JPH07120449A - 液体クロマトグラフィー用カラムの製造方法 - Google Patents
液体クロマトグラフィー用カラムの製造方法Info
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- JPH07120449A JPH07120449A JP26469393A JP26469393A JPH07120449A JP H07120449 A JPH07120449 A JP H07120449A JP 26469393 A JP26469393 A JP 26469393A JP 26469393 A JP26469393 A JP 26469393A JP H07120449 A JPH07120449 A JP H07120449A
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Abstract
(57)【要約】
【目的】 カラムに陽イオン交換型液体クロマトグラフ
ィー用充填剤を充填後、短時間で所定性能を発揮する陽
イオン交換型液体クロマトグラフィー用カラムの製造方
法を提供する。 【構成】 陽イオン交換型液体クロマトグラフィー用充
填剤を、陰イオン型界面活性剤を１重量％以下の濃度で
含有し、且つ表面張力５０ダイン／ｃｍ以下の充填用溶
液に分散させてカラムに充填することを特徴とする。
ィー用充填剤を充填後、短時間で所定性能を発揮する陽
イオン交換型液体クロマトグラフィー用カラムの製造方
法を提供する。 【構成】 陽イオン交換型液体クロマトグラフィー用充
填剤を、陰イオン型界面活性剤を１重量％以下の濃度で
含有し、且つ表面張力５０ダイン／ｃｍ以下の充填用溶
液に分散させてカラムに充填することを特徴とする。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、カラムに充填剤を充填
後、短時間で所定性能を発揮する液体クロマトグラフィ
ー用カラムの製造方法に関する。
後、短時間で所定性能を発揮する液体クロマトグラフィ
ー用カラムの製造方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】従来、陽イオン交換型液体クロマトグラ
フィー用カラムの製造方法は、陽イオン交換型液体クロ
マトグラフィー用充填剤（以下、充填剤とする）を溶離
液などからなる充填用溶液に分散させスラリー状態とし
て分散の直後にカラムに圧入充填していた。
フィー用カラムの製造方法は、陽イオン交換型液体クロ
マトグラフィー用充填剤（以下、充填剤とする）を溶離
液などからなる充填用溶液に分散させスラリー状態とし
て分散の直後にカラムに圧入充填していた。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】しかしながら、このよ
うにして得られたカラムの性能は、充填直後は所定の性
能が発揮されず、測定のたびに測定値がばらつき不安定
な状態にあった。そこで、この問題について検討した結
果、充填剤を充填用溶液に分散後、充填するまでの時間
を長くすればよいことが分かった。しかし、充填直後か
ら所定性能を発揮するカラムを得るには、上記の時間は
１週間程必要なことがわかり、この方法は実用的なもの
ではなかった。
うにして得られたカラムの性能は、充填直後は所定の性
能が発揮されず、測定のたびに測定値がばらつき不安定
な状態にあった。そこで、この問題について検討した結
果、充填剤を充填用溶液に分散後、充填するまでの時間
を長くすればよいことが分かった。しかし、充填直後か
ら所定性能を発揮するカラムを得るには、上記の時間は
１週間程必要なことがわかり、この方法は実用的なもの
ではなかった。
【０００４】本発明は、上記問題点に鑑みてなされたも
のであり、その目的は、カラムに陽イオン交換型液体ク
ロマトグラフィー用充填剤を充填後、短時間で所定性能
を発揮する液体クロマトグラフィー用カラムの製造方法
