JPH06509706A

JPH06509706A - Intercellular adhesion molecule-3 and its binding ligand

Info

Publication number: JPH06509706A
Application number: JP5500999A
Authority: JP
Inventors: デフォッジローリス，アントニン・アール; スプリンガー，ティモシー・エイ
Original assignee: センター・フォー・ブラッド・リサーチ，インコーポレイテッド
Priority date: 1991-06-11
Filing date: 1992-06-11
Publication date: 1994-11-02
Anticipated expiration: 2017-06-04
Also published as: FI935500A; KR100333120B1; BG61682B1; HU9303529D0; IL102176A; RU2130782C1; WO1992022323A1; CZ283478B6; CZ270293A3; NZ243114A; BR9206142A; HUT66617A; JP3288042B2; IE921893A1; EP0590051A4; UA27763C2; NO317658B1; IL102176A0; SK139593A3; BG98287A

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。 (57) [Abstract] This bulletin contains application data before electronic filing, so abstract data is not recorded.

Description

【発明の詳細な説明】細胞間接着分子−３およびその結合リガンド本出願は、米国特許出願第０７／７１２，８７９号（１９９１年６月１１日出願）の一部係属出願であり、そして、米国特許出願第０７１０４５．９６３号（１９８７年５月４日出願）、第０７／１１５，７９８号（１９８７年１１月２日出願）、第０７／１５５．９４３号（１９８８年２月１６日出願）、第０７／１８９．８１５号（１９８８年５月３日出願）、第０７／２５０．４４６号（１９８８年９月２８日出願）、第０７／４５４．２９４号（１９８９年１２月２２日出願）、ＰＣＴ出願第ＰＣＴ／ＵＳ９１１０２９４２号およびＰＣＴ／ＵＳ９１１０２９４６号（１９９１年４月２７日に米国受理官庁に出願）に関連する。これらの出願は、本明細書で参考として援用されている。発明の技術分野本発明は、ＩＣＡＭ−３と名付けられた、新規な細胞間接着分子の発見に関する。この分子は、白血球の集団が細胞性基質を認識し、そしてそれに接着する場合のプロセスに関与する。ＩＣＡＭ−３は、炎症の部位および免疫応答の部位において、細胞と、他のリンパ球、マクロファージ、および好中球との相互作用を媒介する。本発明はさらに、ＩＣＡＭ−３単独あるいはＩＣＡＭ−１および／あるいはＩＣＡＭ−２との組合せを用いて、顆粒球、リンパ球、あるいはマクロファー７系統の細胞間接着を阻害することに関する。このような分子の使用により、特異的および非特異的炎症の治療法が提供される。本発明はさらに、ＩＣＡ〜１−３単独あるいはＩＣＡＭ−１および／あるいはＩｃＡＭ−２との組合せを投与することによって、ＨＴ〜′に感染しているかあるいは曝されている個体中で、白血球のＨＩＶ感染、特にＨＩＶ−１感染を抑制するための治療法および予防法に関する。従って本発明は、ＨＩＶウィルスによって引き起こされるＡＩＤＳ（後天性免疫不全症候群）のような疾病の療法を提供する。本発明はさらに、ＩＣＡＭ−３単独あるいはＩＣＡＭ−１および／あるいはＩＣＡＭ−２との組合せを用いて、ＨＩＶ−１感染細胞が循環系から移動するのを抑制するための治療方法に関する。従って本発明は、ＨＩＶ−１ウイルスによって引き起こされるＡＩＤＳ（後天性免疫不全症候群）のような疾病の療法を提供する。本発明はまた、ＩＣＡＭ−３単独あるいはＩＣＡＭ−１および／あるいはＩＣＡＭ−２との組合せを用いて、ＨＩＭに感染した個体中のＴ細胞の死滅および「ノンンチアＪ　（ｓｙｎｃｙｔｉａ）形成を抑制する治療法に関する。従って本発明は、）（ＩＶ−１ウイルスによって引き起こされるＡＩＤＳ（ｖｉ天性免疫不全症候群）のような疾病の療法を提供する。本発明は、ＩＣＡＭ−３単独あるいはＩＣＡＭ−１および／あるいはＩＣＡＭ− ２との組合せの、喘息の治療における使用に関する。本発明はさらに、ＩＣＡＭ−３に結合し得る分子（以後、抗ＩＣＡＭ−３と呼ぶ）に関する。抗ＩＣＡＭ−３分子のＩＣＡＭ−３への結合は、ＩＣＡＭ−３に関する生物学的機能を調節することを目的とする。本発明の結合分子は、ＩＣＡＭ −３に結合し得る抗体、ペプチド、あるいは炭水化物てあり得る。このような結合分子は、ＩＣＡＭ−３の生物学的機能を調節するのに有用である。本発明はまた、抗ＩＣＡＭ−３単独あるいは抗ＩＣＡＭ−１および／あるいは抗ＩＣＡＭ−２との組合せを用いて、顆粒球、リンパ球、あるいはマクロファー７系統の細胞間接着を阻害することに関する。このような分子の使用によって、特異的および非特異的炎症の治療の方法が提供される。本発明はまた、抗ＩＣＡＭ−３単独あるいは抗ＩＣＡＭ−１および／あるいは抗ＩＣＡＭ−２との組合せを投与することによって、ＨＩＶに感染しているかあるいは曝されでいる個体中で、白血球のＨＩＶ感染、特にＨＩＶ−１感染を抑制するための治療法および予防法に関する。従って本発明は、ＨＩＶウィルスによって引き起こされるＡＩＤＳ（後天性免疫不全症候群）のような疾病の療法を提供する。本発明はさらに、抗ＩＣＡＭ−３剤単独あるいは抗ＩＣＡＭ−１剤および／あるいは抗ＩＣＡＭ’−２剤との組合せを用いて、ＨＩＶ−１感染細胞が循環系から移動するのを抑制するための治療方法に関する。従って本発明は、ＨｒＶ−１ウイルスによって引き起こされるＡＩ［Ｓ（後天性免疫不全症候群）のような疾病の療法を提供する。本発明はさらに、抗ＩＣＡＭ−３剤単独あるいは抗ＩＣＡＭ−１剤および／あるいは抗ＩＣＡＭ−２剤との組合せの、喘息の治療における使用に関する。細菌あるいはウィルスのような外来侵入物から、宿主を適正に防御するために、白血球は細胞基質に付着てきなければならない。これらの機能については、Ｅｉｓｅｎ、　Ｉｌ、Ｗ、、　（Ｉｎ：　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ、第三版、Ｈａｒｐｅｒ　＆　Ｒｏｗ、　Ｐｈ１ｌａｄｅｌｐｈｉａ、@Ｐ＾（１９８０）、　ｐｐ、　２９０−２９５および３８１−４１．８）を参照のこと。白血球は、循環系から炎症部位へ移動できるように、内皮細胞に付着できなければならない。さらに、白血球は、正常な特異的免疫応答が起こり得るように、抗原提示細胞に付着しなければならず、そして、最後に、ウィルス感染細胞あるいは腫瘍細胞の溶解が起こるように、適当な標的細胞に付着しなければならない。最近、ハイブリドーマ技術を用いて、上記の付着が媒介する機能の媒介に関与する白血球表面分子が同定された。簡単にいえば、白血球表面に結合し、そして上述の付着関連機能を阻害する、ヒトＴ細胞に対するモノクローナル抗体（Ｄａｖｊｇｎｏｎ、　Ｄら、Ｐｒｏｃ、　Ｎａｔｌ　＾ｃａｄ、　Ｓｃｉ、　ＵＳ＾７８：４５３５−４５３９　（１９８１））およびマウスひ臓細胞に対するモノクローナル抗体（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ、　Ｔ、ら、Ｅｕｒ、　Ｊ、　Ｉｓｍｕｎｏｌ、　９：３０１−３０６　（１９７９））が同定された（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ、　Ｔ、　Ｆｅｄ、　Ｐｒｏｃ、　４４：２６６０−２６６３　（１９８５））。これらの抗体により同定された分子は、Ｍａｃ−１および白血球機能関連抗原−１（ＬＦＡ−１）と呼ばれた。Ｍａｃ−１は、マクロファーン、顆粒球および大顆粒リンパ球上に見られるヘテロダイマーである。ＬＦＡ−１は、リンパ球上に見られるヘテロダイマーである（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ、　Ｔ＾、ら、Ｉｉｍｕｎｏｌ、　Ｒｅｖ、　６８：１１１−１３５　（１９８２））　。これらの２つの分子、加えて第三の分子であるｐ１５０．９５　（これは、Ｍａｃ−１と同様の組織分布を有する）は、細胞接着て役割を果たしている（Ｋｅｉｚｅｒ、　Ｇ、ら、Ｅｕｒ、　Ｊ、　Ｉｍｍｕｎｏｌ、　１５：１１４２−１１４７（１９８５））。上記の白血球の分子は、糖タンパク質のｒＣＤ−１８フアミリ刊と呼ばれる、糖タンパク質の関連あるファミリーのメンバーであることがわかった（Ｓａｎｃｈｅｚ−Ｍａｄｒｉｄ、　Ｆ、Ｊ　ら、Ｅｘｐｅｒ、　Ｍｅｄ、１５８：　１７８５−１８０３　（１９８３）；　Ｋｅｉｚｅｒ、　ＧAＤ。ら、Ｅｕｒ、　Ｊ、Ｉｍｍｕｎｏｌ、１５：１１４２−１１４７　（１９８５））　。この糖タンパク質ファミリーは、１つのアルファ鎖および１つのベータ鎖を有するヘテロダイマーからなる。抗原のアルファ鎖は、それぞれ異なっているが、ベータ鎖は、高度に保存されている（Ｓａｎｃｈｅｚ−Ｍａｄｒｉｄ、　Ｆ、　Ｊ、　Ｅｘｐｅｒ、　１ｉｅｄ、　１５８：１７８５−１８０３　（１９８３））　。糖^ ンパク質ファミリー（ｒｃＤ１８Ｊと呼ばれることもある）のベータ鎮は、９５ｋｄの分子量を有することがわかり、一方、アルファ鎖は、１５０ｋｄがら１８０ｋｄまて様々であることがわがった（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ、Ｔ、、　Ｆｅｄ、　Ｐｒｏｃ、　４４：２６６０−２６６３　（１９８５））。膜タンパク質のアルファサブユニットは、ベータサブユニット程のホモロノーは、示さないが、糖タンパク質のアルファサブユニットを細かく分析すると、これらの間で実質的に類似していることがわかった。ＬＦＡ−１関連糖タンパク質のアルファサブユニットおよびベータサブユニットの間でノ類似性ニツいては、５ａｎｃｈｅｚ−３１ａｄｒｉｄ、　Ｆ、ら（Ｊ、　Ｅｘｐｅｒ、　Ｍｅｄ、　１５８：５８６−６０２（１９８３）；　Ｊ、　Ｅｘｐｅｒ、　Ｍｅｄ、１５８：１７８５−１８０３　（１９８３））で述べられている。白血球細胞表面上にこの接着タンパク質ファミリーのうちのいずれかを正常な量発現できない個体の一群が確認されている（Ａｎｄｅｒｓｏｎ、　Ｄ、Ｃ，ら、Ｆｅｄ、　Ｐｒ。ｃ、４４：２６７１−２６７７　（１９８５）＋　Ａｎｄｅｒｓｏｎ、Ｄ、Ｃ，ら、Ｊ、Ｉｎｆｅｃｔ、Ｄｉｓ、１５２：６６８−６８９（１，９８５））　。このような個体は、「白血球付着不完全症Ｊ　（Ｌ　Ａ　Ｄ　）　（Ａｎｄｅｒｓｏｎ。Ｄ、Ｃら、Ｆｅｄ、　Ｐｒｏｃ、　４４：２６７１−２６７７　（１９８５）；　Ａｎｄｅｒｓｏｎ、　Ｄ、Ｃら、Ｊ、ＩｎｆｅｃｔＤｉｓ、　１５２：６６８ −６８９　（１９８５））に罹っていると言われる。ＬＡＤ患者の特徴には、壊死性軟組織病変、障害性腺形成、および創傷治癒、ならびにインビトロにおける付着依存性白血球機能の異常および慢性および反復性細菌感染に対する感受性が含まれる。ＬＡＤ磨者由来の顆粒球は、インビトロにおいて、正常な顆粒球が抗ＣＤ１８モノクローナル抗体の存在下で行なうのと同じように不完全なやり方で挙動する。すなわち、これらの顆粒球は、凝集あるいは内皮細胞への付着のような付着関連機能を発揮できない。しかしより重要なことは、このような患者は、その顆粒球が細胞性基質に付着することがてきないために、正常な炎症反応を高められないことが観察されたことである。最も注目すべきは、これらＬ　Ａ　Ｄ　患者由来の顆粒球が、炎症病変近くの血管中の内皮細胞に付着できないために、皮膚炎症のような炎症の部位に到達できないことが観察されたことである。このような付着は、管外遊出のための必要な工程である。これらの吏者由来のリンパ球は、インヒドロにおいて、ＣＤ１８フアミリーの分子が抗体により中和されているような正常リンパ球と同様の欠陥を示した。さらに、このような個体は、細胞が細胞性基質に接着することができないために、正常な炎症反応を高められなかった（Ａｎｄｅｒｓｏｎ、　Ｄ、Ｃら、Ｆｅｄ、　Ｐｒｏｃ、　４４：２６７１−２６７７　（１９８５）：　Ａｎｄｅｒｓｏｎ、Ｄ、Ｃら、Ｊ、Ｉｎｆｅｃｔ、Ｄｉｓ、１５２：６６８−６８９　（１９８５）j 、これらのデークから、ＣＤ　］、　８ファミリーの機能的な接着分子の欠損により１）ツバ球が正常な方法て付着てきない場合、免疫反応は和らげられることがわかる。従って、要約すると、動物の健康および生命を維持するためには、白血球の他の細胞（内皮細胞なと）に接着する能力が必要である。この接着には、白血球の細胞表面に存在する特異的レセプター分子が関与する細胞−細胞接触が必要であることが見いだされた。これらのレセプターにより、白血球が他の白血球、内皮細胞、および非血管細胞に接着することができるようになる。細胞表面レセプター分子であるＬＦＡ−１，Ｍａｃ−１、およびｐ１５０．９５は、お互いに深く関連していることがわかっている。これらの細胞表面レセプター分子が欠如している白血球をもつヒトでは、慢性および反復性感染、ならびに不完全な抗体応答を含む他の臨床上の症状が現われる。さらに、白血球接着は外来組織が確認されて拒絶されるプロセスに関与しているため、このプロセスの理解は、腎臓などの固体臓器移植、骨髄などの非固体臓器移植、組織移植、アレルギー、腫瘍学の分野で重要な価値がある。Ｂ、ＨＩＶ感染ＨＩＶ感染は、ＡＩＤＳの原因である。ＨＩＶの変異体の多くが報告されている。その主要なものは、ＨＩＶ−１およびＨＩＶ−２である。ＨＩＶ−１は、化アメリカおよびヨーロッパで流行っており、ＨＩＶ−２は、アフリカでのみ流行っている。これらのウィルスは、類似の構造を持ち、類似の機能を有するタンパク質をコートしている。ＨＩＶ感染は、ウィルスタンパク質（ｒｇｐ１２０」と呼ばれる）が、Ｔ４（ｒＴヘルパー」）リンパ球の表面に存在するレセプター分子（ｒｃＤ４Ｊと呼ばれる）に結合することによって起こると考えられている（本明細書に参考として援用されている、Ｓｃｈｎｉｔｔｍａｎ、　Ｓ、Ｍら、Ｊ。Ｉｍｍｕｎｏｌ、　１４１：４］８１−４１８６　（１９８８））　。