JPH07502274A

JPH07502274A - 多薬剤耐性を低下させる方法および組成物

Info

Publication number: JPH07502274A
Application number: JP5511010A
Authority: JP
Inventors: クーン，ジヨン・エス
Original assignee: ラシユ−プレスビタリアン−セントルークス・メデイカル・センター
Priority date: 1991-12-10
Filing date: 1992-12-09
Publication date: 1995-03-09
Also published as: EP0616493A1; WO1993011668A1; AU3243393A; CN1076358A; MX9207150A; EP0616493A4; IL104063A0; CA2125279A1

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】多薬剤耐性を低下させる方法および組成物技術分野本発明は、ヒトまたは動物腫瘍細胞における多薬剤耐性をインビボで逆転させる耐性修飾剤の使用に関するものである。より詳細には、本発明は、耐性修飾剤として特定の両親媒性脂肪酸エステルを含んでいる特定の非イオン界面活性剤の使用に関する。

発明の背景癌化学治療の主要な問題の１つは、化学治療に対する応答性の低下をもたらす腫瘍的薬剤耐性の存在である。いくつかのヒトの癌、例えば腎臓および結腸癌は、治療を開始する以前がら薬剤耐性を示す一方、他の薬剤では、連続した化学治療を行っている間に耐性が進展してくる。多薬剤耐性と呼ばれている１つの種類の薬剤耐性は、機能的および構造的に無関係な薬剤に対する交差耐性によって特徴づけられる。この多薬剤耐性による影響を受ける典型的な薬剤はドキソルビシン（ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ）、ビンクリスチン（ｖｉｎｃｒｉｓｔｉｎｅ）　、ビンブラスチン（ｖｉｎｂｌａｓｔｉｎｅ）　、コルヒチン（ｃｏｌｃｈｉｃｉｎｅ）およびアクチノマイシンＤ　（ａｃｔｉｎｏｍｙｃｉｎｅ　Ｄ）などである。少なくともある種の多薬剤耐性は、Ｐ−糖蛋白質としても知られている細胞膜薬剤エフラックストランスポーター（ｅｆｆｌｕｘ　ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ）　（Ｍｄ　ｒ　Ｉ蛋白質と呼ばれている）の高発現に連結している複雑な表現型である。この膜の「ポンプ」は幅広い特異性を示し、そしてこれは、この細胞から幅広い種類の化学的に無関係な毒素を除去する働きをしている。（Ｅｎｄｉｃｏｔｔ、　Ｊ＾、他、［Ｐ−糖蛋白質介在多薬剤耐性の生化学Ｊ　（Ｔｈｅ　Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　ｏｆ　Ｐ−Ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ−Ｍｅｄｉａｔｅｄ　ＭｕｌｔｉｄｒｕｇＲｅ５ｉｓｔａｎｃｅ）　、＾ｎｎ、　Ｒｅｖ、　Ｂｉｏｃｈｅｍ、、５８巻、１２７−７１頁、１９８９）。

多薬剤耐性を逆転させる物質は耐性修飾剤（ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉ。

ｎａｇｅｎｔｓ）　（ＲＭＡ）として知られており、これらは、ヒトの癌が耐性を示すようになった化学治療剤の細胞毒性を増強するに重要である。インビトロでは数多くの薬剤がＲＭＡとして同定されているが、多くはほとんどか或は全く治療学的効力を示さない、と言うのは、インビボでは多薬剤耐性を逆転させるに必要とされる用量で高い毒性を示すからである。例えば、アジドの如き代謝前はインビトロで多薬剤耐性を逆転するが、しかしながら、インビボでは全く有効性を示さない。高い有効性を示す他の大部分のＲＭＡ、例えばベラパミル（ｖｅｒａｐａｍｉｌ）などは、Ｍｄｒｌ蛋白質上に存在している薬剤結合部位の競合拮抗薬として働くと見られている。これらの薬剤の多くもまた毒性を示し、これがインビボにおけるそれらの有効性を制限している。その結果として、ＨＭＡに改良された活性を与えると共にそれらが示す全体的毒性を低くするための、多薬剤耐性を逆転させる代替薬学方策を開発することの必要性が存在している。

薬剤エフラックスＭｄｒｌ蛋白質の過剰発現によって細胞内の薬剤蓄積が低くなることは、多薬剤耐性表現型にとって重要な因子であるが、明らかにこれのみがただ１つの因子ではない。他の可能性の中で、細胞内の薬剤分布および結合が変化することもまた１つの役割を果していると思われる。例えば、ベラパミルを用いてドキソルビシン耐性を逆転させる機構は、５ｃｈｕｕｒｈｕｉｓ、　Ｇ、Ｊ他、［多薬剤耐性を示す細胞におけるドキソルビシン耐性の一因となる要因の定量測定Ｊ　、Ｊ、　Ｎａｔｌ、　Ｃａｎｃｅｒ　Ｉｎ５ｔ、、　８１：１８８７ −１８９２．１９８９の中に詳述されているように、その細胞内の蓄積が増大するのではなくむしろドキソルビシンの細胞内分布が変化することに関係していると見られる。この報告には、ドキソルビシンは、薬剤感受性を示す細胞内ではほとんど排他的に核の中に集まり、そして薬剤耐性を示す細胞内では主に細胞質の中に集まることが示されている。

ベラパミルを添加すると、ドキソルビシンは主にその薬剤耐性細胞内の核の中に局在する。従って、薬剤がＭｄｒｌに高い親和力で結合するのでは、エフラックスを最適にするに不充分であると見られ、薬学的介在に感受性を示し得る追加的律速段階が存在していることを示唆している。

特定の非イオン性両親媒性界面活性剤、例えばＴｗｅｅｎ　８０およびＣｒｅｍｏｐｈｏｒ　ＥＬなどがＲＭＡ活性を示すといった証拠が示されている。（ＲｉｅｔｕｓＨ他「アクチノマイシンＤおよびダノマイシン（Ｄａｎｏｍｙｃｉｎｅ）に耐性を示すチャイニーズハムスター細胞におけるＴｖｅｅｎ　８０による薬剤効力の増強Ｊ　、Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ、　３２巻、１１９５−１２００頁、１９７２およびｆｏｏｄｃｏｃｋ、　Ｄ、Ｂ、他［水に不溶なビタミン類および薬剤のための通常賦形剤であるＣｒｅｍｏｐｈ。

