JPH08157383A - 細胞接着抑制剤 - Google Patents
細胞接着抑制剤Info
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- JPH08157383A JPH08157383A JP6299225A JP29922594A JPH08157383A JP H08157383 A JPH08157383 A JP H08157383A JP 6299225 A JP6299225 A JP 6299225A JP 29922594 A JP29922594 A JP 29922594A JP H08157383 A JPH08157383 A JP H08157383A
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Abstract
(57)【要約】
【構成】 ハマメリス抽出物を有効成分とする細胞接着
抑制剤、免疫抑制剤及び癌転移抑制剤。 【効果】 優れた細胞接着抑制作用を有し、かつ安全性
も高いので、各種炎症性疾患、気管支喘息、リウマチ、
アトピー性皮膚炎、花粉症、乾癬、虚血再灌移植臓器拒
絶反応抑制、自己免疫疾患等の治療及び癌転移予防に有
用。
抑制剤、免疫抑制剤及び癌転移抑制剤。 【効果】 優れた細胞接着抑制作用を有し、かつ安全性
も高いので、各種炎症性疾患、気管支喘息、リウマチ、
アトピー性皮膚炎、花粉症、乾癬、虚血再灌移植臓器拒
絶反応抑制、自己免疫疾患等の治療及び癌転移予防に有
用。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、免疫抑制剤、癌転移抑
制剤等として有用な細胞接着抑制剤に関する。
制剤等として有用な細胞接着抑制剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】免疫抑制剤としては従来より、アザチオ
プリン、ミゾリビン等の代謝拮抗剤、プレドニゾロン等
のステロイド、各種抗体、サイクロスポリン、ＦＫ５０
６等が用いられている。そして、癌転移抑制剤として有
効な物質はない。このように、従来、これら免疫抑制剤
及び癌転移抑制剤には、明らかな関連性は認められてい
なかった。
プリン、ミゾリビン等の代謝拮抗剤、プレドニゾロン等
のステロイド、各種抗体、サイクロスポリン、ＦＫ５０
６等が用いられている。そして、癌転移抑制剤として有
効な物質はない。このように、従来、これら免疫抑制剤
及び癌転移抑制剤には、明らかな関連性は認められてい
なかった。
【０００３】ところが最近各種炎症、免疫反応及び癌転
移についての細胞レベルでの研究が進展し、これらの疾
患に細胞間接着が大きく関与するとの報告がなされてい
る〔「接着分子の発現調節と臨床応用」（１９９１年、
メジカルビュー社）、Ｎａｔｕｒｅ，Ｖｏｌ．３６４，
１４９−１５１（１９９３）、Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｖｏ
ｌ．２４７、４５６−４５９（１９９０）、Ａｎｎｕａ
ｌ Ｒｅｖｉｅｗ 免疫１９８９，１７５〜１８５、Ｔ
ｒｅｎｄｓ ｉｎ Ｇｌｙｃｏｓｃｉｅｎｃｅａｎｄ
Ｇｌｙｃｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．４，Ｎｏ．
１９，４０５−４１４（１９９２）、実験医学 Ｖｏ
ｌ．１０，Ｎｏ．１１，１４０２〜１４１３（１９９
２）、実験医学 Ｖｏｌ．１１，Ｎｏ．１６，２１６８
〜２１７５（１９９３）、Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｖｏｌ．２
５５，１１２５〜１１２７（１９９２）等〕。そして、
