８】

【化２】

【０００９】［式中、Ｒ¹ はキノリン−２−カルボニル
基又はキノキサリン−２−カルボニル基を示し、Ｒ² は
水素原子、炭素数１乃至４個のアルキル基、アセチル
基、メトキシメチル基、メチルチオメチル基、アセトキ
シメチル基、ピバロイルオキシメチル基、ＨＯＯＣ（Ｃ
Ｈ₂ ）n ＣＯ−基（ｎは、２乃至４の整数を示す）又は
ＨＯＯＣＣＨ₂ ＯＣＨ₂ ＣＯ−基を示す］で表わされる
化合物及びその塩である。上記一般式（Ｉ）において：
Ｒ² の炭素数１乃至４個のアルキル基としては、メチ
ル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチ
ル、イソブチル、ｓ−ブチル及びｔ−ブチル基があげら
れ、好適にはメチルまたはｔ−ブチル基である。

【００１０】本発明の化合物（Ｉ）は、塩にすることが
できる場合があり、そのようなとしては、好適には、ナ
トリウム塩、カリウム塩のようなアルカリ金属塩、カル
シウム塩、マグネシウム塩のようなアルカリ土類金属塩
等の金属塩；塩酸塩、臭化水素酸塩、沃化水素酸塩のよ
うなハロゲン化水素酸塩、硝酸塩、過塩素酸塩、硫酸
塩、燐酸塩等の無機酸塩；メタンスルホン酸塩、トリフ
ルオロメタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩のよう
な低級アルカンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、
p-トルエンスルホン酸塩のようなアリ−ルスルホン酸
塩、フマ−ル酸塩、コハク酸塩、クエン酸塩、酒石酸
塩、蓚酸塩、マレイン酸塩等の有機酸塩及びグルタミン
酸塩、アスパラギン酸塩のようなアミノ酸塩を挙げるこ
とができる。 又、本発明の化合物（Ｉ）は、大気中に
放置しておくことにより、水分を吸収し、吸着水が付い
たり、水和物となる場合があり、そのような塩も本発明
に包含される。

【００１１】本発明の化合物（Ｉ）は、分子内に不斉炭
素を有し、各々がＲ配置、Ｓ配置である立体異性体が存
在するが、その各々、或いはそれらの混合物のいずれも
本発明に含まれる。

【００１２】本発明の化合物のうち、好適なものとして
は、 ２）Ｒ² が水素原子、炭素数１乃至４個のアルキル基、
アセチル基、メトキシメチル基、ＨＯＯＣ（ＣＨ₂ ）n
ＣＯ−基（ｎは、２乃至４の整数を示す）又はＨＯＯＣ
ＣＨ₂ ＯＣＨ₂ ＣＯ−基である化合物、 ３）Ｒ² が水素原子又は炭素数１乃至４個のアルキル基
である化合物、 ４）Ｒ² が水素原子である化合物である。

【００１３】本発明の代表化合物を下記表１に示すが、
本発明の化合物はこれらに限定されるものではない。

【００１４】なお、表１中、Ｍｅはメチル基を示し、ｔ
Ｂｕはｔ−ブチル基を示し、ＭＯＭはメトキシメチル基
を示し、Ａｃはアセチル基を示し、Ｓｕｃはサクシニル
基（ＨＯＯＣ（ＣＨ₂ ）₂ ＣＯ−）を示し、Ｄｉｇはジ
グリコリル基（ＨＯＯＣＣＨ₂ ＯＣＨ₂ ＣＯ−）を示
し、Ｇｌｔはグルタリル基（ＨＯＯＣ（ＣＨ₂ ）₃ ＣＯ
−）を示し、ＭＳＭはメチルチオメチル基を示し、ＡＯ
Ｍはアセトキシメチル基を示し、Ｑｘａはキノキサリン
−２−カルボニル基を示し、Ｑｏａはキノリン−２−カ
ルボニル基を示し、ＰＯＭはピバロイルオキシメチル基
を示す。

【００１５】

【化３】

【００１６】

【表１】 ────────────────────────── 例示番号 Ｒ¹ Ｒ² ────────────────────────── １ Ｑｘａ Ｈ ２ Ｑｘａ Ｍｅ ３ Ｑｘａ ｔＢｕ ４ Ｑｘａ Ａｃ ５ Ｑｘａ ＭＯＭ ６ Ｑｘａ Ｓｕｃ ７ Ｑｘａ Ｄｉｇ ８ Ｑｘａ Ｇｌｔ ９ Ｑｘａ ＭＳＭ １０ Ｑｘａ ＡＯＭ １１ Ｑｘａ ＰＯＭ １２ Ｑｏａ Ｈ １３ Ｑｏａ Ｍｅ １４ Ｑｏａ ｔＢｕ １５ Ｑｏａ Ａｃ １６ Ｑｏａ ＭＯＭ １７ Ｑｏａ Ｓｕｃ １８ Ｑｏａ Ｄｉｇ １９ Ｑｏａ Ｇｌｔ ２０ Ｑｏａ ＭＳＭ ２１ Ｑｏａ ＡＯＭ ２２ Ｑｏａ ＰＯＭ ─────────────────────────── 上記表中、好適な化合物は、２（Ｓ），３（Ｓ）−３−
［Ｎ−（キノキサリン−２−カルボニル）−Ｌ−スレオ
ニル］アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタノイ
ル−［４（Ｓ）−クロロ］−Ｌ−プロリンｔｅｒｔ−ブ
チルアミド（例示番号１）及び２（Ｓ），３（Ｓ）−３
−［Ｎ−（キノリン−２−カルボニル）−Ｌ−スレオニ
ル］アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタノイル
−［４（Ｓ）−クロロ］−Ｌ−プロリンｔｅｒｔ−ブチ
ルアミド（例示番号１２）である。

【００１７】

【発明の実施の形態】次に、本発明の化合物の製造方法
について説明する。

【００１８】

【化４】

【００１９】（Ａ法）上記工程式中、Ｒ¹ 及びＲ² は前
記と同意義を示し、Ｒ³ 及びＲ⁴ は同一であって低級ア
ルキル、低級アルコキシ若しくは水酸基で置換されてい
てもよいアリールメチル基を示すか、又は、一方が水素
原子、他方がアリールメチル基以外のアミノ基の保護基
を示し、Ｒ⁵ はアミノ基の通常の保護基を示す。

【００２０】Ｒ³ 及びＲ⁴ の「低級アルキル、低級アル
コキシ若しくは水酸基で置換されていてもよいアリール
メチル基」としては、ベンジル、４−メチルベンジル、
４−メトキシベンジル、４−エチルベンジル、４−エト
キシベンジル、４−ヒドロキシベンジル等があげられ
る。

【００２１】Ｒ³ 又はＲ⁴ の「アリールメチル基以外の
アミノ基の保護基」及びＲ⁵ のアミノ基の通常の保護基
としては、通常使用するものであれば限定はないが、好
適には、前記「脂肪族アシル基」；ベンゾイル、α−ナ
フトイル、β−ナフトイルのようなアリールカルボニル
基、２−ブロモベンゾイル、４−クロロベンゾイルのよ
うなハロゲン化アリールカルボニル基、２，４，６−ト
リメチルベンゾイル、４−トルオイルのような低級アル
キル化アリールカルボニル基、４−アニソイルのような
低級アルコキシ化アリールカルボニル基、４−ニトロベ
ンゾイル、２−ニトロベンゾイルのようなニトロ化アリ
ールカルボニル基、２−（メトキシカルボニル）ベンゾ
イルのような低級アルコキシカルボニル化アリールカル
ボニル基、４−フェニルベンゾイルのようなアリール化
アリールカルボニル基等の芳香族アシル基；メトキシカ
ルボニル、エトキシカルボニル、ｔ−ブトキシカルボニ
ル、イソブトキシカルボニルのような低級アルコキシカ
ルボニル基、２，２，２−トリクロロエトキシカルボニ
ル、２−トリメチルシリルエトキシカルボニルのような
ハロゲン又はトリ低級アルキルシリル基で置換された低
級アルコキシカルボニル基等のアルコキシカルボニル
基；ビニルオキシカルボニル、アリルオキシカルボニル
のようなアルケニルオキシカルボニル基；ベンジルオキ
シカルボニル、４−メトキシベンジルオキシカルボニ
ル、３，４−ジメトキシベンジルオキシカルボニル、２
−ニトロベンジルオキシカルボニル、４−ニトロベンジ
ルオキシカルボニルのような、１乃至２個の低級アルコ
キシ又はニトロ基でアリール環が置換されていてもよい
アラルキルオキシカルボニル基；トリメチルシリル、ト
リエチルシリル、イソプロピルジメチルシリル、ｔ−ブ
チルジメチルシリル、メチルジイソプロピルシリル、メ
チルジ−ｔ−ブチルシリル、トリイソプロピルシリルの
ようなトリ低級アルキルシリル基、ジフェニルメチルシ
リル、ジフェニルブチルシリル、ジフェニルイソプロピ
ルシリル、フェニルジイソプロピルシリルのような１乃
至２個のアリール基で置換されたトリ低級アルキルシリ
ル基等のシリル基である。

【００２２】出発物質として使用される化合物（VI）
は、公知であるか又は公知の方法に従って合成できる。
化合物（VI）の４−クロロプロリンは、４−ヒドロキシ
プロリンを原料にして塩酸による方法、三塩化リンを用
いる方法、塩化チオニル又はオキシ塩化リン等の酸ハラ
イドを用いる方法、好ましくはA. K. Boseらの方法［ T
etrahedron Letters, 40, 3937(1973)に従って、Ｎ−ク
ロロコハク酸イミドとトリアルキルホスフェートを用い
る方法、J. G. Calzada S(Org. Syn.,６, 634)に従っ
て、四塩化炭素とトリフェニルホスフィンを作用させる
方法等が用いられる。

【００２３】出発物質として使用される化合物（Ｖ）
は、公知であるか、又は公知の方法に従って容易に合成
される。例えば、R. Horanz 等の方法（Synthesis, 70
3, 1989）及びM. T. Reets 等の方法（Tetraheron Let
t., 29, 3295, 1988）に従って合成される。

【００２４】これらは既知化合物又は既知の方法に従っ
て、容易に合成できる化合物であり、本明細書に詳述し
ていない変形法を使用することもできる。

【００２５】以下、各工程について詳述する。

【００２６】第１工程は、化合物（Ｖ）又はそのカルボ
ン酸の反応性誘導体と、アミノ化合物（VI）を反応させ
て、化合物（VII)を製造する工程である。

【００２７】反応は、通常のペプチド合成法に準じて行
われ、例えば、アジド法、活性エステル化法、混合酸無
水物法又は縮合法により行われる。

【００２８】アジド法は、アミノ酸又はそのエステル体
をヒドラジドと、不活性溶剤中、室温付近で反応させる
ことによって製造されるアミノ酸ヒドラジンを、亜硝酸
化合物と反応させ、アジド化合物に変換した後、アミン
化合物と処理することにより行われる。

【００２９】使用される亜硝酸化合物としては、例え
ば、亜硝酸ナトリウムのようなアルカリ金属亜硝酸塩又
は亜硝酸イソアミルのような亜硝酸アルキル化合物を挙
げることができる。

【００３０】使用される不活性溶剤としては、例えば、
ジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミドのような
アミド類、ジメチルスルホキシドのようなスルホキシド
類、Ｎ−メチルピロリドンのようなピロリドン類を挙げ
ることができる。

【００３１】本工程の２つの反応は、通常、１つの反応
液中で行われ、反応温度は、前段が−５０乃至０℃であ
り、後段が−１０乃至１０℃であり、反応時間は、前段
が５分乃至１時間であり、後段が１０時間乃至５日間で
ある。

【００３２】活性エステル化法は、溶剤中、アミノ酸を
活性エステル化剤と反応させ、活性エステルを製造した
後、アミン化合物と反応させることによって行われる。

【００３３】使用される溶剤としては、不活性であれば
特に限定はないが、例えば、メチレンクロリド、クロロ
ホルムのようなハロゲン化炭化水素類、エーテル、テト
ラヒドロフランのようなエーテル類、ジメチルホルムア
ミド、ジメチルアセトアミドのようなアミド類を挙げる
ことができる。

