HU191104B - Gel cell for performing gel-electrophoresis and an electrophoretic device using this - Google Patents
Gel cell for performing gel-electrophoresis and an electrophoretic device using this Download PDFInfo
- Publication number
- HU191104B HU191104B HU260684A HU260684A HU191104B HU 191104 B HU191104 B HU 191104B HU 260684 A HU260684 A HU 260684A HU 260684 A HU260684 A HU 260684A HU 191104 B HU191104 B HU 191104B
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- gel
- chamber
- priority
- cell
- walls
- Prior art date
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N27/00—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means
- G01N27/26—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means by investigating electrochemical variables; by using electrolysis or electrophoresis
- G01N27/416—Systems
- G01N27/447—Systems using electrophoresis
- G01N27/44704—Details; Accessories
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N27/00—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means
- G01N27/26—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means by investigating electrochemical variables; by using electrolysis or electrophoresis
- G01N27/416—Systems
- G01N27/447—Systems using electrophoresis
- G01N27/44704—Details; Accessories
- G01N27/44708—Cooling
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Electrochemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
Description
A találmány tárgya gélcella gélelektroforézis végzésére, amelynek átlátszó anyagú falakkal határolt és legalább egyik végén nyitott gélkamrája van. A találmány vonatkozik ezenkívül a gélcellát felhasználó új eleklrolorclizáló berendezésre is. A találmány szerinti gélcellával és berendezéssel függőleges gélelektrolorézis végezhető.FIELD OF THE INVENTION The present invention relates to a gel cell for gel electrophoresis having a gel chamber confined at least at one end to walls with transparent material. The invention also relates to a new electrolysis device using a gel cell. Vertical gel electrolysis can be performed with the gel cell and apparatus of the present invention.
Függőleges gélelektroforézis végzéséhez több feltételt kell biztosítani. Az első és sokszor legfontosabb feladat a géllcst, leggyakrabban géllcmcz elkészítése, amely a gélelektroforézis során a vizsgált mintát hordozó közegként szolgál, majd gondoskodni kell ennek tárolásáról, rögzítéséről, a géltest két szemközti szélének egymástól szigorúan elválasztott pufferoldatokhoz való csatlakoztatásáról, végül az elektroforézis befejeződése után a mintát tartalmazó géltesthez való hozzáférésről.A number of conditions must be met to perform vertical gel electrophoresis. The first and often most important task is the preparation of the gel, most often gel, which serves as the carrier of the sample during gel electrophoresis, then it has to be stored, fixed, and the two opposite edges of the gel body are electrically connected to each other. on access to a gel body containing a sample.
Az itt felsorolt követelményrendszer kielégítésére számos megoldás született. A legtöbb megoldás megegyezik abban, hogy a gél testet üvegfalakkal határolt gélkamrában képezik ki, a gél megkötése után a gélkamra alsó szélét (pl. tömítés eltávolításával) felnyitják, majd a lapos téglatest alakú gélcellát sajátos tömítések alkalmazásával felül és alul puíferoldathoz csatlakoztatják. A csatlakoztatás módja különböző lehet. Egy ismert megoldásnál az üvegből készült gélcella egyik lapja első pufferoidatol tartalmazó üvegtartály oldallapjához van tömítetten szorítva és a gélcella és a tartály felül egy mélyedésen át közlekedik, majd az egész így leírt rendszer egy tankba van helyezve, amiben második pufferoldat van és ez a gélcella alsó nyitott szélével kapcsolódik.Several solutions have been found to meet the requirements listed here. Most solutions consist of forming the gel body in a gel chamber enclosed by glass walls, after the gel has been set, the lower edge of the gel chamber (e.g. by removing the seal) is opened and the flat rectangular gel cell is attached to the buffer solution above and below. There are different ways to connect. In a known embodiment, one sheet of a glass gel cell is sealed to the side of a glass container containing a first buffer and passes through a recess at the top of the glass cell and the container, the entire system thus described being placed in a tank containing a second buffer solution. connected to the edge.
Ennél a szerkezeti kialakításnál a géícella és a puffertartály tömített egymáshoz kapcsolása munkaigényes, ugyanakkor a gélcella egyik falának kellő hűtése nem megoldható.In this embodiment, the sealing of the gel cell and the buffer vessel is labor-intensive, but sufficient cooling of one of the walls of the gel cell cannot be achieved.
A következő nehézség az elektroforézis befejeződése után kezdődik, mert a szerkezetet szét kell szedni, a gélcellából a géltestet ki kell szabadítani. A kiszabadításhoz az üvegből és több részből összeállított gélcellát szót kell szedni, miközben gondosan ügyelni kell a géltest épségére.The next difficulty begins after the completion of electrophoresis because the structure has to be disassembled and the gel body has to be released from the gel cell. To release, a gel cell made up of glass and multiple parts must be taken while taking care of the integrity of the gel body.
