JPH07508016A

JPH07508016A - ９−アミノ−ピリダジノ〔４′，５′：３，４〕ピローロ〔２，１−ａ〕イソキノリンと該化合物の医薬製剤製造への使用

Info

Publication number: JPH07508016A
Application number: JP6502019A
Authority: JP
Inventors: アルンツ　ディートリッヒ; レーゼル　ヴァルター; ロース　オットー
Original assignee: ベーリンガー　インゲルハイム　コマンディトゲゼルシャフト
Priority date: 1992-06-22
Filing date: 1993-06-18
Publication date: 1995-09-07
Anticipated expiration: 2018-11-17
Also published as: DE59307281D1; WO1994000451A1; CN1082046A; US5565452A; JP3468520B2; MX9303706A; AU4327293A; ATE157665T1; IL106089A0; CA2138791A1; US5677304A; EP0647226B1; EP0647226A1

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】９−アミノ−ピリダジノ［４’、５’　：３．４）ピローロ（２，１−ａ）イソキノリンと該化合物の医薬製剤製造への使用この発明は、化学式で与えられる９−アミノ−ピリダジノ（４’、５’　：３，４）ピロロ（２，ｌ −ａ〕イソキノリン、並びに及び錯体形成剤と該化合物との生理学的に許容し得る塩を、慢性・炎症性過程、潰瘍性大腸炎及びクローン病の治療用薬剤の製造並びに抗増殖効果を有する薬剤の製造に使用することに関するものである。

さらに詳しく説明すると、これらの化合物の一部は、ＤＢ　３５００９４１．　ＤＢ　３５２５０４８、ＥＰ　１９０５６３とＥＰ　２５２２９９から既知のものであり、これらの化合物の一部は、しかしながら新規のものである。したがって、発明は、これらの新規な化合物、これらの化合物を含む医薬製剤、特にこれらを、特に血栓症を起こした、又は血栓症を起こす危険のある患者の治療に使用する、脳保護薬としての使用に関するものである。

化学式１では以下を意味する。

Ｒ１とＲ７は同じ、又は異なる基であって、水素：ｅｓ　ｃ？シクロアルキル：Ｃｓ　Ｃｓアルケニル、フェニル（その際フェニル環は場合によっては１つ又は２つの位置をハロゲン又はメトキンで置換されていてもよい。）；プロパルギル；直鎖又は分枝、飽和又は不飽和Ｃ１−５アルキル残基（下記の基で置換されていてもよい、ヒドロキシ、Ｃ１−４アルコキシ、ハロゲン、ＮＨ，，１〜２個の炭素原子を含むＮＨ−アルキル、　Ｎ、　Ｎ−ジ（Ｃ＋’　Ｃｔ）アルキノげミ人２〜４個の炭素原子を含むＮＨ−アシル、Ｃ５−７ンクロアルキル、ｌ又は２フエニル基（式中、フェニル環は、１つ又は２つの位置をハロゲン、ＣＦ３　、Ｃ，−４アルキル、Ｃ１−２アルコキシ、１〜２個の炭素原子を含むＮＨアルキル、１〜２個の炭素原子を含むＮ、　Ｎ−ジアルキル、聞２．２〜３個の炭素原子を含むＮ−アシル、アルキルスルホニルアミノ、又はベンジルオキシで置換され得る）、フリル、チェニル、任意に異種原子として酸素原子又は硫黄原子を含み得る、窒素を含む五又は六員複素環（その隔環は任意にＣｌ−４アルキルで置換され得る））；又はＲｔとＲ７は共に窒素原子を含み、任意に、さらに異種原子として酸素原子、又は窒素原子を含み得る３から７員環を形成し、その際、この環は場合によってはフェニル−（Ｃ，−Ｃ，）−アルキルで置換され得る：　（その際、該フェニル環は１つ又は２つの部位をハロゲン、ＣＦ３、（ＣＩ　Ｃ４）アルコ苓シ、（ＣＩ−Ｃ４）アルキル又はＣＮで置換され得る　また、その際、置換基は互いに同種又は異種であり得る）：又はＲｏが水素の場合、Ｒ１は一■、；ジ（ＣＩ　Ｃｔ）アルキルアミノ；アセトニルアミノ；　ＩＪＦＩ（Ｃｔ　ＣＩ）アシル；アルキル鎖中に１〜３個の炭素原子をもつアルキルスルホニル基又はアルコキシカルボニル基；イソプロピルイデンアミノ基（−Ｎ　＝Ｃ（Ｃ）Ｉｓ）ｓ）　；又は窒素原子と、場合によってはさらに異種原子として１個の酸素原子、窒素原子又は硫黄原子を含む５−又は６員複素環を意味し得る：同種又は異種であり得るＲ１、Ｒ４とＲ１は、水素、又はＣ１−４アルキル基である；同種又は異種であり得るＲ７とＲ１は、ヒドロキシ；Ｃ１−４アルコキシ；又はＣ１−４アルキルチオで同種又は異種であり得るＲ６とＲ１は、水素；ヒドロキシ；Ｃ，−４アルコキシ；Ｃ１−４アルキルチオ；又は基（−Ｎ（Ｒ１゜）（Ｒｌｔ））を意味し、（式中、ＲＩＯは水素；又はＣＩ−４アルキルであり、Ｒ１１は水素；又はＣｌ−４アルキルで、その際、該アルキル基は場合によってはヒドロキシ、メトキシ、又はフルフリルで置換され得る。又は置換基Ｒ・、Ｒ７、Ｒ，とＲｅのうち隣同士の２つの置換基で、共に−０−（ＣＬ）Ｉ又は、−ローを形成し、各々残りの２つの置換基は上述のように定義される。）。

本発明は、さらに慢性・炎症性過程、潰瘍性大腸炎及びクローン病との治療薬及び抗増殖効果を有する薬剤を製造するために、該化合物と、酸、塩基又は錯体形成との、並びに酸及び錯体形成剤と該化合物との生理学的に許容し得る塩の使用に関する。

前記のとおり、本発明は、一般式Ｉの新規化合物に関するものであって、（式中Ｒ１、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ，及の、は水素であり、Ｒ１とＲ１はＣＩ−、アルコキシであるか又はＲ。

とＲ１とで一０ＣＨＩＯ−又は−０ＣＨ２ＣＨｔＯ−を形成し、ＮＲＩＲを基はであり、式中Ｚは０．１又は２であり、ＲｌｔはＣＮ、ＣＦ、ハロゲン、（ＣＩ −Ｃ４）アルキル又は（ＣＩ　Ｃ４）アルコキシ）であるか、又は該化合物と酸又は錯体形成剤の並びに酸及び錯体形成剤と該化合物との生理学的に許容し得る塩であるが、下記化合物は除外される。