ｒｅ　ＥＬを用いた多薬剤耐性表現型の逆転Ｊ　、Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ、　５０巻、４１９９−４２０３頁、１９９０参照）。しがしながら、Ｔｗｅｅｎ　８０は、元の細胞および多薬剤耐性を示す細胞両方で薬剤毒性を増強し、薬剤耐性に対して示すＴｗｅｅｎ８０の特異性は問題視されている。薬剤エフラックスに対する効果は示されていない。Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ　ＥＬは、主にリシノール酸（ひまし油）を含んでいるトリグリセライド類のポリオキシエチル化エステルの複雑な混合物であり、これの組成および活性成分はまだ同定されていない。インビボてＣｒｅｍｏｐｈｏｒ　ＥＬを用いると、ある種の患者で不利なヒスタミン放出が併発する。

従って、必要とされているものは、インビボで多薬剤耐性を逆転させる明確に同定された種類の組成物である。この組成物カ拐１き起こす副作用は低くなくてはならない。この組成物は、Ｍｄｒｌ蛋白質上の薬剤結合部位に関する拮抗競合とは異なる機構で薬剤のエフラックスを抑制すべきであり、それによって、多薬剤耐性を逆転させる目的で用いられ得る薬学的レパートリ−を広げるべきである。

発明の要約本発明は、癌内で実質的ＲＭＡ活性を示す特定組成物を含んでいる。

上記組成物の１つの例は、商品名５ＯＬＵＴＯＬ　（商標）　Ｈ３１５（ＢＡＳＦ−Ｃｏｒｐｏｒｔａｉｏｎ、　Ｐａｒｓｉｐｐａｎｙ、　Ｎｅｗ　Ｊｅｒｓｅｙ）で知られている非イオン性の両親媒性界面活性剤である。この組成物は、化学治療剤が示す細胞毒性を多薬剤耐性細胞系内では高くするが薬剤感受性細胞系内では高くせず、このことは、この増強効果はこの薬剤それ自身が示す添加毒性によるものでないことを示している。この薬剤はまた、多薬剤耐性を示す細胞内の化学治療剤蓄積を促進することによってこの化学治療剤の効果を増強する。

本発明はまた、ヒトもしくは動物の癌細胞における多薬剤耐性を逆転させる方法、並びに多薬剤耐性を示すヒトもしくは動物の癌細胞をなくさせる組成物を包含している。本発明の１つの面である１つの組成物は、逆相液クロで集めた５ＯＬＵＴＯＬ　（商ｍ）Ｉｓ　１５の特別な画分である。このｓ。

ＬＵＴＯＬ　（商標）　Ｉｔ３１５内のＲＭＡ活性はその逆相液クロで得られる狭い両分内に存在していることが見いだされた。５ＯＬＵＴＯＬに固有の、細胞に対する毒性は、ＲＭＡ活性を含んでいる画分とは異なる画分の中に存在していることが更に確認された。

本発明はまた、強力なＲＭＡ活性を示す、エトキシル化された脂肪酸類である種類の化合物を包含している。これらの化合物は、約８から６０個の炭素原子と約４がら１００個のエトキシ単位を有する脂肪酸であることが見いだされた。本発明の脂肪酸成分は不飽和であってもよく、そして１個以上のヒドロキシル基を有していてもよい。一般に、エトキシ単位を含んでいない脂肪酸類はほとんどか或は全＜ＲＭＡ活性を示さない。

本発明はまた、化学治療剤に対して特定の微生物が示す耐性を低くする組成物および方法も包含している。特定の微生物は、哺乳動物の細胞内に見られるのと同様なｐ−糖蛋白様ポンピング（ｐｕＩｌｐｉｎｇ）機構を含んでおり、そしてこれらの機構は抗菌剤に対する耐性において重要であり得ると考えられ、る。

本発明の別の態様は、下記の一般式：％式％）［式中、ａは、（Ｃ３Ｈ６０）ＴｕれるＭ承部ｔ、：約１２００から９０００、好適には１７５０から４０００の分子量を与えるような整数であり、そしてｂは、（Ｃ２Ｈ４０）で表される親水部がこの化合物の約１０から５０重量％を構成するような整数である］で表されるポリオキシエチレン／ポリオキシプロピレン共重合体である。

本発明の別の管様は、下記の一般式。

［式中、ポリオキシプロピレンで表されるオクタブロック共重合体部分の平均総分子量は約４５００から７０００ダルトンであり、ａは、ポリオキシエチレンで表される部分がこの化合物の約１０がら２０重量％を構成するような数であり、そしてｂは、オクタブロック共重合体が有する全分子量のポリオキシプロピレン部分がこの化合物の約８０から９０重量％を構成するような数である］で表されるポリオキシエチレン／ポリオキシプロピレン共重合体である。

本発明の更に別の態様は、下記の一般式ポリオキシプロピレンで表されるオクタブロック共重合体部分の平均総分子量は約４５００から７０００ダルトンであり、ａは、ポリオキシエチレンで表される部分がこの化合物の約１０から４０重量％を構成するような数であり、そしてｂは、オクタブロック共重合体が有する全分子量のポリオキシプロピレン部分がこの化合物の約６０から９０重量％を構成するような数である］て表されるポリオキシエチレン／ポリオキンプロピレン共重合体である。

従って、本発明の１つの目的は、ヒトもしくは動物の癌細胞における多薬剤耐性を低くするか或はなくさせる組成物および方法を提供することにある。

本発明のさらなる目的は、多薬剤耐性を示す癌を有するヒトまたは動物を治療する組成物および方法を提供することにある。

本発明のさらなる目的は、副作用を生じさせないで多薬剤耐性を低くする組成物および方法を提供することにある。

本発明のさらなる目的は、血液脳関門を低下させることによって特定の治療剤がその関門を通って血液から脳に入るのを可能にする目的で用いられ得る組成物および方法を提供することにある。

本発明の更に別の目的は、癌細胞におけるＶＰ−１６およびＶＭ−２６に対する多薬剤耐性を逆転させる目的で用いられ得る組成物および方法を提供することにある。

本発明の更に別の目的は、特定の薬剤に対して微生物が示す耐性を低くする組成物および方法を提供することにある。

本発明の上記および他の目的、特徴および利点は、以下に開示する態様の詳細な記述および添付請求の範囲を再考することで明らかになるで図１は、逆相液体クロマトグラフィーを用いた５ＯＬｔｌＴＯＬ　（商標）　Ｈ３１５の分別を示している。

詳細な記述本発明は、ヒトまたは動物における癌の多薬剤耐性を低くするか或はなくさせる方法および組成物を包含している。本発明の方法および組成物に従い、ヒトもしくは動物の癌が化学治療剤に多薬剤耐性を示す患者に脂肪酸の非イオン性両親媒性エステルを投与する。本発明の方法および組成物は、何らかの化学治療剤に対する多薬剤耐性が癌に生じた場合、特別な効力で用いられ得る。