細胞間の接着にはＩＣＡＭ−１、ＥＬＡＭ−１、ＶＣＡ
Ｍ−１等の細胞表面接着分子が関与していることも判明
している〔Ａｎｎｕａｌ Ｒｅｖｉｅｗ 免疫 １９８
９、１７５〜１８５、感染・炎症・免疫 Ｖｏｌ．１９
（２）、１２９〜１５３（１９８９）〕。
移についての細胞レベルでの研究が進展し、これらの疾
患に細胞間接着が大きく関与するとの報告がなされてい
る〔「接着分子の発現調節と臨床応用」（１９９１年、
メジカルビュー社）、Ｎａｔｕｒｅ，Ｖｏｌ．３６４，
１４９−１５１（１９９３）、Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｖｏ
ｌ．２４７、４５６−４５９（１９９０）、Ａｎｎｕａ
ｌ Ｒｅｖｉｅｗ 免疫１９８９，１７５〜１８５、Ｔ
ｒｅｎｄｓ ｉｎ Ｇｌｙｃｏｓｃｉｅｎｃｅａｎｄ
Ｇｌｙｃｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．４，Ｎｏ．
１９，４０５−４１４（１９９２）、実験医学 Ｖｏ
ｌ．１０，Ｎｏ．１１，１４０２〜１４１３（１９９
２）、実験医学 Ｖｏｌ．１１，Ｎｏ．１６，２１６８
〜２１７５（１９９３）、Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｖｏｌ．２
５５，１１２５〜１１２７（１９９２）等〕。そして、
細胞間の接着にはＩＣＡＭ−１、ＥＬＡＭ−１、ＶＣＡ
Ｍ−１等の細胞表面接着分子が関与していることも判明
している〔Ａｎｎｕａｌ Ｒｅｖｉｅｗ 免疫 １９８
９、１７５〜１８５、感染・炎症・免疫 Ｖｏｌ．１９
（２）、１２９〜１５３（１９８９）〕。
【０００４】これらの細胞接着を抑制する物質として
は、細胞表面接着分子に対する抗体やリガンド、Ｎ−
（フルオレニル−９−メトキシカルボニル）アミノ酸
類、３−デアザアデノシン等が知られているが〔Ｐｒｏ
ｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，Ｖｏｌ．８
８，３５５〜３５９（１９９１）、Ｉｍｍｕｎｏｐｈａ
ｒｍａｃｏｌｏｇｙ，２３（１９９２）１３９〜１４
９、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃ
ｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｖｏｌ．２６７，Ｎｏ．１３，９３
７６〜９３８２（１９９２）、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ
Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．１４４，Ｎｏ．２，６
５３〜６６１（１９９０）〕、その活性は未だ満足すべ
きものでない、安全性に問題がある等の欠点があった。
は、細胞表面接着分子に対する抗体やリガンド、Ｎ−
（フルオレニル−９−メトキシカルボニル）アミノ酸
類、３−デアザアデノシン等が知られているが〔Ｐｒｏ
ｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，Ｖｏｌ．８
８，３５５〜３５９（１９９１）、Ｉｍｍｕｎｏｐｈａ
ｒｍａｃｏｌｏｇｙ，２３（１９９２）１３９〜１４
９、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃ
ｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｖｏｌ．２６７，Ｎｏ．１３，９３
７６〜９３８２（１９９２）、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ
Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．１４４，Ｎｏ．２，６
５３〜６６１（１９９０）〕、その活性は未だ満足すべ
きものでない、安全性に問題がある等の欠点があった。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】従って、本発明の目的
は、安全性が高く、細胞接着抑制に基づく優れた免疫抑
制剤、癌転移抑制剤を提供することにある。
は、安全性が高く、細胞接着抑制に基づく優れた免疫抑
制剤、癌転移抑制剤を提供することにある。
【０００６】
【課題を解決するための手段】そこで、本発明者は、細
胞接着抑制試験及び安全性試験を数多くの植物抽出物に
ついて行った結果、ハマメリス抽出物が優れた細胞接着
抑制作用を有し、かつ安全性も高いことを見出し、本発
明を完成するに至った。
胞接着抑制試験及び安全性試験を数多くの植物抽出物に
ついて行った結果、ハマメリス抽出物が優れた細胞接着
抑制作用を有し、かつ安全性も高いことを見出し、本発
明を完成するに至った。
【０００７】すなわち、本発明はハマメリス抽出物を有
効成分とする細胞接着抑制剤、免疫抑制剤及び癌転移抑
制剤を提供するものである。
効成分とする細胞接着抑制剤、免疫抑制剤及び癌転移抑
制剤を提供するものである。
【０００８】ハマメリスの抽出物は、従来鎮静作用、収
れん作用、ＳＯＤ様作用、染毛作用等を有することが知
られているが、細胞接着抑制作用については全く知られ
ていない。
れん作用、ＳＯＤ様作用、染毛作用等を有することが知
られているが、細胞接着抑制作用については全く知られ
ていない。
【０００９】本発明に使用されるハマメリス抽出物は、
ハマメリス（Ｈａｍａｍｅｌｉｓｖｉｒｇｉｎｉａｎａ
Ｌ．）の全草又はそれらの葉、樹皮、根及び枝のうち
の１又は２以上の箇所（以下「原体」と称する）を乾燥
し又は乾燥することなく粉砕した後、常温又は加温下
に、溶剤により抽出するか又はソックスレー抽出器等の
抽出器等の抽出器具を用いて抽出することにより得るこ
とができる。
ハマメリス（Ｈａｍａｍｅｌｉｓｖｉｒｇｉｎｉａｎａ
Ｌ．）の全草又はそれらの葉、樹皮、根及び枝のうち
の１又は２以上の箇所（以下「原体」と称する）を乾燥
し又は乾燥することなく粉砕した後、常温又は加温下
に、溶剤により抽出するか又はソックスレー抽出器等の
抽出器等の抽出器具を用いて抽出することにより得るこ
とができる。
【００１０】ここで、使用される溶剤は特に限定され
ず、例えば、水、メチルアルコール、エチルアルコール
等の１級アルコール、プロピレングリコール、１，３−
ブチレングリコール等の液状多価アルコール、酢酸エチ
ルエステル等の低級アルキルエステル、ベンゼン、ヘキ
サン等の炭化水素、エチルエーテル、アセトン等の公知
の溶媒が挙げられ、これら溶媒は、１種又は２種以上を
組み合わせて使用することができる。
ず、例えば、水、メチルアルコール、エチルアルコール
等の１級アルコール、プロピレングリコール、１，３−
ブチレングリコール等の液状多価アルコール、酢酸エチ
ルエステル等の低級アルキルエステル、ベンゼン、ヘキ
サン等の炭化水素、エチルエーテル、アセトン等の公知
の溶媒が挙げられ、これら溶媒は、１種又は２種以上を
組み合わせて使用することができる。
【００１１】原体からの好ましい抽出方法の具体例とし
ては、ハマメリスの乾燥粉砕物１００グラムに５０v/v
％エタノール１０００mlを加え、室温で時々攪拌しなが
ら３日間抽出を行う。得られた抽出液を濾過し、濾液を
５℃で３日間静置したのち再度濾過して、上澄みを得
る。
ては、ハマメリスの乾燥粉砕物１００グラムに５０v/v
％エタノール１０００mlを加え、室温で時々攪拌しなが