【００３４】使用される活性エステル化剤としては、例
えば、Ｎ−ヒドロキシサクシイミド、１−ヒドロキシベ
ンゾトリアゾール、Ｎ−ヒドロキシ−５−ノルボルネン
−２，３−ジカルボキシイミドのようなＮ−ヒドロキシ
化合物を挙げることができ、活性エステル化反応は、ジ
シクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）のような縮合
剤の存在下に好適に行われる。又、１，１′−オキザリ
ルジイミダゾール、２，２′−ジピリジルジサルファイ
ド、Ｎ，Ｎ′−ジサクシンイミジルカーボネート、ジフ
ェニルリン酸アジド（ＤＰＰＡ）、ジエチルシアノリン
酸（ＤＥＰＣ）、Ｎ，Ｎ′−ビス（２−オキソ−３−オ
キサゾリジニル）ホスフィニッククロライド（ＢＯＰ−
ＣＩ），Ｎ，Ｎ′−カルボニルジイミダゾール、Ｎ，
Ｎ′−ジサクシンイミジルオキザレート（ＤＳＯ）、
Ｎ，Ｎ′−ジフタールイミドオキザレート（ＤＰＯ）、
Ｎ，Ｎ′−ビス（ノルボルネニルサクシンイミジル）オ
キザレート（ＢＮＯ）、１，１′−ビス（ベンゾトリア
ゾリル）オキザレート（ＢＢＴＯ）、１，１′−ビス
（６−クロロベンゾトリアゾリル）オキザレート（ＢＣ
ＴＯ）、１，１′−ビス（６−トリフルオロメチルベン
ゾトリアゾリル）オキザレート（ＢＴＢＯ）、ブロム−
トリス−ピロリジノ−ホスホニウム−ヘキサフルオロ−
ホスフェート（ＰｙＢｒＯＰ）の縮合剤の存在下縮合す
ることもできる。反応温度は、活性エステル化反応で
は、−１０乃至２５℃であり、活性エステル化合物とア
ミンとの反応では室温付近であり、反応時間は両反応共
に３０分乃至１０時間である。

【００３５】混合酸無水物法は、アミノ酸の混合酸無水
物を製造した後、アミンと反応させることにより行われ
る。

【００３６】混合酸無水物を製造する反応は、不活性溶
剤（例えば、エーテル、テトラヒドロフランのようなエ
ーテル類、ジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミ
ドのようなアミド類）中、クロロ炭酸エチル、クロロ炭
酸イソブチルのような炭酸低級アルキルハライド、ジエ
チルシアノリン酸（ＤＥＰＣ）のようなジ低級アルキル
シアノリン酸、又はジフェニルリン酸アジド（ＤＰＰ
Ａ）とアミノ酸を反応させることにより達成される。

【００３７】反応は、好適には、トリエチルアミン、Ｎ
−メチルモルホリンのような有機アミンの存在下に行わ
れ、反応温度は、−１０乃至２５℃であり、反応時間
は、３０分間乃至５時間である。

【００３８】混合酸無水物とアミンの反応は、好適には
不活性溶剤（例えば、エーテル、テトラヒドロフランの
ようなエーテル類、ジメチルホルムアミド、ジメチルア
セトアミドのようなアミド類）中、前記の有機アミンの
存在下に行われ、反応温度は０℃乃至室温であり、反応
時間は、１時間乃至２４時間である。

【００３９】縮合法は、アミノ酸とアミンをジシクロヘ
キシルカルボジイミド、カルボニルジイミダゾールのよ
うな縮合剤の存在下、直接反応させることによって行わ
れ、前記の活性エステルを製造する反応と同様にして行
われる。

【００４０】第２工程は、化合物（VII)のアミノ基の保
護基を溶剤中で除去し、化合物（VIII）を製造する工程
である。

【００４１】アミノ基の保護基として、シリル基を使用
した場合には、通常、弗化テトラブチルアンモニウム、
弗化カリウムのような弗素アニオンを生成する化合物で
処理することにより除去される。

【００４２】反応溶剤は、反応を阻害しないものであれ
ば特に限定はないが、テトラヒドロフラン、ジオキサン
のようなエーテル類が好適である。

【００４３】反応温度及び反応時間は特に限定はない
が、通常室温で１０乃至１８時間反応させる。

【００４４】アミノ基の保護基として、ｔ−ブチルオキ
シカルボニル基のようなアルコキシカルボニル基を使用
した場合には、不活性溶剤中、酸で処理することにより
除去される。

【００４５】反応溶剤は、反応を阻害しないものであれ
ば特に限定はないが、ジメチルホルムアミド、ジメチル
アセトアミドのようなアミド類；ジエチルエーテル、ジ
イソプロピルエーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサ
ン、ジメトキシエタン、ジエチレングリコールジメチル
エーテルのようなエーテル類；メタノール、エタノー
ル、ｎ−プロパノール、イソプロパノール、ｎ−ブタノ
ール、イソブタノール、ｔ−ブタノール、イソアミルア
ルコール、ジエチレングリコール、グリセリン、オクタ
ノール、シクロヘキサノール、メチルセロソルブのよう
なアルコール類、ジクロルメタン、クロロホルム、トリ
クロロエタンのようなハロゲン化炭化水素が好適であ
る。

【００４６】使用される酸は、酸であれば特に限定はな
いが、好適には、塩酸のような無機酸、トリフルオロ酢
酸のような有機酸、トリフルオロボロン・エテレートの
ようなルイス酸である。

【００４７】反応温度及び反応時間は特に限定はない
が、通常、０乃至３０℃で、２０分間乃至１時間処理す
ることにより行われる。

【００４８】アミノ基の保護基が、脂肪族アシル基、芳
香族アシル基又はシッフ塩基を形成する置換されたメチ
レン基である場合には、水性溶剤の存在下に、酸又は塩
基で処理することにより除去することができる。

【００４９】使用される酸としては、通常酸として使用
されるものであれば特に限定はないが、好適には、塩
酸、硫酸、リン酸、臭化水素酸のような無機酸が用いら
れ、使用される塩基としては、化合物の他の部分に影響
を与えないものであれば特に限定はないが、好適には、
ナトリウムメトキシドのような金属アルコキシド類、炭
酸ナトリウム、炭酸カリウムのようなアルカリ金属炭酸
塩、水酸化ナトリウム、水酸化カリウムのようなアルカ
リ金属水酸化物又はアンモニア水、濃アンモニア−メタ
ノールのようなアンモニア類が用いられる。

【００５０】尚、塩基による加水分解では異性化が起こ
ることがある。

【００５１】使用される溶剤としては、通常の加水分解
反応に使用されるものであれば特に限定はなく、水；メ
タノール、エタノール、ｎ−プロパノールのようなアル
コール類、テトラヒドロフラン、ジオキサンのようなエ
ーテル類等の有機溶剤又は水と上記有機溶剤との混合溶
剤が好適である。

【００５２】反応温度及び反応時間は、出発物質及び用
いる塩基等により異なり特に限定はないが、副反応を抑
制するために、通常は０乃至１５０℃で、１乃至１０時
間実施される。

【００５３】アミノ基の保護基が、アラルキルオキシカ
ルボニル基である場合には、不活性溶剤中、接触還元触
媒の存在下に還元することにより除去される。

【００５４】使用される溶剤としては、通常の還元反応
に使用されるものであれば特に限定はないが、好適に
は、ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、テト
ラヒドロフラン、ジオキサン、ジメトキシエタン、ジエ
チレングリコールジメチルエーテルのようなエーテル
類；メタノール、エタノール、ｎ−プロパノール、イソ
プロパノール、ｎ−ブタノール、イソブタノール、ｔ−
ブタノール、イソアミルアルコール、ジエチレングリコ
ール、グリセリン、オクタノール、シクロヘキサノー
ル、メチルセロソルブのようなアルコール類である。

【００５５】使用される接触還元触媒としては、例え
ば、パラジウム炭素、パラジウム黒等を挙げることがで
きる。

【００５６】反応温度及び反応時間は、出発物質等によ
り異なり特に限定はないが、通常、常圧乃至１０気圧の
水素と室温付近で１時間乃至８時間反応することにより
行われる。

【００５７】アミノ基の保護基が、アリールメチル基の
場合には、通常、溶剤中、還元剤と接触させることによ
り除去され、好適には、触媒下に、常温にて接触還元を
行ない、除去する方法又は酸化剤を用いて除去する方法
が好適である。

【００５８】接触還元による除去において使用される溶
剤としては、本反応に関与しないものであれば特に限定
はないが、メタノール、エタノール、イソプロパノール
のようなアルコール類、ジエチルエーテル、テトラヒド
ロフラン、ジオキサンのようなエーテル類、トルエン、
ベンゼン、キシレンのような芳香族炭化水素類、ヘキサ
ン、シクロヘキサンのような脂肪族炭化水素類、酢酸エ
チル、酢酸プロピルのようなエステル類、ギ酸、酢酸の
ような脂肪酸類又はこれらの有機溶剤と水との混合溶剤
又は脂肪酸類とアルコール類の混合溶剤が好適である。

【００５９】使用される触媒としては、通常、接触還元
反応に使用されるものであれば、特に限定はないが、好
適には、パラジウム黒、パラジウム炭素、ラネーニッケ
ル、酸化白金、白金黒、ロジウム−酸化アルミニウム、
トリフェニルホスフィン−塩化ロジウム、パラジウム−
硫酸バリウムが用いられる。

【００６０】圧力は、特に限定はないが、通常１乃至１
０気圧で行なわれる。

【００６１】反応温度及び反応時間は、出発物質及び触
媒の種類等により異なるが、通常、０乃至１００℃で、
５分乃至２４時間実施される。

【００６２】酸化による除去において使用される溶剤と
しては、本反応に関与しないものであれば特に限定はな
いが、好適には、含水有機溶剤である。

【００６３】このような有機溶剤として好適には、アセ
トンのようなケトン類、メチレンクロリド、クロロホル
ム、四塩化炭素のようなハロゲン化炭化水素類、アセト
ニトリルのようなニトリル類、ジエチルエーテル、テト
ラヒドロフラン、ジオキサンのようなエーテル類、ジメ
チルホルムアミド、ジメチルアセトアミド、ヘキサメチ
ルホスホロトリアミドのようなアミド類及びジメチルス
ルホキシドのようなスルホキシド類を挙げることができ
る。

【００６４】使用される酸化剤としては、通常、酸化に
使用される化合物であれば特に限定はないが、好適には
過硫酸カリウム、過硫酸ナトリウム、アンモニウムセリ
ウムナイトレイト（ＣＡＮ）、２，３−ジクロロ−５，
６−ジシアノ−ｐ−ベンゾキノン（ＤＤＱ）が用いられ
る。

【００６５】反応温度及び反応時間は、出発物質及び触
媒の種類等により異なるが、通常、０乃至１５０℃で、
１０分乃至２４時間実施される。

【００６６】アミノ基の保護基がジアリールメチル基で
ある場合には、前記アリールメチル基の除去反応の条件
と同様にして処理することにより達成される。

【００６７】アミノ基の保護基がアルケニルオキシカル
ボニル基である場合は、通常、アミノ基の保護基が前記
の脂肪族アシル基、芳香族アシル基、アルコキシカルボ
ニル基又はシッフ塩基を形成する置換されたメチレン基
である場合の除去反応の条件と同様にして、塩基と処理
することにより達成される。

【００６８】尚、アリルオキシカルボニルの場合は、特
にパラジウム、及びトリフェニルホスフィン若しくはニ
ッケルテトラカルボニルを使用して除去する方法が簡便
で、副反応が少なく実施することができる。

【００６９】第３工程は、化合物（ＩＸ）又はそのカル
ボン酸の反応性誘導体と、化合物（ＶＩＩＩ）を、第１
工程と同様に反応させて、化合物（Ｘ）を製造する工程
である。

【００７０】第４工程は、化合物（Ｘ）のアミノ基の保
護期を第２工程と同様に除去し、化合物（ＸＩ）を製造
する工程である。

【００７１】第５工程は、化合物（ＸＩＩ）又はそのカ
ルボン酸の反応性誘導体と化合物（ＸＩ）を、第１工程
と同様に反応させて本発明の化合物（Ｉ）を製造する工
程である。

【００７２】

【化５】

【００７３】（Ｂ法）上記工程式中、Ｒ¹ 、Ｒ² 、Ｒ
³ 、Ｒ⁴ 及びＲ⁵ は前述のものと同意義示し、Ｒ ⁶ は水
酸基の保護基を示す。

【００７４】以下、各工程について詳述する。

【００７５】第６工程は、化合物（ＶＩＩ）の水酸基を
通常の方法で保護して化合物（ＸＩＶ）を製造する工程
である。

【００７６】第７工程は、化合物（ＸＩＶ）のアミノ基
を、Ａ法の第２工程と同様にして除去し、化合物（Ｘ
Ｖ）を製造する工程である。

【００７７】第８工程は、化合物（ＸＶＩ）またはその
カルボン酸の反応性誘導体とアミノ化合物（ＸＶ）を、
Ａ法の第１工程と同様に反応させて、化合物（ＸＶＩ
Ｉ）を製造する工程である。

