JPH0661274B2 - 固定化細菌細胞を用いるイソマルツロースの製造方法 - Google Patents
固定化細菌細胞を用いるイソマルツロースの製造方法Info
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- JPH0661274B2 JPH0661274B2 JP58059381A JP5938183A JPH0661274B2 JP H0661274 B2 JPH0661274 B2 JP H0661274B2 JP 58059381 A JP58059381 A JP 58059381A JP 5938183 A JP5938183 A JP 5938183A JP H0661274 B2 JPH0661274 B2 JP H0661274B2
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- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/24—Preparation of compounds containing saccharide radicals produced by the action of an isomerase, e.g. fructose
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Description
【発明の詳細な説明】 本発明は、固定化細菌細胞の使用によるイソマルツロー
ス（６−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシド−Ｄ−フルクト
ース）の製造方法に関する。
ス（６−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシド−Ｄ−フルクト
ース）の製造方法に関する。
ドイツ国公開明細書第Ｐ ３０ ３８ ２１９号は、純
粋なショ糖溶液を、ショ糖からイソマルツロースを生成
することができる微生物の死んだ固定化細胞と接触させ
ることにより、ショ糖を酵素的にイソマルツロースに転
化することができることを開示している。こうして、濃
度が４５〜７５重量％、好ましくは６５〜７５重量％で
あるショ糖溶液を、４０〜６５℃の温度において、固定
化細胞を充填した反応器に連続的に通過させる。生成す
るイソマルツロースは、既知の方法により、結晶形で得
られる。
粋なショ糖溶液を、ショ糖からイソマルツロースを生成
することができる微生物の死んだ固定化細胞と接触させ
ることにより、ショ糖を酵素的にイソマルツロースに転
化することができることを開示している。こうして、濃
度が４５〜７５重量％、好ましくは６５〜７５重量％で
あるショ糖溶液を、４０〜６５℃の温度において、固定
化細胞を充填した反応器に連続的に通過させる。生成す
るイソマルツロースは、既知の方法により、結晶形で得
られる。
使用する微生物は、プロタミノバクター・ルブルム（Ｐ
ｒｏｔａｍｉｎｏｂａｃｔｅｒ ｒｕｂｒｕｍ）（ＣＢ
Ｓ ５７４．７７）、セラチア・プリムシカ（Ｓｅｒｒ
ａｔｉａ ｐｌｙｍｕｔｈｉｃａ）（ＡＴＣＣ １５９
２８）、セラチア・マルセセンス（Ｓｅｒｒａｔｉａ
ｍａｒｃｅｓｃｅｎｓ）（ＮＣＩＢ ８２８５）および
リューコノストック・メセンテロイデス（Ｌｅｕｃｏｎ
ｏｓｔｏｃ ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ）（ＮＲＲＬ
Ｂ−５１２ Ｆ）（ＡＴＣＣ １０８３０ａ））、好
ましくはプロタミノバクター・ルブルム（Ｐｒｏｔａｍ
ｉｎｏｂａｃｔｅｒ ｒｕｂｒｕｍ）（ＣＢＳ ５７
４．７７）である。
ｒｏｔａｍｉｎｏｂａｃｔｅｒ ｒｕｂｒｕｍ）（ＣＢ
Ｓ ５７４．７７）、セラチア・プリムシカ（Ｓｅｒｒ
ａｔｉａ ｐｌｙｍｕｔｈｉｃａ）（ＡＴＣＣ １５９
２８）、セラチア・マルセセンス（Ｓｅｒｒａｔｉａ
ｍａｒｃｅｓｃｅｎｓ）（ＮＣＩＢ ８２８５）および
リューコノストック・メセンテロイデス（Ｌｅｕｃｏｎ
ｏｓｔｏｃ ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ）（ＮＲＲＬ
Ｂ−５１２ Ｆ）（ＡＴＣＣ １０８３０ａ））、好
ましくはプロタミノバクター・ルブルム（Ｐｒｏｔａｍ
