JPH0757916B2 - 改良された試料ウエルおよび冷却系を有するスラブ電気泳動装置 - Google Patents

改良された試料ウエルおよび冷却系を有するスラブ電気泳動装置

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JPH0757916B2
JPH0757916B2 JP3107963A JP10796391A JPH0757916B2 JP H0757916 B2 JPH0757916 B2 JP H0757916B2 JP 3107963 A JP3107963 A JP 3107963A JP 10796391 A JP10796391 A JP 10796391A JP H0757916 B2 JPH0757916 B2 JP H0757916B2
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イューマン チュー ダニエル
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バイオ−ラッド ラボラトリーズ,インコーポレイティド
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Description

【発明の詳細な説明】
【0001】
【産業上の利用分野】本発明は、垂直スラブゲル電気泳
動の分野に関する。特に本発明は、スラブゲル上への試
料の負荷および電気泳動中のゲルの冷却に関係する問題
を扱う。
【0002】
【従来の技術】垂直スラブゲル電気泳動装置を設計する
上での多数の考慮事項の幾つかは、均一で且つ一定の温
度に維持するための冷却、安定で且つ均一な電場の維
持、必要とされる緩衝液の容量の最小化、および信頼で
き且つ再現できる方法での試料の負荷である。
【0003】ゲルスラブは通常、2枚のガラス板の間に
幅0.25〜3mm のすき間を作るために両側の垂直縁にスペ
ーサーを有する2枚のガラス板を一緒に重ねることによ
り作製される。それらの板は垂直縁りに沿って圧締めさ
れ、そして開放下端に沿ってシールが置かれる。次いで
すき間をゲル溶液で満たし、そして「コーム」または
「テンプレート」と当業界で呼ばれるウエル形成用差し
込み具を、歯が板の間の空間に伸びるように開放上端に
沿って設置する。この差し込み具を決まった場所におい
た状態でゲルをセットし、次いで差し込み具を取り外し
てゲルの上端に沿ったウエルの列を残す。ゲルの下端に
沿ったシールを除去し、そして生じた「ゲルサンドイッ
チ」をセル中に置いた後、試料をそれらのウエルに入れ
る。次に、暴露された上端と下端を、電極が浸漬された
泳動緩衝液と接触させる。
【0004】
【発明が解決しようとする課題】薄いゲルは多くの分離
に望ましい。不運にも、薄いゲルは薄い試料ウエルを有
し、負荷することができる試料の量を制限し、その上ウ
エル中に試料を入れるのを難しくする。本明細書におい
て扱う別の課題は、あらゆる型の電気泳動−ジュール熱
に伴って生じるものである。他の電気泳動方式と同様、
スラブゲル方式も、特に高度の電場が使われる時にこの
熱効果を受けやすい。当業者の間で周知であるように、
制御できないジュール熱は試料に損傷を与えることがあ
り、そして不均一な温度は異なるゲル位置のタンパク質
を異なる速度で移動させるだろう。
【0005】
【課題を解決するための手段】本明細書中で開示される
装置は、それらの課題の両方を処理する特徴を有する。
本発明の1つの観点においては、ゲルの囲いを形成する
2枚板配列のうちの一方の板が、試料負荷端に沿って斜
めに曲がった一連のくぼみ(trough)を含み、各くぼみは
両板間のすき間の方に向かって開いている。くぼみの間
隔は、ゲルに試料ウエルを形成せしめるのに用いるコー
ム形差し込み具の歯の間隔と一致し、そして試料ウエル
の容量を増加させるために試料ウエルを広くするのに役
立つ。好ましい態様においては、コーム形差し込み具の
歯は、くぼみの開口部を覆うようにくぼみよりも長く且
つ幅が広く、そして更に好ましい態様においては、差し
込み具を決まった場所に置いた時に突起がくぼみの中に
及ぶように、各々の歯から突起が伸びている。それらの
突起は、差し込み具を適当な高さに支持するため、また
は各くぼみの内部空間を満たし、ゲルが注入成形されて
いる間、くぼみの開口空間にゲルがないようにするた
め、またはその両方のために働くことができる。一度ゲ
ルが鋳造されそして差し込み具が除去されれば、くぼみ
は系が収容することができる試料の大きさを増加させ、