このレセプターに結合した後、ウィルスは、細胞に入り、複製し、そしてそのプロセスの中で、Ｔ細胞を殺す。このように、個体のＴ４細胞の破壊は、ｌ−（Ｉ　Ｖ感染の直接の結果である。Ｔ細胞の破壊により、感染した患者は、日和見感染と闘う能力が損なわれる。ＡＩＤＳに罹っている個体でよくカンが発生するが、このようなガンとＨＩＶ感染との関係は、はとんどの場合、よ（わからない。ＨＩ　Ｖウィルスのわずかな復製も感染細胞にとっては致死的であるが、このような複製は、典型的には、感染している個体のＴ４細胞のわずかな部分にしか検出されない。最近の結果から、以前考えられていたより多くウィルス血症が起こり、モしてＴ細胞感染率は、１％はどであることがわかる。いくつかの研究により、ＨＩＶウィルスがＴ４細胞の破壊を媒介する他の機構が解明されてきた。ＨＩＶ複製とは別に、ＨＩＶ感染細胞は、細胞障害性のキラー細胞の作用により破壊され得る。キラー細胞は、通常ヒトのなかに存在し、宿主をモニターして、出会うすべての外来細胞（例えば、不適合な輸血あるいは臓器移植でみられる）を破壊する役割をしている。ＨＩＶに感染すると、Ｔ４細胞は、その細胞表面にｇｐ１２０分子を提示する。キラー細胞は、このようなＴ４細胞を異物（本来の細胞としててはなく）と認識して、それ故に、その破壊を媒介する。ＨＩＶ感染は、感染していない健康な細胞の破壊にもつながり得る。感染細胞は、血流中にｇｐ１２０タンパク質を分泌し得る。次に遊離したｇｐ１２０分子は、健康な非感染細胞のＣＤ４レセプターに結合し得る。このような結合により、細胞はＨＩＶ感染細胞の外観を呈する。細胞障害性のキラー細胞は、非感染Ｔ４細胞に結合したｇｐ１２０を認識し、その細胞を異物と認識して、その細胞の破壊を媒介する。さらに他の機構であって、本発明にとって特に興味深いものは、Ｈ２Ｎ・′がＴ４細胞の死滅を、「ノンノチア」形成によって引き起こす機構である。「ノン／チウム」は、多核巨大細胞てあり、数百ものＴ４細胞の融合により形成される。ＨＩＶ感染により、感染細胞が、他の、感染しているＴ４細胞あるいはしていない健康なＴ４細胞と融合する能力を有するようになる。ンンシチウムは、機能できず、すぐに死ぬ。その死滅により、ＨＩＶ感染したＴ細胞およびＨ１■感染していないＴ細胞の両方の破壊がなされる。このプロセスは、Ｔ４細胞の直接の細胞−細胞接触を必要とするため、本発明にとって特に興味深い。ＨＩｖ感染細胞のノンノチアを形成する能力により、このような細胞が健康な細胞と融合する手段を得たことが示唆される。ＨＩ　Ｖ感染および特にＨＩＶ−１感染は、白血球インテグリン（ｉｎｔｅｇｒｉｎｓ）の細胞表面発現およびこれらのヘテロダイマーによって媒介される細胞接着反応に影響を与えるようである（Ｐｅｔｉｔ、＾。Ｊら、Ｊ、　Ｃｌ１ｎ、　Ｉｎｖｅｓｔ、　７９：１８８　（１９８７）：　Ｈｉｌｄｒｅｔｈ、Ｊ、Ｅ、Ｋ　ら、　５ｃｉｅｎｃｅ　２４４：　１０７５　（１９８９）：　Ｖａｌｅｎｔｉｎ、Ａ、ら、Ｊ、Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ　１４４：９３４−９３７　（１９９０）：　Ｒｏｓｓｅｎ、Ｒ，Ｄ　ら、Ｔｒａｎｓ、Ａｓ５ｏｃ、Ａｗｅｒｉ ■ ａｎ　Ｐｈｙｓｊｃｉａｎｓ　１０２：　１］７−１３０　（１９９０）、これらのすべては、参考として本明細書に援用されている）。ＩＩ〜７−１感染の後、Ｕ９３７細胞の同型凝集が増加し、ＣＤ１８およびＣＤ１１ｂの細胞表面発現も同様である（Ｐｅｔｉｔ、＾、Ｊら、Ｊ、　Ｃｌ１ｎ、　Ｉｎｖｅｓｔ、　７９：１８８　（１９８７））　。ＨＩ　Ｖ−１に感染したＵ９３７細胞は、非感染Ｕ９３７細胞よりずっとＩＬ、−１刺激内皮細胞に接着し易い。この挙動は、内皮基質を抗ＣＤ１８モノクローナル抗体あるいは抗ＣＤ１１ａモノクローナル抗体で処理するかあるいは抗ＩＣＡＭ−１抗体で処理することによって抑制され得る（Ｒｏｓｓｅｎ、　Ｒ，Ｄ、、　Ｔｒａｎｓ、　Ａｓ５ｏｃ、　Ａｍｅｒｉｃａｎ　Ｐｈｙｓｉｃｉａｎｓ　１０２：１１７−１３０　（１９８９））　。ＣＤ　１８あるいはＣＤ１１ａに対する一Ｅ／クローナル抗体はまた、フィトヘマグルチニン（ＰＨＡ）で刺激されたリンパ芽球細胞および構成的に感染性のＣＤ４ネカテイブＴ細胞を含むシンノチアの形成を阻害し得ることがわかっている（Ｈｉｌｄｒｅｔｈ、　Ｊ、Ｅ、にら、５ｃｉｅｎｃｅ　２４４：１０７５　（１９８９））　。ウィルスに感染している細胞のみを抗ＣＤ１８あるいは抗ＣＤ１］、ａモノクローナル抗体で処理すると、／ンンチウム形成にほとんど影響を与えないことがわかった。このことから、これらの抗体は、主に非感染標的細胞を感染から守っていることが示唆される（Ｈｉｌｄｒｅｔｈ、　Ｊ、Ｅ、にら、５ｃｉｅｎｃｅ　２４４：１０７５　（１９８９）　；　Ｖａｌｅｎｔｉｎ、　Ａ　ら、Ｊ、Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ　１４４：９３４−９３７　（１９９０））。Ｖａｌｅｎｔｉｎら（Ｖａｌｅｎｔｉ氏B Ａら、Ｊ、　ＩｍｍｕｎｏｌｏｇＹ　１４４：９３４−９３７　（１９９０））は、最近、ＣＤ１８に特異的なモノクローナル抗体が、継続的なＴ細胞株をＨＩＶ−１感染したＵ９３７細胞とともに培養した場合に形成されるシンンチアを阻害することを示すことにより、これらのことを確認した。ＣＤ１８あるいはＣＤ１１ａに特異的なモノクローナル抗体が、感受性の細胞がＨＩＶ感染細胞と融合するのを防ぐ機構については、不明のままであり、本発明においては必要てないが、放射性標識したｇｐ１２０による研究で、ＣＤ１８を含むヘテロダイマーが、ウィルスに結合する部位を提供するわけではないことが示唆されている（Ｖａｌｅｎｔｉｎ、＾、ら、Ｊ、　Ｉｍｕｕｎｏｌｏｇｙ　１４４：９３４−９３７　（１９９０））。従って、ＨＩ　Ｖ感染には、細胞−細胞相互作用、および／あるいはこのような細胞−細胞相互作用に類似するウィルス−細胞相互作用が含まれる。この細胞−細胞相互作用により、内皮バリアを横切る細胞遊離ウィルスの輸送あるいはウィルスに感染した細胞の輸送が行なわれ得る。細胞−細胞相互作用に類似のウィルス−細胞相互作用により、遊離のウィルスが、健康な細胞に付着および／あるいは感染するのを促進するかあるいは可能になり得る。従って、本発明は、一部には、ＨＩＶ感染および特にＨＩＶ−１感染によって、ＣＤ１１ａ／ＣＤ１８ヘテロダイマーの発現およびその結合リガンドの発現が増加するという観察からくる。この発現の増加は、ＨＩＶ感染したＴ細胞がお互いに付着したり凝集したりする（すなわち、「同型の凝集」がおこる）能力を高めるという点て重要である。このような同型の凝集は、休止している正常な白血球間で起こることは見られないため、この発見により、ＣＤＩＩ／ＣＤ１８レセプターおよび／あるいはＩｃＡＭ−１のようなりガントがこのような凝集に必要であることが示唆される。同型の凝集が起こるためには、ＬＦＡｎは、ＩｃＡＭ− １に結合しなければならない。本明細書に記載のように、ｌｃＡＭ−３は、休止Ｔ細胞上て高レベルて発現している唯一のＩＣＡＭファミリーの分子である。Ｔ細胞が「活性化」されない限り、抗ＩＣＡＭ−３抗体のみが、Ｔ細胞がＬ　Ｆ　、Ａ　−１に接着するのをブロックできる。従って、抗ＩＣへＭ−３抗体は、Ｔ細胞の凝集を抑制するのに用いられ得る。さらに、抗１ｃＡＭ　３抗体は、感染したＴ細胞の接着プロセスを阻害するのに用いられ得る。この接着プロセスは、Ｈ１〜′−１が個体の感染細胞から健康な細胞へと移動するのを助け、そして健康な細胞が遊離のウィルスに感染するのを助けるかあるいは促進するものである。白血球の移動および散在は、個体を感染症から防御するのに重要である。しかし、これらのプロセスは、ウィルスに感染した白血球の移動および散在にも役割を果たしている。特に重大なのは、ＨＩＶに感染した白血球の移動および散在である。このような細胞の移動によって、血管外病巣の形成がなされ、そして腫瘍および他の異常を引き起こし得る。病気に冒された臓器の組織学的試験によって、病巣の血管外単核細胞浸潤が明らかになっている。中枢神経系の中のこのような浸潤物中のウィルスに感染した細胞を同定する試みにより、ＨＩＶ−１感染細胞の存在が明らかとなっている。これらの研究で、ＨＩＶ−１ウイルスが王に単球およびマクロファーン、ならびにこの系統の他の細胞に存することがわかった（Ｒ，Ｔ、　Ｊｏｈｎｓｏｎら、ＦＡＳＥＢ　Ｊ、２：２９７０　（１９８８）；　Ｍ、Ｈ，５ｔｏｌｅｒら、Ｊ、＾ｍｅｒ、Ｍｅｄ、Ａｓ５ｎ、２５６：２３６０　（１９８６）；　Ｓ、　Ｇａｒｔｎｅｒら、５ｃｉｅｎｃｅ　２３３：２１５　（１９８６））。ＨＩＶ−１感染した単球様細胞の血管外浸潤物の形成を刺激する機構は、これまでよくわかっていなかった。この機構は、細胞から遊離したウィルスの輸送あるいは感染した単核細胞の細胞質内の内皮バリアを突き抜けるウィルスの輸送のいずれかを含み得る。ＨＩＶ−１感染により、白血球の血管内皮細胞への接着および白血球の血液中から血管外組織部位への移動を促進する細胞表面の分子の発現が刺激される（Ｃ，ｆ、　Ｓｍ１ｔｈら、Ｊ、Ｃｌ１ｎ、　Ｉｎｖｅｓｔ、　８２：１７４６　（１９８８）、これは参考として本明細書に援用されている）。従って、細胞の移動を阻害する抗体を使って、ＨＩＶ感染細胞の散在を防ぐことが提案されている（１０９０／１３３１６）。Ｄ　喘息　臨床上の特徴喘息は、異質ファミリーの疾病である。喘息は、刺激に対する気管気管支の過剰反応により特徴づけられる（Ｋａｙ、　Ａ、Ｂ、、＾ｌｌｅｒｇｙ　ａｎｄ　Ｉｎｆｌａｏ＋ｍａｔｉｏｎ、＾ｃａｄｅｍｉｃ　Ｐｒｅｓｓ、　ＮＹ　（１９８７）；これは参考として本明細書に援用されている）。臨床的には、喘萄は、気管気管支の狭窄、濃い執着性の分泌物、ならびに呼吸困難、咳、セイセイいう発作として顕れる。これらのそれぞれの症状のお互いの関連は不明であるが、最終的な結果は、気道抵抗の増加、肺および胸郭の過度膨張、ならびに通気分布の異常、および肺の血流の異常である。この疾病は、症状のでない期間を間において、急性の症状が一時的な期間顕れる。急性の症状により、低酸素症となり、致死的であり得る。全世界の人口の約３％が喘息に罹っている。アレルギー性喘息および自家混合（ｉｄｉｏｓｙｎｃｒａｔｊｃ）喘息の２つの型が報告されている。アレルギー性喘息は、通常、鼻炎、ノンマシン、湿疹などの遺伝性のアレルギー病と関連している。症状は、空気媒介抗原（例えば、花粉、環境汚染物、職業上の汚染物など）の皮肉注入に対する陽性の膨疹およびフレア（ｗｈｅａｌ−ａｎｄ−ｆｌａｒｅ）反応、ならびにＩｇＥの血清レベルの増加により特徴づけられる。アレルギー性の喘息は、多くの患者でＩｇＥ抗体の存在と因果関係があるよってある。上述の特徴を示さない喘息患者は、自家混合（ｉｄｉｏｓｙｎｃｒａｔｉｃ）喘息と考えられる。アレルギー性喘息は、ＴおよびＢリンパ球により制御されるＩｇＥの応答に依存し、そして、空気媒介の抗原と肥満細胞に結合したあらかじめ形成されたＩｇＥ分子との相互作用により活性化されると考えられている。抗原と出会う場合、抗原は、個体を感作するために、長い期間１ｇＥの産生がなされるのに十分な濃度てなければならない。一旦感作されれば、喘息患者は、非常に低いレベルの抗原にも応答して症状を顕すようになる。喘息の症状は、引き金となる抗原、環境的要因、職業的要因、肉体作業、および感情のストレスの存在および増加により悪化し得る。喘息は、メチルキサンチン（テオフィリンなど）、ベーターアドレナリン作用性アンタゴニスト（カテコールアミン、レゾシノール、サリゲニン、およびエフェドリンなど）、クルココルチコイド（ヒドロコルチゾンなど）、肥満細胞の脱顆粒の阻害剤（すなわち、クロモリンナトリウムのようなりロモン）、および抗コリン作用剤（アトロピンなど）により、処置され得る。喘息は、好酸球（「好酸球増加」）の肺の組織への流入が関与していると考えられている（Ｆｒｉｇａｓ、　Ｅら、Ｊ、　ＡＩｌｅｒｇｙ　Ｃ１１ｎ、　Ｉｍｍｕｎｏｌ、　７７＋５２７−５３７　（１９８６）、　これは、参考として本明細書に援用されている）。喘密、の免疫学的根拠については、気管支肺胞洗浄研究（Ｇｏｄａｒｄ、　Ｐら、Ｊ、Ａｌｌｅｒｇｙ　Ｃ１１ｎ、　Ｉｍｍｕｎｏｌ、　７０：８８　（１９８２））および上皮を露出した呼吸平滑筋組織の研究（Ｆｌａｖａｈａｎ、　Ｎ、Ａら、Ｊ、　Ａｐｐｌ、　Ｐｈｙｓｉｏｌ、　５８：８３４　（１９８５）：　Ｂａｒｎｅｓ、　Ｐ。Ｊら、Ｂｒ、　Ｊ、　Ｐｈａｒｍａｃｏｌ、　８６＋６８５　（１９８５））から得られた。これらの研究から喘１、の免疫学にある機構が解明されたわけではないが、この疾病の免疫学的原因に関する、一般的に受け入れられている仮定が導かれた（Ｆｒｉｇａｓ、　Ｅ、ら、Ｊ。ＡＩｌｅｒｇｙ　Ｃ１１ｎ、　Ｉｍｍｕｎｏｌ、　７７：５２７−５３７　（１９８６））。喘息の病理学的な顕著な特徴は、肺の実質組織の好酸球による広範囲な浸潤および粘膜線毛能力の破壊である。いわゆる「好酸球の仮定」によれば、肺の肥満細胞から放出された有害なメディエータ−を中和するために、好酸球が気管支に引き付けられるとされている。この仮定によれば、好酸球は、気管支に引き付けられ、そこで脱顆粒がおきて細胞毒性分子が遊離される。脱顆粒により、好酸球は、肥満細胞の有害なメディエータ−を酵素的に中和する、ヒスタミン、アリルサルファターゼおよびホスホリパーゼＤなどのような酵素を放出する。しかし、これらの分子は、粘膜線毛機構の破壊をも促進し、従って、気管支の分泌物を取り除くことを阻害し、喘息に特徴的な肺の損傷を起こさせる。喘息には、細胞の移動が関与するため、被検体中のアレルゲンの影響を和らげるように、この移動を阻害する抗体の使用が提案されている（Ｗｏ　９０／］、０４５３）本発明は、細胞間接着分子−３（ＩＣＡＭ−３）と呼ばれる新規な細胞接着分子の発見に基づく。本発明はさらに、ＩＣＡＭ−３の機能的な誘導体、抗ＩＣＡＭ−３抗体、この抗体のヒト化した抗ＩＣＡＭ−３抗体フラグメント、およびＩＣＡＭ−３に結合しかつＩＣＡＭ−３の生物学的機能を阻害することができる他の分子にも関する。本発明はさらに、上記のすべての分子の治療および予防における使用を含む。詳細には、本発明は、実質的に天然の夾雑物のない、ＩＣＡＭ−３、あるいはその機能的な誘導体を含む。本発明は、ＩＣＡＭ−３あるいはその機能的な誘導体をコードし、あるいは発現できる、組換えあるいは合成りＮＡ分子を得る方法を提供する。