JPH0717979A - 生理活性物質ＡＤ−２４−１ｂ - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【目的】駆虫、殺ダニおよび殺虫作用を有する新規生理
活性物質を提供する。 【構成】式 【化１】 で表わされる新規生理活性物質ＡＤ−２４−１ｂに関す
る。 【効果】生理活性物質ＡＤ−２４−１ｂは強力な駆虫、
殺ダニ、殺虫作用を有し、とりわけ動物用医薬品として
有用である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、駆虫・殺ダニ・殺虫作
用を示す新規生理活性物質ＡＤ−２４−１ｂ、その製造
法および用途ならびにそれを生産する微生物に関する。

【０００２】

【従来の技術】人間および動物の健康および農業におい
て、寄生虫感染は貧血・栄養不良・衰弱・体重減少・消
化管壁ならびに他の組織および器官に対する重大な損傷
に導き、もし治療しないで置くと、感染宿主を死に至ら
しめることもあり得る。本発明者らは、新規な駆虫・殺
虫薬を開発すべく微生物代謝産物に着目して探索研究を
行った。これまでに微生物を起源とする駆虫・殺虫性物
質には、糸状菌の生産する環状ペプチドであるデストル
キシン〔アグリカルチュラル・バイオロジカル・ケミス
トリイ（Agricultural and Biological Chemistry）第
２６巻、第３６頁（１９６２年）〕、バチルス属細菌の
生産する結晶性蛋白質であるデルタ−エンドトキシン
〔農薬と園芸第４７巻、第１１号、第１５０７頁（１９
７２年）〕、放線菌の生産するピエリシジン〔アグリカ
ルチュラル・バイオロジカル・ケミストリイ第３０巻、
第１頁（１９６６年）〕、ピロリドンを母核とする電子
伝達阻害物質マクロテトロライド類にはいるテトラナク
チン〔ジャーナル・アンチバイオティクス（Journal An
tibiotics）第２４Ａ巻、第４１８頁（１９７１
年）〕、マクロライド系のミルベマイシン〔テトラヘド
ロン・レターズ（Tetrahedron Letters）第７１１頁
（１９７５年）〕、アバメクチン類〔アンチミクロバイ
アル・エイジェンツ・アンド・ケモセラピイ（Antimicr
obial Agents and Chemotherapy）第１５巻、第３６１
頁（１９７９年）〕、ＬＬ−Ｆ２８２４９α〔ジャーナ
ル・オブ・ケミカル・ソサイエテイ・ケミカル・コミュ
ニケーションズ（Journalof Chemical Society Chemica
l Communications）第４０２頁（１９８７年）〕などが
知られている。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】新規な天然生理活性物
質を見いだすと共に、人間及び動物の健康及び農業にお
いて、より優れた駆虫剤、殺虫剤および殺ダニ剤が求め
られている。

【０００４】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、多数の微
生物培養液中から新しい殺虫・殺ダニ・駆虫剤を得るた
めの探索研究を行ったところ、ストレプトミセス属の菌
株が駆虫・殺ダニ・殺虫作用を有する物質を産生するこ
とを見出した。該微生物を適宜の培地に培養することに
より、駆虫・殺ダニ・殺虫作用を有する物質を培養物中
または菌体中に蓄積しうることを認め、活性物質を単離
し、その物理化学的性質から、当該活性物質が新規物質
であることを確かめ、その構造を解明し、これらの知見
に基づいてさらに研究を続けた結果、本発明を完成する
に至った。すなわち、本発明は、式

【化２】 で表される新規生理活性物質ＡＤ−２４−１ｂ、ストレ
プトミセス属に属し、生理活性物質ＡＤ−２４−１ｂを
生産する能力を有する微生物を培地に培養し、培養液中
に該ＡＤ−２４−１ｂを生成蓄積せしめ、これを採取す
ることを特徴とする生理活性物質ＡＤ−２４−１ｂの製
造法、生理活性物質ＡＤ−２４−１ｂを含有する駆虫、
殺ダニもしくは殺虫剤および生理活性物質ＡＤ−２４−
１ｂの生産能を有するストレプトミセス ファエオファ
シエンスに関するものである。