を提供することにある。
のであり、その目的は、カラムに陽イオン交換型液体ク
ロマトグラフィー用充填剤を充填後、短時間で所定性能
を発揮する液体クロマトグラフィー用カラムの製造方法
を提供することにある。
【０００５】
【課題を解決するための手段】本発明に使用される陽イ
オン交換型液体クロマトグラフィー用充填剤としては、
陽イオン交換樹脂タイプのものであれば、特に限定され
ずいずれも使用可能であり、例えば、イオン交換基とし
て表面にカルボキシル基やスルホン基などを有するもの
が挙げられる。
オン交換型液体クロマトグラフィー用充填剤としては、
陽イオン交換樹脂タイプのものであれば、特に限定され
ずいずれも使用可能であり、例えば、イオン交換基とし
て表面にカルボキシル基やスルホン基などを有するもの
が挙げられる。
【０００６】この場合、充填剤の全体に上記の交換基を
有するものでもよいし、適当な担体の表面に上記の交換
基が存在するように処理されたものでもよい。充填剤の
全体に上記の交換基を有するものとしては、例えば、ス
チレン、ジビニルベンゼンとイオン交換基を有する単量
体との架橋共重合体粒子及びテトラメチロールメタント
リアクリレートなどの（メタ）アクリル酸のエステルと
（メタ）アクリル酸の架橋共重合体粒子（特開昭５８−
２２１１６４号公報参照）などが挙げられる。適当な担
体の表面に上記の交換基が存在するように処理されたも
のとしては、例えば、スチレン−ジビニルベンゼンの架
橋共重合体粒子の表面にイオン交換基が導入されたも
の、疎水性架橋重合体粒子の表面に（メタ）アクリル酸
の（共）重合体の層が形成されたもの（特開平２−３０
９２５３号公報参照）及びシリカ粒子の表面にイオン交
換基が導入されたもの（特開昭６３−７５５５８号公報
参照）などが挙げられる。
有するものでもよいし、適当な担体の表面に上記の交換
基が存在するように処理されたものでもよい。充填剤の
全体に上記の交換基を有するものとしては、例えば、ス
チレン、ジビニルベンゼンとイオン交換基を有する単量
体との架橋共重合体粒子及びテトラメチロールメタント
リアクリレートなどの（メタ）アクリル酸のエステルと
（メタ）アクリル酸の架橋共重合体粒子（特開昭５８−
２２１１６４号公報参照）などが挙げられる。適当な担
体の表面に上記の交換基が存在するように処理されたも
のとしては、例えば、スチレン−ジビニルベンゼンの架
橋共重合体粒子の表面にイオン交換基が導入されたも
の、疎水性架橋重合体粒子の表面に（メタ）アクリル酸
の（共）重合体の層が形成されたもの（特開平２−３０
９２５３号公報参照）及びシリカ粒子の表面にイオン交
換基が導入されたもの（特開昭６３−７５５５８号公報
参照）などが挙げられる。
【０００７】本発明に使用される陰イオン型界面活性剤
としては、特に限定されずいずれも使用可能である。例
えば、ジアルキルスルホコハク酸エステル塩、アルキル
ベンゼンスルホン酸塩、アルキルスルホ酢酸塩、α−オ
レフィンスルホン酸塩、Ｎ−アシルメチルタウリン等の
スルホン酸塩；硫酸化油、高級アルコール硫酸エステル
塩、第２級高級アルコール硫酸エステル塩、アルキルエ
ーテル硫酸塩、第２級高級アルコールエトキシサルフェ
ート、ポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテル硫
酸塩、モノグリサルフェート、脂肪酸アルキロールアマ
イドの硫酸エステル塩等の硫酸エステル塩；脂肪酸石
鹸、Ｎ−アシルアミノ酸およびその塩、アルキルエ−テ
ルカルボン酸塩、アシル化ペプチド等のカルボン酸塩；
アルキルエーテルリン酸エステル塩、アルキルリン酸エ
ステル塩等のリン酸エステル塩などが挙げられる。
としては、特に限定されずいずれも使用可能である。例
えば、ジアルキルスルホコハク酸エステル塩、アルキル
ベンゼンスルホン酸塩、アルキルスルホ酢酸塩、α−オ
レフィンスルホン酸塩、Ｎ−アシルメチルタウリン等の
スルホン酸塩；硫酸化油、高級アルコール硫酸エステル
