JPH0658933A - フィブリン分解産物及びフィブリノーゲン分解産物の測定方法 - Google Patents
フィブリン分解産物及びフィブリノーゲン分解産物の測定方法Info
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- JPH0658933A JPH0658933A JP23289392A JP23289392A JPH0658933A JP H0658933 A JPH0658933 A JP H0658933A JP 23289392 A JP23289392 A JP 23289392A JP 23289392 A JP23289392 A JP 23289392A JP H0658933 A JPH0658933 A JP H0658933A
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Abstract
(57)【要約】
【目的】 二種類以上の抗フィブリノーゲン抗体を用い
て免疫学的測定方法によるフィブリン分解産物およびフ
ィブリノーゲン分解産物の測定を行ったときに、同一な
ヒト血清に対して実質上同一の測定値を示すような方法
を提供すること。 【構成】 フィブリン分解産物およびフィブリノーゲン
分解産物を免疫学的測定により測定する方法において、
校正用または検量線用キャリブレ−タ−としてフィブリ
ン分解産物を用いることを特徴とする方法を提供した。
て免疫学的測定方法によるフィブリン分解産物およびフ
ィブリノーゲン分解産物の測定を行ったときに、同一な
ヒト血清に対して実質上同一の測定値を示すような方法
を提供すること。 【構成】 フィブリン分解産物およびフィブリノーゲン
分解産物を免疫学的測定により測定する方法において、
校正用または検量線用キャリブレ−タ−としてフィブリ
ン分解産物を用いることを特徴とする方法を提供した。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は血清中フィブリン分解産
物およびフィブリノーゲン分解産物の免疫学的測定方法
にに関するものである。
物およびフィブリノーゲン分解産物の免疫学的測定方法
にに関するものである。
【０００２】
【従来の技術】血液中のフィブリン分解産物及びフィブ
リノーゲン分解産物の量は、ヒトの線溶系の活性化度を
反映するものとして診断に用いられている。血液中のフ
ィブリン分解産物およびフィブリノーゲン分解産物測定
のためには、血液をトロンビンまたは蛇毒などにより脱
フィブリノーゲン処理した血清を用いている。この血清
中には凝固能をもたず、また可溶性であるフィブリン分
解産物およびフィブリノーゲン分解産物が含まれ、フィ
ブリノーゲンは含まれない。この血清中のフィブリン分
解産物およびフィブリノーゲン分解産物を免疫学的に測
定する際には抗フィブリノーゲン抗体を用いることが可
能であり、また、一般的に用いられている。すなわち、
本来血液中に存在したフィブリノーゲンは凝固して除去
されたため、、当該抗体に反応する物質は凝固活性を持
たないフィブリノーゲン関連物質であるフィブリン分解
産物およびフィブリノーゲン分解産物である。この方法
は当業者には公知である。
リノーゲン分解産物の量は、ヒトの線溶系の活性化度を
反映するものとして診断に用いられている。血液中のフ
ィブリン分解産物およびフィブリノーゲン分解産物測定
のためには、血液をトロンビンまたは蛇毒などにより脱
フィブリノーゲン処理した血清を用いている。この血清
中には凝固能をもたず、また可溶性であるフィブリン分
解産物およびフィブリノーゲン分解産物が含まれ、フィ
ブリノーゲンは含まれない。この血清中のフィブリン分
解産物およびフィブリノーゲン分解産物を免疫学的に測
定する際には抗フィブリノーゲン抗体を用いることが可
能であり、また、一般的に用いられている。すなわち、
本来血液中に存在したフィブリノーゲンは凝固して除去
されたため、、当該抗体に反応する物質は凝固活性を持
たないフィブリノーゲン関連物質であるフィブリン分解
産物およびフィブリノーゲン分解産物である。この方法
は当業者には公知である。
【０００３】このような免疫学的測定方法において、校
正用または検量線用キャリブレ−タ−としてフィブリノ