【０００５】本発明に用いることができる微生物として
は、ストレプトミセス属に属し、ＡＤ−２４−１ｂを産
生する能力を有する微生物であればいずれのものでもよ
い。たとえばインド国土壌より分離されたストレプトミ
セス エスピー No. ＡＬ−６１７２９（Streptomyces
sp. No. ＡＬ−６１７２９）などは具体的に使用しう
る例として挙げられる。ＡＬ−６１７２９株について、
インターナショナル・ジャーナル・オブ・システマティ
ック・バクテリオロジー（International Journal of S
ystematic Bacteriology），第１６巻，３１３−３４０
頁（１９６６年）記載の方法に準じて検討した菌学的性
状は下記のとおりである。なお、培地上の所見は特に記
載のないかぎり、２８℃において１４日間培養し、観察
したものである。

【０００６】（I）形態的特徴 気菌糸は、よく伸長分岐した基生菌糸から単純分岐状に
伸長しており、その先端に形成された胞子連鎖（通常１
０〜５０個以上）はループ状又は開放したらせん状、時
にはかぎ状を呈する。輪生糸は認められない。胞子は楕
円形（φ０.６〜０.８×１.１〜１.３μm ）を示し、そ
の表面は平滑である。 （II）各種培地上での生育状態 各種培地における生育の程度（Ｇ）、気菌糸の生育及び
色調（ＡＭ）、裏面の色調（Ｒ）、可溶性色素の有無及
び色素（ＳＰ）などについて以下に列記する。色の記載
について（ ）で示す標準色調記号は、コンティナー・
コーポレーション・オブ・アメリカ（Container Corpor
ation of America）のザ・カラー・ハーモニー・マニュ
アル（The Color Harmony Manual）第４版、１９５８年
によった。

【０００７】

【表１】

【０００８】（III）生理的性質 (a) 生育温度範囲 ： １４〜３
８.５℃ 最適生育温度範囲 ： ２４〜３２℃ (b) 硝酸塩の還元 ： 陰性 (c) ゼラチンの液化 ： 陽性 （グルコース・ペプトン・ゼラチン培地） (d) 澱粉の加水分解 ： 陽性 (e) 脱脂乳の凝固 ： 陰性 脱脂乳のペプトン化 ： 陽性 (f) メラニン様色素の生成 チロシン寒天培地 ： 陰性 ペプトン・イースト・鉄寒天培地 ： 陽性

【０００９】 （IV）炭素源の資化性 （プリードハム・ゴットリープ寒天培地） Ｌ−アラビノース ： ＋＋ （注）＋＋： 比較的良好な生育 Ｄ−キシロース ： ＋ ＋ ： 生育を認める Ｄ−グルコース ： ＋＋ ± ： ＋又は−の判定が困難 Ｄ−フラクトース ： ＋＋ − ： 生育せず シュクロース ： − イノシトール ： ＋ Ｌ−ラムノース ： ＋ ラフィノース ： − Ｄ−マンニット ： ＋＋ 対 照 ： −

【００１０】（V）菌体分析 長谷川らの方法（Journal of General Applied Microbi
ology 第２９巻，３１９−３２２頁(１９８３)）に準じ
て分析したところ、菌体の塩酸加水分解液中のジアミノ
ピメリン酸は、ＬＬ−体であった。以上の菌学的性状か
ら、本菌株がストレプトミセス（Streptomyces）属に、
属することが明らかであり、ストレプトミセス・エスピ
ー・ＡＬ−６１７２９（Streptomyces sp. ＡＬ−６１
７２９）と称することができる。本菌株は、グレイ・カ
ラーシリーズに属し、胞子連鎖はかぎ状から緩やかな螺
旋状、胞子表面は平滑、弱いメラニン色素を産生するな
どの諸性質を有する。ＩＳＰ記載菌株の諸性質と比較す
ると、本菌株に類似な菌株として S. mirabilis,S. bot
tropensis, S. galbus, S. collinus, S. phaeofaci
ens, S. plicatus の６株が挙げられる。Streptomyces bottropensis ＩＦＯ １３０２３Streptomyces galbus ＩＦＯ １２８６４Streptomyces mirabilis ＩＦＯ １３４５０Streptomyces collinus ＩＦＯ １２７５９Streptomyces phaeofaciens ＩＦＯ １３３７２Streptomyces plicatus ＩＦＯ １３０７１ 以上６株を本菌株ＡＬ−６１７２９と前記方法に従って
比較検討したところStreptomyces phaeofaciens ＩＦ
Ｏ １３３７２が最も近縁な菌株と判断された。以下両
菌株の詳細な比較データを以下に記載する。

