JPH08109109A - マメ科植物用微生物製剤 - Google Patents
マメ科植物用微生物製剤Info
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- JPH08109109A JPH08109109A JP6246315A JP24631594A JPH08109109A JP H08109109 A JPH08109109 A JP H08109109A JP 6246315 A JP6246315 A JP 6246315A JP 24631594 A JP24631594 A JP 24631594A JP H08109109 A JPH08109109 A JP H08109109A
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Abstract
(57)【要約】
【目的】 マメ科植物に対し優れた成長促進効果及び収
量増加効果を有する微生物製剤及び生育促進・収量増加
方法を提供する。 【構成】 細胞数の比が０．１〜１０のアゾスピリラム
ブラジレンスＮＩ−１０株と、リゾビウム属細菌、ブ
ラジリゾビウム属細菌あるいはアゾリゾビウム属細菌等
の根粒菌とを、ダイズ等のマメ科植物に接種する。
量増加効果を有する微生物製剤及び生育促進・収量増加
方法を提供する。 【構成】 細胞数の比が０．１〜１０のアゾスピリラム
ブラジレンスＮＩ−１０株と、リゾビウム属細菌、ブ
ラジリゾビウム属細菌あるいはアゾリゾビウム属細菌等
の根粒菌とを、ダイズ等のマメ科植物に接種する。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、マメ科植物用微生物製
剤に関し、詳しくは、ダイズ等のマメ科植物の成長を促
進させ、収量を増加させるための微生物製剤、及び生育
促進・収量増加方法に関する。
剤に関し、詳しくは、ダイズ等のマメ科植物の成長を促
進させ、収量を増加させるための微生物製剤、及び生育
促進・収量増加方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】マメ科植物は、リゾビウム（Rhizobiu
m）属細菌、ブラジリゾビウム（Bradyrhizobium）属細
菌、アゾリゾビウム（Azorhizobium）属細菌などの根粒
菌類の感染により共生的に根粒を形成する。根粒中に形
成されたバクテロイドが空中窒素固定を行うことによ
り、マメ科植物は他の作物の収穫が期待できないような
土地においても生産を行うことができる。現在、根粒菌
の純粋培養物をマメ科植物に人工接種することにより、
収量増加が図られている（Moawad, H. et al., Biol.Fe
rtil. Soils, 6, 174-177 (1988)）。
m）属細菌、ブラジリゾビウム（Bradyrhizobium）属細
菌、アゾリゾビウム（Azorhizobium）属細菌などの根粒
菌類の感染により共生的に根粒を形成する。根粒中に形
成されたバクテロイドが空中窒素固定を行うことによ
り、マメ科植物は他の作物の収穫が期待できないような
土地においても生産を行うことができる。現在、根粒菌
の純粋培養物をマメ科植物に人工接種することにより、
収量増加が図られている（Moawad, H. et al., Biol.Fe
rtil. Soils, 6, 174-177 (1988)）。
【０００３】一方、アゾスピリラム（Azospirillum）属
細菌（以下、「アゾスピリラム菌」という）は、植物に
緩やかに共生し植物の生育促進を行うことが知られてい
る植物成長促進根圏細菌の一種である。このアゾスピリ
ラム属細菌においても、純粋培養物をコムギ、トウモロ
コシ、イネ等の単子葉植物に接種することにより収量を
増加させようという試みが行われている（Singh, C. S.
et al., Plant Soil,53, 387 (1979)）。例えば、コム
ギの水耕栽培に対するアゾスピリラム ブラジレンス
（Azospirillum brasilense） ＡＴＣＣ２９７１０等の
効果については、種子に接種して葉の重量が約５０％増
加したという報告（Soil Biol. Biochem., 18, 297-301
(1988)）。しかし、根粒菌、アゾスピリラム菌をそれ
ぞれ単独で圃場に接種した場合には、安定した効果が得
られにくいという問題があった。
細菌（以下、「アゾスピリラム菌」という）は、植物に
緩やかに共生し植物の生育促進を行うことが知られてい
る植物成長促進根圏細菌の一種である。このアゾスピリ
ラム属細菌においても、純粋培養物をコムギ、トウモロ
コシ、イネ等の単子葉植物に接種することにより収量を
増加させようという試みが行われている（Singh, C. S.