本発明はさらに、ＩＣＡＭ−３およびＩＣＡＭ−３の機能的誘導体よりなる群から選択される分子に結合できる、抗体および特にモノクローナル抗体を提供する。本発明はさらに、上記のモノクローナル抗体を産生じ得るノゾブリドーマ細胞を提供する。本発明は、ＩＣＡＭ−３あるいはＩＣＡＭ−３の機能的誘導体に結合し得る、抗体を産生ずる所望のハイブリトーマ細胞を調製する方法を含む。この方法は、以下の工程を含む。（ａ）実質的に純粋なＩＣＡＭ−３、ＩＣＡＭ−３を発現する細胞、ＩＣＡＭ− ３を発現する膜、担体に結合したＩｃＡＭ−３、ＩＣＡＭ−３のペプチドフラグメント、あるいは担体に結合したＩＣＡＭ−３のペプチドフラグメントからなる群より選択される免疫原で、動物を免疫する工程、（ｂ）該免疫された動物から単離したひ臓細胞とミエローマ細胞株とを融合させる工程、（Ｃ）融合させたひ臓およびミエローマ細胞を抗体分泌／・イブリドーマ細胞にする工程、（ｄ）ハイブリトーマ細胞をスクリーニングして、抗ＩＣＡＭ−３抗体を産生し得る７９７１月・−マ細胞を見いだす工程。本発明はまた、ＩｃＡＭ−３が媒介する細胞の生物学的機能を調節する方法を提供する。この方法は、このような処置が必要な被検体に、効果的な量のＩＣＡＭ　３調節剤を提供する工程を包含する。ここて、このＩＣＡＭ−３調節剤は、ＩＣＡＭ−３に結合し得る抗体；該抗体のフラグメントてあって、ＩＣＡＭ−３に結合し得るフラグメント、Ｉ　ＣＡＭ−３：　Ｉ　ＣＡＭ−３の機能的誘導体；およびＩＣＡＭ−１、ＩｃＡＭ−２、あるいはＣＤ−１８フアミリーの分子以外の、ＩＣＡＭ−３の非免疫グロブリンアンタゴニストからなる群より選択される。本発明はさらに、ヒトおよび他の哺乳類における特異的炎症を処置する方法を提供する。この方法は、そのような処置が必要な被検体に、炎症を抑制するのに十分な量の抗炎症剤を提供することを含む。ここて、この抗炎症剤は、ＩＣＡＭ− ３に結合し得る抗体、該抗体のフラグメントてあって、ＩＣＡＭ−３に結合し得るフラグメント；実質的に純粋なＩ　ＣＡＭ−３；　ＩＣＡＭ−３の機能的誘導体、あるいはＩＣＡＭ−３の非免疫グロブリンアンタゴニストからなる群より選択される。ここで、該炎症は、固体臓器移植（例えば腎臓）、非固体臓器移植（例えば骨髄）、あるいは組織移植の結果である。本発明はまた、ヒトおよび他の哺乳類における非特異的炎症を処置する方法を提供する。この方法は、そのような処置が必要な被検体に、炎症を抑制するのに十分な量の抗炎症剤を提供することを含む。ここで、この抗炎症剤は、ＩＣＡＭ− ３に結合し得る抗体、該抗体のフラグメントであって、ＩＣＡＭ−３に結合し得るフラクメント、実質的に純粋なＩＣＡＭ−３；　ＩＣＡＭ−３の機能的誘導体、あるいはＩＣＡＭ−３の非免疫グロブリンアンタゴニストからなる群より選択される。本発明はさらに、炎症が以下の症状と関連している場合における、上記の炎症の処置方法を含む。つまり、症状は、成人呼吸逼迫症候群１敗血症、外傷、出血から派生する多発性臓器傷害症候群、心筋あるいは他の組織の再還流傷害、急性糸球体腎炎９反応性関節炎、急性炎症性成分を伴う皮膚病：急性化膿性髄膜炎あるいは発作のような他の中枢神経系炎症性疾患、＊１１傷害；血液透析。白血球除去面輸血、潰瘍性大腸炎、限局性回腸炎：壊死性全腸炎、顆粒性輸血関連症候群、およびサイトカイン誘導性毒性からなる群より選択される。本発明はまた、造血腫瘍細胞の転移を抑制する方法を含む。この細胞は、ＣＤ− １，８（特にＬＦＡ−１）のメンバーを移動のために利用する。この方法は、そのような処置が必要な患者に、転移を抑制するのに十分な量の薬剤を提供することを含む。ここで、この薬剤は、ＩＣＡＭ−３に結合し得る抗体、該抗体のトキノン結合物（ｄｅｒｊｖａｔｉｚａｔｉｏｎ）　；該抗体のフラグメントてあって、ＩＣ７八Ｍ−３に結合し得るフラクメント、該フラグメントのトキンン結合物、実質的に純粋なＩＣＡＭ−３；トキノン結合したＩＣＡＭ−３；　ＩＣＡＭ −３の機能的誘導体、ＩＣＡＭ−３の機能的誘導体のトキ・／ンー結合物、あるいはＣＤ−１８フアミリーの分子のメンバー以外の非免疫グロブリンアンタゴニストからなる群より選択される。本発明はまた、ＩＣＡＭ−３を発現する腫瘍細胞の増殖を抑制する方法を含む。この方法は、そのような処置が必要な患者に、増殖を抑制するのに十分な量の薬剤を提供することを含む。ここで、この薬剤は、ＩＣＡＭ−３に結合し得る抗体、該抗体のトキンン結合物、該抗体のフラグメントであって、ＩＣＡＭ−３に結合し得るフラグメント、該フラグメントのトキンン結合物、トキンンに固定化した、ＣＤ−１８フアミリーの分子のメンバー、あるいはトキシンに結合した、ＣＤ−１８フアミリーの分子のメンバーの機能的誘導体からなる群より選択される。本発明はまた、ＩＣＡＭ−３を発現する細胞の存在を検出する方法を提供する。この方法は、以下の工程を含む。（ａ）細胞あるいは細胞抽出物を核酸分子の存在下においてインキュベーショ〉する工程てあって、該核酸分子はＩＣＡＭ−３ＭＲＮＡにハイブリダイズしうる分子である、工程。（ｂ）核酸分子が、該細胞あるいは該細胞抽出物中に存在する相補的な核酸分子とハイブリダイズしているか否かを決定する工程。本発明はまた、生物学的な液体サンプル中のＩｃＡＭ−３の存在を検出する方法を提供する。この方法は、以下の工程を含む。（ａ）該サンプルをＩＣＡＭ−３に結合し得る抗体あるいはそのフラグメントとインキュベーションする工程、および（ｂ）該抗体が該サンプルに結合しているが否かを検出する工程。本発明はまた、以下を含む薬学的組成物を提供する：　（ａ）ＩＣＡＭ−３に結合し得る抗体、該抗体のフラグメントであって、ＩＣＡＭ−３に結合し得るフラグメント、実質的に純粋なＩＣＡＭ＝３　：　ＩＣＡＭ−３の機能的誘導体。あるいは、ＣＤ−１８フアミリーの分子のメンバー以外の、ＩＣＡＭ−３の非免疫グロブリンアンタゴニストからなる群より選択される薬剤および免疫抑制剤。図面の簡単な説明図１．精製したＬＦＡ−１に対する細胞系の接着精製したＬＦＡ−１への細胞系（Ａ）およびリンパ球（Ｂ）の接着は、ＩＣＡＭ−１、ＩＣＡＭ−２、およびＩＣＡＭ−３ｉ：起因する。ＬＦＡ−１、ＩＣＡＭ−１、ＩＣＡＭ−２、およびＩＣＡＭ−３に特異的なブロッキングＭＡｂの存在下での、ＬＦＡ−１被覆し二マイクロタイターウェル上のＢＣＥＣＦラベルした細胞の結合。コントロールウェルは、ＬＦＡ−１なしで被覆されている。（Ａ）リンパ芽球様細胞系を、飽和量のＭＡｂ　ＲＲＩ／１　（抗ＩＣＡＭ−１、ＭＡｂ　ＣＢ−ＩＣ２／１（抗ＩＣＡＭ−２）、ＭＡｂ　ＣＢＲ−ＩＣ３／１（抗ＩＣＡＭ−３）　、あるいは未結合のコントロールＭＡｂＸ６３（細い線）のいずれかで標識し、次にＦＩＴＣ−抗マウス免疫グロブリンで標識した。（Ｂ）休止ヒト白血球および３日ＰＨＡで活性化したリンパ球をＩＣＡＭ発現について分析した。図３．ＩＣＡＭ−３の免疫沈降（Ａ）Ｉ２Ｊ−標識した細胞溶解物を、未結合コントロールＸ６３あるいはＭ　Ａｂ　ＣＢ−ＩＣ３／１　（抗■ｃＡＭ−３）のいずれがと免疫沈降させた。（ＢＰ２５７−標識した５ＫＷ３細胞溶解物をＮ−グリヵナーゼ有（＋）あるいは無　（−）で処理し、未結合のコントロールＭＡｂ　Ｘ６３、ＭＡｂ　Ｗ６／３２　（抗ＨＬＡ　ＡＳＢ、Ｃ）　、ＭＡｂ　ＲＲＩ／１　（抗ＩＣＡＭ−１）、ＭＡｂ　ＣＢＲ−ＩＣ２／１（抗１ｃＡＭ−２）、あるＬ’ｌ；！ＭＡｂ　ＣＢ−ＩＣ３／１　（抗ＩＣＡＭ−３）と免疫沈降した。図４　由来の異なるＩＣＡＭ−３の免疫沈降Ｉ２５１標識したリンパ球および好中球の溶解物由来のＩＣＡＭ−３を、ｍＡｂ結合セファロースを用いて免疫沈降した。免疫沈降したＩＣＡＭ−３は、ポリアクリルアミドケル電気泳動により分離した。他の細胞表面分子を免疫沈降するのに、池のｍＡｂを用いた。ヒト１ｇセファロース（コントロールのレーン）　、ＣＢＲ−ＩＣ２／１　（ＩＣＡＭ　２）　、ＣＢＲ−ＩＣ３／１　（ＩＣＡＭ−３）　、ＴＳ２／４　（ＬＦＡ−１）　、ＬＭ２／１　（ＭＡＣ−１）。精製したＩＣＡＭ−１およびＩＣＡＭ−３へ５ＫＷ３細胞が結合する能力、ならびにこの結合に対するＰＭＡ刺激の影響を文献に記載のようにテストしたＣＤｕｓｔｉｎら、Ｎａｔｕｒｅ　３４１：６］９　（１９８９）＋　Ｍａｒｌｉｎら、Ｃｅ１ｌ　５１：８１３−８１９　（１９ｇ？））B １つの代表的な結果を示している。誤差を示す線は、標準偏差（ＳＤ）を示ＰＭＡｉ１１激した５ＫＷｌｌ胞が精製したＩＣＡＭ−１あるいはＩＣＡＭ−３に結合するのをブロックする能力について、文献に記載のようにして様々な抗体をテス］・シた（Ｄｕｓｔｉｎら、Ｎａｔｕｒｅ　３４１：６１９　（１９８９）：　Ｍａｒｌｉｎら、Ｃｅ１ｌ　５１：８］３−８１９　（１９８７））　、、１つの代表的な結果を示している。誤差を示す線は、標準偏差（ＳＤ　）を示している。図７．ＣＯ５形質導入体の精製したＩＣＡＭ’　ｓに対する結合文献に記載の様にして、ＣＯ８細胞をＬＦＡ−１発現ベクターでトランスフェクトした（ｄｅＦｏｕｇｅｒｏｌｌｅｓら、Ｊ、　Ｅｘｐ、　Ｍｅｄ、１７５：１８５−１９０　（１９９２））　。抗ＬＦＡ−１抗体（ＴＳＩ／２２）の存在下あるいは非存在下で、固定化したＩＣＡＭ−１およびＩＣＡＭ−３へ結合する能力について、トランスフェクトした細胞をテストした。１つの代表的な結果を示している。誤差を示す線は、ＳＤを示４℃、１６℃、２２℃、および３７℃にて、ＰＭＡ刺激した５ＫＷ３細胞の精製したＩＣＡＭ−１およびＩＣＡＭ−３への結合能力について、文献に記載の様にしてテストした（Ｍａｒｌｉｎら、Ｃｅ１ｌ　５１：８１３−８１９　（１９８７））　。アッセイは、ＬＦＡ−１ｍＡｂ　（ＴＳＩ／２２）の存在下あるいは非存在下で行なった。１つの代表的な結果を示している。誤差を示す線は、ＳＤを示している。図９．ＰＨＡ刺激したＴ細胞の分裂の抗体によるブロッキングＰＨＡ刺激したＴ細胞の分裂をブロックする能力について、文献に記載のようにして様々な抗体をテストした（Ｋｒｅｎｓｋｙら、Ｊ、　Ｉｍａ＋ｕｎｏ１．１３１：６１１−６１６　（１９８３））。図１０．混合リンパ球の反応に対する、抗ＩＣＡＭ抗体の影響混合リンパ球の反応をブロックする能力について、文献に記載の様にして、様々な抗体をテストした（Ｋｒｅｎｓｋｙら、Ｊ、　Ｉｍｍｕｎｏｌ、　１３１：６１１−６１６　（１９８３））。図１１．ＩＣＡＭ−３のペプチドフラグメントのガスクロマトグラフＩＣＡＭ− ３を精製して、ＬＶＳ−Ｃで消化した。ペプチドフラグメントを高性能液体クロマトグラフィーで分離した。図１２　クローン１１２の概略図クローン１１．２の略図。ＮＫ−１０およびＮＫ−１７ペプチドの位置、得られた様々なりＮＡ配列、および膜貫通領域が示されている。図１３．ＮＫ−１０−次配列とヒトＩＣＡＭ−１との配列比較ＮＫ−１０−次配列とヒトＩＣＡＭ−１タンパク質との配列のホモロジーを同定するために、ＧＡＰプログラムを用いた。図１４．ＲＭ１３−次配列とヒトＩＣＡＭ−１との配列比較ＲＭ　１３−ｉ＆配列とヒトＩＣＡＭ−１との配列のホモロジーを同定するために、ＧＡＰプログラムを用いた。図１５．ＲＭ１３−次配列とヒ目ＣＡＭ−２との配列比較ＲＭ１３−次配列とヒトＩＣＡＭ−２との配列のホモロジーを同定するために、ＧＡＰプログラムを用いた。図１６　Ｔ７−次配列とヒトＩＣＡＭ−１との配列比較Ｔ７−次配列とヒトＩＣＡＭ−１との配列のホモロジーを同定するために、ＧＡＰプログラムを用いた。図１７．Ｔ７−次配列とヒトＩＣＡＭ−２との配列比較Ｔ７−次配列とヒトＩＣＡＭ−２との配列のホモロン−を同定するために、ＧＡＰプログラムを用いた。図１８．ＩＣＡＭ−３の部分配列クローン１１２のＤＮＡ配列を常法により決定した。Ａ、ＩＣＡＭ−３の５°末端から得られた配列。これらの配列は、クローン１１．２をＴ７プライマーでプライムして得られた。Ｂ、ＩＣＡＭ−３遺伝子中から得られた配列。これらの配列は、クローン１１２をＮＫ−］Ｑプローブてプライムして得られた６、Ｃ，ＩＣＡＭ−３の３′末端から得られた配列。これらの配列は、クローン１１２を逆ＲＭ１３プライマーでプライムして得られた。好ましい態様の説明本発明は、先には同定されていなかったＬＦＡ−１の結合リガンドの発見に基づいている。細胞接着のプロセスに関与しているＣＤ−１８フアミリーなどの分子は、「接着分子」と呼ばれている。１、ＬＦＡ−１白血球接着分子ＬＦＡ−１は、免疫性および炎症における、広範囲のリンパ球、単球、ナチュラルキラー細胞、および顆粒球の他の細胞との相互作用を媒介する（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ、　ＴＡ、ら、＾ｎｎ、　Ｒｅｖ、Ｉｍｍｕｎｏｌ、　５＋２２３−２５２　（１９８７））。ＬＦＡ−１は、ＩＣＡＭ−１、ＩＣＡＭ−２、および新たに同定されたＩＣＡＭ −３（これは本明細書に開示されている）のレセプターである。これらの表面分子は、ある組織では構成的に発現されており、他の組織では炎症により誘導される（Ｍａｒｌｉｎ、　Ｓ、Ｄら、Ｃｅ１ｌ　５］：８１３−８１９　（］Ｑｇ？）　：　Ｄｕｓｔｉｎ、　ｌ１１．Ｌ、　ラ、ＪＩｍｍｕｎｏｌ、１３７：２４５−２５４　（１９８６）＋Ｄｕｓｔｉｎ、　Ｍ、１．、ら、ＩｍｍｕｎｏＬ　Ｔｏｄａｙ　９：２１３−２P５（１９８８）　＋　１９８７年、２月２６日に出願した、米国特許出願第０７１０１９゜４４０号、および１９８８年９月２８日に出願した、米国特許出願第０７／２５０．４４６号、両出願とも、本明細書において、参考として援用されている）抗原特異的および抗原非依存性Ｔ細胞傷害性、Ｔペルパー、ナチュラルキラー、顆粒球、および単球の他の細胞型に対する相互作用において、ＬＦＡ−１は機能する（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ、　ＴＡら、＾ｎｎ、　Ｒｅｖ、　Ｉｍｍｕｎｏｌ、　５：２２３−２５２　（１９８７）；Ｋｉｓｈｉｍｏｔｏ、　Ｔ、にら、＾ｄｖ、　Ｉｍｍｕｎｏｌ、　（１９８８、印刷中））。ＩＣＡＭ−１は、異なる細胞上において大きさが７６〜１１４ｋＤまで様々である、一本鎖糖タンパク質であり、５つのＣ様ドメインを有する１ｇスーパーファミリーのメンバーである（Ｄｕｓｔｉｎ、　Ｍ、Ｌら、Ｉｍｍｕｎｏｌ、　Ｔｏｄａｙ　９：２１３−２１５（１９８８）　：　５ｔａｕｎｔｏｎ、Ｄ、Ｅ　ら、Ｃｅ１ｌ　５２：９２５−９３３　（１９８ｇ）：Ｓｊｍｍｏｎｓ、Ｄ、ら、Ｎａｔｕｒｅ　３３１：６２４−６２７　（１９８８））。