ら３日間抽出を行う。得られた抽出液を濾過し、濾液を
５℃で３日間静置したのち再度濾過して、上澄みを得
る。
【００１２】上記抽出物は、そのままで細胞接着抑制
剤、免疫抑制剤及び癌転移抑制剤の有効成分として用い
ることができるが、当該抽出物をさらに、適当な分離手
段、例えばゲル濾過法やシリカゲルカラムクロマト法又
は逆相若しくは順相の高速液体クロマト法により活性の
高い画分を分画して用いることもできる。
剤、免疫抑制剤及び癌転移抑制剤の有効成分として用い
ることができるが、当該抽出物をさらに、適当な分離手
段、例えばゲル濾過法やシリカゲルカラムクロマト法又
は逆相若しくは順相の高速液体クロマト法により活性の
高い画分を分画して用いることもできる。
【００１３】かくして得られるハマメリス抽出物は、細
胞接着に関与するＩＣＡＭ−１、ＥＬＡＭ−１等の細胞
表面分子の発現を抑制し、また優れた白血球−血管内皮
細胞間に代表される細胞接着を抑制する作用を有する。
さらにまた、細胞毒性、皮膚刺激性等が弱く、安全性も
高い。従って、ハマメリス抽出物を有効成分として含有
する製剤は、細胞接着抑制に基づき、移植臓器拒絶反応
抑制、自己免疫疾患等の治療及び癌転移予防に有用であ
る。
胞接着に関与するＩＣＡＭ−１、ＥＬＡＭ−１等の細胞
表面分子の発現を抑制し、また優れた白血球−血管内皮
細胞間に代表される細胞接着を抑制する作用を有する。
さらにまた、細胞毒性、皮膚刺激性等が弱く、安全性も
高い。従って、ハマメリス抽出物を有効成分として含有
する製剤は、細胞接着抑制に基づき、移植臓器拒絶反応
抑制、自己免疫疾患等の治療及び癌転移予防に有用であ
る。
【００１４】本発明の製剤は、上記疾患の治療又は予防
のため、経口、経腸、非経口、局所投与などのいずれの
経路によってもヒトに投与することができる。投与量
は、患者の年齢、病態、体重などに応じ適宜決定される
が、通常は１日あたりハマメリス抽出物（乾燥重量）と
して０．１〜１０００mg／kg体重、好ましくは１〜１０
０mg／kg体重の範囲内から選ばれ、一回又は複数回に分
けて投与される。
のため、経口、経腸、非経口、局所投与などのいずれの
経路によってもヒトに投与することができる。投与量
は、患者の年齢、病態、体重などに応じ適宜決定される
が、通常は１日あたりハマメリス抽出物（乾燥重量）と
して０．１〜１０００mg／kg体重、好ましくは１〜１０
０mg／kg体重の範囲内から選ばれ、一回又は複数回に分
けて投与される。
【００１５】本発明の製剤は、通常製剤に使用される賦
形剤、その他の添加剤を含む組成物として使用するのが
普通である。これらの例として、固体状のものとして
は、乳糖、カオリン、ショ糖、結晶セルロース、コーン
スターチ、タルク、寒天、ペクチン、ステアリン酸、ス
テアリン酸マグネシウム、レシチン、塩化ナトリウムな
どが挙げられ；液状のものとしてはグリセリン、落花生
油、ポリビニルピロリドン、オリーブ油、エタノール、
ベンジルアルコール、プロピレングリコール、水などが
挙げられる。
形剤、その他の添加剤を含む組成物として使用するのが
普通である。これらの例として、固体状のものとして
は、乳糖、カオリン、ショ糖、結晶セルロース、コーン
スターチ、タルク、寒天、ペクチン、ステアリン酸、ス
テアリン酸マグネシウム、レシチン、塩化ナトリウムな
どが挙げられ；液状のものとしてはグリセリン、落花生
油、ポリビニルピロリドン、オリーブ油、エタノール、
ベンジルアルコール、プロピレングリコール、水などが
挙げられる。
【００１６】剤形としては任意の形態を採ることがで
き、例えば錠剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤、坐剤、ト