本発明の使用の好ましい領域には次のものがある。

古い、及び新規の化合物を包括する上述の定義による化学式（Ｉ）の化合物の使用、その式中、同種又は異種であり得るＲ１とＲ７は、水素；Ｃ５−Ｃｔシクロアルキルｉｃ２　ｃ５アルケニル；フェニル（その際フェニル環は場合によっては１つ又は２つの位置がハロゲン又はメトキシで置換され得る）；プロパルギル；直鎖又は分岐鎖の飽和、又は不飽和のＣＩ−５アルキル基、（下記の基で置換されていてもよい：ヒドロキシ、Ｃ，−４アルコキシ、ハロゲン、■７．１〜２個の炭素原子を含むＮＨ−アルキル、Ｎ、　Ｎ−ジ（ＣＩ　Ｃｔ）アルキルアミノ、２〜４個の炭素原子を含むＮＨ−アシル、ＣＩ−７ンクロアルキル、フェニル（その際、フェニル環は１つ又は２つの位置をハロゲン、Ｃ１−２アルキル、Ｃ１−２アルコキシ、１〜２個の炭素原子を含むＮＨ−アルキル、１〜２個の炭素原子を含むＮ、　Ｎ−ジアルキル、洲１．２〜３個の炭素原子を含むＮ−アシル又はアルキルスルホニルアミノで置換され得る）、フリル、チェニル、窒素原子を含む五又は六員複素環で場合によってはさらに異種原子として酸素原子又は硫黄原子を含み尋る（その際、その環は場合によってはＣ１−４アルキルで置換される））；又はＲ１とＲ８が窒素原子と共に、場合によってはさらに異種原子として酸素原子、又は窒素原子を含み得る１つの３〜７員環、（その際この環は場合によってはフェニル−（Ｃｏ−Ｃ４）−アルキルで置換される（その際フェニル環の１つ又は２つの位置はハロゲン又はメトキシで置換される）ことを意味する；又はＲ１が水素を意味する場合、Ｒ１は、−間７．ジ（ＣＩ−Ｃｆ）アルキルアミノ；アセトニルアミノ；ＮＨ（Ｃｔ　Ｃｓ）アシル；各々１〜３個の炭素原子をアルキル鎖の中に持つアルキルスルホニル基又はアルコキシカルボニル基；イソプロピルイデンアミノ基（−Ｎ＝Ｃ（ＣＨＩ）り又は、１つの窒素原子と場合によってはさらに異種原子として酸素原子、窒素原子又は硫黄原子を含む五又は六員複素環を意味し得る；同種、又は異種であり得るＲ１、Ｒ１とＲ３は、水素又はＣＩ−４アルキル基を意味する同種又は異種であり得るＲ７とＲ，はヒドロキシ；Ｃ１−４アルコキシ；又はＣ１−４アルキルチオを意味する。そして同種、又は異種であり得るＲ６とＲ１は水素；ヒドロキシ；ｃｌ−４アルコキン；Ｃ１−４アルキルチオ：又は基（−Ｎ（Ｒ１゜ＸＲ＋＋））を意味し、この中のＲ１゜は水素：又はＣｌ−４アルキルでありＲ１＋は水素；又はＣ３−４アルキルで、その際、該アルキル基は場合によってはヒドロキシ、メトキシ、又はフルフリルで置換され得る。

並びに、該化合物と、酸又は錯形成剤との並びに酸及び錯体形成剤と該化合物との生理学的に許容し得る塩を慢性炎症性過程、潰瘍性大腸炎とクローン病の治療用薬剤の製造、及び抗増殖活性を有する薬剤の製剤に使用すること。

−）　化合物Ｉの使用で、式中−ＮＲ，Ｒ，の代わりには、を表わし、その式中、フェニル基はｌ又は２個のメトキシ基で置換され得る。

−）　化合物（Ｉ）の使用で、式中の−ＮＲ＋Ｒｔが、基を意味し、式中、フェニル基は先に定義された基で置換され得る。

−）　化合物（Ｉ）の使用で、式中−ＮＲ＋Ｒ＊が基であり、式中、フェニル環のｌ又は２つの位置が弗素、塩素、ｃｐｓ　、メトキシ、メチル、エチル又はＣＮで置換される。

−）　化合物（Ｉ）の使用で、式中Ｒ１は水素で、Ｒ１はＣ８−７シクロアルキル、チェニル、又は１又は２個の無置換フェニル基で又は先に定義された置換基をもつ置換フェニル基で、置換された直鎖又は分枝鎖Ｃ１−４アルキル基、−）　化合物（１，）の使用で、式中Ｒ１は水素でＲ，は（ＣＩ　Ｃ４）アルキルシクロヘキシル、特に−ＣＨ，−Ｃ，ＨＩ　、である。

−）　化合物（１）の使用で、式中Ｒ１は水素でＲ７は（ＣＩ−Ｃ４）アルキルフェニル（式中、フェニル基は無置換であるか又は１又は２つの位置がＦ、ＣＩ、ＣＦｓ、メチル、エチル、メトキシ又はエトキシで置換されている。

−）　化合物（Ｉ）の使用で、式中ＮＲ＋Ｒｙが下記の基の１つであるものニー）　化合物（Ｉ）の使用で、式中ＮＲ＋Ｒｔｈ似下に記した基の１種である；− ）　化合物（１）の使用で、式中Ｒ１、Ｒ１、Ｒｓ、　Ｒｅ及升、は水素で、Ｒ７とＲ１はＣ＋＝４アルコキシか又はＲ１とＲ１で−ｏｃｏｔｏ−又は−ＯＣＨ，ＣＨｆ０−を形成する。

−）　化合物（Ｉ）の使用で、式中Ｒ１とＲ１はメトキシである。

また、一般式Ｉの次のような化合物の使用は好ましい。すなわち、式中、同種又は異種であり得るＲ１とＲ７は、水素；直鎮又は分枝鎖Ｃ１−５アルキル基、又はＲ，が水素で、Ｒ７がアミノ；メチルアミノニジメチルアミノ；イソプロピルイデンアミノ：ジメチルアミノＣ１−４アルキル；メトキシＣ２−４アルキル；シクロプロピル；シクロペンチル、シクロヘキシル；シクロヘキシルメチル；フェニル；フェニルエチル（該フェニル環は場合によってはｌ又は２つの位置がメトキシ又は１１０ゲンで置換される。ピラゾリル；プロパルギル；　〔ｌ−メチルピロリジン−２−イル〕エチル：　（ビペリフンーＩ−イル）エチル；アリル；４−ベンジル−ピペラジン−１−イル、（フラン−２−イル）メチル；　（ピロリジン−■−イル）エチル；２−ヒドロキシエチル：　（ピリジン−４−イル）エチル；ベンジル；　（チェシー３−イル）エチル：又はＲ１とＲ１でそれらが結合している窒素原子と共に、ピロリノン、モルホリン；ピペラジンを形成し、任意にそれらが７エネチル又はメトキンフェニルで置換されていてもよく。

Ｒ７とＲ６は互いに独立してメトキシ；ヒドロキシ、又はメチルチオであり、Ｒ５、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ６とＲ，は水素を意味する。

化学式Ｉの化合物は塩基であり、無機又は有機酸及び塩及び錯体形成剤を用いた通常の方法により、所望の生理学上危険のない付加物（塩）に転換される。

塩形成に適した酸は例えば、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、フッ化水素酸、硫酸、リン酸、硝酸、酢酸、プロピオン酸、酪酸、カプロン酸、吉草酸、蓚酸、マロン酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、乳酸、酒石酸、クエン酸、リンゴ酸、安息香酸、パラヒドロキシ安息香酸、フタル酸、桂皮酸、サリチル酸、アスコルビン酸、メタンスルホン酸などである。

次の一般式Ｉの化合物を使用することが好ましい。すなわち、Ｒ３、Ｒ１、Ｒｓ、　Ｒｅ及びＲ１は水素であり、Ｒ１とＲ，はメトキンであり、及び／又はＲ１は水素で、Ｒ８は−（ＣＨＩ）。４−＾という基で、Ａはノクロペンチル、シクロヘキシル、フェニル、モノ又はジメトキシフェニル、又はＲ１は分枝又は直鎖Ｃ４−５アルキルである。

特に化合物中に基（−Ｎ（Ｒ＋ＸＲｔ）は、フェニル基は１つ又は２つのメトキシ基で置換し得る。又はＲ１は水素でＲ７は以下の基の１つである　ノクロペンチル、ンクロヘキシル、フェニル、−（ＣＨ２）２−ＣＨ（ＣＩコ）２ −（ＣＨ２１３−ＯＣＨ３又は基（−Ｎ（Ｒ，）（Ｒ２））が、であり、特にその中のＲ１は水素であり、かつＲ１は次に挙げる基の１つである。

又は基（−Ｎ（Ｒ，ＸＲｔ））はこの新規化合物について、下記の化合物を、好ましいものとして記載することができる。

−）　Ｒ，とＲ，がメトキシである化合物）　ＲｕがＣＮ、０ＣＨｘ、ＣＴｏ　、ＣＩ）Ｉｓ、Ｃ（ＣＨ３）３　、Ｆ、ＣＩ、又はＣＦ、である化合物。

）　−ＮＲＩＲｔが基であり、Ｒ１２とＺは前述のように定義された化合物。

−）Ｒ１とＲ１がメトキシで一１ｆｆｌ、Ｒ，は次に挙げる基の１つである化合物；）　ＮＲＩＲｌがである化合物。

−）　一般式Ｉの化合物；式中、ＲＩ、　Ｒ４、Ｒ，、Ｒ６及びＲ１は水素で、Ｃ１とＣｌＣｌ−４アルコキシ、又はＲ７とＲ。

で−ＯＣＨ！０−又は−０ＣＨｔＣＨｔＯ−を形式し、基−ＮＲ＋　Ｒｔが、又は−ＮＨ（ＣＨＩ）Ｉ又はｔＣＨ（Ｃ−Ｈｚ）＊を意味し、式中、Ｒ１，はＣＦｓ　、　Ｃ（ＣＨｓ）ｓ又は−０ＣＨｙＣｓＨｉであり、ｙはｌ又は２である。

