JPH07159405A

JPH07159405A - 光学的免疫測定方法及びこれに用いられる免疫測定装置

Info

Publication number: JPH07159405A
Application number: JP5305193A
Authority: JP
Inventors: Masato Kimura; 正人木村; Takashi Yamada; 隆山田
Original assignee: Olympus Optical Co Ltd
Current assignee: Olympus Corp
Priority date: 1993-12-06
Filing date: 1993-12-06
Publication date: 1995-06-23

Abstract

(57)【要約】【目的】被検試料の発光光量の検出精度を恒常的に保つ
ことが可能な光学的免疫測定装置及びこれに用いられる
免疫測定装置を提供することにある。【構成】被検試料の免疫反応に伴って生じる化学発光の
光量を光電子倍増管７を利用して検出し、光量に基づい
て免疫測定を行う光学的免疫測定方法において、予め決
められた基準値に基づいて光電子倍増管７の検出結果の
可否を判断する第１の工程と、検出結果が否の場合に光
電子倍増管７に向けて化学発光の疑似光を発し、この疑
似光を光電子倍増管７を利用して検出し、得られた検出
値を基準値と比較する第２の工程と、光電子倍増管７の
検出値が基準値に近付くよう検出条件を変化させる第３
の工程とを具備した。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、例えば、免疫反応によ
り生じる化学発光を検出する免疫測定方法及びこれに用
いられる免疫測定装置に関する。

【０００２】

【従来の技術】抗原または抗体に分類される種々の生体
関連物質の測定は、環境衛生の分野や医療の分野で日常
検査として実施されている。特に医療の分野では、疾病
の特定や疾病に対する治療効果の判定等の目的で、数多
くの施設で数多くの種類の検査が実施されている。中で
も、最近公衆衛生上の問題となっている後天性免疫不全
症候群（ＡＩＤＳ）等の感染症や、従来特定が困難であ
った癌関連物質等も、特異親和性物質による反応の一つ
である抗原抗体反応を用いることで測定することが可能
となっている。ＡＩＤＳ等で代表される感染症の診断も
抗原抗体反応を用いて検出することは可能であるが、他
に感染性微生物の遺伝子であるＤＮＡあるいはＲＮＡを
その核酸の特徴部分と結合する相補核により測定するこ
とも可能である。

【０００３】このように多数の生体関連物質が測定でき
るようになり、その結果、より感度の高い計測法の開発
が行われている。以前は、放射性同位元素を用いた放射
免疫分析（ＲＩＡ）が一般的であったが、近年、非放射
性の測定法でありながらＲＩＡと同程度の感度を有する
測定法が次々と開発され、主に反応成分から未反応成分
を除去するためのＢ／Ｆ分離を要するサンドイッチ法
と、Ｂ／Ｆ分離せずに反応成分の比率を測定する競合法
とに分かれる。Ｂ／Ｆ分離を行うには、微粒子（例；粒
径0.1 〜30μｍ）群、小球（例；粒径0.5 〜20ｍｍ）、
反応容器のいずれかに抗体（および／または抗原）を被
覆処理したものが使用される。酵素を用いた酵素免疫分
析（ＥＩＡ）、蛍光物質を用いた蛍光免疫分析（ＦＩ
Ａ）が日常検査に応用されているが、最近は、発光物質
を用いた発光免疫分析（ＬＩＡ）が日常検査に取り入れ
られようとしている。

【０００４】ＬＩＡは、試料から発せられる極微弱光を
検出器である光電子倍増管（以下、ＰＭＴと称する）で
受けて光量を測定するものであり、従来は光量をアナロ
グ信号に変換する方法が採用されていたが、近年ではフ
ォトカウンティング法が採用され始めている。このフォ
トカウンティング法においては、ＰＭＴからの１つの信
号パルスがＰＭＴへの入射光の光子１つに相当するとい
う考えに基づき、ＰＭＴへの入射光量がＰＭＴからの信
号パルス数で表される。

【０００５】フォトカウンティング法は、安定性、検出
感度が高く、信号対雑音比（Ｓ／Ｎ）においても有利で
ある。しかし、この測定法は極微弱な光を検知できると
いう長所を有しているが、測定系のキャリブレ−ション
を行うことが困難であるため、異なる時点あるいは異な
る場所での測定値を比較することができないという欠点
があった。

