JPH07508040A - セレノアミノ酸の経皮適用による外因性皮膚老化の再生 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 セレノアミノ酸の経皮適用による外因性皮膚老化の再生発明の背景 ｌ−発明の分野 本発明は、皮膚に対する慢性の細胞性および分子性の損傷の回復を増強し促進す る方法に関する。

２−先行技術の記載 近年、ＵＶ照射または環境汚染物質による皮膚に対する慢性の遊離ラジカル性損 傷が、ＵＶ照射の急性影響とは区別される表皮および真皮の特異的な老朽化の原 因となっており、「内因性Ｊ老化として皮膚科学の文献に示された、必然的な年 齢に依存する変化を単純に促進するのではないということが明らかになってきた 。

ＵＶ照射によって生じる特別の慢性の蓄積性損傷は、医学的な皮膚科学の文献で は「元老化」と表され、臨床的には、皺、乾燥した、螺状変性にかかった皮膚（ ｗａｘｙ　５ｋｉｎ　）　、および様々な悪性新生物と同様、良性および前悪性 新生物を発現する。これらの臨床的変化はすべて、光化学作用的に損傷された特 性付けられた皮膚の特異的な組織学的特徴の結果であり、（ｉ）細胞の異型性お よび角質の肥大による表皮の肥厚、（ｉ　ｉ）からんで分解した表皮弾性組織の 非晶性の塊への変性をともなう日光弾力繊維症（クリマンＡＭ（Ｋｌ　ｉｇｍａ ｎ　ＡＭ）、ジャーｖ（ＪＡＶＡ）、　２１０巻、２３７７頁、　１９６９年） 　、（ｉｉｉ）表皮コラーゲンのより太いローブ様構造への分解（ベントリー　 ＪＰ（ＢｅｎＬｌｙ　ＪＰ）、ジャーナル　オブ　インベスティゲーションダー マトロジ−（Ｊ、　Ｉｎｖｅｓｔ、　Ｄｅｒｍａｔｏｌ、）、　７３巻、８０頁 、　１９７９年）、および（ｉｖ）真皮の過細胞性（アンドリューＷ（Ａｎｄｒ ｅｗ　Ｗ）等ニゲロントロシカ（Ｇｅｒｏｎｔｏｒｏｇｉｃａ）。

１０巻、１頁、　１９６４年）である。

レチノイン酸（レチン　Ａ（Ｒｅｔｉｎ　Ａ）、オルソ製薬（Ｏｒｔｈｏ　Ｐｈ ａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＣｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ））の局所適用は、文献的に は、過剰な角質層を薄くし、新しい、細い筋原繊維の皮膚コラーゲンを生成する ばかりでなく、表皮のより深い層の細胞の異型性を正常化し、正常な、からまっ ていない、筋原繊維状態に損傷された皮膚の弾性組織を再構成することによって 表皮の回復を生じるとされている（クリマンＡＭ　（Ｋｌｉｇｍａｎ　ＡＭ）、 レイトンＪＪ　（Ｌｅｙｄｏｎ　ＪＪ）、クリマンＬＨ（Ｋｌ　ｉｇｍａｎ　Ｌ ｌｌ）、グローブＧＬ　（Ｇｒｏｖｅ　ＧＬ）、元老化の逆転のためのレチノイ ン酸局所剤（Ｔｏｐｉｃａｌ　Ｒｅｔｉｎｏｉｃ　八ｃｉｄ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　 ｒｅｖｅｒｓａｌ　ｏｆ　Ｐｈｏｔｏａｇｉｎｇ）、オルソ製薬からのコミニュ ケーション、１９８６年０２月：ワイスＪＳ　（Ｗｅｉｓｓ　ＪＳ）、エリスＣ Ｎ（Ｅｌｌｉｓ　ＣＮ）、ヘディントンＪＴ（ｌｌｅａｄｉｎｇｔｏｎ　ＪＴ） 、ティンコツＴ（Ｔｉｎｃｏｆｆ　Ｔ）。

