JPH07504448A - 高活性セルラーゼと第四級アンモニウム化合物とを有する洗剤組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 高活性セルラーゼと第四級アンモニウム化合物とを有する洗剤組成物 技　術　分　野 本発明は、クリーニング効果と柔軟化効果とを有する洗剤組成物に関する。

背　景　技　術 良好なりリーニング性を示すだけではなく良好な布帛柔軟化性能および他の布帛 ケア上の効果を示す洗剤組成物へのニーズは、当該技術分野で定着している。

ＥＰＰＯ２０２６５２９号明細書には、スメクタイト型粘土とクリーニングおよ び布類柔軟化性能を有する成る陽イオン化合物とを含有する洗剤組成物が記載さ れている。

布類クリーニングおよび布帛用ハーシュネス（ざらざらした触感、ｈａｒｓｈｎ ｅｓｓ）減少剤に関するセルロース分解酵素、即ち、セルラーゼの有効性は、以 前から認識されている。英国特許第２，０７５，０２８号明細書、英国特許第２ ，０９５，２７５号明細書および英国特許第２゜０９４．８２６号明細書には、 改善されたクリーニング性能のためのセルラーゼを有する洗剤組成物が開示され ており；英国特許第１．３６８．５９９号明細書には、セルラーゼを使用して綿 含有布帛のハーシュネスを減少することが開示されており；米国特許第４，４３ ５，３０７号明細書には、フミコラ・インゾレンズ　（）Ｉｕ■ｉｃ。

Ｉａ　１ｎｓｏｌｅｎｓ）並びにそれらの画分から誘導されるセルロース分解酵 素（ＡＣＸＩと称する）をハーシュネス減少洗剤添加剤として使用することが教 示されている。

ＥＰ−Ａ第０　２６９　１６８号明細書には、マイルドなアルカリ性ｐＨ範囲に 処方され且つ兼備された布帛クリーニング、布帛柔軟化および布帛ケア性能を与 えるセルラーゼを含有する最適化洗剤組成物が開示されている。

ＥＰ−Ｂ第０　１２５　１２２号明細書は、長鎖第三級アミンとセルラーゼとの 相乗混合物を使用することによってクリーニングと布類柔軟化性能とを兼備する 洗剤組成物が開示されている。

ＷＯ第８９１０９２５９号明細書には、高いエンドアーゼ活性を有し且つセルロ ースに対する親和力を有するエンドグルカナーゼ成分を含む綿含有布帛のハーシ ュネスを減少するのに有用なセルラーゼ製品が開示されている。

しかし、なから、セルラーゼの実用的活用は、セルラーゼ製品、例えば、前記の 従来技術の文書に開示のものが複雑な混合物であり、それらの成る両分しか布帛 ケアに関して有効ではないという事実によって妨げられてきた。

このように、洗剤工業用セルラーゼのコスト上有効な工業的生産を実施すること は困難であり；且つ布帛に対して所望の効果を得るためには多量のこのようなセ ルラーゼ製品を適用することが必要であろう。

また、セルラーゼ生産の改良が洗剤での応用性に関して十分に一致し得ることは 、しばしば、証明されていなかった。セルラーゼの洗剤応用に関連するセルラー ゼ選択基準を規定することは、ＥＰ−Ａ第３５０　０９８号明細書に開示のＣ１ ４ＣＭＣ法によって可能にされた。

洗濯試験液中のセルラーゼタンパク質２５Ｘ１０−６重量％での固定化放射性標 識カルボキシメチルセルロースの最小除去率１０％は、高活性セルラーゼを与え ることが見出された。本発明に係る高活性定義に入る好ましい群のセルラーゼは 、１９９０年５月５日出願の同時係属テンマーク特許出願第１１５９／９０号明 細書に開示されている。本質上フミコラ・インゾレンズＤＭ１８００から誘導さ れる部分精製４３ｋＤセルラーゼに対して生育されたモノクローナル抗体と免疫 反応性である均質なエンドグルカナーゼ成分からなるセルラーゼ製品が開示され ている。

セルラーゼのこの特定のエンドグルカナーゼ成分がセルロース含有物質の処理に 有利であるという知見は、例えば、組換えＤＮＡ技術を使用することによってセ ルラーゼをコスト上有効に産生ずることを今や可能にし且つ少量のみのセルラー ゼ製品を適用し且つ布帛に関して所望の効果を得ることを可能にする。

驚異的なことに、水溶性第四級アンモニウム化合物と高活性セルラーゼとの相乗 混合物を使用することによりて優れたクリーニング性能と柔軟化性能とを兼備す る改良洗剤組成物が処方できることが、見出された。前記セルラーゼは、洗濯試 験液中のセルラーゼタンパク質２５Ｘ１０−６重量％でＣＭＣ除去率少なくとも １０％を有する。

本発明の別゛の目的は、主要洗浄サイクル用に本発明の洗剤組成物を利用するこ とを特徴とする布帛を洗濯機中で処理する方法を提供することにある。

発　明　の　開　示 本発明は、式 〔式中、ＲはＣ−Ｃアルキルであり、ＲＲｌ　８　１６　２１３ およびＲの各々は独立に０１〜Ｃ４アルキルまたはヒドロキシアルキル、ベンジ ル、または −（Ｃ２Ｈ４ｏ）ｘＨ（式中、Ｘは２〜５の値を有する）であり、ＲＲまたはＲ ４の１個以下はベンジルであり、Ｘは陰イオンである〕 の第四級アンモニウム化合物およびセルラーゼを含む洗剤組成物であって、前記 セルラーゼは洗濯試験液中のセルラーゼタンパク質２５Ｘ１０−６重二％でＣ１ ４ＣＭＣ法に従って固定化放射性標識カルボキシメチルセルロースの除去率少な くとも１０％を与えることを特徴とする洗剤組成物を提供する。