【０００６】この種の光量検出方法を示した文献とし
て、特開平２−２３６４５３号公報が在る。この文献に
示された技術は、計測の安定性及び信頼性を高めるため
に、測定直前あるいは直後のバックグラウンド値を測定
し、この値を測定値より減算する。さらに、この文献に
は、バックグラウンド値を監視し、この値が予め設定さ
れている範囲を越えていれば、その測定の信頼性が低い
ことを判断する機能についても若干記載されている。

【０００７】上述の技術では、バックグラウンド値の測
定値を基にして、測定が期待どうりの条件で測定された
か否かを判断している。更に、測定する状態が適切な状
態が否かを判断することが記載されている。しかし、測
定する状態でないという判断が下された場合の対応策に
ついては一切記載がない。

【０００８】

【発明が解決しようとする課題】発光量の計測は、比色
分析の０％、 100％のような計測装置のキャリブレ−シ
ョンに相当するものがないため、異なる時点での測定値
同士を比較することが困難であった。勿論、測定値は得
られるが、この測定値はその時の迷光（外乱光）、ＰＭ
Ｔへの印加電圧量、ＰＭＴと測定試料の位置関係、ある
いはＰＭＴや処理回路の熱変動等の測定条件により著し
く変化するため、例えば同じ試料を異なる時点あるいは
異なる装置で測定すると、大幅に異なる測定値が得られ
ることが普通であった。

【０００９】また、臨床分析の分野では、既知濃度の材
料を測定して検量線を作成した後、検体試料を測定して
いたが、最近はこの検量線を毎回は作成せず、装置が記
憶している検量線を使用することが一般的である。特
に、免疫測定では直線の検量線が得にくいため、普通は
５種類以上の濃度の異なる検量線用試料を用いて検量線
を作成しなければならなかった。この結果、操作は煩雑
になり、特に少数の検査しか行われない場合は、測定に
要する費用が莫大なものになっていた。そのため、免疫
分析装置では、測定の度に検量線を作成する装置は敬遠
されがちである。

【００１０】さらに、先に記した理由によりＬＩＡ測定
装置では異なる時点で測定した測定値を比較することが
困難であるため、記憶されている検量線を用いても、濃
度値を出力することは不可能であった。

【００１１】本発明の目的とするところは、被検試料の
発光光量の検出精度を恒常的に保つことが可能な光学的
免疫測定装置及びこれに用いられる免疫測定装置を提供
することにある。

【００１２】

【課題を解決するための手段および作用】上記目的を達
成するために請求項１の発明は、被検試料の免疫反応に
伴って生じる化学発光の光量を光検出器を利用して検出
し、光量に基づいて免疫測定を行う光学的免疫測定方法
において、予め決められた基準値に基づいて光検出器の
検出結果の可否を判断する第１の工程と、検出結果が否
の場合に光検出器に向けて化学発光の疑似光を発し、こ
の疑似光を光検出器を利用して検出し、得られた検出値
を基準値と比較する第２の工程と、光検出器の検出値が
基準値に近付くよう検出条件を変化させる第３の工程と
を具備した光学的免疫測定方法にある。

【００１３】また、請求項２の発明は、被検試料の免疫
反応に伴って生じる化学発光の光量を光検出器を利用し
て検出し、光量に基づいて免疫測定を行う免疫測定装置
において、光検出器へ疑似光を発する疑似光光源と、光
検出器の検出値を予め設定された基準値と比較し、検出
値が基準値に近付くよう検出条件を変化させる検出条件
変更部とを備えた免疫測定装置にある。そして、請求項
１及び請求項２の発明は、被検試料の発光光量の検出精
度を恒常的に保てるようにしたことにある。

【００１４】

【実施例】以下、本発明の一実施例を図１〜図５に基づ
いて説明する。図１は本発明の一実施例の要部を示すも
ので、図中の符号１は光学的免疫測定装置（以下、測定
装置と称する）である。この測定装置１は発光免疫分析
（ＬＩＡ）を実施するもので、発光反応部２、免疫測定
部３、信号処理部４、及び、検出条件変更部５を備えて
いる。また、この測定装置１は、図示しないが、試料
（血液、尿等）と試薬（抗体または抗原被覆粒子、発光
物質標識抗体等）を公知の順序により反応させるための
分注手段や反応後のＢ／Ｆ分離を行う洗浄手段を備えた
免疫反応部とも自動化された構成で連結しているのが好
ましい。