ここで用いる言葉「多薬剤耐性」は、化学治療剤に対して腫瘍もしくは他の細胞が示す耐性または後天的もしくは天然の耐性を意味している。

この多薬剤耐性にはＰ−糖蛋白質が介在し得るか或は他の機構が介在し得る。

本発明は、この薬剤耐性を低くするか或はなくさせる目的で、多薬剤耐性を示す癌を有するヒトまたは動物を治療する方法を包含しており、この方法は、脂肪酸の非イオン性両親媒性エステルを有効量でヒトまたは動物に投与することを含んでいる。所望の生物学的活性を示す調剤は５ＯＬＵＴＯＬ　（商標）　Ｈ３１５である。この調剤は、界面活性を示す種々の化合物の混合物である。

逆相液体クロマトグラフィーを用いてこの５ＯＬＵＴＯＬ　（商標）　Ｉｔ３１５の分別を行った後、その種々の画分をＨＭＡ活性に関して評価することにより、このＲＭＡ活性は、エトキシド単位を有する脂肪酸エステルを含んでいる小さい画分の中に存在していることが確認された。この両分は、分別する前の５ＯＬＵＴＯＬ　（商標）　ＩＩ３１５よりもずっと高い特異的活性を示す。

エトキシド単位を変化させていくつかの脂肪酸エステルを合成することにより、エトキシル化された脂肪酸である化合物が強力なＲＭＡ活性を示すことが見いだされた。これらの化合物は、約８から６０個の炭素原子と約４から１００個のエトキン単位を有する脂肪酸または脂肪酸のポリマー類であることが見いだされた。本発明の脂肪酸成分は不飽和であってよいと共にヒドロキシル化されていてもよく、これらはそれでも活性を示す。加うるに、この脂肪酸は分枝していてもよい。好適な脂肪酸は直鎮である。一般に、エトキシ単位を含んでいない脂肪酸はほとんどか或は全＜ＲＭＡ活性を示さない。

好適な化合物は、カルボキシ基がエステル化されているエトキシ単位を有する脂肪酸である。これらの脂肪酸は８から６０個の炭素原子と約４から１００個のエトキシ単位を含んでいる。この脂肪酸がヒドロキシル化されている場合、このエトキシ単位のヒドロキシル基はエステル化されていてもよい。これらのエトキシ単位は、そのカルボキシル基および／またはヒドロキシル基代ドロキシル基が存在している場合）に付いていてもよい。より好適な化合物は１２から５０個の炭素原子を有する脂肪酸を含んでおり、最も好適な化合物は１５から２５個の炭素原子と約１５から６０個のエトキシ単位を有しており、そして最も好適な化合物は約１５から２０個の炭素原子を有している。これらの好適な化合物は、４から１００個のエトキシ単位を有しており、より好適な化合物は１５から６０個のエトキシ単位を有しており、そして最も好適な化合物は２５から５０個のエトキシ単位を有している。好適な脂肪酸は、ステアリン酸、１２−ヒドロキシステアリン酸、オレイン酸、パルミチン酸およびリンノール酸から成る群から選択される。エトキシ単位の好適な数は約５から５０単位である。

以下に示す理論で範囲が限定されることを望むものではないが、細胞膜の輸送蛋白質は、それらの輸送機能を有効に果すには多量体、通常二量体または四量体を形成している必要があると考えられる。従って、Ｍｄｒｌ蛋白質は、その膜の中で多量体を生じた後でのみ、幅広い種類の化学的に無関係な毒素をその細胞から除去する機能を達成し得る可能性がある。非イオン性の両親媒性界面活性剤は膜表面活性を示し、そしてこれらは、親水性を示す頭と疎水性を示す尾を有していることによって特徴づけられる。特に、脂肪酸の非イオン性両親媒性エステルは、上記蛋白質多量体の形成を阻害し、それによって薬剤エフラックスを抑制している。

本発明のエステルは、ポリエチレングリコールを含んでいる親水性を示す頭と、脂肪酸を含んでいる疎水性を示す尾を有している。このような分子は両親媒性を示す。この分子は、各末端がそれ自身の溶解度挙動を表すに充分な稈大きい。

本発明の組成物が有するエステルの脂肪酸成分は、幅広い範囲の脂肪酸から選択され得る。これはこのカルボキシル基の外側に少なくとも１個のヒドロキシル化を有しているのが有利であり得る。このような脂肪酸は、本分野でよく知られているように、容易にそれら自身とエステル化してこの脂肪酸のポリマー類を生じ得る。本発明の目的で、このＲＭＡは、脂肪酸モノマーとポリエチレングリコールとのエステルからのみ生じ得るものでなく、ヒドロキシル化されている脂肪酸の上記ポリマー類をポリエチレングリコールでエステル化することによってもＲＭＡが生じ得る。

本発明の好適な態様では、この非イオン性の両親媒性エステルは、１２−ヒドロキシステアリン酸のポリエチレングリコールエステルを含んでいる。上記組成は商品名５ＯＬＵＴＯＬ　（商標）　Ｉｔｓ　１５の下でＢＡＳＦ　Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ　（Ｐａｒｓｉｐｐａｎｙ、　Ｎｅｗ　Ｊｅｒｓｅｙ）から商業的に入手可能な調剤の成分である。

このエステルは単独か、或はヒトの癌が耐性を示す少なくとも１種の化学治療剤の治療プログラムと組み合わせて徹者に投与され得る。上記化学治療剤には、典型的に、これに限定されるものではないが、ドキソルビシン、ビンクリスチン、ビンブラスチン、タキソール（Ｔａｘｏｌ）、コルヒチン、ＶＰ−１６およびアクチノマイシンＤなどが含まれる。しかしながら、治療中に多薬剤耐性が現れ得る、化学治療で用いられる他の数多（の化学品が存在しており、本発明はこのような場合にも同様に良好に用いられ得る。加つるに、本発明は、白金化合物の蓄積を促進することによってこれらの化合物に対する耐性を低くする目的でも用いられ得る。