ーゲンが従来用いられている。しかし、個体の異なる宿
主より由来する二種類以上の抗フィブリノーゲン抗体を
用いて、ヒト血液中のフィブリン分解産物およびフィブ
リノーゲン分解産物を測定するとき、校正用または検量
線用キャリブレ−タ−としてフィブリノーゲンを用いた
場合、抗フィブリノーゲン抗体の違いにより、同一のヒ
ト血清中のフィブリン分解産物およびフィブリノーゲン
分解産物の測定値に違いが生じる場合がある。例えば、
２羽のウサギにフィブリノ−ゲンを免疫して得られた抗
フィブリノーゲン抗体ＡおよびＢを用いて、同一のヒト
血清中のフィブリン分解産物およびフィブリノーゲン分
解産物濃度を測定する。抗体Ａを用いた時の測定値が例
えば５０μｇ／ｍｌであったとき、抗体Ｂを用いたとき
の測定値が１５μｇ／ｍｌを示す場合がある。本来同一
のヒト血清中のフィブリン分解産物およびフィブリノー
ゲン分解産物濃度の測定値には、このような抗体の違い
に起因する差が生じないことが望ましい。
正用または検量線用キャリブレ−タ−としてフィブリノ
ーゲンが従来用いられている。しかし、個体の異なる宿
主より由来する二種類以上の抗フィブリノーゲン抗体を
用いて、ヒト血液中のフィブリン分解産物およびフィブ
リノーゲン分解産物を測定するとき、校正用または検量
線用キャリブレ−タ−としてフィブリノーゲンを用いた
場合、抗フィブリノーゲン抗体の違いにより、同一のヒ
ト血清中のフィブリン分解産物およびフィブリノーゲン
分解産物の測定値に違いが生じる場合がある。例えば、
２羽のウサギにフィブリノ−ゲンを免疫して得られた抗
フィブリノーゲン抗体ＡおよびＢを用いて、同一のヒト
血清中のフィブリン分解産物およびフィブリノーゲン分
解産物濃度を測定する。抗体Ａを用いた時の測定値が例
えば５０μｇ／ｍｌであったとき、抗体Ｂを用いたとき
の測定値が１５μｇ／ｍｌを示す場合がある。本来同一
のヒト血清中のフィブリン分解産物およびフィブリノー
ゲン分解産物濃度の測定値には、このような抗体の違い
に起因する差が生じないことが望ましい。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、二種
類以上の抗フィブリノーゲン抗体を用いて免疫学的測定
方法によるフィブリン分解産物およびフィブリノーゲン
分解産物の測定を行ったときに、同一なヒト血清に対し
て実質上同一の測定値を示すような方法を提供すること
である。
類以上の抗フィブリノーゲン抗体を用いて免疫学的測定
方法によるフィブリン分解産物およびフィブリノーゲン
分解産物の測定を行ったときに、同一なヒト血清に対し
て実質上同一の測定値を示すような方法を提供すること
である。
【０００５】
【課題を解決するための手段】本願発明者らは、鋭意研
究の結果、校正用または検量線用キャリブレーターとし
て、従来のフィブリノーゲンに代えてフィブリン分解産
物を用いることにより、上記課題を解決できることを見
出し、本発明を完成した。
究の結果、校正用または検量線用キャリブレーターとし
て、従来のフィブリノーゲンに代えてフィブリン分解産
物を用いることにより、上記課題を解決できることを見
出し、本発明を完成した。
【０００６】すなわち、本発明は、フィブリン分解産物
およびフィブリノーゲン分解産物を免疫学的測定により
測定する方法において、校正用または検量線用キャリブ
レ−タ−としてフィブリン分解産物を用いることを特徴
とする方法を提供する。
およびフィブリノーゲン分解産物を免疫学的測定により
測定する方法において、校正用または検量線用キャリブ
レ−タ−としてフィブリン分解産物を用いることを特徴
とする方法を提供する。
【０００７】本発明の方法に用いられるフィブリン分解
産物としては、ヒト精製フィブリノーゲンを凝固させ、
これにヒトプラスミンを作用させることにより調製した
人工フィブリン分解産物を用いることができる。人工フ
ィブリン分解産物の好ましい調製方法の詳細は以下の通
りである。
産物としては、ヒト精製フィブリノーゲンを凝固させ、
これにヒトプラスミンを作用させることにより調製した
人工フィブリン分解産物を用いることができる。人工フ
ィブリン分解産物の好ましい調製方法の詳細は以下の通
りである。
【０００８】人工フィブリン分解産物の調製法 ヒト精製フィブリノーゲンを適当な緩衝液（例えば、0.