et al., Plant Soil,53, 387 (1979)）。例えば、コム
ギの水耕栽培に対するアゾスピリラム ブラジレンス
（Azospirillum brasilense） ＡＴＣＣ２９７１０等の
効果については、種子に接種して葉の重量が約５０％増
加したという報告（Soil Biol. Biochem., 18, 297-301
(1988)）。しかし、根粒菌、アゾスピリラム菌をそれ
ぞれ単独で圃場に接種した場合には、安定した効果が得
られにくいという問題があった。
【０００４】上記問題に対し、アゾスピリラム菌を根粒
菌と同時にマメ科植物に接種し、更なる収量増加を求め
る試みがなされている（蒲生卓磨、 「農業と園芸」、第
６４巻、第７号、第８８９〜８９５頁、１９８９年；仁
王以智夫、「微生物と資源」、第６巻、第３５〜４２頁、
１９８１年）が、実際に圃場で効果が示されてはいな
い。
菌と同時にマメ科植物に接種し、更なる収量増加を求め
る試みがなされている（蒲生卓磨、 「農業と園芸」、第
６４巻、第７号、第８８９〜８９５頁、１９８９年；仁
王以智夫、「微生物と資源」、第６巻、第３５〜４２頁、
１９８１年）が、実際に圃場で効果が示されてはいな
い。
【０００５】また、根粒菌と光合成細菌とを混合するこ
とにより根粒菌の保存中の失活を防ぐ方法が開示されて
いる（特公昭５９−５０３１１号公報）が、根粒菌の持
つ植物成長促進作用を増強することを目的としたもので
はない。
とにより根粒菌の保存中の失活を防ぐ方法が開示されて
いる（特公昭５９−５０３１１号公報）が、根粒菌の持
つ植物成長促進作用を増強することを目的としたもので
はない。
【０００６】以上のことから、マメ科植物に対し、優れ
た成長促進効果及び収量増加効果を有する、実用的な微
生物製剤が求められている。
た成長促進効果及び収量増加効果を有する、実用的な微
生物製剤が求められている。
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】本発明は、上記観点か
らなされたものであり、マメ科植物に対し優れた成長促
進効果及び収量増加効果を有する微生物製剤及び生育促
進・収量増加方法を提供することを課題とする。
らなされたものであり、マメ科植物に対し優れた成長促
進効果及び収量増加効果を有する微生物製剤及び生育促
進・収量増加方法を提供することを課題とする。
【０００８】
【課題を解決するための手段】本発明者は、上記課題を
解決するために鋭意研究を行った結果、特定のアゾスピ
リラム菌と根粒菌とを併用することにより、マメ科植物
に対し優れた成長促進効果及び収量増加効果が得られる
ことを見い出し、本発明に至った。
解決するために鋭意研究を行った結果、特定のアゾスピ
リラム菌と根粒菌とを併用することにより、マメ科植物
に対し優れた成長促進効果及び収量増加効果が得られる
ことを見い出し、本発明に至った。
【０００９】すなわち本発明は、アゾスピリラム ブラ
ジレンスＮＩ−１０株と根粒菌とを含有するマメ科植物
用微生物製剤である。本発明はさらに、アゾスピリラム
ブラジレンスＮＩ−１０株と根粒菌とをマメ科植物に
接種することを特徴とするマメ科植物の生育促進及び収
量増加方法を提供する。
ジレンスＮＩ−１０株と根粒菌とを含有するマメ科植物
用微生物製剤である。本発明はさらに、アゾスピリラム
ブラジレンスＮＩ−１０株と根粒菌とをマメ科植物に
接種することを特徴とするマメ科植物の生育促進及び収
量増加方法を提供する。
【００１０】以下、本発明を詳細に説明する。本発明に
用いるアゾスピリラム ブラジレンス（Azospirillum b
rasilense）ＮＩ−１０は、本発明者により、溶液栽培
トマトに対する植物成長促進効果を有する微生物として
分離された菌株である。具体的には、本菌株は、土耕栽
培されたキュウリ、コマツナの根から窒素固定能を指標
として選択され、さらに養液栽培トマトに接種したとき
に高い生育促進効果を有するものとして選択されたもの
である。このアゾスピリラム ブラジレンスＮＩ−１０
は、工業技術院生命工学工業技術研究所に、ＦＥＲＭ
Ｐ−１３５８８として寄託されている。 本菌株の分離
については文献（Soil Sci. Plant. Nutr., 37(3), 455
-461, (1991)）に記載されているが、根粒菌と共にマメ
科植物に対して優れた生育促進作用を有することは、本
発明で初めて明らかにされた。
用いるアゾスピリラム ブラジレンス（Azospirillum b
rasilense）ＮＩ−１０は、本発明者により、溶液栽培
トマトに対する植物成長促進効果を有する微生物として
分離された菌株である。具体的には、本菌株は、土耕栽
培されたキュウリ、コマツナの根から窒素固定能を指標
として選択され、さらに養液栽培トマトに接種したとき
に高い生育促進効果を有するものとして選択されたもの
である。このアゾスピリラム ブラジレンスＮＩ−１０
は、工業技術院生命工学工業技術研究所に、ＦＥＲＭ