【００７８】第９工程は、化合物（ＸＶＩＩ）のアミノ
基の保護期をＡ法の第２工程と同様にして除去し、化合
物（ＸＶＩＩＩ）を製造する工程である。

【００７９】第１０工程は、化合物（ＸＩＩ）またはそ
のカルボン酸の反応性誘導体とアミノ化合物（ＸＶＩＩ
Ｉ）をＡ法の第１工程と同様に反応させて、化合物（Ｘ
ＩＸ）を製造する工程である。

【００８０】第１１工程は、化合物（Ｘ）と化合物（Ｘ
ＩＸ）を反応させて、化合物（ＸＸＩ）を製造する工程
である。

【００８１】第１２工程は、化合物（ＸＸＩ）の水酸基
の保護基（Ｒ⁶ ）を選択的に除去して、本発明の化合物
（Ｉ）を製造する工程である。

【００８２】上記各工程の反応終了後、各目的化合物は
常法に従って、反応混合物から採取される。例えば、反
応混合物を適宜中和し、また、不溶物が存在する場合に
は濾過により除去した後、水と混和しない有機溶剤を加
え、水洗後、溶剤を留去することにより得られる。得ら
れた目的化合物は必要ならば、常法、例えば、再結晶、
再沈殿又はクロマトグラフィー等によって更に精製でき
る。

【００８３】本発明の化合物（Ｉ）の投与形態として
は、例えば、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤若しくは
シロップ剤等による経口投与又は注射剤若しくは坐剤等
による非経口投与を挙げることができ、これらの製剤
は、賦形剤（例えば、乳糖、白糖、葡萄糖、マンニッ
ト、ソルビットのような糖誘導体；トウモロコシデンプ
ン、バレイショデンプン、α澱粉、デキストリン、カル
ボキシメチルデンプンのような澱粉誘導体；結晶セルロ
ース、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロ
キシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセル
ロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム、内部
架橋カルボキシメチルセルロースナトリウムのようなセ
ルロース誘導体；アラビアゴム；デキストラン；プルラ
ンのような有機系賦形剤：及び、軽質無水珪酸、合成珪
酸アルミニウム、メタ珪酸アルミン酸マグネシウムのよ
うな珪酸塩誘導体；燐酸カルシウムのような燐酸塩；炭
酸カルシウムのような炭酸塩；硫酸カルシウムのような
硫酸塩等の無機系賦形剤を挙げることができる。）、滑
沢剤（例えば、ステアリン酸、ステアリン酸カルシウ
ム、ステアリン酸マグネシウムのようなステアリン酸金
属塩；タルク；コロイドシリカ；ビーガム、ゲイ蝋のよ
うなワックス類；硼酸；アジピン酸；硫酸ナトリウムの
ような硫酸塩；グリコール；フマル酸；安息香酸ナトリ
ウム；ＤＬロイシン；脂肪酸ナトリウム塩；ラウリル硫
酸ナトリウム、ラウリル硫酸マグネシウムのようなラウ
リル硫酸塩；無水珪酸、珪酸水和物のような珪酸類；及
び、上記澱粉誘導体を挙げることができる。）、結合剤
（例えば、ポリビニルピロリドン、マクロゴール、及
び、前記賦形剤と同様の化合物を挙げることができ
る。）、崩壊剤（例えば、前記賦形剤と同様の化合物、
及び、クロスカルメロースナトリウム、カルボキシメチ
ルスターチナトリウム、架橋ポリビニルピロリドンのよ
うな化学修飾されたデンプン・セルロース類を挙げるこ
とができる。）、安定剤（メチルパラベン、プロピルパ
ラベンのようなパラオキシ安息香酸エステル類；クロロ
ブタノール、ベンジルアルコール、フェニルエチルアル
コールのようなアルコール類；塩化ベンザルコニウム；
フェノール、クレゾールのようなフェノール類；チメロ
サール；デヒドロ酢酸；及び、ソルビン酸を挙げること
ができる。）、矯味矯臭剤（例えば、通常使用される、
甘味料、酸味料、香料等を挙げることができる。）、希
釈剤等の添加剤を用いて周知の方法で製造される。

【００８４】その使用量は症状、年齢、投与方法等によ
り異なるが、例えば、経口投与の場合には、１回当り、
下限として 0.1mg/kg、上限として、20mg/kg を、静脈
内投与の場合には、１回当り、下限として 0.01mg/kg
、上限として、2mg/kgを１日当り１乃至数回症状に応
じて投与することが望ましい。

【００８５】次に実施例を挙げて、本発明をさらに詳し
く説明する。

【００８６】

【実施例】

（実施例１）２（Ｓ），３（Ｓ）−３−［Ｎ−（キノキサリン−２−
カルボニル）−Ｌ−スレオニル］アミノ−２−ヒドロキ
シ−４−フェニルブタノイル−［４（Ｓ）−クロロ］−
Ｌ−プロリンｔｅｒｔ−ブチルアミド １） ２（Ｓ），３（Ｓ）−３−（Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチ
ルオキシカルボニル−Ｌ−スレオニル）アミノ−２−ヒ
ドロキシ−４−フェニルブタノイル−［４（Ｓ）−クロ
ロ］−Ｌ−プロリンｔｅｒｔ−ブチルアミド ３（Ｓ）−アミノ−２（Ｓ）−ヒドロキシ−４−フェニ
ルブタノイル−［４（Ｓ）−クロロ］プロリンｔｅｒｔ
−ブチルアミド 200mg（0.52ミリモル）をＮ，Ｎ−ジメ
チルホルムアミド（以下ＤＭＦと略す。）６ｍｌに溶か
し、これに、Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル−
Ｌ−スレオニン114mg （0.52ミリモル）を加え氷冷し
た。シアノリン酸ジエチル（以下ＤＥＰＣと略す。）0.
1ml(0.624 ミリモル）を加え、次いでトリエチルアミン
0.14ml(1.04 ミリモル）を滴下し、３時間攪拌した。反
応混合物を減圧下溶媒留去し、酢酸エチル２０ｍｌを加
え、５％クエン酸、５％ＮａＨＣＯ₃ 水溶液および飽和
食塩水で洗浄し、無水Ｎａ₂ ＳＯ₄ で乾燥した。溶媒を
減圧濃縮し、油状の残さを分取薄層クロマトグラフィー
（塩化メチレン／メタノール＝８：１）で精製した。無
色結晶性固体として表記の化合物190mg を得た。

【００８７】融点２１１−２１４℃。

【００８８】元素分析：C₂₈H₄₃N₄O₇Cl・1/2H₂O( 分子量
592.12) として 理論値:C,56.79;H,7.49;N,9.46;Cl,5.99 実測値:C,56.93;H,7.17;N,9.46;Cl,6.07. Ｍａｓｓ：584(M+H)⁺ ． ＮＭＲ：δ（d₆-DMSO, 270MHz):7.97(1H,d,J=7.9Hz),
7.64(1H,s), 7.41(2H,d,J=6.6Hz), 7.28-7.18(3H,m),
6.36(1H,d,J=8.6Hz), 5.01(1H,d,J=7.3Hz), 4.71(1H,d,
J=5.3Hz), 4.55(1H,m), 4.43(1H,t,J=7.9Hz), 4.34-4.1
9(3H,m), 3.81-3.61(3H,m), 2.82-2.65(3H,m),2.01-1.9
6(1H,m), 1.43(9H,s), 1.30(9H,s), 0.86(3H,d,J=5.9H
z). ２） ２（Ｓ），３（Ｓ）−３−［Ｎ−（キノキサリン
−２−カルボニル）−Ｌ−スレオニル］アミノ−２−ヒ
ドロキシ−４−フェニルブタノイル−［４（Ｓ）−クロ
ロ］−Ｌ−プロリンｔｅｒｔ−ブチルアミド ２（Ｓ），３（Ｓ）−３−（Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチルオキ
シカルボニル−Ｌ−スレオニル）アミノ−２−ヒドロキ
シ−４−フェニルブタノイル−［４（Ｓ）−クロロ］−
Ｌ−プロリンｔｅｒｔ−ブチルアミド0.33g(0.57ミリモ
ル）を４Ｎ塩酸−ジオキサン溶液１０ｍｌに加え、ｔｅ
ｒｔ−ブチルオキシカルボニルを除去して、得られた塩
酸塩の全量と２−キノキサリンカルボン酸99mg(0.57 ミ
リモル）をＤＭＦ６ｍｌに溶かして氷冷した。ＤＥＰＣ
0.11ml(0.684ミリモル）を加え、次いでトリエチルアミ
ン0.16ml( 1.14ミリモル）を滴下し、３時間攪拌した。
反応混合物を減圧下溶媒留去し、酢酸エチル２０ｍｌを
加え、５％クエン酸、５％ＮａＨＣＯ₃ 水溶液および飽
和食塩水で洗浄、無水Ｎａ₂ ＳＯ₄ で乾燥した。溶媒を
減圧濃縮し、油状の残さを分取薄層クロマトグラフィー
（塩化メチレン／メタノール＝８：１）で精製した。ヘ
キサン−エチルエーテルで結晶化し、白色結晶性固体と
して表記の化合物244mg を得た。

【００８９】融点１０９−１１８℃。

【００９０】元素分析：C₃₂H₃₉N₆O₆Cl( 分子量639.14)
として 理論値:C,60.13;H,6.15;N,13.15;Cl,5.55 実測値:C,59.91;H,6.09;N,13.04;Cl,5.64. Ｍａｓｓ：639(M+H)⁺ ． ＮＭＲ：δ（CD₃OD, 270MHz):9.50(1H,m), 8.23-8.16(2
H,m), 7.99-7.93(2H,m),7.33-7.29(2H,m), 7.13-7.14(2
H,m), 7.04-7.01(1H,m), 4.47-4.34(6H,m), 4.23-4.19
(1H,m), 3.78(1H,m), 3.01(1H,dd,J=13.9,3.3Hz), 2.79
-2.70(2H,m), 2.11-2.06(1H,m), 1.36,1.30(9H,ss),
1.17(3H,d,J=6.6Hz). （実施例２）２（Ｓ），３（Ｓ）−３−［Ｎ−（キノキサリン−２−
カルボニル）−Ｏ−アセチル−Ｌ−スレオニル］アミノ
−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタノイル−［４
（Ｓ）−クロロ］−Ｌ−プロリンｔｅｒｔ−ブチルアミ
ド １） ２（Ｓ）、３（Ｓ）−３−［( Ｎ−ベンジルオキ
シカルボニル) −Ｌ−スレオニル］アミノ−２−ｔｅｒ
ｔ−ブチルジメチルシリルオキシ−４−フェニルブタノ
イル［４（Ｓ）−クロロ］−Ｌ−プロリンｔｅｒｔ−ブ
チルアミド 参考例２で合成された化合物0.64g(1.01ミリモル）をメ
タノール５０ｍｌに溶かし、５％パラジウム−炭素触媒
で水素添加しベンジルオキシカルボニル基を除去した。
得られたアミノ化合物全量とＮ−ベンジルオキシカルボ
ニル−Ｌ−スレオニル−Ｎ−ハイドロキシサクシイミド
エステル0.53g （1.52ミリモル）をＤＭＦ１２ｍｌに溶
かして氷冷し、トリエチルアミン0.28ml(2.02 ミリモ
ル）を滴下し、5 時間攪拌した。反応混合物を減圧下溶
媒留去し、酢酸エチル３０ｍｌを加え、５％クエン酸、
５％ＮａＨＣＯ₃ 水溶液および飽和食塩水で洗浄、無水
Ｎａ₂ ＳＯ₄ で乾燥した。溶媒を減圧で留去し、油状の
残さを分取薄層クロマトグラフィー（塩化メチレン／メ
タノール＝１０：１）で精製した。ヘキサンで結晶化
し、白色結晶性固体として表記の化合物0.46g を得た。