Az újra felhasználáshoz mosás, csírátlanítás és ismételt összeszerelés szükséges.Washing, germination and reassembly are required for reuse.
A legtöbb ismert megoldás az itt leírt elvek szerint működik, közöttük különbség csak a kivitelben, nem pedig a technológiai folyamatban található. A technika állásához jellegzetes példaként említhetjük a 2.640.892 Isz. NSZK szabadalmat, a svéd LKB cég LKB-2001 típusú berendezését, az 1.577.712 Isz. angol szabadalmat, továbbá a 4.224.134; 4.290.871 és a 4.292.161 Isz. USA szabadalmat.Most known solutions work according to the principles described here, with the difference being only in the design and not in the technological process. A typical example of the prior art can be found in U.S. Patent No. 2,640,892. German Patent LKB-2001, LKB-2001, U.S. Patent No. 1,577,712; English Patent No. 4,224,134; Nos. 4,290,871 and 4,292,161; US patent.
A találmány feladata olyan gélcella, és ezt felhasználó elektroforetizáló berendezés létrehozása, amely mentesít a gélelektroforézis végzéséhez használt szerelésigényes technológiától, továbbá amely a pufferoldatok csatlakozását és a géltesthez való hozzáférést egyszerűsíti, végül amely a technológiai folyamat minőségét is javítja.It is an object of the present invention to provide a gel cell and an electrophoresis device that utilizes it, which eliminates the assembly-intensive technology used to perform gel electrophoresis, simplifies the connection of buffer solutions and access to the gel body, and ultimately improves the quality of the process.
A kitűzött feladat megoldásához az a felismerés vezetett, hogy a gélelektroforézis a géikészítéstől a kész gcllest cellából való kiszedéséig egyetlen helyen, egy egyszer használatos eszközként kialakított gélcellában elvégezhető, és a pufferoldathoz való tömített csatlakoztatás feladata automatikusan megoldódik, ha ez a gélcella a gélkainrán kívül egy, a pufferoldatot tartalmazó tartályrésszel van egybeépítve.To accomplish this task, the realization has been made that gel electrophoresis, from gel preparation to extraction from the finished gcllest cell, can be accomplished in one place in a single-use gel cell and sealed to the buffer solution automatically if this gel cell is integrated with the container portion containing the buffer solution.
A gélcclla így két egymáshoz csatlakozó és összcg függő részből, azaz gélkamrából és tarlálvrészből áll, amely részek belső terei a gélkamra felső nyílásán keresztül közlekednek egymással. A gélcella átlátszó, hőre lágyuló műanyagból készíthető. Átlátszónak azt a tulajdonságot nevezzük, amely lehetővé teszi a belső folyamaink vizuális megfigyeléséi, azaz nem szükséges az üvegnél megszokott tökéletes átlátszóságot feltételezni.The gel cell thus consists of two interconnected and total cg-dependent portions, i.e., the gel chamber and the tarsal portion, the internal spaces of which pass through the upper opening of the gel chamber. The gel cell can be made of transparent thermoplastic. Transparency is the property that enables us to observe our internal processes visually, so that it is not necessary to assume the perfect transparency of glass.
A gélkamra előnyösen sík első és hátsó fallal és megerősített vastagságú oldalfallal rendelkezik, amely15 nek lapos téglatest alakú belső tere van. A tartályrész és a gélkamra szélessége előnyösen azonosra választható. Itt az oldalfalak legalább egy nagyságrenddel nagyobb távolságra vannak egymástól, mint az első és a hátsó falak.The gel chamber preferably has a flat front and rear wall and a reinforced thickness side wall having a flat rectangular interior. Preferably, the width of the container portion and the gel chamber is the same. Here, the side walls are at least one order of magnitude larger than the front and rear walls.
A gélkamra felnyitását elősegíti, ha alul az első és hátsó falak egymáshoz közelednek és záróélben találkoznak. Ennek levágásával az alsó nyílás egyszerűen kiképezhet ő.The opening of the gel chamber is facilitated when the front and rear walls at the bottom approach each other and meet at the closing edge. By cutting off this, the lower opening can simply be trained.
Egy tartályrészhez akár több gélkamra is csatlakoz25 tatható.Up to several gel chambers can be connected to one container part.
A géltest párhuzamos sík falakkal határolt kiképzését a gélkamra belső falának alakja határozza meg. A sík és párhuzamos alak biztosítható megfelelő merevítő bordák alkalmazásával, de a falvastagság növelése helyett annak csökkentése is megoldáshoz vezet, amennyiben az elülső és hátsó falhoz egy-egy üveglapot szorítunk, amelyek a rugalmas faiak alakját meghatározzák.The formation of the gel body bounded by parallel flat walls is determined by the shape of the inner wall of the gel chamber. Flat and parallel shapes can be achieved by using appropriate stiffening ribs, but instead of increasing the wall thickness, a solution is provided by clamping a sheet of glass on the front and rear walls defining the shape of the resilient wall.