本発明によれば、好ましいセルラーゼは、フミコラ・インゾレンズＤＭ１８００ から誘導される部分精製４３ｋＤセルラーゼに対して生育されたモノクローナル 抗体と免疫反応性である均質なエンドグルカナーゼ成分から酵素の活性、特にセ ルラーゼ酵素の活性は、異なる分析法によって各種の応用に対して規定されてき た。これらの方法は、すべて予想される使用中の性能の実際的な評価または少な くとも使用中の性能と相関する測定値を与えようとする。欧州特許出ＭＥ　Ｐ− Ａ第３５００９８号明細書に詳述したように、方法の多く、特にセルラーゼ製造 業者によってしばしば使用されているものは、洗濯洗剤組成物中のセルラーゼの 使用中の性能とは十分には相関しない。これは、これらの活性測定法が開発され た各種の他の使用条件のためである。

ＥＰ−Ａ第３５００９８号明細書に記載の方法は、洗濯洗剤組成物中でのセルラ ーゼ活性のランク付けに予測的相関であり且つ予測的相関を有するように開発さ れた。

それゆえ、本発明は、ＥＰ−Ａ第３５００９８号明細書に開示の方法を使用して 、本発明で有用であるセルラーゼと本発明の目的を提供しないであろうものとを 区別するためにセルラーゼを選別する。ＥＰ−Ａ第３５００９８号明細書に開示 の方法から採用された選別法（以下Ｃ１４ＣＭＣ法と称する）は、次の通り記載 できる。

原理 選別用Ｃ１４ＣＭＣ法の原理は、洗浄液中の規定されたセルラーゼ濃度において 布基体からの固定化カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）の除去をｎ１定する ことである。ＣＭＣの除去は、Ｃ１４放射性炭素を使用することによりＣＭＣの 若干の放射性標識によって測定する。

Ｃ１４の量の単純な計数は、セルラーゼ活性の評価を可能にする。

試料調製 ＣＭＣ調製：放射性ＣＭＣストック溶液を表Ｉに従って調製する。放射性ＣＭＣ は、ＥＰ−Ａ第３５００９８号明細書に記載の方法によって得ることができる。

布帛基体二布帛基体は、５ＣＩｌｌＸ５Ｃ１１１の大きさを有するモスリン綿見 本である。それらに放射性標識ＣＭＣストック溶液０．３５ｍ１を中心において 接種する。次いで、モスリン綿見本を風乾する。

ＣＭＣの固定化：放射性標識ＣＭＣをモスリン綿見本上に固定化するために、強 国オリジナル・ハウナラ製のラウンダーオメーター装置［リニテスト・オリジナ ル・ハウナラ（Ｌｉｎ１ｔｅｓｔ　Ｏｒｉｇｉｎａｌ　ｌ１ａｕｎａｕＪを使用 する０ラウンダーオメーターの金属製ジャーに硬水（Ｃａ　”４オン４ミリモル ／リットル）４００ｍｌを充填する。最大数１３の見本が、ジャー当たり使用で きる。次いで、ジャーをラウンダーオメーター装置中で４０分かけて２０℃から ６０℃までの昇温サイクルにおいてインキュベートする。インキュベーション後 、見本を水道水下で１分間すすぐ。それらを絞り、少なくとも３０分間風乾させ る。

ＥＰ−Ａ第３５００９８号明細書に従って、固定化放射性ＣＭＣを有する見本の 試料も、洗浄なしの「ブランク試料」として測定できる。

試料処理 洗濯試験液：洗濯試験液を表Ｈの組成に従って調製する。

それをｐＨ７，５に釣り合わせる。洗濯試験液は、セルラーゼ試験試料を加える 基準である。加えるべきセルラーゼの量を測定する前に水〔残部（１００％とす る）〕を加えることによって洗濯試験液を希釈しないように注意を払うべきであ る。この選別試験で使用するセルラーゼの量は、洗濯試験液中のセルラーゼタン パク質２５×１０−６重量％（１４，５℃で０．２５ａ＋ｇ／リットルに等価） を与えるように加えるべきである。

洗浄法：次いで、放射性標識ＣＭＣがこのようにして接種された見本を洗濯シミ ュレーション法で処理する。洗濯法を強国ハウナウのオリジナル・ハウナラ製の ラウンダーオメーター型装置「リニテスト・オリジナル・ハウナラ」中で模擬す る。個々の見本を２０１Ｊガラスバイアルに入れる。バイアルに洗濯試験液１０ ｍ１を充填し、次いで、液密に密封する。５個までのバイアルを各ラウンダーオ メータージャーに入れる。ジャーに洗濯シミュレーション用熱媒として水を充填 する。洗濯シミュレーションを４０分かけて２０℃から６０℃まで昇温サイクル として行う。

試料の加工後、バイアルを冷水に水没した後、各見本をバイアルから取り出し、 ビーカー中で流れる軟水下ですすぎ、絞り、少なくとも３０分間風乾させる。

測定 放射性標識ＣＭＣ除去を測定するために、シンチレーション計数装置、例えば、 ＬＫＢ　１２１０ウルトラベータ（Ｕｌｔｒａｂｅｔａ）シンチレーション計数 装置を使用する。

最も正確な結果を得るために、特定のシンチレーション計数装置の最適の操作の 指図マニュアルに従うべきである。例えば、ＬＫＢ１２１０ウルトラベータシン チレーション計数装置の場合には、下記の方法に従うべきである。測定すべき見 本を、シンチレータ−液体（例えば、バラカードからのシンチレータ−２９９） １２ｍｌが充填されたプラスチックバイアルに入れる。次いで、見本を少なくと も３０分間安定化させる。次いで、バイアルをＬＫＢ　１２１０ウルトラベータ シンチレーシヨン計数装置に入れ、見本のそれぞれの放射能計数が得られる。

セルラーゼのみによるＣＭＣ除去量を測定するために、同時に接種されているが セルラーゼなしの洗濯試験液中で処理されている見本の測定が、必要である。次 いで、セルラーゼの活性を放射性機：ａＣＭＣ除去率として表現する。この％は 、下記の式 （式中、ＸＯはセルラーゼなしの洗濯試験液で処理された見本の放射能シンチレ ーション計数であり、ＸＣは評価すべきセルラーゼを含有する洗濯試験液で処理 された見本の放射能シンチレーション計数である）によって計算する。