塩、第２級高級アルコール硫酸エステル塩、アルキルエ
ーテル硫酸塩、第２級高級アルコールエトキシサルフェ
ート、ポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテル硫
酸塩、モノグリサルフェート、脂肪酸アルキロールアマ
イドの硫酸エステル塩等の硫酸エステル塩；脂肪酸石
鹸、Ｎ−アシルアミノ酸およびその塩、アルキルエ−テ
ルカルボン酸塩、アシル化ペプチド等のカルボン酸塩；
アルキルエーテルリン酸エステル塩、アルキルリン酸エ
ステル塩等のリン酸エステル塩などが挙げられる。
【０００８】本発明で使用される充填用溶液は、その主
成分としては、従来、充填用溶液の主成分として使用さ
れたものが、いずれも使用可能であり、例えば、液体ク
ロマトグラフィー用カラムが使用されるときの溶離液；
該溶離液に近い組成の液；ヘキサン、クロロホルム、４
塩化炭素、メタノールなどの溶剤；水などの液体が挙げ
られる。
成分としては、従来、充填用溶液の主成分として使用さ
れたものが、いずれも使用可能であり、例えば、液体ク
ロマトグラフィー用カラムが使用されるときの溶離液；
該溶離液に近い組成の液；ヘキサン、クロロホルム、４
塩化炭素、メタノールなどの溶剤；水などの液体が挙げ
られる。
【０００９】本発明においては、上記充填用溶液に前記
のような陰イオン型界面活性剤が１重量％以下の濃度で
含有されており、且つその表面張力が５０ダイン／ｃｍ
以下とされていることを特徴とする。陰イオン型界面活
性剤濃度が高くなると、測定値に悪影響を及ぼす。ま
た、表面張力が５０ダイン／ｃｍを超えると、安定化時
間が長くなる。ここで上記表面張力は、デュヌイ式表面
張力計によって測定された値である。
のような陰イオン型界面活性剤が１重量％以下の濃度で
含有されており、且つその表面張力が５０ダイン／ｃｍ
以下とされていることを特徴とする。陰イオン型界面活
性剤濃度が高くなると、測定値に悪影響を及ぼす。ま
た、表面張力が５０ダイン／ｃｍを超えると、安定化時
間が長くなる。ここで上記表面張力は、デュヌイ式表面
張力計によって測定された値である。
【００１０】本発明の液体クロマトグラフィー用カラム
の製造方法は、陽イオン交換型液体クロマトグラフィー
用充填剤を、陰イオン型界面活性剤を１重量％以下の濃
度で含有し、且つ表面張力５０ダイン／ｃｍ以下の充填
用溶液に分散させてカラムに充填する。
の製造方法は、陽イオン交換型液体クロマトグラフィー
用充填剤を、陰イオン型界面活性剤を１重量％以下の濃
度で含有し、且つ表面張力５０ダイン／ｃｍ以下の充填
用溶液に分散させてカラムに充填する。
【００１１】上記充填用溶液に分離剤を分散させるとき
の、分散された溶液中の分離剤濃度は、好ましくは１〜
３０重量％、より好ましくは５〜１５重量％である。分
離剤濃度が高くなると、充填し難くなり、低くなると充
填に時間が掛かる。
の、分散された溶液中の分離剤濃度は、好ましくは１〜
３０重量％、より好ましくは５〜１５重量％である。分
離剤濃度が高くなると、充填し難くなり、低くなると充
填に時間が掛かる。
【００１２】上記充填の方法は、従来使用されている方
法と同様である。充填方法の一例を挙げると、図１に模
式的に示すように、出口部にフィルター（図示せず）が
セットされたカラム１にパッカー２を接続し、パッカー
２に充填剤及び陰イオン型界面活性剤を含有する充填用
溶液３を充填した後、高圧充填ポンプ４によって陰イオ
ン型界面活性剤を含有しないリン酸緩衝液のみからなる
充填用溶液５をパッカー２に送液する。これによって、
パッカー２を通じてカラム１に充填剤を圧入するととも
に、充填剤を洗浄して、充填用溶液３中の陰イオン型界
面活性剤を洗い出す。
法と同様である。充填方法の一例を挙げると、図１に模
式的に示すように、出口部にフィルター（図示せず）が
セットされたカラム１にパッカー２を接続し、パッカー
２に充填剤及び陰イオン型界面活性剤を含有する充填用
