JPH0763756A - 蛍光免疫測定装置 - Google Patents
蛍光免疫測定装置Info
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- JPH0763756A JPH0763756A JP5211628A JP21162893A JPH0763756A JP H0763756 A JPH0763756 A JP H0763756A JP 5211628 A JP5211628 A JP 5211628A JP 21162893 A JP21162893 A JP 21162893A JP H0763756 A JPH0763756 A JP H0763756A
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- G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
- G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
- G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
- G01N21/645—Specially adapted constructive features of fluorimeters
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- G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
- G01N21/6428—Measuring fluorescence of fluorescent products of reactions or of fluorochrome labelled reactive substances, e.g. measuring quenching effects, using measuring "optrodes"
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Abstract
(57)【要約】
【目的】 エバネッセント波成分により励起される蛍光
強度に基づく免疫反応の程度の測定感度、測定精度を高
める。 【構成】 合成樹脂で構成されたスラブ型光導波路４に
抗体４ｂを固定しておき、抗体４ｂに対して抗原抗体反
応により結合した抗原４ｃに対して、６５０ｎｍに蛍光
のピークを有するシアニン系色素で標識された標識抗体
４ｄを抗原抗体反応により結合させ、６３５ｎｍの励起
光をスラブ型光導波路４に導入して、エバネッセント波
成分により光導波路４の表面近傍に拘束されたシアニン
系色素を励起する。
強度に基づく免疫反応の程度の測定感度、測定精度を高
める。 【構成】 合成樹脂で構成されたスラブ型光導波路４に
抗体４ｂを固定しておき、抗体４ｂに対して抗原抗体反
応により結合した抗原４ｃに対して、６５０ｎｍに蛍光
のピークを有するシアニン系色素で標識された標識抗体
４ｄを抗原抗体反応により結合させ、６３５ｎｍの励起
光をスラブ型光導波路４に導入して、エバネッセント波
成分により光導波路４の表面近傍に拘束されたシアニン
系色素を励起する。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】この発明は、蛍光免疫測定装置に
関し、さらに詳細にいえば、導入された励起光を全反射
させながら伝播させる光導波路の表面において抗原抗体
反応を行なわせ、さらに蛍光物質で標識された物質を反
応させ、上記励起光のエバネッセント波成分により励起
される蛍光物質が発する蛍光を光導波路に導入し、全反
射させながら伝播させ、光導波路から出射される蛍光に
基づいて免疫反応の程度を測定する蛍光免疫測定装置に
関する。
関し、さらに詳細にいえば、導入された励起光を全反射
させながら伝播させる光導波路の表面において抗原抗体