【００９１】ＮＭＲ：δ（CDCl₃, 270MHz):7.36-7.13(1
0H,m), 6.49-6.42(1H,m), 5.47(1H,d,J=8.3Hz), 5.13(2
H,q,J=25.2,12.0Hz), 4.41-4.16(6H,m), 3.96(1H,dd,J=
8.5,1.7Hz), 3.75(1H,m), 3.20(1H,dd,J=14.0,3.5Hz),
3.00(1H,d,J=3.7Hz), 2.68-2.43(3H,m), 1.31(9H,s),
1.10(3H,d, J=6.5Hz), 0.96(9H,s), 0.13(6H,d,J=5.4H
z). ２） ２（Ｓ），３（Ｓ）−３−［Ｎ−（キノキサリン
−２−カルボニル）−Ｌ−スレオニル］アミノ−２−ｔ
ｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ−４−フェニルブ
タノイル−［４（Ｓ）−クロロ］−Ｌ−プロリンｔｅｒ
ｔ−ブチルアミド ２（Ｓ）、３（Ｓ）−３−［( Ｎ−ベンジルオキシカル
ボニル) −Ｌ−スレオニル］アミノ−２−ｔｅｒｔ−ブ
チルジメチルシリルオキシ−４−フェニルブタノイル
［４（Ｓ）−クロロ］プロリンｔｅｒｔ−ブチルアミド
0.37g(0.50ミリモル）をメタノール１５ｍｌに溶かし、
５％パラジウム−炭素触媒で水素添加しベンジルオキシ
カルボニル基を除去した。得られたアミノ化合物全量と
２−キノキサリンカルボン酸96mg(0.55 ミリモル）をＤ
ＭＦ８ｍｌに溶かして氷冷した。ＤＥＰＣ0.098ml(0.6
ミリモル）を加え、次いでトリエチルアミン0.14ml(1.0
0 ミリモル）を滴下し、３時間攪拌した。反応混合物を
減圧下溶媒留去し、酢酸エチル２０ｍｌを加え、５％ク
エン酸、５％ＮａＨＣＯ₃ 水溶液および飽和食塩水で洗
浄、無水Ｎａ₂ ＳＯ₄ で乾燥した。溶媒を減圧濃縮し、
油状の残さを分取薄層クロマトグラフィー（塩化メチレ
ン／メタノール＝７：１）で精製し、表記の化合物306m
g を得た。

【００９２】ＮＭＲ：δ（CDCl₃, 270MHz):9.57(1H,s),
8.46(1H,d,J=8.5Hz), 8.25-8.12(2H,m), 7.94-7.87(2
H,m), 7.08(2H,d,J=7.5Hz), 6.88(2H,m), 6.77-6.59(3
H,m), 4.51-4.27(7H,m),3.81-3.78(1H,m), 3.63(1H,br.
s), 3.24-3.17(1H,m), 2.75-2.67(1H,m), 2.60-2.51(2
H,m),1.32(9H,s), 1.19(3H,d,J=6.5Hz), 0.96(9H,s),
0.15(6H,d,J=3.9Hz). ３） ２（Ｓ），３（Ｓ）−３−［Ｎ−（キノキサリン
−２−カルボニル）−Ｏ−アセチル−Ｌ−スレオニル］
アミノ−２−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ−
４−フェニルブタノイル−［４（Ｓ）−クロロ］−Ｌ−
プロリンｔｅｒｔ−ブチルアミド ２（Ｓ），３（Ｓ）−３−［Ｎ−（キノキサリン−２−
カルボニル）−Ｌ−スレオニル］アミノ−２−ｔｅｒｔ
−ブチルジメチルシリルオキシ−４−フェニルブタノイ
ル−［４（Ｓ）−クロロ］−Ｌ−プロリンｔｅｒｔ−ブ
チルアミド100mg(0.13ミリモル）を塩化メチレン４ｍｌ
に溶かし、無水酢酸0.025ml(0.26ミリモル）を加え、次
いで４−ジメチルアミノピリジン1mg(0.013 ミリモル）
を加えて室温で１晩攪拌した。反応混合物を減圧下溶媒
留去し、酢酸エチル２０ｍｌを加え、５％クエン酸、５
％ＮａＨＣＯ₃ 水溶液および飽和食塩水で洗浄、無水Ｎ
ａ₂ ＳＯ₄ で乾燥した。溶媒を減圧濃縮し、表記の化合
物65mgを得た。

【００９３】Ｍａｓｓ：795(M+H)⁺ ＮＭＲ：δ（CDCl₃, 270MHz):9.61(1H,s), 8.36(1H,d,J
=9.2Hz), 8.24-8.16(2H,m)7.95-7.90(2H,m), 7.26-7.15
(2H,m), 7.12-7.01(2H,m),6.85-6.73(2H,m), 6.61(1H,b
r.s),5.47-5.42(1H,m), 4.65-4.59(1H,m), 4.47-4.25(5
H,m), 3.71-3.70(1H,m), 3.11-3.05(1H,m), 2.71-2.58
(3H,m), 1.96(3H,s), 1.31(9H,s), 1.26(3H,d,J=5.9H
z), 0.92(9H,s), 0.10(6H,d,J=8.6Hz). ４） ２（Ｓ），３（Ｓ）−３−［Ｎ−（キノキサリン
−２−カルボニル）−Ｏ−アセチル−Ｌ−スレオニル］
アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタノイル−
［４（Ｓ）−クロロ］−Ｌ−プロリンｔｅｒｔ−ブチル
アミド ２（Ｓ），３（Ｓ）−３−［Ｎ−（キノキサリン−２−
カルボニル）−Ｏ−アセチル−Ｌ−スレオニル］アミノ
−２−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ−４−フ
ェニルブタノイル−［４（Ｓ）−クロロ］−Ｌ−プロリ
ンｔｅｒｔ−ブチルアミド65mg(81.7 マイクロモル）を
テトラヒドロフラン（以下ＴＨＦと略す。）１２ｍｌに
溶かし、テトラ−ｎ−ブチルアンモニウムフルオリド12
8mg(0.49ミリモル）を加えて室温で１４時間攪拌した。
酢酸エチル２０ｍｌを加え、５％ＮａＨＣＯ₃ 水溶液で
洗浄、無水Ｎａ₂ ＳＯ₄ で乾燥した。溶媒を減圧濃縮
し、油状の残さを分取薄層クロマトグラフィー（塩化メ
チレン／メタノール＝９：１）で精製した。ヘキサン−
エチルエーテルで結晶化し、白色結晶性固体として表記
の化合物23mgを得た。

【００９４】融点１０８−１１２℃。

【００９５】元素分析：C₃₄H₄₁N₆O₇Cl・H₂O(分子量681.
17) として 理論値:C,59.95;H,6.07;N,12.34;Cl,5.20 実測値:C,60.28;H,6.23;N,12.05;Cl,5.01. Ｍａｓｓ：681(M+H)⁺ ． ＮＭＲ：δ（CDCl₃, 270MHz):9.63(1H,s), 8.60(1H,d,J
=8.5Hz), 8.25-8.19(2H,m), 7.94-7.86(2H,m), 7.28-7.
11(5H,m), 7.02-6.96(1H,m), 6.44(1H,br), 5.55-5.51
(1H,m),4.88-4.83(1H,m), 4.58-4.52(2H,m), 4.36-4.23
(2H,m), 4.04-3.99(1H,m), 3.84-3.77(1H,m), 2.88-2.5
3(4H,m), 2.05,2.04(3H,ss), 1.85-1.79(1H,m), 1.32(3
H,d,J=6.4Hz), 1,37,1,28(9H,ss). （実施例３）２（Ｓ），３（Ｓ）−３−［Ｎ−（キノキサリン−２−
カルボニル）−Ｏ−メチル−Ｌ−スレオニル］アミノ−
２−ヒドロキシ−４−フェニルブタノイル−［４（Ｓ）
−クロロ］−Ｌ−プロリンｔｅｒｔ−ブチルアミド １） ２（Ｓ），３（Ｓ）−３−（Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチ
ルオキシカルボニル−Ｏ−メチル−Ｌ−スレオニル）ア
ミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタノイル−［４
（Ｓ）−クロロ］−Ｌ−プロリンｔｅｒｔ−ブチルアミ
ド ３（Ｓ）−アミノ−２（Ｓ）−ヒドロキシ−４−フェニ
ルブタノイル−[ ４（Ｓ）−クロロ］プロリンｔｅｒｔ
−ブチルアミド 190mg（0.50ミリモル）を塩化メチレン
６ｍｌに溶かし、これに、Francis M.F. Chen とN.Leo
Benoitonの方法（J. Org. Chem., 1979, vol. 44, 229
9) に従って合成したＮ−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカル
ボニル−Ｏ−メチル−Ｌ−スレオニン114mg （0.52ミリ
モル）を加え氷冷した。ＤＥＰＣ98mg(0.56 ミリモル）
を加え、次いでトリエチルアミン57mg(0.56 ミリモル）
を滴下し、３時間攪拌した。反応混合物を減圧下溶媒留
去し、酢酸エチル２０ｍｌを加え、５％クエン酸、５％
ＮａＨＣＯ₃ 水溶液および飽和食塩水で洗浄、無水Ｎａ
₂ ＳＯ₄ で乾燥した。溶媒を減圧濃縮し、油状の残さに
エチルエーテルを加えて得られた結晶をろ取した。エチ
ルエーテルから再結晶し、無色の細かな針状晶として表
記の化合物280mg を得た。

【００９６】融点２０８−２１１℃。

【００９７】元素分析：C₂₉H₄₅N₄O₇Cl・H₂O(分子量615.
17) として 理論値:C,56.62;H,7.70;N,9.11;Cl,5.76 実測値:C,56.68;H,7.11;N,9.31;Cl,6.51. Ｍａｓｓ：596M⁺. ＮＭＲ：δ (CD₃OD, 360MHz): 7.33-7.14(5H, m), 4.44
-4.31(4H,m), 3.98-3.94(1H, m), 3.76(1H, dd, J=10.
2, 8.0Hz), 3.66-3.60(1H,m), 3.12(3H, s), 2.92-2.70
(3H, m), 2.17-2.10(1H, m), 1.45(9H,s), 1.32(9H,
s), 1.08-1.03(1H+3H, d(3H), J=6.3Hz). ２） ２（Ｓ），３（Ｓ）−３−［Ｎ−（キノキサリン
−２−カルボニル）−Ｏ−メチル−Ｌ−スレオニル］ア
ミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタノイル−［４
（Ｓ）−クロロ］−Ｌ−プロリンｔｅｒｔ−ブチルアミ
ド ２（Ｓ），３（Ｓ）−３−（Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチルオキ
シカルボニル−Ｏ−メチル−Ｌ−スレオニル）アミノ−
２−ヒドロキシ−４−フェニルブタノイル−［４（Ｓ）
−クロロ］−Ｌ−プロリンｔｅｒｔ−ブチルアミド0.24
g(0.4 ミリモル）を４Ｎ塩酸−ジオキサン溶液１０ｍｌ
に加え、ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルを除去し
て、得られた塩酸塩の全量と２−キノキサリンカルボン
酸77mg(0.44 ミリモル）をＤＭＦ６ｍｌに溶かして氷冷
した。ＤＥＰＣ77mg(0.44 ミリモル）を加え、次いでト
リエチルアミン85mg(0.84 ミリモル）を滴下し、３時間
攪拌した。反応混合物を減圧下溶媒留去し、酢酸エチル
２０ｍｌを加え、５％クエン酸、５％ＮａＨＣＯ₃ 水溶
液および飽和食塩水で洗浄、無水Ｎａ₂ ＳＯ₄ で乾燥し
た。溶媒を減圧濃縮し、油状の残さを分取薄層クロマト
グラフィー（塩化メチレン／メタノール＝10：１）で精
製した。ヘキサン、エチルエーテルで結晶化し、白色結
晶性固体として表記の化合物194mg を得た。

【００９８】融点９０−９２℃。

【００９９】元素分析：C₃₃H₄₁N₆O₆Cl・1/2H₂O( 分子量
662.19) として 理論値:C,59.86;H,6.39;N,12.69;Cl,5.35 実測値:C,59.97;H,6.57;N,12.20;Cl,5.03. Ｍａｓｓ：653(M+H)⁺. ＮＭＲ：δ（CD₃OD, 360MHz): 9.53(1H, m), 8.27-8.24
(1H,m), 8.23-8.18(1H,m), 8.01-7.95(2H, m), 7.31(1
H, d, J=7.7Hz), 7.24-7.20(2H, m), 7.11-7.07(1H,
m), 4.51(1H,d, J=3.5Hz), 4.47-4.34(4H, m), 3.91-3.
85(1H, m), 3.77(1H, dd,J=10.4, 3.8Hz), 3.26(3H,
s), 2.99-2.93(2H, m), 2.79-2.70(2H,m), 2.15-2.08(1
H, m), 1.28(9H, s), 1.14(3H, d, J=6.1Hz), 0.9 (1H,
t, J=6.7Hz). （実施例４）２（Ｓ），３（Ｓ）−３−［Ｎ−（キノキサリン−２−
カルボニル）−Ｏ−メトキシメチル−Ｌ−スレオニル］
アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタノイル−
［４（Ｓ）−クロロ］−Ｌ−プロリンｔｅｒｔ−ブチル
アミド １）２（Ｓ），３（Ｓ）−３−（Ｎ−ベンジルオキシカ
ルボニル）−Ｏ−メトキシメチル−Ｌ−スレオニル）ア
ミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタノイル−［４
（Ｓ）−クロロ］−Ｌ−プロリンｔｅｒｔ−ブチルアミ
ド ３（Ｓ）−アミノ−２（Ｓ）−ヒドロキシ−４−フェニ
ルブタノイル−［４（Ｓ）−クロロ］プロリンｔｅｒｔ
−ブチルアミド 190mg（0.50ミリモル）を塩化メチレン
６ｍｌに溶かし、これに、Ｎ−ベンジルオキシカルボニ
ル−Ｏ−メトキシメチル−Ｌ−スレオニン149mg （0.50
ミリモル）を加え氷冷した。ＤＥＰＣ96mg(0.55 ミリモ
ル）を加え、次いでトリエチルアミン56mg (0.55ミリモ
ル）を滴下し、３時間攪拌した。反応混合物を減圧下溶
媒留去し、酢酸エチル２０ｍｌを加え、５％クエン酸、
５％ＮａＨＣＯ₃ 水溶液および飽和食塩水で洗浄、無水
Ｎａ₂ ＳＯ₄ で乾燥した。溶媒を減圧濃縮し、油状の残
さを分取薄層クロマトグラフィー（塩化メチレン／メタ
ノール＝20：１）で精製した。ヘキサン−エチルエーテ
ルで結晶化し、白色結晶性固体として表記の化合物260m
g を得た。