ｉｎｏｂａｃｔｅｒ ｒｕｂｒｕｍ）（ＣＢＳ ５７
４．７７）である。
この方法を実施するとき、しばしば使用するショ糖の高
い比率（約３分の１まで）は所望の化合物（イソマルツ
ロース）に転化せず、副生物に転化しおよび／または反
応溶液中に未転化のまま残ることが、わかった。これら
の副生物は生ずるイソマルツロースの結晶化を阻止し、
こうして結晶の収率を減少することさえあるので、本発
明の目的は、望ましくなくかつ妨害する副生物の生成を
完全にまたは少なくとも部分的に防止する方法を提供す
ることである。
い比率（約３分の１まで）は所望の化合物（イソマルツ
ロース）に転化せず、副生物に転化しおよび／または反
応溶液中に未転化のまま残ることが、わかった。これら
の副生物は生ずるイソマルツロースの結晶化を阻止し、
こうして結晶の収率を減少することさえあるので、本発
明の目的は、望ましくなくかつ妨害する副生物の生成を
完全にまたは少なくとも部分的に防止する方法を提供す
ることである。
本発明によれば、ショ糖溶液を、ショ糖をイソマルツロ
ースに転化することができる微生物の死んだ固定化細胞
で処理するか、あるいはそれと接触させることからな
る、イソマルツロース（６−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノ
シド−Ｄ−フルクトース）の製造方法において、 （ａ）前記ショ糖溶液を、前のイソマルツロース結晶化
の母液と混合して、混合物を形成し、 （ｂ）前記混合物を、２５〜４０℃の温度において、前
記微生物の死んだ固定化細胞でと接触させるか、あるい
はそれで処理して、イソマルツロースを生成し、 （ｃ）工程（ｂ）において生成した前記イソマルツロー
スを結晶の形で回収する、 ことを特徴とする、イソマルツロース（６−Ｏ−α−Ｄ
−グルコピラノシド−Ｄ−フルクトース）の製造方法
が、提供される。
ースに転化することができる微生物の死んだ固定化細胞
で処理するか、あるいはそれと接触させることからな
る、イソマルツロース（６−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノ
シド−Ｄ−フルクトース）の製造方法において、 （ａ）前記ショ糖溶液を、前のイソマルツロース結晶化
の母液と混合して、混合物を形成し、 （ｂ）前記混合物を、２５〜４０℃の温度において、前
記微生物の死んだ固定化細胞でと接触させるか、あるい
はそれで処理して、イソマルツロースを生成し、 （ｃ）工程（ｂ）において生成した前記イソマルツロー
スを結晶の形で回収する、 ことを特徴とする、イソマルツロース（６−Ｏ−α−Ｄ
−グルコピラノシド−Ｄ−フルクトース）の製造方法
が、提供される。
驚くべきことには、濃度が好ましくは、４０〜７５重量
％、より好ましくは４５〜６０重量％である純粋なショ
糖溶液を、前のイソマルツロースの結晶化の母液と配合
し、この溶液を、２５〜４０℃、好ましくは３０〜４０
℃において、ショ糖からイソマルツロースを生成する微
生物の固定化した死んだ細胞で処理するか、あるいはそ
れと接触させ、そして得られたイソマルツロースを結晶
形で、既知の方法により、得ることによって、ショ糖か
らイソマルツロースを高純度および高収率で得ることが
可能であることを発見した。
％、より好ましくは４５〜６０重量％である純粋なショ
糖溶液を、前のイソマルツロースの結晶化の母液と配合
し、この溶液を、２５〜４０℃、好ましくは３０〜４０
℃において、ショ糖からイソマルツロースを生成する微
生物の固定化した死んだ細胞で処理するか、あるいはそ
れと接触させ、そして得られたイソマルツロースを結晶
形で、既知の方法により、得ることによって、ショ糖か
らイソマルツロースを高純度および高収率で得ることが
可能であることを発見した。
この方法の有利な実施態様は、４０〜６０重量％の濃度
のショ糖溶を、２つの部分に分割し、第１の部分を、２
５〜４０℃の温度において、ショ糖からイソマルツロー
スを生成する微生物の死んだ固定化細胞を充填した反応
器に通過させ、ショ糖溶液の第２の部分を、前のイソマ
ルツロース結晶化の母液と混合し、この溶液を、２５〜
４０℃、好ましくは３０〜４０℃の温度において、ショ
糖からイソマルツロースを生成する微生物の死んだ固定
化細胞を充填した反応器に通過させて、ショ糖をほとん