ローチ剤などの固形製剤；シロップ、乳液、軟ゼラチン
カプセル、クリーム、ゲル、ペースト、スプレー、注射
などの液状製剤が挙げられる。
き、例えば錠剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤、坐剤、ト
ローチ剤などの固形製剤；シロップ、乳液、軟ゼラチン
カプセル、クリーム、ゲル、ペースト、スプレー、注射
などの液状製剤が挙げられる。
【００１７】
【実施例】次に実施例を挙げて本発明を詳細に説明する
が、本発明はこれに何ら限定されるものではない。
が、本発明はこれに何ら限定されるものではない。
【００１８】参考例１ ハマメリスの乾燥粉砕物１００グラムに５０v/v％エタ
ノール１０００mlを加え、室温で時々攪拌しながら３日
間抽出を行った。得られた抽出液を濾過し、濾液を５℃
で３日間静置したのち再度濾過して、上澄みを得た。
ノール１０００mlを加え、室温で時々攪拌しながら３日
間抽出を行った。得られた抽出液を濾過し、濾液を５℃
で３日間静置したのち再度濾過して、上澄みを得た。
【００１９】実施例１ 白血球−血管内皮細胞接着抑制試験：９６ ｗｅｌｌ
ｆｌａｔｂｏｔｔｏｍ ｐｌａｔｅ上にコンフルエント
となったヒト血管内皮細胞に対し、固形分で最終濃度
０．０００１〜０．００１v/v％となるように被験抽出
物を添加する。１８時間後にヒトＩＬ−１αを最終濃度
５units/mlとなるように添加し、６時間培養する。培養
液除去後、新しい培養液で２回洗浄した後、予め常法に
従い蛍光標識したヒト末梢白血球１０6cells/mlを２０
０μｌを添加し、培養する。３０分後、未接着細胞を除
去し、接着細胞を溶解後その蛍光活性を測定する。その
結果、表１に示すようにハマメリス抽出物は優れた細胞
接着抑制効果を有することが判明した。また、４０℃に
おいて１ケ月放置したところ、色の変化はほとんど認め
らず、安定性に優れていることが証明された。
ｆｌａｔｂｏｔｔｏｍ ｐｌａｔｅ上にコンフルエント
となったヒト血管内皮細胞に対し、固形分で最終濃度
０．０００１〜０．００１v/v％となるように被験抽出
物を添加する。１８時間後にヒトＩＬ−１αを最終濃度
５units/mlとなるように添加し、６時間培養する。培養
液除去後、新しい培養液で２回洗浄した後、予め常法に
従い蛍光標識したヒト末梢白血球１０6cells/mlを２０
０μｌを添加し、培養する。３０分後、未接着細胞を除
去し、接着細胞を溶解後その蛍光活性を測定する。その
結果、表１に示すようにハマメリス抽出物は優れた細胞
接着抑制効果を有することが判明した。また、４０℃に
おいて１ケ月放置したところ、色の変化はほとんど認め
らず、安定性に優れていることが証明された。
【００２０】
【表１】
【００２１】実施例２ 細胞接着に関与する細胞表面分子の抑制試験（ＦＡＣＳ
ｃａｎ）：２５cm2 培養フラスコ内にて、コンフルエン
トとなったヒト血管内皮細胞に対し、最終濃度０．００
１％となるように被験化合物を添加する。１８時間後に
ヒトＩＬ−１α又はＴＮＦαを最終濃度２．５ng/ml と
なるように添加し、６時間培養する。培養液除去後、Ｐ
ＢＳ（−）にて洗浄し、トリプシン−ＥＤＴＡにて細胞
を剥離、回収する。抗ＩＣＡＭ−１、抗ＥＬＡＭ−１の
それぞれの抗体（ｍｏｕｓｅ ＩｇＧ）を一次抗体、ま
た抗ｍｏｕｓｅ ＩｇＧ−ＦＩＴＣを二次抗体とし、常
法に従い細胞を染色後、ＦＡＣＳｃａｎによる解析を行
った。その結果、表２に示すようにハマメリス抽出物
は、細胞表面の接着分子として、また免疫反応に関与す
る細胞表面因子として知られているＩＣＡＭ−１及びＥ
ＬＡＭ−１の発現を強く抑制することが判明した。
ｃａｎ）：２５cm2 培養フラスコ内にて、コンフルエン