該化合物とあるいは酸、塩基、又は錯体形成剤との並びに酸及び錯体形成剤と該化合物との生理学的に許容し得る塩を意味し、Ｒ１，とｙは前述通りに定義される化合物。

−）　Ｒ，とＲ１がメトキシである化合物）Ｒ７とＲ，がメトキシで、−ＮＲ，Ｒ，が下記の基の１つである化合物ＮＨ−ｃＨ２−ｃｏ２−ｃｏ（ｃ６Ｈ，）　２８Ｍ−ＣＨ２−Ｃ）Ｉ　（Ｃ６１（５）　２一般式Ｉの化合物式中、Ｒ３、Ｒ９、Ｒ５、Ｒ８及びＲ，は水素であり、Ｒ７とＲ１はメトキシで、−ＮＲ＋Ｒ１は下記の基の１つである化合物聞−ＣＭ２Ｃ１２−ＣΣＣＭ。

ＮＨ−ＣＨｆＨ（ＣＨＨＯ２Ｈ−（ＣＨ２）４Ｊ！ＪＪＪこれらのうち、好ましいのは、　−Ｎ　Ｈ−ＣＨ２ＣＨＤＣＨ、である。

次に示す表１と表２は化学式Ｉの化合物の例を列挙したものである。

表１の化合物は、刊行物Ｄ［ｌ　３５００９４Ｌ　ＤＯ３５２５０４ルＥＰ　１９０５６３及びＥＰ　２５２２９９に、以前に記載されていた。

表２の化合物は、一般式Ｉの新規な化合物の例である。

表−１ ■−ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＭ、＋２ＨＣＩＮＨ−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ，ＨＣＩＮＨ−Ｃ’ｚ−ＣＨｚ　−Ｃ”　２−Ｃ’　３Ｈ□Ｎ）Ｉ−Ｎ（堝１２８Ｃ１１Ｍ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＯＣＨ３ＨＣＩ　又１才ＨＩＨＨ−ＣＨ−ＣＩＣｔｌ　）ＩｃＩＣＨ。

ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃｔ１３）１ｃＩＮ）ｌ−ＣＨ２−ＣＭ−ＣＨ２８ＣＩ８８−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＭ２＝ＮＴＣＨ３）２ＭＣＩＮＯ−ＣＨ２−ＣＱ２− ＣＨ２−１１；Ｈ２−ＣＨｉ　ＨＣＩ）ＩＨ＝ｃＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＯＣＨ３Ｈｃ１ＮＮ−ＣＨ，、−Ｃ）＋２−ＣＨｔＣＨ３１２Ｈｃ１表−又ＮＨ−ａＨ２ｃＨ２−Ｑ）−ｃｏ、　２７０−２７２ドイツめ特許出願ＤＥ　３５００９４＋、　１．　ＤＢ　３５２５０４８．８、及びヨーロッパ特許１９０５６３から一般式Ｉの心臓病に効果のある化合物が知られた。

これらの化合物は、これらの出願によると、心臓機能不全区及び／又は脳の新陳代謝障害抑制用に使用される。ヨーロッパ特許出願第２５２２９９（＾）から、これらの化合物が心臓及び神経保護効果を有することが知られ、さらにそれから中央神経系の組織血液循環と組織酸素補給を促進する。

本発明の範囲は前記新規化合物とこれらの化合物を含む医薬製薬がある。本発明はさらにこれらの新規化合物の使用に関する。この化合物は、脳の変性及び壊死性疾病に有効である。同じくそのような病気で危険にさらされた患者の予防的治療も可能である。この化合物の効果は組織血液循環の改善に因るものではない。

したがって、該化合物はてんかん及びアルツｌ＼イマー病の新種しい治療に適するもので、特に血栓症を起こした、又は血栓症を起こす危険のある患者の治療に適するものである。

本発明は、さらに一般式Ｉの古い及び新規の化合物及びその塩を、慢性炎症性過程、潰瘍性大腸炎及びクローン病の治療用の製造及び抗増殖効果を有する薬剤の製造に使用に関するこの化合物の結果は非選択的陽イオンチャンネル（ＵＣＣ）の抑制により説明することができる。

慢性気管支ぜんそくの病理生理学は炎症性細胞の活性化より媒介される炎症性過程カｔｉｆｆＥｌ：アル（ＢＡＲＮＥＳ、＋　９８７　、　ＳＥ　Ｉ　ＦＥＲＴと５ＣＨＶＬＴＺ。

１９９１）。

炎症性細胞のレセプクー調節活性（例えば、好中球性果粒病　（顆粒症）肥液細胞、すなわちその不変細胞系（統）ＨＬ−６０細胞又は感作された、すなわちガンマグロブリンＥを持つＲＢＬ−細胞）は、非選択的カチオンチャンネルのブロックにより、刺激（興奮）の種類には、左右されずに抑制される。（作動薬の性質（例えば、エンドセリン感作（ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ）　、ＰＡＦ、ロイコトリエン、老化ペプチドｆＭＬＰ又は、肥絆細胞に対する抗原）には関係なく阻害される。（ＲＩＮＫ、１９９　Ｇ）。

このチャンネルを通して、受容体の介在細胞活性化の継続の為に必要な細胞外カルシウムに応答する（ＰＵＴＮＥＹ、Ｉ　９９０）。もし、このカルシウムの供給が中断されると、炎症細胞活性が阻害される。

ジヒドロピリジン、又はフェニルアルキルアミンタイプの通常のカルシウム競合薬はＵＣＣｓも炎症過程をも抑制しない（ＷＥＬＬＳ等、、１９８Ｂ）。

フラー２−負荷した細胞の細胞質カルシウムイオン濃縮速度は、細胞活性度として、すなわちＵＣＣブロック剤によるその阻害度として、ＧＲＹＮＫＩＥＷＩＣＺ等（１９８５）により書かれた方法をもとに螢光法的に定量化される。

この措置方法は、この発明の範囲でＵＣＣブロック剤の検出の為の信頼出来るスクリーニング方と実証された。

いわゆる機能性タブシガルギン（ＴＨＡＰＳＩＧＡＲＧＩＮ）は阻害非選択性カチオンチャンネルブロック剤の具体的な特性を適切に証明した。タブシガルギンはＴＨＡＳＴＥＵＰ等（Ｐｒｏｃ、　Ｎａｔｌ、　Ａｃａｄ、　Ｓｃｉ、　（ＵＳＡ）　、８７．２４６６−２４７０．１９９０）により記載された腫瘍プロモーターであって、細胞内のＣａ”ＡＴＰアーゼ、ＩＰ、に感度をもつＣａ”貯蔵を選択的及び非可逆的に阻害する。

その結果、Ｃａ”−貯蔵庫は急速に個渇する。Ｊ、　ＰｔＴＴＮＥＹ　（Ｃａｌｃｉｕａ　１１．６１１−６２４、＋　９９０）が述べたように、この貯蔵庫の個渇は、細胞膜における非選択的カチオンチャンネルの開口の為に起こる生理学上の刺激となる。この結果、細胞中へＮａ’及びＣａ＋ｆが強力にもたらされる。

これらの特性ゆえに、間接の刺激剤としてのタプシガルギンは非選択性カチオンチャンネルの作動物質及びＩＰ、独立性開口に適する。

本発明の範囲で非選択カチオンチャンネルのタブシガルギン刺激はＨＬ６０細胞（人の白血病細胞）、海馬と皮質のノイロン細胞、及びＲＢＬ細胞（ラット好塩基性リンパ腫）に効果を伴って実施され、そのことにより、その特性の細胞系中のこのチャンネルの存在が実証された。

細胞質のＣａ″１濃度（（Ｃａ”）　、）は、細胞増殖及び腫瘍生育時に重要な役割りを果たす（Ｌ、　Ｒ，ＺＡＣＨＡＲ３Ｋ　１．　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅｌ　９　：　Ｉ　４５−１７７．１９８８の要約参照のこと）、特に受容体を通じ、連続的なイノシトール３リン酸塩・　（ＩＰ、−）の仲立ちでレセプター活性で刺激した、Ｃａｔ　４の細胞中への導入は、オンコ遺伝子細胞増殖に決定的な意味を持たせる（Ｕ、キラカワとＹ。