溶液３を充填した後、高圧充填ポンプ４によって陰イオ
ン型界面活性剤を含有しないリン酸緩衝液のみからなる
充填用溶液５をパッカー２に送液する。これによって、
パッカー２を通じてカラム１に充填剤を圧入するととも
に、充填剤を洗浄して、充填用溶液３中の陰イオン型界
面活性剤を洗い出す。
【００１３】
【作用】本発明の製造方法では、充填用溶液に陰イオン
型界面活性剤を添加することにより、充填剤表面への充
填用溶液の浸透が均一に促進されるので、充填剤の機能
が短時間で安定化される。また、充填剤が陽イオン交換
型であるため、カラム充填時に陰イオン型界面活性剤を
含有しない充填用溶液による洗浄によって、陰イオン型
界面活性剤は全て溶出され、カラム性能に影響を及ぼす
ことがない。
型界面活性剤を添加することにより、充填剤表面への充
填用溶液の浸透が均一に促進されるので、充填剤の機能
が短時間で安定化される。また、充填剤が陽イオン交換
型であるため、カラム充填時に陰イオン型界面活性剤を
含有しない充填用溶液による洗浄によって、陰イオン型
界面活性剤は全て溶出され、カラム性能に影響を及ぼす
ことがない。
【００１４】
【実施例】以下、本発明の実施例及び比較例を挙げるこ
とにより、本発明を詳細に説明する。
とにより、本発明を詳細に説明する。
【００１５】（実施例１） （１）充填剤の調製 ジエチレングリコールジメタクリート３００ｇ及びベン
ゾイルパーオキサイド１ｇをイソアミルアルコール２０
０ｇに溶解させた。これを４％ポリビニルアルコール水
溶液２．５リットルに添加して、攪拌しながら調粒した
後、窒素置換下で８０℃に加熱し懸濁重合を行った。８
０℃で８時間重合した後、生成物を熱水及びアセトンで
順次洗浄し、乾燥して微小の疎水性架橋重合体粒子を得
た。この疎水性架橋重合体粒子２００ｇをベンゾイルパ
ーオキサイド０．５ｇが溶解しているアセトン１リット
ルに浸漬してベンゾイルパーオキサイドを含浸させた。
次に、アセトンを２０℃において減圧下で留去した。１
％ポリビニルアルコール水溶液２．５リットルに上記の
含浸処理した疎水性架橋重合体粒子を懸濁させ、攪拌し
ながらメタクリル酸５０ｇを添加し、窒素置換後８０℃
で２時間重合反応を行った。生成物を熱水及びアセトン
で順次洗浄し、乾燥した。得られた微小のポリマーゲル
を分級して粒径が８〜１０μｍの粒子を集め、陽イオン
交換型液体クロマトグラフィー用充填剤を得た。
ゾイルパーオキサイド１ｇをイソアミルアルコール２０
０ｇに溶解させた。これを４％ポリビニルアルコール水
溶液２．５リットルに添加して、攪拌しながら調粒した
後、窒素置換下で８０℃に加熱し懸濁重合を行った。８
０℃で８時間重合した後、生成物を熱水及びアセトンで
順次洗浄し、乾燥して微小の疎水性架橋重合体粒子を得
た。この疎水性架橋重合体粒子２００ｇをベンゾイルパ
ーオキサイド０．５ｇが溶解しているアセトン１リット
ルに浸漬してベンゾイルパーオキサイドを含浸させた。
次に、アセトンを２０℃において減圧下で留去した。１
％ポリビニルアルコール水溶液２．５リットルに上記の
含浸処理した疎水性架橋重合体粒子を懸濁させ、攪拌し
ながらメタクリル酸５０ｇを添加し、窒素置換後８０℃
で２時間重合反応を行った。生成物を熱水及びアセトン
で順次洗浄し、乾燥した。得られた微小のポリマーゲル
を分級して粒径が８〜１０μｍの粒子を集め、陽イオン
交換型液体クロマトグラフィー用充填剤を得た。
【００１６】（２）液体クロマトグラフィー用カラムの
製造 陰イオン型界面活性剤として、ジ（２−エチルヘキシ
ル）スルホコハク酸ソーダエステルの３０重量％水及び
アルコール混合溶液（日本油脂社製、商品名「日油ラピ
ゾール３０」）を、リン酸緩衝液（ＮａＨ2 ＰＯ4 ・２
Ｈ2 Ｏ ２１．８ｇとＮａ2 ＨＰＯ4 ・１２Ｈ2 Ｏ
８．２ｇを水に溶解させて１リットルとしたもの）に
０．１重量％となるように溶解させて充填用溶液を作成
した〔ジ（２−エチルヘキシル）スルホコハク酸ソーダ