反応を行なわせ、さらに蛍光物質で標識された物質を反
応させ、上記励起光のエバネッセント波成分により励起
される蛍光物質が発する蛍光を光導波路に導入し、全反
射させながら伝播させ、光導波路から出射される蛍光に
基づいて免疫反応の程度を測定する蛍光免疫測定装置に
関する。
【０００２】
【従来の技術】従来から光導波路に励起光を導入し、励
起光を全反射させながら光導波路中を伝播させることに
より生じるエバネッセント波成分を用いて、抗原抗体反
応により光導波路の表面近傍に拘束された蛍光物質を励
起し、励起された蛍光を光導波路を通して全反射させな
がら伝播させ、光導波路から出射させ、出射した蛍光の
強度を測定することにより間接的に免疫反応の程度を測
定する蛍光免疫測定装置の研究が行われている。具体的
には、光導波路として合成樹脂により成型されたものを
用いるとともに、蛍光物質としてフルオレインイソチオ
シアネートを用い、励起光として４５０ｎｍ〜５５０ｎ
ｍの波長領域（可視光領域）のものを用いていた。
起光を全反射させながら光導波路中を伝播させることに
より生じるエバネッセント波成分を用いて、抗原抗体反
応により光導波路の表面近傍に拘束された蛍光物質を励
起し、励起された蛍光を光導波路を通して全反射させな
がら伝播させ、光導波路から出射させ、出射した蛍光の
強度を測定することにより間接的に免疫反応の程度を測
定する蛍光免疫測定装置の研究が行われている。具体的
には、光導波路として合成樹脂により成型されたものを
用いるとともに、蛍光物質としてフルオレインイソチオ
シアネートを用い、励起光として４５０ｎｍ〜５５０ｎ
ｍの波長領域（可視光領域）のものを用いていた。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】しかしながら、従来の
蛍光免疫測定装置においては、励起光のエバネセント波
成分により免疫反応の程度に対応する蛍光物質が励起さ
れるだけでなく、光導波路自体に含まれる蛍光物質も励
起されてしまうため、光導波路から出射される蛍光の強
度は免疫反応の程度に対応する蛍光強度と光導波路自体
の蛍光強度が重畳された値となってしまう。そして、光
導波路の表面近傍に拘束された蛍光物質はエバネッセン
ト波成分のみによって励起されるのに対して光導波路中
の蛍光物質は励起光そのものによって励起されるのであ
るから、光導波路中に含まれる蛍光物質の量が少ないに
もかかわらず、光導波路自体から到底無視し得ない蛍光
が励起され、免疫反応の程度の測定精度が低下するとい
う問題がある。
蛍光免疫測定装置においては、励起光のエバネセント波
成分により免疫反応の程度に対応する蛍光物質が励起さ
れるだけでなく、光導波路自体に含まれる蛍光物質も励
起されてしまうため、光導波路から出射される蛍光の強
度は免疫反応の程度に対応する蛍光強度と光導波路自体
の蛍光強度が重畳された値となってしまう。そして、光
導波路の表面近傍に拘束された蛍光物質はエバネッセン
ト波成分のみによって励起されるのに対して光導波路中
の蛍光物質は励起光そのものによって励起されるのであ
るから、光導波路中に含まれる蛍光物質の量が少ないに
もかかわらず、光導波路自体から到底無視し得ない蛍光
が励起され、免疫反応の程度の測定精度が低下するとい
う問題がある。
【０００４】この問題を解決するために光導波路を石英
ガラスで構成すれば光導波路自体から発生する蛍光をほ
どんど皆無にできるのであるが、光導波路が高価になっ
てしまうととに、合成樹脂と比較して割れ等が発生しや
すいので、保管、取扱いに最新の注意を払わなければな
らず、作業性が低下するという問題が発生する。また、
光導波路自体の蛍光の問題に対して、本出願人は既に特
願平４−３４１８４号において、光導波路の蛍光励起波
長と蛍光物質のシアニン系色素の蛍光励起波長が互いに
異なる波長となるように設定されているとともに、光導
波路に導入される励起光の波長がシアニン系色素の蛍光
励起波長に含まれる波長に設定された蛍光免疫測定装置