【００１５】これらのうち発光反応部２には、図２に示
すように、本体６、光検出器としての光電子倍増管（以
下、ＰＭＴと称する）７、及び、疑似光光源としての発
光ダイオ−ド（以下、ＬＥＤと称する）８を備えてい
る。本体６は中空であり、ＰＭＴ７とＬＥＤ８は本体６
の中に配置されている。本体６の中の空間は３つに仕切
られており、本体６にはＰＭＴ収容室９、試料セル収容
室１０、及び、ＬＥＤ収容室１１が形成されている。こ
れらの収容室９〜１１を仕切る二つの壁には第１及び第
２の窓１２ａ、１２ｂが開口している。

【００１６】ＰＭＴ収容室９にはＰＭＴ７が収容されて
おり、ＰＭＴ７はＰＭＴホルダ１３を介して本体６の所
定位置に装脱可能に固定されている。さらに、ＰＭＴ７
はその受光面１４を一方の窓１２ａに向けている。ＰＭ
Ｔ７にはケ−ブル１５が接続されており、ケ−ブル１５
は本体６の外へ導出されている。そして、ＰＭＴ７はケ
−ブル１５を介して、信号処理部４や電圧制御部１７に
接続されている。また、ＰＭＴ７には検出条件変更部５
が接続されている。さらに、電圧制御部１７には定電圧
電源１８が接続されている。

【００１７】ここで、本体６は、外乱光の侵入や、各収
容室９〜１１間で光の漏れを防げるよう構成されてい
る。また、ケ−ブル１５と本体６との間には外乱光の侵
入を防ぐためのシ−ルが施されている。また、ＰＭＴ７
として一般的な種々のものを利用することが可能であ
る。

【００１８】試料セル収容室１０は三つの収容室９〜１
１の中央に位置しており、この試料セル収容室１０には
セルホルダ１９が設けられている。セルホルダ１９は試
料セル２０を着脱自在に保持する。さらに、このセルホ
ルダ１９には、試料セル２０の有無を検知するための試
料セル検知機能が備えられている。試料セル検知機能
は、試料セルセンサ２１を利用して達成される。

【００１９】ここで、セルホルダ１９の形状や構造は免
疫測定に用いられる試料セル２０に基づいて決められ
る。そして、試料セル２０として、試験管、角セル、ス
ライド板、マイクロプレ−ト等の一般的な種々のものを
採用することが可能である。

【００２０】ＬＥＤ収容室１１にはＬＥＤ８が収容され
ており、ＬＥＤ８は窓１２ｂに向けられている。さら
に、ＬＥＤ８の端子２２、２３は本体６の外へ導出され
ており、本体６によって保持されている。このＬＥＤ８
は電圧制御部２４を介して電源２５に接続されており、
電圧制御部２４によってＬＥＤ８の発光光量が調節され
る。

【００２１】ここで、端子２２、２３と本体６との間に
は外乱光の侵入を防ぐためのシ−ルが施されている。こ
こで、ＬＥＤ８として、一般的な種々のものを採用する
ことが可能である。ＬＥＤ８は、試料との発光反応に供
する発光物質の発光波長と近似する発光波長を少なくと
も有しているのが好ましいが、適宜のフィルタ−により
波長選択するようにしてもよい。また、発光物質による
発光波長とＬＥＤ８による発光成分との光学的条件を予
め関連付けるように構成すれば、測定項目、発光物質等
の毎にＬＥＤ８を取り替える必要は無い。

【００２２】ＬＥＤ８、試料セル２０、及び、ＰＭＴ７
は略同一な直線上に配置されている。さらに、セルホル
ダ１９の位置や形状等の決定は、ＬＥＤ８からＰＭＴ７
に向かう光を遮らないよう行われている。

【００２３】第１及び第２の窓１２ａ、１２ｂには、第
１及び第２のシャッタ２６、２７が取付けられている。
また、第３の窓２８が試料セル収容室１０に面してお
り、この窓２８にも第３のシャッタ２９が取付けられて
いる。図３に示すように、各シャッタ２６、２７、２９
はステッピングモ−タ３０〜３２に接続されており、そ
れぞれ独立に開閉する。そして、各シャッタ２６、２
７、２９が閉じられると、各窓１２ａ、１２ｂ、２８は
光の漏れが生じないよう塞がれる。