ど完全にイソマルツロースに転化し、この溶液から生成
したイソマルツロースを、既知の方法により、結晶の形
で回収し、反応溶液の転化した第１の部分中に溶解し、
そして結晶化を行ない、生ずるイソマルツロースの結晶
を分離し、そして得られた母液をショ糖溶液の第２の部
分への混合に使用する。
のショ糖溶を、２つの部分に分割し、第１の部分を、２
５〜４０℃の温度において、ショ糖からイソマルツロー
スを生成する微生物の死んだ固定化細胞を充填した反応
器に通過させ、ショ糖溶液の第２の部分を、前のイソマ
ルツロース結晶化の母液と混合し、この溶液を、２５〜
４０℃、好ましくは３０〜４０℃の温度において、ショ
糖からイソマルツロースを生成する微生物の死んだ固定
化細胞を充填した反応器に通過させて、ショ糖をほとん
ど完全にイソマルツロースに転化し、この溶液から生成
したイソマルツロースを、既知の方法により、結晶の形
で回収し、反応溶液の転化した第１の部分中に溶解し、
そして結晶化を行ない、生ずるイソマルツロースの結晶
を分離し、そして得られた母液をショ糖溶液の第２の部
分への混合に使用する。
反応器中のショ糖溶液の平均の接触時間は、各場合に存
在する、固定化細胞の比活性に依存する。比活性は、シ
ョ糖のμモル／固定化細胞（乾燥）のｇ／分として定義
される。たとえば、直径１００mm、床の高さ４５０mmの
反応器は、６０単位／ｇの比活性の固定化細胞（乾燥）
の９５０ｇを含有する。１９００ml／時のショ糖溶液
（５０重量％）の量を、反応器に通過させて、ショ糖の
９０％を転化しなくてはならない。活性は作業時間にわ
たって連続的に減少するので、流速を絶えず再調整し
て、一定の組成の生成物を得なくてはならない。
在する、固定化細胞の比活性に依存する。比活性は、シ
ョ糖のμモル／固定化細胞（乾燥）のｇ／分として定義
される。たとえば、直径１００mm、床の高さ４５０mmの
反応器は、６０単位／ｇの比活性の固定化細胞（乾燥）
の９５０ｇを含有する。１９００ml／時のショ糖溶液
（５０重量％）の量を、反応器に通過させて、ショ糖の
９０％を転化しなくてはならない。活性は作業時間にわ
たって連続的に減少するので、流速を絶えず再調整し
て、一定の組成の生成物を得なくてはならない。
本発明の特定の利点を、次ぎの実施例により詳述する。
実施例１は、ドイツ国公開明細書第Ｐ ３０ ３８ ２
１９号の既知の方法の手順および結果を説明する。
実施例１は、ドイツ国公開明細書第Ｐ ３０ ３８ ２
１９号の既知の方法の手順および結果を説明する。
実施例１ （比較例） （ａ）プロタミノバクター・ルブルム（Ｐｒｏｔａｍｉ
ｎｏｂａｃｔｅｒ ｒｕｂｒｕｍ）（ＣＢＳ ５７４．
７７）の接種物からの細胞を、砂糖工場からの８kgの濃
縮ジュース（乾燥物質含有＝６５％）、２kgのトウモロ
コシ浸漬液、０．１kgの（ＮＨ４）ＨＰＯ４および８
９．９kgの蒸留水（必要ならば、pH７．２に調整した）
から成る無菌の栄養基質の１０mlに移植した。この懸濁
液を、前記組成の栄養溶液のそれぞれ２００mlを含む１
ｌのフラスコ中における振とう機での予備培養のため
の、接種材料として使用した。そのような２０個のフラ
スコ（全含量４ｌ）を、２９℃で３０時間培養した。
ｎｏｂａｃｔｅｒ ｒｕｂｒｕｍ）（ＣＢＳ ５７４．
７７）の接種物からの細胞を、砂糖工場からの８kgの濃
縮ジュース（乾燥物質含有＝６５％）、２kgのトウモロ
コシ浸漬液、０．１kgの（ＮＨ４）ＨＰＯ４および８
９．９kgの蒸留水（必要ならば、pH７．２に調整した）
から成る無菌の栄養基質の１０mlに移植した。この懸濁
液を、前記組成の栄養溶液のそれぞれ２００mlを含む１
ｌのフラスコ中における振とう機での予備培養のため
の、接種材料として使用した。そのような２０個のフラ
スコ（全含量４ｌ）を、２９℃で３０時間培養した。
３０ｌの小さい発酵機中の１６ｌの前記組成を有する栄
養溶液に、前記の２０個のフラスコの内容物（４ｌ）を
接種し、２０ｌ／分の通気速度、３５０rpmのかきまぜ
速度および２９℃において発酵させた。細胞数の増加
を、顕微鏡で決定した。５×１０９の細胞／mlの濃度に
達したとき、発酵機の内容物を他の容器に移し、そこで
陽イオン性凝集剤（たとえば、ＰＲＩＭＡＦＬＯＣＣ
７，ローム・アンド・ハース社）と反応させた。凝集し