を提案している。この蛍光免疫測定装置によれば、光導
波路自体において励起される蛍光を少なくすることがで
きるとともに光導波路の表面近傍に拘束されているシア
ニン系色素のみを励起させることが可能となる。
ガラスで構成すれば光導波路自体から発生する蛍光をほ
どんど皆無にできるのであるが、光導波路が高価になっ
てしまうととに、合成樹脂と比較して割れ等が発生しや
すいので、保管、取扱いに最新の注意を払わなければな
らず、作業性が低下するという問題が発生する。また、
光導波路自体の蛍光の問題に対して、本出願人は既に特
願平４−３４１８４号において、光導波路の蛍光励起波
長と蛍光物質のシアニン系色素の蛍光励起波長が互いに
異なる波長となるように設定されているとともに、光導
波路に導入される励起光の波長がシアニン系色素の蛍光
励起波長に含まれる波長に設定された蛍光免疫測定装置
を提案している。この蛍光免疫測定装置によれば、光導
波路自体において励起される蛍光を少なくすることがで
きるとともに光導波路の表面近傍に拘束されているシア
ニン系色素のみを励起させることが可能となる。
【０００５】しかしながら、シアニン系色素の吸収のピ
ークが６５０ｎｍであることから一般的には効率を考え
て励起波長は６５０ｎｍに設定されるのであるが、シア
ニン系色素の蛍光のピークが６６２ｎｍであるから、ス
トークシフト（励起光波長と励起される蛍光波長との
差）が比較的短くなり、励起光散乱の影響を受けやすく
なってしまう。その結果、免疫反応の測定感度、精度に
限界があり、より一層、測定感度、精度を向上させるこ
とが難しいという問題がある。
ークが６５０ｎｍであることから一般的には効率を考え
て励起波長は６５０ｎｍに設定されるのであるが、シア
ニン系色素の蛍光のピークが６６２ｎｍであるから、ス
トークシフト（励起光波長と励起される蛍光波長との
差）が比較的短くなり、励起光散乱の影響を受けやすく
なってしまう。その結果、免疫反応の測定感度、精度に
限界があり、より一層、測定感度、精度を向上させるこ
とが難しいという問題がある。
【０００６】
【発明の目的】この発明は上記の問題点に鑑みてなされ
たものであり、合成樹脂からなる光導波路を用いた蛍光
免疫測定装置において、従来の装置に比べて免疫反応の
測定感度、測定精度を向上できる蛍光免疫測定装置を提
供することにある。
たものであり、合成樹脂からなる光導波路を用いた蛍光
免疫測定装置において、従来の装置に比べて免疫反応の
測定感度、測定精度を向上できる蛍光免疫測定装置を提
供することにある。
【０００７】
【課題を解決するための手段】上記の目的を達成するた
めの請求項１の蛍光免疫測定装置は、導入された励起光
を全反射させながら伝播させる光導波路の表面において
抗原抗体反応を行なわせ、さらに蛍光物質で標識された
物質を反応させ、上記励起光のエバネッセント波成分に
より励起される蛍光物質が発する蛍光を光導波路に導入
し、全反射させながら伝播させ、光導波路から出射され
る蛍光に基づいて免疫反応の程度を測定する蛍光免疫測
定装置において、６５０ｎｍ近傍に吸収のピークがある
蛍光物質を用い、６３５ｎｍ近傍の波長の光を励起光と
して採用している。
めの請求項１の蛍光免疫測定装置は、導入された励起光
を全反射させながら伝播させる光導波路の表面において
抗原抗体反応を行なわせ、さらに蛍光物質で標識された
物質を反応させ、上記励起光のエバネッセント波成分に
より励起される蛍光物質が発する蛍光を光導波路に導入
し、全反射させながら伝播させ、光導波路から出射され
る蛍光に基づいて免疫反応の程度を測定する蛍光免疫測
定装置において、６５０ｎｍ近傍に吸収のピークがある
蛍光物質を用い、６３５ｎｍ近傍の波長の光を励起光と
して採用している。
【０００８】請求項２の蛍光免疫測定装置は蛍光物質と
してシアニン系蛍光色素を使用している。請求項３の蛍
光免疫測定装置は下記化２で示されるシアニン系蛍光色
素を使用している。
してシアニン系蛍光色素を使用している。請求項３の蛍