統計的考慮、方法確認： 統計的に健全な結果を与えるために、標準統計的分析を使用すべきである。所定 の例の場合には、ＬＫＢ　１２１０ウルトラベータシンチレーシヨン計数装置を 使用して、各放射能シンチレーション計数用に３個の見本の試料サイズが使用で きることが見出された。

方法を内部クロスチェックによって確認するために、ＥＰ−Ａ第３５００９８号 明細書に従う「ブランク試料」の測定および計算が推奨される。これは、誤差を 検出し且つ排除することを可能にするであろう。

特表千７−５０４４４８　（５） 結果の解釈 記載の選別試験は、本発明の一部分ではないセルラーゼと比較しての本発明の活 性基準を満たすセルラーゼを同定するための迅速な独特の信頼できる方法を提供 する。

前言ビＣ１４ＣＭＣ法に従う固定化放射性標識ＣＭＣの除去率１０％以上は、そ れぞれのセルラーゼが本発明の要件を満たすことを示すことが見出された。

１０％より高い除去率がそれぞれのセルラーゼの場合により高い活性を示すこと が、当業者に自明であろう。

それゆえ、Ｃ１４ＣＭＣ法に従って洗濯試験液中のタンパク質濃度で２５％より 高い放射性標識ＣＭＣの除去または好ましくは５０％より高い放射性標識ＣＭＣ の除去を与えるセルラーゼが洗濯洗剤で使用するためのセルラーゼの一層良い性 能の指摘を与えるであろうことが予想される。

また、Ｃ１４ＣＭＣ法の場合により高い濃度のセルラージの使用がより高い除去 率を与えるであろうことが予想された。しかしながら、セルラーゼ濃度とそれに よって得られる除去率との間には線形の証明された相関は、存在しない。

また、Ｃ１４ＣＭＣ法の場合により高い濃度のセルラージの使用がより高い除去 率を与えるであろうことが予想された。

表１＝放射性Ｃ１４標”ｎｃＭｃストック溶液（すべての％は全溶液の重量％） 全ＣＭＣ★　９９．２Ｘ１０’％ （ＣＭＣは置換度約０．４７〜約０．７０．　７を有する洗剤等級ＣＭＣである べきである） エタノール　１４９ｇ５．１２ＸｌＯ−３％脱イオン水　８４９１５．６８　ｘ 　１０−３％計　１００％ ★全ＣＭＣは使用するシンチレーション計数装置で十分に明瞭な読みを可能にす る放射能を与えるために非放射性ＣＭＣおよび放射性ＣＭ　Ｃを含有する。例え ば、放射性ＣＭＣは、０．７ミリキユ一リー／ｇの活性を有することができ且つ １：６．７の比率で非放射性ＣＭＣと混合できる。

表■：洗濯試験液 （すべての％は全溶液の重量％） 線状Ｃ１２アルキルベンゼンスルホン酸　０．１１０％ココナツアルキルサルフ ェート（ＴＥＡ塩）　０．０４０％Ｃアルコールエトキシレート（ＥＯ７）　０ ．１００％１２〜１５ ココナツ脂肪酸　０．１００％ オレイン酸　０．０５０％ クエン酸　０．０１０％ トリエタノールアミン　０．０４０％ エタノール　ｏ、ｏｅｏ％ プロパンジオール　０．０１５％ 水酸化ナトリウム　０．０３０％ ギ酸ナトリウム　ｏ、ｏｔｏ％ プロテアーゼ　ｏ、ｏｏｅ％ 水（Ｃａ２．５ミリモル／リットル）、　残部ｐＨ調整剤（ＨＣＩまたはＮａＯ Ｈ溶液＞　（１００とおよびセルラーゼ　する） 水溶性第四級アンモニウム化合物 水溶性可溶性第四級アンモニウム化合物は、式〔式中、Ｒ１は０８〜０１６アル キルであり、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４の各々は独立に０１〜Ｃ４アルキル、０１〜 Ｃ４ヒドロキシアルキル、ベンジル、および−（Ｃ２Ｈ４ｏ）ＸＨ（式中、Ｘは ２〜５の値を有する）であり、Ｘは陰イオンである） を有する。ＲＲ　またはＲ４の１以下はベンジルであるべきである。

Ｒ１の好ましいアルキル鎖長は、特にアルキル基がココナツまたはパーム核脂肪 から誘導される鎖長の混合物であるかオレフィン増成またはオキソアルコール合 成によって合成的に誘導される場合にはＣ１２〜Ｃ１５である。

Ｒ２、Ｒ３およびＲ４の好ましい基はメチルおよびヒドロキシエチル基であり且 つ陰イオンＸはハライド、メトサルフエート、アセテートおよびホスフエートイ オンから選んでもよい。好適な第四級アンモニウム化合物の例は、 ココナツトリメチルアンモニウムブロミドココナツメチルジヒドロキシエチルア ンモニウムブロミド デンルトリエチルアンモニウムクロリドデシルジメチルヒドロキシエチルアンモ ニウムブロミド ミリスチルトリメチルアンモニウムメチルサルフエート ラウリルジメチルベンジルアンモニウムブロミドラウリルメチル（エテンオキシ ）４アンモニウムブロミド である。

本発明の組成物の水溶性陽イオン成分は、ｐＨ１０で０．１％水溶液中で陽イオ ン形で存在することができる。

水溶性陽イオン化合物は、通常、洗剤組成物の０．２〜１０重量％の量で存在す るであろう。

洗剤補助剤 本発明の洗剤組成物は、洗濯洗剤で通常見出される成分を包含し、これらの成分 は組成物の９５重量％までの量で存在する。

これらとしては、非イオン界面活性剤および双性界面活性剤、ビルダー塩、漂白 剤およびそのだめの存機前駆物質、抑泡剤、汚れ沈殿防止／再付着防止剤、酵素 、光学増白剤、着色剤および香料が挙げられる。

