一种时间分辨免疫分析检测系统与检测方法
技术领域
本发明涉及时间分辨光学检测的技术领域,特别涉及一种时间分辨免疫分析检测系统与检测方法。
背景技术
当今感染性疾病仍然是人类面临的主要疾病,抗生素使得许多细菌性感染得到了控制,有效地降低了各种严重细菌感染性传染病的死亡率,但随之而来的抗生素滥用及耐药性问题也日趋严重。目前国家已经加大合理使用抗生素的控制力度,因此,对感染性染性疾病的早期、快速的鉴别诊断,动态监测对抗生素的合理使用及疾病的治疗具有重要的意义。
现有技术中,为确定患者患病而取其体液,并在体外检测体液中响应蛋白的含量是否符合标准,当其超出区间范围时,则判断其可能患有相关的疾病。但对于单一蛋白的检测很多情况下会有误诊情况,常是需要相关诊断或是多种对应蛋白检测结果相互佐证,用以提高诊断的准确率,减少误诊率直至确诊。但是现有相关检测的各种蛋白都是分别进行检测,使得检测时长较久,且增加检测量。
目前,C反应蛋白(CRP)、血清淀粉样蛋白A(SAA)、降钙素原(PCT)是感染性疾病的实验检查的主要依据,用于感染的诊断和鉴别,适用于发热待查、昏迷病人、老年病人、痴呆病人和儿童等患者。其中,在感染发生6h~8h后,CRP水平即开始升高,24h~48h达到高峰,高峰值可达正常的数百倍,在感染消除后其含量急骤下降,一周内可恢复正常,在病毒感染时无显著升高,这为疾病早期感染类型的鉴别提供了极其得要的依据。SAA在病毒和细菌感染中均升高,而病毒感染中CRP几乎不升高或升高不明显。因此,在CRP正常的病毒感染患者、非侵袭性或早期侵袭性细菌感染患者中,SAA是一个较为有用的指标,对于及时有效地治疗及各种并发症的预防有着重要的意义。因此,两者的联合检测可有效提高感染早期的诊断效率,提高临床灵敏度和临床特异性,并为病毒与细菌感染的鉴别及治疗方案的选择提供有用的参考信息。
目前,针对上述几种标记物的检测主要是免疫检测技术,即利用抗原与抗体特异性反应而建立的检测方法,包括免疫比浊法、免疫荧光法、化学发光法、时间分辨免疫荧光法、电化学发光法和免疫层析法等,可从人体血清和血浆中检测出上述蛋白。根据标记与否可归纳为标记免疫分析法和非标记免疫分析法两大类。由于需要有标记物,不可避免地存在需要将结合的抗原-抗体与过量的抗原或抗体的分离问题,因而标记免疫分析法根据分离与否又分为均相免疫分析法和非均相免疫分析法。非均相免疫分析法需要包埋、洗脱、分离等多步操作,设备昂贵,样本处理和分析过程繁琐,分析时间长,对专业程度要求高,操作易出现假阳性结果,造成漏检误检,不能满足快速检测和诊断的要求。均相发光免疫检测法是一种基于微球与微球、粒子与粒子、或分子与分子之间靠近的效应,并用于待测样本中目标分析物检测的方法,例如均相FRET、均相化学发光等。通过对光信号的强度检测,来判断实际检测样本中有无待测目标分析物或进一步得到目标分析物的浓度信息。均相发光免疫检测法有效避免了洗脱、分离等繁琐步骤,极大提高了分析效率和性价比,具有取代传统非均相免疫分析的潜力。
但是,均相发光免疫检测方法目前无法同时对单一样本中的多种抗原或抗体进行准确检测。一方面,如上述CRP、SAA、PCT的检测,由于体内含量的差异(CRP、SAA是mg级水平的物质,PCT是pg级水平的物质),同时测量时低浓度目标物对应的弱信号会被高浓度目标物对应的强信号掩盖,因此一般需要分别测试一次才能完成所有项目的检测。另一方面,由于均相环境下多种颗粒之间的存在复杂的关联,如何有效的鉴别区分不同待测物的信号,也成为一个重要因素。
除此之外,目前均相免疫方法的检测样本基本上是血清或血浆样本,而无法检测全血样本。这是由于全血样本基质复杂,干扰因素多。这就必然需要样本的前处理,从而检测流程变得更复杂,耗时更长。