A találmány szerinti gélcellát felhasználó elektro3® foretizáló berendezésnek átlátszó falú tankja van, amelynek belső terében legalább egy gélcella helyezkedik el, amelynek gélkamrája függőleges helyzetben van, a gélkamra körül hűtőfolyadék keringetésére cső40 kígyó van elrendezve, amelynek magassága előnyösen a gélkamra magasságáig ér, a gélcella tartályrészében első pufferoldat, a tankban a gélcellát kívülről körülvevő második pufferoldat van, ezek elektródokon keresztül elektroforetizáló áramkörhöz csatlakoztathatók.The electro3® foretization device utilizing the gel cell of the present invention has a transparent walled tank having at least one gel cell having an upright gel chamber, a tube serpent arranged around the gel chamber, preferably having a height up to the height of the gel chamber. a first buffer solution, a second buffer solution surrounding the gel cell in the tank, these may be connected to an electrophoretic circuit via electrodes.
A pufferoldatokkal való takarékosság szempontjából célszerű, ha a tankban a második pufferoldat számára az első' pufferoldatok össztérfogatával azonos vagy közel azonos tér van kiképezve. Az „azonos” βθ kifejezést nem matematikai értelemben veti pontossággal kell venni, mintegy —10 % — +50 %-os eltérés még a működés szempontjából azonosnak tekinthető,In order to save on buffer solutions, it is expedient to have in the tank a space equal to or nearly equal to the total volume of the first buffer solutions for the second buffer solution. The expression "identical" βθ is to be taken with non-mathematical precision, a difference of about -10% to + 50% is still considered to be functionally identical,
A géltestre ható hidrosztatikai nyomáskülönbség megszűnik, ha üzemi állapotban mindkét pufferoldat szintje azonos.The difference in hydrostatic pressure acting on the gel body is eliminated when both buffer solutions are at the same level during operation.
A találmány szerinti megoldást a továbbiakban kiviteli példák kapcsán, a rajz alapján ismertetjük részletesebben. A rajzon az;The present invention will now be described in more detail with reference to the following exemplary embodiments. The drawing shows;
1. ábra a találmány szerinti gélcella első kiviteli alakjának távlati képe, aFigure 1 is a perspective view of a first embodiment of a gel cell according to the invention, a
2. ábra a találmány szerinti gélcella második kiviteli alakjának távlati képe, aFigure 2 is a perspective view of a second embodiment of a gel cell according to the invention, a
3. ábra a találmány szerinti gélcclla harmadik kiviteli alakjának távlati képe és a θ5 4. ábra az 1. ábrán vázolt gélcellát felhasználóFigure 3 is a perspective view of Figure 5 and θ 4 gel cell according to the third embodiment of the invention, users gel cell shown in Fig 1
191 104 elektroforetizáló berendezés távlati képe részben kitöréses ábrázolásban.191 104 is a perspective view of an electrophoresis device, partially in eruption.
Az 1·. ábrán a találmány szerint kialakított 10 gélcella első kiviteli alakjának távlati képe látható. A 10 gélcella hőre lágyuló műanyagból, például polivinil-kloridból, polikarbonátból, polisztirolból, metakrilátból vagy hasonló műanyagból egy darabban készül és két fő szerkezeti részre, úgymint 12 gélkamrára és 20 tartály részre osztható. Ezek a részek közvetlenül egymáshoz csatlakoznak és egymás folytatását képezik.The 1 ·. FIG. 4A is a perspective view of a first embodiment of a gel cell 10 according to the invention. The gel cell 10 is made of a thermoplastic material such as polyvinyl chloride, polycarbonate, polystyrene, methacrylate, or the like and is divided into two main structural parts, such as 12 gel cells and 20 container parts. These parts are directly connected to each other and form a continuation of each other.
A 12 gélkamra lapos hasáb alakú, amelyet két keskeny 13 oldalfal és ezekre merőleges elülső és hátsó 14 fal határol. A falak lapos téglatest alakú belső teret határoznak meg, amely alul zárt kiképzésű. A belső téglatest alsó szélén túl a 14 falak egy keskeny 18 szélső zónában íveken egymáshoz közelednek, majd 19 záróéi mentén egyesülnek.The gel chamber 12 is a flat column shaped by two narrow side walls 13 and a perpendicular front and rear wall 14. The walls define a flat rectangular interior, which is below closed. Beyond the lower edge of the inner rectangle, the walls 14 in a narrow peripheral zone 18 converge on one another and then join along their closing edges 19.