1M NaCl を含む 50mMＴｒｉｓ- 塩酸,pH7.5）に溶解
し、ヒト血液凝固第１３因子、塩化カルシウムを加えた
後、ウシまたはヒトトロンビンを加え、フィブリノーゲ
ンを凝固させ、いわゆるクロスリンクフィブリンとす
る。これにヒトプラスミンを加え、フィブリンを酵素に
より分解する。分解後の上清をセファロースＣＬ−６Ｂ
カラムによりゲル濾過を行いフィブリン分解産物の分画
を得る。（V.J.MARDER, et al ;Biochimica et Biophys
ica Acta, 427,1-14(1976)）
1M NaCl を含む 50mMＴｒｉｓ- 塩酸,pH7.5）に溶解
し、ヒト血液凝固第１３因子、塩化カルシウムを加えた
後、ウシまたはヒトトロンビンを加え、フィブリノーゲ
ンを凝固させ、いわゆるクロスリンクフィブリンとす
る。これにヒトプラスミンを加え、フィブリンを酵素に
より分解する。分解後の上清をセファロースＣＬ−６Ｂ
カラムによりゲル濾過を行いフィブリン分解産物の分画
を得る。（V.J.MARDER, et al ;Biochimica et Biophys
ica Acta, 427,1-14(1976)）
【０００９】フィブリン分解産物としては、ヒト血清中
に生理的に生じたフィブリン分解産物を精製せずに血清
のままの状態で用いることもできる。この際、複数のヒ
ト由来の血清を混合すること、または、血清を適当な緩
衝液にて希釈して用いることも可能である。
に生理的に生じたフィブリン分解産物を精製せずに血清
のままの状態で用いることもできる。この際、複数のヒ
ト由来の血清を混合すること、または、血清を適当な緩
衝液にて希釈して用いることも可能である。
【００１０】なお、用いるフィブリン分解産物として
は、分子量５万ないし１００万程度のものが好ましい
が、これに限定されるものではない。
は、分子量５万ないし１００万程度のものが好ましい
が、これに限定されるものではない。
【００１１】フィブリン分解産物及びフィブリノーゲン
分解産物を測定するための免疫学的測定方法としては、
従来から公知のいずれの方法を用いることもできるが、
特にラテックス粒子に抗体を感作した試薬を用いるいわ
ゆるラテックス凝集法においてその効果が最もよく発揮
される。
分解産物を測定するための免疫学的測定方法としては、
従来から公知のいずれの方法を用いることもできるが、
特にラテックス粒子に抗体を感作した試薬を用いるいわ
ゆるラテックス凝集法においてその効果が最もよく発揮
される。
【００１２】
【発明の効果】本発明の方法によると、二種類以上の異
なった抗フィブリノーゲン抗体を用いた場合でも、同一
のヒト血清に対しては実質上同一のフィブリン分解産物
およびフィブリノーゲン分解産物測定値を示すことがで
きる。
なった抗フィブリノーゲン抗体を用いた場合でも、同一
のヒト血清に対しては実質上同一のフィブリン分解産物
およびフィブリノーゲン分解産物測定値を示すことがで
きる。
【００１３】以下、実施例に基づき本発明をより具体的
に説明する。もっとも、本発明は下記実施例に限定され
るものではない。
に説明する。もっとも、本発明は下記実施例に限定され
るものではない。
【００１４】実施例１ ラテックス凝集比濁法による、人工フィブリン分解産物
を校正用または検量線用キャリブレ−タ−として用いた
ヒト血清中フィブリン分解産物およびフィブリノーゲン
分解産物濃度の測定 （１）校正用または検量線用キャリブレ−タ−としての
人工フィブリン分解産物の調製 0.1 ｇの ヒト精製フィブリノーゲンを0.1M NaCl を含
む50mM Tris-塩酸,pH7.5の40ｍｌに溶解する。3 ｍｇ／
ｍｌヒト血液凝固第１３因子を0.1 ｍｌ、1 Ｍ塩化カル
シウムを0.65ｍｌ加えた後、1000ＮＩＨ単位／ｍｌのウ
シトロンビンを50μｌ加え37℃、2 時間インキュベート
する。フィブリノーゲンは凝固して、いわゆるクロスリ
ンクフィブリンとなる。これに7.5 ｃｕ／ｍｌのヒトプ
ラスミンを180 μｌ加え、フィブリンを分解する。分解
後の上清を0.1M NaCl を含む50mMＴｒｉｓ- 塩酸, pH7.