光免疫測定装置は下記化２で示されるシアニン系蛍光色
素を使用している。
【０００９】
【化２】
【００１０】
【作用】請求項１の蛍光免疫測定装置であれば、６５０
ｎｍ近傍に吸収のピークがある蛍光物質を用い、６３５
ｎｍ近傍の波長の光を励起光として採用することによ
り、ストークシフトを大きくでき励起光散乱の影響を低
減することができ、さらに、蛍光物質からの信号光とし
ての蛍光とノイズ光との比率（Ｓ／Ｎ）を向上させるこ
とができる。したがって、光導波路が合成樹脂で構成さ
れていても、蛍光の強度に基づいて免疫反応の程度を従
来装置に比べて、高感度かつ高精度に測定できる。
ｎｍ近傍に吸収のピークがある蛍光物質を用い、６３５
ｎｍ近傍の波長の光を励起光として採用することによ
り、ストークシフトを大きくでき励起光散乱の影響を低
減することができ、さらに、蛍光物質からの信号光とし
ての蛍光とノイズ光との比率（Ｓ／Ｎ）を向上させるこ
とができる。したがって、光導波路が合成樹脂で構成さ
れていても、蛍光の強度に基づいて免疫反応の程度を従
来装置に比べて、高感度かつ高精度に測定できる。
【００１１】請求項２の蛍光免疫測定装置であれば、蛍
光物質としてシアニン系蛍光色素を使用することにより
励起光として６３５ｎｍ近傍の波長を使用することがで
きるので、信号光のＳ／Ｎを高めることができ、免疫反
応の測定感度および測定精度を向上させることが可能に
なる。請求項３の蛍光免疫測定装置においても信号光の
Ｓ／Ｎを高めることができ、免疫反応の測定感度および
測定精度を向上させることが可能になる。
光物質としてシアニン系蛍光色素を使用することにより
励起光として６３５ｎｍ近傍の波長を使用することがで
きるので、信号光のＳ／Ｎを高めることができ、免疫反
応の測定感度および測定精度を向上させることが可能に
なる。請求項３の蛍光免疫測定装置においても信号光の
Ｓ／Ｎを高めることができ、免疫反応の測定感度および
測定精度を向上させることが可能になる。
【００１２】
【実施例】以下、実施例を示す添付図面によって詳細に
説明する。図１はこの発明の蛍光免疫測定装置の一実施
例を示す概略図である。この蛍光免疫測定装置は６３５
ｎｍ近傍の長波長光を出射する半導体レーザ１と、出射
されたレーザ光を集光するレンズ系２と、ダイクロイッ
クミラー３と、合成樹脂で構成されているスラブ型光導
波路４と、遮断周波数６９５ｎｍのシャープカットフィ
ルタ５ａを含んで構成されノイズ成分を除去するレンズ
系５と、受光素子としての光電子増倍管６と、半導体レ
ーザ１から出力される励起光強度の変化を検出するため
の吸光体７とを有している。
説明する。図１はこの発明の蛍光免疫測定装置の一実施
例を示す概略図である。この蛍光免疫測定装置は６３５
ｎｍ近傍の長波長光を出射する半導体レーザ１と、出射
されたレーザ光を集光するレンズ系２と、ダイクロイッ
クミラー３と、合成樹脂で構成されているスラブ型光導
波路４と、遮断周波数６９５ｎｍのシャープカットフィ
ルタ５ａを含んで構成されノイズ成分を除去するレンズ
系５と、受光素子としての光電子増倍管６と、半導体レ
ーザ１から出力される励起光強度の変化を検出するため
の吸光体７とを有している。
【００１３】スラブ型光導波路４は、例えば、図２に示
すように、表面の所定範囲を包囲するように溶液収容部
４ａが形成されており、溶液収容部４ａに含まれる光導
波路本体の表面に予め抗体４ｂが固定されている。な
お、スラブ型光導波路本体を水平方向を向くように配置
する代わりに垂直方向を向くように配置して両面に溶液
収容部４ａを形成しても良く、この場合には励起される
蛍光の強度を倍増できるので、高感度化、高精度化に有
利である。また、図２において４ｃは抗原、４ｄは標識
抗体、４ｅは蛍光物質をそれぞれ示している。
すように、表面の所定範囲を包囲するように溶液収容部
４ａが形成されており、溶液収容部４ａに含まれる光導
波路本体の表面に予め抗体４ｂが固定されている。な
お、スラブ型光導波路本体を水平方向を向くように配置