一般に、治療で投与される化学治療剤の全ての投与毎に、本発明のＲＭＡの少なくとも１有効量を投与する。好適には、このＲＭＡの有効量を、化学治療剤を連続して投与している期間全体を通して少なくとも日に１回投与することができる。この治療期間は、治療すべき癌および用いる化学治療剤に応じて典型的に４週間継続する。また、このＲＭＡは、上記期間全体に渡って連続的に注入されてもよい。このＲＭＡの投与はまた、化学治療期間に先立って開始されてもよく、そしてこの化学治療期間の全体およびその後も継続され得る。１服用当たりのＲＭＡ量は、本発明に従ってどの特別な非イオン性の両親媒性脂肪酸エステルを用いるかに依存している。しかしながら、インビボにおける毒性兆候が無視できる程であるように、有害作用を現さない最大投薬量で用いるのが好適である。少なくともいくつかの非イオン性両親媒性脂肪酸エステル、例えば５ＯＬＵＴＯＬ　（商標）　Ｈ３１５などは、インビボにおいて極めて充分に、有害な作用を現さず、そしてこれらは、通常の化学治療剤に対する多薬剤耐性を逆転させることに関して原型ＲＭＡベラパミルの投薬量（際だった毒性をもたらす）と比較して同等か或は優れた活性を達成する投薬量において、急性毒性を示さないで用いられ得る。

本発明のＨＭＡは静脈内または経口投与され得る。これは、化学治療で指示され得るように、その化学治療剤とは別に投与することが可能であり、この場合、このＲＭＡの投与を開始する時とこの化学治療剤の投与を開始する時との間の時間差は大きくなく、例えば典型的には２４時間以内であるか、或はこの化学治療が許す時間差である。例となる治療法には、その化学治療剤を経口もしくは静脈投与した後、次の化学治療期間までの期間を通してこのＲＭＡを連続投与するか、連続注入するか或は経口徐放カプセルを用いることが含まれる。ヒトにおけるその５ＯＬＬＩＴＯＬ　（商標）　Ｉｓ　１５の典型的用量は約１　ｍ　ｇ　／　ｋ　ｇから２５０ｍｇ／ｋｇである。より好適な５ＯＬＬＩＴＯＬ　（商標）　Ｉｔｓ　１５用量は約５ｍｇ／ｋｇから１００ｍｇ／ｋｇである。多薬剤耐性を示す癌を有するヒトを治療する目的で精製したエステル化脂肪酸を用いる場合、この好適な用量は約１ｍｇ／ｋｇから２００ｍｇ／ｋｇであり、最も好適な用量は約１５ｍｇ／ｋｇから６０ｍｇ／ｋｇである。

また、本発明のＲＭＡは、その化学治療剤との組み合わせで投与されてもよく、これは、例として、このＲＭＡの連続注入または毎日の徐放カプセル経口消費をその化学治療期間に先立って始め、そしてこの期間全体およびその後も継続することを含んでいる。このＲＭＡは、その化学治療剤と同じ針を通してそれと一緒に注入され得るか、或はこの化学治療剤が許すならば、単一の経口カプセル内でそれらを一緒にすることも可能であり、この場合、脂肪酸の非イオン性両親媒性エステルは乳化特性を示すことから、本発明のＲＭＡはその薬剤の乳化剤として用いられ得る。

このＲＭＡと共に化学治療剤が入っている乳化剤の製造は、用いる特別な薬剤に依存している。典型的には、このＲＭＡと化学治療剤とを一緒にし、そしてこれらを室温以上の温度から、このＲＭＡと化学治療剤の両方が安定性を示すままであるがこのＲＭＡが液体になる範囲の温度である約５０℃から８０℃に加熱する。無菌水を上と同じ温度まで加熱した後、投与に適切な粘度を達成するに適当な量で激しく撹拌しながら添加する。本技術でよく知られているように、必要に応じて他の成分をこのエマルジョンに添加することで、静脈内もしくは経口投与するための調合を行ってもよい。

本発明の別の態様に従い、本発明のＨＭＡは他のＲＭＡ類、例えばベラパミルなどと一緒に投与され得る。本発明のＲＭＡおよび第二ＲＭＡは、この第二ＲＭＡの毒性が許す限り、各ＲＭＡ単独を用いた処理で典型的に投与される有効量で個別にか或は同時に注入されてもよいか、或はこれらを組み合わせて１個の経口消費用徐放性カプセルの中に入れてもよい。

本発明の方法および組成物は、ヒト癌における多薬剤耐性に打ち勝つに重要な新規手段を与えるものである。この方法および組成物は、本発明者が知る最良の耐性修飾剤に等しいか或はそれよりも良好な効力を有している。更に、本発明の方法および組成物内で用いる薬剤は、他のＲＭＡよりも低い毒性を示すと共に、他の可能なＲＭＡよりも副作用が低い。更に、この薬剤は異なる機構でその複雑な多薬剤耐性表現型に作用し、従って他のＲＭＡと組み合わせることで、多薬剤耐性の逆転でより高い効力を示す手段を与え得ると考えられる。

５ＯＬＩＪＴＯＬ　（商標）　Ｉｔｓ　１５の構造は、ベラパミルまたは他の典型的なＲＭＡのそれとは異なっている。ビンブラスチンまたはドキソルビシン耐性を逆転させる各々の能力に関して、この５ＯＬＵＴＯＬ　（商標）　）Ｉｓ　１５の方が、ＶＰ−１６またはコルヒチン耐性を逆転させるためのベラパミルよりも際だって大きい効力を有していることは、ベラパミルで見られるようにＭｄｒｌ蛋白質蛋白同上結合部位；こ関して競合することとは異なるＭＤＲ逆転機構で、この５ＯＬｔｌＴＯＬ　（商標）　Ｉｔｓ　１５が作用しているとする仮定の支持を与えている。コルヒチンはビンブラスチン結合に関して競合しないことから、コルヒチンとそのＭｄｒｌ蛋白質蛋白同上された薬剤結合部位との相互作用は弱いことは知られている。ＭＤＲ細胞はそれにも拘らずコルヒチンに高い耐性を示すことの事実は、コルヒチンのエフラックスがこの薬剤結合部位との相互作用に依存している度合はビンブラスチンよりも低いことを示している。５ＯＬｔｌＴＯＬ　（商ｆｉ）　Ｉｔｓ　１５はコルヒチンおよびビンブラスチン両方に関して高い効力を示すＲＭＡであることから、これは、薬剤結合後のエフラックスに必要とされている２番目の出来事、即ちこの膜を通る実際の輸送を阻害している可能性がある。５ＯＬＤＴＯＬ　（商標）　Ｉｓ　１５は、界面活性剤として、薬剤のエフラックスを達成するに必要とされ得るＭｄｒｌ蛋白質多量体が生じるのを阻害している可能性がある。