如果能同时检测上述几种抗体,就可以更加快速、简单地对感染性疾病进行辅助诊断,降低患者医疗负担,从而可以有效避免窗口期的患者因体内抗体灵敏度不足以无法被检出时造成漏检的风险,提高临床诊断的灵敏度和特异性。
发明内容
本发明的目的是,提供一种免疫分析检测装置、检测方法以及相应的免疫分析检测试剂。免疫分析检测试剂包括零时均相免疫检测试剂和/或延时均相免疫检测试剂。零时均相免疫检测试剂用于在激发光照射的同时产生用于辨别待检零时生物标志物的含量的信号。延时均相免疫检测试剂用于在激发光照射后的固定时段内产生用于辨别待检延时生物标志物的含量的信号。根据本发明的免疫分析检测装置、检测方法以及相应的免疫分析检测试剂,能够在同一试剂中进行零时生物标志物的含量与延时生物标志物的含量的检测。本发明中的零时生物标志物可以为CRP和/或SAA。延时生物标志物可以为PCT。CRP与SAA是mg级水平的物质,可以通过浊度检测对含量进行检测。PCT是pg级水平的物质,可以通过高精度的光学测试对含量进行检测。当两者含量差别较大时,可以忽略PCT对浊度的影响。
本公开涉及一种用于检测待测样本的时间分辨免疫分析检测系统,所述待测样本包括具有至少一个零时生物标志物和至少一个延时生物标志物的采集样本和加入的分别用于检测所述至少一个零时生物标志物和至少一个延时生物标志物的至少一个零时均相免疫检测试剂与至少一个延时均相免疫检测试剂,所述时间分辨免疫检测系统包括:
光源,所述光源构造成为样品槽位提供光照,所述样品槽位用于放置待测样本;
时间门控模块,所述时间门控模块限定零时检测时段、和从所述零时检测时段结束后开始的至少一个延时检测时段,所述时间门控模块与所述光源联接,并且构造成在所述零时检测时段开始时控制所述光源开启,以对待测样本进行照射,并且在所述零时检测时段结束时控制所述光源关闭;
零时检测模块,所述零时检测模块联接至所述时间门控模块,并能够在所述时间门控模块的控制下在所述零时检测时段期间开启,并且在所述光源的照明条件下采集用于识别所述至少一个零时生物标志物的含量的至少一个零时检测信号;
延时检测模块,所述延时检测模块联接至所述时间门控模块,并能够在所述时间门控模块的控制下在所述至少一个延时检测时段期间内开启,并且在没有所述光源的照明条件下采集用于识别所述至少一个延时生物标志物的含量的至少一个延时检测信号;
信号处理模块,所述信号处理模块联接至所述零时检测模块和所述延时检测模块,并且构造成通过对所述至少一个零时检测信号和所述至少一个延时检测信号进行处理而得到所述至少一个零时生物标志物的含量和所述至少一个延时生物标志物的含量。
在一些实施例中,所述至少一个延时检测时段为多个延时检测时段,并且所述多个延时检测时段互相错开。
在一些实施例中,所述零时检测模块为浊度检测模块。
在一些实施例中,所述浊度检测模块包括透射检测模块和/或散射检测模块。
在一些实施例中,所述延时检测模块为余辉检测模块。
在一些实施例中,所述至少一个延时检测信号包括长余辉信号,所述长余辉信号在所述至少一个延时检测时段中的长余辉检测时段中被采集。
在一些实施例中,所述长余辉检测时段为从所述零时检测时段结束后开始的100ms至10s之间。
在一些实施例中,所述至少一个延时检测信号包括荧光或磷光信号,所述荧光或磷光信号在所述至少一个延时检测时段中的荧光或磷光检测时段中被采集。
在一些实施例中,所述荧光或磷光检测时段为从所述零时检测时段结束后开始的0s至100ms之间。
在一些实施例中,所述透射检测模块的位置设置成使所述光源发出的入射光经过所述待测样本到达所述透射检测模块。
在一些实施例中,经过待测样本由所述散射检测模块检测到的散射光与所述光源发出的入射光之间所成的夹角为8°至172°。