エステルの濃度は０．０３重量％となる〕。この充填用
溶液の表面張力は、２８ダイン／ｃｍであった。
製造 陰イオン型界面活性剤として、ジ（２−エチルヘキシ
ル）スルホコハク酸ソーダエステルの３０重量％水及び
アルコール混合溶液（日本油脂社製、商品名「日油ラピ
ゾール３０」）を、リン酸緩衝液（ＮａＨ2 ＰＯ4 ・２
Ｈ2 Ｏ ２１．８ｇとＮａ2 ＨＰＯ4 ・１２Ｈ2 Ｏ
８．２ｇを水に溶解させて１リットルとしたもの）に
０．１重量％となるように溶解させて充填用溶液を作成
した〔ジ（２−エチルヘキシル）スルホコハク酸ソーダ
エステルの濃度は０．０３重量％となる〕。この充填用
溶液の表面張力は、２８ダイン／ｃｍであった。
【００１７】この充填用溶液に、上記（１）で得られた
陽イオン交換型液体クロマトグラフィー用充填剤が１０
重量％となるように分散させた。上記の充填剤が分散さ
れた充填用溶液を、分散の１時間後、４日後、７日後及
び１１日後に、それぞれ６φ×７５ｍｍのステンレス製
カラムに３５０ｋｇ／ｃｍ2 で充填した後、上記のリン
酸緩衝液で洗浄して、陽イオン交換型液体クロマトグラ
フィー用カラムを製造した。
陽イオン交換型液体クロマトグラフィー用充填剤が１０
重量％となるように分散させた。上記の充填剤が分散さ
れた充填用溶液を、分散の１時間後、４日後、７日後及
び１１日後に、それぞれ６φ×７５ｍｍのステンレス製
カラムに３５０ｋｇ／ｃｍ2 で充填した後、上記のリン
酸緩衝液で洗浄して、陽イオン交換型液体クロマトグラ
フィー用カラムを製造した。
【００１８】（３）カラムの性能試験 上記（２）で得られた液体クロマトグラフィー用カラム
を使用して、京都第一科学社製、商品名「Ｈｉ−ＡＵＴ
Ｏ Ａ1c」を用いて、ヒト血液のヘモグロビンの分析を
行い、ヘモグロビンＡ1cの保持時間及び濃度の定量を行
なった。その結果を表１に示した。なお、測定方法は次
の通りである。ヒト血液検体として、同一人（健常人）
の血液を採取後直ちにヘパリンを添加したものを用い
た。血液検体は、本装置付属の専用溶血液２１Ｌ（ノニ
オン系界面活性剤を含むリン酸緩衝液）によって、自動
的に２９０倍に希釈・溶血される。溶離液は本装置付属
の専用試薬であるＡ液（ｐＨ５．９のリン酸緩衝液）、
Ｂ液（ｐＨ７．２のリン酸緩衝液）及びＣ液（ｐＨ５．
９のリン酸緩衝液）を使用した。
を使用して、京都第一科学社製、商品名「Ｈｉ−ＡＵＴ
Ｏ Ａ1c」を用いて、ヒト血液のヘモグロビンの分析を
行い、ヘモグロビンＡ1cの保持時間及び濃度の定量を行
なった。その結果を表１に示した。なお、測定方法は次
の通りである。ヒト血液検体として、同一人（健常人）
の血液を採取後直ちにヘパリンを添加したものを用い
た。血液検体は、本装置付属の専用溶血液２１Ｌ（ノニ
オン系界面活性剤を含むリン酸緩衝液）によって、自動
的に２９０倍に希釈・溶血される。溶離液は本装置付属
の専用試薬であるＡ液（ｐＨ５．９のリン酸緩衝液）、
Ｂ液（ｐＨ７．２のリン酸緩衝液）及びＣ液（ｐＨ５．
９のリン酸緩衝液）を使用した。
【００１９】このようにして分析を行って得られたクロ
マトグラムを図２に示す。図２において、６はヘモグロ
ビンＡ1aおよびＡ1b、７は胎児性ヘモグロビンＦ、８は
不安定型ヘモグロビンＡ1c、９は安定型ヘモグロビンＡ
1c、そして１０は正常ヘモグロビンに起因するピークで
ある。「Ｈｉ−ＡＵＴＯ Ａ1c」においては、安定型ヘ
モグロビンＡ1cの保持時間が１３０〜１３５秒のとき
に、ヒト血液検体中のヘモグロビンＡ1cの濃度が正確に
測定（通常７．５〜８．０％）できるようにされてい
る。なお、このヘモグロビンＡ1cの濃度は次のようにし
て算出される。 ヘモグロビンＡ1c（％）＝（ピーク８と９の合計面積／
ピーク６〜１０の合計面積）×１００
マトグラムを図２に示す。図２において、６はヘモグロ
ビンＡ1aおよびＡ1b、７は胎児性ヘモグロビンＦ、８は
不安定型ヘモグロビンＡ1c、９は安定型ヘモグロビンＡ