ＩＣＡＭ−１は、ＩＦＮ−ｇ、ＴＮＦ、および■Ｌ−１を含むサイトカインにより、広範囲の細胞型上に高度に誘導され得る（Ｄｕｓｔｉｎ、　Ｍ、Ｌら、Ｉｍｍｕｎｏｌ、　ＴｏｄａＹ　９：２１３−２１５　（１９８８）　）　。上皮細胞、内皮細胞、および繊維芽細胞上でＩＣＡＭ−１を誘導させることにより、リンパ球のＬＦＡ−１依存性液着が媒介される（Ｄｕｓｔｉｎ、　ＬＬら、Ｊ、　Ｉｍｍｕｎｏｌ、　１３７：２４５−２５４　（１９８６）　：　Ｄｕｓｔｉｎ、Ｍ、Ｌ　ら、Ｊ、　Ｃｅ１１．　Ｂｉｏｌ、１０７：３２１−３３１　（１９８８）＋　Ｄｕｓ狽奄氏B ｋｌ、Ｌら、Ｊ、　Ｅｘｐ、　Ｍｅｄ、　１６７：］３２３−１３４０　（１９８８））　。接着は、リンパ球をＬＦＡ−Ｉ　ＭＡｂで前処理すること、あるいは他の細胞をＩＣＡＭ−Ｉ　ＭＡｂで前処理することにより、ブロックされる（Ｄｕｓｔｉｎ、　Ｍ、Ｌ、ら、Ｊ、　Ｉｗｕｎｏｌ、　１３７：２４５−２５４　（１９８６）　；　Ｄｕｓｔｉｎ９Ｍ、Ｌ　ら、Ｊ、　Ｃｅ１１．　Ｂｉｏｌ、＋０７：３２１−３３１　（１９８８）：@Ｄｕｓｔｊｎ、　Ｍ、Ｌら、Ｊ、　Ｅｘｐ、　Ｍｅｄ、　１６７：１３２３−１３４０　（１９８８））　。人工膜中あるいはペトリ皿上の精製したＩＣＡＭ−１を用いた場合でも同様の結果かえられ、ＬＦＡ＝１およびＩＣＡＭ−１がお互いのレセプターであることが示されている（Ｍａｒａｉｎ、　Ｓ、Ｄら、Ｃｅ１ｌ　５］：８］３−８１９　（１９８７）　：　ＭａｋｇｏｂａｌＭ、Ｗ　ら、Ｎａｔｕｒｅ　３３１：８６|８８　（１９８８））。区別のために、これらはそれぞれ「レセプター」および「リガンド」と呼ばれている。ＩＣＡＭ−１については、米国特許出願第０７１０４５゜９６３号、第０７／１１５．７９８号、第０７／１５５．９４３号、第０７／１８９．８１５号あるいは第０７／１５５．４４６号にも記載されており、これらは参考として、全部が本明細書に援用されている。　ＩＩｌ、ＩＣＡＭ− ＩＣＡＭ−１とは別のＬＦＡ−１リガンドの存在が予セされていた（Ｒｏｔｈｌｅｉｎ、Ｉｌｌ　ら、Ｊ、Ｉ［Ｉｍｕｎｏｌ、１３７：１２７０−１２７４　（１！１１８６）：　Ｍａｋｇｏｂａ、Ｍ、Ｗ　ら、Ｅｕｒ、ＪAＩｍｍｕｎｏｌ、１８：６３７−６４０　（１９８ｇ）：　Ｄｕｓｔｉｎ、　ＬＬら、Ｊ、　Ｃｅ１１．　Ｂｊｏｌ、１０７：３２１−３３１（１９８８））。同定された第二のＬＦＡ−１リガンドは、ｒＩｃＡＭ−２Ｊと名付けられている。ＩＣＡＭ−２は、細胞分布の点て、およびサイトカイン誘導が欠如している点て、ＩＣＡＭ−１とは異なっている。ＩＣＡＭ−２は、２つのＩｇ様ドメインを有する不可欠な膜タンパク質てあり、一方、ＩＣＡＭ−１は、５つのＩｇ様ドメインを有する（Ｓｔａｕｎｔｏｎ、　Ｄ、Ｅら、Ｃｅ１ｌ　５２：９２５−９３３　（１９８８）：Ｓｉｍｍｏｎｓ。Ｄ、ら、Ｎａｔｕｒｅ　３３１：６２４−６２７　（１９８８））　。特に、ＩＣＡＭ−２は、Ｉ　ＣＡＭ−１の最もＮ末端側の２つのドメインに非常に関連しており（３４％同一）、この割合は、ＩＣＡＭ−１あるいはＩＣＡＭ−２が、（也の１ｇスーパーファミリーのメンバーに対するより大きい。このことから、同じインテグリンファミリーレセブターに結合するＩｇ様リガンドのサブファミリーであることがわかる。ＩＣＡＭ−２については、米国特許出願第０７／４５４．２９５号にも記載されており、これは参考として本明細書に援用されている。ＩＶ、ＩＣＡＭ−３本発明は、第三のＬＦＡ（リガントである、ｒＩＣＡＭ−３Ｊの発見に関する。ＩＣＡＭ−２に対するＭＡｂの開発により、先のＬＦＡ−１依存性、ＩＣＡＭ− １非依存性現象が分析され、そして、ＬＦＡ−１の第三のリガンドが存在することが示唆された。上皮細胞および内皮細胞などの数種類の細胞型の、精製されたＬＦＡ−１に対する結合は、ＩＣＡＭ−１およびＩＣＡＭ−２ＭＡｂの組合せにより完全にブロックされ得るが、一方、ＩＣＡＭ−１、ＩＣＡＭ−２非依存性のＬＦＡ−１に対する経路も、Ｔ細胞リンパ腫細胞系である５ＫＷ３を含む、多（のリンパ球様細胞系に存在する（図１）。この接着経路の特徴を調べるために、５ＫＷ３に対するＭＡｂを誘起し、抗Ｉ　ＣＡＭ−１および抗ＩＣＡＭ−２ＭＡｂと共に、この細胞系がＬＦＡ−１に結合するのを阻害する能力についてスクリーニングした。この新規な接着経路を完全に阻害する、１つのＭＡｂ、ＣＢＲ−ＩＣ３／１が選択された（図１）。５ＫＷ３の精製ＬＦＡ−１に対する接着は、ブロッキング側坑ＩＣＡＭ−１および抗ＩＣＡＭ−２ＭＡｂの組合せによりわずかに阻害されたのみであった。抗ＩＣＡＭ−３ＭＡｂ　ＣＢ、ＩＣ３／１のみを加えると、接着は十分阻害され、ブロッキング抗ＩＣＡＭ−２ＭＡｂとの組合せにより完全に阻害された。従って、５ＫＷ３の精製されたＬＦＡ−１への接着は、はとんどＩＣＡＭ−３が媒介しており、一部、ＩＣＡＭ−２が媒介していた。ＭＡｂ阻害のパターンが異なっていることから、ＬＦＡ−１への接着においては、４つの細胞系のそれぞれが、異なった割合でこれら３つのＩＣＡＭを用いていた。Ｂリンパ芽球様細胞系のＪＹの接着は、主にＩＣＡＭ−１経路によって起こり、わずかにＩＣＡＭ−２およびＩＣＡＭ−３経路による。他のＢリンパ芽球様細胞系のＳＬＡは、ＩＣＡＭ−１およびＩＣＡＭ−３の両方を用いていた。これは、接着がＩＣＡＭ−ＩＭＡｂあるいはＩＣＡＭ−３ＭＡｂのどちらか単独によっては阻害されず、両方のＭＡｂを共に用いたときにほぼ完全に阻害されたことによりわかった。胸腺腫細胞系、Ｊｕｒｋａｔは、ＩＣＡＭ−２およびＩＣＡＭ−３の接着経路の両方を用い、わずかにＩＣＡＭ−１に依っていた。休止Ｔリンパ球およびフィトヘマグルチニン（ＰＨＡ）で活性化されたＴリンパ球の接着もまた、調べられた（図ＩＢ）。休止リンパ球は、精製したＬＦＡ−１に強く結合することが文献に記載されており（Ｄｕｓｔｉｎら、Ｎａｔｕｒｅ　３４１：６１９−６２４　（１９８９））　、そしてこの結合はＩＣＡＭ−３に太き（依存していることがわかった。ＰＨＡによる活性化によって、ＩＣＡＭ−１発現が誘導され、モしてＬＦＡ−１に対する接着は、主にＩＣＡＭ−１によって起こり、部分的にＩＣＡＭ−３による。休止および活性化Ｔ細胞の両方における接着のＩＣＡＭ−２成分は検出てきる程度であったが、Ｉ　ＣＡＭ−１およびＩＣＡＭ−３の存在で遮蔽されていた。それぞれの細胞について、実質的な阻害を達成するには、少なくとも２つのＩＣＡＭに対するＭＡｂが必要であったため、ＩＣＡＭを用いるのに、非常な労力がかかる。これの注目すべき例外は、休止リンパ球のＬＦＡ−１に対する接着であり、この接着は、はとんどＩＣＡＭ−３が媒介していた。すべての場合において、３つのすべての抗ＩＣＡＭ−ＭＡｂの組合せで、抗ＬＦＡ−ＩＭＡｂの存在において見られるに匹敵するほどのレベルまで、ＬＦＡ−１への結合がなくなる。３つのＩＣＡＭのＬＦＡ−１に対する相対的親和性は、上記のようにして調べｔ：ＩＣＡＭ（７）ＬＦＡ−１への結合に対する寄与とイムノフルオレッセンスフローサイトメトリーによって測定したＩＣＡ、Ｍの細胞表面発現とを比較することによって調べた（図２）。ＩＣＡＭの表面発現とそのＬＦＡ−１接着に対する寄与との比較によって、ＩＣＡＭ−１がＬＦＡ−１に非常に親和性が高いこと、そしてｒｃＡＭ−２およびＩＣＡＭ−３が同程度で低い親和性を有していることがわかった。例えば、Ｊｕｒｋａｔ細胞は、ＩＣＡＭ−２およびＩＣＡＭ−３を同レベルで発現し、それぞれＬＦＡ−１への結合に寄与していた。ＩＣＡＭ−２発現がＩＣＡＭ−３より非常に大きいＪＹ細胞のような場合、ＬＦＡ−１接着のＩＣＡＭ−２経路は、ＩＣＡＭ−３より勝っていた。これに対して、ＳＬＡおよび５ＫＷ３は、ＩＣＡＭ−２の３〜５倍量のＩＣＡＭ−３を発現しており、そして当然のことながら、接着のＩＣＡＭ−３経路がＩＣＡＭ−２経路より勝っていた。休止１９２６球上ではＩＣＡＭ−３がよく発現しており、■ＣＡＭ−１はなく、ＬＦＡ−１への接着は主にＩＣＡＭ−３が媒介していた。ＩＣＡＭ−１がよく発現しているＳＬＡ、ＪＹ、およびＰＨＡ活性化Ｔ細胞のような場合、ＩＣＡＭ−１が接着の主な経路である。ＩＣＡＭ−３の分布のパターンは、ＩＣＡＭ−１およびＩＣＡＭ−２とはいくらか異なっていた。ＩＣＡＭ−１およびＩＣＡＭ−２と違って、ＩＣＡＭ−３は休止内皮細胞あるいは刺激された内皮細胞のいずれの上にも発現しなかった（データは示されていない）。このことは、細胞の休止内皮細胞あるいは刺激された内皮細胞の両方に対するＬＦＡ−１依存性結合がＩＣＡＭ−１およびＩＣＡＭ−２依存性の現象であるという発見と一致する。ＩＣＡＭ−３は、いくつかの例外はあるが、造血系に限定されており、リンパ様細胞系および単球様細胞系で高度に発現していた。しかしながら、すべての場合において、細胞系上のＩＣＡＭ−３の発現は、ＬＦＡ−１依存性で、ＩＣＡＭ−１、ＩＣＡＭ＝２非依存の接着経路と協同していた。専らＩＣＡＭ−１およびＩＣＡＭ−２によってＬＦＡ−１に結合する細胞系（ＨＵＶＥＣ，Ｒａｊｉ）ではＩＣＡＭ−３の発現は見られず、一方、この接着の第三の経路によって弱い結合を示す細胞系（ＪＹ、Ｕ９３７．５ｕｐＴ）は、これに一致してＩＣＡＭ−３の表面発現が低かった（データは示していない）。ＩＣＡＭ−３は、白血球上の発現の点で、ＩＣＡＭ−１およびＩＣＡＭ−２と大きく異なっていた（図２Ｂ）。ＩＣＡＭ−３は、休止しているリンパ球、単球および好中球上で高レベルに発現しており、一方ＩＣＡＭ−１およびＩＣＡＭ−２は、非常に低いかあるいは全（なかった。比較すると、ＩＣＡＭ−１およびＩＣＡＭ−２は、単球上てわずかに発現しており、そしてＩＣＡＭ−２のみが休止しているリンパ球上に存在していた。ＩＣＡＭ−１およびＩＣＡＭ−２は共に、好中球上で発現していなかった。リンパ球のＰＨＡによる活性化によって、ＩＣＡＭ−３の発現が２〜３倍増加し、ＩＣＡＭ−１発現も大きく誘導された（Ｄｕｓｔｊｎら、Ｊ、　Ｉｍｍｕｎｏｌ、　１３７：２４５−２５４　（１９８６））　（図２Ｂ）。様々な＋２５１標識された細胞系由来のＩＣＡＭ−３の免疫沈降物により、還元条件下て１２４．０００Ｍｒのンヤープなバンドで、非還元条件下ではわずかに移動度が増加するものが明らかとなった（図３Ａ）。Ｎ−グリカナーゼて処理すると、ＩＣＡＭ−３のバンドは、Ｍｒ８７，０００に減少し、ＩＣＡＭ−３がＩＣＡＭ−１およびＩＣＡＭ−２と同様に高度にグリコリル化されているタンパク質であることが示された（図３Ｂ）。ＩＣＡＭ−３の生物学的特徴、発現のパターン、および機能的性質から、ＩＣＡＭ−３は、これまての接着分子と区別される。これまての接着分子には、ヒトホーミングレセプターＬ、ＡＭ−１（Ｔｅｄｄｅｒら、Ｊ、　Ｔｍｍｕｎｏｌ、　１４４：５３２−５４０　（１９９０））、誘導性の内皮接着分子ＶＡＣ，ＡＭ−１（Ｒｉｃｅら、Ｊ、　Ｅｘｐ、Ｍｅｄ、１７１：１３６９−１３７４　（１９９０）＋　Ｃａｒｌｏｓら、Ｂｌｏｏｄ印刷中（１９９０）　＋　（Ｏｓｂｏｒｎら、Ｃｅ１ｌ　５９：１２０３−１２１１　（１９８９））　、およびマトリックスレセプターのＶＬＡファミリー（Ｄｅｌｌｅｒ、　Ｍ、Ｅ、、＾ｎｎ、　Ｒｅｖ、　Ｉｍｍｕｎｏｌ。８：３６５−４００　（１９９０））が含まれる。そして、第四の白血球ワークシ・ツブデータペース中に同様の細胞分布を示すＭＡｂは見いだされなかった（Ｇｉｌｋｓ、　ｆ、Ｒ。ら、Ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ　Ｔｙｐｉｎｇ　Ｄａｔａ　Ｂａ５ｅ　ＩＶ、　０ｘｆｏｒｄ　ＩＪｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　Ｐｒｅｓｓ、　０ｘｆｏ窒пA　Ｅｎｇｌａｎｄ　（１９９０））。３つのＬＦＡ−１リガントの存在から、ＬＦＡ−１依存性の白血球相互作用における異なる面に分化が示唆される。ＩＣＡＭ−１は、基本的に内皮細胞上、および多くの上皮線対する砲撃上で発現されており、そして、炎症および免疫性において強（誘導され、細胞の位置付けを制御し、そして特異的な抗原認識を促進している（ｆａｖｒｙｋら、Ｉｍｍｕｎｏｌ、　Ｒｅｖ、　１０８：１３５（６１（１９８９）　）。ＩＣＡＭ−２は、休止している内皮細胞上での優勢なＬＦＡ −１リガンドであることから、この接着の経路は、組織内皮細胞による通常のＬＦＡ−１を持つリンパ球の再循環に重要な影響をもたらし得る（Ｈａｍａｎｎら、Ｊ、　Ｉｍｍｕｎｏｌ　１４０：６９３−６９９　（１９８８）；Ｍａｃｋａｙら、Ｊ、　Ｅｘｐ、　Ｍｅｄ、１７１：８１０−８１７　（１９９０）：　Ｐａ１ｓら、Ｊ、Ｉｍｍｕ■ ｏｌ　１４０：１８５１−１８５３　（１９８８）　：および（Ｎｕｎｏｉら、Ｈｕｍ、　Ｐａｔｈ、　１９ニア５３−７５９　（１９８８j）。現在、ＩＣＡＭ−３の好中球上における機能は、不明のままである。なぜならば、ＬＦＡ−１の存在があるにもかかわらず、好中球の同型凝集は、主にＭａｃ −１依存性のようであるからである（Ａｎｄｅｒｓｏｎら、Ｊ、　Ｉｍａ＋ｕｎｏ１．１３７：１５−２７　（１９８６）；Ｐａｔａｒｒｏｙｏら、５ｃａｎｄ、　Ｊ、　Ｉ＋＋ｕｓｕｎｏｌ　２２：６１９−６３１　（１９８５））　、休止し■ Ｔリンパ球のＬＦＡ−１への接着が主にＩＣＡＭ−３によって起こるという発見と、ＩＣＡＭ−３が他のＬＦＡ−１リガンドに比べて、単球および休止リンパ球上でよく発現している事実とを組み合わせると、免疫応答の開始における重要な役割が示唆される。実際、Ｔ細胞の抗原提示細胞との接着には、ＬＦＡ−１＋　ＩＣＡＭ相互作用が必要である（Ｄｒａｎｓｆｉｅｌｄら、Ｉｍｍ、　Ｒｅｖ、　１１４：２９−４４（１９９０）：　Ｍａｋｇｏｂａら、Ｉｒｎｒａｕｎｏｌ、　ＴｏｄａＹ　ＩＯ：４１７−４２２　（１９８９））　。そして、特にＩＣＡＭ−１もＩＣＡＭ−２も発現していない休止１９２６球上においては、ＩＣＡＭ−３自体が役割を果たして得る。実際、同種および自己混合リンパ球反応における、ＩＣＡＭ　１以外のＬＦＡ−１リガンドの役割が提案されている（Ｂａｇｎａｓｃｏら、Ｃｅ１ｌ　Ｉｍｍｕｎｏｌ、　１２８：３６２−３６９　（１９９０））　、さらに、ＩＣＡＭ−３は、ＴとＢリンパ球との間の抗原特異的相互作用において重要であることが予想されている。ここで、これらの細胞のうちのいずれか一方は活性化されていない状態である。ＩＣＡＭ−３はまた、ＬＦＡ− １に依存するがＩＣＡＭ−１には依存しないＴ細胞による特定の標的の溶解に重要であり得る（Ｍａｋｇｏｂａら、Ｅｕｒ、Ｊ、Ｉｍｍｕｎｏｌ　１８：６３７ −６４０　（１９８８））。