【００２４】ステッピングモ−タ３０〜３２は監視部３
３に接続されており、各ステッピングモ−タ３０〜３２
の動作量に基づいて、各シャッタ２６、２７、２９の開
閉状態が検知される。なお、この監視部３３には試料セ
ルセンサ２１が接続されており、監視部３３は試料セル
２０の有無の検知も行う。

【００２５】第２の窓１２ｂにはＮＤフィルタ３４が取
付けられている。このＮＤフィルタ３４は、ＮＤフィル
タ制御部３５に接続されており、ＮＤフィルタ３４の光
透過率は任意に変化させられる。

【００２６】また、試料セル収容室１０に面した第３の
窓２８は、試料セル２０の出入れに利用される。つま
り、第３の窓２８は本体６の中と外との間に介在してお
り、試料セル２０が試料セル収容室１０に搬入される際
には、第３のシャッタ２９が開かれる。そして、試料セ
ル２０は、試料セル移送手段３６によって試料セル収容
室１０に移送され、セルホルダ１９に装着される。試料
セル２０の搬出の際にも、同様に試料セル移送手段３６
によって、試料セル２０が本体６の外に移送される。こ
こで、試料セル移送手段３６として、一般的なセルロ−
ダや移送ア−ム等を利用することが可能である。

【００２７】なお、図示しないが、試料セル収容室１０
内には、セルホルダ１９に保持された試料セル２０に対
して、発光反応を起こすための基質溶液等を適宜のタイ
ミングで注入するよう構成された注入手段が組み込まれ
ているものとする。

【００２８】図４中に示すように、信号処理部４には処
理部３７と記憶部３８が備えられている。また、免疫測
定部３にはカウント部３９と演算部４０とが備えられて
いる。さらに、検出条件変更部５には、比較部４１と制
御部４２とが備えられている。ＰＭＴ７の検出結果は信
号処理部４と検出条件変更部５とに送られる。また、Ｐ
ＭＴ７の検出結果は、信号処理部４を経て免疫測定部３
にも送られる。

【００２９】次に、上述の測定装置１を用いた光学的免
疫測定方法を図５に基づいて説明する。まず、サンドイ
ッチ法におけるＢ／Ｆ分離を含む段階的な抗原抗体反応
工程ないし競合法における同時的な抗原抗体反応工程が
実施された後、被測定対象である試料中の抗体または抗
原が試料セル２０内の試薬と結合した状態で、Ｂ／Ｆ分
離等の洗浄工程を含む必要な反応工程が済んだ後、被検
試料としての検液試料が入った試料セル２０が、発光反
応部２の試料セル収容室１０に搬入され、セルホルダ１
９に装着される（ｓ₂ ）。試料セル２０の装着の際に
は、第３のシャッタ２９が開かれ（ｓ₁ ）、試料セル２
０が第３の窓２８を通ってセルホルダ１９へ搬送され
る。

【００３０】試料セル２０がセルホルダ１９に装着され
たのち、第３のシャッタ２９が閉じられ（ｓ₃ ）、第３
のシャッタ２９が完全に閉じたことが確認される。この
際、第２のシャッタ２７も閉じられている。第１のシャ
ッタ２６が開かれ（ｓ₄ ）、ＰＭＴ７に高電圧が印加さ
れる（ｓ₅ ）。この後、図示せぬ注入手段が試料セル２
０中に所要量の基質溶液を注入して、発光物質に応じた
発光反応を生ぜしめ、ＰＭＴ７が試料セル２０に生じた
化学発光を検出し、ＰＭＴ７からの光電子パルスが免疫
測定部３へ送られる。そして、カウント部３９により光
電子パルスが所定時間カウントされ、そのカウント値に
基づいて演算部４０により検液試料からの発光量が求め
られ、測定対象である物質の量が算定される（ｓ₆ ）。

【００３１】ここで用いられる発光物質の違いによって
発光反応部２の構成が決まる。例えばアダマンチルメト
キシホスホリルフェニルジオキセタン化合物（ＡＭＰＰ
Ｄ）のように、トリガ−溶液を注入した後にある程度の
時間発光現象が持続する場合には、本実施例の発光反応
部２を利用することが可能である。