する代わりに垂直方向を向くように配置して両面に溶液
収容部４ａを形成しても良く、この場合には励起される
蛍光の強度を倍増できるので、高感度化、高精度化に有
利である。また、図２において４ｃは抗原、４ｄは標識
抗体、４ｅは蛍光物質をそれぞれ示している。
【００１４】半導体レーザ１から出射された励起光はレ
ンズ系２により絞り込まれ、ダイクロイックミラー３に
より反射されてスラブ型光導波路４に入射される。そし
て、スラブ型光導波路４の入射面から出射される蛍光を
ダイクロイックミラー３を透過させ、レンズ系５により
ノイズ成分を除去して十分に集光して光電子増倍管に導
かれる。なお、励起光強度の変化は吸光体７によって検
出され、半導体レーザ１をフィードバック制御すること
により励起光強度を一定に保持するようにしている。
ンズ系２により絞り込まれ、ダイクロイックミラー３に
より反射されてスラブ型光導波路４に入射される。そし
て、スラブ型光導波路４の入射面から出射される蛍光を
ダイクロイックミラー３を透過させ、レンズ系５により
ノイズ成分を除去して十分に集光して光電子増倍管に導
かれる。なお、励起光強度の変化は吸光体７によって検
出され、半導体レーザ１をフィードバック制御すること
により励起光強度を一定に保持するようにしている。
【００１５】上記構成の蛍光免疫測定装置を用いて被検
溶液の測定を行なう場合には、まず、溶液収容部４ａに
そのままの濃度の被検溶液または所定倍率に希釈した被
検溶液を注入することにより、スラブ型光導波路本体の
表面に固定されている抗体４ｂとの間で抗原抗体反応を
行なわせる。次いで、溶液収容部４ａから被検溶液を排
出し、半導体レーザ１を駆動した後、被検溶液の代わり
に蛍光物質で標識された蛍光標識抗体を含む溶液を溶液
収容部４ａに注入し、抗原抗体反応により光導波路本体
の表面近傍に拘束された抗原４ｂとの間で再び抗原抗体
反応を行なわせる。なお、ここで蛍光物質としては、シ
アニン系色素としての下記化３に示すＢＩＣＹ５．１８
−ＯＳｕ｛バイオケミカル ディテクション システム
ズ社（Biochemical Detection Systems Inc. 4516 Henr
y Street, Pittsburgh, PA 15213USA）製｝を用い、β
−２マイクログロブリン抗体を所定の割合で混合し、互
いに結合させて得たＢＩＣＹ５．１８−ＯＳｕ標識抗体
を含む溶液を被検溶液に代えて溶液収容部４ａに注入す
る。
溶液の測定を行なう場合には、まず、溶液収容部４ａに
そのままの濃度の被検溶液または所定倍率に希釈した被
検溶液を注入することにより、スラブ型光導波路本体の
表面に固定されている抗体４ｂとの間で抗原抗体反応を
行なわせる。次いで、溶液収容部４ａから被検溶液を排
出し、半導体レーザ１を駆動した後、被検溶液の代わり
に蛍光物質で標識された蛍光標識抗体を含む溶液を溶液
収容部４ａに注入し、抗原抗体反応により光導波路本体
の表面近傍に拘束された抗原４ｂとの間で再び抗原抗体
反応を行なわせる。なお、ここで蛍光物質としては、シ
アニン系色素としての下記化３に示すＢＩＣＹ５．１８
−ＯＳｕ｛バイオケミカル ディテクション システム
ズ社（Biochemical Detection Systems Inc. 4516 Henr
y Street, Pittsburgh, PA 15213USA）製｝を用い、β
−２マイクログロブリン抗体を所定の割合で混合し、互
いに結合させて得たＢＩＣＹ５．１８−ＯＳｕ標識抗体
を含む溶液を被検溶液に代えて溶液収容部４ａに注入す
る。
【００１６】
【化３】
【００１７】なお、Ｓｕの構造式を下記化４に示す。
【００１８】
【化４】
【００１９】また、半導体レーザとしては６３５ｎｍの
波長の光を出射するものを用いている。上記ＢＩＣＹ
５．１８−ＯＳｕの最適励起波長は６５０ｎｍである
が、励起波長を６３５ｎｍにすることにより、信号のＳ
／Ｎが良くなるからである。以下、最適蛍光励起波長が
６５０ｎｍのＢＩＣＹ５．１８−ＯＳｕに対して励起波