【０１００】融点５７．５−５９℃。

【０１０１】元素分析：C₃₃H₄₅N₄O₈Cl・H₂O(分子量679.
22) として 理論値:C,58.36;H,6.97;N,8.25;Cl,5.22 実測値:C,58.33;H,7.02;N,8.21;Cl,5.11. Ｍａｓｓ：661(M+H)+ ． ＮＭＲ：δ（CDCl₃, 270MHz): 7.37-7.01(10H, m), 6.3
(1H, br.s), 5.64-5.59(1H, m), 4.49(3H, br.s), 4.45
-4.07(6H, m), 3.86-3.64 (2H, m), 3.24(3H, s), 2.81
-2.53(5H, m), 1.31(9H, s), 1.15(2H,d, J=5.7Hz), 0.
89(1H, t, J=5.1,6.9Hz). ２）２（Ｓ），３（Ｓ）−３−［Ｎ−（キノキサリン−
２−カルボニル）−Ｏ−メトキシメチル−Ｌ−スレオニ
ル］アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタノイル
−［４（Ｓ）−クロロ］−Ｌ−プロリンｔｅｒｔ−ブチ
ルアミド 実施例４で合成された２（Ｓ），３（Ｓ）−３−（Ｎ−
ベンジルオキシカルボニル−Ｏ−メトキシメチル−Ｌ−
スレオニル）アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブ
タノイル−［４（Ｓ）−クロロ］−Ｌ−プロリンｔｅｒ
ｔ−ブチルアミド 210mg（0.3 ミリモル）をメタノール
１０ｍｌに溶かし、１０％パラジウム−炭素触媒で水素
添加しベンジルオキシカルボニル基を除去した。得られ
たアミノ化合物全量と２−キノキサリンカルボン酸55mg
(0.33 ミリモル）をＤＭＦ５ｍｌに溶かして氷冷した。
ＤＥＰＣ58mg(0.33 ミリモル）を加え、次いでトリエチ
ルアミン64mg(0.63 ミリモル）を滴下し、１０時間攪拌
した。酢酸エチル２０ｍｌを加え、５％クエン酸、５％
ＮａＨＣＯ₃ 水溶液および飽和食塩水で洗浄、無水Ｎａ
₂ ＳＯ₄ で乾燥した。溶媒を減圧で留去し、油状の残さ
を分取薄層クロマトグラフィー（塩化メチレン／メタノ
ール＝20：１）で精製した。エチルエーテル−ヘキサン
で結晶化し、白色結晶性固体として表記の化合物160mg
を得た。

【０１０２】融点８２−８８℃。

【０１０３】元素分析：C₃₄H₄₃N₆O₇Cl・1/2H₂O( 分子量
692.22) として 理論値:C,59.00;H,6.41;N,12.14;Cl,5.12 実測値:C,58.97;H,7.02;N,11.66;Cl,5.05. Ｍａｓｓ：683(M+H)⁺ ． ＮＭＲ：δ（CDCl₃, 360MHz): 9.62(1H, m), 8.7(1H,
d, J=7.2Hz), 8.23-8.20(2H, m), 7.94-7.85(2H, m),
7.31-7.11(5H, m), 6.23(1H,s), 4.74-4.66(2H, m), 4.
57(1H, d, J=2.4Hz), 4.50-4.24(6H, m), 3.82(1H, d
d, J=10.7, 6.8Hz),3.69-3.56(1H, m), 3.38(1H, q,),
2.84-2.60(5H, m), 1.39(1H, s), 1.27(9H,s), 1.04(1
H, d, J=6. 2Hz), 0.9(1H, t, J=6.6, 6.1Hz). （実施例５）２（Ｓ），３（Ｓ）−３−［Ｎ−（キノキサリン−２−
カルボニル）−Ｏ−スクシニル−Ｌ−スレオニル］アミ
ノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタノイル−［４
（Ｓ）−クロロ］−Ｌ−プロリン ｔｅｒｔ−ブチルア
ミド １） ２（Ｓ）、３（Ｓ）−３−［( Ｎ−ベンジルオキ
シカルボニル) −Ｌ−スレオニル］アミノ−２−メトキ
シメチルオキシ−４−フェニルブタノイル［４（Ｓ）−
クロロ］−Ｌ−プロリンｔｅｒｔ−ブチルアミド 参考例３で合成された化合物1.90g(3.40ミリモル）をメ
タノール５０ｍｌに溶かし、１０％パラジウム−炭素触
媒で水素添加しベンジルオキシカルボニル基を除去し
た。得られたアミノ化合物全量とＮ−ベンジルオキシカ
ルボニル−Ｌ−スレオニル−Ｎ−ハイドロキシサクシイ
ミドエステル1.24g （3.70ミリモル）を塩化メチレン６
０ｍｌに溶かして氷冷し、トリエチルアミン0.56ml(4.0
4 ミリモル）を滴下し、16時間攪拌した。反応混合物を
減圧下溶媒留去し、酢酸エチル３０ｍｌを加え、５％ク
エン酸、５％ＮａＨＣＯ₃ 水溶液および飽和食塩水で洗
浄、無水Ｎａ₂ ＳＯ₄ で乾燥した。溶媒を減圧で留去
し、油状の残さをシリカゲルクロマトグラフィー（塩化
メチレン／メタノール＝ １０：１）で精製した。ヘキ
サンで結晶化し、白色結晶性固体として表記の化合物1.
56g を得た。

【０１０４】融点８３−８６℃。

【０１０５】元素分析：C₃₃H₄₅N₄O₈Cl( 分子量661.20)
として 理論値:C,59.95;H,6.86;N,8.47;Cl,5.36 実測値:C,59.75;H,6.89;N,8.46;Cl,5.44. Ｍａｓｓ：661(M+H)⁺ ． ＮＭＲ：δ（CDCl₃, 270MHz):7.38-7.24 (10H, m), 6.9
5(1H, d, J=4. 8Hz), 6.26(1H, br.s), 5.69(1H, d, J=
4.5Hz), 5.11(2H,d,J=6.1Hz ), 4.79-4.63(3H,m), 4.52
-4.06(7H, m), 3.77-3.71(1H,m), 3.37(3H,s), 2.95(2
H, d, J=7.17Hz),2.56(2H, t, J=7.1Hz),1.31(9H, s),
1.12(3H, d, J=6.5Hz). ２） ２（Ｓ），３（Ｓ）−３−［Ｎ−（キノキサリン
−２−カルボニル）−Ｌ−スレオニル］アミノ−２−メ
トキシメチルオキシ−４−フェニルブタノイル−［４
（Ｓ）−クロロ］−Ｌ−プロリンｔｅｒｔ−ブチルアミ
ド ２（Ｓ）、３（Ｓ）−３−［( Ｎ−ベンジルオキシカル
ボニル) −Ｌ−スレオニル］アミノ−２−メトキシメチ
ルオキシ−４−フェニルブタノイル［４（Ｓ）−クロ
ロ］プロリンｔｅｒｔ−ブチルアミド1.55g(2.35ミリモ
ル）をメタノール40ｍｌに溶かし、１０％パラジウム−
炭素触媒で水素添加しベンジルオキシカルボニル基を除
去した。得られたアミノ化合物全量と２−キノキサリン
カルボン酸412mg(2.37ミリモル）をＤＭＦ40ｍｌに溶か
して氷冷した。１−エチル−３−（３−ジメチルアミノ
プロピル）カルボジイミド塩酸塩450mg(2.35ミリモ
ル）、次いで１−ヒドロキシベンゾトリアゾ−ル一水和
物317mg(2.35ミリモル）を加え、１４時間攪拌した。反
応混合物を減圧下溶媒留去し、酢酸エチル２０ｍｌを加
え、５％クエン酸、５％ＮａＨＣＯ₃ 水溶液および飽和
食塩水で洗浄、無水Ｎａ₂ ＳＯ₄ で乾燥した。溶媒を減
圧濃縮し、油状の残さをシリカゲルクロマトグラフィー
（塩化メチレン／メタノール＝１０：１）で精製し、表
記の化合物1.12g を得た。

【０１０６】融点８２−８７℃。

【０１０７】元素分析：C₃₄H₄₃N₆O₇Cl・H₂O (分子量70
1.23) として 理論値:C,58.24;H,6.47;N,11.98;Cl,5.06 実測値:C,57.87;H,6.73;N,11.87;Cl,4.62. Ｍａｓｓ：683(M+H)⁺ ． ＮＭＲ：δ（CDCl₃, 270MHz):9.65-9.55 (1H, m), 8.31
-7.83(6H, m), 7.37-7.25(5H, m), 7.01(1H, d, J=7.4H
z), 6.35(1H, br.s), 4.79-4.21(9H, m), 3.79-3.73(1
H, m), 3.37(3H,s), 3.08-2.83(2H, m), 2.72-2.51(2
H, m), 1.31(9H, s), 1.21(3H, d, J=6.5Hz). ３） ２（Ｓ），３（Ｓ）−３−［Ｎ−（キノキサリン
−２−カルボニル）−Ｏ−スクシニル−Ｌ−スレオニ
ル］アミノ−２−メトキシメチルオキシ−４−フェニル
ブタノイル−［４（Ｓ）−クロロ］−Ｌ−プロリンｔｅ
ｒｔ−ブチルアミド ２（Ｓ），３（Ｓ）−３−［Ｎ−（キノキサリン−２−
カルボニル）−Ｌ−スレオニル］アミノ−２−メトキシ
メチルオキシ−４−フェニルブタノイル−［４（Ｓ）−
クロロ］−Ｌ−プロリンｔｅｒｔ−ブチルアミド1.11g
(1.63ミリモル）を塩化メチレン２０ｍｌに溶かし、無
水こはく酸360mg(3.60ミリモル）を加え、次いで４−ジ
メチルアミノピリジン3mg(0.039 ミリモル）を加えて室
温で１晩攪拌した。反応混合物を減圧下溶媒留去し、酢
酸エチル２０ｍｌを加え、５％クエン酸、５％ＮａＨＣ
Ｏ₃ 水溶液および飽和食塩水で洗浄、無水Ｎａ₂ ＳＯ₄
で乾燥した。溶媒を減圧濃縮し、残さをシリカゲルクロ
マトグラフィー（塩化メチレン／メタノール＝１０：
１）で精製し、表記の化合物756mg を得た。

【０１０８】融点９９−１０１℃。

【０１０９】元素分析：C₃₈H₄₇N₆O₁₀Cl ( 分子量783.2
9) として 理論値:C,58.27;H,6.05;N,10.73;Cl,4.53 実測値:C,57.81;H,6.28;N,10.60;Cl,4.50. Ｍａｓｓ：783(M+H)⁺ ． ＮＭＲ：δ（CDCl₃, 270MHz):9.61 (1H, s), 8.61(1H,
d, J=7.9Hz),8.23-8.19(2H, m), 7.89-7.86(2H, m),7.2
6-7.22(5H, m), 6.45-6.37(1H, br.s), 5.41-5.38(1H,
m), 4.78-4.58(3H, m), 4.45-4.21(4 H, m), 3.71-3.65
(1H, m), 3.47(3H, s), 3.42(1H, d, J=8.6Hz), 3.36(2
H, s), 2.94-2.88(2H, m), 2.66-2.50(6H,m), 1.36-1.2
7(12H,m). ４） ２（Ｓ），３（Ｓ）−３−［Ｎ−（キノキサリン
−２−カルボニル）−Ｏ−スクシニル−Ｌ−スレオニ
ル］アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタノイル
−［４（Ｓ）−クロロ］−Ｌ−プロリンｔｅｒｔ−ブチ
ルアミド ２（Ｓ），３（Ｓ）−３−［Ｎ−（キノキサリン−２−
カルボニル）−Ｏ−スクシニル−Ｌ−スレオニル］アミ
ノ−２−メトキシメチルオキシ−４−フェニルブタノイ
ル−［４（Ｓ）−クロロ］−Ｌ−プロリンｔｅｒｔ−ブ
チルアミド270mg(0.35ミリモル）を塩化メチレン２０ｍ
ｌに溶かし、トリフルオロ酢酸0.2ml(1.8ミリモル）を
加えて室温で２時間攪拌した。酢酸エチル２０ｍｌを加
え、５％ＮａＨＣＯ₃ 水溶液で洗浄、無水Ｎａ₂ ＳＯ₄
で乾燥した。溶媒を減圧濃縮し、油状の残さを分取薄層
クロマトグラフィー（塩化メチレン：エタノール：酢酸
＝９５：５：３）で精製し、白色結晶性固体として表記
の化合物130mg を得た。