在一些实施例中,经过待测样本由所述延时检测模块检测到的光束与所述光源发出的入射光之间所成的夹角为30°至150°。
在一些实施例中,所述零时生物标志物为CRP和/或SAA,所述延时生物标志物为PCT。
在一些实施例中,所述浊度检测模块包括滤波片、衰减片与浊度检测器。
在一些实施例中,所述浊度检测器选自以下组中的一种或多种:硅光检测器、光电池、雪崩管。
在一些实施例中,所述余辉检测模块包括光学快门、滤波片与余辉检测器,所述光学快门联接至所述时间门控模块并由所述时间门控模块控制。
在一些实施例中,所述余辉检测器选自以下组中的一种或多种:光电倍增管检测器、单光子计数检测器、雪崩管。
在一些实施例中,所述零时检测模块和所述延时检测模块采用一个共同的多用途检测器,或分别采用不同的检测器。
在一些实施例中,所述时间分辨免疫分析检测系统还包括遮蔽器,所述遮蔽器为所述光源、所述零时检测模块和所述延时检测模块提供避光条件。
在一些实施例中,所述时间分辨免疫分析检测系统还包括温度传感器,所述温度传感器设置成检测待测样本的温度,并且设置成与所述信号处理模块连接,以用于在信号处理时进行参数校正。
在一些实施例中,所述时间分辨免疫分析检测系统还包括样本传输装置,所述样本传输装置设置成能够移动待测样品。
在一些实施例中,所述样本传输装置设置成能够将待测样品从第一检测位置移动至第二检测位置,其中,待测样品在所述第一检测位置接受零时检测,待测样品在所述第二检测位置接受延时检测。
在一些实施例中,所述样本传输装置为传送带、导轨或移动抓手。
在一些实施例中,信号处理模块中存储有至少一条延时生物标志物的含量-延时检测信号的标准曲线、至少一条延时生物标志物的含量-零时检测信号的标准曲线和至少一条零时生物标志物的含量-零时检测信号的标准曲线,以用于对获得的零时检测信号和延时检测信号分别进行处理,从而得到至少一个零时生物标志物的含量和至少一个延时生物标志物的含量。
在一些实施例中,所述时间分辨免疫分析检测系统还包括示出模块,所述示出模块将所述至少一个零时生物标志物的含量与所述至少一个延时生物标志物的含量进行示出。
本公开还涉及一种利用前述的时间分辨免疫分析检测系统进行时间分辨免疫分析检测的方法,所述方法包括以下步骤:
将至少一个零时均相免疫检测试剂与至少一个延时均相免疫检测试剂分别加入到采集样本中以形成待测样本;
打开光源以对待测样本进行照射,并同时打开零时检测模块以在所述光源的照明条件下从待测样本采集至少一个零时检测信号;
时间门控模块记录光源打开的时间为时间零点,并在时间零点之后的零时检测时段结束时关闭所述光源和零时检测模块,所述时间门控模块进一步在互相错开的至少一个延时检测时段打开延时检测模块以在没有所述光源的照明条件下从待测样本采集至少一个延时检测信号;
信号处理模块调取至少一条延时生物标志物的含量-延时检测信号的标准曲线、至少一条延时生物标志物的含量-零时检测信号的标准曲线和至少一条零时生物标志物的含量-零时检测信号的标准曲线;
将所述至少一个延时检测信号结合至少一条延时生物标志物的含量-延时检测信号的标准曲线得到至少一个延时生物标志物的含量;
将所述至少一个延时生物标志物的含量结合至少一条延时生物标志物的含量-零时检测信号的标准曲线得到所述至少一个延时生物标志物的对每一个零时检测信号的干扰值;
将所述至少一个零时检测信号分别减去所述对每一个零时检测信号的干扰值以得到至少一个零时生物标志物的纯净信号;
将所述至少一个零时生物标志物的纯净信号分别代入至少一条零时生物标志物的含量-零时检测信号的标准曲线得到所述至少一个零时生物标志物的含量。