トとなったヒト血管内皮細胞に対し、最終濃度０．００
１％となるように被験化合物を添加する。１８時間後に
ヒトＩＬ−１α又はＴＮＦαを最終濃度２．５ng/ml と
なるように添加し、６時間培養する。培養液除去後、Ｐ
ＢＳ（−）にて洗浄し、トリプシン−ＥＤＴＡにて細胞
を剥離、回収する。抗ＩＣＡＭ−１、抗ＥＬＡＭ−１の
それぞれの抗体（ｍｏｕｓｅ ＩｇＧ）を一次抗体、ま
た抗ｍｏｕｓｅ ＩｇＧ−ＦＩＴＣを二次抗体とし、常
法に従い細胞を染色後、ＦＡＣＳｃａｎによる解析を行
った。その結果、表２に示すようにハマメリス抽出物
は、細胞表面の接着分子として、また免疫反応に関与す
る細胞表面因子として知られているＩＣＡＭ−１及びＥ
ＬＡＭ−１の発現を強く抑制することが判明した。
【００２２】
【表２】
【００２３】実施例３ 癌細胞−血管内皮細胞接着抑制試験：９６ ｗｅｌｌ
ｆｌａｔｂｏｔｔｏｍ ｐｌａｔｅ 上にコンフルエン
トとなったヒト血管内皮細胞に対し、最終濃度０．００
１％となるように被験化合物を添加する。１８時間後に
ヒトＩＬ−１αを最終濃度５ｕｎｉｔｓ／mlとなるよう
に添加し、６時間培養する。培養液除去後、新しい培養
液で２回洗浄した後、予め常法に従い51Ｃｒ標識したヒ
ト骨髄腫瘍細胞（ＨＬ−６０）１０6 ｃｅｌｌｓ／mlを
２００μｌを添加し、培養する。３０分後、未接着細胞
を除去し、接着細胞を溶解後その放射活性を測定する。
その結果、表３に示すようにハマメリス抽出物は癌細胞
の転移に重要な、癌細胞と血管内皮細胞との接着を強く
抑制することが判明した。
ｆｌａｔｂｏｔｔｏｍ ｐｌａｔｅ 上にコンフルエン
トとなったヒト血管内皮細胞に対し、最終濃度０．００
１％となるように被験化合物を添加する。１８時間後に
ヒトＩＬ−１αを最終濃度５ｕｎｉｔｓ／mlとなるよう
に添加し、６時間培養する。培養液除去後、新しい培養
液で２回洗浄した後、予め常法に従い51Ｃｒ標識したヒ
ト骨髄腫瘍細胞（ＨＬ−６０）１０6 ｃｅｌｌｓ／mlを
２００μｌを添加し、培養する。３０分後、未接着細胞
を除去し、接着細胞を溶解後その放射活性を測定する。
その結果、表３に示すようにハマメリス抽出物は癌細胞
の転移に重要な、癌細胞と血管内皮細胞との接着を強く
抑制することが判明した。
【００２４】
【表３】
【００２５】実施例４ 血管内皮細胞に対する毒性（細胞形態，ＤＮＡ合成）：
形態的変化に関しては倒立顕微鏡による目視評価とし、
ＤＮＡ合成は常法に従い、3Ｈ−ＴｄＲ取り込みを指標
にサンプル添加後２４時間培養の最終８時間における取
り込み量を液体シンチレーションカウンターを用いて定
量評価した。なお、被験化合物濃度は０．００１％とし
た。その結果、表４に示すように、ハマメリス抽出物は
血管内皮細胞に対する毒性がほとんどなかった。
形態的変化に関しては倒立顕微鏡による目視評価とし、
ＤＮＡ合成は常法に従い、3Ｈ−ＴｄＲ取り込みを指標
にサンプル添加後２４時間培養の最終８時間における取
り込み量を液体シンチレーションカウンターを用いて定
量評価した。なお、被験化合物濃度は０．００１％とし
た。その結果、表４に示すように、ハマメリス抽出物は
血管内皮細胞に対する毒性がほとんどなかった。
【００２６】
【表４】
【００２７】実施例５ 免疫担当細胞（リンパ節細胞）に対する毒性（ＤＮＡ合
成）：マウスリンパ節細胞を使用した。ＤＮＡ合成は常
法に従い、3Ｈ−ＴｄＲ取り込みを指標にサンプル及び
リンパ球刺激物質（ＩＬ−２：５Ｕ／ml）添加後７２時
間培養の最終２４時間における取り込み量を液体シンチ
レーションカウンターを用いて定量評価した。なお、被
験化合物濃度は０．００１％とした。その結果、表５に
示すように安息香酸アニリド類（１）は免疫担当細胞に
対する毒性がほとんどなかった。