広範囲の陰イオン界面活性剤は、本発明の組成物で使用できる。

好適な陰イオン非石鹸界面活性剤は、アルキルベンゼンスルホン酸、アルキル硫 酸、アルキルポリエトキシエーテル硫酸、パラフィンスルホン酸、α−オレフィ ンスルホン酸、α−スルホカルボン酸およびそれらのエステル、アルキルグリセ リルエーテルスルホン酸、脂肪酸モノグリセリド硫酸および脂肪酸モノグリセリ ドスルホン酸、アルキルフェノールポリエトキシエーテル硫酸、２−アクジロジ アルカン−１−スルホン酸、およびβ−アルコキシアルカンスルホン酸の水溶性 塩である。石鹸も、好適な陰イオン界面活性剤である。

特に好ましいアルキルベンゼンスルホネートは、線状または分枝アルキル鎖中に ９〜１５個の炭素原子、より特に１１〜１３個の炭素原子を有する。好適なアル キルサルフエ−トは、アルキル鎖中に１０〜２２個の炭素原子、より特に１２〜 １８個の炭素原子を有する。好適なアルキルボリエトキシエーテルサルフエート は、アルキル鎖中に１０〜１８個の炭素原子を有し且つ１分子当たり平均１〜１ ２個のーＣ　Ｈ　２　Ｃ　Ｈ　２　０一基を有し、特にアルキル鎖中に１０〜１ ６個の炭素原子を有し且つ１分子当たり平均１〜６個の一ＣＨ２ｃＨ２ｏ一基を 有する。

好適なバラフィンスルホネートは、本質的に線状であり且つ８〜２４個の炭素原 子、より特に１４〜１８個の炭素原子を有する。好適なα−オレフィンスルホネ ートは、１０〜２４個の炭素原子、より特に１４〜１６個の炭素原子を有する。

α−オレフィンスルホネートは、三酸化硫黄と反応させた後、存在するいかなる スルトンも対応のヒドロキシアルカンスルホネートに加水分解するような条件下 で中和することによって生成できる。好適なα−スルホカルボキシレートは、６ 〜２０個の炭素原子を有する。α−スルホン化脂肪酸の塩だけではなく炭素数１ 〜１４のアルコールから生成されるそれらのエステルもここに包含される。

好適なアルキルグリセリルエーテルサルフエートは、炭素１１０〜１８のアルコ ールのエーテル、より特にヤシ油および夕ローから誘導されるものである。

好適なアルキルフェノールボリエトキシエーテルサルフエートは、アルキル鎖中 に８〜１２個の炭素原子を有し且つ１分子当たり平均１〜６個の一ＣＨ２ＣＨ２ ０一基を有する。好適な２−アシルオキシアルカン−１−スルホネートは、アシ ル基中に２〜９個の炭素原子を有し且つアルカン部分中に９〜２３個の炭素原子 を有する。

好適なβ−アルキルオキシアルカンスルホネートは、アルキル基中に１〜３個の 炭素原子を有し且つアルカン部分中に８〜２０個の炭素原子を有する。

前記非石鹸陰イオン界面活性剤のアルキル鎖は、ヤシ油、タローなどの天然物か ら誘導でき、または例えば、チーグラーまたはオキソ法を使用して合成的に生成 できる。水溶性は、アルカリ金属、アンモニウム、またはアルカノールアンモニ ウム陽イオンを使用することによって達成できる。ナトリウムが好ましい。陰イ オン界面活性剤の混合物は、本発明によって意図される。満足な混合物は、アル キル基中に１１〜１３個の炭素原子を有するアルキルベンゼンスルホネートおよ びアルキル基中に１２〜１８個の炭素原子を有するアルキルサルフェートを含有 する。

好適な石鹸は、８〜１８個の炭素原子、より特に１２〜１８個の炭素原子を有す る。石鹸は、ヤシ油、タロー、パーム油などの天然油脂の直接ケン化により、ま たは天然源または合成源のいずれがから得られる遊離脂肪酸の中和により生成で きる。石鹸陽イオンは、アルカリ金属、アンモニウムまたはアルカノールアンモ ニウムであることができ、ナトリウムが好ましい。

組成物は、陰イオン洗剤３〜４０％、好ましくは陰イオン洗剤４〜１５％、より 好ましくは陰イオン界面活性剤５〜１０％を含有する。

前記のように、本発明の組成物は、良好な柔軟化とクリーニング性能とを兼備し 且つ後者を維持するために全界面活性剤特性が陰イオンであることが必須である 。それゆえ、水溶性第四級アンモニウム化合物対陰イオン界面活性剤成分のモル 比は、１．１より低くあるべきであり、望ましくは１：１．５より低くあるべき である。本発明の好ましい態様、例えば、ヘビーデユーティ−洗濯洗剤処方物に おいては、モル比は、１．２より低くあるべきである。

これらの拘束を条件として、陽イオン化合物は、通常、組成物の０．５〜１５重 量％、好ましくは１〜５重量％、最も好ましくは１．５〜３重量％の量で存在す るであろう。

非イオン界面活性剤および双性界面活性剤は、全界面活性剤の５０重量％までの 量で配合してもよいが、通常、全界面活性剤の３０％未満の量で存在する。「全 界面活性剤」とは、陰イオン界面活性剤（ａ）と陽イオン成分（ｂ）と添加され た非イオン界面活性剤および／または双性界面活性剤との和を意味する。全界面 活性剤重量に対して１５〜２５％の非イオン界面活性剤の配合（全組成物基準で １〜２％に対応）は、油汚れの除去における洗剤は、ＨＬＢ　１１．５〜１７７ ．０の水溶性エトキシ化物質であり、その例としては（限定せずに）Ｃ１ｏ〜Ｃ ２ｏ第一級および第二級アルコールエトキシエトキシレートおよびＣ６〜Ｃ１ｏ アルキルフエノールエトキシレートが挙げられる。アルコール１モル当たり７〜 ３０モルのエチレンオキシドと縮合された０１４〜０１８線状第一級アルコール が、好ましい。例は、Ｃ１４〜ｃ１５（ＥＯ）７．０１６〜Ｃｌ８（ＥＯ）２５ 、特にｃ、Ｂ−Ｃ１８（ＥＯ）１１である。