ニシズカ、Ａｎｎ、　ＲＥＶ、　ＣＥＬＬ、　ＢＩＯＬ、２　：　Ｉ　４９−１７８．１９８６）、この機構もまた、転移形成及び「複合−薬剤耐性」に重要な役割りを果たす（上述のり。

Ｒ，ＺＡＣＨＡＲ８ＫＩ、の公開を参照のこと）Ｊ、ＭＥＤ、１９：１４５−１７７．１９８８゜この仮説はタブシガルギンが非選択性カチオンチャンネル（ＵＣＣ）の間接的刺激剤として、高い効果のある腫瘍プロモーターであると同時に、細胞中のＣａ１ “−過負へと導（ものでもあるということを支持している（Ｖ、ＴＨＡＳＲＲＵＰ等、Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ　ｏｒ　ｔｈｅ　ＮＡＴＬ、Ａｃａｄ、　Ｓｃｉ　：　（Ｏ８Ａ）　８７　：　２４６６−２４７０、ｌ　９９０）。

ＵＣＣのＣａ”導入の阻害は、細胞内のＣａイオン濃度正常化とそれによって腫瘍成長などの阻害を導く。

従来のカルシウム拮抗剤は、このＵＣＣを阻害しない。驚くべきことに本発明の化合物がＵＣＣを通って細胞中のカルシウム導入を阻止することが確認された。

Ｓ、Ｈ，ＭＵＲＣＨ等（Ｌａｎｃｅｊ３３９　：　３８１−３８５．１５．０２．１９９２）が示したように、エンドセリンＩが潰瘍性大腸炎及びクローン病等の炎症性腸疾患において病態生理学上重要な役割を果すことを示した。免疫性組織内検出法を用いて、クローン病患者が粘膜下の範囲で、潰瘍性大腸炎の患者が大腸上皮の基底膜の範囲で、健康な普通の人と比べてエンドセリンＩ濃度力叶分かつ大幅に増加しているということを見い出した。これは、エンドセリンの局所分泌が前記疾患で実際に起ると考えられている微小梗塞をともなう連続種層性貧血による広範囲な血管痙彎を引き起こすと推定される。

エンドセリンの血管痙牽効果は、血管収縮性細胞のＣａｔ“過負荷で説明される。

その際、エンドセリンは最初にＩＰ、−を仲介した細胞内のＣａ”放出を引き起こし、続いて、ジヒドロピリジンを非感受性チャンネルを通じて広い範囲の膜内のＣａ“導入が起る。（Ｍ、　Ｓ、　Ｓｉｍｏｎｓｏｎ等Ｃｌ１ｎ、　Ｉｎｖｅｓｔ、　Ｍｅｄ、　１４　：　４９９−５０７．１９９１　；　Ｔ、　Ｍａｓａｋａ：　Ｊ、　Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ、　Ｐｈａｒｍａｃｏｌ、１３　：　５ｕｐｐ１．５．Ｓ　１−　Ｓ４、＋　９８９　；Ｄ、Ｗ、Ｈａｙ、　ＲＪ、Ｐｈａｒｍａｃｏｌ、１００：３８３−３９２．　Ｉ　９９０）、これらのチャンネルは、大腸粘膜細胞中のその存在も要約的に記載された（Ｃｈｒ、　Ｓｉｅｍｅｒｕｎｄ　Ｈ，Ｏｇｅｌｅｉｎ、　Ｅｕｒｏｐｊ、Ｐｈｙｓｉｏｌ、４２０　：　３１９−３２８、＋　９９２）非選択カチオンチャンネルである。

機能性エンドセリン拮抗物質詰抗物質検出の為の適当なスクリーニングモデルとして、Ｆｕｒａ−２負荷人白血病細胞（ＨＬ６０細胞）のエンドセリンを刺激活性が実証された。Ｇ、　ＧＲＹＮＫＩＥＷＩＣＺ等（Ｊ、Ｂｉｏｌ、　Ｃｈｅｍ、２６０：３４０−３４５０゜１９８５）によると、ＨＬ６０細胞（懸濁液）の細胞形質における細胞内のＣａ”濃度は、分光蛍光計でモニターでき、エンドセリンによる細胞活性度として定量できる。刺激は０．１μＭエンドセリンの添加により起り、これは、服用量に依存し、本発明の物質により阻害される。

本発明の物質の機能的内エンドセリン拮抗性機械的エンドセリン拮抗のスクリーニング法としては、非選択カチオンチャンネルの封鎖を通して媒介される。ゆえに機能性タブシガルギンＲＢＬ−ｈｍｌ細胞において、又、拮抗性を検出することが、適するものである。

試験の実施スクリーニングをする為に、Ｃａ”″のない培養培地中でＦｕｒａ−２を負荷した粘着性ＲＢＬ−ｈｍｌ細胞を０．１μＭのタブシガルギンで刺激する。４分後、細胞外のＣａ’″″が１．５ｒ＃ｌに再蓄積され、Ｆｕｒａ−２−蛍光を用いて、非選択カチオンチャンネルを介した広い範囲の膜内Ｃａ”＋導入により起る細胞形質のＣａ”濃度の過剰な増加が記録される。

この導入は、投与量に依存する様式で、非選択カチオンチャンネルでブロック剤のみｌご阻害されるものである。通常的なカルシウム拮抗物質もＩＰ、−転換を刺激する作用物質の特定のブロック剤もタブシガルギンにより間接的に引き起こされた膜内Ｃａ’＋導入を阻止出来ない。本発明の化合物はＵＣＣ阻止により識別される。

個々の粘着性ＲＢＬ−ｈｍｌ細胞の細胞形質中の蛍光光度法カルシウム測定は、クドウとオグラ（１９８６）の神経細胞用に書かれた方法に類似する方法で行なわれる。ＺＥＩＳＳ社製蛍光顕微鏡ＡＸＩＯＶＥＲＴ３５を、ＩＣＭＳ−画像処理システムから成るＨＡＭＡＭＡＴＳＵの画像システムとの組み合わせで使用し、制御ユニットと画像増幅器ＤＶＳ　３０００を備えた残光カメラも使われる。

細胞形質Ｃａ′″′濃縮の速度は、タブンガルギン（０，１μＭ）により刺激した細胞活性度から濃度／時間曲線として連続的記録される。

１０μｍＭの試験物質を加えたものと加えないもの２種の活性化細胞培養曲線を比較する。これらの曲線の下面（ＡＶＣ＝曲線下領域）は積分され細胞活性度として記録される。試験したＵＣＣブロック剤の阻止効果強度は、次の関係式をもとに算出される。