Ｐ−１３５８８として寄託されている。 本菌株の分離
については文献（Soil Sci. Plant. Nutr., 37(3), 455
-461, (1991)）に記載されているが、根粒菌と共にマメ
科植物に対して優れた生育促進作用を有することは、本
発明で初めて明らかにされた。
【００１１】一方、本発明に用いる根粒菌としては、マ
メ科植物の根に感染して根粒を形成するグラム陰性細菌
であり、マメ科植物に対して生育促進作用を有するもの
であれば特に制限されず、具体的にはリゾビウム（Rhiz
obium）属、ブラジリゾビウム（Bradyrhizobium）属、
アゾリゾビウム（Azorhizobium）属に属する微生物が挙
げられる。さらに具体的には、リゾビウム メリロッテ
イ（Rhizobium meliloti）、リゾビウム トリフォリイ
（R. trifolii）、リゾビウム レグミノサルム（R. le
guminosarum）、リゾビウム ファゼオリイ（R. phaseo
li）、リゾビウム ルピニ（R. lupini）、リゾビウム
フレデイ（R. fredii）、リゾビウムロッテイ（R. lo
ti）、ブラジリゾビウム ジャポニクム（Bradyrhizobi
um japonicum）、アゾリゾビウム カウリノダンス（Az
orhizobium caulinodans）が挙げられる。
メ科植物の根に感染して根粒を形成するグラム陰性細菌
であり、マメ科植物に対して生育促進作用を有するもの
であれば特に制限されず、具体的にはリゾビウム（Rhiz
obium）属、ブラジリゾビウム（Bradyrhizobium）属、
アゾリゾビウム（Azorhizobium）属に属する微生物が挙
げられる。さらに具体的には、リゾビウム メリロッテ
イ（Rhizobium meliloti）、リゾビウム トリフォリイ
（R. trifolii）、リゾビウム レグミノサルム（R. le
guminosarum）、リゾビウム ファゼオリイ（R. phaseo
li）、リゾビウム ルピニ（R. lupini）、リゾビウム
フレデイ（R. fredii）、リゾビウムロッテイ（R. lo
ti）、ブラジリゾビウム ジャポニクム（Bradyrhizobi
um japonicum）、アゾリゾビウム カウリノダンス（Az
orhizobium caulinodans）が挙げられる。
【００１２】上記根粒菌及びアゾスピリラム ブラジレ
ンスＮＩ−１０株の培養に用いる培地は、これらの微生
物の増殖に適した培地であれば特に制限されないが、液
体培地が好ましい。尚、アゾスピリラムブラジレンスＮ
Ｉ−１０株については、ＤＬ−リンゴ酸を培地に添加す
ると培地中の菌数を高めることができる。具体的には、
アゾスピリラム菌の培養には、ＲＣ培地（ＤＬ−リンゴ
酸：５ｇ／Ｌ、ＫＯＨ：４．８ｇ／Ｌ、酵母エキス：
０．５ｇ／Ｌ、ＫＨ2ＰＯ4：０．５ｇ／Ｌ、ＭｇＳＯ4
・７Ｈ2Ｏ：０．２ｇ／Ｌ、ＮａＣｌ：０．１ｇ／Ｌ、
ＦｅＣｌ3・６Ｈ2Ｏ：０．０１５ｇ／Ｌ、ｐＨ７．０）
が挙げられる。また、根粒菌の培養には、以下の組成を
有する培地が挙げられる。マニトール：１０ｇ／Ｌ、酵
母エキス：０．４ｇ／Ｌ、ＫＨ2ＰＯ4：０．５ｇ／Ｌ、
ＭｇＳＯ4・７Ｈ2Ｏ：０．２ｇ／Ｌ、ＮａＣｌ：０．１
ｇ／Ｌ。これらの培地に、上記根粒菌あるいはアゾスピ
リラム菌を１０8個細胞／Ｌの割合で接種後、３０℃で
２４時間、毎分１８０回の振盪培養を行い、遠心分離機
で集菌し、菌体を得ることができる。
ンスＮＩ−１０株の培養に用いる培地は、これらの微生
物の増殖に適した培地であれば特に制限されないが、液
体培地が好ましい。尚、アゾスピリラムブラジレンスＮ
Ｉ−１０株については、ＤＬ−リンゴ酸を培地に添加す
ると培地中の菌数を高めることができる。具体的には、
アゾスピリラム菌の培養には、ＲＣ培地（ＤＬ−リンゴ
酸：５ｇ／Ｌ、ＫＯＨ：４．８ｇ／Ｌ、酵母エキス：
０．５ｇ／Ｌ、ＫＨ2ＰＯ4：０．５ｇ／Ｌ、ＭｇＳＯ4
・７Ｈ2Ｏ：０．２ｇ／Ｌ、ＮａＣｌ：０．１ｇ／Ｌ、
ＦｅＣｌ3・６Ｈ2Ｏ：０．０１５ｇ／Ｌ、ｐＨ７．０）
が挙げられる。また、根粒菌の培養には、以下の組成を
有する培地が挙げられる。マニトール：１０ｇ／Ｌ、酵
母エキス：０．４ｇ／Ｌ、ＫＨ2ＰＯ4：０．５ｇ／Ｌ、
ＭｇＳＯ4・７Ｈ2Ｏ：０．２ｇ／Ｌ、ＮａＣｌ：０．１
ｇ／Ｌ。これらの培地に、上記根粒菌あるいはアゾスピ
リラム菌を１０8個細胞／Ｌの割合で接種後、３０℃で
２４時間、毎分１８０回の振盪培養を行い、遠心分離機
で集菌し、菌体を得ることができる。
【００１３】上記アゾスピリラム ブラジレンスＮＩ−
１０株と根粒菌とをマメ科植物に接種すると、優れた成
長促進効果及び収量増加効果が得られる。本発明が適用
されるマメ科植物としては、ダイズ、エンドウ、インゲ
ン、ソラマメ、ラッカセイ、アズキ等マメ科の植物であ
れば何れでもよいが、これらの中ではダイズ、エンド
ウ、インゲンが好適である。尚、根粒菌は通常、宿主特