た細胞を沈殿させ、デカントし、pH７．０の０．１モル
のリン酸緩衝液で洗浄し、遠心分離機せ脱水した。次い
で、物質を糸状に押出し、空気乾燥し、粉砕した。
養溶液に、前記の２０個のフラスコの内容物（４ｌ）を
接種し、２０ｌ／分の通気速度、３５０rpmのかきまぜ
速度および２９℃において発酵させた。細胞数の増加
を、顕微鏡で決定した。５×１０９の細胞／mlの濃度に
達したとき、発酵機の内容物を他の容器に移し、そこで
陽イオン性凝集剤（たとえば、ＰＲＩＭＡＦＬＯＣＣ
７，ローム・アンド・ハース社）と反応させた。凝集し
た細胞を沈殿させ、デカントし、pH７．０の０．１モル
のリン酸緩衝液で洗浄し、遠心分離機せ脱水した。次い
で、物質を糸状に押出し、空気乾燥し、粉砕した。
（ｂ）上のように製造した調製物からのふるい分けした
０．３〜０．８mmの分画を０．１％のグルタルアルデヒ
ド溶液中で１０分間かきまぜ、リン酸緩衝液（０．１モ
ル、pH＝７．０）で洗浄し、水の存在下に加熱可能なカ
ラム中に充填した。次いで、このカラムを５０℃に加熱
し、７０重量％のショ糖溶液をポンプで連続的に通過さ
せた。流速はカラムの終端においてショ糖がまったく検
出されないように調整した。このようにして得たイソマ
ルツロース溶液は、次ぎの平均組成を有した（ＨＰＬ
Ｃ、すなわち、高圧液体クロマトグラフィーにより定
量）： フルクートス 7.4ｇ／100ｇＴＳ （ＴＳ＝合計の糖類） グルコース 0.3ｇ／100ｇＴＳ ショ糖 0.1ｇ／100ｇＴＳ イソマルツロース 62.6ｇ／100ｇＴＳ １−Ｏ−α−グルコピ ラノシド−Ｄ−フルク トース 16.6ｇ／100ｇＴＳ 少糖類 13.0ｇ／100ｇＴＳ この溶液を冷却結晶化器へ供給し、２０℃に冷却し、そ
して結晶化したイソマルツロースをワイヤーバスケット
（ｗｉｒｅ−ｂａｓｋｅｔ）の遠心分離機において母液
から分離した。母液を蒸発により７８〜８２％のＴＳ含
量に濃縮し、第２結晶化器内で２０℃に冷却し、そして
第２量の結晶化したイソマルツロースをワイヤーバスケ
ットの遠心分離機において母液から分離した。
０．３〜０．８mmの分画を０．１％のグルタルアルデヒ
ド溶液中で１０分間かきまぜ、リン酸緩衝液（０．１モ
ル、pH＝７．０）で洗浄し、水の存在下に加熱可能なカ
ラム中に充填した。次いで、このカラムを５０℃に加熱
し、７０重量％のショ糖溶液をポンプで連続的に通過さ
せた。流速はカラムの終端においてショ糖がまったく検
出されないように調整した。このようにして得たイソマ
ルツロース溶液は、次ぎの平均組成を有した（ＨＰＬ
Ｃ、すなわち、高圧液体クロマトグラフィーにより定
量）： フルクートス 7.4ｇ／100ｇＴＳ （ＴＳ＝合計の糖類） グルコース 0.3ｇ／100ｇＴＳ ショ糖 0.1ｇ／100ｇＴＳ イソマルツロース 62.6ｇ／100ｇＴＳ １−Ｏ−α−グルコピ ラノシド−Ｄ−フルク トース 16.6ｇ／100ｇＴＳ 少糖類 13.0ｇ／100ｇＴＳ この溶液を冷却結晶化器へ供給し、２０℃に冷却し、そ
して結晶化したイソマルツロースをワイヤーバスケット
（ｗｉｒｅ−ｂａｓｋｅｔ）の遠心分離機において母液
から分離した。母液を蒸発により７８〜８２％のＴＳ含
量に濃縮し、第２結晶化器内で２０℃に冷却し、そして
第２量の結晶化したイソマルツロースをワイヤーバスケ
ットの遠心分離機において母液から分離した。
７０kgのショ糖を含有する１００kgのショ糖溶液から、
４３．８kgのイソマルツロース（６２．６％のＴＳ含
量）が得られた。これから、第１結晶化において１５．
９kgの純粋なイソマルツロースが得られ、そして第２結
晶化において１３．４kgの９８％の純度のイソマルツロ
ースが得られた。これは７０kgのショ糖からの２９kgの
純粋のイソマルツロース合計の収量または原料からの４
１．４％の収率に等しい。
４３．８kgのイソマルツロース（６２．６％のＴＳ含
量）が得られた。これから、第１結晶化において１５．
９kgの純粋なイソマルツロースが得られ、そして第２結
晶化において１３．４kgの９８％の純度のイソマルツロ
ースが得られた。これは７０kgのショ糖からの２９kgの
純粋のイソマルツロース合計の収量または原料からの４
１．４％の収率に等しい。
実施例２ （参考例） 実施例１（ａ）に従って製造した調製物からのふるい分
けした０．３〜０．８mmの分画を０．１％のグルタルア