A 20 tartályrész a 12 gélkamra fölött, annak függőleges középvonalára szimmetrikusan helyezkedik el. A 20 tartályrésznek a 12 gélkamra belső terével azonos hosszúságú, de annál lényegesen szélesebb téglatest alakú belső tere van, amely alul folyamatosan szűkülve a 12 gélkamra belső teréhez csatlakozik. A két tér keskeny téglalap alakú 15 nyíláson keresztül (1. ábra szaggatott vonal) egymással közlekedik. A 20 tarfáiyrész függőleges falait leiül körbefntó vízszintes 27 perem határolja, amely a 10 gélcella rögzítését segíti és a szerkezetet merevíti. A 20 tartályrész 23, 24 oldalfalai a 10 gélcella 13 oldalfalának meghosszabbítását képezik és rajtuk kétoldalt középen egy-egy 25, ill. 26 bemélyedés található. A 25,26 bemélyedések a 20 tartályrész belső tere felé nyitottak és feladatuk a 20 tartályrészt működés közben kitöltő pufferoldatot érintkeztető elektród mechanikai rögzítése. A 20 tartályrész és a 12 gélkamra között kialakított ívelt hátramenet előnyösen a rajzon vázolt módon képezhető ki, de egyes felhasználásoknál előnyös lehet, ha a 15 nyílás fölött közvetlenül egy öbkisödés, majd ezt követő meredekebb falszakasz képezi a ferde átmenetet.The container portion 20 is located symmetrically above the gel chamber 12 on its vertical center line. The container portion 20 has a rectangular interior space of the same length but substantially wider than the interior of the gel chamber 12, which is continuously tapered to engage the interior of the gel chamber 12. The two spaces communicate with each other through narrow rectangular openings 15 (dotted line in Figure 1). The vertical walls of the wrapper portion 20 are flanked by a horizontal flange 27 which defines the gel cell 10 and reinforces the structure. The sidewalls 23, 24 of the container portion 20 form an extension of the sidewall 13 of the gel cell 10 and each has a 25 and a 25 in the middle, respectively. There are 26 recesses. The recesses 25.26 are open toward the interior of the container portion 20 and are intended to mechanically secure the electrode contacting the buffer solution during operation with the buffer solution. Advantageously, the curved reverse between the container portion 20 and the gel chamber 12 may be formed as outlined in the drawing, but in some applications it may be advantageous to have a cavity directly above the opening 15 followed by a steeper wall section.
A 10 gélcellát átlátszó vagy legalábbis áttetsző műanyagból kell készíteni, mert a gélelektroforézis ezáltal válik követhetővé és megfigyelhetővé. A szerkezeti kialakítás szempontjából annak van nagy jelentősége, hogy a 12 gélkamra felső terének lapTelületei egymással párhuzamosak legyenek. A párhuzamosság többféle módon biztosítható. Az egyik előnyös megoldás az elülső és hátsó 14 falak külső bordázattal való merevítése. A 12 gélkamra 13 oldallapjainál az anyagvastagság lényegesen nagyobb a 14 falak vastagságánál, így a 13 oldalfalakig kinyúló bordák kellő megtámasztása megoldható.The gel cell 10 should be made of transparent or at least translucent plastic, as this will allow the gel electrophoresis to be tracked and observed. It is of great importance for the construction that the top surfaces of the upper space of the gel chamber 12 are parallel to each other. There are several ways to ensure parallelism. One advantageous solution is to reinforce the front and rear walls 14 with an outer rib. The material thicknesses of the side panels 13 of the gel chamber 12 are substantially greater than the thickness of the walls 14, so that the ribs extending to the side walls 13 can be adequately supported.