長を６３５ｎｍに設定して蛍光を検出した方が信号のＳ
／Ｎが良くなることを実例を挙げて説明する。
波長の光を出射するものを用いている。上記ＢＩＣＹ
５．１８−ＯＳｕの最適励起波長は６５０ｎｍである
が、励起波長を６３５ｎｍにすることにより、信号のＳ
／Ｎが良くなるからである。以下、最適蛍光励起波長が
６５０ｎｍのＢＩＣＹ５．１８−ＯＳｕに対して励起波
長を６３５ｎｍに設定して蛍光を検出した方が信号のＳ
／Ｎが良くなることを実例を挙げて説明する。
【００２０】下記表１はＢＩＣＹ５．１８−ＯＳｕの励
起波長を６３０ｎｍ，６３５ｎｍ，６４０ｎｍ，６５０
ｎｍと変化させた場合の蛍光強度比と励起光減光比とを
示した表である。なお、蛍光強度比と励起光減光比はシ
ャープカットフィルタ５ａを含むレンズ系５（遮断周波
数λｃ＝６９５ｎｍ）透過後の強度から算出した値であ
る。この表１から励起波長を６３５ｎｍに設定した方が
最適蛍光励起波長である６５０ｎｍに設定するより信号
のＳ／Ｎが良くなることが理解できる。また、６２０ｎ
ｍ，６１０ｎｍというように励起波長を短波長側に設定
すると、蛍光強度が低くなり過ぎるとともに、レンズ系
５によるノイズ光の除去効果が低下するので、励起波長
は６３５ｎｍ近傍が好ましい。
起波長を６３０ｎｍ，６３５ｎｍ，６４０ｎｍ，６５０
ｎｍと変化させた場合の蛍光強度比と励起光減光比とを
示した表である。なお、蛍光強度比と励起光減光比はシ
ャープカットフィルタ５ａを含むレンズ系５（遮断周波
数λｃ＝６９５ｎｍ）透過後の強度から算出した値であ
る。この表１から励起波長を６３５ｎｍに設定した方が
最適蛍光励起波長である６５０ｎｍに設定するより信号
のＳ／Ｎが良くなることが理解できる。また、６２０ｎ
ｍ，６１０ｎｍというように励起波長を短波長側に設定
すると、蛍光強度が低くなり過ぎるとともに、レンズ系
５によるノイズ光の除去効果が低下するので、励起波長
は６３５ｎｍ近傍が好ましい。
【００２１】
【表１】
【００２２】表２は６３５ｎｍ，６５０ｎｍをそれぞれ
励起波長とした場合において、免疫反応が飽和し、信号
値が平衡値に達した飽和光導波路と未反応の光導波路か
らの信号値の比率を比較した表である。未反応の光導波
路からの信号値はノイズ光を示している。そして抗原の
濃度を０．０５ｎｇ／ｍｌと、１０ｎｇ／ｍｌとの２種
類を選択して飽和光導波路と未反応光導波路からの信号
値の比率を比較している。なお、表２において｛ ｝で
囲まれた値は飽和光導波路部／未反応光導波路の値を示
している。また、ＮＤフィルターはともに５０％×１０
％の構成を用い、ダイクロイックミラーはそれぞれ６５
０ｎｍ用、６３５ｎｍ用のものを使用しており、遮断周
波数λｃ＝６９５ｎｍのシャープカットフィルタ５ａを
含むレンズ系５を使用している。
励起波長とした場合において、免疫反応が飽和し、信号
値が平衡値に達した飽和光導波路と未反応の光導波路か
らの信号値の比率を比較した表である。未反応の光導波
路からの信号値はノイズ光を示している。そして抗原の
濃度を０．０５ｎｇ／ｍｌと、１０ｎｇ／ｍｌとの２種
類を選択して飽和光導波路と未反応光導波路からの信号
値の比率を比較している。なお、表２において｛ ｝で
囲まれた値は飽和光導波路部／未反応光導波路の値を示
している。また、ＮＤフィルターはともに５０％×１０
％の構成を用い、ダイクロイックミラーはそれぞれ６５
０ｎｍ用、６３５ｎｍ用のものを使用しており、遮断周
波数λｃ＝６９５ｎｍのシャープカットフィルタ５ａを
含むレンズ系５を使用している。
【００２３】
【表２】
【００２４】表２から抗原の濃度によらず励起波長を６
３５ｎｍに設定した方が、｛ ｝で囲まれた値からも分
かるように信号のＳ／Ｎが、約１．６〜１．７倍（（１
１８．５／７３．２５）〜（２．５９／１．５３））も
良くなっていることが理解できる。なお、この発明は上
記実施例に限定されるものではなく、例えば、光導波路
の表面に抗体を固定する代わりに抗原またはハプテン
（hapten）を固定し、シアニン系色素を抗原またはハプ