本発明のＲＭＡが示す別の重要な利点は、本発明の一部であると見なす化合物が、抗癌剤であるＶＰ−１６に対する多薬剤耐性に高い効力を示すことである。従来技術のＲＭＡ、例えばベラパミルなどは、■Ｐ−１６多薬剤耐性に対して効力を示さない。（Ｓｃｈｅｓｔｅｄ、　１１．他「古典的な多薬剤耐性表現型に対するＶＰ−１６の関係Ｊ　、Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ、５２巻、２８７４−２８７９頁、１９９２参照）。本発明のＲＭＡは、幅広いスペクトルの抗癌剤に対する多薬剤耐性を低くするに有効であることが見いだされた。

特定の微生物は哺乳動物内のＭＤＲＩ遺伝子が発現するＰ−糖蛋白質に構造および機能が類似している膜蛋白質を含んでいることはよく知られている。特定の微生物が治療薬剤に対して示す感受性をより高（する目的で、本発明を構成している方法および組成物を用いることができることは、本発明の一部と見なされる。

例えば、本発明はマラリアにおけるクロロキン（ｃｈｌｏｒｏｑｕｉｎｅ）耐性を逆転させる可能性がある。

本発明の別の態様は血液脳関門に関係している。編毛細管内皮の中にはＰ−糖蛋白質ポンプが存在していると報告されている。（Ｔａｓｕｔａ、　Ｔ。

他［血液脳関門におけるＰ−糖蛋白質の機能的関与Ｊ　、Ｊ、　Ｂｉｏｌ、　Ｃｈｅｗ、、２６７巻、２０３ｇ３−２０３９１頁、１９９２参照）。脳は、全身投与された数多（の薬剤がその組織実質に近寄るのが制限されている点でを域である。脳内の毛細管を形成している内皮細胞は、器官から数多くの物質が入り込むのを防止している連続した閉鎖帯と連結している。脳細胞に必要とされる栄養は、選択的に、その毛細管内皮細胞内の特定チャンネルまたはトランスポーターを通して血管から輸送される。従って、脳は、血液−脳関門で保護された、強力に絶縁されている区分室である。Ｖｉｎｃａアルカロイドおよびアドリアマイシン（ＡＤＭ）などの如き疎水性抗腫瘍剤は脳の中に入ることはできないが、ニコチンおよびエタノールなどの如き他の疎水性分子は容易にその血液−脳関門を通過する。従って、脂質に溶解性を示す抗腫瘍剤が脳に浸透するのを選択的に遮断している、この関門が有するある種の機構が存在している可能性がある。この毛細管内皮内のＰ−糖蛋白質は、脳と畢丸の両方に存在しているが、他の組織内には存在していないと報告されている。このことは、血液−脳関門にＰ−糖蛋白質が機能的に関与していることの示唆を与えている。血液−脳関門を低下させることで有益な治療薬剤がその関門を通過することを可能にする目的で、本明細書の中に記述する方法および化合物を用いることができることは、本発明の一部と見なす。

本発明の別の態様は、下記の一般式：％式％）［式中、ａは、（Ｃ，Ｈ６０）で表される疎水部に約１２００から９０００、好適ｌ二は１７５０から４０００の分子量を与えるような整数であり、そしてｂは、（Ｃ２Ｈ４０）で表される親水部がこの化合物の約１０から５０重量％を構成するような整数である］で表されるポリオキシエチレン／ポリオキシプロピレン共重合体である、癌細胞における多薬剤剛性を低くするに有効性を示す化合物である。

本発明の別の態様において、このブロック共重合体は、エチレンジアミン開始剤上に作り出した親水性ポリオキシエチレン（ＰＯＥ）のポリマーを含んでいる。

次に、この親水性ポリオキシエチレン（ＰＯＥ）のブロックの上に疎水性ポリオキシプロピレン（ＰＯＰ）のポリマーを作り出す。これによって、下記の一般式：ポリオキンプロピレンで表されるオクタブロック共重合体部分の平均総分子量は約４５００から７０００ダルトンであり、ａは、ポリオキシエチレンで表される部分がこの化合物の約１０から２０重量％を構成するような数であり、そしてｂは、オクタブロック共重合体が有する全分子量のポリオキシプロピレン部分がこの化合物の約８０から９０重量％を構成するような数であるコで表されるオクタブロック共重合体が生じる。

本発明の１つの態様において、このブロック共重合体は、エチレンジアミン開始剤上に作り出した疎水性ポリオキシプロピレン（Ｐ　ＯＰ）のポリマーを含んでいる。次に、この疎水性ポリオキシプロピレン（ＰＯＰ）のブロックの上に親水性ポリオキシエチレン（ＰＯＥ）のポリ？−を作り出す。これにより、下記の一般式：ポリオキシプロピレンで表されるオクタブロック共重合体部分の平均総分子量は約４５００から７０００ダルトンであり、ａは、ポリオキシエチレンで表される部分がこの化合物の約１０から４０重量％を構成するような数であり、そしてｂは、オクタブロック共重合体が有する全分子量のポリオキシプロピレン部分がこの化合物の約６０から９０重量％を構成するような数である］て表されるオクタブロック共重合体が生じる。

本発明の生物活性を示す共重合体を含んでいるオクタブロック共重合体には、これに限定されるものではないが、ＢＡＳＦ　Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ　（ＢＡＳＦ　Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、　ＰａｒｓｉｐｐａｎｙＳＮＪ）が製造しているブロック共重合体であるＴｅｔｒｏｎｉｃ　（商標）およびリバース（ｒｅｖｅｒｓｅ）　Ｔｅｔｒｏｎｉｃ　（商標）などが含まれる。トリブロック共重合体は商ｌ１ｌＩＰＬＵＲＯＮＩｃ　（商標）の下で市販されており、ＢＡＳＦ　Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎから入手可能である。

如何なる様式でも本発明の範囲に対する制限を与えるものでないと解釈されるべき下記の実施例を用いて本発明の詳細な説明を行う。それとは対照的に、本明細書の記述を読んだ後の本分野の技術者にそれら自身が思い浮かぶであろう、本発明の精神および／または添付請求の範囲から逸脱することのない本発明の他の種々の態様、修飾形および相当物を手段として用いる必要があり得ると明らかに理解されるべきである。

実施例Ｉ多薬剤耐性を示すヒト類表皮癌細胞系Ｋ　Ｂ　８−５およびＫＨ２−５−１１、並びに薬剤感受性を示すそれらの親細胞系ＫＢ３−１を、インビトロにおいて、種々の化学治療剤、即ちコルヒチン、ビンブラスチンおよびドキソルビシンと組み合わせた５ＯＬｔｌＴＯＬ　（商標）　）Ｉｓ　１５で処理した。