ルデヒド溶液中で１０分間かきまぜ、リン酸緩衝液
（０．１モル、pH＝７．０）で洗浄し、水の存在下に加
熱可能なカラム中に充填した。次いで、このカラムを３
０℃に加熱し、５０重量％のショ糖溶液をポンプで連続
的に通過させた。流速はカラムの終端においてショ糖が
まったく検出されないように調整した。このようにして
得たイソマルツロース溶液は、次ぎの平均組成を有した
（ＨＰＬＣ、すなわち、高圧液体クロマトグラフィーに
より定量）： フルクートス 3.6ｇ／100ｇＴＳ グルコース 1.8ｇ／100ｇＴＳ ショ糖 ０ｇ／100ｇＴＳ イソマルツロース 78.4ｇ／100ｇＴＳ １−Ｏ−α−グルコピ ラノシド−Ｄ−フルク トース 12.6ｇ／100ｇＴＳ 少糖類 3.6ｇ／100ｇＴＳ この溶液を蒸発により７８〜８２％のＴＳ含量に濃縮
し、結晶化器内で２０℃に冷却し、そして結晶化したイ
ソマルツロースをワイヤーバスケットの遠心分離機にお
いて母液から分離した。母液を再び蒸発により７８〜８
２％のＴＳ含量に濃縮し、第２結晶化器内で２０℃に冷
却し、そして第２量の結晶化したイソマルツロースをワ
イヤーバスケットの遠心分離機において母液から分離し
た。
けした０．３〜０．８mmの分画を０．１％のグルタルア
ルデヒド溶液中で１０分間かきまぜ、リン酸緩衝液
（０．１モル、pH＝７．０）で洗浄し、水の存在下に加
熱可能なカラム中に充填した。次いで、このカラムを３
０℃に加熱し、５０重量％のショ糖溶液をポンプで連続
的に通過させた。流速はカラムの終端においてショ糖が
まったく検出されないように調整した。このようにして
得たイソマルツロース溶液は、次ぎの平均組成を有した
（ＨＰＬＣ、すなわち、高圧液体クロマトグラフィーに
より定量）： フルクートス 3.6ｇ／100ｇＴＳ グルコース 1.8ｇ／100ｇＴＳ ショ糖 ０ｇ／100ｇＴＳ イソマルツロース 78.4ｇ／100ｇＴＳ １−Ｏ−α−グルコピ ラノシド−Ｄ−フルク トース 12.6ｇ／100ｇＴＳ 少糖類 3.6ｇ／100ｇＴＳ この溶液を蒸発により７８〜８２％のＴＳ含量に濃縮
し、結晶化器内で２０℃に冷却し、そして結晶化したイ
ソマルツロースをワイヤーバスケットの遠心分離機にお
いて母液から分離した。母液を再び蒸発により７８〜８
２％のＴＳ含量に濃縮し、第２結晶化器内で２０℃に冷
却し、そして第２量の結晶化したイソマルツロースをワ
イヤーバスケットの遠心分離機において母液から分離し
た。
５０kgのショ糖を含有する１００kgのショ糖溶液から、
３９．２kgのイソマルツロース（７８．４％のＴＳ含
量）が得られた。これから、第１結晶化において２５．
０kgの純粋なイソマルツロースが得られ、そして第２結
晶化において９．６kgの９８％の純度のイソマルツロー
スが得られた。これは５０kgのショ糖からの３４．４kg
の純粋のイソマルツロース合計の収量または原料からの
６８．８％の収率に等しい。
３９．２kgのイソマルツロース（７８．４％のＴＳ含
量）が得られた。これから、第１結晶化において２５．
０kgの純粋なイソマルツロースが得られ、そして第２結
晶化において９．６kgの９８％の純度のイソマルツロー
スが得られた。これは５０kgのショ糖からの３４．４kg
の純粋のイソマルツロース合計の収量または原料からの
６８．８％の収率に等しい。
実施例３ 開始 実施例１（ａ）に従って製造した調製物からのふるい分
けした０．３〜０．８mmの分画を０．１％のグルタルア
ルデヒド溶液中で１０分間かきまぜ、リン酸塩緩衝液
（０．１モル、pH＝７．０）で洗浄し、水の存在下に３
０℃に加熱した加熱可能なカラム中に充填した。
けした０．３〜０．８mmの分画を０．１％のグルタルア
ルデヒド溶液中で１０分間かきまぜ、リン酸塩緩衝液
（０．１モル、pH＝７．０）で洗浄し、水の存在下に３
０℃に加熱した加熱可能なカラム中に充填した。
５０％のショ糖溶液をカラムの１つ（カラム１）に連続
的に流す。ほぼ９０％のショ糖のみが転化するように、
流速を調整する。得られる反応溶液を７８〜８２％ＴＳ
含量になるまで蒸発濃縮し、２０℃に冷却結晶化し、結
晶化したイソマルツロースをワイヤーバスケツト遠心分
離により母液から分離する。得られる母液を新しいショ
糖溶液と混合し、ショ糖濃度が７４〜７６％ＴＳとなる