且つゲル自体に対する損傷を危ぶむことなくウエル中に
試料を入れることが作業者にとってかなり容易になるだ
ろう。
【0006】本発明の第二の観点においては、スラブゲ
ル囲いは、緩衝液を経てゲルの暴露下端と電気的に接触
させて電極を置くようにして、緩衝液槽中に配置され
る。槽は、1つの平壁が熱電冷却装置によって外側から
冷却され、一方その壁の内面がゲル囲いの一方の板と接
触するように構成される。ゲル囲いの下端は槽の床の上
方に持ち上げられており、冷却壁の一部分をゲル囲いの
下方に残す。冷却壁のこの暴露部分の反対は、電極の所
で発生した気泡がゲル囲いの下から反対壁に沿って上昇
する冷却緩衝液を引き寄せ、それによって冷却効果をゲ
ルの両側に均一に広げるように配置された電極がある。
それらの特徴の幾つかは本発明のこの観点の好ましい態
様として下記に記載される。更に好ましい態様は、緩衝
液槽の冷却壁の外側に固定され、前記壁と冷却装置との
間に置かれた熱分散性材料のスラブ、ゲル囲いの2つの
平壁について異なる材料の使用、並びに2材料間の熱伝
導度の差の原因となる槽の壁とゲル囲いの壁の表面積の
選択といった特徴を包含する。
【0007】本発明のそれらの2つの観点は、別々の構
造において個々に包含されてもよく、または単一の構造
に統合されてもよい。それら2観点の各々の更なる特
徴、利点および態様は、下記の記載から明らかであろ
う。
【0008】
【作用】図1に示されたゲル囲い11は、本発明の第一観
点の一例として与えられる。この囲いは、2つの平面お
よび2つの垂直縁に沿ってゲルを取り囲み、上端と下端
は暴露されたままである第一および第二部材12,13 から
構成される。この略図中の第一部材12は平板であり、一
方第二部材13は成形構造であってその一部分がもう1つ
の平板12に面している平板14である。それらの部材を構
成する材料は、電気の不導体であるべきであるが、その
他は重要ではなく、主要な考慮事項はゲル形成および電
気泳動過程の肉眼観察を可能にするための透明性、並び
にそれらの部材の壁を通した冷却を可能にするための熱
伝導性である。製造を容易にするため、第一部材12は好
ましくは剛性のガラス板であり、第二部材13は好ましく
は透明プラスチック、例えばアクリル板である。
【0009】この略図中の第二部材13は、平坦部分14の
各側に平坦ストリップ15,16 を含む。それらのストリッ
プは2つの部材間の接触領域として働く。2つのストリ
ップは、平板部分14の平面の前方にある面を限定し、そ
れによってゲルの厚さと等しい幅の細い肩17を提供する
ことにより更なる目的に役立つ。板の間隔は、他の常用
手段、例えば2部材間に適当な厚さのスペーサーを置く
ことにより作ってもよい。図面に示される構造は、第二
部材13中にスペーサーが組み込まれており、そして該部
材の整列を容易にし且つ少ない数の全集成体の構成部品
を要求するという利点を提供する。すき間は、ゲルのキ
ャビティおよび電気泳動中にゲルにより占有される空間
の両方として働く空間を限定する。この空間は、平板
(ゲル囲いの第一部材12)、ゲル囲いの第二部材13の平
板部分14、および各側の平坦ストリップに沿った2つの
細い肩17により縁取られる。
【0010】2つの部材12,13 は、常用手段、例えば一
般に様々なタイプのクランプまたはクリップのいずれか
によって、横縁に沿って一緒に固定される。図1に示さ
れるクリップは、接触している横縁上をスライドするU
字型のプラスチッククリップ18,19 であり、そして電気
泳動中2部材を一緒に維持するのに十分な強度とレジリ
エンスを有する。ゲルの作製中、追加の型締力をそれら
のクリップに適用することができる。
【0011】コーム形差し込み具24は、第一の平板12と
第二部材13の平板部分14との間のすき間にぴったり合
う。この差し込み具の歯25は、ゲルにウエルを形成させ
るために下方に伸びている。その他の図面が証明するよ
うに、差し込み具24はゲル空間の上端に沿って載せら
れ、歯25のみがゲル空間中に及ぶように設計されるだろ
う。ゲル囲いの第二部材13は、平板部分14の最上部に沿
って壁で囲まれた延長部26を含む。この延長部26は、ゲ
ルの上端と接触する帯電緩衝液を提供するための上部緩
衝液室を形成する。この延長部は床27と3つの壁28,29,
30を含む。ゲル囲いのもう一方の部材を形成する平板12
が第四の壁面として働く。
【0012】ゲル空間の近くを走る床27の縁は、コーム
形差し込み具24の歯25によってウエルが形成されるであ
ろう位置に配列された一連のくぼみ31を含む。各くぼみ