％Ｈ＝　ｌ　ＯＯＡＵＣ＋−ｂ　Ｘ　Ｉ　ＯＯ／ＡＵＣ＋ｂ−ｔ、。１１．。

％Ｈ＝非選択カチオンチャンネルを通ってのカルシウム導入阻止パーセイントで、ＩＯμＭの試験物質で刺激及び阻止される。

ＡＵＣ，、ｂ　＝Ｉ　ＯμＭの阻止用試験物質を加えた刺激薬の存在下で記録された曲線の下面Ａ　Ｕ　Ｃｋｏｎｔｒ、　＝刺激薬の添加後のみに記録された曲線の下面。

前記説明に関連する文献ＢＡＲＮＥＳ　Ｐ、Ｊ、、　ＬＷ、　ＲＯＤＧＥＲａｎｄ　Ｎ、Ｃ，ＴＨＯＭＳＯＮＰａｃｈｏｇｅｎｅｓｉｓ　ｏｅａｓｃｈｍａ、　ｉｎ　”ＡＳＴＨＭＡ、　ｂａｓｉｃ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ　ａｎｄｃｌｉｎｉｃａｌ　ｍａｎａｇｅｍｅｎｃｌ′ＥＤ　ｂｙ　Ｐ、Ｊ、　Ｂ）ＪＪＪＥＳ；　ＭＪ、ＤＥＭＩＣＰＰ、ＥＳＳ、　ＬＯ）！ＤＯＮ、　１９８８ＧＲＹＮＫＩＥＷＩＣＺ　Ｇ、、　Ｍ、　ＰＯＥＮＩＥ　ａｎｄ　Ｒ，Ｙ、　ＴＳＩＥＮＡ　ｎｅｗ　ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ　ｏｅ　Ｃａ”−１ｎｄｉｃａ仁ｏｒｓ　ｗ江ｈ　ｇｒｅａｅｌｙ　ｉｍｐｒｏｖｅｄｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ　ｐｒｏｐｅｒヒｉｅｓ、７ＢＸＯＬ、　ＣＨＥＭ、み追：　３４４０−３４５０．１９８５ＨよりＥ、　Ｍ、　ａｎｄ　Ｍ、Ａ、　ＢＥＡＶＥＮＣａｌｃｉｕｍ　１ｎｆｌｕｘ　ｉｎ　ａ　ｒａ仁　ｍａｓｅ　ｃｅｌｌ　（ＲＢＬ−２Ｈ３１１ｉｎｅ、Ｔ：　ＢＩＯＬ、　Ｃ８Ｈ１７，２ＭＬ１５２２１−１５２２９．１９９１ＫＵＤＯ，Ｙ、　ａｎｄ　Ａ、　ＯＧＵＲＡＧｌｕｅａｍａｃｅ−ｉｎｄｕｃｅｄ　１ｎｃｒｅａｓｅ　ｉｎ　１ｎｅｒａｃｅｌｌｕｌａｒ　Ｃａ”−ＣＯｎＣｅｎｊｒａｔｉＯｎ　ｉｎ　１ｓｏｌａｅｅｄ　ｈｉｐｐｏｅａｍｐａｌ　ｎｅｕｒｏｎｅｓＢＲ，Ｊ、　Ｐ）ＬＡＲＭＡＣＯＬ、　Ｑ：　１９１−４９８．１９８６ＰＵＴＮＥＹ、Ｊ、Ｗ、、ｊｒ。

ｃａｐａｃｉｔａｅｉｖｅ　Ｃａｌｃｉｕｍ　ｅｎｅｒｙ　ｒｅｖｉｓｅｄＣＥＬＬ　ＣＡＬＣ工Ｕ１４ｐ、；　６１１−６２４．１９９０ＲＩＮＫ、　Ｔ、ＪＲｅＣｅｐセｏｒ−ｍｅｄｉａｔｅｄ　ｃａｌｃｉｕｍ　ｅｎｔｒｙＦＥＢＳ　ＬＥＴｒ、　２ｆｉｆｌ：　３８１−３８５，１９９０ＳＥＩＦＥＲＴ、　Ｒ，ａｎｄ　Ｇ、　５Ｃ）ｎＪＬＴＺＴｈｅ　５ｕｐｓｒｏｘｉｄａ　ｆｏｒｍｉｎｇ　ＮＡＤＰＨｏｘｉｄａｓｅ　ｏｆ　ｐｈａｇｏｃｙヒｅｓ：Ａｎｅｎｚｙｍ　ｓｙｓｅｅｍ　ｒｅｇｕｌａｅｅｄｂｙ　ｍｕｌｅ工ｐｌｅ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍＲＥＶ、　ＰＨＹＳＩＯＬ、　Ｂ工ＯＣＨＥＭ、　Ｐ）ＬＡＲＭＡＣＯＩ、、Ｖｏｌ、　１１７゜５ＰＲＩＮＧＥＲＶＥＲＬ、、１９９１ＷＥＬＬＳ、Ｅ、、Ｃ，Ｇ、ＪＡＣＫＳＯＮ、Ｓ、Ｔ、）ＬＡＲＰＥＲ，Ｊ、、ＭＡＮＮ　ａｎｄ　Ｒ，Ｐ。

ＡＯＹＣｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｅｉｏｎ　ｏｆ　ｐｒｉｍａＬｅ　ｂｒｏｎｃｈｏａｌｖｅｏｌａｒ　ｍａｓｈ　ｃｅｌｌｓＩＩ、１ｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ｏｆ　ｈｉｓｔａｍｉｎｅ、ＬＴＣ４ａｎｄ　ＰＧＦ、ａ　ｒａｌｅａｓｓ＋　ｆｒｏｍｐｒｉｍａｍｅ　ｂｒｏｎｃｈｏａｌｖｅｏｌａｒ　ｍａｓセ　ｃｅｌｌｓ　ａｎｄ　ａ　ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ　ｗｉｔｈｒａｗ　ｐｅｒｉｃｏｎｅａｌ　ｍａｓｅ　ｃｅｌｌｓＪ、Ｉｔ’１１６１’ＮＯＬ　工：　３９４１−３９４５．　：Ｌ９８６゜評価結果ＲＢＬ−ｈｍＩ細胞の刺激（タブシガルギン０．１μＭ）後のＵＣＣの抑制パーセントを示す。試験物質のそれぞれの濃縮は１０−１モル（表３）、又はｌμモルと１０μモル（表４）である。

ＲＢＬ　−ｈｍ　ｌ　細胞−タブシガルシン（０，１μＭ）−刺激表４ＲＢＬ−ｈｍｌ細胞　（０，１μＭ）−刺激（１）試験物質の濃縮ｌμモル（２）試験物質の濃縮ｌＯμモルＮＨ−ＣＨ２ＣＨ２（ΣＣＨ３９５，３６７Ｂ。１Ｏ−７ＮＨ−ｃＨ２ｃＨ（ｃｏ３）−Ｃ：）＞ｚ、□　８９．８４ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃり−Ｆ　６９，２５ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ（Ｃ６Ｈ５）２３５．６０　１，６３　Ｙ　１０−６以下の試験に基づき機能的抗炎症性効果が示される。

各々のガラススライドに付着させたＲＢＬ−２Ｈ３細胞（肥絆細胞に関連する腫瘍細胞結合）を使用する。ＲＢＬ−２Ｈ３細胞の培養及び付着はＨＩＤＥとＢＥＡＶＥＮ　（１９９１）中に書いである方法に従って実施する。付着ＲＢＬ−２Ｈ３細胞を感作するため、該細胞を２時間室温でｌ　：　２０００希釈販売されているガンマグロブリンＥ溶液とジニトロフェノール−牛血清アルブミン複合体（ＤＮＰ−ＢＳＡ−抗原）とともにイキュベートする。続いて細胞流降を行なう。

０．１ｍｌのＤＮＰ−ＢＳＡ溶液（ＩＱμｇ／ｍｌ）添加により、細胞負のＣ＆ ″３過負荷により媒介される、強い免疫学的細胞活性化が生じる。各々付着したＲＢＬ−２８３細胞の細胞血負中の蛍光光度法でのカルシウム測量は、この明細書で先に説明しているクドウとオグラ（１９８６）によって神経細胞について書かれた方法に類似する方法によって行う。

この試験で用いる比較物質としては、約５０パーセントの抗原−誘導細胞活性の阻害をひき起こすクロモグリケート（１０μＭ）を用いる。

この試験においては、先に述べた化合物の値と比較できる阻害パーセント値を示す。

表５ＲＢＬ−２Ｈ３細胞；ＡＫ（単クローンーマウスＮ：２０００刺激：ＤＮＰ−ＢＳＡ　（１０μｇ／ｍ１）Ｆｓ＋ｎｏｔａｒｏ１　３Ｂ、ＳＨａ−Ｃｈｒｏｍｏ、　９，０本発明の物質の拮抗増殖効果を確認するために、テトラゾリウム分析を用（１ての様々な人間の腫瘍細胞のマイクロ培養試験により、被試験化合物は比較物質ベラパミルより、５〜１００倍もの強い効果がみられるという驚くべき結果を示した。