A 2. ábrán a 12 gélkamra falának merevítésére egy másik példát vázoltunk. Az itt látható 10 gélcella kialakítást tekintve lényegében azonos az 1. ábrán vázolttal, a különbséget csak az képezi, hogy a 12 gélkamra falának vastagabb anyagból, esetleg merevítéssel ellátott kiképzése helyett mindkét 14 fal kisebb vastagsággal készül, amely a falak rugalmas elmozdulását megengedi. Az oldalfalak vastagsága ebben az esetben is lényegesen nagyobb a 14 falakénál. A merevítést külső 16, 17 üveglapok biztosítják, amelyek a 12 gélkamra külsejéhez 21 és 22 szorítok és 28 csavarok segítségévéi (amelyek műanyagból készülnek) könnyen hozzákapcsolhatók. A 12 gélkamra belső terét a gélkészítés során gélesedő eleggyel töltjük föl, és az elegy hidrosztatikus nyomásának hatására a rugalmas 14 falak a 16, 17 üveglapokhoz simulnak és annak sík alakját veszik fel. A gélképződés befejeződése után a sík alakzatot a géltest megtartja. A 16 és 17 üveglapok helyett műanyag lemezek is használhatók.Fig. 2 shows another example of reinforcing the wall of the gel chamber 12. The gel cell 10 shown here is essentially the same as in Figure 1, except that instead of providing a thicker material for the gel chamber wall 12, each wall 14 may be made with a smaller thickness, which allows for elastic displacement of the walls. Again, the thickness of the side walls is significantly greater than that of the walls 14. The stiffening is provided by external glass sheets 16, 17 which are easily attached to the outside of the gel chamber 12 by means of clips 21 and 22 and screws 28 (made of plastic). The interior of the gel chamber 12 is filled with a gelling mixture during gel preparation and, under the hydrostatic pressure of the mixture, the elastic walls 14 are flush with the glass sheets 16, 17 and assume a flat shape. After the gel formation is complete, the flat shape is retained by the gel body. Plastic sheets may be used instead of the glass sheets 16 and 17.
A 12 gclkanira mérete a felhasználástól függően különböző lehet. Fehérjék gélelektroforéziséhez előnyösen a 2X150X150 mm belméret, míg nukleinsavak, polipeptidek és polinukleotidok esetében 1- 2X X300X600 inni méret tűnik alkalmasnak. A 2. ábrán vázolt megoldás különösen nagyobb méretű gélkamrák használata esetében előnyös, mert nagy méretek mellett a falpárhuzamosság biztosítása komoly műszaki nehézséget jelenthet.The size of the 12 gclkanira may vary depending on the application. For gel electrophoresis of proteins, a 2X150X150mm internal diameter is preferred, whereas for nucleic acids, polypeptides and polynucleotides, a 1x2XX300X600 drinking size seems appropriate. The solution illustrated in Figure 2 is particularly advantageous when larger gel chambers are used, because at large dimensions, securing wall parallelism can be a major technical difficulty.
Most a 3. ábrára hivatkozunk, amelyen a találmány szerinti gélcella egy további kiviteli alakja látható. Az itt vázolt 30 gélcella 20 tartályrészéhez két 12 és 11 gélkamra csatlakozik, így vele egyidejűleg két minta gél-elektroforézise végezhető. A kettős gélkamrával ellátott gélcella felépítése minden egyéb szempontból azonos az 1. ábrán vázolttal, a 11 és 12 gélkamrák kiképezhetek merevített fallal, de a külső üvcglapos nicrcvílés a kettős kivitelnél is használható.Referring now to Figure 3, a further embodiment of a gel cell according to the invention is shown. Two gel chambers 12 and 11 are connected to the reservoir portion 20 of the gel cell 30 outlined herein, so that two samples can be gel electrophoresed simultaneously. In all other respects, the structure of the gel cell with the double gel chamber is the same as that outlined in Figure 1, the gel chambers 11 and 12 can be provided with a stiffened wall, but the exterior glass sheet nickel plating can also be used in the dual design.
A találmány szerint kialakított gélcella felhasználása során először a géltestet kell kiképezni, és ebből a célból a függőleges helyzetben tartott gélkamrákba a 20 tartályrészen keresztül a gélesedő elegyet töltjük, és adott esetben a 15 nyíláson keresztül a gélkamra belső terébe mintatér kialakító fésűt helyezünk. A gélkamra alsó végét a gélelektroforézis megkezdése előtt fel kell nyitni. Ez a művelet a 14 falaknak a 18 szélső zónában történő felvágásával végezhető el. A 18 szélső zónában a laptávolság nagyon kicsi, a felvágás ollóval vagy egyéb vágóeszközzel megoldható. A vágás elősegítése céljából a 1 8 szélső zónában a falanyagban a 19 zárószéllcl párhuzamos hornyot is kialakíthatunk. A 19 záróéi eltávolítása után a géltesthez alulról is hozzáférhetünk.To use the gel cell of the present invention, the gel body must first be formed by inserting the gelling mixture into the upright gel chambers through the container portion 20 and optionally inserting a comb through the opening 15 into the interior of the gel chamber. The lower end of the gel chamber should be opened prior to gel electrophoresis. This operation can be performed by cutting the walls 14 in the extreme zone 18. In the extreme zone 18, the blade spacing is very small and can be cut using scissors or other cutting tools. In order to facilitate cutting, a parallel groove 19 in the wall material may also be formed in the wall material with the closing edge 19. After removing the closing edges 19, the gel body can be accessed from below.