5 にて平衡化させたリジンセファロースカラムに通し、
プラスミンをアフィニテイ吸収により除去する。素通り
したフィブリン分解産物を含む溶液を0.2 Ｍイプシロン
アミノカプロン酸、28ｍＭクエン酸ナトリウムおよび0.
02％アジ化ナトリウムを含む50ｍＭ Tris−塩酸緩衝液
pH7.5 にて平衡化されたセファロースＣＬ−６Ｂカラム
によりゲル濾過を行いフィブリン分解産物の分画を得
た。校正用または検量線用キャリブレ−タ−としては、
このうち分子量１５万以上の分画を用いた。校正用また
は検量線用キャリブレ−タ−としての濃度は蛋白量を測
定することによって求めた（V.J.MARDER, et al ; Bi
ochimica et Biophysica Acta,427,1-14(1976)）。
を校正用または検量線用キャリブレ−タ−として用いた
ヒト血清中フィブリン分解産物およびフィブリノーゲン
分解産物濃度の測定 （１）校正用または検量線用キャリブレ−タ−としての
人工フィブリン分解産物の調製 0.1 ｇの ヒト精製フィブリノーゲンを0.1M NaCl を含
む50mM Tris-塩酸,pH7.5の40ｍｌに溶解する。3 ｍｇ／
ｍｌヒト血液凝固第１３因子を0.1 ｍｌ、1 Ｍ塩化カル
シウムを0.65ｍｌ加えた後、1000ＮＩＨ単位／ｍｌのウ
シトロンビンを50μｌ加え37℃、2 時間インキュベート
する。フィブリノーゲンは凝固して、いわゆるクロスリ
ンクフィブリンとなる。これに7.5 ｃｕ／ｍｌのヒトプ
ラスミンを180 μｌ加え、フィブリンを分解する。分解
後の上清を0.1M NaCl を含む50mMＴｒｉｓ- 塩酸, pH7.
5 にて平衡化させたリジンセファロースカラムに通し、
プラスミンをアフィニテイ吸収により除去する。素通り
したフィブリン分解産物を含む溶液を0.2 Ｍイプシロン
アミノカプロン酸、28ｍＭクエン酸ナトリウムおよび0.