試験物質の拮抗増殖効果は、モスマン（Ｊ、ＩＭＭＵＮＯＬ、ＭＥＴＨ，６５：　５５−６３．１９８３）、デニゾット等（Ｊ、ＩＭＭＵＮＯＬ、ＭＥＴＨ，８９：２？ｌ−２７７，１９８６）及びＪ、エリアマン等（ＩＮＴ、Ｊ、ＣＡＮＣＥＲ４６：１１３−１１７．１９９０）に書かれているＭＴＴ試験を用（１て’ ｉｎ定した。（ＭＴＴ＝　（３−（４，５−ジメチルチアゾール−２イル）−２，５−ジフェニル臭化テトラゾリウム）　ＣＨＥＭＩＣＯＮ　Ｉｎｃ、　［１１Ｓｅｇｕｎｄ、　Ｃａ、　ＵＳＡ）。この指示薬は完全なミトコンドリアを含む生存細胞でのみ代謝されて青Ｌ１ホルマザン生成物に変る。次にあげる人間の腫瘍を示し我々の試験で使用した。すなわちＡ３４９（肺の腺癌）、Ａ４３１（外陰表皮癌腫）、ＰＣ３（前立腺の癌腫５ＫＢＲ３（乳房の癌腫）、）ＩＴ−２９（ＣＸＩ　ｌ）（結腸の癌腫）及びに５６２（慢性骨髄球性白血病細胞）である。　゛この試験はマイクロ滴定（ｔ）ブレード上で実施された。

各々のくぼみは、細胞懸濁液（０，２Ｘ１０１細胞／ｍｌ）　１００ｍｌを含む。

インキュベージコン培地としてｌＯ％加熱不活性化胎児血清と５０μｇ／ｍｌのゲンタマイシンを含むＲＰＭｌ　１６４０を用いた。細胞懸濁液は０．２４．４８又は７２時間ＣＯ＊（５％）−空気（９５％）の混合気体中で３７℃で飽和湿度下でインキュベートした。このインキュベートでは、各種濃度の拮増殖試験物質の存在下及び非存在下で行なっ、た。試験物質はＤＭＳＯ（最終希釈度：０，１％）中に溶解させた。続いて１０μｌのＭＴＴ溶液（３■／ｍｌ）と３時間後に０．０８ＮのＨＣＩを含むイソプロパツール溶液１００μｌを添加した。さらに１時間後に、マイクロプレートリーダーで５７０ｔｍ　（比較波長６３０ｍ）の光吸収を測定した。

この光の吸収は直接生きている細胞数に比例するものである。試験した物質の半数最大抑制濃度はｌμｇ／ｍｌであった。

先に述べた機能エンドセリン及びタブシガルギン拮抗薬の摘出した血管痙牽効果は、単離した血管の調製で確認された。すなわちラットから摘出したの逆行性潅流、自体鼓動するランゲントリルフ（ＬＡＮＧＥＮＤＯＲＦＦ心臓において、電磁気流量測定（ヒユーゴザツクスミ気概器、ＭＡＲＣ）Ｉ）を用いて、冠状潅流を継続的に定量した。この測定装置で血管痙拳の範囲時間とパターンを非常に高い精度で記録することができた。この潅流を１１００ｎのエンドセリン濃度で行うと、環状潅流の流れはＩ＋から５ａ＋１／ｗｉｎに減少する。

潅流の制限は本発明の物質により逆転することができる。本発明の化合物に関するＦｕｒａ　−２負荷ＲＢＬ−ｈｍｌ細胞でのタブシガルギン阻害、又はＦｕｒａ−２を負荷ＨＬ６０細胞でのエンドセリン阻害効果の潜在性は、試験物質のＬａｎｇｅｎｄｏｒｆ　ｆプレパラートで検出された試験物質の血管痙牽効果ではっきりと相関が認められた。それゆえ、この事実から非選択カチオンチャンネルの封鎖が試験物質の血管痙牽のエンドセリン拮抗作用が下回ると結論することができる。

この化合物は腸管内と腸管外の双方に投与され得る。示唆される経口投与量は、 −投与量たり活性物質０．０５から５００■、静脈投与では、ｌ投与量たり活性物質０．１から１５（１ｍの範囲である。望まれる臨床投与量は適応症と投与方式に依存し、実験により確定される。

適した投与形式は例えば錠剤、カプセル、座薬、溶液、シロップ、エマルジ５ン、エーロゾル又は分散性粉末である。錠剤は、例えば既知の賦形剤、例えば炭酸カルシウム塩、リン酸カルシウム又は乳糖のような不活性希釈剤、コーンスターチ又はアルギン酸のような錠剤分解剤、でん粉又はゼラチンのような結合剤、ステア！ル酸マグネシウム又はタルクのような滑剤、及び／又はカルボキシポリメチレン、カルボキシメチルセルロース、酢酸・フタル酸セルロース、又はポリビニノげセテート；を活性物質と混合することにより製造する。錠剤は、多層から成るものでも良い。

錠剤と同じ方法で作られた芯部を、通常錠剤の被膜に用いられている物質、例えば、コリトン又はシェラツク、アラビアゴム、タルク、二酸化チタン又は砂糖のようなもので覆うことにより被覆された錠剤を作ることができる。

遅延性の放出又は非相溶性を避ける為に芯部は多層から成り得る。同様に遅延放出達成の為、錠剤被膜は多層から成り得る。その際、先の錠剤で述べた賦形剤の使用も可能である。

本発明の活性物質含有シロップ又はその組み合わせでは、さらに、サッカリン、シクラメート、グリセリン、又は糖のような甘味剤ならびに香味向上剤、例えばバニラ又はオレンジエキスのような香料を含み得る。又その他にナトリウムカルボキシメチルセルロースのような分散助成剤又は凝集剤、例えば酸化エチレンを含む脂肪アルコールの凝縮生成物のような湿潤剤、又は）くラヒドロキシベン゛ノエートのような防腐剤を含み得る。

注射溶液は通常の方法で、例えばパラヒドロキシベンゾエートのような防腐剤又は、エチレンジアミンテトラ酢酸のアルカリ金属塩のような安定化剤を添加して作られ次いで注入瓶又はアンプル中に移される。

１種以上の活性物質、又は活性剤の組み合わせを含むカプセルは、活性物質を乳糖又はソルビトールのような不活性担体と混ぜ、ゼラチンカプセル中に包み込むことにより作られる。

適当な座薬は、例えば中性脂肪又はポリエチレングリコール、又はその誘導体のような、この目的のために提供される担体と混合することにより作られる。

式■の化合物の製造法はヨーロッパ特許出願第１９０５６３号及び第２５２２９９号に記載されており、本文中にこの文献を引用する。

該化合物は一般式■の化合物を一般式■鼎−（Ｒ１）（Ｒｔ）　Ｃ式中、Ｒ，及ｒＪＲ１は、これまで、定義したものと同じである。）の化合物と反応させることにより得られる。

（式中、基Ｒ１、Ｒ４、Ｒｓ−Ｒｅ、Ｒ１、Ｒ１及の、は、これまで定義したものとのなしである。）一般式■の出発化合物は、高沸点の不活性溶媒、例えばジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミド、塩化ペンゾール又はへキサメチルリン酸トリアミドに溶解させ、一般式■のアミン成分と共に反応終了まで還流下で加熱する。反応時間は１時間から１５時間で使われた最終成分に依存する。

反応可能なアミンの場合、アルコール又はテトラヒドロフランも溶媒として使用でき、若干の状況下では、オートクレーブ中で反応を行うことも有利であろう。

使用したアミンが液状で十分な高温で沸騰する場合、反応は溶媒を加えることなく、過剰量のアミン（例えばアニリン、モルホリン、フェニルエチルアミン、）中で、任意に窒素雰囲気中で行なうことが出来る。

場合によっては、反応中に溶媒としても働き、かつ例えばジメチルホルムアミドのような反応中の分裂によって所望のアミンとして得ることができるものを使用することもできる。

発明の適する９−アミノピリダジノピラゾロイソキノリンは塩基であり、通常方法で無機又は有機酸を用いて、所望の生理学危険のない酸付加塩に転換できる。

塩の形成に適した酸は、例えば塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、フッ化水素酸、硫酸、リン酸、硝酸、酢酸、プロピオン酸、酪酸、カプロン酸、吉草酸、蓚酸、マロン酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、乳酸、酒石酸、クエン酸、リンゴ酸、安息香酸、バラヒドロキシ安息香酸、パラアミノ安息査酸、フタル酸、桂皮酸、サリチル酸、アスコルビン酸、及びメタンスルホン酸である。

例（実施例）５．６−シヒドロー２．３−ジメトキシ−９−４−［（２，６−ジメチル）ピペラジノコピリダジノ　（４’、５’　：３，４）ピロロ（２，１−ａ）イソキノール−塩化水素３ｇのＳ−メチル化合物（塩化水素）、５ｍｌの１−（２，６−シメチルフエニル）ピペラジンと５０ｍ１のトルエンを約５時間還流下で加熱する。反応終了（ＴＬＣによるモニター）後、放冷し、反応生成物を吸引濾過する。