テンと結合させることが可能であるほか、ＢＩＣＹ５．
１８−ＯＳｕ以外のシアニン系色素を用いることが可能
であり、その他、この発明の要旨を変更しない範囲内に
おいて種々の設計変更を施すことが可能である。
３５ｎｍに設定した方が、｛ ｝で囲まれた値からも分
かるように信号のＳ／Ｎが、約１．６〜１．７倍（（１
１８．５／７３．２５）〜（２．５９／１．５３））も
良くなっていることが理解できる。なお、この発明は上
記実施例に限定されるものではなく、例えば、光導波路
の表面に抗体を固定する代わりに抗原またはハプテン
（hapten）を固定し、シアニン系色素を抗原またはハプ
テンと結合させることが可能であるほか、ＢＩＣＹ５．
１８−ＯＳｕ以外のシアニン系色素を用いることが可能
であり、その他、この発明の要旨を変更しない範囲内に
おいて種々の設計変更を施すことが可能である。
【００２５】
【発明の効果】以上のように、請求項１の発明は、６５
０ｎｍ近傍に吸収のピークがある蛍光物質を用い、６３
５ｎｍ近傍の波長の光を励起光として採用することによ
り、ストークシフトを大きくでき励起光散乱の影響を低
減することができ、さらに、蛍光物質からの信号光とし
ての蛍光とノイズ光との比率（Ｓ／Ｎ）を向上させるこ
とができる。その結果、光導波路が合成樹脂で構成され
ていても、蛍光の強度に基づいて免疫反応の程度を従来
装置に比べて高感度かつ高精度に測定できるという特有
の効果を奏する。
０ｎｍ近傍に吸収のピークがある蛍光物質を用い、６３
５ｎｍ近傍の波長の光を励起光として採用することによ
り、ストークシフトを大きくでき励起光散乱の影響を低
減することができ、さらに、蛍光物質からの信号光とし
ての蛍光とノイズ光との比率（Ｓ／Ｎ）を向上させるこ
とができる。その結果、光導波路が合成樹脂で構成され
ていても、蛍光の強度に基づいて免疫反応の程度を従来
装置に比べて高感度かつ高精度に測定できるという特有
の効果を奏する。
【００２６】請求項２の発明は、蛍光物質としてシアニ
ン系蛍光色素を使用することにより励起光として６３５
ｎｍ近傍の波長を使用することができるので、信号光の
Ｓ／Ｎを高めることができ、免疫反応の測定感度および
測定精度を向上させることが可能になるという特有の効
果を奏する。請求項３の発明も、信号光のＳ／Ｎを高め
ることができ、免疫反応の測定感度および測定精度を向
上させることが可能になるという特有の効果を奏する。
ン系蛍光色素を使用することにより励起光として６３５
ｎｍ近傍の波長を使用することができるので、信号光の
Ｓ／Ｎを高めることができ、免疫反応の測定感度および
測定精度を向上させることが可能になるという特有の効
果を奏する。請求項３の発明も、信号光のＳ／Ｎを高め
ることができ、免疫反応の測定感度および測定精度を向
上させることが可能になるという特有の効果を奏する。
【図１】この発明の蛍光免疫測定装置の一実施例を示す
概略図である。
概略図である。
【図２】スラブ型光導波路の構成を示す縦断面図であ
る。
る。
４ スラブ型光導波路 ４ｄ 標識抗体 ４ｅ 蛍光物質
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｇ０１Ｎ 33/543 ５９５ 9217−2Ｊ
Claims (3)
- 【請求項１】 導入された励起光を全反射させながら伝
播させる光導波路（４）の表面において抗原抗体反応を
行なわせ、さらに蛍光物質（４ｅ）で標識された物質
（４ｄ）を反応させ、上記励起光のエバネッセント波成
分により励起される蛍光物質（４ｅ）が発する蛍光を光
導波路（４）に導入し、全反射させながら伝播させ、光
導波路（４）から出射される蛍光に基づいて免疫反応の
程度を測定する蛍光免疫測定装置において、６５０ｎｍ
近傍に吸収のピークがある蛍光物質（４ｅ）を用い、６
３５ｎｍ近傍の波長の光を励起光として採用したことを
特徴とする蛍光免疫測定装置。 - 【請求項２】 蛍光物質（４ｅ）としてシアニン系蛍光