02％アジ化ナトリウムを含む50ｍＭ Tris−塩酸緩衝液
pH7.5 にて平衡化されたセファロースＣＬ−６Ｂカラム
によりゲル濾過を行いフィブリン分解産物の分画を得
た。校正用または検量線用キャリブレ−タ−としては、
このうち分子量１５万以上の分画を用いた。校正用また
は検量線用キャリブレ−タ−としての濃度は蛋白量を測
定することによって求めた（V.J.MARDER, et al ; Bi
ochimica et Biophysica Acta,427,1-14(1976)）。
【００１５】（２）校正用または検量線用キャリブレ−
タ−としてのフィブリノーゲン溶液の調製 精製ヒトフィブリノーゲンを、150 ｍＭ塩化ナトリウ
ム、28ｍＭクエン酸ナトリウムおよび0.02％アジ化ナト
リウムを含む50ｍＭ ＨＥＰＥＳ塩酸緩衝液pH7.5 に溶
解する。校正用または検量線用キャリブレ−タ−として
のフィブリノーゲン濃度は、溶解したフィブリノーゲン
の蛋白量により決定する。
タ−としてのフィブリノーゲン溶液の調製 精製ヒトフィブリノーゲンを、150 ｍＭ塩化ナトリウ
ム、28ｍＭクエン酸ナトリウムおよび0.02％アジ化ナト
リウムを含む50ｍＭ ＨＥＰＥＳ塩酸緩衝液pH7.5 に溶
解する。校正用または検量線用キャリブレ−タ−として
のフィブリノーゲン濃度は、溶解したフィブリノーゲン
の蛋白量により決定する。
【００１６】（３）ラテックス試薬の調製 粒径0.05から1 μｍのポリスチレンラテックス粒子に、
0.17M グリシン緩衝液(pH7.0) に溶解したＡおよびＢ二
種類の抗フィブリノーゲン抗体を吸着させる。この後0.
17M グリシン緩衝液に溶解した１％ＢＳＡによりラテ
ックス粒子表面のタンパク吸着を飽和させる。このラテ
ックス粒子を0.17M グリシンを含む緩衝液に懸濁して、
反応に用いる。（Cambisao C.L. et al.:Methods Enzym
ol 74(B):106,1981)
0.17M グリシン緩衝液(pH7.0) に溶解したＡおよびＢ二
種類の抗フィブリノーゲン抗体を吸着させる。この後0.
17M グリシン緩衝液に溶解した１％ＢＳＡによりラテ
ックス粒子表面のタンパク吸着を飽和させる。このラテ
ックス粒子を0.17M グリシンを含む緩衝液に懸濁して、
反応に用いる。（Cambisao C.L. et al.:Methods Enzym
ol 74(B):106,1981)
【００１７】（４）ヒト血清中のフィブリンおよびフィ
ブリノーゲン分解産物濃度の測定 第一試薬として150mMNaCl を含むグリシン−水酸化ナト
リウム緩衝液(pH9.0)を使用する。 第二試薬として
（３）で調製したラテックス試薬を用いる。吸光度変化
（濁度変化）を測定する装置として分光光度計をもちい
る。ヒト血清または（１）または（２）で調製した標準
物質５μｌと第一試薬２００μｌを反応させ、約５分後
に第二試薬２００μｌを添加反応させ第二試薬添加から
７０秒後の５７０ｎｍの吸光度と１８０秒後の吸光度の
差を測定し、標準物質から検量線を作成してヒト血清中
のフィブリンおよびフィブリノーゲン分解産物濃度の測
定を行う。
ブリノーゲン分解産物濃度の測定 第一試薬として150mMNaCl を含むグリシン−水酸化ナト
リウム緩衝液(pH9.0)を使用する。 第二試薬として
（３）で調製したラテックス試薬を用いる。吸光度変化
（濁度変化）を測定する装置として分光光度計をもちい
る。ヒト血清または（１）または（２）で調製した標準
物質５μｌと第一試薬２００μｌを反応させ、約５分後
に第二試薬２００μｌを添加反応させ第二試薬添加から
７０秒後の５７０ｎｍの吸光度と１８０秒後の吸光度の
差を測定し、標準物質から検量線を作成してヒト血清中
のフィブリンおよびフィブリノーゲン分解産物濃度の測
定を行う。
【００１８】（５）校正用または検量線用キャリブレ−
タ−の違いによるヒト血清中フィブリン分解産物および
フィブリノーゲン分解産物濃度の比較 抗体Ａより調製した試薬および抗体Ｂより調製した試薬
と（１）または（２）で調製した校正用または検量線用