２回トルエンで洗浄し、ＣＨ，Ｃ１，と希ＭａＯ）１中で分離する。

有機層を数回水で洗浄し、Ｎａ１ＳＯ４で乾燥させ、蒸発により、残渣を、任意に、シＩＪカゲル（ｒ）カラム（溶離液Ｃ）ｌ、ＣＩ！　！　／Ｎａ０）ｌ＝　１００　＋　１０Ｖ、Ｖ、　’）を通して精製後、少量のＣＨ，Ｃ１，中に取り入れ、エタノール性ＨＨＣＩを加え、塩化水素化合物に転換する。

収量　２．８６ｇ（６８％理論収率）、ＭｏＰｏ：２９４−２９５℃一般式Ｉａの活性剤　３０．０Ｉ１ｇ乳糖　１００．０■ コーンスターチ　７５・θ■ ゼラチン　３・θ■　− ステアリン酸マグネシウム　２・θ■ ２１０．０■ 艶佳活性物質、乳糖及びコーンスターチの混合物を、１０％ゼラチン水溶液と共にＩｗのメツシュ幅の篩を通して造粒し、４０℃で乾燥させもう一度篩をこすり通らせる。そのようにして得られた顆粒をステアリン酸マグネシウムと混ぜ加圧する。そのようにして得られた芯部は通常の方法で糖、二酸化チタン、タルク及びアラビアゴムからなるコーテイング液を用いた被膜で覆う。

完成した被覆錠をみつろうで磨かく。

ｂ）　錠剤一般式■の活性物質　３０．０■ 乳糖　１００．０■ ２１０．０■ ！床活性物質とステアリン酸マグネシウムを可溶性でん粉の水溶液と共に造粒しその顆粒を乾燥して乳糖及びコーンスターチと共によく混合する。次にその混合物を２１０ｍｇ重量の錠剤に加圧成形する。

Ｃ）　カプセル請求の範囲第１８項の活性物質　２０．０■乳糖　２３０．０■ コーンスターチ　４０．０■ ３００、０■ ！佳活性物質、乳糖及びコーンスターチをまず混合機の中に入れて混合し、それから粉砕機中で混ぜる。その混合物を再び混合機の中に入れ徹底的にタルクと混ぜ機械で硬ゼラチンカプセル中に詰め号。

フロントページの続き（３１）優先権主張番号　Ｐ４２２０３８０．５（３２）優先日　１９９２年６月２２日（３３）優先権主張国　ドイツ（ＤＥ）（８１）指定国　ＥＰ（ＡＴ、ＢＥ、ＣＨ，ＤＥ。

ＤＫ、ＥＳ、ＦＲ，ＧＢ、ＧＲ，ＩＥ、ＩＴ、ＬＵ、ＭＣ，ＮＬ、ＰＴ、ＳＥ）、ＡＵ、ＢＧ、ＢＹ、ＣＡ、ＣＺ、ＦＩ、ＨＵ、ＪＰ、ＫＲ，Ｎｏ、ＮＺ、ＰＬ、ＲＵ、ＳＫ、ＵＡ（７２）発明者　ロース　オツトードイツ連邦共和国　デー６５０１　シュヴアーセ３６