在一些实施例中,所述方法还包括分别建立所述至少一条延时生物标志物的含量-延时信号的标准曲线、所述至少一条延时生物标志物的含量-零时信号的标准曲线和所述至少一条零时生物标志物的含量-零时信号的标准曲线。
在一些实施例中,所述方法还包括使用示出模块将所述至少一个零时生物标志物的含量与所述至少一个延时生物标志物的含量进行示出。
本公开的主题技术的其它特征和优点将在下面的描述中阐述,并且部分地将从所述描述显而易见,或者可以通过实践本公开的主题技术来学习。通过在书面说明书及其权利要求书以及附图中特别指出的结构,将实现和获得本公开的主题技术的优点。
应当理解,前述一般性描述和以下详细描述都是示例性和说明性的,并且旨在提供对要求保护的本公开的主题技术的进一步说明。
附图说明
为了更清楚地说明本发明,下面将参照附图来说明一些实施方式,但本发明不限于所示出的和所说明的实施方式。
图1为根据本发明的一个实施例的时间分辨免疫分析检测系统的结构示意图。
图2为根据本发明的一个实施例的时间分辨免疫分析检测方法中的时序示意图。
图3为根据本发明的一个实施例的时间分辨免疫分析检测方法的流程示意图。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚,下面将参照附图对本发明实施例进行描述。基于所描述的实施例,本领域普通技术人员能够做出各种修改并且得到其他变型方案或者改进方案,它们都落在本发明保护范围之内。
图1为根据本发明一个实施例的时间分辨免疫分析检测系统1的结构示意图。时间分辨免疫检测系统1用零时检测和延时检测的模式分析同一免疫反应体系(也称为待测样本2)中的多个生物标志物。所述多个生物标志物可以包括至少一个零时生物标志物和至少一个延时生物标志物。时间分辨免疫检测系统1包括光源10、零时检测模块20、延时检测模块30、时间门控模块40和信号处理模块50。
时间门控模块40分别与光源10、零时检测模块20和延时检测模块30电联接。时间门控模块40构造成记录时间零点,并确定从时间零点开始的零时检测时段、和从零时检测时段结束后的至少一个延时检测时段。如图2所示,时间零点t1处,时间门控模块40控制光源10和零时检测模块20开启。在零时检测时段(t1-t2)期间,光源10构造成为用于放置待测样本的样品槽位提供光照,并照射待测样本2,从而例如为待测样本2中的零时生物标志物和零时均相免疫检测试剂提供照明条件,并为待测样本2中的延时生物标志物和延时均相免疫检测试剂提供供其吸收的光照能量。在零时检测时段(t1-t2)期间,零时检测模块20在光源10的照明条件下对零时生物标志物进行零时检测。在零时检测时段结束t2时,时间门控模块40控制光源10和零时检测模块20关闭。在延时检测时段(例如,t2之后的100ms-10s)期间,时间门控模块40控制延时检测模块30开启。延时检测模块30在没有光源10的照明条件下对延时生物标志物进行延时检测。如此,可以实现用零时检测和延时检测的模式对待测样本2中的多个生物标志物的含量进行定量检测。
零时检测模块20用于采集至少一个零时检测信号,以识别至少一个零时生物标志物的含量。延时检测模块30用于采集至少一个延时检测信号,以识别至少一个延时生物标志物的含量。在一些实施例中,零时检测模块20和延时检测模块30可以采用一个共同的多用途检测器。在一些实施例中,零时检测模块和延时检测模块也可以分别采用不同的检测器。