【００１１】

【表２】

【００１２】

【表３】

【００１３】

【表４】 Streptomyces phaeofaciens ＩＦＯ １３３７２はＡ
Ｌ−６１７２９と比べるとオートミール寒天培地、グル
コース アスパラギン寒天培地、栄養寒天培地において
生育及び気菌糸の形成がやや不良であった。しかし両菌
株は共に気菌糸の色は白色〜灰色を呈し、胞子連鎖はか
ぎ状から緩やかな螺旋状、胞子表面は平滑、弱いメラニ
ン色素を産生する等極めて類似した諸性質を呈した。従
ってＡＬ−６１７２９は Streptomyces phaeofaciens
No. ＡＬ−６１７２９と同定された。上記ストレプト
ミセス ファエオファシエンスNo. ＡＬ−６１７２９株
（Streptomyces phaeofaciens No. ＡＬ−６１７２
９）は財団法人醗酵研究所に平成５年５月２６日から寄
託番号ＩＦＯ １５４８９として寄託されており、日本
国通商産業省工業技術院生命工学工業技術研究所（ＮＩ
ＢＨ；茨城県つくば市東１−１−３）に平成５年６月２
８日から寄託番号ＦＥＲＭ Ｐ−１３７１２として寄託
されている。ストレプトミセス属菌は、微生物の一般的
性質として自然的または変異剤によって変異を起こし得
る。たとえばＸ線、ガンマー線、紫外線等の放射線の照
射、更には単胞子分離、種々の薬剤による処理または薬
剤を含有する培地上での培養、その他の手段で変異させ
て得られる多くの変異株、あるいは自然的に得られる突
然変異株であっても、ＡＤ−２４−１ｂを生産する性質
を有するものはすべて本発明の方法に利用し得る。

【００１４】本発明方法の培養に用いられる培地は用い
られる菌株が利用し得る栄養源を含むものなら、液状で
も固状でもよいが、大量を処理するときには液体培地を
用いるのがより適当である。培地には同化し得る炭素
源、消化し得る窒素源、無機物質、微量栄養素を適宜配
合される。炭素源としては、たとえばブドウ糖、乳糖、
ショ糖、麦芽糖、デキストリン、でん粉、グリセリン、
マンニトール、ソルビトール、油脂類（例、大豆油、オ
リーブ油、ヌカ油、ゴマ油、ラード油、チキン油な
ど）、窒素源としては、たとえば肉エキス、酵母エキ
ス、乾燥酵母、大豆粉、コーン・スチープ・リカー、ペ
プトン、綿実粉、廃糖蜜、尿素、アンモニウム塩類
（例、硫酸アンモニウム、塩化アンモニウム、硝酸アン
モニウム、酢酸アンモニウムなど）その他が用いられ
る。さらにナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネ
シウムなどを含む塩類、鉄、マンガン、亜鉛、コバル
ト、ニッケルなどの金属塩、りん酸、ホウ酸などの塩類
や酢酸、プロピオン酸などの有機酸の塩類が適宜用いら
れる。その他、アミノ酸（例、グルタミン酸、アスパラ
ギン酸、アラニン、リジン、バリン、メチオニン、プロ
リン等）、ビタミン類（例、Ｂ₁、Ｂ₂、ニコチン酸、Ｂ
₁₂、Ｃ等）、核酸類（例、プリン、ピリミジンおよびそ
の誘導体）等を含有させてもよい。もちろん培地のｐＨ
を調節する目的で無機または有機の酸、アルカリ類、緩
衝剤等を加え、あるいは消泡の目的で油脂類、表面活性
剤等の適量を添加される。