ハミルトン　ＴＡ（ｌｌａｍｉｌｔｏｎ　ＴＡ）、ブーヒーズＪＪ（Ｖｏｏｒｈ ｃｅｓ　ＪＪ）、ジャーマ（Ｊへ１ｉＩＡ）、２５９巻、５２７頁、１９８８年 ）。しかしながら、レチノイン酸局所剤の使用は、通常、治療開始時に不快感、 層状剥離（ｆｌａｋｉｎｇ）および紅斑を生じ、そして太陽光に対する感受性を 高める原因となる（バークＫＥ（Ｂｕｒｋｅ　ＫＥ）、グラハムＧＦ（Ｇｒａｈ ａｍ　ＧＦ）、北カロライナ、ニューヨーク、ジ＋　−７（ＪへＩＩＩＡ）、　 ２６０巻、　３１３０頁、１９８８年）。

セレノアミノ酸の適用は、皮膚中の増強されたセレンレベルで経皮吸収を導き、 ＵＶ光に曝されることに伴う皮膚癌の発生率を有意に低下させながら、皮膚損傷 を誘導するＵＶ照射からの保護を提供する（米国特許番号４．８６５．８４０゜ １９８９年０９月１２日）。効果的であったセレンのレベルは、局所毒性または 全身毒性のいずれにおいても証明されていない。

慢性の細胞性および分子性の皮膚に対する損傷の回復を増強し促進するための付 加的な方法、特に局所的に適用されたビタミンへの副作用がない方法が要望され ている。

発明の概要 −の実施態様では、本発明は、慢性の細胞性および分子性の皮膚に対する損傷の 回復を増強し、促進する方法を提供する。この方法は、哺乳類、好ましくはヒト の皮膚への製剤学的に許容できる皮膚透過性のキャリア中にセレノアミノ酸を含 む組成物の局所投与を含む。

他の態様では、本発明は、外因性遊離ラジカルによって肥大した、哺乳類、好ま しくはヒトの皮膚の角質層を薄くし、外因性遊離ラジカルによって損傷された弾 性組織を回復する方法を提供する。この方法は、製剤学的に許容できる皮膚透過 性のキャリア中にセレノアミノ酸を含む組成物を皮膚へ局所投与することを含む 。

詳細な議論 本発明は、環境因子が含んでいるが、それに限られない紫外線（ＵＶ）照射およ び環境汚染物質による遊離ラジカルの生成によって誘導された皮膚に対する外因 性の慢性損傷を、セレノアミノ酸の局所経皮適用、好ましくは持続的に、より好 ましくは長期間適用することによって逆転することに関する。

ここで使用される「局所的、経皮的」、「局所的」または［経皮的Ｊという語は 、前記組成物が局所的に適用され、経皮的に吸収されることを意味する。

近年、皮膚の外因性の老化及び内因性の老化の区別は、組織学的なレベルで明ら かにされてきた。外因性の老化は、内因性の老化が時間の経過とともに自然に起 こるのに対し、環境的傷害の原因、特に、ＵＶ照射や汚染物質、すなわち、タバ コの煙等の遊離ラジカルを生成するものによる。外因性の老化の慢性の臨床的お よび組織学的な発現もまた、日焼け（ｓｕｎｂｕｒｎ　）という急性障害とはは っきりと区別される。

セレノアミノ酸を含む組成物の経皮的な適用が、これらの外因性の環境的な傷害 の原因による表皮層および真皮（ｄｃｒｍａｌ）層に対する慢性の損傷の回復を 、損傷がすでに生じた後に適用した場合であっても、促進し、増強することが明 らかにされてきた。この慢性の損傷の逆転は、もし治療されなければ、これらの 環境的傷害の原因は、成熟前に老化を出現させるばかりでなく、皮膚癌に対する と同様の前癌状態の外傷が目に見えて増加するため最も重要である。