1c、そして１０は正常ヘモグロビンに起因するピークで
ある。「Ｈｉ−ＡＵＴＯ Ａ1c」においては、安定型ヘ
モグロビンＡ1cの保持時間が１３０〜１３５秒のとき
に、ヒト血液検体中のヘモグロビンＡ1cの濃度が正確に
測定（通常７．５〜８．０％）できるようにされてい
る。なお、このヘモグロビンＡ1cの濃度は次のようにし
て算出される。 ヘモグロビンＡ1c（％）＝（ピーク８と９の合計面積／
ピーク６〜１０の合計面積）×１００
【００２０】（実施例２）実施例１の工程（２）におい
て、陰イオン型界面活性剤を０．１重量％となるように
リン酸緩衝液に溶解させたことに代えて、陰イオン型界
面活性剤を１．０重量％となるようにリン酸緩衝液に溶
解させたことの他は、実施例１と同様にして行って、ヒ
ト血液検体中のヘモグロビンＡ1cの保持時間及び濃度の
定量を行い、結果を表１に示した。なお、この充填用溶
液の表面張力は、２７ダイン／ｃｍであった。
て、陰イオン型界面活性剤を０．１重量％となるように
リン酸緩衝液に溶解させたことに代えて、陰イオン型界
面活性剤を１．０重量％となるようにリン酸緩衝液に溶
解させたことの他は、実施例１と同様にして行って、ヒ
ト血液検体中のヘモグロビンＡ1cの保持時間及び濃度の
定量を行い、結果を表１に示した。なお、この充填用溶
液の表面張力は、２７ダイン／ｃｍであった。
【００２１】（実施例３）実施例１の工程（２）におい
て、陰イオン型界面活性剤ジ（２−エチルヘキシル）ス
ルホコハク酸ソーダエステルの３０重量％水及びアルコ
ール混合溶液を、リン酸緩衝液に０．１重量％となるよ
うに溶解させたことに代えて、陰イオン型界面活性剤と
してドデシルベンゼンスルホン酸ソーダをリン酸緩衝液
に０．１重量％となるように溶解させたことの他は、実
施例１と同様にして行って、ヒト血液検体中のヘモグロ
ビンＡ1cの保持時間及び濃度の定量を行い、結果を表１
に示した。なお、この充填用溶液の表面張力は、３２ダ
イン／ｃｍであった。
て、陰イオン型界面活性剤ジ（２−エチルヘキシル）ス
ルホコハク酸ソーダエステルの３０重量％水及びアルコ
ール混合溶液を、リン酸緩衝液に０．１重量％となるよ
うに溶解させたことに代えて、陰イオン型界面活性剤と
してドデシルベンゼンスルホン酸ソーダをリン酸緩衝液
に０．１重量％となるように溶解させたことの他は、実
施例１と同様にして行って、ヒト血液検体中のヘモグロ
ビンＡ1cの保持時間及び濃度の定量を行い、結果を表１
に示した。なお、この充填用溶液の表面張力は、３２ダ
イン／ｃｍであった。
【００２２】（比較例１）実施例１の工程（２）におい
て、陰イオン型界面活性剤ジ（２−エチルヘキシル）ス
ルホコハク酸ソーダエステルを、リン酸緩衝液に溶解さ
せたことに代えて、陰イオン型界面活性剤を使用せず
に、単にリン酸緩衝液のみからなる充填用溶液を使用し
たことの他は、実施例１と同様にして行って、ヒト血液
検体中のヘモグロビンＡ1cの保持時間及び濃度の定量を
行い、結果を表１に示した。なお、この充填用溶液の表
面張力は、７１ダイン／ｃｍであった。
て、陰イオン型界面活性剤ジ（２−エチルヘキシル）ス
ルホコハク酸ソーダエステルを、リン酸緩衝液に溶解さ
せたことに代えて、陰イオン型界面活性剤を使用せず
に、単にリン酸緩衝液のみからなる充填用溶液を使用し
たことの他は、実施例１と同様にして行って、ヒト血液
検体中のヘモグロビンＡ1cの保持時間及び濃度の定量を
行い、結果を表１に示した。なお、この充填用溶液の表
面張力は、７１ダイン／ｃｍであった。
【００２３】（比較例２）実施例１の工程（２）におい
て、陰イオン型界面活性剤を０．１重量％となるように
リン酸緩衝液に溶解させたことに代えて、陰イオン型界
面活性剤を０．０１重量％となるようにリン酸緩衝液に
溶解させたことの他は、実施例１と同様にして行って、
ヒト血液検体中のヘモグロビンＡ1cの保持時間及び濃度
の定量を行い、結果を表１に示した。なお、この充填用
溶液の表面張力は、５２ダイン／ｃｍであった。