色素を使用した請求項１に記載の蛍光免疫測定装置。 - 【請求項３】 化１で示されるシアニン系蛍光色素を使
用する請求項２に記載の蛍光免疫測定装置。 【化１】
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP21162893A JP3362206B2 (ja) | 1993-08-26 | 1993-08-26 | 蛍光免疫測定装置 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP21162893A JP3362206B2 (ja) | 1993-08-26 | 1993-08-26 | 蛍光免疫測定装置 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0763756A true JPH0763756A (ja) | 1995-03-10 |
| JP3362206B2 JP3362206B2 (ja) | 2003-01-07 |
Family
ID=16608924
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP21162893A Expired - Fee Related JP3362206B2 (ja) | 1993-08-26 | 1993-08-26 | 蛍光免疫測定装置 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3362206B2 (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH08285851A (ja) * | 1995-04-13 | 1996-11-01 | Nec Corp | 光導波路型蛍光免疫センサとその製造方法 |
| US7276368B2 (en) | 2001-02-02 | 2007-10-02 | Research International, Inc. | Enhanced waveguide and method |
| US7496245B2 (en) | 2004-08-20 | 2009-02-24 | Research International, Inc. | Misalignment compensating optical sensor and method |
-
1993
- 1993-08-26 JP JP21162893A patent/JP3362206B2/ja not_active Expired - Fee Related
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH08285851A (ja) * | 1995-04-13 | 1996-11-01 | Nec Corp | 光導波路型蛍光免疫センサとその製造方法 |
| US7276368B2 (en) | 2001-02-02 | 2007-10-02 | Research International, Inc. | Enhanced waveguide and method |
| US7608463B2 (en) | 2001-02-02 | 2009-10-27 | Research International, Inc. | Enhanced waveguide and method |
| US7496245B2 (en) | 2004-08-20 | 2009-02-24 | Research International, Inc. | Misalignment compensating optical sensor and method |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP3362206B2 (ja) | 2003-01-07 |
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