表皮の細胞の回復および皮膚コラーゲンおよび弾性組織の分子の回復による上記 の慢性損傷の自然回復は速やかではなく、ここで記載されているような局所用セ レノアミノ酸と、カロチン類、レチノイド類、例えば、レチノイン酸、およびト コフェロール異性体およびそのエステル誘導体を含む他の活性細胞の保護および 回復化合物を付加的に含有する局所剤からなる組成物を用いた経皮的治療による 回復よりも非常に長い時間がかかる。

上述のように、光老化の影響を逆転するために用いられた先行技術のレチノイン 酸局所剤組成物の副作用は、通常、治療開始時に、不快感、層状剥離、および紅 斑等の原因となり、日光に対する感受性を高める原因となる。このような不利な 作用は、セレノアミノ酸の局所的、経皮的な適用では記載されておらず、事実、 セレノアミノ酸のこのような適用は日光に対する感受性を実際に低下させる。さ らに、経皮用セレノアミノ酸局所剤はより効果的でさえあり、そしてレチノイン 酸局所剤よりも光老化した皮膚に対する細胞性および分子性損傷の逆転において より速やかに作用する。

本発明の発明者は、セレノアミノ酸の長期間の経皮適用が光老化の影響を臨床的 および組織学的に逆転することを見出した。特に、セレノアミノ酸の局所適用は 、経皮吸収を生じさせ、過剰の角質層を薄くし、新たな細い筋原繊維の皮膚コラ ーゲンを生成するとともに表皮のより深い層の細胞の異型性を正常化し、損傷さ れた真皮（ｄｅｒｍａｌ）の弾性組織を正常なからまっていない、筋原繊維型に 再構成することによって表皮を回復させる。

技術の現状から、以前にもたらされた皮膚に対する遊離ラジカル損傷（特に、Ｕ Ｖ照射によるものばかりでなくタバコの煙を含む環境汚染物質等の他の原因によ る損傷）をｉ！４すしためのセレノアミノ酸の、新規な、長期局所、持続的経皮 適用は、自明でもなく、予見できるものでもない。

本発明の方法で用いられたセレノアミノ酸組成物は、いかなる適切なキャリア中 で提供されてもよい。例えば、適切なキャリアは、親水性ローションやクリーム として処方される、ポリプロピレングリコール−３−ミリスチン酸　エステル（ ｐｏｌｙｐｒｏｐｙｌｅｎｅ　ｇｌｙｃｏｌ−３−ｍｙｒｉｓｔｙｌ　ｅｓｔｅ ｒ）　、スクアラン（ｓｑｕａｌａｎｃ）、他の不飽和油および分枝炭化水素、 液体脂肪酸エステル、不飽和液体脂肪酸アルコールおよび不飽和植物油の水中油 型エマルジョンを含む現実に皮膚に浸透するものである。かくして、上記キャリ アは、グリセリンまたはプロピレングリコールおよび他の従来の添加剤等の湿潤 剤（ｈｕｍｅｃｔａｎｔｓ）を含んでもよい。例えば、顔または手の皮膚の基剤 として用いられる既知の水中油型エマルジョンが、好適に使用することができる 。好ましくは、経皮的キャリアは、環境因子によって損傷されたする。

本発明によれば、セレノアミノ酸は、好ましくは、Ｌ−セレノチオニンであり、 例えば、ローションまたはクリーム型の皮膚透過性キャリア中に、少なくとも０ ．００２ｗｔＸ、好ましくは０．０２〜０．１ｗｔＸ、より好ましくは約０．０ ５ｗｔＸの濃度で取り込まれることが可能であり、皮膚に適用できる組成物をつ くる。

最適の効果を得るために、この組成物を、１周あたり複数回、異なる日に持続的 に、すなわち、所望の治療効果が得られるまでの期間適用すべきである。矯正的 効果（ｃｏｒｒｅｃｔｉｖｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ）がヒトにおいては２力月で例証 されたけれども、以前に被った外因性の皮膚に対する損傷を逆転するためには、 適用は複数回、好ましくは１週間に少なくとも５回を異なる日に、少なくとも９ 力月間、適用すべきである。