好適な双性界面活性剤としては、０１２〜ｃ１６アルキルベタインおよびスルタ インが挙げられる。これらの双性界面活性剤および非イオン界面活性剤および他 の双性界面活性剤および非イオン界面活性剤は、ローリンおよびホイリングの米 国特許第３，９２９，６７８号明細書に開示されている。

洗浄性ビルダーは、特性が無機または有機であることができる。好適な水溶性無 機アルカリ性洗浄性ビルグー塩の非限定例としては、アルカリ金属の炭酸塩、ホ ウ酸塩、リン酸塩、ポリリン酸塩、重炭酸塩、およびケイ酸塩が挙げられる。こ のような塩の特定例としては、ナトリウムおよびカリウムの四ホウ酸塩、重炭酸 塩、炭酸塩、トリポリリン酸塩、ビロリン酸塩、ペンタポリリン酸塩およびヘキ サメタリン酸塩が挙げられる。サルフェートも、通常、存在する。

好ましい水溶性ビルダーは、トリポリリン酸ナトリウムおよびケイ酸ナトリウム であり且つ通常両方とも存在する。特に、組成物の実質的割合、例えば３〜１５ 重量％のケイ酸ナトリウム（固形分）または比率（Ｓ　ＩＯ２：本発明で有用な 更に他の種類の洗浄性ビルダー物質は、式 ％式％ （式中、２およびｙは少なくとも６に等しい整数であり、２対ｙのモル比は１． ０：１から０．５：１の範囲内であり、Ｘは１５〜２６４の整数である）の不溶 性アルミノケイ酸ナトリウムである。好ましい物質は、Ｎ　ａ　（Ｓ　ｉＯＡ　 １０　）　２７　Ｈ２０である。

存在するならば、水溶液中の組成物の特定のｐＨを与えるのに十分な水溶性アル カリ性塩が残るならば、水溶性ビルダー塩に部分的に取り替えてのアルミノシリ ケート５〜２５重量％の配合は、好適である。

洗浄性ビルダー塩は、通常、組成物の１０〜８０重量％、好ましくは２０〜７０ 重量％、最も通常３０〜６０重量％の量で配合する。

漂白剤、制泡剤、汚れ沈殿防止剤、タンパク分解酵素、デンプン分解酵素または 脂肪分解酵素、特にタンパク分解酵素、および光学増白剤は、存在してもよい。

非直接着色剤、および香料は、製品の美的許容性を改善するために必要に応じて 、通常配合する。

本発明に係る洗剤組成物は、液体、ペーストまたは粒状形であることができる。

本発明に係る粒状組成物は、「コンパクト形」であることもでき、即ち、通常の 粒状洗剤より比較的高い密度を有していてもよく、本発明に係る組成物は通常の 粒状洗剤と比較して少量の「無機充填剤塩」を含有するであろうし；典型的な充 填剤塩は硫酸および塩化物のアルカリ土類金属塩、典型的には硫酸ナトリウムで あり；　「コンパクト」洗剤は、典型的には、充填剤塩１０％以下を含む。

組成物の調製 洗剤組成物は、物理的形に適当なように、いかなる方法によっても、例えば、成 分を混合することにより、それらを同時凝集することにより、またはそれらを液 体担体に分散することにより調製してもよい。粒状形においては、洗浄性塩ビル ダーは配合でき且つ粒状物は非感熱成分とビルダー塩との水性スラリーを噴霧゛ 乾燥して噴霧乾燥粒状物を形成することによって調製し、その噴霧乾燥粒状物に 過酸塩、酵素、香料などの感熱成分を混入してもよい。水溶性第四級化合物は、 噴霧乾燥用スラリーに配合してもよく、または陽イオン成分を水または別の好適 な揮発性液体に溶解または分散し、次いで、他の感熱固体がそれらと乾式混合す る前または後に、この溶液または分散液を噴霧乾燥粒状物上に噴霧することによ って配合してもよい。或いは、水溶性第四級化合物は、他の感熱固体と一緒に乾 式混合できる。粘土成分は、柔軟化効果に関係しない理由、例えば、製品の最適 の色に好ましいように、噴霧乾燥用スラリーに添加してもよく、または乾式混合 してもよい。

本発明を下記の非限定例によって例示する。

下記の例は、本発明の組成物を例証することを意味するが、本発明の範囲（該範 囲は以下の請求の範囲に従って決定される）を限定するか、さもなければ規定す ることを必ずしも意味しない。

例■ 請求項１のセルラーゼ性能パラメーターの臨界性下記の試験を行った。

試験条件 洗浄温度：６０℃（昇温サイクル） 洗浄時間：４０分 ｐｕ−７，５ 水硬塵：４ミリモル／ＩＩ 洗剤濃度：１％ 洗剤組成物：　ＥＰＡ第３５００９８号明細書の例１参照セルラーゼ： １）ノボ・ノルディスクによって供給されているセルザイム（Ｃｅｌ　ｌｕｚｙ ｍｅＲ）一対照２）４３ｋＤエンドグルカナーゼ一本発明に係るセルラーゼ 試験結果二 セルラーゼによるＣ　１４　ＣＭＣ除去率セルラーゼなしの洗剤（対照）　０ 洗剤＋セルザイムＲ タンパク質り、５　ｒａｇ／　ｆｌ　（１５０ｘ　１０−６％）　１２．７タン ハク質３．ＯＬ１ｇ／　Ｄ　（３００Ｘ　１（１−６１）　１７．７タンパク質 ４．５ｍｇ／Ω（４５０Ｘ　１０〜６％）　２１．５洗剤＋４３ｋＤエンドグル カナーゼ ９　：／ハクｉｊＯ，３ｍｇ／　（１（３０ｘ　１０−６％）　２０．３結果の 議論： 前記データは、市販のセルザイム以上の本発明のセルラーゼの請求パラメーター の臨界性を明らかに実証する。