【００１５】培養の手段は静置培養でも、振盪培養ある
いは通気撹拌培養法等の手段を用いてもよい。大量の処
理には、いわゆる深部通気撹拌培養によるのが望ましい
ことはいうまでもない。培養の条件は培地の状態、組
成、菌株の種類、培養の手段によって一定しないのは当
然であるが、それらは通常１５℃〜３２℃の温度で、初
発ｐＨ約５〜９付近に選択するのがよい。とりわけ、培
養中期の温度は２０℃〜３０℃、また初発ｐＨは約６〜
８の条件が望ましい。培養時期も前記の諸条件により一
定しないが、該生理活性物質濃度が最大となるまで培養
するのがよい。これに要する時間は液体培地を用いる振
盪培養または通気撹拌培養の場合は通常約１〜１０日間
程度である。生成した生理活性物質ＡＤ−２４−１ｂ
は、その化学的性質に従って培養物から抽出、精製する
ことが可能である。

【００１６】ＡＤ−２４−１ｂの大部分は培養菌体中に
生産されるので、培養物はろ過または遠心分離によって
菌体を分離し、菌体をアセトンまたは酢酸エチルあるい
はアルコールで抽出し、抽出液を減圧濃縮後、酢酸エチ
ル、クロロホルムのような転溶性溶剤に転溶させ精製す
ることができる。あるいは培養物に直接、メタノール、
アセトン、ブタノール、酢酸エチルなどの有機溶媒を添
加して得られる抽出液から精製する方がより有利である
場合もある。ＡＤ−２４−１ｂを培養液から採取するに
は、当該物質が中性脂溶性物質であるので、そのような
微生物代謝産物を採取する為に通常用いられる分離・精
製の手段が適宜利用される。たとえば、夾雑物との溶解
度の差を利用する方法、活性炭、非イオン性ハイポーラ
ス樹脂、シリカゲル、アルミナ、デキストランゲル等の
各種担体を用いるクロマトグラフィーなどがそれぞれ単
独または組み合わせて利用される。

【００１７】培養物中に生産されるＡＤ−２４−１ｂを
採取する方法を具体的に説明すると、まず培養液をトプ
コ・パーライトNo. ３１などのろ過助剤を用いてろ過す
る。得られた固形分にアセトンのような有機溶媒を加え
て、撹拌、抽出した後、助剤を用いてろ過する。ろ液を
濃縮し、ｐＨを調整後、酢酸エチルのような溶媒で抽
出、有機層を酸、水、アルカリ、水のように順次洗浄し
た後濃縮する。得られた残渣をメタノールのような溶媒
に溶解し、エチレングリコール−ヘキサン、ジエチルエ
ーテル−食塩水等の組合せを用いる分配操作後、得られ
る有機層を濃縮乾固し、残渣をシリカゲルのカラムクロ
マトグラフィーに付す。展開溶媒としては、例えばクロ
ロホルム−メタノールまたはトルエン−酢酸エチルの混
合溶媒が用いられる。得られた有効画分は濃縮後、Seph
adexＬＨ−２０のクロマトグラフィーに付し、展開溶媒
としてはヘキサン−トルエン−メタノールの混合溶媒を
用い、得られた有効画分は濃縮後、残渣を更に分取高速
液体クロマトグラフィーを用いて精製する。ここで用い
られるカラム充填剤としては、ＯＤＳ−ＡＭ １２０−
Ｓ１０（山村化学研究所製）が、溶媒系としては、含水
アセトニトリルが用いられる。