【００３２】ＰＭＴ７の検出結果は検出条件変更部５に
も送られている。また、信号処理部４の記憶部３８に
は、これまでの検出の度に得られた検出結果、検出の日
時、ＬＥＤ８への印加電圧値、ＰＭＴ７への印加電圧値
が記憶されている。検出条件変更部５は、記憶部３８に
記憶されている過去の検出結果を基準値とし、比較部４
１が今回の検出結果と基準値とを比較する（ｓ₈ ）。

【００３３】このとき、制御部４２は今回の検出結果と
過去の検出結果との差が、測定手法や発光物質等に応じ
て予め設定された範囲内に収まっている場合、検液試料
の測定が続けられる。また、今回と過去の差が予め設定
された所定の範囲を外れた場合、以下のようにして検出
条件の変更が行われる。

【００３４】まず、ＬＥＤ８に流す電流量が設定され
る。ＬＥＤ８の電流量の設定のために、電圧制御部２４
に複数の抵抗値を切換え可能に構成したディップスイッ
チを設けること等が考えられる。ここで、抵抗値の設定
範囲は、ＬＥＤの性能により規定される許容電流範囲を
２以上、好ましくは４または５以上の異なる電流値に段
階的に変更するように、複数の抵抗器もしくは可変抵抗
器を利用すればよい。次に、第３のシャッタ−２９が閉
じてられていること、更にセルホルダ１９に試料セル２
０がセットされていないことを確認した後、ＬＥＤ８に
電力を供給する（ｓ₁₀）。第１のシャッタ−２６、第２
のシャッタ−２７を共に開け（ｓ₁₁）、ＬＥＤ８から出
力された疑似光をＮＤフィルタ３４に通してＰＭＴ７に
入射させる。必要ならば、監視部３３は、図５にて枝別
れしたフロ−チャ−トに示すように、試料セル２０がセ
ルホルダ１９に残っている場合にこれを検知して、図示
せぬ警報手段によりオペレ−タに警告を与えると共に、
ＬＥＤ８の点灯、第２シャッタ−２７の開放、ＰＭＴ７
による検出のうち少なくとも１つを禁止するための禁止
信号を発光反応部の図示せぬ制御回路に送る構成として
もよい。疑似光の光量はＮＤフィルタ３４によって所望
の値に設定される。そして、ＰＭＴ７に印加電圧が投入
され、ＰＭＴ７はＬＥＤ８の疑似光を検出する
（ｓ₁₂）。

【００３５】ここで、ＰＭＴ７の印加電圧は予め投入さ
れていてもよい。また、ＰＭＴ７の信号出力が安定する
まで、印加電圧を投入した後数分間待つ必要がある。こ
のため、発光物質の性質を考慮して印加電圧を投入する
時点を決定することが望ましい。

【００３６】この状態でＰＭＴ７からの出力信号を一定
時間測定する。ＬＥＤ８の発光量を測定しながら、ＰＭ
Ｔ７への印加電圧を、今回の検出出力が過去の基準値と
同一の検出結果をもたらすように調節される（ｓ₁₃）。

【００３７】一般に、発光ダイオ−ドに流す電流が一定
であれば、発光ダイオ−ドから生じる光の光量は同一で
あることは良く知られている。また、発光ダイオ−ドも
長時間の使用により若干の変化を生じるが、その変化は
光電子倍増管の変化に比較するとほとんど無視できる安
定なレベルである。したがって、発光ダイオ−ドの発光
条件を一定とし、その光量を光電子倍増管で検出した場
合、光電子倍増管の検出結果に変化があれば、光電子倍
増管の感度の変化を知ることができる。また、ＰＭＴ７
の検出感度は、ある範囲で印加電圧に比例することが知
られている。

【００３８】つまり、本実施例のように、ＬＥＤ８の一
定な光量をＰＭＴ７で検出し、ＰＭＴ７の検出結果が基
準値に一致するようＰＭＴ７の印加電圧を変化させれ
ば、検出条件を変化した分だけ補正することができる。
この結果、被検試料の発光光量の検出精度を恒常的に保
つことが可能になる。そして、光学的免疫測定の精度及
び信頼性が向上する。一方、ＬＥＤ８からの疑似光の検
出値が基準値と一致しているにもかかわらず、試料セル
２０からの発光量が異常な場合には、試料の異常、抗原
抗体反応工程での処理ミス等と判断できる。