ようにする。この溶液を５０％のＴＳ含量に調節し、第
二のカラム（カラム２）に３０℃において連続的に通
す。このカラムにおける流速を、存在するショ糖の少な
くとも９９％が転化されるように調節する。
的に流す。ほぼ９０％のショ糖のみが転化するように、
流速を調整する。得られる反応溶液を７８〜８２％ＴＳ
含量になるまで蒸発濃縮し、２０℃に冷却結晶化し、結
晶化したイソマルツロースをワイヤーバスケツト遠心分
離により母液から分離する。得られる母液を新しいショ
糖溶液と混合し、ショ糖濃度が７４〜７６％ＴＳとなる
ようにする。この溶液を５０％のＴＳ含量に調節し、第
二のカラム（カラム２）に３０℃において連続的に通
す。このカラムにおける流速を、存在するショ糖の少な
くとも９９％が転化されるように調節する。
カラム２から得られる第二の反応溶液を７８〜８２％Ｔ
Ｓ含量まで蒸発濃縮し、２０℃に冷却結晶化し、結晶化
した第二のイソマルツロースをワイヤーバスケツト遠心
分離により第二の母液から分離する。第二の母液は、廃
棄してもよく或いは１−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシド
−Ｄ−フラクトースの回収のための原料として用いても
よい。第二のイソマルツロースは純粋ではない。これを
カラム１からの反応溶液中に溶解し、カラム１からの反
応溶液中に含まれるイソマルツロースと一緒に結晶化す
ることにより精製する。
Ｓ含量まで蒸発濃縮し、２０℃に冷却結晶化し、結晶化
した第二のイソマルツロースをワイヤーバスケツト遠心
分離により第二の母液から分離する。第二の母液は、廃
棄してもよく或いは１−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシド
−Ｄ−フラクトースの回収のための原料として用いても
よい。第二のイソマルツロースは純粋ではない。これを
カラム１からの反応溶液中に溶解し、カラム１からの反
応溶液中に含まれるイソマルツロースと一緒に結晶化す
ることにより精製する。
定常状態 第二のイソマルツロースがカラム１からの反応溶液と混
合することが可能となると、工程は定常状態に入り、第
１図に示すフローシートにより説明することができる。
合することが可能となると、工程は定常状態に入り、第
１図に示すフローシートにより説明することができる。
合計で１８０kgのショ糖を使用する。このうち１００kg
のショ糖を１００kgの水に溶解して２００kgの５０重量
％ショ糖溶液とする。これを９０％のショ糖が転化され
るような流速でカラム１に通す。かくして第一のイソマ
ルツロース溶液（カラム１からの反応溶液）は１０kgの
未反応のショ糖及び７４．５kgのイソマルツロース（７
４〜７８kgの間で変化しうる）を含有し、残りが他の糖
類である。
のショ糖を１００kgの水に溶解して２００kgの５０重量
％ショ糖溶液とする。これを９０％のショ糖が転化され
るような流速でカラム１に通す。かくして第一のイソマ
ルツロース溶液（カラム１からの反応溶液）は１０kgの
未反応のショ糖及び７４．５kgのイソマルツロース（７
４〜７８kgの間で変化しうる）を含有し、残りが他の糖
類である。
この第一のイソマルツロース溶液を７５．４kg（７４〜
７６kgの間で変りうる）の第二のイソマルツロースと混
合し、７８〜８２％のＴＳ含量に蒸発濃縮し、２０℃に
冷却結晶化する。晶出したイソマルツロース（１４４k
g）をワイヤーバスケツト遠心分離により母液から分離
する。得られる母液（第一の母液）は、未反応のショ
糖、結晶化しなかったイソマルツロース及び他の糖類か
らなる固形分３１．４kgを含有する。
７６kgの間で変りうる）の第二のイソマルツロースと混
合し、７８〜８２％のＴＳ含量に蒸発濃縮し、２０℃に
冷却結晶化する。晶出したイソマルツロース（１４４k
g）をワイヤーバスケツト遠心分離により母液から分離
する。得られる母液（第一の母液）は、未反応のショ
糖、結晶化しなかったイソマルツロース及び他の糖類か
らなる固形分３１．４kgを含有する。
残りの８０kgのショ糖を第一の母液と混合して、９０kg
のショ糖を含む固形分１１１．４kgを含有する第二の基
質とする。この基質を５０％のＴＳ含量に調節し、実質
的にすべてのショ糖が転化されるような流速でカラム２
に通す。かくして得られる反応溶液（第二のイソマルツ