【００１８】このようにして、後述の実施例の方法で得
られたＡＤ−２４−１ｂの物理化学的性質は次に示す通
りである。 １）形状：白色固体 ２）比旋光度：〔α〕_D ²²＋１１０.６（ｃ＝１.０，ア
セトン） ３）分子量：６２６（ＥＩＭＳ） ４）分子式：Ｃ₃₇Ｈ₅₄Ｏ₈ ５）紫外線吸収スペクトル：メタノール中 λ_max（ε）：２３９（ｓｈ，２９４００）， ２４４
（３１９００）， ２５２（ｓｈ，２１２００） （ｎ
ｍ） ６）赤外線吸収スペクトル（ＫＢｒ 錠剤法による主な
吸収を示す）：3460, 2970, 2930, 2875, 1710, 1450,
1380, 1340, 1310, 1290, 1180,1120, 1090, 1060, 104
0, 1010, 1000, 960, 940, 870, 820 (cm^-1) ７）¹Ｈ核磁気共鳴スペクトル（３００ＭＨz，重クロロ
ホルム中でのケミカルシフト，δppm）：0.72(3H,d,J=
6.6Hz),0.84(3H,d,J=7.4Hz),0.89-0.95(2H,m),1.00(3H,
d,J=6.4Hz),1.02(3H,d,J=6.4Hz),1.17-1.49(3H,m),1.55
(3H,s),1.57(3H,d,J=1.0Hz),1.64-1.95(9H,m),2.20-2.4
1(6H,m),3.25-3.40(3H,m),3.56-3.65(1H,m),3.94-3.96
(2H,m),4.29(1H,br-s),4.65,4.69(each 1H,AB-q,J=13.7
Hz),4.98(1H,br-t),5.07(1H,dd,J=9.4Hz,0.9Hz),5.29-
5.41(3H,m),5.69-5.77(2H,m) ただし、s：シングレット（singlet），d：ダブレット
（doublet），t：トリプレット（triplet）q：クァルテ
ット（quartet)，br：ブロード（broad）を示す。 ８）¹³Ｃ核磁気共鳴スペクトル（７５ＭＨz，重クロロ
ホルム中でのケミカルシフト，δppm）：173.6(s),142.
7(d),139.5(s),137.7(s),137.2(s),136.0(d),131.8(s),
123.4(d),120.6(d),120.2(d),118.1(d),98.8(s),82.2
(d),80.2(s),79.2(d),71.6(d),68.6(d),68.4(t),67.9
(d),67.7(d),48.5(t),45.7(d),36.8(t),36.4(t),36.4
(t),35.9(d),34.6(t),33.7(d),32.0(d),30.4(t),22.3
(q),20.6(q),19.9(q),17.6(q),15.6(q),12.0(q),11.4
(q) ただし、s，d，t，q は上記と同意義である。

【００１９】９）溶解性： 可溶：メタノール、酢酸エチル、アセトン、ジエチルエ
ーテル、クロロホルム 難溶：水 10）薄層クロマトグラフィー（担体、シリカゲルガラス
プレート６０Ｆ₂₅₄，０.２５mm，独メルク社製）： 11）高速液体クロマトグラフィー： 担体：ノバパックＣ₁₈ ４μm，８×１００mm（日本ミ
リポアリミテッド社製) 溶媒系：８５％アセトニトリル／０.１％トリフルオロ
酢酸 流速：１.０ml／分 検出法：ＵＶ吸収、２４４nm 保持時間：１０.３分 12）酸性、中性、塩基性の別：中性 これらの物理化学的性状から生理活性物質ＡＤ−２４−
１ｂの構造は前記した化合物（I）と決定された。

【００２０】

【作用】以下に実験例を挙げて生理活性物質ＡＤ−２４
−１ｂの抗線虫活性ならびに節足動物に対する活性を試
験法と共に示す。 実験例１ 抗線虫活性 セノラブヂチス属線虫（Caenorhabditis）に対する活性
を、イン・ビトロスクリーニング試験法によって評価し
た。すなわち、被試験化合物を５０％アセトンに溶解
し、マイクロプレート（８×１２well）の各well内に、
ダイリューターを用いて段階的濃度に薬液を希釈充填し
た。次に寒天培地表面に発育させた上記線虫をリン酸緩
衝液で洗い出し、線虫浮遊液を調製した。上記薬液を充
填したマイクロプレート１well宛０.２mlの線虫浮遊液
（線虫約１００雙を含む）を上乗せして各濃度の薬液に
線虫を暴露させた。薬剤の最終濃度は、１.１１ppm〜
０.００００５ppmに調製した。感作後２４時間以内の運
動停止状態を実体顕微鏡で観察し、５０％運動阻止最小
濃度（ＩＣ₅₀）および１００％運動阻止最小濃度（ＩＣ
₁₀₀）により薬物の活性を評価した。その結果を〔表
５〕に示す。