さらに詳細を説明することなく、当業者は、前述の記載を用いて、本発明を限度 一杯まで利用することができると思われる。以下の好適な特別の実施態様は、そ れゆえ、単に例示的なものであり、そしていずれかの方法で開示されたものに限 定されるものではないと解釈されるべきである。以下の実施例においては；別な 方法で示されない限り、すべての部およびパーセンテージは重量表示を示す。

実施例 セレノアミノ酸局所剤、特に、Ｌ−セレノメチオニンが、日焼け（ｓｕｎｂｕｒ ｎ）による水泡と色素沈着を減少させ、前述した（米国特許番号４，８６５，８ ４０．１９８９年０９月１２日）に示されたように、皮膚癌の発症を遅らせ発生 率を減少させ、皮膚に対する急性および慢性のＵＶ誘導損傷を部分的に肪り、ま たは阻害する、そればかりでなく、「光老化」として示される表皮における長期 間の変化を部分的に鋲することができるかどうかを突き止めることは興味深い。

２４匹のＳｋｈ：２無毛、有色素、黒目の雌のマウスを、表１に示すように群分 けした。

表１＝光老化の逆転 実験処理群 レチノイン酸クリーム局所剤０．０５％（レチンＡ（Ｒｅｔｉｎ　Ａ）、オルソ 製薬（Ｏｒ　ｔｈ。

Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　Ｃｏｒｐ、））は、光老化した皮膚の構造的な 異常を部分的に逆転することを示す薬物にすぎないため、この処理は外因性老化 または光老化のような医学的皮膚科学の文献（オルソ製薬からのコミニュケーシ ョン、１９８６年０２月；ワイスＪＳ（Ｗｅｉｓｓ　ＪＳ）＋　エリスＣＮ（Ｅ ｌｌｉｓ　ＣＮ）、ヘディントンＪＴ（ＨｅａｄｉｎｇｔｏｎＪＴ）、　ハミル トンＴＡ（ｔｌａｍｌｌｌｏｎ　Ｔ八）、ブーヒーズ　ＪＪ（Ｖｏｏｒｈｅｅｓ 　ＪＪ）、ジャーマ（ＪΔＭＡ）、２５９巻、５２７頁、　１９８８年）で指摘 された細胞性または分子性の変化の最適の既知の逆転を例証するための対照とし て本実験に含まれる。

２４匹のマウスを、ウェスチングハウスＦＳ４０日光ランプを用いて、開始２． ５分間ＵＶを浴びさせ、その後２，５分ごとに照射量を上げて（０，２４ジユー ル１ｃｒｌ／曝露量（ｅｘｐｏｓｕｒｅ））　Ｕ　Ｖを浴びさせた。照射は、こ の系統のマウスにおける光老化した皮膚の構造的な異常を誘導した。

ＵＶ照射終了後、照射を受けたマウスを、治療群、Ｉａ、　２ａ、および３ａに 分け、各群の比較的黒っぽいマウスと比較的色の薄いマウスが同じ分布になるよ うにした（各マウスにおける色素過剰症の程度は臨床的にわずかに相違するため ）；　（賦型剤のみで治療された）対照「ｂ」群は、各々１匹の濃茶色および１ 匹の中程度の濃茶色のマウスを含んでいる。個々のマウスは、耳にクリップを止 めて同定する。各マウスの背部に表１に示す各組成物０．１ｍｌを毎日、週５日 間、ｌＯ週間適用した。表皮および真皮のＵＶ誘導光老化を部分的に逆転させる レチノイン酸局所剤とＬ−セレノメチオニン局所剤の効果とを評価するために、 組織学的分析用に、クリームの塗布前、治療５および１０週後に各マウスの背部 中央部分から２つのパンチバイオプシーを得た。

表２は、Ｌ−セレノメチオニン局所剤が、光老化した皮膚の構造的異常性を逆転 させる上で効果的であることを例証している。事実、Ｌ−セレノメチオニン局所 剤はレチノイン酸局所剤よりも実験条件の下では効果的であった。ＵＶ照射を受 けなかったマウスでは、いずれも組織学的な変化は検出されず、上記組成物を塗 布した場合にもこのような変化は検出されなかった。