ロース溶液）は８１．８kg（８０〜８３kgの間で変わり
うる）のイソマルツロースを含み、残りは他の糖類であ
る。
のショ糖を含む固形分１１１．４kgを含有する第二の基
質とする。この基質を５０％のＴＳ含量に調節し、実質
的にすべてのショ糖が転化されるような流速でカラム２
に通す。かくして得られる反応溶液（第二のイソマルツ
ロース溶液）は８１．８kg（８０〜８３kgの間で変わり
うる）のイソマルツロースを含み、残りは他の糖類であ
る。
第二のイソマルツロース溶液を７８〜８２％ＴＳ含量に
蒸発濃縮し、２０℃に冷却結晶化する。
蒸発濃縮し、２０℃に冷却結晶化する。
晶出した第二のイソマルツロース（７５．４kg、７４〜
７６kgの間で変りうる）を第一のイソマルツロース溶液
に送り、母液すなわち糖密（３６kgＴＳ）は廃棄するか
或いは使用する。
７６kgの間で変りうる）を第一のイソマルツロース溶液
に送り、母液すなわち糖密（３６kgＴＳ）は廃棄するか
或いは使用する。
収量は１８０kgのショ糖から１４４kgの純粋なイソマル
ツロースであり、収率は８０％である。
ツロースであり、収率は８０％である。
第１図は、実施例３の方法を図解するフローシトであ
る。
る。
Claims (7)
- 【請求項１】ショ糖溶液を、ショ糖をイソマルツロース
に転化することができる微生物の死んだ固定化細胞で処
理するかまたはそれと接触させることからなるイソマル
ツロース（６−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシド−Ｄ−フ
ルクトース）の製造方法において、 (a)前記ショ糖溶液を前のイソマルツロースの結晶化の
母液と混合して混合物を形成し、 (b)前記混合物を２５〜４０℃の温度において、前記微
生物の死んだ固定化細胞と接触させるかまたはそれで処
理してイソマルツロースを生成せしめ、 (c)工程(b)において生成した前記イソマルツロースを結
晶の形で回収する、 ことを特徴とするイソマルツロースの製造方法。 - 【請求項２】工程(b)における温度が３０〜４０℃であ
る特許請求の範囲第１項記載の方法。 - 【請求項３】(a)４０〜７５重量％の濃度のショ糖溶液
を使用し、 (b)前記ショ糖溶液を第１ショ糖溶液と第２ショ糖溶液
とに分割し、 (c)前記第１ショ糖溶液を、２５〜４０℃の温度におい
て、前記微生物の死んだ固定化細胞と接触させるかまた
はそれで処理して、ショ糖の８０〜９０％をイソマルツ
ロースに転化し、これによりイソマルツロースを含有す
る溶液を形成せしめ、 (d)前記第２ショ糖溶液を、前のイソマルツロースの結
晶化の母液と混合して混合物を形成し、 (e)工程(d)において形成した前記混合物を、２５〜４０
℃の温度において、前記微生物の死んだ固定化細胞と接
触させるかまたはそれで処理して、前記混合物のショ糖
をほとんど完全にイソマルツロースに転化し、 (f)工程(e)において生成した前記イソマルツロースを結
晶の形で回収し、 (g)工程(f)において回収された前記結晶を、工程(c)に
おいて形成した前記溶液中に溶解し、そして結晶化を行
なってイソマルツロースの結晶と母液を形成し、そして (h)工程(g)において得られる母液を工程(d)における母
液として使用する、 特許請求の範囲第１項記載の方法。 - 【請求項４】前記ショ糖溶液の濃度が４５〜６０％であ
る特許請求の範囲第３項記載の方法。 - 【請求項５】工程(c)および(e)における温度が３０〜４
０℃である特許請求の範囲第３項記載の方法。 - 【請求項６】前記微生物が、プロタミノバクター・ルブ
ルム（Protaminobacter rubrum）（ＣＢＳ ５７４．７
７）、セラチア・プリムシカ（Serratia plymuthica）
（ＡＴＣＣ １５９２８）、セラチア・マルセセンス
（Serratia marcescens）（ＮＣＩＢ ８２８５）およ
びリューコノストック・メセンテロイデス（Leuconosto
c mesenteroides）（ＮＲＲＬ Ｂ−５１２ Ｆ（ＡＴ
ＣＣ １０８３０ａ））から成る群より選ばれる特許請
求の範囲第１〜３項のいずれかに記載の方法。 - 【請求項７】前記微生物がプロタミノバクター・ルブル
ム（Protaminobacter rubrum）（ＣＢＳ ５７４．７
７）である特許請求の範囲第６項記載の方法。