【表５】

【００２１】実験例２ 節足動物に対する活性 アルテミア・サリナ（Artemia salina）に対する活性
を、ザ・ジャーナル・オブ・アンチバイオティクス（Th
e Journal of Antibiotics）第４２巻８号第１３０４頁
〜１３０７頁（１９８９年）に記された Blizzard らの
方法に準じたイン・ビトロスクリーニング方法によって
評価した。その結果 A. salina を死滅させる本化合物
（ＡＤ−２４−１ｂ）の最小阻止濃度は０.０２２μg／
mlであった。 本発明化合物は低毒性で抗線虫活性および節足動物に
対する活性を有し、人間および動物の健康および農業に
おいて、医学的または獣医学的あるいは農薬学的に許容
される処方により、駆虫剤、殺虫剤および殺ダニ剤とし
て、安全に適用することができる。

【００２２】すなわち、本発明の生理活性物質ＡＤ−２
４−１ｂ（化合物（I））は前記の実験例においても示
されるとおり、強力な駆虫、殺ダニ、殺虫作用を有し、
とりわけ哺乳動物、例えばイヌ，ネコなどの愛玩動物、
牛，ブタ，ヒツジ，馬などの経済動物の予防、治療剤と
して有用である。例えば、シラミ，ハエ，チック，マイ
トなどの外部寄生虫の殺虫剤、殺ダニ剤として、ならび
に、例えば糸状虫，回虫，円虫，鉤虫，肺虫などの内部
寄生虫の駆虫剤として用いることができる。化合物
（I）は、通常医薬品として生理的に許容される賦形
剤、希釈剤などとともに散剤、錠剤，ペースト，カプセ
ル剤，水剤，注射剤として経口的または非経口的に投与
される。例えば経口的に投与する場合目的により異なる
がおおよそ体重１kg当たり１日平均量０.００５〜０.５
mgの割合で投与する。経口で投与する場合直接製剤を投
与しても良いし、動物飼料や飲料水に加えて投与するこ
ともできる。

【００２３】

【実施例】次に実施例を挙げて本発明を更に具体的に説
明するが、これによって本発明が限定されるものではな
い。 実施例１ イースト・麦芽エキス寒天からなる斜面培地に予め十分
に成育したStreptomyces phaeofaciens No. ＡＬ−６１
７２９の１白金耳量の菌体を、予め、１２０℃で３０分
間加熱処理を施した可溶性澱粉３％、グルコース２％、
コーン・スチープ・リカー（ＣＳＬ）１％、大豆粉１
％、ポリペプトン０.５％、食塩０.３％、アクトコール
０.０５％、炭酸カルシウム０.５％、ｐＨ７.０からな
る種培地５００mlを含む２リットル容坂口フラスコに接
種して、往復振盪機上で、２８℃で２日間振盪培養し
た。次に、この種培養液の全量を、予め、１２２℃で３
０分間加熱処理を施したデキストリン３％、グルコース
２％、ＣＳＬ ０.５％、大豆粉０.５％、硫酸アンモニ
ウム０.５％、食塩０.１％、アクトコール０.０５％、
塩化コバルト０.００１％、炭酸カルシウム０.５％、ｐ
Ｈ７.０からなる生産培地１２００リットルを含む２０
００リットル容醗酵槽に接種して、２８℃、通気量６０
０リットル／分、撹拌１２０rpmの条件下で４日間培養
した。