は平板部分の上端を横切り、そして平板部分14に沿って
開口部32を形成する。それらの開口部32は、差し込み具
の歯25によってゲルに形成される種々の試料ウエルの各
々の方に開いているだろう。このくぼみは斜めに曲がっ
ており、平板部分14と鈍角を形成する。好ましい態様で
は、この角度は約 110°〜約 160°であろう。一旦ゲル
が作製されそして差し込み具24が除去されれば、ゲルに
形成されたウエルだけでなく各くぼみの内部をも満たす
のに十分な容量で試料を添加することができ、従ってく
ぼみは各ウエルの容量を増加させることができる。
【0013】図2はコーム形差し込み具24の背面図を提
供する。歯25の各々が突起33を有する。それらの突起
は、差し込み具を決まった位置に置いた時、くぼみ31の
中に入る。この突起はくぼみと同様に斜めに曲がった下
面を有し、そして通常は形状においてくぼみを補足し、
ゲルが注入成形されそして差し込み具が除去された後に
各くぼみにすき間を残す。各すき間はウエル容積の部分
を構成する。歯がくぼみよりも広く且つ深いのと同様
に、各歯25は各突起33よりも幅が広く且つ長いことに注
目されるだろう。差し込み具上には、ゲルが作製された
後の作業者による差し込み具の取り外しを容易にするつ
まみ34も含まれる。
【0014】図3は、下部緩衝液の受容器および下部電
極のハウジングとして、並びにゲル囲い全体を収容する
ために設計された緩衝液槽40の正面図である。蓋41は緩
衝液槽の上方に示されており、この蓋を決まった場所に
置いた時に上部電極として働くであろう電極を含む。緩
衝液槽のキャビティ42は、槽からの緩衝液の除去を容易
にするV字形の床43およびV字の頂点に向かう排水口44
を有する。次の図面に示されるように、この態様におけ
る緩衝液槽40は、2つの半部品において構成され、ボル
トとナットまたは他の常用手段により下側と両側に沿っ
て液密方式において一緒にシールされる。9つのボルト
通路45が図3に示されている。
【0015】次に図4に移って、緩衝液槽は、ゲル囲い
11と共に上方からの拡大図において示されている。この
略図においては、緩衝液槽の2つの半部品46,47 が認め
られ、この2つの半部品を一緒に固定するボルト48があ
る。垂直破断図は図5に示される。
【0016】図4と図5を一緒にみると、緩衝液槽の前
半部品47の内側に、両端に段付の断面49を有することが
認められる。緩衝液槽の後半部品46は、対応する押し込
み50を含む。2つの半部品が一緒に固定されると、段付
断面と押し込みは一緒になって槽キャビティの各縁に沿
った溝を形成し、各溝はゲル囲い11の2つの側縁の1つ
を収容するような大きさを有し、且つ端クリップ18,19
を収容するほど十分に大きいであろう。この溝は、ゲル
囲いの成形板の平板部分14の外側表面が緩衝液槽の後半
部品46の平壁51と接触した状態で、ゲル囲いを槽の中の
所望の位置に保持するようにして配置される。この平壁
51は、平壁51の全表面に渡り冷却効果を広げる高い熱伝
導性材料53のスラブを経て、熱電冷却装置52により冷却
される。熱電冷却装置52は、様々な市販のユニットのい
ずれであってもよい。一例は、0.025 インチ(0.0635cm)
の厚さのプラスチック壁51および15W の定電力電気泳動
に特に有用であるそのような装置であり、カタログ番号
CP 1.4-127-045L の熱電加熱ポンプモジュール(Thermoe
lectric Heat Pump Modules)と一致する Melcor Mater
ials Electronic Products Corporation, Trenton, New
Jersey, U.S.A. により供給される2つの冷却要素の使
用である。
【0017】熱伝導性材料53は、通常、20℃において少
なくとも約120 W/mK、好ましくは20℃において少なくと
も約229 W/mKの熱伝導度を有する材料であろう。例えば
この材料は、金属スラブ、例えば銅またはアルミニウム
(グレード2024または1100)であることができる。冷却
装置を完全なものにするため、冷却用放熱器54とファン
60が図示されている。ファンの左側の矢印は、ファンに
より生じる空気流の方向を示している。
【0018】緩衝液槽の前半部分47の段付断片49は、ゲ
ル囲いの前方の平板12と緩衝液槽の前方壁56との間にす
き間55を残す。操作中、このすき間は下部緩衝液により
占有され、ゲル囲い11中のゲルの高さを越えるだろう。
電極57はこのすき間の底近くで且つ板12の表面近くに置
かれ、陽極として働く。電気泳動中に陽極の側で発生す