て、陰イオン型界面活性剤を０．１重量％となるように
リン酸緩衝液に溶解させたことに代えて、陰イオン型界
面活性剤を０．０１重量％となるようにリン酸緩衝液に
溶解させたことの他は、実施例１と同様にして行って、
ヒト血液検体中のヘモグロビンＡ1cの保持時間及び濃度
の定量を行い、結果を表１に示した。なお、この充填用
溶液の表面張力は、５２ダイン／ｃｍであった。
【００２４】（比較例３）実施例１の工程（２）におい
て、陰イオン型界面活性剤を０．１重量％となるように
リン酸緩衝液に溶解させたことに代えて、陰イオン型界
面活性剤を５．０重量％となるようにリン酸緩衝液に溶
解させたことの他は、実施例１と同様にして行って、ヒ
ト血液検体中のヘモグロビンＡ1cの保持時間及び濃度の
定量を行い、結果を表１に示した。なお、この充填用溶
液の表面張力は、２７ダイン／ｃｍであった。
て、陰イオン型界面活性剤を０．１重量％となるように
リン酸緩衝液に溶解させたことに代えて、陰イオン型界
面活性剤を５．０重量％となるようにリン酸緩衝液に溶
解させたことの他は、実施例１と同様にして行って、ヒ
ト血液検体中のヘモグロビンＡ1cの保持時間及び濃度の
定量を行い、結果を表１に示した。なお、この充填用溶
液の表面張力は、２７ダイン／ｃｍであった。
【００２５】（比較例４）実施例１の工程（２）におい
て、陰イオン型界面活性剤ジ（２−エチルヘキシル）ス
ルホコハク酸ソーダエステルの３０重量％水及びアルコ
ール混合溶液を、リン酸緩衝液に０．１重量％となるよ
うに溶解させたことに代えて、陽イオン型界面活性剤で
あるポリアクリル酸アンモニウム（東亜合成化学工業社
製、商品名「アロンＬＡ−０１」）の４０重量％溶液
を、リン酸緩衝液に１．０重量％となるように溶解させ
たことの他は、実施例１と同様にして行って、ヒト血液
検体中のヘモグロビンＡ1cの保持時間及び濃度の定量を
行い、結果を表１に示した。なお、この充填用溶液の表
面張力は、４８ダイン／ｃｍであった。
て、陰イオン型界面活性剤ジ（２−エチルヘキシル）ス
ルホコハク酸ソーダエステルの３０重量％水及びアルコ
ール混合溶液を、リン酸緩衝液に０．１重量％となるよ
うに溶解させたことに代えて、陽イオン型界面活性剤で
あるポリアクリル酸アンモニウム（東亜合成化学工業社
製、商品名「アロンＬＡ−０１」）の４０重量％溶液
を、リン酸緩衝液に１．０重量％となるように溶解させ
たことの他は、実施例１と同様にして行って、ヒト血液
検体中のヘモグロビンＡ1cの保持時間及び濃度の定量を
行い、結果を表１に示した。なお、この充填用溶液の表
面張力は、４８ダイン／ｃｍであった。
【００２６】
【表１】
【００２７】
【発明の効果】以上のように、本発明によれば、カラム
に陽イオン交換型液体クロマトグラフィー用充填剤を充
填後、短時間で所定性能を発揮する液体クロマトグラフ
ィー用カラムを製造できる。また、カラム性能の安定化
が完全であり、定量精度、再現性、耐久性に優れたカラ
ムを製造できる。また、陽イオン交換型液体クロマトグ
ラフィー用充填剤を、陰イオン型界面活性剤を含む充填
用溶液に分散させた後、短時間で充填操作に移れるの
で、充填に要する全時間が短縮される。
に陽イオン交換型液体クロマトグラフィー用充填剤を充
填後、短時間で所定性能を発揮する液体クロマトグラフ
ィー用カラムを製造できる。また、カラム性能の安定化
が完全であり、定量精度、再現性、耐久性に優れたカラ
ムを製造できる。また、陽イオン交換型液体クロマトグ
ラフィー用充填剤を、陰イオン型界面活性剤を含む充填
用溶液に分散させた後、短時間で充填操作に移れるの
で、充填に要する全時間が短縮される。
【図面の簡単な説明】
【図１】図１は、本発明の製造方法により、カラムに充
填する方法を示す模式的説明図である。
填する方法を示す模式的説明図である。
【図２】図２は、本発明により得られた液体クロマトグ
ラフィーカラムを使用して、ヒト血液のヘモグロビンの
分析を行って得られるクロマトグラムである。