【０１１０】融点１２６−１２９℃。

【０１１１】元素分析：C₃₆H₄₃N₆O₉Cl・1.5H₂O(分子量76
6.26) として 理論値:C,56.43;H,6.05;N,10.97;Cl,4.63 実測値:C,56.23;H,6.06;N,10.23;Cl,4.36. Ｍａｓｓ：739(M+H)⁺ ． ＮＭＲ：δ（CDCl₃, 270MHz):9.62 (1H, s), 8.70-8.59
(1H, m), 8.23-8.18(2H,m), 7.93-7.84(2H, m), 7.26-
7.20(5H, m), 7.02-6.97( 1H, m), 6.30(1H, br.s), 5.
54-5.50(1H, m), 4.83-4.11(7H, m), 3.97-3.68(2H,
m), 2.97-2.51(8H,m), 1.43-1.22(12H, m). （実施例６）２（Ｓ），３（Ｓ）−３−［Ｎ−（キノキサリン−２−
カルボニル）−Ｌ−アロスレオニル］アミノ−２−ヒド
ロキシ−４−フェニルブタノイル−［４（Ｓ）−クロ
ロ］−Ｌ−プロリンｔｅｒｔ−ブチルアミド １） ２（Ｓ），３（Ｓ）−３−（Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチ
ルオキシカルボニル−Ｌ−アロスレオニル）アミノ−２
−ヒドロキシ−４−フェニルブタノイル−［４（Ｓ）−
クロロ］−Ｌ−プロリンｔｅｒｔ−ブチルアミド ３（Ｓ）−アミノ−２（Ｓ）−ヒドロキシ−４−フェニ
ルブタノイル−［４（Ｓ）−クロロ］プロリンｔｅｒｔ
−ブチルアミド 461mg（1.21ミリモル）をＮ，Ｎ−ジメ
チルホルムアミド（以下ＤＭＦと略す。）１０ｍｌに溶
かし、これに、Ｎ−tert−ブチルオキシカルボニル−Ｌ
−アロスレオニン285mg （1.30ミリモル）を加え氷冷し
た。シアノリン酸ジエチル（以下ＤＥＰＣと略す。）0.
23ml(1.31ミリモル）を加え、次いでトリエチルアミン
0.18ml(1.31 ミリモル）を滴下し、３時間攪拌した。反
応混合物を減圧下溶媒留去し、酢酸エチル２０ｍｌを加
え、５％クエン酸、５％ＮａＨＣＯ₃ 水溶液および飽和
食塩水で洗浄、無水Ｎａ₂ ＳＯ₄ で乾燥した。溶媒を減
圧濃縮し、油状の残さをシリカゲルクロマトグラフィー
（塩化メチレン／メタノール＝１０：１）で精製した。
無色結晶性固体として表記の化合物670mg を得た。

【０１１２】融点１９４−１９６℃。

【０１１３】Ｍａｓｓ：583(M)⁺ ． ＮＭＲ：δ（CDCl₃, 270MHz):7.32-7.12(5H,m ), 4.43-
4.04(9H,m), 3.96-3.73(3H,m), 2.95-2.67(4H,m), 2.18
-2.07(1H,m), 1.44(9H,m), 1.33(9H,s) 1.01(3H,d,J=6.
1Hz) ２） ２（Ｓ），３（Ｓ）−３−［Ｎ−（キノキサリン
−２−カルボニル）−Ｌ−アロスレオニル］アミノ−２
−ヒドロキシ−４−フェニルブタノイル−［４（Ｓ）−
クロロ］−Ｌ−プロリンｔｅｒｔ−ブチルアミド ２（Ｓ），３（Ｓ）−３−（Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチルオキ
シカルボニル−Ｌ−アロスレオニル）アミノ−２−ヒド
ロキシ−４−フェニルブタノイル−［４（Ｓ）−クロ
ロ］−Ｌ−プロリンｔｅｒｔ−ブチルアミド651mg(1.12
ミリモル）を４Ｎ塩酸−ジオキサン溶液１０ｍｌで処理
し、ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルを除去して、得
られた塩酸塩の全量と２−キノキサリンカルボン酸193m
g(1.11ミリモル）をＤＭＦ１０ｍｌに溶かして氷冷し
た。ＤＥＰＣ0.18ml(1.18 ミリモル）を加え、次いでト
リエチルアミン0.42ml(0.30 ミリモル）を滴下し、１６
時間攪拌した。反応混合物を減圧下溶媒留去し、酢酸エ
チル００ｍｌを加え、５％クエン酸、５％ＮａＨＣＯ₃
水溶液および飽和食塩水で洗浄、無水Ｎａ₂ ＳＯ₄ で乾
燥した。溶媒を減圧濃縮し、油状の残さを分取薄層クロ
マトグラフィー（塩化メチレン／メタノール＝１０：
１）で精製した。ヘキサン−エチルエーテルで結晶化
し、白色結晶性固体として表記の化合物305mg を得た。

【０１１４】融点１１７−１２１℃。

【０１１５】元素分析：C₃₂H₃₉N₆O₆Cl・1.5H₂O( 分子量
666.18) として 理論値:C,57.70;H,6.35;N,12.62;Cl,5.32 実測値:C,57.97;H,6.11;N,12.31;Cl,5.01. Ｍａｓｓ：639(M+H)⁺ ． ＮＭＲ：δ（CDCl₃, 270MHz):8.50(1H,d,J=8.5Hz), 8.2
4-8.12(2H,m), 7.95-7.85(2H,m), 7.14-7.09(2H,m),
6.99-6.87(2H,m), 6.77-6.71 (1H,m), 6.20(1H,br.s),
4.54-4.42(4H,m), 4.38-4.22(3H,m), 4.11 -3.67(5H,
m), 2.85-2.62(4H,m), 1.30-1.21(12H,m) （実施例７）２（Ｓ），３（Ｓ）−３−［Ｎ−（キノリン−２−カル
ボニル）−Ｌ−スレオニル］アミノ−２−ヒドロキシ−
４−フェニルブタノイル−［４（Ｓ）−クロロ］−Ｌ−
プロリンｔｅｒｔ−ブチルアミド ２（Ｓ），３（Ｓ）−３−（Ｌ−スレオニル）アミノ−
２−ヒドロキシ−４−フェニルブタノイル−［４（Ｓ）
−クロロ］−Ｌ−プロリンｔｅｒｔ−ブチルアミド118m
g(0.25ミリモル）とキナルジン酸55mg(0.31 ミリモル）
をＴＨＦ５ｍｌに溶かして氷冷し、１−エチル−３−
（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩
57mg(0.3ミリモル）、次いで１−ヒドロキシベンゾトリ
アゾ−ル一水和物38mg(0.28 ミリモル）を加え、１６時
間攪拌した。反応混合物を減圧下溶媒留去し、塩化メチ
レン２０ｍｌを加え、１０％クエン酸、５％ＮａＨＣＯ
₃ 水溶液および飽和食塩水で洗浄、無水Ｎａ₂ ＳＯ₄ で
乾燥した。溶媒を減圧濃縮し、油状の残さを分取薄層ク
ロマトグラフィー（塩化メチレン／メタノール＝１０：
１）で精製した。ヘキサン−エチルエーテルで結晶化
し、白色結晶性固体として表記の化合物103mg を得た。

【０１１６】融点１１５−１１８℃。

【０１１７】元素分析：C₃₃H₄₀N₅O₆Cl・H₂O(分子量656.
19) として 理論値:C,60.40;H,6.45;N,10.67;Cl,5.40 実測値:C,60.77;H,6.56;N,10.62;Cl,5.94. Ｍａｓｓ：638(M+H)⁺ ． ＮＭＲ：δ（CDCl₃, 270MHz):8.88-8.79(1H,m), 8.50-
8.14(2H,m), 7. 94-7.64(3H,m), 7.21-6.72(6H,m), 6.2
6(1H,br.s), 4.57-4.11(7H,m ), 3.93-3.68(3H,m), 2.8
0-2.56(5H,m) （実施例８）２（Ｓ），３（Ｓ）−３−［Ｎ−（キノキサリン−２−
カルボニル）−Ｏ−カルボキシメトキシアセチル−Ｌ−
スレオニル］アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブ
タノイル−［４（Ｓ）−クロロ］−Ｌ−プロリン ｔｅ
ｒｔ−ブチルアミド （例示化合物番号７） １）２（Ｓ），３（Ｓ）−３−［Ｎ−（キノキサリン−
２−カルボニル）−Ｏ−カルボキシメトキシアセチル−
Ｌ−スレオニル］アミノ−２−メトキシメチルオキシ−
４−フェニルブタノイル−［４（Ｓ）−クロロ］−Ｌ−
プロリン ｔｅｒｔ−ブチルアミド 実施例５（２）で合成された化合物２（Ｓ），３（Ｓ）
−３−［Ｎ−（キノキサリン−２−カルボニル）−Ｌ−
スレオニル］アミノ−２−メトキシメチルオキシ−４−
フェニルブタノイル−［４（Ｓ）−クロロ］−Ｌ−プロ
リン ｔｅｒｔ−ブチルアミド1.20g(0.18ミリモル）を
塩化メチレン２ｍｌに溶かし、無水ジグリコール酸31mg
(0.27 ミリモル）を加え、次いで４−ジメチルアミノピ
リジン2mg(0.018 ミリモル）を加えて室温で１晩撹はん
した。反応混合物を５％クエン酸、５％ＮａＨＣＯ₃ 水
溶液および飽和食塩水で洗浄、無水Ｎａ₂ ＳＯ₄ で乾燥
した。溶媒を減圧濃縮し、残渣をシリカゲルクロマトグ
ラフィー（塩化メチレン／メタノール/ 酢酸＝９０：
９：３）で精製し、表記の化合物52mgを得た。

【０１１８】Ｍａｓｓ：799(M+H)⁺ ． ＮＭＲ：δ（CDCl3, 270MHz):9.58(1H,s), 8.64(1H,d,J
=7.9Hz), 8.16-8.15(2H,m), 7.89-7.84(3H,m), 7.27-7.
12(4H,m), 7.05-7.00(1H, m), 6.61(1H,br), 5.49-5.45
(1H,m), 4.91-4.80(1H,m), 4.72-4.61( 3H,m), 4.47(1
H,t,J=7.3Hz), 4.35(1H,t,J=5.9Hz), 4.29-4.13(3H,m
), 4.07(2H,br.s), 3.70-3.63(1H,m), 3.38-3.29(3H,
m), 2.91-2.88 (2H,m), 2.64-2.47(2H,m), 1.34-1.26(1
2H,m). ２）２（Ｓ），３（Ｓ）−３−［Ｎ−（キノキサリン−
２−カルボニル）−Ｏ−カルボキシメトキシアセチル−
Ｌ−スレオニル］アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニ
ルブタノイル−［４（Ｓ）−クロロ］−Ｌ−プロリン
ｔｅｒｔ−ブチルアミド ２（Ｓ），３（Ｓ）−３−［Ｎ−（キノキサリン−２−
カルボニル）−Ｏ−カルボキシメトキシアセチル−Ｌ−
スレオニル］アミノ−２−メトキシメチルオキシ−４−
フェニルブタノイル−［４（Ｓ）−クロロ］−Ｌ−プロ
リン ｔｅｒｔ−ブチルアミド40mg(0.05 ミリモル）を
２０％トリフルオロ酢酸／塩化メチレン２mlに加えて、
低温で一晩撹はんした。反応混合物を減圧下溶媒留去
し、ベンゼンを加えて共沸によりできるだけトリフルオ
ロ酢酸を除去した後、エーテルで結晶化し、白色結晶性
固体として表記の化合物21mgを得た。