る気泡は、このすき間を垂直に上昇し、緩衝液を攪拌す
るだろう。このすき間55の均一幅は約0.1 cmより小さく
ないことが好ましい。0.3 〜0.6 cmの実際のすき間が好
結果で使用された。
【0019】緩衝液槽中のゲル囲い11の高さは一対の支
持リブ58によって確立され、そのリブ上に上部緩衝液室
26の下面が乗せられるだろう。それらのリブ58は、ゲル
囲い11が冷却表面51の全長より下には伸びないが、その
代わりとして下部緩衝液に暴露されるゲル囲い11の下端
の下方に冷却表面の底に沿ってストリップ61を残すであ
ろう高さのものである。このストリップ61を含む下部緩
衝液がそれにより直接冷却され、そして電極57のところ
で発生した気泡がこの冷却液体と電極の上方のすき間55
を占有する残余液体とを混合し、ゲル囲いの前板12全体
に冷却効果を広げるだろう。最大効果のために、ゲル囲
いの背板14と接触する冷却壁51の部分62の表面積と、暴
露されるストリップ61の表面積との比は、ゲル囲いの前
板12の熱伝導度と背板14の熱伝導度との比にほぼ等しい
であろう。背側の平板14は、通常前側の平板12よりも低
い熱伝導度のものであるため、冷却壁51の接触部分62の
表面積は通常暴露ストリップ61の表面積よりも大きいだ
ろう。
【0020】蓋41が陽極として上部電極59を含み、電気
泳動中は上部緩衝液で満たされるであろうゲル囲いの上
部緩衝液室中に伸びるようにして上部電極が配置される
ことにも気付くであろう。
【0021】上記の説明は例示の目的で提供される。本
発明の精神および範囲から逸脱することなしに、本明細
書中に開示された材料、形状、配置および構造において
多数の変更および置換を行い得ることは当業者にとって
明白であろう。
【図面の簡単な説明】
【図1】図1は、ゲルに試料ウエルを形成するためのコ
ーム形差し込み具を含む、本発明に係るゲル囲いの斜視
部分拡大図である。
【図2】図2は、反対側から見た、図1のコーム形差し
込み具の斜視図である。
【図3】図3は、図1のゲル囲いを収容および保持する
ために設計された、本発明に係る緩衝液槽の正面図であ
る。
【図4】図4は、図1のゲル囲いを含む、図3の緩衝液
槽の平面拡大図である。
【図5】図5は、図4の緩衝液槽およびゲル囲いの、線
5─5についての垂直破断図である。
【符号の説明】
11…ゲル囲い 12…前板 14…背板 24…コーム形差し込み具 31…くぼみ 33…突起 41…蓋 45…ボルト通路 54…冷却用放熱器 55…すき間 57…陽極 59…陰極 60…ファン
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (56)参考文献 特開 昭60−243552(JP,A) 特開 昭64−80850(JP,A) 特開 昭57−49852(JP,A) 実開 平1−75875(JP,U) 実開 昭62−34356(JP,U)

Claims (10)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項1】 垂直スラブゲル電気泳動用装置であっ
    て、角形スラブゲル空間を限定する向かい合った第一お
    よび第二の平壁を有し、その間が一端に沿って開いてお
    り、前記開放端が前記角形スラブゲル空間の幅を限定し
    ているスラブゲル囲い;前記スラブゲル囲いを入れるた
    めに合わせて作った緩衝液槽であって、向かい合った第
    三および第四の平壁並びにその間に床を含んで成り、前
    記第三の平壁が幅と高さにおいて前記角形スラブゲル空
    間と少なくとも同一の広がりを有する緩衝液槽;前記第
    一の平壁と第三の平壁が接触し、そして前記スラブゲル
    囲いの前記開放端と前記床との間に第一の間隙並びに前
    第二の平壁と第四の平壁との間に第二の間隙を有する
    状態で、前記緩衝液槽の内側に前記スラブゲル囲いを固
    定するための固定手段;前記スラブゲル囲いがそのよう
    に前記緩衝液槽中に固定された時、電極が前記第一の間
    隙中に存在するように置かれた前記緩衝液槽中の電極;
    および前記第三の平壁から熱を取るための冷却手段、を
    含んで成る装置。
  2. 【請求項2】 前記第三の平壁が高さにおいて前記角形
    ゲル空間を越えており、前記固定手段が前記第一の間隙
    に隣接した前記床に沿って前記第三の平壁のストリップ
    を提供し、そして前記第三の平壁と接触し且つ実質的に
    同一の広がりを有しそして20℃において少なくとも120