キャリブレ−タ−を用いて、（４）の方法でヒト血清中
のフィブリン分解産物およびフィブリノーゲン分解産物
濃度を測定した。 抗体Ａより調製した試薬を用いた時
の測定値をＸ（μｇ／ｍｌ）、また抗体Ｂより調製した
試薬を用いたときの測定値をＹ（μｇ／ｍｌ）と表わす
こととする。（１）で調製した人工フィブリン分解産物
を校正用または検量線用キャリブレ−タ−として用い測
定した場合、その相関関係を一次回帰曲線により表現す
ると Ｙ＝１．０５Ｘ＋２．５ となった。また、相関
係数は ０．９９１であった。（図１）
タ−の違いによるヒト血清中フィブリン分解産物および
フィブリノーゲン分解産物濃度の比較 抗体Ａより調製した試薬および抗体Ｂより調製した試薬
と（１）または（２）で調製した校正用または検量線用
キャリブレ−タ−を用いて、（４）の方法でヒト血清中
のフィブリン分解産物およびフィブリノーゲン分解産物
濃度を測定した。 抗体Ａより調製した試薬を用いた時
の測定値をＸ（μｇ／ｍｌ）、また抗体Ｂより調製した
試薬を用いたときの測定値をＹ（μｇ／ｍｌ）と表わす
こととする。（１）で調製した人工フィブリン分解産物
を校正用または検量線用キャリブレ−タ−として用い測
定した場合、その相関関係を一次回帰曲線により表現す
ると Ｙ＝１．０５Ｘ＋２．５ となった。また、相関
係数は ０．９９１であった。（図１）
【００１９】しかるに、（２）で調製したフィブリノー
ゲン溶液を校正用または検量線用キャリブレ−タ−とし
て用い測定した場合、その相関関係を一次回帰曲線によ
り表現するとＹ＝０．３３Ｘ＋１．２となった。また、
相関係数は０．９７９であった。（図２）
ゲン溶液を校正用または検量線用キャリブレ−タ−とし
て用い測定した場合、その相関関係を一次回帰曲線によ
り表現するとＹ＝０．３３Ｘ＋１．２となった。また、
相関係数は０．９７９であった。（図２）
【００２０】以上のように、（２）の方法により調製し
たフィブリノーゲンを校正用または検量線用キャリブレ
−タ−として用いた場合には、異なった抗体を用いた場
合には、同一の血清に対して異なったフィブリン分解産
物およびフィブリノーゲン分解産物濃度の測定値が得ら
れる。しかし、（１）の方法により調製したフィブリン
分解産物を校正用または検量線用キャリブレ−タ−とし
て用いた場合には、異なった抗体を用いた場合でも、同
一のフィブリン分解産物およびフィブリノーゲン分解産
物濃度の測定値が得られることが示された。
たフィブリノーゲンを校正用または検量線用キャリブレ
−タ−として用いた場合には、異なった抗体を用いた場
合には、同一の血清に対して異なったフィブリン分解産
物およびフィブリノーゲン分解産物濃度の測定値が得ら
れる。しかし、（１）の方法により調製したフィブリン
分解産物を校正用または検量線用キャリブレ−タ−とし
て用いた場合には、異なった抗体を用いた場合でも、同
一のフィブリン分解産物およびフィブリノーゲン分解産
物濃度の測定値が得られることが示された。
【００２１】実施例２ ラテックス免疫凝集比濁法による、ヒト血清由来のフィ
ブリン分解産物およびフィブリノーゲン分解産物を校正
用標準液として用いたヒト血清中フィブリンおよびフィ
ブリノーゲン分解産物濃度の測定 （１）ヒト血清を用いた校正用または検量線用キャリブ
レ−タ−の調製 フィブリン分解産物およびフィブリノーゲン分解産物陽
性ヒト血清を、そのまままたは、０．２Ｍイプシロンア
ミノカプロン酸、２８ｍＭクエン酸ナトリウムおよび
０．０２％アジ化ナトリウムを含む５０ｍＭ Ｔｒｉｓ
塩酸緩衝液ｐＨ７．４などを用いて希釈した溶液を使用
する。なお、ヒト血清中のフィブリン分解産物およびフ
ィブリノーゲン分解産物濃度は、実施例１の（４）の方
法により測定する。このとき校正用または検量線用キャ
リブレ−タ−としては実施例１の（１）の方法により調
製した人工フィブリン分解産物をもちいる。
ブリン分解産物およびフィブリノーゲン分解産物を校正
用標準液として用いたヒト血清中フィブリンおよびフィ