複数のＩＣＡＭの存在は、ＩＣＡＭあるいはＩＣＡＭアナログに対するＭＡｂによる臨床的な処置にとって、重要な意味を持つ。ＩＣＡＭ−ＩＭＡｂは、インビボにおいて、腎臓の（Ｃｏｓｉｍｉら、Ｊ、　Ｉｍｍｕｎｏｌ、　１４４：　４６０４−４６１２　（１９９０））および心臓の（Ｆｌａｖｉｎら、Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ、　Ｐｒｏｃ、　２３：５３３−５３４　（１９９１））同種移植を長期化させるのに効果がある。ＩＣＡＭ−３ＭＡｂは、異なる細胞型のサブセットのＬＦＡ−１依存性接着相互作用を阻害することから、インビボにおいて、異なるおよび重複した数の免疫応答を阻害する。Ｖ、ＩｃＡＭ−３のｃＤＮＡクローニングＩＣＡＭ−３遺伝子のクローン化には、種々の方法のうちのいずれもが用られ得る。このような方法の１つでは、ｃＤＮＡインサートのシャトルベクターライブラリー（ＩＣＡＭ−３発現細胞由来）について、ＩＣＡＭ−３遺伝子を含むインサートの存在を調べることを含む。このような分析は、細胞をこのベクターでトランスフェクトし、そして、ＩＣＡＭ −３発現をアッセイすることにより、行なわれ得る。ＩＣＡＭ−３ｃＤＮＡは、好ましくは、接着分子のりガントを同定するためのＡｒｕｆｆｏおよび５ｅｅｄの方法（Ｓｅｅｄ、　Ｂ、ら、Ｐｒｏｃ、　Ｎａｔｌ、Ａｃａｄ、　５ｃｉＵＳ＾８４・３３６５−３３６９　（１９８７））の改変法を用いて同定する。この方法では、ＩＣＡＭ−３を発現する細胞（ＳＬＡ、Ｊｕｒｋａｔ、あるいは５ＫＷ３リンパ芽球様細胞系など）から、ｃＤＮＡライブラリーを調製する。好ましくは、ｃＤＮＡライブラリーは、Ｔ細胞から調製される。このライブラリーは、通常はＩＣＡＭ−３を発現しない細胞（例えば、Ｃｏｓ細胞あるいはＨｅＬａ細胞など）をトランスフェクトするのに用いる。トランスフェクトした細胞を、あらかしめＬＦＡ−１あるいは抗ＩＣＡＭ−３抗体で被覆しておいたペトリ皿に入れる。ＩＣＡＭ−３をコードする配列を含み、その細胞表面上にリガンドを発現するトランスフェクト細胞は、ベトリ皿表面上のＬＦＡ−１あるいは抗ＩＣＡＭ−３抗体に接着する。未接着の細胞を洗い流して、次に接着細胞をベトリ皿がら除去し、培養する。組換えＩＣＡＭ−３発現細胞の配列を決定する。ベトリブレートの被覆にＬＦＡ−１が用いられた場合、ＩＣＡＭ−１あるいはＩＣＡＭ−２発現細胞の接着を予防するために、抗ＩＣＡＭ−１および抗ＩＣＡＭ −２特異的抗体をベトリ皿に加える。ＩＣＡＭ−１”あるいはＩＣＡＭ−２゛形質導入体のＬＦＡ−１被覆プラスチツクへの接着は、このように、ＲＲ１／１、抗ＩＣＡＭ−ＩＭＡｂおよびＣＢＲ−ＩＣ２／２、抗ＩＣＡＭ−２ＭＡｂのような抗体により阻害され得る。ＩＣＡＭ−３でトランスフェクトされた細胞のＬＦＡ−１被覆ベトリブレートへの結合は、ＥＤＴＡおよび抗ＬＦＡ−１ＭＡｂによって阻害されるが、抗ＩＣＡＭ−１あるいは抗ＩＣＡＭ−２ＭＡｂによっては阻害されない。従って、ＩＣＡＭ−１あるいはＩＣＡＭ−２を発現する細胞はベトリ皿に接着することができず、はとんど他の接着しない細胞と共に洗い流される。このことで、ＩＣＡＭ−３を発現する細胞は富化される。ＩＣＡＭ−３をコートする遺伝子配列を得るための他の方法も当該分野においてよく知られており、当業者は、所望の遺伝子を得るために、これらの方法をルーチンで用いる。ＩＣＡＭ−３をコートする遺伝子配列を得るためのこのような方法のうちの１つは、ｃＤＮＡライブラリーあるいは染色体ＤＮＡライブラリーをスクリーニングするために、オリゴヌクレオチドプローブを用いるというものである。この方法ては、ＩＣＡＭ−３タンパク質は、好ましくは当該分野で周知の免疫精製方法を用いて精製され、そして末端のアミノ酸配列を当該分野で知られている方法により決定する。あるいは、ＩＣＡＭ−３を、トリプシンあるいはＬの１つのアミノ酸配列を決定する。一旦部分的なアミノ酸配列が決定すると、その生物にとって好ましいコドンに基づいてオリゴヌクレオチドプローブを作成するか、すべての考えられるコドンの組合せに基づいた縮重プローブを作成するか、または、好ましいコドン、既知のＩＣＡＭ−１あるいはＩＣＡＭ−２ＤＮＡ配列とのホモロジー、およびコドン縮重、の組合せを用いて、プローブを作成する。このプローブを染色体ライブラリーあるいはｃＤＮＡライブラリーをスクリーニングするのに用い、プローブにハイブリダイスする配列を見いだす。上述のような、あるいはそれと類似の技術により、ヒトアルデヒドデヒドロゲナーゼの遺伝子（）ｌｓｕ、　Ｌ、Ｃら、Ｐｒｏｃ、　Ｎａｔｌ、八ｃａｄ、　Ｓｃｉ、　ｔｌｓ＾ｇ２：３７７１−３７７５（１９８５））　、フィブロネクチンの遺伝子（Ｓｕｚｕｋｉ、　Ｓ、ら、Ｅｕｒ、　Ｍｏ１．　Ｂｉｏｌ、　Ｏｒｇａｎ、　１４：２５１９−２５２４　（１９８５））　、ヒトニストロケンレセプター遺伝子（Ｗａｌｔｅｒ。Ｐら、Ｐｒｏｃ、　Ｎａｔｌ、　Ａｃａｄ、　Ｓｃｉ、　ＵＳＡ　８２ニア８８９−７８９３　（１９８５））　、および組織型プラスミノーケンアクチベーター（Ｐｅｎｎｉｃａ、　Ｄら、Ｎａｔｕｒｅ　３０１：２１４−２２１　（１９８３））のクローニングが成功した。さらに別のＩｃＡＭ−３遺伝子のクローニング法では、染色体ＤＮＡあるいはより好ましくはｃＤＮＡを、ＩＣＡＭ−３を発現する細胞からクローニングすることによって、発現ライブラリーを調製する。次にこのライブラリーを抗ＩＣＡＭ −３抗体に結合するタンパク質を発現し得るメツバーについてスクリーニングする。上記の方法のうちのいずれかによって得られたクローン化したＩＣＡＭ−３遺伝子は、発現ベクターに作動可能に結合させ、それを細菌、ある（Ｘは真核細胞にに導入し、ＩＣＡＭ−３タンパク質を産生じ得る。このような操作についての技術は、１ｌａｎｉａｔｉｓ、　Ｔ、ら、前出、に開示されており、当該技術分野においてよく知られている。ＩｃＡＭ−３遺伝子をクローン化するための、ＰＣＲを用いた方法ては、ＩＣＡＭ−３がＩＣＡＭ−１および／あるいはＩＣＡＭ−２とホモロン−があるという仮定がされる。ＩＣＡＭ−１とＩＣＡＭ−２との間で保存されている配列に基づいてできた縮重オリゴヌクレオチドを用いて、ポリメラーゼチェーンリアクンヨンによるｃＤＮＡあるいはｍＲＮＡの増幅を行なう。このｃＤＮＡあるいはｍＲＮＡは、ＩＣＡＭ−３タンパク質を発現することが知られている、５ＫＷ３あるいは扁桃のような細胞由来である（ｄｅＦｏｕｇｅｒｏｌｌｅｓら、Ｊ、　Ｅｘｐ、　Ｍｅｄ。７１７５・＋８５−１９０　（１９９２））。クローンを配列決定し、そしてＩＣＡＭ−１およびＩＣＡＭ−２とは異なるものを完全長のｃＤＮＡクローンを得るのに用いる。上述のいずれの方法でも、クローンが真正なものであるかどうかを、完全長のクローンを、例えばＣＯ８細胞中で発現させ、そしてＩＣＡＭ−３ｍＡｂとの反応性を調べることによって、確認した。本発明は、さらに、ＩＣＡＭ−３、その「機能的な誘導体」、その「アゴニスト」、および「アンタゴニスト」を目的とする。Ａ、ＩＣＡＭ−３の機能的誘導体ＩＣＡＭ−３の「機能的誘導体」とは、ＩＣＡＭ−３の生物学的活性と実質的に同様の生物学的活性（機能的あるいは構造的のどちらでも）を有する化合物である。用語「機能的誘導体」には、もとのＩＣＡＭ−３分子の「フラグメント」、「変異体」、および「化学的誘導体」が含まれる。ＩＣＡＭ−３の「フラグメント」とは、この分子のいずれかのポリペプチドのサブセ、トを言う。ＩＣＡＭ−３活性を持ち、可溶性（すなわち、膜に結合しない）であるＩＣＡＭ−３のフラグメントが、特に好ましい。可溶性のフラグメントは、好ましくは、もどの分子の膜に広がる領域を欠損させることによって、あるいは疎水性アミノ酸残基のかわりに親水性アミノ酸残基で置換するか欠損させることによって、作成される。このような残基の同定は、当該分野でよく知られている。ドメイン１（ＤＩ）、ＤＩおよびＤ２、Ｄｌ−３、Ｄｌ−４、およびＤｌ−５のような完全なＩｇ様トドメインいくつかを含むフラグメントが好ましい。ＩＣＡＭ−３の「変異体」とは、完全な分子あるいはそのフラグメントのいずれかと実質的に同様な構造および機能を有する分子を言う。ある分子が、他の分子と「実質的に同様である」のは、両方の分子が実質的に同様の構造を有しているかあるいは両方の分子が同様の生物学的活性を有している場合である。従って、２つの分子が同様の活性を有しているとすれば、それらは本明細書ていう変異体であると考えられる。これは一方の分子が他方の分子には見いだせない構造を有している場合、あるいはアミノ酸残基の配列が同一でない場合にも言える。本発明では、ある分子が、他の分子の「化学的誘導体」であるのは、天然の分子には通常ないような付加的な化学的成分を含んでいる場合である。このような成分は、分子の溶解度、吸収、生物学的半減期などを改善するものであり得る。これらの成分は、あるいは分子の毒性を減するものか、または分子のなんらかの望ましくない副作用をなくすかあるいは弱めるものであり得る。このような効果を媒介し得る成分は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’　ｓ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　５ｃｉｅｎｃｅｓ　（１９８０）に開示されている。「トキ／ンに結合した」分子は、特別なりラスの「化学的誘導体」を構成する。「トキ／ンに結合した」分子は、トキシン成分と共有結合した分子（ＩＣＡＭ− ３あるいは抗ＩＣＡＭ−３抗体など）である。このような成分を分子に結合させる方法は、当該分野でよく知られている。このような分子の細胞への結合によって、）・キノン成分が細胞の非常に近（に送達され、これにより細胞の死滅を促進する。すべての適当なトキシン成分を用い得る。しかし、例えば、す／ントキノン、コレラトキシン、シフテリアトキノン、ラノオアイソトープトキンン、あるいは膜チャンネル形成トキノンが好ましく用いられる。約１００残基までのＩＣＡＭ−３の機能的誘導体は、インビトロ合成で都合よく調製され得る。所望であれば、このようなフラグメントは、当該分野で公知の方法を用いて、改変され得る。改変は、精製したあるいは粗製のタンパク質の標的のアミノ酸残基と、特定の側鎖あるいは末端残基と反応し得る有機誘導剤とを反応させることてなされる。得られた共有結合誘導体は、生物学的活性に重要な残基を同定するのに用いられ得る。ＩＣＡＭ−３のフラグメントを作り、そして単離するために、多くの方法が用いられ得る。−二官能基性剤との結合を用いて、ＩＣＡＭ−３を水に不溶性の支持マトリックスに架橋させることができる。あるいは、臭化ン了ンで活性化した炭化水素のような反応性の水に不溶なマトリックス、および米国特許第３゜９６９．２８７号、第３．６９１．０１．６号：第４．１９５．１２８号、第４２４７．６４２号：第４．２２９．５３７号：および第４，３３０．４４０号に記載の反応性基質をタンパク質固定化のために用いる。改変したアミノ酸配列を有するＩＣＡＭ−３の機能的誘導体もまた、ＩＣＡＭ− ３をコードするＤＮＡを変異させることによって、調製され得る。このような機能的誘導体には、例えば、ＩＣＡＭ−３のアミノ酸配列中の残基から欠損させたり、残基を挿入したり、あるいは置換したりしたものを含む。最終的な構築物が所望の活性を有しているかぎり、欠損、挿入、および置換のいずれの組合せも、最終的な構築物を作るのに用いることができる。明らかなことであるが、機能的誘導体をコードするＤＮＡの変異は、リーディングフレームの外の配列に配置されるべきではなく、そして好ましくは、ｍＲＮＡの二次構造を作るような相補的な領域を作成しない（ＥＰ特許出願公開第７５．４４４号を参照のこと）。遺伝子レベルでは、機能的誘導体は、ＩＣＡＭ−３をコードするＤＮＡの部位特異的変異導入、そしてそれによる機能的誘導体をコードするＤＮＡの作成、およびその後の組換え細胞培養物中におけるＤＮＡの発現によって調製され得る。　アミノ酸配列中で変異を導入する部位はあらかじめ決めておくが、変異自体はあらかじめ決めておく必要はない。例えば、決められた位置での変異を適性に行なうために、リンカースキャンニング変異導入などのようなランダムな変異導入を標的のコドンあるいは標的の領域に行ない、多くの誘導体を作り得る。次にこの誘導体を発現させ、そして所望の活性の適当な組合せをスクリーニングする。既知のＤＮＡ配列中で、決められた部位で変異をつくる技術はよく知られており、例えば、部位特異的変異導入がある。本明細書でのＩＣＡＭ−３の機能的誘導体の調製は、好ましくは、ＩＣＡＭ−３あるいは先に調製したＩＣＡＭ−３の機能的誘導体をコートするＤＮＡの部位特異的変異導入によってなされる。このような部位特異的変異導入の技術は、当該分野でよく知られており、Ｍａｎｉａｔｉｓ、　Ｔ、ら；　Ｍｏ１ｅｃｕｌａｒ　Ｃｌｏｎｉｎｇ、　ａＬａｂｏｒａｔｏｒｙ　Ｍａｎｕａｌ、　Ｃｏｌｄｓｐｒｉｎｇ　Ｈａｒｂｏｒ、　ＮＹ　（１９８２）のような刊行物に述べられており、その開示は、参考として本明細書に援用されている。部位特異的変異導入では、所望の変異のＤＮＡ配列をコードする特異的なオリゴヌクレオチド配列を用いることによって、ＩＣＡＭ−３の機能的誘導体を作ることができる。部位特異的変異導入を用いて、アミノ酸の欠損、挿入、あるいは置換を行なうことができる。アミノ酸配列の欠損は、一般的には、約１から３０個の残基てあり、より好ましくは、１から１０個の残基てあり、典型的には、それぞれ隣接している。最も好ましい欠損は、ＩＣＡＭ−３の可溶性型を作るために行なわれるものである。ＩＣＡＭ−３の可溶性型は、最も好ましくは、Ｉ　ＣＡＭ−３の膜に広がる領域かあるいはＩＣＡＭ−３中の疎水性の領域のいずれかを大損させることによって作られる。アミノ酸の挿入には、】ＣＡＭ−３コ一ド配列中の１個あるいは複数のアミノ酸残基を挿入すること、および実質的に制限のない長さのポリペプチドと末端で融合させることを含む。配列内への挿入（例えば、完全なＩＣＡＭ−３分子配列内への挿入）は、一般的には約１から１０個の残基の範囲であり得、よ−〕好ましくは、１個から５個の残基てあり得る。末端への挿入の例には、宿主細胞に対して異種あるいは同種の１つの配列を、分子のＮ末端に融合して、組換え宿主からの誘導体の分泌を促進させることが含まれる。