    W/mKの熱伝導度を有する固体材料のスラブを更に含んで
    成る、請求項1に記載の装置。
  3. 【請求項3】 前記緩衝液槽が前記第三と第四壁を接続
    する1対の向かい合った側壁を更に含んで成り、そして
    前記固定手段が前記スラブゲル囲いの向かい合った横縁
    を差し込むための前記側壁中の溝を含んで成る、請求項
    1に記載の装置。
  4. 【請求項4】 前記スラブゲル囲いが前記開放端と反対
    の上端に沿った上部緩衝液室、および前記上部緩衝液室
    中に電極を支持するための手段を含んで成る、請求項1
    に記載の装置。
  5. 【請求項5】 前記スラブゲル囲いの第一および第二の
    平壁が熱伝導度の異なる材料のものであり、前記第一の
    平壁の材料が前記第二の平壁の材料よりも低い熱伝導度
    のものである、請求項1に記載の装置。
  6. 【請求項6】 前記第三の平壁の表面積の一部分のみが
    前記第一の平壁と接触するように、前記第三の平壁が高
    さにおいて前記角形ゲル空間を越えており; 前記固定
    手段が前記第一の間隙に隣接した前記床に沿って前記第
    三の平壁のストリップを提供し;
    前記スラブゲル
    囲いの前記第一および第二の平壁が熱伝導度の異なる材
    料のものであり、前記第一の平壁の材料が前記第二の平
    壁の材料よりも低い熱伝導度のものであり;そして前記
    第一の平壁と接触する前記第三の平壁の部分の表面積
    と、前記第一の間隙に隣接した前記第三の平壁の前記ス
    トリップの表面積との比が、前記第二の平壁の材料の熱
    伝導度と前記第一の平壁の熱伝導度との比に等しい、請
    求項1に記載の装置。
  7. 【請求項7】 電気泳動において使用するスラブゲルを
    注入成形および保持するための装置であって、 (1)選択された幅および長さの第一の平板から成る第
    一の部材; (2)(i)前記第一の平板のものよりも小さい長さの
    第二の平板であって、前記第二の平板の幅に沿った一端
    が上端を限定している第二の平板、および(ii)前記第
    二の平板に関して鈍角において前記第二の平板の一側面
    に広がっており、前記上端と交差し、前記上端に沿って
    前記平板中の開口部を限定している一連のくぼみから成
    る第二の部材; (3)前記第一の平板の一部分が前記上端を越えて伸び
    ている状態で前記第一および第二の部材を一緒に固定
    し、それによって前記第一の平板と第二の平板との間に
    あって且つ前記上端に近接したスラブゲル空間を限定し
    ている固定手段;並びに (4)前記くぼみと間隔および数が等しく、そして少な
    くとも長さと幅が等しい歯を有し、前記第一および第二
    の部材が一緒に固定された時、前記歯が前記スラブゲル
    空間中に伸びるような状態で前記上端の上に載せるのに
    適合したコーム形差し込み具、を含んで成る装置。
  8. 【請求項8】 前記第二の部材が、前記第二の平板の方
    に横に伸びる前記上端に沿った突起を更に含んで成り、
    前記突起は、前記第一および第二の部材が一緒に固定さ
    れた時に前記上端を越えて伸びる前記第一の平板の前記
    部分と一緒に、前記上端に沿った緩衝液受容器を形成
    し、前記くぼみが前記突起において押込みを形成する
    請求項7に記載の装置。
  9. 【請求項9】 前記コーム形差し込み具が前記歯の上に
    突起を含み、前記突起前記くぼみと実質的に相補的な
    形状であり、そして前記コームが前記上端の上に載って
    いる時は前記くぼみの内側に属し且つその内部空間を実
    質的に満たすように前記歯の上に置かれている、請求項
    7に記載の装置。
  10. 【請求項10】 前記第二の部材が、前記第二の平板の
    対辺に沿って前記第二の部材の長さを延長する一対の平
    面を更に含んで成り、前記平面は、前記第二の平板に平
    行でありそして前記スラブゲルの所望の厚さに等しい選
    択された距離によって前記第二の平板から離れている平
    面を限定する、請求項7に記載の装置。
JP3107963A 1990-05-16 1991-05-14 改良された試料ウエルおよび冷却系を有するスラブ電気泳動装置 Expired - Fee Related JPH0757916B2 (ja)

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