ブリノーゲン分解産物濃度の測定 （１）ヒト血清を用いた校正用または検量線用キャリブ
レ−タ−の調製 フィブリン分解産物およびフィブリノーゲン分解産物陽
性ヒト血清を、そのまままたは、０．２Ｍイプシロンア
ミノカプロン酸、２８ｍＭクエン酸ナトリウムおよび
０．０２％アジ化ナトリウムを含む５０ｍＭ Ｔｒｉｓ
塩酸緩衝液ｐＨ７．４などを用いて希釈した溶液を使用
する。なお、ヒト血清中のフィブリン分解産物およびフ
ィブリノーゲン分解産物濃度は、実施例１の（４）の方
法により測定する。このとき校正用または検量線用キャ
リブレ−タ−としては実施例１の（１）の方法により調
製した人工フィブリン分解産物をもちいる。
【００２２】（２）校正用または検量線用キャリブレ−
タ−の違いによるヒト血清中フィブリン分解産物および
フィブリノーゲン分解産物濃度の比較 実施例１の（３）により調製した試薬を用い、実施例１
の（４）の方法によりヒト血清中のフィブリン分解産物
およびフィブリノーゲン分解産物濃度を測定した。抗体
Ａより調製した試薬を用いた時の測定値をＸ（μｇ／ｍ
ｌ）、また抗体Ｂより調製した 試薬を用いたときの測
定値をＹ（μｇ／ｍｌ）と表わすこととする。その相関
関係を一次回帰曲線により表現するとＹ＝０．８６Ｘ＋
１．９となった。また、相関係数は０．９８３であっ
た。（図３）
タ−の違いによるヒト血清中フィブリン分解産物および
フィブリノーゲン分解産物濃度の比較 実施例１の（３）により調製した試薬を用い、実施例１
の（４）の方法によりヒト血清中のフィブリン分解産物
およびフィブリノーゲン分解産物濃度を測定した。抗体
Ａより調製した試薬を用いた時の測定値をＸ（μｇ／ｍ
ｌ）、また抗体Ｂより調製した 試薬を用いたときの測
定値をＹ（μｇ／ｍｌ）と表わすこととする。その相関
関係を一次回帰曲線により表現するとＹ＝０．８６Ｘ＋
１．９となった。また、相関係数は０．９８３であっ
た。（図３）
【００２３】実施例１の（２）で調製したフィブリノー
ゲン溶液を校正用または検量線用キャリブレ−タ−とし
て用い測定した場合、その相関関係を一次回帰曲線によ
り表現するとＹ＝０．３１Ｘ＋１．４となった。また、
相関係数は０．９９０であった。したがってヒト血清由
来のフィブリン分解産物およびフィブリノーゲン分解産
物を校正用または検量線用キャリブレ−タ−として用い
た場合には、異なった抗体を用いた場合でも、同一のフ
ィブリン分解産物およびフィブリノーゲン分解産物濃度
の測定値が得られることが示された。
ゲン溶液を校正用または検量線用キャリブレ−タ−とし
て用い測定した場合、その相関関係を一次回帰曲線によ
り表現するとＹ＝０．３１Ｘ＋１．４となった。また、
相関係数は０．９９０であった。したがってヒト血清由
来のフィブリン分解産物およびフィブリノーゲン分解産
物を校正用または検量線用キャリブレ−タ−として用い
た場合には、異なった抗体を用いた場合でも、同一のフ
ィブリン分解産物およびフィブリノーゲン分解産物濃度
の測定値が得られることが示された。
【図１】実施例１の（１）で調製した人工フィブリン分
解産物を校正用または検量線用キャリブレ−タ−として
用い、実施例１の（４）の方法でヒト血清中のフィブリ
ン分解産物およびフィブリノーゲン分解産物濃度の測定
を行い、抗体Ａより調製した試薬を用いた時の測定値
と、抗体Ｂより調製した試薬を用いたときの測定値の相
関関係を示した図である。
解産物を校正用または検量線用キャリブレ−タ−として
用い、実施例１の（４）の方法でヒト血清中のフィブリ
ン分解産物およびフィブリノーゲン分解産物濃度の測定
を行い、抗体Ａより調製した試薬を用いた時の測定値
と、抗体Ｂより調製した試薬を用いたときの測定値の相
関関係を示した図である。
【図２】実施例１の（２）で調製したフィブリノーゲン
溶液を校正用または検量線用キャリブレ−タ−として用
い第１図と同様の測定を行った場合の、抗体Ａより調製
した試薬を用いた時の測定値と、抗体Ｂより調製した試
薬を用いたときの測定値の相関関係を示した図である。
溶液を校正用または検量線用キャリブレ−タ−として用