Ezt követően a mintatérbe mintát helyezünk, és a gél-elektroforézist megkezdhetjük. A gél-elektroforézis végzése legelőnyösebben a találmány szerint kialakított és a 4. ábrán vázolt gél-eiektroforetizáló berendezésben végezhető.Subsequently, a sample is placed in the sample compartment and gel electrophoresis can be initiated. Most preferably, gel electrophoresis is carried out in a gel electrophoresis apparatus constructed in accordance with the invention and outlined in Figure 4.
Most a 4. ábrára hivatkozunk, amelyen átlátszó falú, téglatest formájú 31 tank belsejében egymás mellett két 10a és 10b gélcella helyezkedik el. A 31 tankot átlátszó 32 fedél zárja le, amelynek belsejében a rajzon csak vázlatosan jelölt 33 mikrokapcsolók helyezkednek cl, és ezek-a 32 fedél üzemi (zári) helyzetében az elektroforetizáló áramkört zárják.Referring now to Figure 4, two gel cells 10a and 10b are arranged side by side inside a transparent walled, rectangular tank 31. The tank 31 is closed by a transparent lid 32 having only microswitches 33 schematically indicated in the drawing, which close the electrophoretic circuit in the operating (closed) position of the lid 32.
A 10a és 10b gélcellák 27 peremeik révén a 31 tank felső szélére támaszkodnak. A 31 tank belsejében a gélkamrák körül 34 csőkígyó van elrendezve, amelynek helyzetét több keskeny 35 tartólap biztosítja, és ennek furatain a csőkígyó egyes menetei átvezetnek. A 34 csőkígyó végei a 31 tankból kivezetnek és hűtőfolyadék keringető berendezéshez csatlakoztathatók. A 34 csőkígyó magassága lényegében azonos a gélcellák gélkamráinak magasságával.The gel cells 10a and 10b, by their edges 27, rest on the upper edge of the tank 31. Inside the tank 31, a tube snake 34 is arranged around the gel chambers, the position of which is secured by a plurality of narrow support plates 35, through which holes are led through each thread of the tube snake. The ends of the snake 34 are discharged from the tank 31 and can be connected to a coolant circulation device. The height of the tube snake 34 is substantially the same as the height of the gel cells of the gel cells.
A 31 tank alján a gélkamrák közötti szakaszon 3At the bottom of the tank 31 there is 3 between the gel chambers
191 104 elektródtartó van, amelybe a gélelektroforézis végzéséhez szükséges közös elektród elhelyezhető.There is an electrode holder 191 104 in which a common electrode for carrying out gel electrophoresis can be placed.
A találmány szerinti gélelektroforetizáló berendezéssel a gélelektroforézis az alábbiak szerint végezhető.With the gel electrophoresis apparatus of the present invention, gel electrophoresis can be performed as follows.
A gélccilákclőkészílésea már leírt módon történik. A kialakított fészkekbe mintákat helyezünk, majd a gélcellákat a 4. ábrán vázolt helyzetben a 31 tankba helyezzük. A 31 tank belsejét és a gélcellák 20 tartályrészeit alsó, illclve felső pufferoldat tál feltöltjük. A méretek alkalmas megválasztása mellett a 20 tartályrészekbe helyezett felső pufferoldatok együttes mennyisége nagyjából megegyezik az alsó pufferoldatéval, és az alsó pufferoldat szintje a felső pufferoldat szintjéig ér. Ebben az esetben a nyitott gélkamrában levő géltestekre hidrosztatikus nyomáskülönbség nem hat. A felső pufferoldatokba felső elektródokat, a 36 elektródtól tóra alsó elektródot helyezünk és a 32 fedél zárásával az clcktroforelÍzáló áramköri áram alá helyezzük. A 34 csőkígyón keresztül hűtőfolyadékot áramoltatunk keresztül.Preparation of the gels is done as described above. Samples are placed in the formed nests and the gel cells are placed in the tank 31 in the position shown in Figure 4. The interior of the tank 31 and the reservoir portions 20 of the gel cells are filled with lower and / or upper buffer solutions. With a suitable choice of dimensions, the total amount of the upper buffer solutions placed in the container portions 20 is approximately equal to the lower buffer solution and the lower buffer solution reaches the level of the upper buffer solution. In this case, the gel bodies in the open gel chamber are not affected by a hydrostatic pressure difference. Upper electrodes are placed in the upper buffer solutions, the lower one from the electrode 36, and the lid 32 is placed under the circuit current of the cloptrophore. Coolant is passed through the coil 34.
A gélelektroforézis a teljesen átlátszó gélelektroforetizáló berendezésen keresztül vizuálisan nyomon követhető. A választott hűtési mód és feltöltés mellett a gélkamrák mindkét fala és mindkét széle egyenletes hűtést kap, sőt a felső pufferben keletkezett hő elvonása is megtörténik a vékony kamrafalon keresztül. A hűtőhatás mágneses keverőbaba használata esetén tovább javítható.Gel electrophoresis can be visually tracked through a fully transparent gel electrophoresis device. In addition to the selected cooling mode and filling, both walls and edges of the gel chambers are cooled evenly and even the heat generated in the upper buffer is removed through the thin chamber wall. The cooling effect can be further improved by using a magnetic stirrer.