機能的誘導体の第三のグループは、ＩＣＡＭ−３分子の１以上のアミノ酸残基が除去されており、そしてその場所に異なる残基が挿入されているものである。このような置換体は、好ましくは、ＩＣＡＭ−３分子の性質を微妙に調節するのが所望の場合、以下の表に従って作られる。（以下余白）機能的あるいは免疫学的性質の実質的な変化は、表１に記載のものより保存性の低い置換を選択することによってなされる。すなわち、（ａ）置換の領域のポリペプチドの骨格構造、例えば、ノートあるいはヘリックスコンフォメーノヨン、（ｂ）標的部位における分子の電荷あるいは疎水性、あるいは（Ｃ）側鎖の部分の保持に大きく異なった影響を与える残基を選択することによってなされる。一般的により保存性の低い置換とは、（ａ）グリシジおよび／あるいはプロリンを他のアミノ酸て置き換えるか、欠損、あるいは挿入させる。（ｂ）親水性残基を疎水性残基に置き換える：　（Ｃ）ンスティン残基を他のいずれかの残基の代わりに置き換えるかあるいはノスティン残基の代わりに他の残基をｆｆｉ＜　；　（ｄ）電気陽性の側鎖を有する残基を電気陰性の電荷を有する残基の代わりに置き換えるかあるいは電気陽性の側鎖を有する残基の代わりに電気陰性の電荷を有する残基を置（９または（ｅ）大きな側鎖を有する残基をそのような側鎖を持たない残基の代わりに置き換えるがあるいは大きな側鎖を有する残基の代わりに、そのような側鎖を持たない残基を置く、ことを言う。最も好ましいのは、ＩＣＡＭ−３の溶解度に影響を与える置換である。このようなことは、疎水性アミノ酸の代わりに親水性アミノ酸残基を置くことによってなされる。ＩＣＡＭ−３の親和性を増加させるように設計した変異体は、ＩＣＡＭ−１あるいはＩＣＡＭ−２と類似の位置に存在するアミノ酸を導入することにより作られ得る。同様に、ＩＣＡＭ−１あるいはＩＣＡＭ−２と類似の位置でＮ−結合ＣＨＯを欠く変異ＩＣＡＭ−３分子を調製し得る。特定の置換、欠損、あるいは挿入がＩＣＡＭ−３の生物学的活性にどう影響するかを、実際にやる前に正確に予測することは難しい。しかし、当業者には、そのような影響をルーチンのスクリーニングアッセイで評価できることは、明白である。例えば、誘導体は、典型的には、天然のＩＣＡＭ−３分子をコードするＤＮＡのリンカースキャンニング部位特異的変異導入により作られる。次にこの誘導体を組換え宿主中て発現させ、そして、随意、例えばイムノアフィニティークロマトグラフィーにより、細胞培養物から精製する。次に、細胞溶解物あるいは精製した誘導体の活性を適当なスクリーニングアッセイてスクリーニングして、所望の性質を有しているものを選ぶ。例えば、特定の抗体に対する親和性のような、機能的誘導体の免疫学的性質は、競合型イムノアッセイによって測定される。免疫調整活性の変化は、適当なアッセイにより測定する。酸化還元的あるいは熱的安定性、生物学的半減期、疎水性、タンパク質分解性消化への感受性、または担体との、あるいは多量体への凝集傾向などのタンパク質の性質の改変は、当業者によく知られている方法により、アッセイされる。Ｂ、ＩＣＡＭ−３のアゴニストおよびアンタゴニストＩＣＡＭ−３の「アゴニストとは、ＩＣＡＭ−３のいずれかの生物学的機能の発揮能力を増強あるいは増加する化合物をいう。このようなアゴニストの例はＩＣＡＭ−３の細胞レセプターへの結合能力を増加するものである。ＩＣＡＭ−３の「アンタゴニスト」とは、ＩＣＡＭ−３のいずれかの生物学的機能の発揮能力を減少あるいは妨げる化合物をいう。このようなアンタゴニストの例にはＩＣＡＭ−１およびＩＣＡＭ−２、ＩＣＡＭ−１およびＩＣＡＭ−２の機能的誘導体、抗ＩＣＡＭ−３抗体、抗ＬＦＡ−１抗体などが含まれる。細胞凝集アッセイについては、米国特許出願第０７１０４５．９６３号：０７゜１１５．７９８号＋０７／１５５．９４３号；０７／１８９．８１５号あるいは０７／２５０．４４６号に記載があり、これらのすべては、本明細書に参考として援用されている。このようなアッセイにより、ＬＦＡ−１依存性凝集の測定ができ、従って、ＩＣＡＭ−３／ＬＦＡ、−１凝集の程度に影響を与える薬剤を同定するのに用いられ得る。このように、このアッセイは、ＩＣＡＭ−３のアゴニストおよびアンタゴニストを同定するのに用いられ得る。アンタゴニストは、Ｌ　Ｆ　Ａ−］あるいはＩＣＡＭ−３の凝集媒介の能力を損なわせる作用をし得る　さらに、非免疫クロプリン（すなわち化学的）薬剤を、上記の了・セイを用いて調べて、ＩＣＡＭ−３／ＬＦＡ−１媒介凝集のアゴニストであるかアンタゴニストであるかを決定し得る。このような凝集アッセイは、典型的には、Ｐ　ＨＡで刺激された末梢Ｔ細胞を用いて行なう。従って、末梢血の１、　Ｆ　Ａ　−１に対する結合は、ＩＣＡＭ−３媒介凝集をアッセイするのに用いる。Ｃ抗ＩＣＡｋｊ−３抗体本発明の好ましい免疫クロブリノアンタコニストは、本明細書に開示されている、ＣＢＲ−ＩＣ３／１などのＩＣＡＭ−３に対する抗体である。他の適当な抗ＩＣＡＭ−３抗体も様々な方法で得ることができる。ＩＣＡＭ−３（あるいはＩＣＡＭ−３の機能的誘導体）に対する抗体は、ポリクローナルあるいはモノクローナルのどちらがであり得る。さらに、本出願の抗体は、当該分野で知られている方法、あるいは１９９１年４月２２日米国受理官庁に出願されたＰＣＴ出願第ＰＣＴ／ＵＳ９１１０２９４２号および第ＰＣＴ／ＵＳ　９１１０２９４６号に開示されている方法により、ヒト化され得る。抗ＩＣＡＭ−３抗体は、ＩＣＡＭ−３あるいはそのペプチドフラグメントを適当な動物に導入することにより作成され得る。免疫された動物は、これに対してポリクローナル抗体を産生ずる。ＩＣＡＭ−３のペプチドフラグメントを用いると、動物を免疫するのに用いたそのペプチドフラグメント中に含まれるエピトープ（単数あるいは複数）とのみ反応する、領域に特異的な抗体を得ることができる。あるいは、抗ＩＣＡＭ−３抗体は、リンパ球の表面上で天然に発現しているＩＣＡＭ−３を用いて作り得る。このような細胞を、腹腔内注入などで適当な動物に導入すると、ＩＣＡＭ−３あるいはＣＤ−１８フアミリ一分子に結合し得る抗体が産生される。所望であれば、このような動物の血清を取出し、これらの分子に結合し得るポリクローナル抗体の原料として用いることができる。あるいは、抗ＩＣＡｈｉ−３抗体は、５ｅｌｄｅｎ、　Ｒ，Ｆ、　（欧州特許出願公開第２８９．０３４号）あるいは５ｅｌｄｅｎ、　Ｒ，Ｆら、（Ｓｃｉｅｎｃｅ　２３６：７］４−７１８　（１９８７））の方法を使って生産し得る。詳細には、適当な動物（例えばマウス）の細胞を、完全なＩＣＡＭ−３分子、あるいはそのフラグメントを発現し得るヘクターてトランスフェクトする。その動物のトランスフェクトされた細胞中のＩＣへＮ１−３産生により動物内で免疫反応が誘起され、その動物によって抗ＩＣＡ〜１−３抗体が産生される。しかし、上記のいずれかの方法で免疫し７た動物から、ひ臓細胞を取出し、ＩＣＡＭ−３に結合し得るモノクローナル抗体を作るのが好ましい。 −上記の様にして得られたハイブリドーマ細胞を様々な方法でスクリーニングし、ＩｃＡＭ−３に結合し得る抗体を分泌するバイブリドーマ細胞を同定する。好ましいスクリーニングアッセイでは、このような分子は、ＩｃＡＭ−３を発珊腰　ＩＣＡＭ−１およびＩＣＡＭ−２を発現しない細胞のり集を阻害する能ブ７により同定される。このような凝集を阻害し得る抗体をさらにスクリーニングして、ＩＣＡＭ−３に結合することによってこのような凝集を阻害するのが、あるいはＣＤ−１８フアミリ一分子のメンバーに結合することによってこのような凝集を阻害するのかを決定する。このようなスクリーニングにおいては、ＩＣＡＭ −３を他のＣＤ−１８フアミリーから区別し得るどんな方法も用いられ得る。従って、例えば、抗体に結合し得る抗原を免疫沈降およびポリアクリルアミドケル電気泳動により、分析し得る。これらの抗体を、ＣＤ−１８フアミリーの分子に結合する抗体とＩＣＡＭ−３に結合する抗体とに区別することは、抗体のＬＦＡ −１発現細胞に結合してＩＣＡＭ−３発現細胞に結合しない能力（あるいはその逆）をスクリーニングすることによって、可能である。ＬＦＡ−１発現細胞に結合するがＩＣＡＭ−３発現細胞に結合しない抗体の能力は、当業者によく用いられている方法により検出され得る。このような方法には、イムノアッセイ（特に、免疫蛍光を用いるアッセイ）、細胞凝集、フィルター結合研究、抗体沈降法等が含まねる。好ましい方法では、抗体は、ＩＣＡＭ−３を発現する細胞に結合し、ＩＣＡＭ− ３を発現しない細胞には結合しない能力のものが選択される。上記のＩＣＡＭ−３のアゴニストおよびアンタゴニストに加えて、本発明において、炎症、ＨＩＶ感染、喘ｐ、などの治療に用いられ得る池の薬剤には、抗ＩＣＡＭ−３抗体に対する抗イデオタイプ抗体、およびレセプター分子、あるいはＩＣＡＭ−３に結合し得るそのような分子のフラグメントが含まれる。本発明の抗イデオタイプ抗体は、ＩＣＡＭ−３との競合において（あるいは除外して）結合し得る。このような抗体は、例えば、抗ＩＣＡＭ−３抗体に対する抗体を誘起し、次にＩＣＡＭ−３の天然のりガントのうちの１つに結合する能力についてスクリーニングすることにより得られ得る。ＣＤ−１８フアミリーの分子は、ＩＣＡＭ−３に結合することができるので、このような分子（例えば、アルファおよびベータサブユニットの両方を有するヘテロダイマー、またはアルファあるいはベータサブユニットのみからなる分子、または両方あるいは一方のサブユニットのフラグメントを有する分子など）を投与することによって、細胞上に存在するＩＣＡＭ−３に対する結合において、他の細胞と競合することになる。本発明の抗ν集抗体は、様々な方法で同定され、モして力価を測定し得る。例えば、抗体が、ＩＣＡＭ−３発現細胞（例えばＴ細胞など）に結合して、ＩＣＡＭ−３を発現しない細胞には結合しないような能力を測定し得る。細胞凝集の適当なアッセイは、米国特許出願第０７１０４５．９６３号、第０７／１１５．７９８号：第０７／１１５，９４３号；第ｏ７／１８９．８１５号；あるいは、第０７／２５０．４４６号に記載されており、そのすべては、本明細書に参考として援用されている。あるいは、抗体のＩＣＡＭ−３あるいはＩＣＡＭ−３のベプチトフラクメントに結合する能力が測定され得る。当業者には明らかなように、上記のアッセイは、様々な可能性のあるスクリーニングアッセイを提供するために、改変でき、あるいは異なる順序で行なうことができる。これらのアッセイは、それぞれ、ＩＣＡＭ−３に結合できる抗体とＣＤ−１８フアミリーのメンバーの分子と結合できる抗体とを同定および区別できるものである。Ｄ　本発明の薬剤の調製本発明の薬剤は、天然のプロセス（例えば、動物、植物、真菌類、細菌などをＩＣＡＭ−３の非免疫グロブリンアンタゴニストを産生するように誘導する二と、あるいは、動物をＩｃＡＭ−３に結合し得るポリクローナル抗体を産生ずるように誘導すること）９合成法（例えば、ＩＣＡＭ−３、ＩＣＡＭ−３の機能的誘導体、あるいはＩＣＡＭ−３のタンパク質アンタゴニスト（免疫グロブリンあるいは非免疫クロプリンのいずれか）を合成すること）、ハイブリドーマ技術（例えば、ＩＣＡＭ−３に結合し得るモノクローナル抗体を作成すること）、あるいは組換え技術（例えば、本発明の薬剤を様々な宿主（すなわち、酔母、細菌、真菌類、培養した哺乳類細胞など）中で、組換えプラスミドあるいはウイルスヘクターを用いて本発明の薬剤を作ること）によって得られ得る。どの方法を用いるかの選択は、便利さ、所望の収量などの要因による。しかし、特定の抗炎症剤を作るために、上記の方法、プロセス、あるいは技術のうち、１つのみを用いる必要はなく、上記の方法、プロセス、あるいは技術は、特定の薬剤を得る際に組み合わせることがてきる。本発明の薬剤は、ＩＣＡＭ−３により媒介される様々な生物学的活性を調節するのに用いられ得る。、へ　炎症の抑制本発明の１つは、ＩＣＡＩＶ１３およびその機能的誘導体の、ＣＤ−１８ファミ１１−の分子、持にＬ　Ｆ　Ａ　−１、に結合する能力に由来する。ＩＣＡＭ− ３は、ＣＤ−１８フアミリーの糖タンパク質のメンバーと相互作用することができるために、た症を抑制〈すなわち、予防するあるいは弱める）するのに用い得る。本明細書の用語「炎症」とは、特異的防１１１／ステムの反応および非特異的防御、ステムの反応の両方を含む。本明細書の用語「特異的防御システム」は、特異的抗原の存在に反応する免疫システムの構成要素のことを言う。炎症は、特異的防御システムの反応が原因の場合、それに媒介されている場合、あるいはそれに関連している場合に、特異的防御システムに応答した結果であると言われる。特異的防御システムの応答の結果の炎症の例には、風疹ウィルスのような抗原に対する応答、自己免疫疾患、およびＴ細胞によって媒介される遅延型過敏症反応が含まれる（例えば、マント−Ｑｌａｎｔａｕｘ）テストて「陽性」の個体に見られる）。慢性炎症疾患および固体移植組織および腎臓などの臓器、ならびに骨髄移植の拒絶もまた、特異的防御システムの炎症反応の例である。本発明の用語「非特異的防御システム」の反応とは、免疫記憶ができない白血球によって媒介される反応をいう。このような細胞には、顆粒球およびマクロファ〜ノが含まれる。本明細書ては、炎症は、非特異的防御システムの反応が原因の場合、それに媒介されている場合、あるいはそれに関連している場合に、非特異的防御システムに応答した結果であると言われる。少なくとも一部が非特異的防御システムの反応によって起こる炎症の例には、以下の症状に関連する炎症が含まれる。すなわち、成人呼吸逼迫症候群（ＡＲＤＳ）あるいは敗血症、外傷、出血から派生する多発性臓器傷害症候群、心筋あるいは他の組織の再還流傷害、急性糸球体腎炎１反応性関節炎、急性炎症性成分を伴う皮膚病、急性化膿性髄膜炎あるいは発作のような他の中枢神経系炎症性疾患、熱傷害：血液透析、白血球除去面輸血、潰瘍性大腸炎、限局性回腸炎；壊死性全腸炎、顆粒性輸血関連症候群、およびサイトカイン誘導性毒性などである。上述した通り、ＩＣＡＭ−３分子のＣＤ−１８フアミリ一分子のメンバーへの結合は、細胞接着にとって中心的な重要性を持つ。接着のプロセスを通して、白血球は、動物において外来抗原の存在を継続的にモニターすることができる。これらのプロセスは、通常は望ましいものであるが、固体臓器移植の拒絶（例えば腎臓）、非固体臓器移植の拒絶（例えば骨髄）組織移植拒絶および他の自己免疫疾患の原因ともなる。