成）：マウスリンパ節細胞を使用した。ＤＮＡ合成は常
法に従い、3Ｈ−ＴｄＲ取り込みを指標にサンプル及び
リンパ球刺激物質（ＩＬ−２：５Ｕ／ml）添加後７２時
間培養の最終２４時間における取り込み量を液体シンチ
レーションカウンターを用いて定量評価した。なお、被
験化合物濃度は０．００１％とした。その結果、表５に
示すように安息香酸アニリド類（１）は免疫担当細胞に
対する毒性がほとんどなかった。
【００２８】
【表５】
【００２９】実施例６ 皮膚刺激性：被験抽出物（２％／エタノール）又は溶媒
（エタノール）をヘアレスマウス背部に１００μｌずつ
３カ月間塗布し、無処理皮膚との肉眼的差異につき観察
を行った。その結果、ハマメリス抽出物は、３カ月連続
して皮膚に塗布しても何ら炎症を発生せず、安全性が高
かった。
（エタノール）をヘアレスマウス背部に１００μｌずつ
３カ月間塗布し、無処理皮膚との肉眼的差異につき観察
を行った。その結果、ハマメリス抽出物は、３カ月連続
して皮膚に塗布しても何ら炎症を発生せず、安全性が高
かった。
【００３０】
【発明の効果】ハマメリス抽出物は、優れた細胞接着抑
制作用を有し、さらに、かつ安全性も高いので、移植臓
器拒絶反応抑制、自己免疫疾患等の治療及び癌転移予防
に有用である。
制作用を有し、さらに、かつ安全性も高いので、移植臓
器拒絶反応抑制、自己免疫疾患等の治療及び癌転移予防
に有用である。
─────────────────────────────────────────────────────
【手続補正書】
【提出日】平成６年１２月１５日
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２７
【補正方法】変更
【補正内容】
【００２７】実施例５ 免疫担当細胞（リンパ節細胞）に対する毒性（ＤＮＡ合
成）：マウスリンパ節細胞を使用した。ＤＮＡ合成は常
法に従い、３Ｈ−ＴｄＲ取り込みを指標にサンプル及び
リンパ球刺激物質（ＩＬ−２：５Ｕ／ｍｌ）添加後７２
時間培養の最終２４時間における取り込み量を液体シン
チレーションカウンターを用いて定量評価した。なお、
被験化合物濃度は０．００１％とした。その結果、表５
に示すようにハマメリス抽出物は免疫担当細胞に対する
毒性がほとんどなかった。
成）：マウスリンパ節細胞を使用した。ＤＮＡ合成は常
法に従い、３Ｈ−ＴｄＲ取り込みを指標にサンプル及び
リンパ球刺激物質（ＩＬ−２：５Ｕ／ｍｌ）添加後７２
時間培養の最終２４時間における取り込み量を液体シン
チレーションカウンターを用いて定量評価した。なお、
被験化合物濃度は０．００１％とした。その結果、表５
に示すようにハマメリス抽出物は免疫担当細胞に対する
毒性がほとんどなかった。
Claims (3)
- 【請求項１】 ハマメリス抽出物を有効成分とする細胞
接着抑制剤。 - 【請求項２】 ハマメリス抽出物を有効成分とする免疫
抑制剤。 - 【請求項３】 ハマメリス抽出物を有効成分とする癌転
移抑制剤。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP29922594A JP3294449B2 (ja) | 1994-12-02 | 1994-12-02 | 細胞接着抑制剤 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP29922594A JP3294449B2 (ja) | 1994-12-02 | 1994-12-02 | 細胞接着抑制剤 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
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