例■ ２組の異なる洗剤組成物は、調製する（すべてはコンパクト粒状洗剤組成物に基 づく）。

このようなコンパクト粒状洗剤組成物は、典型的には、下記の成分を含有する。

線状アルキルベンゼンスルホネート（ＬＡＳ）　９．５％アルキルサルフェート 　３％ 非イオン界面活性剤　４％ クエン酸三ナトリウム　２１％ 硫酸ナトリウム　６％ 前記洗剤組成物を後述のように下記の成分で補完した。

第一組：４３ｋＤエンドグルカナーゼ （★）第四級　セルラーゼ２．４ｍｇ／アンモアンモニウムルラーゼなし　洗浄 液ｆＩ（２４０Ｘ　１０””（札Ｃ１２〜Ｃ１４ジメチル（ヒドロキシエチル） アンモアンモニウム　セルラーゼなし　洗浄液Ω（９２００Ｘ（★）０１２〜Ｃ １４ジメチル（ヒドロキシエチル）アンモセルラーゼは、着用された綿布帛を脱 ビル（ｄｅ−ｐＮＩ）する性質を有する。モデル試験においては、脱ピルの測定 を使用してセルラーゼ性能を評価する。着用された青色のパジャマ布帛の見本を ラウンダーオメーター中で異なる洗浄液で処理した（温度３０℃）。水硬度は、 カルシウム２．５ｍＭであった。タンブル乾燥後、布帛を異なる洗剤マトリック スの直接比較によって脱ピルについて格付けした。目視格付は、０〜４のスケー ル（ＰＳＵ）を使用して専門判定者によって行った。このスケールにおいては、 ０は差なしに与えられ且つ４は最大差に与えられる。ＰＳＵ格付は、統計的再計 算であり、平均４回の反復実験を行い、ＬＳＤ　（最小有意差）は信頼水準９５ ％で０．５ＰＳＵである。

前記結果は、４３ｋＤセルラーゼの性能が第四級アンモニウム化合物によって有 意に改善されるので第四級アンモニウム化合物と４３ｋｄセル゛ラーゼとの間の 相乗作用を実証する。

きれいな布帛洗濯ロード３．５）ｃｇを６０℃で自動ドラム洗濯機ミーレ（Ｍｉ ｅｌｅ）４２３中で洗浄した。水の硬度はカルシウム２．５ｍＭであり且つ組成 物濃度は洗浄液中で　０．７％であった。柔軟性評価のために、テリータオルの 見本を柔軟性の評価のために前にライン乾燥した。比較柔軟性評価は、０〜４の パネルスコア単位（ＰＳＵ）のスケールを使用して専門判定者によって行った。

このスケールにおいては、０は差なしに与えられ且つ４は最大差に与えられる。

柔軟性を１回の洗浄サイクル後、１回の洗浄サイクル後、４回の洗浄サイクル後 、８回の洗浄サイクル後に評価した。ＬＳＤは、信頼水準９５％で０．５ｐｓｕ である。下記の組成物を調製する。

線状アルキルベンゼンスルホネート　８　８　８　Ｂタローアルキルサルフェー ト　２２２２０１２〜Ｃ１４ジメチルヒドロキシエチルアンモニウム知リド　５ 　−　５　− 脂肪アルコール（ＣＩ２〜Ｃ１５）エトキシレート　１．５　１．５　１．５　 １．５ビルダー／キレート化剤 ゼオライトＡ　１８．５　１ｇ、５　１８．５　１８．５マレイン酸とアクリル 酸との共重合体、ナトリウム塩　５　５　５　５漂白剤 過ホウ酸ナトリウム　１１　１１　１１　１１Ｎ、　Ｎ、　Ｎ、　Ｔ−テトラア セチルエチレンジアミン、　４４４４香料　０．５　０．５　０．５　０．５柔 軟系 スメクタイト／モンモリロナイト粘土　１２．５　１２．５　１２．５　１２． ５ポリエチレンオキシド　０．３　０Ｊ　Ｏ，３０，３緩衝剤 カーボネー）　１０．６　１０．６　１０．６　１０．６シリケート（２，０） 　４　４　４　４ＣＭＣ，キレートイＩＪＪ 混合およびスプレーオン（抑泡剤、雑多な成分）　残部（１００とする）楔！ 洗剤組成物Ｉ［［４３ｋＤセルラーゼ０．５％（タンパク質４０×１０−６％ｍ ｇ洗浄液）十第四級アンモニウム成分５％ｖｓ洗剤組成物ＩＶ　４３ｋＤセルラ ーゼ０．５％（タンパク質４０Ｘ１０　％＠ｇ洗浄液）、第四級アンモニウム成 分なし 洗剤組成物Ｖ　第四級アンモニウム組成物５％ｖｓ洗剤組成物■　第四級アンモ ニウム成分なし信頼９５％で有意差 結論： 前記結果は、第四級アンモニウム化合物／４３ｋＤセルラーゼ組み合わせが両方 の成分の個々の作用の和より統計的な有意な良い性能を与えることを実証する。

処方例 下記の組成物が調製される。

トリポリリン酸ナトリウム　２４　−　−　２５ゼオライトＡ　−２０２０− クエン酸ナトリウム　−５５− オレイン脂肪酸　−一一一 メタホウ酸Ｎａ８水和物　−−一− ポリエチレンオキシド分子量５ＭＭ　Ｏ，０５−−０，０５ポリ工チレンオキシ ド分子量０．３ＭＭ　−０，３−−硫酸ナトリウム　１２　１０　１５　５炭酸 ナトリウム　５　７　−　１５ ケイ酸ナトリウム　４　４　４　４ 過ホウ酸ナトリウム（１水和物）　１５　１５　１８　１５Ｎ、Ｎ、　Ｎ、　Ｎ −テトラアセチルエチレンジアミン　３　３　−　３ＣＭＣＯ，３０Ｊ　Ｏ，３ ０Ｊ ポリアクリレート（ＭＷ１０００〜２０，０００）　−１，５１−ポリアクリレ ート（ＭＷ４０００〜５０００）　−−３−マレイン酸−アクリル酸共重合体　 ２−−３セルラーゼ　０．５　０．５　０．５　１スメクタイト／モンモリロナ イト粘土　１．０．５　１０．５　１０．５　１０．５ホスフエート　−　−− ０，３ ６Ｎ合およびスプレーオン　（翻、プロテアーゼ、アミラーゼ、リポラーゼ。