従って、細胞接着を弱めるかあるいは阻害することができるいずれの方法も、固体臓器移植のレンピエント（特に腎臓移植）、非固体臓器移植のし／ピエント（特に骨髄移植）組織移植レノピエントあるいは自己免疫疾患患者にとって、非常に望まれている。ＣＤ−１８フアミリーのメンバーに対するモノクローナル抗体は、白血球の接着依存性機能の多くを阻害する。この機能には、内皮細胞への接着（ｌｌａｓｋａｒｄ、　Ｄら、Ｊ、Ｉｍｍｕｎｏｌ、　１３７：２９０１−２９０６　（１９８６））　、同型の接着（Ｒｏｔｈｌｅｉｎ、　Ｒ。ら、Ｊ、　Ｅｘｐ、　Ｍｅｄ、　１６３：１１３２−１１４９　（１９８６））　、白血球の抗原およびマイトジェノ誘導性増殖（Ｄａｖｉｇｎｏｎ、　Ｄら、Ｐｒｏｃ、　Ｎａｔｌ、　Ａｃａｄ、　Ｓｃｉ、、　ＵＳＡ　７８：４５３５− ４５３９（１９８］、））、抗体形成（Ｆｉｓｃｈｅｒ、＾ら、Ｊ、　Ｉｍｍｕｎｏｌ、　１３６：３１９８−３２０３　（１９８６））、ならびに、例えば細胞傷害性Ｔ細胞（Ｋｒｅｎｓｋｙ、＾」、ら、Ｊ、　Ｉｍｍｕｎｏｌ、　１３２：２１８０−２１８２　（１９８４））　、マクロファージ（Ｓｔｒａｓｓｍａｎ、　Ｇら、Ｊ、　Ｉｍｍｕｎｏｌ、　１３６：４３２ｇ−４３３３（１９８６））　、および抗体依存性細胞傷害性反応に関与するすべての細胞（Ｋｏｈｌ、　Ｓら、Ｊ、　１ｗｕｎｏ１．１３３：２９７２−２９７８　（１９８４））の溶解活性のようなすべての白血球のエフェクター機能が含まれる。上記のすべての機能において、抗体は、白血球が適当な細胞基質に接着する能力を阻害し、そのことによって、結合に関連する生物学的機能を阻害する。このような機能は、ＩＣＡＭ−３／ＬＦＡ−１相互作用が関与する限り、抗ＩＣＡＭ−３抗体によって抑制され得る。従って、ＩＣＡＭ−３に結合し得るモノクローナル抗体を哺乳類の検体で抗炎症剤として用い得る。重要なことには、このような抗炎症剤は、一般的な抗炎症剤とは、接着を選択的に阻害し得る点、および従来の薬剤で見られた腎毒性などの他の副作用がない点て異なる。このようなＩＣＡＭ−３、特に可溶性型は、ＣＤ−１８フアミリーのメンバーに対する抗体と同様にして作用し得るので、炎症を抑制するのに用いられ得る。さらに、ＩＣＡＭ−３の機能的誘導体およびアンタゴニストもまた、炎症を抑制するのに用いられ得る。１　遅延型過敏反応のサプレッサーＩＣＡＭ−３は、部分的には、遅延型過敏反応のような炎症反応を起こすのに必要な接着事象を媒介する。従って、ＩＣＡＭ−３に結合し得る抗体（特にモノクローナル抗体）は、このような反応を弱めたりあるいは排除したりする治療上の可能性を有している。あるいは、ＩＣＡＭ−３は、ＩＣＡ、Ｍ−１／ＬＦＡ−１相互作用のアンタゴニストであることから、ＩＣＡＭ−３（特に可溶性型）、あるいはその機能的誘導体は、遅延型過敏反応を抑制するのに用い得る。これらの可能性のある治療上の使用は、２つの様式のいずれかで利用され得る。第一には、抗ＩＣＡＭ−３抗体を含む組成物あるいはＩＣＡＭ−３の可溶性誘導体を、遅延型過敏反応を経験したことのある患者に投与し得る。例えば、このような組成物は、毒ヅタ、毒カン、などのような抗原に接触した個体に提供し得る。他の態様においては、ＩＣＡＭ−３に結合し得るモノクローナル抗体を、患者に抗原と共に投与する。これは、次に起こる炎症反応を妨げるためである。このように、抗ＩＣＡＭ−３抗体と抗原とを投与することで、次のその抗原提示に対して個体を一時的に寛容にする。２　慢性炎症疾患の治療ＬＦＡ−１を欠＜ＬＡＤ患者は炎症応答を上げることができないため、ＬＦＡ− １の天然のりカントの拮抗作用もまた、炎症応答を阻害すると考えられる。ＩＣＡＭ−３に対する抗体の炎症を阻害する能力により、慢性炎症疾患およびエリトマト−デス、自己免疫甲状腺炎、実験的アレルギー性脳を髄炎（ＥＡＥ）、多発性硬化症、糖尿病のいくつかの型、レイノルズ症候群、リュウマチ様関節炎などのような自己免疫疾患の処置への治療上の使用の基礎ができる。このような抗体はまた、乾せんの処置の療法として採用され得る。一般的に、本発明の抗ＩＣＡＭ−３抗体は、単独で、あるいは抗ＩＣＡＭ−１抗体および／あるいは抗ＩＣＡＭ−２抗体との組合せで投与され、現在ステロイド療法で処置され得る疾患の処置に利用され得る。本発明によれば、このような炎症および免疫拒絶応答は、このような処置が必要な被検体に、該炎症を抑制するのに十分な量の抗炎症剤を提供することによって、抑制され（すなわち、妨害されあるいは弱められ）得る。適当な抗炎症剤には、ＩＣＡＭ−３に結合し得る抗体、該抗体のフラグメントであって、ＩｃＡＭ− ３に結合し得るフラグメント；実質的に純粋なＩＣＡＭ−３：ＩＣＡＭ−３の機能的誘導体、ＩＣＡＭ−３の非免疫グロブリンアンタゴニスト、あるいはＬＦＡ −１以外の、ＩＣＡＭ−３の非免疫グロブリンアンタゴニストが含まれる。特に好ましいのは、ＩＣＡＭ−３の可溶性機能的誘導体からなる抗炎症剤である。このような抗炎症処置には、さらに、ＬＦＡ−１に結合し得る抗体、ＬＦＡ−１の非免疫グロブリンアンタゴニスト、実質的に純粋なＩＣＡＭ−１および／あるいはＩＣＡＭ−２、あるいはそれらの誘導体、または抗ＩｃＡＭ−１抗体および／あるいは抗ＩＣＡＭ−２抗体あるいはそのフラグメントからなる群より選択される薬剤を投与することが含まれ得る。本発明はさらに、上記の特異的防御システムの炎症応答を抑制するための方法であって、さらに免疫抑制剤を被検体に提供する方法を含む。このような免疫抑制剤は、好ましくは、通常必要とされるより低い用量（すなわち、「最適下限の」用量）で提供される。最適下限の用量の使用は、本発明の薬剤との協同的作用ゆえに可能である。適当な免疫抑制剤には、デキサメタシン、アザチオプリン、ＩＣＡＭ−１、ＩｃＡＭ−２、あるいはシクロスポリンＡが含まれるが、これらには、限定されない。３　非特異的炎症の療法多くの炎症反応は、「非特異的防御システム」の反応に起因し、そして、免疫記憶ができない白血球により媒介されている。このような細胞には、顆粒球およびマクロファージが含まれる。本明細書では、炎症は、非特異的防御システムの反応が原因の場合、それに媒介されている場合、あるいはそれに関連している場合に、非特異的防御／ステムの応答の結果であるといわれる。少なくとも一部が非特異的防御システムの反応によって起こる炎症の例には、以下の症状に関連する炎症が含まれる。すなわち、成人呼吸逼迫症候群（ＡＲＤＳ）あるいは敗血症、外傷、出血から派生する多発性臓器傷害症候群：心筋あるいは他の組織の再還流傷害、急性糸球体腎炎０反応性関節炎、急性炎症性成分を伴う皮膚病：急性化膿性髄膜炎あるいは発作のような他の中枢神経系炎症性疾磨；熱傷害、血液透析、白血球除去面輸血；ｌ１１瘍性犬腸炎、限局性回腸炎：壊死性全腸炎、顆粒性輸血関連症候群；およびサイトカイン誘導性毒性などである。本発明の抗炎症剤は、顆粒球上のＣＤ−１８複合体と内皮細胞との相互作用を特異的に弱めることができる化合物である。このようなアンタゴニストには、ＩＣＡＭ−３；　ＩＣＡＭ−３の機能的誘導体；ＩＣＡＭ−１、ＩＣＡＭ−２、あるいはＣＤ−ＩＢソファリーのメンバーの分子以外の非免疫グロブリンアンタゴニストが含まれる。Ｂ　臓器および組織拒絶のサプレッサーＩＣＡＭ−３、特に可溶性型は、ＣＤ− １８フアミリーのメンバーに対する抗体と同じように作用し得ることから、いずれかの細胞接着依存性機能によって起きる臓器あるいは組織の拒絶を抑制するのに用いられ得る。さらに、抗ＩＣＡＭ−３抗体、Ｉ　ＣＡ　Ｍ　−３ノ機能的誘導体、およびＩＣＡＭ−３のアンタゴニストもまた、このような拒絶を抑制するのに用いられ得る。ＩＣＡＭ−３および抗ＩＣＡＭ−３抗体は、哺乳類被検体中の、例えば腎臓などの固体の臓器あるいは組織の拒絶、例えば骨髄などの非固体臓器拒絶を防ぐために、または自己免疫応答を弱めるために、用いられ得る。重要なことには、ＩＣＡＭ−３を認識し得るモノクローナル抗体の使用によって、ＨＬＡ不適合の個体間における場合でも臓器移植ができるようになる。Ｃ治療あるいは診断の目的用に投与される抗原性物質の導入への付加例えば、ラフインスリン、インターフェロン、組織型プラスミノーゲンアクチヘーター、あるいは不ズミモノクローナル抗体などの治療剤あるいは診断剤に対する免疫応答は、実質的にこのような薬剤の治療上のあるいは診断上の価値を減じ、そしである場合には、血清病のような疾病を引き起こす。このような状況は、本発明の抗体を使用することによって緩和され得る。本発明のこの態様では、抗ＩＣＡＭ− ３抗体は、治療剤あるいは診断剤との組合せにおいて投与される。抗体を加えることによって、レンピエントが薬剤を認識するのが妨害され、そして、それ故に、この薬剤に対する免疫応答の開始が妨害される。このような免疫応答がないことで、患者はさらにその治療剤あるいは診断剤の投与を受けることができるようになる。ＩＣＡＭ−３（特に可溶化型）あるいはその機能的誘導体は、疾患の処置において、単独で、またはＩＣＡＭ−１あるいはＩＣＡＭ−２との組合せにおいて１、またはＬＦＡ−１に結合し得る抗体との組合せにおいて、用いられ得る。従って、可溶化型では、そのような分子は、臓器あるいは移植の拒絶を阻害するために用いられ得る。ＩＣＡＭ−３、あるいはその機能的誘導体は、抗ＩＣＡＭ −３抗体と同様の方法で、治療剤あるいは診断剤の免疫原性を減じるために用いられ得る。Ｄ　腫瘍の転移のサプレッサ一本発明の薬剤はまた、移動にＣＤ−１８フアミリーの機能的なメンバーを必要とする、造血腫瘍細胞の転移を抑制するのに用いられ得る。本発明のこの態様においては、このような処置が必要な被検体に、転移を抑制するのに十分な量の薬剤（例えば、■ＣＡＭ−３に結合し得る抗体、該抗体のトキシン結合物、該抗体のフラグメントてあって、ＩＣＡＭ−３に結合し得るフラグメント。該フラグメントのトキノン結合物；実質的に純粋なＩＣＡＭ−３：　ＩＣＡＭ− ３の機能的誘導体、あるいはｌＣＡＭ−１あるいはＩＣＡＭｉ以外の、ＩＣＡＭ −３の非免疫グロブリンアンタゴニスト）が提供される。本発明のさらなる態様ては、ＩＣＡＭ−３を発現する腫瘍細胞の増殖を抑制するための方法が提供される。詳細には、該方法は、このような処置が必要な被検体に、該増殖を抑制するのに十分な量の薬剤を提供することを含む。適当な薬剤には、ＩＣＡＭ−３に結合し得る抗体：該抗体のトキノン結合物；該抗体のフラグメントてあって、ＩＣＡＭ−３に結合し得るフラグメント；該フラグメントのトキシン結合物、トキシン結合したＣＤ−１８フアミリ一分子のメンバー：あるいはＣＤ−１８フアミリ一分子のメンバーのトキシン結合した機能的誘導体が含まれる。本発明のさらに別の態様では、ＬＦＡ−１発現腫瘍細胞の増殖を抑制する方法が提供される。詳細には、該方法は、このような処置が必要な被検体に、該増殖を抑制するのに十分な量の薬剤を提供することを含む。適当な薬剤には、トキシン結合したＩＣＡＭ−３；　トキシン結合したＩＣＡＭ−３の機能的誘導体が含まれる。Ｅ、ＨＩＶ感染の抑制およびＨＩＶ感染細胞の伝播の防止本発明のさらに別の態様では、ＨＩＶの感染を抑制するための方法が提供される。詳細には、該方法は、ＨＴＶに感染した個体に、効果的な量のＨＩＶ感染抑制剤を提供することを含む。本発明は、特にＨＩＶ−１感染を抑制するための方法に関するが、この方法が細胞に感染し得るいずれのＨＩＶ変異体（例えばＨＩＶ−２など）にも、本発明の薬剤によって抑制され得る同様の様式で適用され得ることは、理解される。このような変異は、本発明の目的にとっては、等価物である。本発明の１つは、ＨＩＶ感染によって刺激された、ＬＦＡ−１およびある場合にはＬＦＡ、−１結合リガンドの発現によって、細胞と細胞の接着反応が促進され、この反応で感染細胞と非感染細胞との接触時間を増やすことができ、感染細胞から非感染細胞へのウィルスの移動を促進する、ということに気が付いたことに基づく。従って、ＬＦＡ−１／リガンド相互作用を調節し得る本発明の薬剤は、ＨＩＶ、および特にＨＩＶ−１による感染を抑制することができる。ＬＦＡ−１／リガンド相互作用を阻害する分子がＨＩＶ感染を抑制し得る１つの方法は、ＨＴＶ感染細胞が発現するＬＦＡ−１リガンドの、健康なＴ細胞のＣＤＩＩ／ＣＤ１８レセプターに結合する能力を減することによるものである。あるいは、ＬＦＡ−１／リガント相互作用を阻害する分子は、）ＩＩＶ感染細胞が発現するＣＤＩＩ／ＣＤ１８レセプターの、健康なＴ細胞のＬＦＡ−１に結合するの能力を減することができる。細胞がＣＤ１１ａ／ＣＤ１８レセプター、あるいはＬＦＡｉ結合リ結合上カントする能力を減するために、ＩＣＡＭ−３、ＩＣＡＭ−３のフラグメント、ＩＣＡＭ−３の機能的誘導体、あるいは抗ＩＣＡＭ −３抗体を用いることがてきる。本発明の薬剤は、レシピエンド被検体に、ＨＴＶ感染の抑制を達成するのに十分な量提供される。投与などによる薬剤の用量がこのようなＨＩＶ感染を弱めるかあるいは防ぐのに十分である場合に、ＨＩＶ感染を「抑制する」のに十分な量であると言われる。薬剤は、ＨＩ　Ｖ感染に曝されているか、ＨＩＶ感染が影響している患者に提供されることを目的とする。本発明の薬剤は、ＨＩ〜′感染の処置の「予防」あるいは「治療」の目的のいずれかのためである。予防に用いられる場合、薬剤は、ウィルス感染のいずれの症状も現われる前に（例えば、このような感染の前、その時、あるいはすぐ後において、しかし、このような感染のすべての症状が現われる前に）提供される。薬剤の予防的投与によって、次のＨＩＶ感染を防ぐかあるいは弱めることができる。治療用に用いられる場合には、この薬剤は、ウィルス感染細胞の検出時（あるいはそのすぐ後）に提供される。薬剤の治療的投与によって、。さらなる）（ＩＶ感染が弱められる。従って、本発明の薬剤は、ウィルス感染の開始の前（予期されるＨＩＶ感染を抑制するように）かあるいはこのようなウィルス感染細胞の実際の検出ｉ＆（さらなる感染を抑制するために）のいずれかにおいて提供され得る。さらなる態様においては、本発明は、ＡＩＤＳの改善療法、ならびにＦ目■感染、および特にＨ１〜′−１感染を抑制するための強化法を提供する。これには以下を共に投与することを含む。（１）ＩＣＡＭ−３、可溶性１ｃＡ〜１−３誘導体、ＣＤＩＩ　（ＣＤ１１ａ、ＣＤ１１．ｂ、あるいはＣＤ１ｌｃ）、可溶性ＣＤＩＩ誘導体、ＣＤ１８、可溶性ＣＤ１８誘導体、あるいはＣＤＩＩ／ＣＤ１８ヘテロダイマーあるいは、ＣＤ　１　］　、′ＣＤ　１８へ子ロダイマーの可溶性誘導体および／あるＬｌは（＋１）ＴＣＡＭ−３に結合し得る抗体、と、（Ｉ　Ｉ　Ｉ）細胞あるいは粒子関連ＣＤ４あるいはＣＤ４の可溶性誘導体および／あるいは（ＴＶ）ＣＤ４に結合し得る分子（好ましくは抗体あるいは抗体フラグメント）本発明のさらなる態様においては、ＨＩＶ感染細胞の移動を抑制する方法が提供される。