在一些实施例中,能够通过免疫比浊技术检测零时生物标志物的含量,并且能够通过均相发光免疫检测技术检测延时生物标志物的含量。零时检测模块20可以为浊度检测模块,并且零时检测信号为浊度信号。浊度检测模块可以包括透射检测模块和/或散射检测模块。透射检测模块与散射检测模块均可以包括滤波片、衰减片与浊度检测器。浊度检测器可以为选自以下组中的一种或多种:硅光检测器、光电池、雪崩管等。透射检测模块设置在光源10发出的入射光方向上,并且待测样本2可以放置在透射检测模块和光源10之间或移动到透射检测模块和光源10之间。散射检测模块设置成偏离光源10发出的入射光方向。经过待测样本2的由散射检测模块检测的散射光与光源10发出的入射光之间所成的夹角可以为8°至172°,优选地,该夹角为15°至165°。
延时检测模块30可以为余辉检测模块,并且延时检测信号为长余辉信号,其对应的延时检测时段为零时检测时段结束后的100ms至10s之间。在一些实施例中,延时检测信号为荧光或磷光信号,其对应的延时检测时段为零时检测时段结束后的0至100ms之间。余辉检测模块可以包括光学快门、滤波片与余辉检测器。时间门控模块40联接至光学快门,并控制光学快门。在一些实施例中,余辉检测器选自以下组中的一种或多种:光电倍增管检测器、单光子计数检测器、雪崩管等。待测样本2可以放置在延时检测模块30附近或移动到延时检测模块30附近。在一些实施例中,经过待测样本2由延时检测模块检测的光束与光源10发出的入射光之间所成的夹角为30°至150°。例如,经过待测样本2由延时检测模块检测的光束与光源10发出的入射光之间所成的夹角为90°。
信号处理模块50联接至零时检测模块20和延时检测模块30,以分别获得零时检测信号和延时检测信号。另外,信号处理模块50存储有至少一条延时生物标志物的含量-延时检测信号的标准曲线、至少一条延时生物标志物的含量-零时检测信号的标准曲线和至少一条零时生物标志物的含量-零时检测信号的标准曲线。信号处理模块50通过上述标准曲线对获得的零时检测信号和延时检测信号进行处理,从而得到待测样本2中的零时生物标志物的含量和延时生物标志物的含量。
在一些实施例中,时间分辨免疫分析检测系统1还可以包括示出模块60。示出模块60电联接至信号处理模块50,以用于对零时生物标志物与延时生物标志物的含量分别进行示出。
在一些实施例中,时间分辨免疫检测系统1还可以包括遮蔽器。遮蔽器用于为光源10、零时检测模块20、延时检测模块30提供避光条件。在时间分辨免疫检测系统1包括遮蔽器的情况下,示出模块60可以设置在遮蔽器上或与遮蔽器分开设置。
在一些实施例中,时间分辨免疫检测系统1还可以包括温度传感器80。温度传感器80设置成用于检测待测样本2在测试环境下的温度。信号处理模块50与温度传感器80电连接,以用于在信号处理时进行参数校正。
在一些实施例中,时间分辨免疫检测系统1还可以包括样本传输装置90。样本传输装置90用于在多个检测位置(例如第一检测位置和第二检测位置)之间移动待测样本2。在一些实施例中,第一检测位置为用于进行零时检测的零时检测位,第二检测位置为用于进行延时检测的延时检测位。样本传输装置90例如为传送带、导轨或移动抓手等。
根据本发明的时间分辨免疫分析检测系统1可以与免疫分析检测试剂配合使用。免疫分析检测试剂可以包括零时均相免疫检测试剂和/或延时均相免疫检测试剂。零时均相免疫检测试剂与零时生物标志物能够在接受激发光照射的同时产生用于辨别待检测的零时生物标志物含量的零时检测信号。延时均相免疫检测试剂与延时生物标志物能够在接受光照能量的一定时间后产生用于辨别待检测的延时生物标志物的含量的延时检测信号。零时生物标志物可以为CRP和/或SAA。延时生物标志物可以为PCT。
所述免疫分析检测试剂可以包括至少一组零时均相免疫检测试剂。当所述免疫分析检测试剂包括两组或多组零时均相免疫检测试剂时,零时检测模块可以通过各组零时均相免疫检测试剂区分地检测多个零时生物标志物的含量。所述免疫分析检测试剂可以包括至少一组延时均相免疫检测试剂。当所述免疫分析检测试剂包括两组或多组延时均相免疫检测试剂时,延时检测模块可以通过各组延时均相免疫检测试剂区分地检测多个延时生物标志物的含量。在一些实施例中,所述免疫分析检测试剂包括一组零时均相免疫检测试剂和一至四组延时均相免疫检测试剂。