異性を有しているので、マメ科植物の種類に応じて菌種
を選択すればよい。例えば、ダイズにはブラジリゾビウ
ム ジャポニクムが、エンドウにはリゾビウム レグミ
ノサルムが、インゲンにはリゾビウム ファゼオリイが
各々好適である。
１０株と根粒菌とをマメ科植物に接種すると、優れた成
長促進効果及び収量増加効果が得られる。本発明が適用
されるマメ科植物としては、ダイズ、エンドウ、インゲ
ン、ソラマメ、ラッカセイ、アズキ等マメ科の植物であ
れば何れでもよいが、これらの中ではダイズ、エンド
ウ、インゲンが好適である。尚、根粒菌は通常、宿主特
異性を有しているので、マメ科植物の種類に応じて菌種
を選択すればよい。例えば、ダイズにはブラジリゾビウ
ム ジャポニクムが、エンドウにはリゾビウム レグミ
ノサルムが、インゲンにはリゾビウム ファゼオリイが
各々好適である。
【００１４】アゾスピリラム ブラジレンスＮＩ−１０
株と根粒菌とを、例えば栽培土壌に接種するには、これ
らの微生物を育苗培土へ散布する方法、あるいは播種部
位へ接種する方法等が挙げられる。育苗培土は、畑土、
水田土壌、人工培土などいずれでもよく、適用するマメ
科植物に応じて適宜設定すればよい。例えば、エダマメ
には砂や人工培土が好ましい。また、植物を栽培する際
に、苗床から本圃に移植する場合には、苗床及び本圃の
いずれに上記微生物を接種使用してもよく、両方に接種
してもよい。これらの微生物の接種量としては、土壌１
ｇ当たり１０5〜１０8個細胞づつが好ましい。また、ア
ゾスピリラム ブラジレンスＮＩ−１０株と根粒菌との
接種量の比率は、細胞数として０．１〜１０の範囲が好
ましい。
株と根粒菌とを、例えば栽培土壌に接種するには、これ
らの微生物を育苗培土へ散布する方法、あるいは播種部
位へ接種する方法等が挙げられる。育苗培土は、畑土、
水田土壌、人工培土などいずれでもよく、適用するマメ
科植物に応じて適宜設定すればよい。例えば、エダマメ
には砂や人工培土が好ましい。また、植物を栽培する際
に、苗床から本圃に移植する場合には、苗床及び本圃の
いずれに上記微生物を接種使用してもよく、両方に接種
してもよい。これらの微生物の接種量としては、土壌１
ｇ当たり１０5〜１０8個細胞づつが好ましい。また、ア
ゾスピリラム ブラジレンスＮＩ−１０株と根粒菌との
接種量の比率は、細胞数として０．１〜１０の範囲が好
ましい。
【００１５】アゾスピリラム ブラジレンスＮＩ−１０
株と根粒菌とを製剤化しておくと、使用に際し簡便であ
り、保存上好適である。このような製剤としては、担体
にこれらの微生物を担持させたものが挙げられる。担体
としては、有機質及び無機質のいずれのものも使用で
き、有機質及び無機質の両方を含むものでもよい。具体
的には、例えば、赤玉土、焼成赤玉土、鹿沼土、黒ボク
土、バーミキュライト、パーライト、ゼオライト等の無
機質、または、ピートモス、木炭、パルプ、藁、バガ
ス、油かす、魚かす、骨粉、血粉、貝化石、カニがら等
の有機物あるいはそれらの混合物が挙げられる。微生物
の保存安定性の観点からは、これらのうちでは有機質の
担体が好ましい。
株と根粒菌とを製剤化しておくと、使用に際し簡便であ
り、保存上好適である。このような製剤としては、担体
にこれらの微生物を担持させたものが挙げられる。担体
としては、有機質及び無機質のいずれのものも使用で
き、有機質及び無機質の両方を含むものでもよい。具体
的には、例えば、赤玉土、焼成赤玉土、鹿沼土、黒ボク
土、バーミキュライト、パーライト、ゼオライト等の無
機質、または、ピートモス、木炭、パルプ、藁、バガ
ス、油かす、魚かす、骨粉、血粉、貝化石、カニがら等
の有機物あるいはそれらの混合物が挙げられる。微生物
の保存安定性の観点からは、これらのうちでは有機質の
担体が好ましい。
【００１６】担体に上記微生物を担持させるには、担体
と微生物又はその懸濁液を混合すればよい。混合物の水
分含量は特に制限されないが、５〜９７％が好ましい。
また、製剤中の微生物の保存性の点からは、水分含量は
製剤全量に対して５０〜９０重量％が好ましい。
と微生物又はその懸濁液を混合すればよい。混合物の水
分含量は特に制限されないが、５〜９７％が好ましい。
また、製剤中の微生物の保存性の点からは、水分含量は
製剤全量に対して５０〜９０重量％が好ましい。
【００１７】微生物の配合量としては、特に制限されな
いが、全量に対しアゾスピリラムブラジレンスＮＩ−１
０株の湿菌体が１０-5〜５０重量％、根粒菌の湿菌体が
１０-5〜５０重量％であることが好ましい。また、細胞
としては、アゾスピリラムブラジレンスＮＩ−１０株及
び根粒菌共に、製剤１ｇ当たり１０5〜１０12個が好ま
しい。
いが、全量に対しアゾスピリラムブラジレンスＮＩ−１
０株の湿菌体が１０-5〜５０重量％、根粒菌の湿菌体が
１０-5〜５０重量％であることが好ましい。また、細胞
としては、アゾスピリラムブラジレンスＮＩ−１０株及
び根粒菌共に、製剤１ｇ当たり１０5〜１０12個が好ま
しい。