この処理の詳細はＣｏｏｎ、　Ｊ、Ｓ、他ｒｓＯＬＵＴＯＬ　（商標）　Ｉｔｓ　１５、即ち１２−ヒドロキシステアリン酸の無毒性ポリオキシエチレンエステル類は多薬剤耐性を逆転させるＪ　、Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ、　５１．８９７−９０２．１９９１　（これは引用することによって本明細書に組み入れられる）の中に記述されている。

簡単に言えば、これらの３種の系由来の細胞を、本技術でよく知られているように、９６個のウェルが備わっているプレートの中に、このプレートの１つの軸に沿って細胞毒性薬剤の濃度を上昇させそしてこのプレートのもう１つの軸に沿ってＲＭＡの濃度を上昇させるように入れる。

５日間インキュベートした後、本技術で知られている方法に従ってこれらのプレートを洗浄および乾燥し、細胞数を測定した。対照に比較して細胞増殖の５０％阻害を引き起こす、その細胞毒性を示す薬剤の平均濃度（Ｉ　Ｃｉｏ）を、種＆（７）ＨＭＡ濃度でプロットした。５ＯＬＵＴＯＬ　（商標）　ＩＩｓ　１５を用いるとＫＨ２−５およびＫＨ２−５−１１細胞におけるＭＤＲ表現型の完全な逆転が達成される一方、このＲＭＡは、薬剤に感受性を示すＫＨ２−１細胞における薬剤毒性を増強せず、このことは、この増強効果はこの５ＯＬＵＴＯＬ　（商標）　Ｉｓ　１５それ自身が有する何らかの毒性によるものでないことを示していた。この５ＯＬＵＴＯＬ　（商標）　ＩＩｓ　１５自身が示すＩＣｓ。の１０％濃度でこれを用いた時、これは、ＫＨ２−５−１１細胞がコルヒチン、ビンブラスチンおよびドキソルビシンに対して示す耐性をそれぞれ３５倍、２８倍および４２倍低くした。

原型ＲＭＡベラパミルに関しても同じ平板培養を実施した。予想外に、上記３種の細胞毒に対して５ＯＬＵＴＯＬ　（商標）　Ｉｔｓ　１５が示す効果間の関係は、これらの３種の細胞毒に対してベラパミルが示す効果間の関係とは異なっており、このことは、５ＯＬＵＴＯＬ　（、商標）　ｌ（Ｓ　１５とベラパミルは異なる機構で薬剤耐性に影響を与えていることを示唆していた。各ＲＭＡがビンブラスチン耐性を逆転させる能力に対する比較を行った時、５ＯＬＵＴＯＬ　Ｉｔｓ　１５は、コルヒチン耐性を逆転させるベラパミルよりも相対的にずっと高い効力を示した。

実施例ＩＩ輸送蛋白質Ｍｄｒｌが示す作用に関する直接的な情報を得る目的で、ＭＤＲ細胞からのローダミン１２３のエフラックスもまた試験した。簡単に言えば、ＫＨ２ −５−１１系から細胞を調製し、洗浄した後、０゜５ｍｇ／ｍＬのローダミン１２３と２４μＭのベラパミル中３７℃で３時間インキュベートした。これらの細胞を氷冷ＤＭＥＭ中で洗浄し、３つの一定分量に分けた後、完全培地単独内か、或はベラパミルが２４１１Ｍ入っている完全培地内か、或は５ＯＬｔｌＴＯＬ　（商標）　ＩＩｓ　１５が７０ａＭ入っている完全培地内で３７°Ｃのインキュベーションを行った。Ｃｏｏｎ他の中に記述されている如きフローサイトメトリック（ｆｌｏｗ　ｃｙｔｏｍｅｔｒｉｃ）分析を用いて定期的に、これらの細胞が示すローダミン１２３蛍光を測定した。このローダミン１２３を用いた試験により、５ＯＬＵＴＯＬ　（商標）　Ｈ３１５はＭＤＲ細胞内に薬剤が蓄積されるのを促進し、そして更に、上記蓄積は少なくとも部分的に薬剤エフラックス率が際だって低くなることによるものであることが示された。

実施例ＩＩＩ逆相液クロを用いて５ＯＬｔｌＴＯＬ　（商標）　ＩＩｓ　１５を分別することで、この調剤内のどの部分にその活性が存在しているかを測定した。１００％アセトニトリル（ＡＣＮ）および水の中で、５ＯＬＵＴＯＬ　（商標）　ＩＩｓ　１！］の約５０％溶液を調製した。この５ＯＬＵＴＯＬ　（商標）　Ｉｔｓ　１５の溶液１ｍＬをＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ　ＩＢ−３ｉｌ逆相カラムに注入した。

このカラムには５μｍの粒子が入っており、ぞしてその内部直径は４．６ｍｍで１５０ｍｍ長である。この流量は２．０ｍＬ／分であった。この可動相は下記の通りであった　Ａ＝５％ＡＣＮおよびＢ＝１００％ＡＣＮ０この勾配は１５分の間直線的に１００％Ａから１００％Ｂであり、続いて１００％Ｂに維持した。３０秒の間隔て画分を集めた。これらの種々の画分を、実施例ＩＩに記述した如く、ＲＭＡ活性に関して分析した。この分別の結果を図１に示す。

加うるに、Ｋｅｓｓｅｌ　Ｄ著「ローダミン１２３を用いた多薬剤耐性の研究」、Ｃａｎｃｅｒ　Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ、　１巻、１４５−１４９頁、１９８９に記述されているようにして５０％阻害濃度（ＩＣ，。）を測定することで、上と同じ画分を毒性に関して評価した。

図１に見られるように、ＲＭＡ活性は単一ピークの中に限定されており、これは、上記クロマトグラフィー流れの中に約２０分で溶離して来る。その毒性は、その活性ピークの前に溶離して来てこのＲＭＡピークに若干型なる別のピークに限定されている。しかしながら、このＲＭＡ活性に貢献している材料の大部分は毒性を示さないことは明らかである。

実施例ＩＶ核磁気共鳴分光法および質量分光法を用いて、図１内の活性ピークの下で溶離してきた材料を分析することにより、いくつかの種の分子が存在していることが確認された。図１内の活性ピークの下で見られる分子は、明らかに、エステル化されている脂肪酸である。ＲＭΔ活性を示す化学的化合物を同定する目的で、いくつかの脂肪酸エステルを合成的に調製し、実施例ＩＩに従ってＲＭＡ活性を試験した。これらのエトキシ化された脂肪酸の製造は本分野の通常の技術者によく知られている。脂肪酸の合成およびエチレンオキサイドを用いたそれらの誘導体は、ＢａｒｅＳ他、Ｔｅｎ５ｉｄｅ　Ｄｅｔｅｒｇｅｎｔｓ、　１２巻、１５５頁、１９７５およびｆｒｉｇｌｅｙ、＾、ＮＳＪ。