い第１図と同様の測定を行った場合の、抗体Ａより調製
した試薬を用いた時の測定値と、抗体Ｂより調製した試
薬を用いたときの測定値の相関関係を示した図である。
【図３】実施例２の（１）で調製したヒト血清由来のフ
ィブリン分解産物およびフィブリノーゲン分解産物を校
正用または検量線用キャリブレ−タ−として用い第１図
と同様の測定を行った場合の、抗体Ａより調製した試薬
を用いた時の測定値と抗体Ｂより調製した試薬を用いた
ときの測定値の相関関係を示したものである。
ィブリン分解産物およびフィブリノーゲン分解産物を校
正用または検量線用キャリブレ−タ−として用い第１図
と同様の測定を行った場合の、抗体Ａより調製した試薬
を用いた時の測定値と抗体Ｂより調製した試薬を用いた
ときの測定値の相関関係を示したものである。
Claims (5)
- 【請求項１】 フィブリン分解産物およびフィブリノー
ゲン分解産物を免疫学的測定により測定する方法におい
て、校正用または検量線用キャリブレ−タ−としてフィ
ブリン分解産物を用いることを特徴とする方法。 - 【請求項２】 免疫学的測定がラテックス凝集法により
行われる請求項１記載の方法。 - 【請求項３】 ヒト精製フィブリノーゲンを凝固させ、
これにヒトプラスミンを作用させることにより調製した
フィブリン分解産物を校正用または検量線用キャリブレ
−タ−として用いる請求項１又は２記載の方法。 - 【請求項４】 フィブリン分解産物の分子量が５万ー１
００万である請求項３記載の方法。 - 【請求項５】 ヒト血清中のフィブリン分解産物を校正
用または検量線用キャリブレ−タ−として用いる請求項
１または２記載の方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP23289392A JPH0658933A (ja) | 1992-08-08 | 1992-08-08 | フィブリン分解産物及びフィブリノーゲン分解産物の測定方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP23289392A JPH0658933A (ja) | 1992-08-08 | 1992-08-08 | フィブリン分解産物及びフィブリノーゲン分解産物の測定方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0658933A true JPH0658933A (ja) | 1994-03-04 |
Family
ID=16946497
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP23289392A Pending JPH0658933A (ja) | 1992-08-08 | 1992-08-08 | フィブリン分解産物及びフィブリノーゲン分解産物の測定方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0658933A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2002372536A (ja) * | 2001-06-15 | 2002-12-26 | Dai Ichi Pure Chem Co Ltd | 免疫学的測定法 |
-
1992
- 1992-08-08 JP JP23289392A patent/JPH0658933A/ja active Pending
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2002372536A (ja) * | 2001-06-15 | 2002-12-26 | Dai Ichi Pure Chem Co Ltd | 免疫学的測定法 |
| JP4616516B2 (ja) * | 2001-06-15 | 2011-01-19 | 積水メディカル株式会社 | 免疫学的測定法 |
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