表２：Ｌ−セレノメチオニン局所剤を用いた光老化の逆転ＲＡ　＝レチノイン酸 （０，０５％） ＳｅＭｅｔ　＝Ｌ−セレノメチオニン（０，０５Ｘ）＃　＝ＵＶ照射直後 ”　＝ｔｏ週の治療後 程度：Ｏ＝最小、３＝最大 上記で引用された学術論文において証明され、表２に示されたように、ＵＶ照射 は、細胞の異型化および角質層の著しい増殖症（Ｓｋｈ：２マウスでは、ＵＶ照 射しないマウスにおける０、　０２ｎｖｎの厚みと比較して、表皮が０．１６ｍ ｍとなった）によって、表皮の肥厚を引き起こした。遊離ラジカル損傷皮膚を特 徴づける他の組織学的特色が表２で等部分けされている。真皮に対する損傷の竜 も顕著な特色は、通常まばらで、繊細な繊維からなる弾性組織が、退化し、厚く なり、ねじれた繊維で置き換えられて顕著な変性をしているーいわゆる「日光弾 力繊維症」である。

また、通常、細い筋原繊維のコラーゲンが、凝集し、不規則に束ねられ、乱雑に 分散されて置換されるコラーゲンの崩壊もある。真皮は、多くの炎症細胞、とり わけマスト細胞で過細胞性（ｈｙｐｅｒｃｅｌｌｕｌａｒ）である。この慢性的 損傷の自然回復または賦型剤のみの局所適用によって試みられた回復は、実験期 間（１５週まで）中の光老化の細胞性および分子性の症状の発現を最小限逆転し たにすぎない。

表２に示すように、１０週間の賦型剤のみの適用は、異型性細胞をほとんど融解 （ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ）せず、反応性の角質層増殖症による厚くなった角質層 をほんのわずか薄くする（表皮の厚さが０．１６ｎｖｎから０．１２ｏｗｎへと 減少している）ことによって、表皮の肥厚をわずかばかり減少させた。変性した コラーゲンまたは弾性組織の回復はほとんど見られなかった：１０週後まで（そ して表２には引用されていないが１５週後であっても）、弾性繊維は、太く、ね じれて、日光弾力繊維症を示す非晶性の塊に凝集しており、コラーゲン繊維は不 規則に厚くなり、乱雑に分散していた。未だに、多数のマスト細胞による真皮の 顕著な過細胞性がある。

レチノイン酸およびＬ−セレノメチオニンの局所適用は、この細胞性および分子 性損傷の発現をすべて回復した。レチノイン酸の局所適用は、表皮の過形成を減 少させ、細胞の異型化を低下させ、そして１０週後に表皮の厚さを０．１６ｍｍ から０．０９ｍｍに減少させながら、角質層の増殖症を減少させた。

Ｌ−セレノメチオニンの局所適用は、ＵＶ照射の表皮細胞性損傷の回復において レチノイン酸の局所適用よりも幾分よい二表皮の過形成は減少し、細胞の異型性 を低下し、角質層の増殖症は低下するため、表皮の厚さは、１０週後に０．０７ ＋ｍ＋になる。

Ｌ−セレノメチオニンの局所側用組成物もまた、損傷された真皮の回復において 、レチノイン酸の局所剤よりもより効果的である。レチノイン酸局所剤で１０週 間治療後、真皮はかなり回復した：明瞭な回復範囲が、多くの繊維芽細胞および 正常な、細い、筋原繊維コラーゲンに、凝集し、不規則なコラーゲンの束がかな りとってかわった部分からなる真皮上層中に表された。Ｌ−セレノメチオニンで ｌＯ週間治療後、真皮全体は繊維芽細胞を含み、以前に変性されたコラーゲンが 回復して、ＵＶ照射を受けていない皮膚のように皮膚表面に平行に規則正しく繊 維が配列された、細い、筋原繊維のコラーゲンを形成することが示された。レチ ノイン酸局所剤でＩＯ週間治療した後、日光弾力繊維症は最低限の回復しか認め られず、正常な、繊細な弾性繊維は、非晶性塊を有しない変性された弾性組織を 有する真皮全体で表された。