＾ｍｅｒ、　Ｏｉｌ　Ｃｈｅｍｉｓｔｓ’ｓ　Ｓａｃ、　３４巻、３９．１９５７の中に記述されている。

全ての化合物をインビトロで３７℃の組織培養培地内のＫＨ２−５−１１（多薬剤耐性を示す）細胞に１００１１ｇ／ｍＬ投与した。ローダミン１２３もまた０、５ａｇ／ｍＬ存在させた。これらの測定結果を表■に示す。

表　■ エトキシル化されている脂肪酸で処理したＫＨ２−５−１１（ＭＤＲ）ａ、　同じ実験で感受性細胞（ＫＨ２−１）が示す範囲のローダミン１２３蛍光を示す細胞パーセントｂ、ＫＨ２−１（感受性）細胞では１００．０％がローダミンを蓄積したＣ６　行わず。

実施例Ｖ毒性試験において、５ＯＬＵＴＯＬ　（商標）　Ｉｓ　１５はインビボで極めて充分に、有害作用を現さないことを示している。純血ピーグル犬に、体重１ｋｇ当たり５．２５．５０または１００ミリグラムの５ＯＬｔｌＴＯＬ　（商ａｌｌ）　）Ｉｓ　１５の用量で４週間に渡り毎日静脈注射した。２５ｍｇ／ｋｇ以下の用量では全く毒性兆候が見られなかった。５０ｍｇ／ｋｇの時、散在的および一時的なかゆみ、紅斑および／またはじんましんが観察された。１００ｍｇ／ｋｇの用量の後、これらの犬は異なる度合でかゆみ、紅斑またはじんましんを示し、これは注入して５から１０分後に最も顕著であったが、６０分後にはもはや見られなくなった。これらの試験は、５ＯＬｔｌＴＯＬ（商標）　Ｈ３１５がインビボで示す有害な作用は、Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ　ＥＬより低い実施例ＩＶに示したのと同様な様式で、ＰＬＵｌ？０ＮＩＣ（商標）およびＴＥＣＴＲＯＮＩＣ（商標）共重合体をＨＭＡ活性に関して試験した。これらの測定結果を表ＩＩに示す。

表ＩＩポリオキシエチレン／ポリオキノプロピレンのブロック共重合体で処理したＫＨ２−５−１１（ＭＤＲ）細胞におけるローダミン１２３の蓄積ａ、　同じ実験で感受性細胞（ＫＨ２−１）が示す範囲のローダミン１２３蛍光を示す細胞パーセントｂ、ＫＨ２−１（感受性）細胞では９９，３％がローダミンを蓄積したＣ１　ベラパミルは逆転剤であるｄ、　非特異的膜フルイダイザ−（ｆｌｕｉｄｉｚｅｒ）。

表ＩＴで見られるように、これらのポリオキシエチレン／ポ１ノオキシプロピレンブロック共重合体のいくつかは、多薬剤耐性を示す癌細１ｍの多薬剤耐性を低くするに有効である。

勿論、上記は本発明の好適な態様にのみ関係してＬ）るものであり、添付請求の範囲に挙げる本発明の精神および範囲から逸脱しなＬ）限り数多くの修飾または変形を行い得ると理解されるべきである。