【００２４】実施例２ 実施例１のように培養し得られた培養液（２４００リッ
トル）に、ろ過助剤としてトプコ・パーライト No. ３
１（東興パーライト社製）を添加し、プレコート剤とし
てラジオライト＃６００および同＃５００（昭和化学工
業社製）を用い、オリバーろ過機を使用し、ろ過した。
得られた固形分をアセトン（５２０リットル）に懸濁
し、１時間撹拌した後、ラジオライト＃６００を助剤と
してろ過した。ろ液を１５０リットルまで濃縮し、ｐＨ
を４.９に調整した後酢酸エチル（５０リットル）で２
回抽出した。得られた有機層を０.５Ｍ硫酸（５０リッ
トル）、水（４０リットル）で順に洗浄し、続いて、３
％重曹水（５０リットル）、水（４０リットル）で２回
ずつ順次洗浄し、得られた有機層を濃縮し濃縮液４６０
ｇを得た。濃縮液をメタノール（２リットル）に溶解
し、エチレングリコール〔ＥＧ〕（４リットル）および
ヘキサン（９リットル）を添加して、撹拌後分配し、メ
タノール−ＥＧ層を得た。ヘキサン層はメタノール−Ｅ
Ｇ（１：３）液（４.５リットル）と再度分配を行い、
メタノール−ＥＧ層を得、先に分配した同層に合一し
た。続いてメタノール−ＥＧ層にジエチルエーテル〔Ｅ
t₂Ｏ〕（５リットル）および８％食塩水（３リットル）
を添加して、撹拌後分配し、Ｅt₂Ｏ層を得た。水層は再
度Ｅt₂Ｏ（３リットル）と分配し、Ｅt₂Ｏ層を得、先の
同層に合一した。そのＥt₂Ｏ層を２％食塩水（３リット
ル）で３回洗浄し、得られたＥt₂Ｏ層を濃縮した。得ら
れた濃縮液にトルエンを添加し、不溶物をろ過によって
除いたろ液を濃縮して、残渣９７.５ｇを得た。その残
渣をトルエン（５００ml）に溶解し、シリカゲル（８リ
ットル，Kiesel gel ６０，７０〜２３０メッシュ，独
メルク社製）の高速液体クロマトグラフィーに付し、ト
ルエン−酢酸エチル（１：１）で溶出すると、ＡＤ−２
４−１ｂを含む粗画分（合計１２.５ｇ）が得られた。
粗画分は SephadexＬＨ−２０（５.６リットル，ファル
マシア社製）に付し、ヘキサン−トルエン−メタノール
（３：１：１）で溶出し、ＡＤ−２４−１ｂを含む画分
を濃縮して油状物（１０.８ｇ）が得られた。この油状
物を更に分取高速液体クロマトグラフィー（充填剤：Ｏ
ＤＳ−ＡＭ １２０−Ｓ１０（山村化学研究所製），カ
ラム：ＬＣ５０ＨＪ ５０mm×２１０mm（栗田工業社
製），展開溶媒：６５％アセトニトリル，流速：４０ml
／分，検出：ＵＶ ２４４nm）に付し、保持時間１４０
〜１６０分のピークを集め濃縮乾固した。残渣をアセト
ニトリル−水で処理して、ＡＤ−２４−１ｂの白色固体
（５５０mg）を得た。

【００２５】

【発明の効果】本発明の新規化合物ＡＤ−２４−１ｂ
は、駆虫剤、殺虫剤及び殺ダニ剤として有用である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ１２Ｐ 17/18 Ｄ 7432−4Ｂ //(Ｃ１２Ｎ 1/20 Ｃ１２Ｒ 1:465） (Ｃ１２Ｐ 17/18 Ｃ１２Ｒ 1:465）

Claims (4)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】式 【化１】 で表される生理活性物質ＡＤ−２４−１ｂ。
2. 【請求項２】ストレプトミセス属に属する生理活性物質
   ＡＤ−２４−１ｂ生産能を有する微生物を培地に培養
   し、培養液中に生理活性物質ＡＤ−２４−１ｂを生成蓄
   積せしめ、これを採取することを特徴とする請求項１記
   載の生理活性物質の製造法。
3. 【請求項３】請求項１記載の生理活性物質ＡＤ−２４−
   １ｂを含有してなる駆虫、殺ダニもしくは殺虫剤。
4. 【請求項４】生理活性物質ＡＤ−２４−１ｂの生産能を
   有するストレプトミセス ファエオファシエンス。