如上所述,能够通过免疫比浊技术测得零时生物标志物的含量,并且能够通过均相发光免疫检测技术测得延时生物标志物的含量。零时均相免疫检测试剂可以为浊度试剂,该浊度试剂包括第一乳胶微球和能够特异性地识别零时生物标志物的第一抗体。第一抗体连接至第一乳胶微球的表面。可以设置至少一种能够特异性地识别零时生物标志物的第一抗体。第一乳胶微球可以具有至少一种粒径。
在一些实施例中,第一乳胶微球为聚苯乙烯乳胶微粒、交联聚苯乙烯乳胶微粒、水凝胶纳米球、SiO2纳米球、聚苯乙烯包覆的SiO2纳米球、水凝胶包覆的SiO2纳米球、水凝胶包覆的聚苯乙烯乳胶微粒、水凝胶包覆的交联聚苯乙烯乳胶微粒、水凝胶高分子球中的至少一种。乳胶微球的粒径为30nm至1000nm。优选地,乳胶微球的粒径为60nm至500nm。在一些实施例中,乳胶微球为表面修饰的聚苯乙烯乳胶微粒、交联聚苯乙烯乳胶微粒、水凝胶高分子球等。
延时均相免疫检测试剂可以为余辉发光试剂,该余辉发光试剂包括第一发光给体组分和第一发光受体组分。第一发光给体组分负载有能特异性识别延时生物标志物的第二抗体,第一发光受体组分负载有能够特异性识别延时生物标志物的第三抗体。第一发光给体组分能够将受到激发光照射时所吸收的能量传递给第一发光受体组分,并使得第一发光受体组分在激发光照射的一定时间后发出能够识别待检延时生物标志物的含量的光信号。
在一些实施例中,第一发光给体组分包括吸光剂,第一发光受体组分包括发光剂与载体微球。吸光剂能够在激发光照射时吸收光后跃迁至激发态,随后产生作用于发光剂以使其发射光信号的单线态氧。在一些实施例中,载体微球的粒径为30nm至1000nm,优选地,粒径为50nm至500nm,更优选地,粒径为80nm至300nm。
在一些实施例中,第一发光受体组分还包括缓存剂。吸光剂能够在激发光照射时吸收光后跃迁至激发态,随后产生单线态氧。单线态氧先氧化缓存剂,缓存剂的氧化物因不稳定断键并释放能量,发光剂在吸收能量后发射光信号。
在一些实施例中,当免疫分析检测试剂包括两组余辉发光试剂时,第一组余辉发光试剂能够在激发光照射后的第一延时检测时段期间发出辨别待检的第一延时生物标志物的含量的光信号,第二组余辉发光试剂能够在激发光照射后的与第一延时检测时段错开的第二延时检测时段期间发出辨别待检的第二延时生物标志物的含量的光信号。在一些实施例中,第一组余辉发光试剂发射长余辉信号,并且该长余辉信号被采集的时间段可以为从光源关闭后的100ms至10s。在一些实施例中,第二组余辉发光试剂发射荧光或磷光信号,并且该荧光或磷光信号被采集的时间段可以为从光源关闭后的0至100ms。当免疫分析检测试剂包括更多组余辉发光试剂时,各组余辉发光试剂所对应的延时检测时段互相错开。
在一些实施例中,第一组余辉发光试剂和第二组余辉发光试剂中所负载的发光剂不同。例如,辨别待检的第一延时生物标志物的含量的光信号与辨别待检的第二延时生物标志物的含量的光信号不同,从而不发生明显的发射光谱重叠。
在一些实施例中,免疫分析检测试剂还包括稀释液,稀释液为由多种成分混合的溶液,其能够对全血样本进行溶血和稀释,并控制反应体系的pH、盐浓度等。在一些实施例中,激发光的波长范围为1532-255nm;优选地,激发光的中心波长为1064nm、980nm、915nm、808nm、785nm、830nm、808nm、785nm、730nm、680nm、630nm、532nm、488nm、450nm、405nm、365nm。