【００１８】また、製剤中のアゾスピリラム ブラジレ
ンスＮＩ−１０株と根粒菌との細胞数の比率は、０．１
〜１０の範囲が好ましい。
ンスＮＩ−１０株と根粒菌との細胞数の比率は、０．１
〜１０の範囲が好ましい。
【００１９】
【実施例】以下に、本発明の実施例を説明する。
【００２０】
【実施例１】 アゾスピリラム ブラジレンスＮＩ−１
０の分離 ＜１＞アゾスピリラム属菌の検索 つくば市の農業生物資源研究所圃場で採取した土壌を用
いて、同所温室内で土耕栽培したキュウリ、コマツナの
根を採取し、水洗後５〜８ｍｍ程度の大きさに切り刻
み、８ｍｌの窒素を含まない半流動リンゴ酸培地（App
l. Environ. Microbiol., 33, 85-88, 1977を参照、シ
クロヘキシミド１００ｐｐｍ添加：以下、「ＮＦｂ培
地」という）を入れた１０ｍｌ用セラムチューブに移
し、３２℃で培養した。
０の分離 ＜１＞アゾスピリラム属菌の検索 つくば市の農業生物資源研究所圃場で採取した土壌を用
いて、同所温室内で土耕栽培したキュウリ、コマツナの
根を採取し、水洗後５〜８ｍｍ程度の大きさに切り刻
み、８ｍｌの窒素を含まない半流動リンゴ酸培地（App
l. Environ. Microbiol., 33, 85-88, 1977を参照、シ
クロヘキシミド１００ｐｐｍ添加：以下、「ＮＦｂ培
地」という）を入れた１０ｍｌ用セラムチューブに移
し、３２℃で培養した。
【００２１】３日間培養後、ダブルキャップで密栓し、
セラムチューブに１ｍｌのアセチレンを入れて３２℃に
１時間おいた後、窒素固定の指標としてニトロゲナーゼ
活性を測定した。ニトロゲナーゼ活性は、アセチレンを
エチレンに還元する反応を利用したアセチレン還元法に
より測定した。セラムチューブ中のエチレン量を、８０
〜１００メッシュのポラパック−Ｑ（（株）ガスクロ工
業）を充填した１ｍｍφのステンレスカラムを用いたガ
スクロマトグラフィーにより測定した。エチレンの検出
は、ＦＩＤを用いて行った。
セラムチューブに１ｍｌのアセチレンを入れて３２℃に
１時間おいた後、窒素固定の指標としてニトロゲナーゼ
活性を測定した。ニトロゲナーゼ活性は、アセチレンを
エチレンに還元する反応を利用したアセチレン還元法に
より測定した。セラムチューブ中のエチレン量を、８０
〜１００メッシュのポラパック−Ｑ（（株）ガスクロ工
業）を充填した１ｍｍφのステンレスカラムを用いたガ
スクロマトグラフィーにより測定した。エチレンの検出
は、ＦＩＤを用いて行った。
【００２２】高いアセチレン還元能が認められたセラム
チューブから、新鮮なＮＦｂ培地を入れたセラムチュー
ブへ菌を移植し、３２℃で３日間培養し、培地の表面下
にペリクル（pellicle）を形成した細菌を、酵母エキス
とコンゴレッドを含む固体ＮＦｂ培地（コンゴレッド培
地：Appl. Environ. Microbiol., 44, 990-991, 1982を
参照）に塗布して７日間培養した。
チューブから、新鮮なＮＦｂ培地を入れたセラムチュー
ブへ菌を移植し、３２℃で３日間培養し、培地の表面下
にペリクル（pellicle）を形成した細菌を、酵母エキス
とコンゴレッドを含む固体ＮＦｂ培地（コンゴレッド培
地：Appl. Environ. Microbiol., 44, 990-991, 1982を
参照）に塗布して７日間培養した。
【００２３】形成されたコロニーのうち、赤色のコロニ
ーを半流動ＮＦｂ培地に移植し、３２℃で３日間培養
後、アセチレン還元能を測定し、高いアセチレン還元能
を示した菌株をＢＭＳ寒天培地に塗布して、３２℃で５
日間培養した。生じた黄色コロニーを単離してＮＦｂ培
地に生育させて保存した。
ーを半流動ＮＦｂ培地に移植し、３２℃で３日間培養
後、アセチレン還元能を測定し、高いアセチレン還元能
を示した菌株をＢＭＳ寒天培地に塗布して、３２℃で５
日間培養した。生じた黄色コロニーを単離してＮＦｂ培
地に生育させて保存した。
【００２４】＜２＞菌株の同定 バージェイのマニュアルに記載の方法に従って、形態、
各種培地における生育状況、生理学的性質等を調べた。
結果を表１〜４（表１：形態、表２：各培地における生
育状況、表３：生理学的性質、表４：その他の諸性質）
に示す。
各種培地における生育状況、生理学的性質等を調べた。
結果を表１〜４（表１：形態、表２：各培地における生
育状況、表３：生理学的性質、表４：その他の諸性質）
に示す。
【００２５】
【表１】
【００２６】
【表２】
【００２７】
【表３】
【００２８】
【表４】
【００２９】表に示された通り、ＮＩ−１０株は、微好
気的条件下で窒素固定可能であり、桿状、湾曲桿状、コ
ンマ状の極鞭毛を有するグラム陰性細菌であり、らせん
状（Corkscrew-like）の運動性を示す。また、各種培地
でピンク色の色素を生成し、グルコースを炭素源として
利用する。カタラーゼ、オキシダーゼ陽性で、ＰＨＢを
蓄積する。分離源は植物根園である。これらの結果よ
り、アゾスピリラム属細菌と同定された。