Ｉｆ！Ｌ　［ｉｔ多な成分、水分および数置成分　）　残部（１００とする）ト リポリリン酸ナトリウム　−−一 ゼオライドＡ　１５１９− クエン酸ナトリウム　−６− オレイン脂肪酸　−−１ メタホウ酸Ｎａ８水和物　−−１ ポリ工チレンオキシド分子Ｅ１５ＭＭ　−−−ポリエチレンオキシド分子量０． 　３ＭＭ　Ｏ，３０，３−スルホネート　−２− 炭酸ナトリウム　１１　１１　− ケイ酸ナトリウム　４　３　− 過ホウ酸ナトリウム（１水和物）　１１　１２　−Ｎ、　Ｎ、　Ｎ、　Ｎ−テト ラアセチルエチレンジアミン　４　３　−ＣＭＣＯ，４０，３− ポリアクリレート（ＭＷ１０００〜２０，０００）　−−−ポリアクリレ−）（ ＭＷ４０００〜５０００）　−−−マレイン酸−アクリル酸共重合体　５　４　 −セルラーゼ　１０．５１ スメクタイト／モンモリロナイト粘土　１２　１２　１０．５層状シリケート　 ７　−　− 混合およびスプレーオン　（ａプロテアーゼ、アミラーゼ、リボラーゼ、Ｍｆｌ Ｋ抑泡剤、Ｕ憤り、水分およ１１紛）　残部（１００とする）配列の記述　配列 ＩＤ番号１： ２２０　２２５ｚ３゜ ＣＧＡＡＡＴＣ，ＡＣＡ　ＣＴＣＣＣＡＡＴＣＡ　ＣＴＧＴＡＴＴＡＣＴ　ＴＣ ＴＴＧＴＡＣＡＴ　ＡＡＴＴＴＣＧＴＣＡ　ＴＣＣＣＴＣＣ`ＧＧ　＋０２４ ＧＡＴＴＧＴＣＡＣＡ　ＴＡＡＡＴＧＣＡＡＴ　ＧＡＧＧＡＡＣＡＡＴ　ＧＡＣ ＴＡＣ１０６０配列の記述、配列ＩＤ番号２ ＡＳＰ　ＴｒＯＰｌｕｓ　ＬｖＳ　Ａｓｎ　二ｆ　Ａｓｏ　Ａｓｎ　Ｐｒｏ　Ｓ ｅｒ　Ｐｈｅ　Ｓｅｒ　Ｐｈｅ　Ａｒｇ　Ｇｌｎ　Ｖａｔ１７″Ｓ　＋ｇｏ　＋ ａｓ Ｇｉｎ　Ｃｙｓ　？−ｏ　二ｌａ　Ｇｌｕ　Ｌｉ’−Ｖａｌ　Ａｊ！　Ａｒ（１ ｒｈｒ　Ｓｌ　ｌ　Ｃａｒｓ　Ａｒｑ　Ａｒｑ　Ａｓｎ　二T） １９つ　２００ ｅｕ 配列の記述：配列ＩＤ番号３゜ ＷＴτｃｃｃｃｃ　ｃｃｃｃτＣＡＴＴＣＡＣＴＴＣＡ丁ＴＣＡ　ＴＴＣＴＴＴ ＡＧＡＡ　ＴＴＡＣＡＴＡＣＡＣＴＣＴＣＴＴＴＣＡＡ　６O ＴＣＣＴＣＴＣＡＴＣＡＧＣＡＧＧＣＴＴＧτＣＡＴＴＧＴＡＴＡ　ＧＣＡＴＧ にＣＡＴＣＣＴＧＧＡＣＣＡＡＧ　ＴＣＴＴＣＧＡＣＣＣ１R３４ ＴＴ（、ＴＴ（、ＴＡＣＡ　ＴＡＧＴＡＴＡＴＣＴ　τＣＡＴＴ［、ＴＡＴＡ　 ＴＡＴＴＴＡ（、ＡＣＡ　ＣＡＴＡＧＡＴＡＧＣＣＴＣＴＴfＴＣＡＧ　１３９ ４ ＣＣＡＣＡＡＣＴＣＣＣＴＡＣＡＡＡＡＧＡ　ＣＴＴＧＧＣＡＧＧＣ丁Ｔ（、Ｔ ＴＣＡＡＴＡ　ＴＴＧＡＣＡＣＡＧＴ　ＴＴＣＣＴＣＣＡＴ`　１４５４ ＮいＡｕＡＭ倶んＣφＡ〜いＡ　１４７３配列の記述：配列ＩＤ番号４゜ Ａｓｐ　Ｓｅｒ　Ｔｙｒ　Ｐｒｏ　（＋１ｕ　Ｌｅｕ　Ｌｅｕ　Ｌｙｓ　Ａｓｐ 　Ｇｌｙ　Ｃｙｓ　Ｈａｓ　Ｔｒｐ　Ａｒｑ　Ｐｈｅ　Ａｓ■ Ｃｙｓ　りｒｏ　５ｔｓ　Ａｌａ　Ｌｅｕ　Ｌｔ”＋　Ａｓｏ　！ｌ！　Ｓ＝ｒ 　Ｇｌｙ　Ｃｙｓ　Ｌｙｓ　Ａｒｑ　Ａｓｏ　Ａｓｐ　ＡｓB ２１：　２１５　２２０ フロントページの続き （５１）　Ｉｎｔ、　Ｃ１，’　識別記号　庁内整理番号Ｃ１２Ｎ　９／４２　 ８８２７−４Ｂ ／／ＣＣ１２Ｎ　１／２１ Ｃ１２Ｒ１：６４５） （Ｃ１２Ｎ　１／２１ Ｃ１２Ｒ１：０１） （Ｃ１２Ｎ　９／４２ Ｃ１２Ｒ１ニア７） （Ｃ１２Ｎ　１５１０９ Ｃ１２Ｒ１：６４５） （７２）発明者　ベーク、アンドレ　セザールベルギー国ボンハイデン、プツェ ステーンウェーク、２７３ Ｉ Ｃ１２Ｒ１：６４５）