Az egyenletes hűtés miatt az ismert gélelektroforeiizáló berendezésekben gyakran lapaszinlt széli effektusok vagy mosolygó effektusok nem lépnek fel, az elektroforézis egyenletes marad.Due to the uniform cooling, the known gel electrophoresis equipment often does not produce flattened edge effects or smiling effects, and the electrophoresis remains uniform.
A gélelektroforézis befejeződése után a 10a és 10b gélcellákat a 31 tankból kivesszük, a felső pufferoldat és a felső elektród eltávolítása után a 12 gélkamrák belső terét felnyitjuk. A felnyitás célszerűen a 13 oldalfalak közelében végzett vágással megoldható. A két szélén felvágott 12 géikamrából a géltest könynyen eltávolítható, ehhez csak a 14 lapok egyikét (vagy mindkettőt) fel kell hajlítani és a keletkezett nyíláson a géltest a sérülés veszélye nélkül kivehető.After completion of the gel electrophoresis, the gel cells 10a and 10b are removed from the tank 31, and the interior of the gel chambers 12 is opened after removal of the upper buffer solution and the upper electrode. The opening can conveniently be accomplished by cutting near the side walls 13. The gel chamber can be easily removed from the gel chamber 12 at the two edges by simply bending one or both sheets 14 and removing the gel body through the resulting opening without risk of injury.
A találmány szerinti gélcellák egyszer használatos eszközök, és ez képezi egyik legnagyobb előnyöket is. Használatuk a géikészítést lehetővé teszi, bennük a minták részére a fészkek kiképezhetek, a gélkamta alsó szélének felvágásával a gélcella készen áll az elektroforézis végzésére, előtte azonban a géltest tárolására alkalmas. A gélceíla egyúttal helyet ad a felső pufferoldat számára, cs a felső pufferoldat és a géltest felső széle között a kapcsolat automatikusan létrejön, a korábban ismert és zavaró tömítési problémák nem lépnek fel.The gel cells of the present invention are disposable devices and this is one of the major advantages. Their use allows for gel preparation, allows them to form nests for the samples, by cutting the bottom edge of the gel chamber, the gel cell is ready for electrophoresis, but prior to storage of the gel body. At the same time, the gel cell provides space for the upper buffer solution, the connection between the upper buffer solution and the upper edge of the gel body is established automatically, previously known and annoying sealing problems do not occur.
Előnyös ezenkívül a gélelektroforézis során a kétoldali hozzáférés lehetősége, ami a hűtés egyenletességét garantálja, ugyanakkor a hidrosztatikai nyomáskülönbség megszüntetése a géltest kicsúszásának veszélyét kizárja.In addition, the possibility of two-sided access during gel electrophoresis, which guarantees uniform cooling, is advantageous, while eliminating the difference in hydrostatic pressure eliminates the risk of slipping of the gel body.
Az olcsó műanyagból készült gélcellában a minta a gélelektroforézis befejeződése után is higiénikusan tárolható, szállítható és eközben törés vagy szennyeződés veszélye nem lép fel.In a cheap plastic gel cell, the sample can be stored, transported hygienically after completion of gel electrophoresis, and without risk of breakage or contamination.
A találmány szerinti megoldás egyszer használatos kivitele révén az eddig ismert eljárásokhoz képest lényeges munkamegtakarítást is jelent.The disposable embodiment of the present invention also results in significant work savings compared to prior art processes.
Az itt leírt előnyök nemcsak a bemutatott kiviteli példák esetében jelentkeznek, azoktól a találmány alapgondolatától való eltávolodás nélkül számos területen eltérhetünk. így például a 31 tankba kettős gélkamrával ellátott gélceilákat is helyezhetünk, vagy a 31 tank belső terének osztásával több különböző méretíí és számú gcicella egyidejű vagy alternatív clcktrolörézisét biztosíthatjuk.The advantages described herein are not limited to the embodiments shown, but may be departed from in many respects without departing from the spirit of the invention. Thus, for example, gel cells with a double gel chamber may be placed in the tank 31, or by dividing the interior space of the tank 31, simultaneous or alternative clctrolysis of several gcicells of different sizes and numbers may be provided.