１ｃ５０１ｉＩ某殆

Claims

【特許請求の範囲】

１．癌を有するヒトまたは動物における癌の多薬剤耐性を逆転させる方法において、脂肪酸の非イオン性両親媒性エステルを含んでいる耐性修飾剤の有効量をヒトまたは動物に投与する段階を含む方法。
２．該エステルがポリエチレングリコールおよび糖類から成る群から選択される親水性を示す頭を含んでいる請求の範囲１の方法。
３．該ポリエチレングリコールが約４から１００個のエチレンオキサイド単位を有している請求の範囲２の方法。
４．該ポリエチレングリコールが約１５から６０個のエチレンオキサイド単位を有している請求の範囲３の方法。
５．該ポリエチレングリコールが約２５から５０個のエチレンオキサイド単位を有している請求の範囲４の方法。
６．該脂肪酸が飽和脂肪酸、不飽和脂肪酸、ヒドロキシル化されている脂肪酸およびヒドロキシル化されている不飽和脂肪酸から成る群から選択される請求の範囲１の方法。
７．該脂肪酸がステアリン酸、１２−ヒドロキシステアリン酸、オレイン酸、パルミチン酸およびリシノール酸から成る群から選択される請求の範囲６の方法。
８．該脂肪酸が約８から６０個の炭素原子を有する請求の範囲６の方法。
９．該脂肪酸が約１２から５０個の炭素原子を有する請求の範囲８の方法。
１０．該脂肪酸が約１５から２５個の炭素原子を有する請求の範囲９の方法。
１１．多薬剤耐性を示す癌を有するヒトまたは動物において化学治療剤が示す細胞毒性を増強する方法において、化学治療剤との組み合わせで脂肪酸の非イオン性両親媒性エステルを含んでいる耐性修飾剤の有効量をヒトまたは動物に投与する段階を含む方法。
１２．該エステルがポリエチレングリコールおよび糖類から成る群から選択される親水性を示す頭を含んでいる請求の範囲１１の方法。
１３．該ポリエチレングリコールが約４から１００個のエチレンオキサイド単位を有している請求の範囲１２の方法。
１４．該ポリエチレングリコールが約１５から６０個のエチレンオキサイド単位を有している請求の範囲１３の方法。
１５．該ポリエチレングリコールが約２５から５０個のエチレンオキサイド単位を有している請求の範囲１４の方法。
１６．該脂肪酸が飽和脂肪酸、不飽和脂肪酸、ヒドロキシル化されている脂肪酸およびヒドロキシル化されている不飽和脂肪酸から成る群から選択される請求の範囲１１の方法。
１７．該脂肪酸がステアリン酸、１２−ヒドロキシステアリン酸、オレイン酸、パルミチン酸およびリシノール酸から成る群から選択される請求の範囲１６の方法。
１８．該脂肪酸が約８から６０個の炭素原子を有する請求の範囲１７の方法。
１９．該脂肪酸が約１２から５０個の炭素原子を有する請求の範囲１８の方法。
２０．該脂肪酸が約１５から２５個の炭素原子を有する請求の範囲１９の方法。
２１．ヒトまたは動物における多薬剤耐性を示すヒト癌細胞を処理するための組成物において、脂肪酸の少なくとも１種の非イオン性両親媒性エステルと少なくとも１種の化学治療剤を含んでいる組成物。
２２．該エステルがポリエチレングリコールおよび糖類から成る群から選択される親水性を示す頭を含んでいる請求の範囲２１の組成物。
２３．該ポリエチレングリコールが約４から１００個のエチレンオキサイド単位を有している請求の範囲２２の組成物。
２４．該ポリエチレングリコールが約１５から６０個のエチレンオキサイド単位を有している請求の範囲２３の組成物。
２５．該ポリエチレングリコールが約２５から５０個のエチレンオキサイド単位を有している請求の範囲２４の組成物。
２６．該脂肪酸が飽和脂肪酸、不飽和脂肪酸、ヒドロキシル化されている脂肪酸およびヒドロキシル化されている不飽和脂肪酸から成る群から選択される請求の範囲２１の組成物。
２７．該脂肪酸がステアリン酸、１２−ヒドロキシステアリン酸、オレイン酸、パルミチン酸およびリシノール酸から成る群から選択される請求の範囲２６の組成物。
２８．該脂肪酸が約８から６０個の炭素原子を有する請求の範囲２７の組成物。
２９．該脂肪酸が約１２から５０個の炭素原子を有する請求の範囲２８の組成物。
３０．該脂肪酸が約１５から２５個の炭素原子を有する請求の範囲２９の組成物。
３１．該化学治療剤がドキソルビシン、ダウノマイシン、ビンクリスチン、ビンプラスチン、タキソール、コルヒチン、ＶＰ−１６、カンプトテキンおよびアクチノマイシンから成る群から選択される請求の範囲２１記載の組成物。
３２．癌を有するヒトまたは動物における癌の多薬剤耐性を逆転させる方法において、下記の一般式：ＨＯ（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｂ（Ｃ３Ｈ６Ｏ）ａ（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｂＨ［式中、ａは、（Ｃ３Ｈ６Ｏ）で表される疎水部に約１７５０から９０００の分子量を与えるような整数であり、そしてｂは、（Ｃ２Ｈ４Ｏ）で表される親水部がこの化合物の約１０から５０重量％を構成するような整数である〕で表されるポリオキシエチレン／ポリオキシプロビレン共重合体を含んでいる耐性修飾剤の有効量をヒトまたは動物に投与する段階を含む方法。
３３．ヒトまたは動物における多薬剤耐性を示すヒト癌細胞を処理するための組成物において、下記の一般式：ＨＯ（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｂ（Ｃ３Ｈ６Ｏ）ａ（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｂＨ［式中、ａは、（Ｃ３Ｈ６Ｏ）で表される疎水部に約１７５０から９０００の分子量を与えるような整数であり、そしてｂは、（Ｃ２Ｈ４Ｏ）で表される親水部がこの化合物の約１０から５０重量％を構成するような整数である］で表される少なくとも１種のポリオキシエチレン／ポリオキシプロビレン共重合体と少なくとも１種の化学治療剤を含んでいる組成物。
３４．該化学治療剤がドキソルビシン、ダウノマイシン、ビンクリスチン、ビンプラスチン、タキソール、コルヒチン、ＶＰ−１６、カンプトテキンおよびアクチノマイシンから成る群から選択される請求の範囲３３記載の組成物。
３５．癌を有するヒトまたは動物における癌の多薬剤耐性を逆転させる方法において、下記の一般式： ▲数式、化学式、表等があります▼ ［式中、ポリオキシプロビレンで表されるオクタブロック共重合体部分の平均総分子量は約４５００から７０００ダルトンであり、ａは、ポリオキシエチレンで表される部分がこの化合物の約１０から２０重量％を構成するような数であり、そしてｂは、オクタブロック共重合体が有する全分子量のポリオキシプロビレン部分がこの化合物の約８０から９０重量％を構成するような数である］で表されるポリオキシエチレン／ポリオキシプロビレン共重合体を含んでいる耐性修飾剤の有効量をヒトまたは動物に投与する段階を含む方法。
３６．ヒトまたは動物における多薬剤耐性を示すヒト癌細胞を処理するための組成物において、下記の一般式：▲数式、化学式、表等があります▼ ［式中、ポリオキシプロビレンで表されるオクタブロック共重合体部分の平均総分子量は約４５００から７０００ダルトンであり、ａは、ポリオキシエチレンで表される部分がこの化合物の約１０から２０重量％を構成するような数であり、そしてｂは、オクタブロック共重合体が有する全分子量のポリオキシプロビレン部分がこの化合物の約８０から９０重量％を構成するような数である］で表される少なくとも１種のポリオキシエチレン／ポリオキシプロビレン共重合体と少なくとも１種の化学治療剤を含んでいる組成物。
３７．該化学治療剤がドキソルビシン、ダウノマイシン、ビンクリスチン、ビンプラスチン、タキソール、コルヒチン、ＶＰ−１６、カンプトテキンおよびアクチノマイシンから成る群から選択される請求の範囲３６記載の組成物。
３８．癌を有するヒトまたは動物における癌の多薬剤耐性を逆転させる方法において、下記の一般式： ▲数式、化学式、表等があります▼ ［式中、ポリオキシプロビレンで表されるオクタブロック共重合体部分の平均総分子量は約４５００から７０００ダルトンであり、ａは、ポリオキシエチレンで表される部分がこの化合物の約１０から４０重量％を構成するような数であり、そしてｂは、オクタブロック共重合体が有する全分子量のポリオキシプロビレン部分がこの化合物の約６０から９０重量％を構成するような数である］で表されるポリオキシエチレン／ポリオキシプロビレン共重合体を含んでいる耐性修飾剤の有効量をヒトまたは動物に投与する段階を含む方法。
３９．ヒトまたは動物における多薬剤耐性を示すヒト癌細胞を処理するための組成物において、下記の一般式：▲数式、化学式、表等があります▼ ［式中、ポリオキシプロビレンで表されるオクタブロック共重合体部分の平均総分子量は約４５００から７０００ダルトンであり、ａは、ポリオキシエチレンで表される部分がこの化合物の約１０から４０重量％を構成するような数であり、そしてｂは、オクタブロック共重合体が有する全分子量のポリオキシプロビレン部分がこの化合物の約６０から９０重量％を構成するような数である］で表される少なくとも１種のポリオキシエチレン／ポリオキシプロビレン共重合体と少なくとも１種の化学治療剤を含んでいる組成物。
４０．該化学治療剤がドキソルビシン、ダウノマイシン、ビンクリスチン、ビンプラスチン、タキソール、コルヒチン、ＶＰ−１６、カンプトテキンおよびアクチノマイシンから成る群から選択される請求の範囲３９記載の組成物。