【０１１９】元素分析：C₃₆H₄₃N₆O₁₀Cl /5H₂O(分子量84
5.28) として 理論値:C,51.15;H,6.32;N,9.94;Cl,4.19 実測値:C,51.48;H,5.47;N,9.29;Cl,4.29. Ｍａｓｓ：755(M+H)⁺ ． ＮＭＲ：δ（ＣＤＣｌ_３， ２７０ＭＨｚ）：９．６１
（１Ｈ，ｓ）， ９．５９（１Ｈ，ｓ）， ８．７０−
８．６６（１Ｈ，ｍ）， ８．２７−８．１９（３Ｈ，
ｍ）， ７．９６−７．８８（３Ｈ，ｍ）， ７．２６
−６．９９（５Ｈ，ｍ）， ６．８０ −６．５５（１
Ｈ，ｍ）， ５．６２（１Ｈ，ｂｒ）， ５．０８−
５．０５（１Ｈ，ｂｒ）， ４．６８−４．５７（２
Ｈ，ｍ），４．４１−４．１５（６Ｈ，ｍ）， ３．９
６−３．９３（１Ｈ，ｍ）， ２．８４（３Ｈ，ｂ
ｒ）， ２．４２−２．３９（１Ｈ，ｍ）， １．３５
−１．２２（１２Ｈ，ｍ）． （実施例９）２（Ｓ），３（Ｓ）−３−［Ｎ−（キノキサリン−２−
カルボニル）−Ｏ−（３−カルボキシブタノイル）−Ｌ
−スレオニル］アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニル
ブタノイル−［４（Ｓ）−クロロ］−Ｌ−プロリン ｔ
ｅｒｔ−ブチルアミド （例示化合物番号８） １） ２（Ｓ），３（Ｓ）−３−［Ｎ−（キノキサリン
−２−カルボニル）−Ｏ−（３−カルボキシブタノイ
ル）−Ｌ−スレオニル］アミノ−２−メトキシメチルオ
キシ−４−フェニルブタノイル−［４（Ｓ）−クロロ］
−Ｌ−プロリン ｔｅｒｔ−ブチルアミド ２（Ｓ），３（Ｓ）−３−［Ｎ−（キノキサリン−２−
カルボニル）−Ｌ−スレオニル］アミノ−２−メトキシ
メチルオキシ−４−フェニルブタノイル−［４（Ｓ）−
クロロ］−Ｌ−プロリン ｔｅｒｔ−ブチルアミド 1.20g(0.18ミリモル）を塩化メチレン２ｍｌに溶かし、
無水グルタル酸103mg(0.9 ミリモル）を加え、次いで４
−ジメチルアミノピリジン10mg(0.09 ミリモル）を加え
て室温で１晩撹はんした。反応混合物を５％クエン酸水
溶液、飽和食塩水で順次洗浄し、無水Ｎａ₂ ＳＯ₄ で乾
燥した。溶媒を減圧濃縮し、残渣をシリカゲルクロマト
グラフィー（塩化メチレン／メタノール＝１０：１）で
精製し、表記の化合物93mgを得た。

【０１２０】Ｍａｓｓ：797(M+H)⁺ ． ＮＭＲ：δ（CDCl₃, 270MHz):9.65(1H,m), 8.59-8.56
(1H,m), 8.24-8.19(2H,m), 7.92-7.88(2H,m), 7.26-7.0
0(5H,m), 6.40(1H,br.s),5.45-5.41(1H,m), 4.79-4.61
(4H,m), 4.60-4.20(4H,m), 3.39-3.32(3H,m), 2.88(2H,
d,J=7.3Hz), 2.59(2H,t,J=7.3Hz), 2.44-2.33(6H,m),
2.00-1.87(3H,m), 1.37,1.33(9H,s,s), 1.27(3H,d,J=6.
6Hz). ２）２（Ｓ），３（Ｓ）−３−［Ｎ−（キノキサリン−
２−カルボニル）−Ｏ−（３−カルボキシブタノイル）
−Ｌ−スレオニル］アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェ
ニルブタノイル−［４（Ｓ）−クロロ］−Ｌ−プロリン
ｔｅｒｔ−ブチルアミド ２（Ｓ），３（Ｓ）−３−［Ｎ−（キノキサリン−２−
カルボニル）−Ｏ−（３−カルボキシブタノイル）−Ｌ
−スレオニル］アミノ−２−メトキシメチルオキシ−４
−フェニルブタノイル−［４（Ｓ）−クロロ］−Ｌ−プ
ロリン ｔｅｒｔ−ブチルアミド78mg(0.098ミリモル）
を２０％トリフルオロ酢酸／塩化メチレン５mlに加えて
室温で一晩撹はんした。反応混合物を減圧下溶媒留去
し、ベンゼンを加えて共沸によりできるだけトリフルオ
ロ酢酸を除去した後エーテルで結晶化し、白色結晶性固
体として表記の化合物36mgを得た。

【０１２１】元素分析：C₃₇H₄₅N₆O₉Cl /H₂O(分子量771.
24) として 理論値:C,57.62;H,6.14;N,10.90;Cl,4.60 実測値:C,57.65;H,6.30;N,10.57;Cl,4.54. Ｍａｓｓ：753(M+H)⁺ ． ＮＭＲ：δ（CDCl₃, 270MHz):9.61(1H,s), 9.61(1H,s),
8.62-8.59(1H,m), 8.25-8.22(2H,m), 7.96-7.91(2H,m),
7.27-6.98(4H,m), 6.48-6.41(1H,m), 5.54-5.47(1H,
m), 4.90-4.85(1H,m), 4.57-4.47(2H,m), 4.39-4.24(2
H,m), 3.89-3.83(1H,m),2.87-2.65(2H,m)，2.57-2.35
(7H,m), 2.02-1.89(3H,m), 1.36-1.28(9H,m). （参考例１）２（Ｓ）、３（Ｓ）−３−( Ｎ−ベンジルオキシカルボ
ニル) アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブタノイ
ル−［４（Ｓ）−クロロ］−Ｌ−プロリンｔｅｒｔ−ブ
チルアミド ３（Ｓ）−アミノ−２（Ｓ）−ヒドロキシ−４−フェニ
ルブタノイル−［４（Ｓ）−クロロ］−Ｌ−プロリンｔ
ｅｒｔ−ブチルアミド 1.5g(3.93ミリモル）を塩化メチ
レン２５ｍｌに溶かし、Ｎ−カルボベンゾキシこはく酸
イミド1.47g(5.90ミリモル）、トリエチルアミン0.55ml
(3.93 ミリモル）を加え、室温で２時間攪拌した。反応
混合物を５％クエン酸、５％ＮａＨＣＯ₃ 水溶液および
飽和食塩水で洗浄し、無水Ｎａ₂ ＳＯ₄ で乾燥した。溶
媒を減圧濃縮し、油状の残さをシリカゲルカラムクロマ
トグラフィー（塩化メチレン／メタノール系）で精製
し、ヘキサンで無色結晶性固体として表記の化合物1.9g
を得た。

【０１２２】ＮＭＲ：δ（CDCl₃, 270MHz):7.33-7.18(1
0H,m), 6.29(1H,br), 5.26(1H,m), 5.02(2H,m), 4.57-
4.11(4H,m), 3.87-3.80(1H,m), 3.70(1H,d,J=6.6), 2.7
1-2.58(4H, m), 1.29(9H,s). （参考例２）２（Ｓ）、３（Ｓ）−３−( Ｎ−ベンジルオキシカルボ
ニル) アミノ−２−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオ
キシ−４−フェニルブタノイル−［４（Ｓ）−クロロ］
−Ｌ−プロリン ｔｅｒｔ−ブチルアミド 参考例１で得られた化合物1.45g(2.81ミリモル）をＤＭ
Ｆ１５ｍｌに溶かし、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル
クロライド0.85g(5.62ミリモル）、イミダゾ−ル0.30g
(5.62ミリモル）を加え、室温で１晩攪拌した。反応混
合物を減圧下溶媒留去し、酢酸エチル５０ｍｌを加え、
５％クエン酸、５％ＮａＨＣＯ₃ 水溶液および飽和食塩
水で洗浄し、無水Ｎａ₂ ＳＯ₄ で乾燥した。溶媒を減圧
濃縮し、表記の化合物1.11g を得た。

【０１２３】ＮＭＲ：δ（CDCl₃, 270MHz):7.33-7.17(1
0H,m), 6.60(1H,br.s), 4.96(2H,q,J=35.0,12.5Hz), 4.
87(1H,d,J=9.2Hz), 4.37-4.27(3H,m),4.10-3.99(2H,m),
3.68(1H,m), 3.12(1H,dd,J=14.5,4.0Hz), 2.69-2.59(2
H,m), 2.34-2.26(1H,m),1.30(9H,s), 0.93(9H,s), 0.09
(6H,d,J=4.6Hz) （参考例３）２（Ｓ）、３（Ｓ）−３−( Ｎ−ベンジルオキシカルボ
ニル) アミノ−２−メトキシメチルオキシ−４−フェニ
ルブタノイル−［４（Ｓ）−クロロ］−Ｌ−プロリンｔ
ｅｒｔ−ブチルアミド 参考例１で得られた化合物1.95g(3.78ミリモル）をＤＭ
Ｆ４０ｍｌに溶かし、Ｎ、Ｎ−ジイソプロピルエチルア
ミン2.62ml(15.12ミリモル）、クロロメチルメチルエー
テル1.20ml(15.12ミリモル）および４ージメチルアミノ
ピリジン52mg（0.43ミリモル）を加え、室温で３日間攪
拌した。反応混合物を減圧下溶媒留去し、酢酸エチル５
０ｍｌを加え、５％クエン酸、５％ＮａＨＣＯ₃ 水溶液
および飽和食塩水で洗浄、無水Ｎａ₂ ＳＯ₄ で乾燥し
た。溶媒を減圧濃縮し、油状の残さをシリカゲルクロマ
トグラフィー（塩化メチレン／メタノール＝１0 ：１）
で精製し、白色結晶性固体として表記の化合物1.91g を
得た。

【０１２４】融点７１−７３℃。

【０１２５】元素分析：C₂₉H₃₈N₃O₆Cl( 分子量560.10)
として 理論値:C,62.19;H,6.84;N,7.50;Cl,6.33 実測値:C,61.63;H,6.81;N,7.31;Cl,6.28． Ｍａｓｓ：560(M)⁺ ． ＮＭＲ：δ（CDCl₃, 270MHz):7.38-7.18 (5H, s), 6.41
(1H, br.s ), 5.39(1H,s), 5.19(2H,q, J=4.2, 8.6Hz),
4.75-4.63(2H,m),4.39- 4.14(4H,m), 3.77-3.71(1H,
m), 3.33(3H,s), 2.92(2H,d,J=7.3Hz), 2.72-2.65(2H,
m), 2.50-2.44(2H, m),1.61(4H, s), 1.30(9H, s), 1.
04(1H, d, J=6.2Hz). （製剤例） （製剤例１）（ハ−ドカプセル剤） 標準二分式ハ−ドゼラチンカプセルの各々に、100 mgの
粉末状の実施例１の化合物、150 mgのラクト−ス、50 m
g のセルロ−ス及び6 mgのステアリン酸マグネシウムを
充填することにより、単位カプセルを製造し、洗浄後、
乾燥する。

【０１２６】（製剤例２）（ソフトカプセル剤） 消化性油状物、例えば、大豆油、綿実油又はオリ−ブ油
中に入れた、実施例１の化合物の混合物を調製し、正置
換ポンプでゼラチン中に注入して、100 mgの活性成分を
含有するソフトカプセルを得、洗浄後、乾燥する。

【０１２７】（製剤例３）（錠剤） 常法に従って、100 mgの実施例１の化合物、0.2 mgのコ
ロイド性二酸化珪素、5 mgのステアリン酸マグネシウ
ム、275 mgの微結晶性セルロ−ス、11 mg のデンプン及
び98.8 mg のラクト−スを用いて製造する。

【０１２８】尚、所望により、剤皮を塗布する。

【０１２９】（製剤例４）（注射剤） 1.5 重量% の実施例１の化合物を、10容量% のプロピレ
ングリコ−ル中で撹拌し、次いで、注射用水で一定容量
にした後、滅菌して製造する。

【０１３０】（製剤例５）（懸濁剤） 5 ml中に、100 mgの微粉化した実施例１の化合物、100
mgのナトリウムカルボキシメチルセルロ−ス、5 mgの安
息香酸ナトリウム、1.0 g のソルビト−ル溶液(日本薬
局方) 及び0.025 mlのバニリンを含有するように製造す
る。

【０１３１】（試験例１） ＨＩＶプロテアーゼ阻害活性の測定 大腸菌に発現させたＨＩＶプロテアーゼと合成した基質
を用い、本発明のペプチド誘導体のＨＩＶプロテアーゼ
阻害活性を、ＩＣ50値を指標として次のようにして求め
た。