图3示出根据本发明的时间分辨免疫分析检测系统1对采集样本进行检测的过程。
在进行检测之前,需要制备标准曲线。具体来说,分别建立至少一条延时生物标志物的含量-延时检测信号的标准曲线、至少一条延时生物标志物的含量-零时检测信号的标准曲线和至少一条零时生物标志物的含量-零时检测信号的标准曲线,并将这些标准曲线存储于信号处理模块50中。
开始进行信号测试。具体来说,将至少一个零时均相免疫检测试剂与至少一个延时均相免疫检测试剂分别加入到包括至少一个零时生物标志物和至少一个延时生物标志物的采集样本中,以形成待测样本2。时间门控模块40在时间零点开启光源10和零时检测模块20。光源10对待测样本2进行照射,零时检测模块20在光源10的照明条件下从待测样本2采集至少一个零时检测信号。时间门控模块40记录时间零点,并在零时检测时段结束时关闭光源10和零时检测模块20。时间门控模块40在零时检测时段结束后的互相错开的至少一个延时检测时段开启延时检测模块30。延时检测模块30在没有光源10的照明条件下从待测样本2采集至少一个延时检测信号。
信号处理模块50从零时检测模块20和延时检测模块30分别获得至少一个零时检测信号和至少一个延时检测信号。信号处理模块50将所述至少一个延时检测信号结合至少一条延时生物标志物的含量-延时检测信号的标准曲线,得到至少一个延时生物标志物的含量。信号处理模块50将所述至少一个延时生物标志物的含量结合至少一条延时生物标志物的含量-零时检测信号的标准曲线,得到所述至少一个延时生物标志物的对每一个零时检测信号的干扰值。信号处理模块50将至少一个零时检测信号分别减去所述对每一个零时检测信号的干扰值,以得到至少一个零时生物标志物的纯净信号。信号处理模块50将所述至少一个零时生物标志物的纯净信号分别代入所述至少一条零时生物标志物的含量-零时检测信号的标准曲线,得到所述至少一个零时生物标志物的含量。
示出模块60将至少一个零时生物标志物的含量与至少一个延时生物标志物的含量进行示出。
本发明使用的长余辉发光剂在激发光源去除后可持续一段时间的发光。长余辉发光材料的发光寿命通常大于一百毫秒(甚至达到秒级及以上水平),在生物医学、生命科学等领域具有重要的应用价值。在基于该有机体系的长余辉发光体系中,发光过程涉及多种化学物质间的光化学相互作用,其中经过一系列光化学能量转化与代谢过程,输入的激发光能量最终以发光的形式释放出来,从而实现长余辉发光。光化学能量转化与代谢过程包括能量输入、能量缓存、能量提取、能量转移和能量释放。原本非常迅速的光子辐射跃迁进程(纳秒量级至微秒量级)发生改变,能量缓慢释放并最终以光能的形式发射出来,由此获得超长的发光时间(毫秒量级至小时量级),大大改善了有机分子发光寿命短的限制,提升了长余辉发光的强度。
根据本发明的免疫分析检测装置、检测方法以及相应的免疫分析检测试剂,能够在同一试剂中进行零时生物标志物的含量与延时生物标志物的含量的检测。本发明的测试免疫分析检测试剂、检测装置与检测方法相互配合作用,得到准确的含量值。在对两组物质测试时,可以简单、快捷且不会相互干扰的得到待测物含量,用于对待检样本的患病情况进行确诊。
最后应说明的是:以上各实施例仅用以示例性地说明本发明的技术方案,而不限制本发明的保护范围。尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明,本领域的普通技术人员应当理解:可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改,或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换,而这些修改或者替换不脱离本发明的保护范围。