Claims

【特許請求の範囲】１．慢性・炎症性過程、潰瘍性大腸炎及びクローン病の治療用薬剤の製造及び抗増殖活性を有する薬剤の製造への、化学式（Ｉ）の化合物又は該化合物と酸もしくは錯体形成剤の使用； ▲数式、化学式、表等があります▼Ｉ式中、等しい又は異なり得るＲ１及びＲ２は、水素；Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル；Ｃ２ −Ｃ８アルケニル；フェニル（該フェニル環は場合により１又は２ヵ所をハロゲン又はメトキシで置換されてもよい。）；プロパルギル；直鎖又は分枝の飽和、又は不飽和のＣ１−５アルキル基（下記の基で置換されていてもよい：ヒドロキシ、Ｃ１−４アルコキシ、ハロゲン、ＮＨ２、１〜２個の炭素原子を持つＮＨ− アルキル，Ｎ，Ｎ−ジ（Ｃ１−Ｃ２）アルキルアミノ、２〜４個の炭素原子を持つＮＨ−アシル、Ｃ３−７シクロアルキル、１又は２フェニル基（その際フェニル環は１又は２ヵ所をハロゲン、ＣＦ３、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−２アルコキシ、１〜２個の炭素原子を持つＮＨ−アルキル，１〜２個の炭素原子を持つＮ，Ｎ−ジアルキル、ＮＨ２、２〜３個の炭素原子を持つＮ−アシル、アルキルスルホニルアミノ又はベンジルオキシ）、フリル、チエニル、場合によってはさらに異種原子として酸素原子又は硫黄原子を含み得る窒素含有３又は六員複素環（その際環は場合によってはＣ１−４アルキルで置換される））；又はＲ１とＲ２と共に窒素原子を含み、場合によってはさらに異種原子として酸素原子又は窒素原子を含み得る３から７の員環を形成し、（その際この環は場合によってはフェニル−（Ｃ０−Ｃ４）−アルキルで置換される（その際このフェニル環は１又は２ヵ所をハロゲン、ＣＦ３、（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル又はＣＮで置換し得る；その際置換基は互いに同じか又は異なることが出来る））ことを意味する；又はＲ１が水素の場合、Ｒ２は同種又は異種であり得るＲ７とＲ８はヒドロキシ；Ｃ１−４アルコキシ；又はＣ１−４アルキルチオを意味し、同種又は異種であり得るＲ８とＲ９は水素；ヒドロキシ；Ｃ１−４アルコキシ；Ｃ１−４アルキルチオ；又は基（−Ｎ（Ｒ１０）（Ｒ１１））を意味するし、式中Ｒ１０は水素；又はＣ１−４アルキルであり、Ｒ１１は水素；又はＣ１−４アルキルで、その際アルキル残基は場合によってはヒドロキシ、メトキシ、又はフルフリルで置換され得る；又は置換基Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８とＲ９のうち隣同士の２つの置換基で、−Ｏ− （ＣＨ２）１又は２−Ｏ−を形成し、各々残りの２つの置換基は前述のように定義される。２．請求の範囲第１項の化学式（Ｉ）の使用：式中、同じか又は異なるものであり得るＲ１とＲ２は水素；Ｃ２−Ｃ７シクロアルキル；Ｃ２−Ｃ５アルケニル；フェニル（その際フェニル環は場合によっては１又は２ヵ所をハロゲン又はメトキシで置換される）；プロパルギル、直鎖又は分枝の、飽和又は不飽和Ｃ１−５アルキル基（下記の基で置換されていてもよい。）ヒドロキシ、Ｃ１−４アルコキシ、ハロゲン、ＮＨ２、１〜２個の炭素原子を含むＮＨ−アルキル，Ｎ，Ｎ− ジ（Ｃ１−Ｃ２）アルキルアミノ、２〜４個の炭素原子を含むＮＨ−アシル、Ｃ３７シクロアルキル、フェニル基（その際フェニル環は、１又は２ヵ所をハロゲン、Ｃ１−２アルキル、Ｃ１−２アルコキシ、１〜２個の炭素原子を含むＮＨアルキル，１〜２個の炭素原子を含むＮ，Ｎ−ジアルキル、ＮＨ２、２〜３個の炭素原子を含むＮアシル、アルキルスルホニルアミノ、フリル、チエニル、場合によってはさらに異種原子として酸素原子又は硫黄原子を含み得る窒素を含む五又は六員環（その際環は場合によってはＣ１−４アルキルで置換される）；又はＲ１とＲ２は共に窒素原子で、場合によってはさらに異種原子として１個の酸素原子、又は１個の窒素原子を含み得る３から７員環を形成し、その際、この環は場合によってはフェニル−（Ｃ０−Ｃ４）−アルキルで置換され得る、（その際フェニル環は１つ又は２つの部位をハロゲン又はメトキシで置換され得る。）；又はＲ１が水素の場合、Ｒ２は−ＮＨ２；ジ（Ｃ１−Ｃ２）アルキルアミノ；アセトニルアミノ；−ＮＨ（Ｃ２−Ｃ３）アシル；アルキル鎖中に各々１〜３個の炭素原子をもつ１個のアルキルスルホニル基又はアルコキシカルボニル基；イソプロピリデンアミノ基（−Ｎ＝Ｃ（ＣＨ３）２）又は窒素原子と場合によってはさらに異種原子として１個の酸素原子、窒素原子又は硫黄原子を含む５−又は６員複素環を意味し得る；同種又は異種であり得るＲ３、Ｒ４とＲ５は水素、又はＣ１ −４アルキル基であることを意味する；３．請求の範囲第２項の化合物の使用：式中−ＮＲ１Ｒ２に▲数式、化学式、表等があります▼を意味し、式中のフェニル基は１又は２個のメトキシ基で置換され得る。４．請求の範囲第１項から第３項の化合物の、式中−ＮＲ１Ｒ２か基 ▲数式、化学式、表等があります▼ であり、式中のフェニル基は請求の範囲１、２、又は３のいずれか１項ように置換され得る。５．請求の範囲第１項又は第２項の化合物の使用：式中−ＮＲ１Ｒ２が基▲数式、化学式、表等があります▼であり、式中のフェニル環の１又は２ヵをフッ素、塩素、ＣＦ３、メトキシ、メチル、エチル又はＣＮで置換している。６．請求の範囲第１項又は２項の化合物の使用：式中のＲ１は水素でＲ２は直鎖又は分枝のＣ１−４アルキル基で、該アルキル基はＣ３−７シクロアルキル、チエニル又は１又は２個の無置換フェニル基又は請求の範囲第１項又は２項で定義された置換基をもつ置換フェニル基、で置換されている。７．請求の範囲第６項の化合物の使用：式中Ｒ１は水素でＲ２は（Ｃ１−Ｃ４）アルキルシクロヘキシル、特に−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ１１である。８．請求の範囲第６項の使用：化合物の式中Ｒ１は水素でＲ２は（Ｃ１−Ｃ４）アルキルフェニル、その内のフェニル基は無置換であるか又は１又は２ヵ所がＦ、Ｃｌ、ＣＦ２、メチル、エチル、メトキシ又はエトキシで置換されている。９．請求の範囲第１項又は２項の化合物の使用：式中のＮＲ１Ｒ２が以下の基の１つである； ▲数式、化学式、表等があります▼▲数式、化学式、表等があります▼▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼▲数式、化学式、表等があります▼▲数式、化学式、表等があります▼▲数式、化学式、表等があります▼▲数式、化学式、表等があります▼▲数式、化学式、表等があります▼▲数式、化学式、表等があります▼▲数式、化学式、表等があります▼▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼▲数式、化学式、表等があります▼▲数式、化学式、表等があります▼▲数式、化学式、表等があります▼▲数式、化学式、表等があります▼▲数式、化学式、表等があります▼▲数式、化学式、表等があります▼▲数式、化学式、表等があります▼▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼１０．請求の範囲第９項の化合物の使用：式中のＮＲ１Ｒ２が以下の基の１つである；▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼ １１．請求の範囲第１項から１０項のうちの１項の化合物の使用：式中Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６及びＲ９は水素でＲ７とＲ８はＣ１−４アルコキシであるか又はＲ７とＲ８で−ＯＣＨ２Ｏ−又は一ＯＣＨ２ＣＨ２Ｏ−を形成する。１２．請求の範囲第１１項の化合物の使用：式中Ｒ７及びＲ８がメトキシである。１３．一般式Ｉの化合物及び該化合物と酸又は錯体形成剤の並びに酸及び錯体形成剤と該化合物との生理学的に許容し得る塩：▲数式、化学式、表等があります ▼Ｉ式中Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６及びＲ９は水素でＲ７及びＲ８はＣ１−４アルコキシか又はＲ７とＲ８で−ＯＣＨ２Ｏ−又は−ＯＣＨ２ＣＨ２Ｏ−を形成し、基ＮＲ１Ｒ２は▲数式、化学式、表等があります▼又は▲数式、化学式、表等があります▼（式中Ｚは０、１又は２であり、Ｒ１２はＣＮ、ＣＦ２、ハロゲン、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル又は（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシである：なお、下記式の化合物は除く。 ▲数式、化学式、表等があります▼ １４．式中Ｒ７及びＲ８がメトキシである請求の範囲第１３項の化合物。１５．式中Ｒ１２はＣＮ、ＯＣＨ３、ＣＨ２、Ｃ２Ｈ５、Ｃ（ＣＨ３）３、Ｆ、．Ｃｌ又はＣＦ２である、請求の範囲第１３項又は１４項の化合物。１６．式中−ＮＲ１Ｒ２が基 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中Ｒ１２とＺは請求の範囲第１３項から１５項で定義される通りである。）である請求の範囲第１３〜１５項のうち１項の化合物。１７．請求の範囲第１３項の化合物であって、式中Ｒ７及びＲ８はメトキシであり、−ＮＲ１Ｒ２は以下の基の１つである； ▲数式、化学式、表等があります▼ １８．請求の範囲第１７項の化合物であって、式中のＮＲ１Ｒ２が下記の基である化合物： ▲数式、化学式、表等があります▼ である。１９．一般式Ｉの化合物あるいは、該化合物と酸又は錯体形成剤との並びに酸及び錯体形成剤と該化合物との生理学的に許容し得る塩：▲数式、化学式、表等があります▼Ｉ（式中Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６及びＲ９は水素であり、Ｒ７とＲ８はＣ１−４アルコキシであるか又はＲ７とＲ８で−ＯＣＨ２Ｏ−又は−ＯＣＨ２ＣＨ２Ｏ−を作り、かつ基−ＮＲ１Ｒ２は、▲数式、化学式、表等があります▼ 又は−ＮＨ（ＣＨ２）１又は２ＣＨ（Ｃ４Ｈ５）２であり、式中Ｒ１３はＣＦ３、Ｃ（ＣＨ３）２又は−ＯＣＨ２Ｃ６Ｈ５で、ｙは１又は２である。２０．請求の範囲第１９項の化合物であって、式中−ＮＲ１Ｒ２が基▲数式、化学式、表等があります▼ を意味し、式中Ｒ１３とｙは請求の範囲第１９項で定義された通りである。２１．Ｒ７とＲ８がメトキシである請求の範囲第１９項又は２０項の化合物。２２．請求の範囲第１９項の化合物であって、式中Ｒ７とＲ８はメトキシであり、−ＮＲ１Ｒ２は以下に挙げる意味を持つ。 ▲数式、化学式、表等があります▼ ２３．一般式Ｉの化合物ならびに該化合物と酸又は錯体形成剤の並びに酸及び錯体形成剤と該化合物との生理学的に許容し得る塩：▲数式、化学式、表等があります▼Ｉ式中Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６及びＲ９は水素であり、Ｒ７とＲ８はメトキシで− ＮＲ１Ｒ２は以下に挙げる基の１つである。 ▲数式、化学式、表等があります▼ ２４．請求の範囲第２３項の化合物であって、式中−ＮＲ１Ｒ２は以下の基の１つである。 ▲数式、化学式、表等があります▼ 特に▲数式、化学式、表等があります▼が望ましい。２５．請求の範囲第１３項から２４項の一般式Ｉの化合物あるいは該化合物と、酸又は錯体形成剤を有する並びに酸及び錯体形成剤と該化合物との生理学的に許容し得る塩の製造方法であって、一般式ＩＩの化合物に、▲数式、化学式、表等があります▼ＩＩ（式中の基Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８及びＲ９は先に述べた意味を持つ。）一般式ＩＩＩの化合物（−ＨＮ−ＣＲＥ１）（Ｒ２）ＩＩＩ）（式中Ｒ１とＲ２は先に述べた意味を持つ。）と反応させ、得られた最終生成物を場合によって既知の方法で並びに酸及び錯体形成剤と該化合物との生理学的に許容し得る塩転換する方法。２６．請求の範囲第１３項から２４項のいずれか１項以上の活性物質として、通常の賦形剤又は担体との組み合わせで含む医薬製薬。２７．請求の範囲２６項の医薬製薬の調剤の製造法で、それにより、請求の範囲第１３から第２４項のいずれか１項の化合物を通常のガレノス賦形剤及び又は担体と共に処理し医薬製造を形成することを特徴とする方法。