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|---|---|---|---|
| DE3213107.0 | 1982-04-07 | ||
| DE32131070 | 1982-04-07 | ||
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Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS592695A JPS592695A (ja) | 1984-01-09 |
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Family
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Family Applications (1)
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| Country | Link |
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| JP (1) | JPH0661274B2 (ja) |
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| DK (2) | DK167366B1 (ja) |
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| JPH02273192A (ja) * | 1989-04-13 | 1990-11-07 | Meito Sangyo Kk | イソマルチユロースの製造方法 |
| DE4209653A1 (de) * | 1992-03-25 | 1993-10-07 | Herbert Prof Dr Daniel | Wärmedämmschicht mit Gas als Dämmittel bei Unterdrückung der Konvektion durch dichtebestimmte Gasschichtung |
| DE9321600U1 (de) * | 1993-05-06 | 2000-04-06 | Südzucker Aktiengesellschaft Mannheim/Ochsenfurt, 68165 Mannheim | Süssungsmittel |
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| DE19747642B4 (de) * | 1997-10-29 | 2004-12-23 | Südzucker AG Mannheim/Ochsenfurt | Verfahren zur Herstellung von Isomelezitose-haltigen Süßungsmitteln, von Isomelezitose und von Isomaltulose |
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| EP2361255B1 (de) | 2009-12-23 | 2014-06-11 | Evonik Degussa GmbH | SÜßUNGSMITTEL UND VERFAHREN ZU SEINER HERSTELLUNG |
| DE102011100772A1 (de) | 2011-05-05 | 2012-11-08 | Evonik Degussa Gmbh | Verfahren zur Herstellung von Isomaltulose aus Pflanzensäften |
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-
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-
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-
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