それゆえ、ＵＶ照射によって誘導された表皮および真皮に対する損傷パラメータ の主観的な評価の後、Ｌ−セレノメチオニン局所剤でなされた回復は、レチノイ ン酸局所剤よりも、より効果的で速やかであった。

前述の実施例は、前述の実施例で用いられた作用物質と本発明の一般的に記載さ れた作用物質とを置換しても、同様の良好な結果を再現し得る。

先の記載より、当業者は、本発明の必須の特徴をその範囲および意図と離れるこ となく確認することができ、様々な変更や修飾を行うことが可能であり様々な用 途および条件に対して適用できる。

フロントページの続き （５１）　Ｉｎｔ、　Ｃ１，６識別記号　庁内整理番号Ａ６１Ｋ　３１／１９５ 　ＡＤＡ　９４５４−４ＣＤＳ ３１／３５５　ＡＤＬ　９４５４−４ＣＩ

Claims (18)

【特許請求の範囲】
1. １．哺乳類の皮膚に対する慢性の細胞性および分子性の損傷の回復を増強させ促 進する方法であって、製剤学的に許容できる皮膚透過性キャリア中に本質的にセ レノアミノ酸を含む組成物の皮膚への局所投与からなる方法。
2. ２．前記セレノアミノ酸がＬ−セレノメチオニンである請求項１に記載の方法。
3. ３．前記セレノアミノ酸が上記組成物の総重量に対して少なくとも０．００２ｗ ｔ％の濃度で存在する請求項１に記載の方法。
4. ４．前記セレノアミノ酸の濃度が０．０２〜０．１ｗｔ％である請求項１に記載 の方法。
5. ５．前記セレノアミノ酸の濃度が約０．５ｗｔ％である請求項１に記載の方法。
6. ６．前記組成物が、少なくとも週に５回、少なくとも２ヵ月間投与される請求項 １に記載の方法。
7. ７．前記損傷が環境因子によるものである請求項１に記載の方法。
8. ８．前記環境因子が、紫外線照射および環境汚染物質である請求項１に記載の方 法。
9. ９．前記損傷が光老化である請求項１に記載の方法。
10. １０．前記皮膚透過性キャリアが前記セレノアミノ酸を、環境因子によって損傷 された皮膚の細胞、分子または基質（マトリックス）成分に経皮的輸送を提供す る請求項１に記載の方法。
11. １１．前記組成物がさらに、カロテン、レチノイドまたはトコフェロールの異性 体またはそのエステル誘導体を含む請求項１に記載の方法。
12. １２．外因性遊離ラジカルによって厚くなった哺乳類の皮膚の角質層を薄くし、 外因性遊離ラジカルによって損傷された弾性組織を修復する方法であって、製剤 学的に許容される皮膚透過性キャリア中に本質的にセレノアミノ酸を含む組成物 の哺乳類の皮膚への局所適用を含む方法。
13. １３．前記セレノアミノ酸がＬ−セレノメチオニンである請求項１２に記載の方 法。
14. １４．前記セレノメチオニンが前記組成物の総重量に対して０．００２ｗｔ％異 常の濃度で存在する請求項１２に記載の方法。
15. １５．前記セレノアミノ酸の濃度が０．０２〜０．１ｗｔ％である請求項１２に 記載の方法。
16. １６．前記セレノアミノ酸の濃度が約０．５ｗｔ％である請求項１２に記載の方 法。
17. １７．前記組成物が少なくとも週に５回、少なくとも２ヵ月間投与される請求項 １２に記載の方法。
18. １８．前記組成物がさらに、カロテン、レチノイドまたはトコフェロールの異性 体またはそのエステル誘媒体を含む請求項１２に記載の方法。