気的条件下で窒素固定可能であり、桿状、湾曲桿状、コ
ンマ状の極鞭毛を有するグラム陰性細菌であり、らせん
状（Corkscrew-like）の運動性を示す。また、各種培地
でピンク色の色素を生成し、グルコースを炭素源として
利用する。カタラーゼ、オキシダーゼ陽性で、ＰＨＢを
蓄積する。分離源は植物根園である。これらの結果よ
り、アゾスピリラム属細菌と同定された。
【００３０】種レベルの同定は、バージェイのマニュア
ルに記載の方法に従って、公知菌であるアゾスピリラム
ブラジレンスＡＴＣＣ２９７１０、ＡＴＣＣ２９１４
５及びアゾスピリラム リボフィラムＡＴＣＣ２９７０
７を対照として実施した。結果は表５に示す通りであ
る。
ルに記載の方法に従って、公知菌であるアゾスピリラム
ブラジレンスＡＴＣＣ２９７１０、ＡＴＣＣ２９１４
５及びアゾスピリラム リボフィラムＡＴＣＣ２９７０
７を対照として実施した。結果は表５に示す通りであ
る。
【００３１】
【表５】
【００３２】尚、表中、ＡＴＣＣ２９７０７株はアゾス
ピリラム リポフェラム、ＡＴＣＣ２９１４５及びＡＴ
ＣＣ２９７１０株はアゾスピリラム ブラジレンスであ
る。上記の結果から明らかなように、検討した全ての性
質が対照菌のアゾスピリラム ブラジレンスと一致し
た。また、ＧＣ含量を熱変性温度より求めた結果、検討
した全ての菌株がＧＣ含量７０％であった。しかしなが
ら、本菌株は、トマトの養液栽培に用いたときに、公知
菌株であるＡＴＣＣ２９７１０及びＡＴＣＣ２９７２９
株と比較して高い生育促進効果が認められたこと、さら
に、後述するように、ＡＴＣＣ２９１４５と比較して、
根粒菌と併用したときにマメ科植物に対する高い生育促
進効果及び収量増加効果が認められたことから、新規菌
株であると考えた。このアゾスピリラム ブラジレンス
ＮＩ−１０は、工業技術院生命工学工業技術研究所に、
ＦＥＲＭ Ｐ−１３５８８として寄託されている。
ピリラム リポフェラム、ＡＴＣＣ２９１４５及びＡＴ
ＣＣ２９７１０株はアゾスピリラム ブラジレンスであ
る。上記の結果から明らかなように、検討した全ての性
質が対照菌のアゾスピリラム ブラジレンスと一致し
た。また、ＧＣ含量を熱変性温度より求めた結果、検討
した全ての菌株がＧＣ含量７０％であった。しかしなが
ら、本菌株は、トマトの養液栽培に用いたときに、公知
菌株であるＡＴＣＣ２９７１０及びＡＴＣＣ２９７２９
株と比較して高い生育促進効果が認められたこと、さら
に、後述するように、ＡＴＣＣ２９１４５と比較して、
根粒菌と併用したときにマメ科植物に対する高い生育促
進効果及び収量増加効果が認められたことから、新規菌
株であると考えた。このアゾスピリラム ブラジレンス
ＮＩ−１０は、工業技術院生命工学工業技術研究所に、
ＦＥＲＭ Ｐ−１３５８８として寄託されている。
【００３３】
【実施例２】 アゾスピリラム ブラジレンス ＮＩ−
１０及び根粒菌のエダマメに対する生育促進効果 ＜１＞アゾスピリラム菌及び根粒菌の培養 アゾスピリラム ブラジレンス ＮＩ−１０は、ＲＣ培
地（ＤＬ−リンゴ酸：５ｇ／Ｌ、ＫＯＨ：４．８ｇ／
Ｌ、酵母エキス：０．５ｇ／Ｌ、ＫＨ2ＰＯ4：０．５ｇ
／Ｌ、ＭｇＳＯ4・７Ｈ2Ｏ：０．２ｇ／Ｌ、ＮａＣｌ：
０．１ｇ／Ｌ、ＦｅＣｌ3・６Ｈ2Ｏ：０．０１５ｇ／
Ｌ、ｐＨ７．０）を用い、５００ｍＬ坂口フラスコに１
００ｍＬづつ培地を分注後、別に液体培養した種菌をフ
ラスコ１本に１０7個細胞づつ接種して、これを毎分１
８０回振盪する振盪培養機の中で３２℃、２４時間培養
後、遠心分離により集菌した。また、コントロールとし
てアゾスピリラム ブラジレンス ＡＴＣＣ２９１４５
を同様に培養して集菌した。
１０及び根粒菌のエダマメに対する生育促進効果 ＜１＞アゾスピリラム菌及び根粒菌の培養 アゾスピリラム ブラジレンス ＮＩ−１０は、ＲＣ培
地（ＤＬ−リンゴ酸：５ｇ／Ｌ、ＫＯＨ：４．８ｇ／
Ｌ、酵母エキス：０．５ｇ／Ｌ、ＫＨ2ＰＯ4：０．５ｇ
／Ｌ、ＭｇＳＯ4・７Ｈ2Ｏ：０．２ｇ／Ｌ、ＮａＣｌ：
０．１ｇ／Ｌ、ＦｅＣｌ3・６Ｈ2Ｏ：０．０１５ｇ／
Ｌ、ｐＨ７．０）を用い、５００ｍＬ坂口フラスコに１
００ｍＬづつ培地を分注後、別に液体培養した種菌をフ
ラスコ１本に１０7個細胞づつ接種して、これを毎分１
８０回振盪する振盪培養機の中で３２℃、２４時間培養
後、遠心分離により集菌した。また、コントロールとし
てアゾスピリラム ブラジレンス ＡＴＣＣ２９１４５
を同様に培養して集菌した。
【００３４】一方、根粒菌（ブラジリゾビウム ジャポ
ニカム ＡＴＣＣ１０３２４）は、マニトール：１０ｇ
／Ｌ、酵母エキス：０．４ｇ／Ｌ、ＫＨ2ＰＯ4：０．５
ｇ／Ｌ、ＭｇＳＯ4・７Ｈ2Ｏ：０．２ｇ／Ｌ、ＮａＣ
ｌ：０．１ｇ／Ｌ を含む培地を用い、その他の条件は
アゾスピリラム菌と同じ条件で培養後、遠心分離により
集菌した。
ニカム ＡＴＣＣ１０３２４）は、マニトール：１０ｇ
／Ｌ、酵母エキス：０．４ｇ／Ｌ、ＫＨ2ＰＯ4：０．５
ｇ／Ｌ、ＭｇＳＯ4・７Ｈ2Ｏ：０．２ｇ／Ｌ、ＮａＣ