ラフィーカラムを使用して、ヒト血液のヘモグロビンの
分析を行って得られるクロマトグラムである。
１ カラム ２ パッカー ３ 充填剤及び陰イオン型界面活性剤を含有する充填用
溶液 ４ 高圧充填ポンプ ５ リン酸緩衝液のみからなる充填用溶液
溶液 ４ 高圧充填ポンプ ５ リン酸緩衝液のみからなる充填用溶液
Claims (1)
- 【請求項１】 陽イオン交換型液体クロマトグラフィー
用充填剤を、陰イオン型界面活性剤を１重量％以下の濃
度で含有し、且つ表面張力５０ダイン／ｃｍ以下の充填
用溶液に分散させてカラムに充填することを特徴とする
液体クロマトグラフィー用カラムの製造方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP26469393A JPH07120449A (ja) | 1993-10-22 | 1993-10-22 | 液体クロマトグラフィー用カラムの製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP26469393A JPH07120449A (ja) | 1993-10-22 | 1993-10-22 | 液体クロマトグラフィー用カラムの製造方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH07120449A true JPH07120449A (ja) | 1995-05-12 |
Family
ID=17406886
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP26469393A Pending JPH07120449A (ja) | 1993-10-22 | 1993-10-22 | 液体クロマトグラフィー用カラムの製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH07120449A (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH09264889A (ja) * | 1996-03-28 | 1997-10-07 | Tosoh Corp | 液体クロマトグラフィーを用いた糖化ヘモグロビン測定装置のデータ処理方法 |
| JP2017156130A (ja) * | 2016-02-29 | 2017-09-07 | 栗田工業株式会社 | クロマトカラムの充填剤充填方法 |
| CN114712894A (zh) * | 2022-04-08 | 2022-07-08 | 无锡博慧斯生物医药科技有限公司 | 一种糖化血红蛋白层析柱的活化液、活化方法和应用 |
-
1993
- 1993-10-22 JP JP26469393A patent/JPH07120449A/ja active Pending
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH09264889A (ja) * | 1996-03-28 | 1997-10-07 | Tosoh Corp | 液体クロマトグラフィーを用いた糖化ヘモグロビン測定装置のデータ処理方法 |
| JP2017156130A (ja) * | 2016-02-29 | 2017-09-07 | 栗田工業株式会社 | クロマトカラムの充填剤充填方法 |
| CN114712894A (zh) * | 2022-04-08 | 2022-07-08 | 无锡博慧斯生物医药科技有限公司 | 一种糖化血红蛋白层析柱的活化液、活化方法和应用 |
| CN114712894B (zh) * | 2022-04-08 | 2024-04-30 | 无锡博慧斯生物医药科技有限公司 | 一种糖化血红蛋白层析柱的活化液、活化方法和应用 |
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