【００３９】なお、本発明の測定装置１を用いることに
より、検出条件の補正だけではなく、ＰＭＴ７の使用の
適否の判断を行うことも可能である。つまり、一般にＬ
ＥＤにおいては入力電流値と発光光量が比例することを
利用して、ＬＥＤ８の電流値を変えて発光量の測定を行
い、ＬＥＤ８への入力電流値とＰＭＴ７の検出値の関係
からＰＭＴ７の適性な測定範囲を求めたり、このＰＭＴ
７の劣化度合いを判定することも可能である。さらに、
この方法の場合には、ＬＥＤ８への入力電力値を変化さ
せるのではなく、ＬＥＤ８とＰＭＴ７の間のＮＤフィル
タ３４を、適宜、透過率の異なる複数個用意して順次交
換できるよう構成することで透過光量を変化させても、
同様にＰＭＴ７の使用の適否の判断を行うことが可能で
ある。ＰＭＴ７の劣化度合いが、許容し得る限界を越え
た場合には、新しいＰＭＴ７をＰＭＴホルダに固定して
交換する。

【００４０】また、本実施例においては、免疫測定部３
と信号処理部４とが分離しているが、これらを一体化し
てもよい。また、測定装置１の全体を制御する制御部
（図示しない）に、本実施例中の信号処理部４、検出条
件変更部５、電圧制御部１７、２４、監視部３３、及
び、ＮＤフィルタ制御部３５などの演算制御のための手
段を一体に組込むことも可能である。

【００４１】さらに、本実施例においては過去の検出結
果が基準値として用いられているが、本発明はこれに限
定されるものではなく、任意の値を記憶部３８に記憶し
てこれを基準値として利用してよい。例えば、試料セル
２０からの過去の検出結果が存在しない場合や、発光物
質、測定項目、免疫反応の測定手法等を変更する毎に異
なる過去の検出結果を要求する場合等を考慮すると、基
準値としてＬＥＤ８による一定量の疑似光を用いる構成
であってもよい。ＬＥＤ光による検出値を基準とする場
合には、発光物質等の種類に拠らず常に同一の基準を利
用できる点で好ましい。但し、この場合にも、ＰＭＴ７
の感度適否をより正確に判断するためには、ＬＥＤ８か
らの光量を異ならせてＰＭＴ７に検出させた複数の基準
値を採用するとよい。

【００４２】また、ＬＥＤ８からの疑似光の検出値を基
準値として用いる場合、従来の検量線を作成する方法に
適用すれば、検量線の良否判定を実施するための理想検
量線として利用することも可能であるから、従来法の精
度管理効率も向上し得る点で好ましい。

【００４３】また、本実施例では、検出条件の変更のた
めにＰＭＴ７の印加電圧が変化させられるが、本発明は
これに限定されず、例えば、図６に示すように、ＰＭＴ
７スライド変位させ、ＰＭＴ７とＬＥＤ８との間隔を、
ＬＥＤ８の光量が基準値に近付くように変化させてもよ
い。図６においては、ＰＭＴホルダ１３がＰＭＴ７とＬ
ＥＤ８による光路上に沿って図の矢印方向に進退調節を
行うための可動機構を有しており、動力源としてアクチ
ュエ−タ５１が採用されている。必要ならば、ＰＭＴ７
の近傍に光学補正のためのレンズ系を配置してもよい。
一般に発光体から発せられた光の強度は距離の自乗に比
例して減ずるので、図６に示すようにＰＭＴ７とＬＥＤ
８の距離を変化させても、検出条件を変更することがで
きる。

【００４４】ここで、可動機構やアクチュエ−タとして
一般的な種々の手段を採用することが可能である。ま
た、試料セル２０がマイクロプレ−トや横載置型スライ
ド板のように、縦方向の測定を要するものでは、ＰＭＴ
７とＬＥＤ８の配置を上下に配置して縦方向の光路に変
更すればよい。

【００４５】また、ＮＤフィルタ３４とセルホルダ１９
の間に退避可能なミラ−や固定されたマジックミラ−を
配設して、試料セル２０からの発光をＰＭＴ７に向けて
反射させるとともに、ＬＥＤ８点灯時にはＬＥＤ８から
の発光がＰＭＴ７に届くよう構成することにより、免疫
測定とＰＭＴの感度試験を効率良く行うこともできる。