ｌ：０．１ｇ／Ｌ を含む培地を用い、その他の条件は
アゾスピリラム菌と同じ条件で培養後、遠心分離により
集菌した。
【００３５】＜２＞エダマメに対する生育促進効果 径９ｃｍの黒色ビニールポットに赤玉土を、ポットの上
部２ｃｍの隙間を残して加え、エダマメ（品種：サッポ
ロミドリ）の種子を２粒づつ播種した。この様なポット
を、下記に示す試験例１及び比較例１、２のそれぞれに
つき２０ポットづつ作成した。
部２ｃｍの隙間を残して加え、エダマメ（品種：サッポ
ロミドリ）の種子を２粒づつ播種した。この様なポット
を、下記に示す試験例１及び比較例１、２のそれぞれに
つき２０ポットづつ作成した。
【００３６】比較例１には何も接種せず、比較例２には
アゾスピリラム ブラジレンス ＡＴＣＣ２９１４５株
を１ポット当たり１０7個接種し、試験例１には根粒菌
とアゾスピリラム ブラジレンス ＮＩ−１０株を、そ
れぞれ１ポット当たり１０7個体接種した。
アゾスピリラム ブラジレンス ＡＴＣＣ２９１４５株
を１ポット当たり１０7個接種し、試験例１には根粒菌
とアゾスピリラム ブラジレンス ＮＩ−１０株を、そ
れぞれ１ポット当たり１０7個体接種した。
【００３７】これらのポットは、種子が発芽してから１
ポット当たり１本になるように間引きを行い、１日１回
潅水し、１か月生育させた。生育１か月の時点で苗を全
て引き抜き、根に付いた土を水洗し、地上部と根部を切
り分けた後、茎長を測定した。その後、試料と地上部と
根とを別々に１１０℃で３日間乾燥させ、各々の重量を
測定した。それらの結果を表６に示す。表中の各数値
は、比較例９の値を１００とした相対値で示したもので
ある。また、T/R率は、根重に対する地上重の比であ
る。
ポット当たり１本になるように間引きを行い、１日１回
潅水し、１か月生育させた。生育１か月の時点で苗を全
て引き抜き、根に付いた土を水洗し、地上部と根部を切
り分けた後、茎長を測定した。その後、試料と地上部と
根とを別々に１１０℃で３日間乾燥させ、各々の重量を
測定した。それらの結果を表６に示す。表中の各数値
は、比較例９の値を１００とした相対値で示したもので
ある。また、T/R率は、根重に対する地上重の比であ
る。
【００３８】
【表６】
【００３９】この結果から、アゾスピリラム ブラジレ
ンス ＮＩ−１０株と根粒菌を接種することにより、エ
ダマメに対して顕著な成長促進効果が得られることが明
らかである。
ンス ＮＩ−１０株と根粒菌を接種することにより、エ
ダマメに対して顕著な成長促進効果が得られることが明
らかである。
【００４０】＜３＞エダマメに対する収量増加効果 エダマメ（品種：サッポロミドリ）を、関東ローム層の
畑で栽培した。栽培期間は１９９４年４月２５日〜７月
２０日であった。まず、底部が網目になっている３０ｃ
ｍ×４０ｃｍのプラスチックバットに人工培土（呉羽化
学社製 クレハ園芸培土）を４Ｌ入れ、種子を１バット
当たり６０粒播種した。本葉２枚になるまでバットで生
育させ、畑に移植した。その際、比較例３は、苗をその
まま植え付け、比較例４は苗の植え付け穴にアゾスピリ
ラム ブラジレンス ＡＴＣＣ２９１４５株と根粒菌を
それぞれ１穴当たり１０7個づつ接種した。試験例２
は、苗の植え付け穴にアゾスピリラム ブラジレンス
ＮＩ−１０株と根粒菌をそれぞれ１穴当たり１０7個づ
つ接種した。比較例３、４、試験例２共に、１区４０本
づつ３反復とした。
畑で栽培した。栽培期間は１９９４年４月２５日〜７月
２０日であった。まず、底部が網目になっている３０ｃ
ｍ×４０ｃｍのプラスチックバットに人工培土（呉羽化
学社製 クレハ園芸培土）を４Ｌ入れ、種子を１バット
当たり６０粒播種した。本葉２枚になるまでバットで生
育させ、畑に移植した。その際、比較例３は、苗をその
まま植え付け、比較例４は苗の植え付け穴にアゾスピリ
ラム ブラジレンス ＡＴＣＣ２９１４５株と根粒菌を
それぞれ１穴当たり１０7個づつ接種した。試験例２
は、苗の植え付け穴にアゾスピリラム ブラジレンス
ＮＩ−１０株と根粒菌をそれぞれ１穴当たり１０7個づ
つ接種した。比較例３、４、試験例２共に、１区４０本
づつ３反復とした。
【００４１】その後、通常の管理により栽培を行い７月
２０日に収穫した。収穫時に各区ごとに、果実を全て取
り、その果実の総重量を測定後、莢中に種子が１粒入っ
ているものと２、３粒入っているものに分け、それぞれ
の重さを測定した。その結果を示したのが表７である。
ここで各数値は比較例３での値を１００とした相対値で
示してある。
２０日に収穫した。収穫時に各区ごとに、果実を全て取
り、その果実の総重量を測定後、莢中に種子が１粒入っ
ているものと２、３粒入っているものに分け、それぞれ
の重さを測定した。その結果を示したのが表７である。
ここで各数値は比較例３での値を１００とした相対値で
示してある。
【００４２】
【表７】
【００４３】この結果から明らかなように、アゾスピリ
ラム ブラジレンス ＮＩ−１０株と根粒菌とを接種す