Claims (12)
Priority Applications (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| HU260684A HU191104B (en) | 1984-07-04 | 1984-07-04 | Gel cell for performing gel-electrophoresis and an electrophoretic device using this |
| PCT/HU1985/000019 WO1986000708A1 (en) | 1984-07-04 | 1985-03-27 | Gel cell and apparatus for gel electrophoresis |
| EP19850901542 EP0216759A1 (en) | 1984-07-04 | 1985-03-27 | Gel cell and apparatus for gel electrophoresis |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| HU260684A HU191104B (en) | 1984-07-04 | 1984-07-04 | Gel cell for performing gel-electrophoresis and an electrophoretic device using this |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| HUT37894A HUT37894A (en) | 1986-03-28 |
| HU191104B true HU191104B (en) | 1987-01-28 |
Family
ID=10960237
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| HU260684A HU191104B (en) | 1984-07-04 | 1984-07-04 | Gel cell for performing gel-electrophoresis and an electrophoretic device using this |
Country Status (3)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0216759A1 (en) |
| HU (1) | HU191104B (en) |
| WO (1) | WO1986000708A1 (en) |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS62127662A (en) * | 1985-11-29 | 1987-06-09 | Dai Ichi Pure Chem Co Ltd | Vertical slab type electrophorectic apparatus |
| US4830725A (en) * | 1987-08-04 | 1989-05-16 | Life Technologies, Inc. | Electrophoresis apparatus |
| US5073246A (en) * | 1990-05-16 | 1991-12-17 | Bio-Rad Laboratories, Inc. | Slab electrophoresis system with improved sample wells and cooling mechanism |
| FR2677894B1 (en) * | 1991-06-20 | 1993-10-15 | Bioprobe Systems | ELECTROPHORESIS DEVICE. |
| US5632877A (en) * | 1996-05-20 | 1997-05-27 | Bio-Rad Laboratories, Inc. | Rapid assembly electrophoresis cell for slab gels |
| EP2941637A4 (en) * | 2013-01-02 | 2016-10-12 | Abraham Shtevi | Device for performing electrophoresis producing mirror copies of separated proteins by using the same gel and the same samples |
| JP2022525842A (en) * | 2019-02-11 | 2022-05-20 | アジレント・テクノロジーズ・インク | Preformation of the fluid sample before treatment into a flat surface |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3523070A (en) * | 1967-05-05 | 1970-08-04 | Trw Inc | Disposable test cell |
| SE7809028L (en) * | 1978-08-28 | 1980-02-29 | Vesterberg Olof | ELECTROPHORES PROCEDURE |
-
1984
- 1984-07-04 HU HU260684A patent/HU191104B/en unknown
-
1985
- 1985-03-27 WO PCT/HU1985/000019 patent/WO1986000708A1/en unknown
- 1985-03-27 EP EP19850901542 patent/EP0216759A1/en not_active Withdrawn
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO1986000708A1 (en) | 1986-01-30 |
| EP0216759A1 (en) | 1987-04-08 |
| HUT37894A (en) | 1986-03-28 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP2620504B2 (en) | Sample well insert for forming wedge-shaped wells in ultra-thin slab gel for electrophoresis | |
| JP5302204B2 (en) | Reagent carousel | |
| KR101140751B1 (en) | Feces collection container | |
| HU191104B (en) | Gel cell for performing gel-electrophoresis and an electrophoretic device using this | |
| US4301963A (en) | Integral one piece centrifuge tube | |
| US20070144907A1 (en) | Integrated two-dimensional gel electrophoresis | |
| CN109470760B (en) | Device for preparing agarose gel, agarose gel electrophoresis method and application | |
| JP2740611B2 (en) | Culture vessel | |
| JP2004069387A (en) | Method and apparatus for two-dimensional electrophoresis, and gel holder for the same | |
| JP4627455B2 (en) | DNA microarray processing equipment | |
| CN209764787U (en) | Device for preparing agarose gel and gel electrophoresis device | |
| CN210252381U (en) | Blood specimen test-tube rack | |
| US20030221962A1 (en) | Strip holder, chamber, cassette, and 2-D gel electrophoresis method and system for performing this method for separating molecules | |
| CN216685410U (en) | Pathology fixed integral type utensil lid box | |
| CN217288513U (en) | Novel test tube storage rack | |
| US7754060B2 (en) | Electrophoresis cassette with collapsible buffer chamber | |
| JP2021122518A (en) | Cell storage container | |
| CN213842810U (en) | Wet sealing cover for improving dyeing quality | |
| CN212125908U (en) | Reagent bottle | |
| US3874503A (en) | Device for housing and retaining small volumes of gelled media | |
| EP0476890A2 (en) | Gel slab reinforcement and support | |
| GB2344651A (en) | Reaction pouch | |
| CN221536757U (en) | Centrifuging tube placer | |
| CN209680168U (en) | A kind of sterile working supporter | |
| JP4723891B2 (en) | Hybridization cartridge, hybridization apparatus, and hybridization method |