【００４６】また、図示しないが、発光反応部２に、検
液試料を試料セル２０に直接分注できる分注器機構を設
け、トリガ−分注とほぼ同時に測光を開始できるように
すれば、アクリジニウムエステル化合物やルミノ−ル類
似物質のようにトリガ−溶液分注後瞬間的に発光現象を
起こす物質の測定も可能になる。

【００４７】さらに、セルホルダ１９をＬＥＤ８とＰＭ
Ｔ７との光路上から退避（または隠蔽）させるよう適宜
移動可能に構成して、ＰＭＴ７による試料セル２０から
の発光量検出の後にセルホルダ１９を退避させるように
制御すれば、遮光条件を維持したまま即座にＬＥＤ８か
らの発光を検出することができるので、ＰＭＴ７の感度
を迅速にかつ高精度に検出でき、ひいては試料セル２０
からの発光量の誤差を正確に補正できるなどの利点を有
する。

【００４８】

【発明の効果】以上説明したように請求項１の発明は、
被検試料の免疫反応に伴って生じる化学発光の光量を光
検出器を利用して検出し、光量に基づいて免疫測定を行
う光学的免疫測定方法において、予め決められた基準値
に基づいて光検出器の検出結果の可否を判断する第１の
工程と、検出結果が否の場合に光検出器に向けて化学発
光の疑似光を発し、この疑似光を光検出器を利用して検
出し、得られた検出値を基準値と比較する第２の工程
と、光検出器の検出値が基準値に近付くよう検出条件を
変化させる第３の工程とを具備した光学的免疫測定方法
である。

【００４９】また、請求項２の発明は、被検試料の免疫
反応に伴って生じる化学発光の光量を光検出器を利用し
て検出し、光量に基づいて免疫測定を行う免疫測定装置
において、光検出器へ疑似光を発する疑似光光源と、光
検出器の検出値を予め設定された基準値と比較し、検出
値が基準値に近付くよう検出条件を変化させる検出条件
変更部とを備えた免疫測定装置である。そして、請求項
１及び請求項２の発明によれば、被検試料の発光光量の
検出精度を恒常的に保てるという効果がある。

【図面の簡単な説明】

【図１】本発明の一実施例の免疫測定装置の要部を示す
構成図。

【図２】発光反応部を示すもので、（ａ）は側断面図、
（ｂ）は平断面図。

【図３】発光反応部の周辺の構成を概略的に示すブロッ
ク図。

【図４】検出条件変更部の周辺の構成を概略的に示すブ
ロック図。

【図５】本発明の一実施例の光学的免疫測定方法を示す
フロ−チャ−ト。

【図６】変形例を示す構成図。

【符号の説明】

１…免疫測定装置、３…免疫測定部、５…検出条件変更
部、７…光電子倍増管（光検出器）、８…発光ダイオ−
ド（疑似光光源）。

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】被検試料の免疫反応に伴って生じる化学
発光の光量を光検出器を利用して検出し、上記光量に基
づいて免疫測定を行う光学的免疫測定方法において、予
め決められた基準値に基づいて上記光検出器の検出結果
の可否を判断する第１の工程と、上記検出結果が否の場
合に上記光検出器に向けて上記化学発光の疑似光を発
し、この疑似光を上記光検出器を利用して検出し、得ら
れた検出値を上記基準値と比較する第２の工程と、上記
光検出器の検出値が上記基準値に近付くよう検出条件を
変化させる第３の工程とを具備した光学的免疫測定方
法。
【請求項２】被検試料の免疫反応に伴って生じる化学
発光の光量を光検出器を利用して検出し、上記光量に基
づいて免疫測定を行う免疫測定装置において、上記光検
出器へ疑似光を発する疑似光光源と、上記光検出器の検
出値を予め設定された基準値と比較し、上記検出値が上
記基準値に近付くよう検出条件を変化させる検出条件変
更部とを備えたことを特徴とする免疫測定装置。
【請求項３】上記光検出器が光電子倍増管であり、上
記検出条件変更部が上記光電子倍増管の印加電圧を変化
させることを特徴とする前記請求項２記載の免疫測定装
置。
【請求項４】上記検出条件変更部が上記光検出器と上
記疑似光光源との位置関係を変化させることを特徴とす
る前記請求項２記載の免疫測定装置。