ることにより、エダマメに対して顕著な収量増加効果が
得られる。
ラム ブラジレンス ＮＩ−１０株と根粒菌とを接種す
ることにより、エダマメに対して顕著な収量増加効果が
得られる。
【００４４】
【発明の効果】本発明のマメ科植物用微生物製剤は、マ
メ科植物に対し優れた成長促進効果及び収量増加効果を
有する。また、本発明の方法により、マメ科植物に対
し、生育促進及び収量増加が図ることができる。
メ科植物に対し優れた成長促進効果及び収量増加効果を
有する。また、本発明の方法により、マメ科植物に対
し、生育促進及び収量増加が図ることができる。
Claims (7)
- 【請求項１】 アゾスピリラム ブラジレンスＮＩ−１
０株と根粒菌とを含有するマメ科植物用微生物製剤。 - 【請求項２】 担体を、全量に対して０．２〜９９．８
重量％含有する請求項１記載のマメ科植物用微生物製
剤。 - 【請求項３】 アゾスピリラム ブラジレンスＮＩ−１
０株と根粒菌の細胞数の比が、０．１〜１０である請求
項１または２記載のマメ科植物用微生物製剤。 - 【請求項４】 アゾスピリラム ブラジレンスＮＩ−１
０株と根粒菌の配合量が、製剤全量に対し、各々１０-5
〜５０重量％である請求項１〜３のいずれか一項に記載
のマメ科植物用微生物製剤。 - 【請求項５】 アゾスピリラム ブラジレンスＮＩ−１
０株及び根粒菌共に、製剤１ｇ当たり１０5〜１０12個
含む請求項１〜４のいずれか一項に記載のマメ科植物用
微生物製剤。 - 【請求項６】 全量に対し、５〜９７重量％の水分を含
有する請求項１〜５のいずれか一項に記載のマメ科植物
用微生物製剤。 - 【請求項７】 アゾスピリラム ブラジレンスＮＩ−１
０株と根粒菌とをマメ科植物に接種することを特徴とす
るマメ科植物の生育促進及び収量増加方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP24631594A JP3574686B2 (ja) | 1994-10-12 | 1994-10-12 | マメ科植物用微生物製剤 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP24631594A JP3574686B2 (ja) | 1994-10-12 | 1994-10-12 | マメ科植物用微生物製剤 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH08109109A true JPH08109109A (ja) | 1996-04-30 |
| JP3574686B2 JP3574686B2 (ja) | 2004-10-06 |
Family
ID=17146734
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP24631594A Expired - Fee Related JP3574686B2 (ja) | 1994-10-12 | 1994-10-12 | マメ科植物用微生物製剤 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3574686B2 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2024101432A1 (ja) * | 2022-11-11 | 2024-05-16 | 国立大学法人茨城大学 | マメ科植物用培土及びその使用、マメ科植物用栽培セット、マメ科植物の栽培方法、並びに、培土付きマメ科植物の苗 |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR102169215B1 (ko) | 2019-07-15 | 2020-10-22 | 전라북도 순창군(농업기술센터장) | 질소고정력과 작물 생육촉진효과를 가지는 라이조비움 트로피씨(Rhizobium tropici) Sunchang180605 균주, 이를 이용한 토양 개량 방법 및 콩과 작물의 생육 촉진방법 |
-
1994
- 1994-10-12 JP JP24631594A patent/JP3574686B2/ja not_active Expired - Fee Related
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2024101432A1 (ja) * | 2022-11-11 | 2024-05-16 | 国立大学法人茨城大学 | マメ科植物用培土及びその使用、マメ科植物用栽培セット、マメ科植物の栽培方法、並びに、培土付きマメ科植物の苗 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP3574686B2 (ja) | 2004-10-06 |
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