【０１３２】ａ）発現ベクターの作成 ＨＴＬＶ ＩＩＩＢプロウイルスの主要部分を含むＢＨ
１０クローン（F lossie Wong-Staal'等、Nature、313
巻、277 −284 頁、1985年に記載）より、同ウイルスｇ
ａｇ領域中のＣｌａＩ部位及びｐｏｌ領域中のＥｃｏＲ
Ｉ部位にはさまれる領域を切り出し、得られたフラグメ
ントをｐＢＲ ３２２の同部位中にクローンした。

【０１３３】次いで、この挿入部位の５' 側上流に存在
するＢａｍＨＩ及びＣｌａＩ部位の間に、翻訳開始コド
ン（ＡＴＧ）を含む合成フラグメント ＧＡＴＣＣＴＡＣＣＡＡＧＴＧＡＴＧＧＧＴＧＣＧＡＧＡＧＣＧＴＣＡＧＴ
ＡＴＴＡＡＧＣＧＧＧＧＧＡＧＡＡＴＴＡＧＡＴ ＧＡＴＧＧＴＴＣＡＣＴＡＣＣＣＡＣＧＣＴＣＴＣＧＣＡＧＴＣＡＴＡＡＴ
ＴＣＧＣＣＣＣＣＴＣＴＴＡＡＴＣＴＡＧＣ の塩基配列よりなるフラグメントを挿入し、更に同Ｂａ
ｍＨＩ部位にＴ７Ｐｒｏｍｏｔｅｒ領域［（Bgl II〜Ba
mHI フラグメント）Barbara A. Moffatt等、J. Mol. Bi
ol. 、189 巻、113 −130 頁、1986年に記載］を挿入し
た。

【０１３４】得られたプラスミド中のＢｇｌ ＩＩ部位
（ｐｏｌ領域最上流域）を切断後、クレノウ（klenow）
フラグメントにて修復合成を行ない、次いで、Ｔ４ Ｄ
ＮＡリガーゼにて、再結合させ、ＨＩＶ ｇａｇ領域及
びｐｏｌ領域の一部分を含む発現ベクターｐＴ７ＨＩ
Ｖ．ＧＰ（−）を構築した。

【０１３５】ｂ）大腸菌での発現 Ｔ７ポリメラーゼ遺伝子を含む大腸菌ＢＬ−２１［（Ｄ
Ｅ−３）Barbara A. Moffatt等、J. Mol. Biol. 、189
巻、113 −130 頁、1986年に記載］に、ｐＴ７ＨＩＶ．
ＧＰ（−）を導入し、得られたトランスフォーマント
を、２００μｇ／ｍｌのアンピシリンを含むＭ９ＣＡ−
１０％ＬＢ培地中で、６００ｎｍでの吸光度が２に達す
るまで、３７℃にて培養した。

【０１３６】０．４ｍＭのイソプロピルチオ−β−Ｄ−
ガラクトシドを加え、更に、３時間培養を継続した。

【０１３７】得られた菌体を集め、これをペレットとし
て−８０℃にて保存した。

【０１３８】尚、本発現ベクターより合成されるポリプ
ロテインは、菌体中において、自己消化により分解さ
れ、ＨＩＶプロテアーゼ自体が生成する。

【０１３９】ｃ）精製 ２リットルの培養液より得られた菌体を６０ｍｌのバッ
ファーＡ（５０ｍＭトリス塩酸（ｐＨ７．５）、１ｍＭ
ジチオスレイトール、０．７％リゾチーム、１０μｇ／
ｍｌアプロチニン、５ｍＭエチレンジアミン四酢酸、１
０μｇ／ｍｌベンズアミド、１ｍＭ弗化フェニルメチル
スルホン酸、１０％グリセリン）に懸濁し、０℃にて１
０分間放置した後、Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００（０．１
％）を加え、更に０℃で１０分間放置した。

【０１４０】凍結融解を４回行ない、ＤＮａｓｅ Ｉ
（０．１ｍｇ）、１０ｍＭ塩化マグネシウムを加え、懸
濁液中のＤＮＡを分解した。

【０１４１】本懸濁液を遠心分離して得た上清を、ＤＥ
ＡＥ Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ａ ２５カラム（５ｃｍ内径
×２０ｃｍ）に付し、分画を行った。尚、同カラムは、
バッファーＢ［５０ｍＭＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．８）、１
ｍＭジチオスレイトール、１０μｇ／ｍｌアプロチニ
ン、５ｍＭエチレンジアミン四酢酸、１０μｇ／ｍｌベ
ンズアミド、１ｍＭ弗化フェニルメチルスルホン酸、１
０％グリセリン］にて平衡化して用いた。

【０１４２】活性の認められた素通り画分を集め、硫安
沈殿（６０％）を行ない、得られた沈殿を、２ｍｌのバ
ッファーＣ（５０ｍＭトリス塩酸（ｐＨ７．５）、１ｍ
Ｍジチオスレイトール、１ｍＭエレンジアミン四酢酸、
２００ｍＭ塩化ナトリウム）に溶解し、ＴＳＫ．Ｓ２０
００ＳＷゲルろ過カラム（７．５ｍｍ内径×６０ｃｍ、
東ソー株式会社）に付し、バッファーＣを用い、０．５
ｍｌ／分の流速にて分画した。

【０１４３】得られた活性画分を、分画分子量１万ダル
トンの限外濾過膜を用いて、２倍に濃縮し、酵素液とし
て−８０℃にて保存した。

【０１４４】ｄ）活性測定 ＨＩＶプロテアーゼ阻害活性の測定は、Ｅ．Ｄ．Ｍａｔ
ａｙｏｓｈｉらの方法（Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４７，９５
４（１９９０））に基づいて行った。

【０１４５】すなわち、２０μＭの合成基質４−（４−
ジメチルアミノフェニルアゾ）安息香酸（ＤＡＢＣＹ
Ｌ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｎ−Ａｓｎ−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｉｌ
ｅ−Ｖａｌ−Ｇｌｎ−５−［（２−アミノエチル）アミ
ノ］ナフタレン−１−スルホン酸（ＥＤＡＮＳ）（ＢＡ
ＣＨＥＭより購入）、ＤＭＳＯに溶解した各濃度の阻害
剤を含む５０ｍＭ酢酸ナトリウム（ｐＨ５．５）−１Ｍ
食塩水の反応液を調製した。これに部分精製した組換え
ＨＩＶプロテアーゼを添加し、室温にて反応を開始し、
蛍光分光光度計にて反応生成物の測定を行った。各濃度
の阻害剤存在下における単位時間当たりの反応生成量を
算出し、５０％阻害濃度（ＩＣ50）を決定した。

【０１４６】本発明の化合物は、強い阻害活性を示し
た。

【０１４７】（試験例２） ＨＩＶ感染ＣＥＭ細胞からのウイルス放出の抑制 （方法）ＨＩＶ（ＨＴＬＶＩＩＩＢ）持続感染細胞Ｍｏ
ｌｔ４細胞（Ｍｏｌｔ４／ＨＴＬＶＩＩＩＢ）をＲＰＭ
Ｉ１６４０培地（１０％非動化牛胎児血清を含む）を用
いて２回洗浄後、同培地に１×１０５ｃｅｌｌｓ／ｍｌ
の濃度になるように植え込み、３７℃、５％炭酸ガス下
にこれを培養した。７２時間後にこの培養上清を遠心分
離によって得、ウイルスストックとした。ＣＥＭ細胞を
ＲＰＭＩ１６４０培地（１０％非動化牛胎児血清を含
む）で２×１０５ｃｅｌｌｓ／ｍｌに調整し、適当な濃
度に希釈したウイルスストックを添加した。さらに種々
の濃度の化合物を添加して、３７℃、５％炭酸ガス下に
これを培養した。７日後にこの培養上清を採取し、これ
に含まれるＨＩＶ抗原量をＥＩＡ法（ＨＩＶ抗原、ＥＩ
ＡＩＩ、アボット）により測定し、化合物の添加により
その放出が９０％抑制される濃度をＩＣ90とした。

【０１４８】本発明の化合物は、強いウイルス放出抑制
活性を示した。

【０１４９】（試験例３）本発明の化合物は、それらが
生体内で上記阻害作用を発揮すると期待される薬力学的
性質を示す。例えば、本発明の化合物１０ｍｇ／ｋｇを
ラットへ静脈内投与した場合、投与１時間後の血中レベ
ルは細胞試験におけるＥＤ90値とほぼ同じであるかまた
はそれよりも高い。前記化合物３０ｍｇ／ｋｇの十二指
腸内投与または経口投与の場合も同様に、投与３０分後
にラットの血液中に検出される濃度は細胞試験における
ＥＤ90値より高く、好ましくは細胞試験におけるＥＤ90
値の約６倍となる。

【０１５０】血中レベルを測定するために、投与液を次
のように調製する。静脈内投与の場合、被験化合物１０
ｍｇをジメチルアセタミド（ＤＭＡ）０．３ｍｌに溶解
し、さらに、ＰＥＧ４００ ０．４ｍｌ、水０．３ｍｌ
を加えた溶液を調製する。十二指腸内投与及び経口投与
の場合、被験化合物３０ｍｇをＤＭＡ０．６ｍｌに溶解
し、さらにＰＥＧ４００ ０．８ｍｌ、水０．６ｍｌを
加えた溶液を調製する。これらの溶液をラットに投与し
た後、経時的に採血し、血液を遠心分離（３００ｒｐ
ｍ、１０分）して血漿を得る。

【０１５１】この血漿２０μｌを次のようなカラムスイ
ッチング法によるＨＰＬＣにて分析し、血漿中濃度を決
定する。カラムスイッチングＨＰＬＣ条件は、カラム１
が、長さ３００ｍｍ直径４．６ｍｍのＴＳＫ Ｇｅｌ
Ｇ−２０００ＳＷ（トーソー製）上でアトニトリル／
０．０５％リン酸（１：９Ｖ／Ｖ％）を溶離液として用
いる。カラム２は、長さ１５０ｍｍ直径６ｍｍのＹＭＣ
Ａ−３１２ ＯＤＳ（ＹＭＣ製）上でカラム１と同じ
溶離液を用いる。但し、被験化合物によりアセトニトリ
ルの含有量を４０−７０％にする。

【０１５２】

【発明の効果】本発明の化合物は、優れた、かつ特異的
に抗ＨＩＶプロテアーゼ阻害活性を示し、また、優れた
ＨＩＶ感染細胞からのウイルス放出の抑制作用を示し
た。さらに本発明の化合物は、優れた経口吸収性を示
し、生物体内において、高い血中濃度を示した。

フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 (Ｃ０７Ｄ 403/12 207:16 241:44） (Ｃ０７Ｄ 401/12 207:16 215:48） (72)発明者 小沢 雄次 東京都品川区広町１丁目２番58号 三共株 式会社内 (72)発明者 駒井 知明 東京都品川区広町１丁目２番58号 三共株 式会社内 (72)発明者 中川 明彦 東京都品川区広町１丁目２番58号 三共株 式会社内

Claims (5)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】一般式 【化１】 ［式中、Ｒ¹ はキノリン−２−カルボニル基又はキノキ
   サリン−２−カルボニル基を示し、Ｒ² は水素原子、炭
   素数１乃至４個のアルキル基、アセチル基、メトキシメ
   チル基、メチルチオメチル基、アセトキシメチル基、ピ
   バロイルオキシメチル基、ＨＯＯＣ（ＣＨ₂ ）n ＣＯ−
   基（ｎは、２乃至４の整数を示す）又はＨＯＯＣＣＨ₂
   ＯＣＨ₂ ＣＯ−基を示す］で表わされる化合物及びその
   塩。
2. 【請求項２】Ｒ² が水素原子又は炭素数１乃至４個のア
   ルキル基である請求項１に記載の化合物。
3. 【請求項３】Ｒ² が水素原子である請求項１に記載の化
   合物。
4. 【請求項４】２（Ｓ），３（Ｓ）−３−［Ｎ−（キノキ
   サリン−２−カルボニル）−Ｌ−スレオニル］アミノ−
   ２−ヒドロキシ−４−フェニルブタノイル−［４（Ｓ）
   −クロロ］−Ｌ−プロリンｔｅｒｔ−ブチルアミド。
5. 【請求項５】２（Ｓ），３（Ｓ）−３−［Ｎ−（キノリ
   ン−２−カルボニル）−Ｌ−スレオニル］アミノ−２−
   ヒドロキシ−４−フェニルブタノイル−［４（Ｓ）−ク
   ロロ］−Ｌ−プロリンｔｅｒｔ−ブチルアミド。