Claims (19)

【特許請求の範囲】
1. １．式 Ｒ１Ｒ２Ｒ３Ｒ４Ｎ＋Ｘ− 〔式中、Ｒ１はＣ８〜Ｃ１６アルキルであり、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４の各々は独 立にＣ１〜Ｃ４アルキルまたはヒドロキシルアルキル、ベンジル、または−（Ｃ ２Ｈ４）ｘＨ（式中、ｘは２〜５の値を有する）であり、Ｒ２、Ｒ３またはＲ４ の１個以下はベンジルであり、Ｘ−は陰イオンである〕 の第四級アンモニウム化合物およびセルラーゼを含む洗剤組成物であって、該セ ルラーゼは洗濯試験液中のセルラーゼタンパク質２５×１０−６重量％でＣ１４ ＣＭＣ法に従う固定化放射性標識カルボキシメチルセルロースの除去率少なくと も１０％を与えることを特徴とする洗剤組成物。
2. ２．セルラーゼが、本質上フミコラ・インゾレンズＤＳＭ１８００から誘導され る部分精製約４３ｋＤセルラーゼに対して生育された抗体と免疫反応性であるか 、または前記４３ｋＤエンドグルカナーゼに相同する均質なエンドグルカナーゼ 成分からなる、請求項１に記載の洗剤組成物。
3. ３．前記セルラーゼのエンドグルカナーゼ成分が等電点約５．１を有する、請求 項２に記載の洗剤組成物。
4. ４．前記エンドグルカナーゼ成分が、前記エンドグルカナーゼ成分または前記エ ンドグルカナーゼ成分の前駆体をコード化するＤＮＡ配列並びにエンドグルカナ ーゼ成分またはその前駆体をコード化するＤＮＡ配列の発現を可能にする機能を コード化するＤＮＡ配列を担持する組換えＤＮＡベクターで形質転換された宿主 細胞を、エンドグルカナーゼ成分またはその前駆体の発現を可能にする条件下で 培地中で培養し、エンドグルカナーゼ成分を培養物から回収することからなる方 法によって産生可能である、請求項２に記載の洗剤組成物。
5. ５．セルラーゼが、または、添付配列一覧表１Ｄ＃２に示すアミノ酸配列を有す るか、エンドグルカナーゼ活性を示すその同族体である、請求項１に記載の洗剤 組成物。
6. ６．前記セルラーゼがフミコラの種、例えば、フミコラ・インゾレンズによって 産生可能である、請求項３に記載の洗剤組成物。
7. ７．セルラーゼ化合物が、添付配列一覧表１Ｄ＃４に示すアミノ酸配列を有する エンドグルカナーゼ酵素であるか、または、エンドグルカナーゼ活性を示すその 同族体であることを特徴とする、請求項１に記載の洗剤組成物。
8. ８．前記エンドグルカナーゼ酵素がフザリウム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）の種、例え ば、フザリウム・オキシスポラム（Ｆｕｓａｒｉｕｍｏｘｙｓｐｏｒｕｍ）によ って産生可能である、請求項７に記載の洗剤組成物。
9. ９．前記酵素が酵素をコード化するＤＮＡ配列を含むＤＮＡ構築によって産生す る、請求項５、６、７または８に記載の洗剤組成物。
10. １０．ＤＮＡ配列が添付配列一覧表１Ｄ＃１またはＩＤ＃３に示す通りである、 請求項９に記載の洗剤組成物。
11. １１．前記宿主細胞が、真菌の菌株、例えば、トリクロデルカ（Ｔｒｉｃｌｏｄ ｅｒｕｃａ）またはコウジカビ属（Ａｓｐｅｒｇｌｌｕｓ）、好ましくはコウジ カビ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｏｒｙｚａｅ）またはクロカビ（Ａｓｐｅｒｇｉ ｌｌｕｓｎｉｇｅｒ）、またはハンセヌラ（Ｈａｎｓｅｎｕｌａ）またはサッカ ロミケス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）の菌株、例えば、サッカコマイセス・ セレピサェ（Ｓａｃｃａｃｈｏｍｙｃｅｓ　ｃｅｒｅｖｉｓａｅ）の菌株に属す る酵母細胞である、請求項５、６、７または８に記載の洗剤組成物。
12. １２．前記宿主細胞が、細菌の菌株、例えば、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）、 ストレプトマイセス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）または大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ ）である、請求項５、６、７または８に記載の洗剤組成物。
13. １３．水溶性陽イオン化合物は、Ｒ１がＣ１２〜Ｃ１４アルキルであり且つＲ２ 、Ｒ３およびＲ４がメチルおよびヒドロキシエチル基から選ばれる第四級アンモ ニウム塩から選ばれる、請求項１、２、３、４、５、６、７または８に記載の洗 剤組成物。
14. １４．前記水溶性陽イオン化合物の量が、０．２〜１０％である、請求項１、２ 、３、４、５、６、７または８に記載の洗剤組成物。
15. １５．陰イオン界面活性剤を更に含み、陰イオン界面活性剤対水溶性第四級アン モニウム化合物のモル比が１：１より大きい、請求項１、２、３、４、５、６、 ７または８に記載の洗剤組成物。
16. １６．無粉塵性粒状物または液体の形の洗剤添加剤である、請求項１、２、３、 ４、５、６、７または８に記載の洗剤組成物。
17. １７．請求項１、２、３、４、５、６、７または８に記載の洗剤添加剤を含むこ とを特徴とする洗剤組成物。
18. １８．粒状形、コンパクト粒状形または液体形である、請求項１７に記載の洗剤 組成物。
19. １９．布帛を請求項１、２、３、４、５、６、７または８に記載の洗剤組成物（ セルラーゼを酵素タンパク質０．００５〜４０ｍｇ／洗浄液１リットルの量で添 加）と接触させることを特徴とする洗濯法。