詳細には、該方法は、ＨＴＶに感染した個体に、有効な量の抗移動剤を投与することを含む。本発明の抗移動剤には、ＨＩＶに感染したＴ細胞のＬＦＡ−１リガンドへの結合能力を減することができる、ＩＣＡＭ−３、ＩＣＡＭ−３のフラグメント、ＩＣＡＭ−３の機能的誘導体、あるいは抗ＩＣＡＭ−３抗体が含まれる。ＩＣＡＭ− ３に結合する抗体は、ＨＩＶ感染Ｔ細胞が発現するＩＣＡＭ−３のＣＤ１１／ＣＤ１８レセプターを発現する細胞に結合する能力を減することによって、移動を抑制する。細胞のＣＤＩＩ／ＣＤ１８レセプターに結合する能力を減するためには、ＩＣＡＭ−３に結合し得る抗体を用いることができる。本発明の薬剤は、レシピエンド被検体に、ＨＩＶ（あるいは他のウィルス）に感染したＴ細胞の移動を抑制するのに十分な量提供される。投与などによる薬剤の用量がこのような移動を弱めるかあるいは防ぐのに十分である場合に、Ｔ細胞の移動を「抑制する」のに十分な量であると言われる。このような化合物（単数あるいは複数）は、「予防」あるいは「治療」の目的のいずれかのためであり得る。予防に用いられる場合、本発明の薬剤は、ウィルス感染のいずれの症状も現われる前に（例えば、このような感染の前、その時、あるいはすぐ後において、しかし、このような感染のすべての症状が現われる前に）提供される。薬剤の予防的投与によって、ウィルスに感染したＴ細胞の次の移動を防ぐかあるいは弱めることができる。治療用に用いられる場合には、この薬剤は、ウィルス感染Ｔ細胞の検出時（あるいはそのすぐ後）に提供される。薬剤の治療的投与によって、このようなＴ細胞がさらに移動するのが弱められる。従って、本発明の薬剤は、ウィルス感染の開始の前（予期される感染Ｔ細胞の移動を抑制するように）かあるいはこのようなウィルス感染細胞の実際の検出後のいずれかにおいて提供され得る。Ｆ　喘息の処置本発明のさらなる態様では、ＬＦＡ−１／ＩＣＡＭ−３相互作用を調節し得る薬剤が喘息の処置に用いられる。詳細には、該方法は、このような処置が必要な個体に、有効な量の抗喘息剤を投与することを含む。本発明の抗喘息剤には、細胞のＬＦＡ−１に結合する能力を損なわせることができる、ＩＣＡＭ−３、ＩＣＡＭ−３のフラグメント、ＩＣＡＭ−３の機能的誘導体、あるいは抗ＩＣＡＭ’−３抗体が含まれる。ＩｃＡＭ−３に結合する抗体は、これらの細胞上で発現するＩＣＡＭ−３の、ＣＤＩＩ／ＣＤ１８レセプターを発現する細胞への結合する能力を損なわせることによって、好酸球の移動を抑制する。本発明の抗喘息剤は、レシピエンド被検体に、喘息の症状のつらさ、程度、あるいは時間を減少させるかあるいは弱めるのに十分な量提供される。本発明の薬剤は、単独て、あるいは抗喘息剤の１つあるいはそれ以上との組合せで投与され得る。このような抗喘息剤は、例えば、メチルキサンチンン（テオフィリンなど）、ベーターアドレナリン作用性アゴニスト（カテコールアミン、レゾルンノール、サリケニン、およびエフェドリンなど）、グルココルチコイドおよび抗コリン作用剤（アトロピンなど）であり、本発明の薬剤との組合せによって、喘息症状を処置するのに必要なこのような薬剤の量を減らせる。本発明の薬剤は、「予防」あるいは「治療」の目的のいずれかのためである。予防に用いられる場合、薬剤は、喘息のいずれの症状も現われる前に提供される。薬剤の予防的投与によって、次の喘息応答を防ぐかあるいは弱めることができる。治療用に用いられる場合には、この薬剤は、喘息の症状の開始時（あるいはそのすぐ後）に提供される。薬剤の治療的投与によって、実質的な喘息の症状が弱められる。従って、本発明の薬剤は、予期される喘息の発作の開始の前に（予期される喘息発作のつらさ、時間あるいは程度を弱めるように）があるいは発作の開始後のいずれかにおいて提供され得る。Ｇ　診断および予測への応用ＩＣＡＭ−３に結合し得るモノクローナル抗体は、患者の中のＩＣＡＭ−３発現部位および炎症の部位を造影あるいは視覚化する方法に用いられ得る。このような使用法においては、抗ＩＣＡＭ−３抗体を、検出てきるように、ラジオアイソトープ、アフィニティー標識（ビオチン、アビノン、など）、蛍光標識、あるいは常磁性原子の使用により、標識する。このような標識をする方法は、当該分野でよく知られている。次に標識した抗体を診断のために造影に用い得る。抗体の診断のための造影における臨床上の応用については、Ｇｒｏｓｓｍａｎ。Ｈ．Ｂ．、　Ｕｒｏ］．　ＣＩｉｎ．　Ｎｏｒｔｈ　Ａｍｅｒ．　１３：４６５ −４７４　（１９８６）、Ｕｎｇｅｒ．　Ｅ．Ｃ．ら、Ｉｎ魔■■ ｔ．　Ｒａｄｉｏｌ．　２０：６９３−７００　（１９８５）、　およびＫｈａｗ．　ＢＡら、Ｓｃｉｅｎｃｅ　２０９：２９５−２９７（１９８０）に記載されている。ＩＣＡＭ−３発現の存在はまた、ハイブリダイゼーションプローブの使用によっても検出され得る。このようなプローブには、ＩＣＡＭ−３発現細胞中に存在する、ＩＣＡＭ−３遺伝子配列あるいはＩＣＡＭ−３ｍＲＮＡ配列に結合し得る、ｍＲＮＡ，ｃＤＮＡ，染色体ＤＮＡ、あるいは合成オリゴヌクレオチドプローブなどが含まれる。このようなハイブリダイゼーションアッセイを行なう技術については、Ｍａｎｉａｔｊｓ．　Ｔ．ら、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　Ｃ］ｏｎｉｎｇ．　ａ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　Ｍａｎｕａｌ．　Ｃｏｌｄｓｐｒｉｎｇ　Ｈａｒｂｏｒ．　ＮＹ　（１９ｇ２）、およびＨａｙｍｅｓ．　Ｂ．Ｄ。ら、Ｎｕｃｌｅｉｃ　Ａｃｉ■ Ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ．　ａ　Ｐｒａｃｔｉｃａｌ　Ａｐｐｒｏａｃｈ．　ＩＲＬ　Ｐｒｅｓｓ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ．　ＤＣ　（P９８５）に記載されており、これらは、参考として本明細書に援用されている。標識した抗体あるいは核酸プローブを用いることによる、ＩＣＡＭ−３発現の場所の検出は、腫瘍発生の診断に用いられ得る。１つの診断の態様においては、組織あるいは血液のサンプルを被検体から取出し、すてに標識された抗体あるいはこれから標識され得る抗体の存在下において、インキュベートする。好ましい態様においては、この技術は、磁気造影、フルオログラフィーの使用を通じた、体中に入れない方式で行なわれる。このような診断のテストは、例えば腎臓などの臓器移植患者をモニターして、起こり得る組織拒絶の早期の兆候を見付けるのに用いられ得る。このようなアッセイはまた、個体のりウマチ様関節炎、あるいは他の慢性炎症疾患への罹り易さを調べるために行なわれ得る。例えば、抗ＩＣＡＭ−３抗体あるいは抗体フラグメントを放射性同位元素標識することによって、ラジオイムノアッセイの使用による抗原の検出が可能となる。ラノオイムノアッセイ（ＲＩＡ）については、Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓａｎｄ　Ｂｊｏｃｈｅｃｊｓｔｒｙ　ｉｎ　Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　Ｂｉｏｌｏｇｙ，　（Ｗｏｒｋ，　Ｔ．Ｓ．らによる、Ｎｏｒｔｈ　Ｒｏ撃■ ａｎｄ　Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ　Ｃｏｍｐａｎｙ．　ＮＹ　（１９７８））の” ＾ｎ　Ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｔｏ　Ｒａｄｉｏｉｗｕ獅■ Ａｓｓａｙ　ａｎｄ　Ｒｅｌａｔｅｄ　Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ”　（Ｃｈａｒｄ．　Ｔによる）と題される章に記載されており、本明細書に参考として援用されている。あるいは、抗体は、蛍光化合物、酵素、あるいは当該分野で知られている他の適当な標識により標識され得る。炎症の部位の位置を決めることとは別に、ＩｃＡＭ−３に結合し得る抗体は、液体アッセイに通常採用される溶媒を用いて、生物学的液体をアッセイして、循環するＩＣＡＭ−３の存在を調べるのに用いられ得る。液体サンプル中の循環ＩＣＡＭ−３の存在は、炎症応答あるいは他のＩＣＡＭ−３媒介生物学的機能の徴候である。あるいは、羊膜液中のＩＣＡＭ−３の存在は、妊娠中の合併症の産物と関連している。すべての生物学的液体がアッセイに用いられ得る。しかし、好ましい生物学的液体は、血液、血清、血漿、滑液、羊膜液、を髄液、あるいは尿である。Ｖ　Ｉ　Ｉ　Ｉ　本発明の組成物の投与ＩＣＡＭ　３の治療上の効果は、全長のＩＣＡＭ−３分子、あるいはその治療上活性のあるペプチドフラグメントのいずれかを患者に投与することにょって得られる。特に関心があるのは、ＩＣＡＭ− ３の可溶性の治療上活性のペプチドフラグメントである。ＩＣＡＭ−３およびその機能的誘導体は、合成により、組換えＤＮＡ技術により、タンパク質分解により、あるいはこのような方法の組合せにより、得ることができる。担体との結合力を強めるために加えられたアミノ酸残基あるいはＩＣＡＭ−３の活性を増大させるために加えられたアミノ酸残基を有するＩＣＡＭ−３の機能的誘導体の使用によって、ＩＣＡＭ−３の治療上の利点が増大する。本発明の範囲には、さらに、ＩＣＡＭ−３の生物学的あるいは薬理学的活性を有しているかあるいは作用する限り、あるアミノ酸残基が欠損した、あるいは代わりのアミノ酸残基を含む、ＩＣＡＭ−３の機能的誘導体も含まれる。この明細書に開示されている、本発明の抗体およびＩＣＡＭ−３分子の両方は、それらの抗体や分子を含む調製物が、通常および天然には見いだされるような物質を実質的に含まない場合に、「実質的に天然の夾雑物がない」と言われる。本発明は、ＩＣＡＭ−３に結合し得る、（ポリクローナルあるいはモノクローナル）抗体、その活性なフラグメント、を含む。このような抗体は、動物、組織培養、あるいは組換えＤＮＡ法のいずれかによって産生され得る。ＩＣＡＭ−３、あるいはＩＣＡＭ−３由来の分子の投与は、単独で、あるいは位置およびあるいはＩＣＡＭ−２との組合せにおいて行なわれ得る。抗ＩＣＡＭ− ３抗体、またはＩＣＡＭ−３あるいはＩＣＡＭ−３由来の分子に結合し得る他の分子は、単独で、あるいは抗ＩＣＡＭ−１抗体および／あるいは抗ＩＣＡＭ−２抗体との組合せて投与され得る。患者に、ＩＣＡＭ−３に結合し得る抗体、あるいは抗体フラグメントを提供する際、またはＩＣＡＭ−３　（あるいはそのフラグメント、変異体、あるいは誘導体）をレノピエント患者に提供する際、投与される薬剤の用量は、患者の年齢、体重、身長、性別、一般的な症状、既往歴などのような因子に依存する。一般的には、約１ｐｇ／ｋｇがら１０ｍｇ／ｋｇ（患者の体重）までの範囲の抗体の用量でレシピエンドに提供するのが望ましいが、それよりも低い用量あるいは高い用量でも投与し得る。ＩＣＡＭ−３分子、あるいはその機能的誘導体を患者に提供する場合もまた、このような分子は、約１ｐｇ／ｋｇがら１０ｍｇ／ｋｇ　（患者の体重）までの範囲の用量で投与するのが望ましいが、それよりも低い用量あるいは高い用量でも投与し得る。以下に示すように、治療上効果的な用量は、抗ＩＣＡＭ−３抗体がさらに抗ＬＦＡ−１抗体、抗ＩＣＡＭ−１抗体、および／あるいは抗ＩＣＡＭ− ２抗体と共に投与される場合、低くすることができる。本明細書において、ある化合物が、さらに第二の化合物と共に投与されると言われるのは、２つの化合物が患者の血清中に同時に見いだされる程、近い時間で投与された場合である。ＩＣＡＭ−３に結合し得る抗体、およびＩＣＡＭ−３自身の両方とも、患者の静脈内に、筋肉内に、皮下に、腸内に、局所的に、あるいは非経口的に投与し、得る。抗体あるいはＩＣＡＭ−３を注入によって投与する場合、投与は、連続注入、または単回あるいは複数回の単位であり得る。本発明の薬剤は、「生理学的に効果的」であるのに十分な量で、レシピエンド被検体に提供される。投与などによる薬剤の用量が、ＩＣＡＭ−３に関連する生理学的効果を弱めたり、あるいは妨害したりするのに十分な場合に、量が生理学的に効果的であるという。例えば、炎症を抑制する目的で、患者に提供される本発明の１つの薬剤は、炎症を「抑制する」のに十分な用量で提供された場合に、生理学的に効果的であるといえる。さらに、抗ＩＣＡＭ’−３抗体、あるいはそのフラグメントは、単独で、または１あるいはそれ以上の別の免疫抑制剤（特に、臓器あるいは組織移植のレシピエンドに対しては）との組合せて、投与され得る。このような化合物（単数あるいは複数）の投与は、「予防」あるいは「治療」の目的のいずれかのためであり得る。予防に用いられる場合、免疫抑制化合物は、いずれの炎症応答あるいは症状も現われる前に提供される（例えば、臓器あるいは組織移植の前、その時、あるいはそのすぐ後であるが、臓器拒絶のいずれの症状も出る前）。化合物（単数あるいは複数）の予防的投与によって、次の炎症応答（例えば、移植臓器あるいは組織の拒絶）を防ぐかあるいは弱めることができる。治療用に用いられる場合には、この化合物（単数あるいは複数）は、実際の炎症の症状の開始時（あるいはそのすぐ後）に提供される。化合物（単数あるいは複数）の治療的投与によって、実際の炎症（例えば、移植した腎臓などの固体臓器あるいは組織または骨髄などの非固体臓器の拒絶）が弱められる。従って、本発明の抗炎症剤は、炎症の開始の前に（予期される炎症を抑制するように）あるいは炎症の開始後のいずれかにおいて提供され得る。投与してレシピエンドである患者に許容される場合、組成物は、「薬学的に許容され得る」という。このような薬剤は、投与される量が生理学的に十分である場合に、「薬学的に効果的な量」投与されるといわれる。薬剤は、その存在によって、レシピエンドである患者の生理に検出できる変化がでる場合に、生理学的に十分である。本発明の抗体およびＩＣＡＭ−３分子は、薬学的に有用な組成物を調製するための既知の方法で処方され得る。これらの方法では、これらの材料、あるいはその機能的誘導体は、薬学的に許容し得る担体賦形剤と組み合わす。適当な賦形剤およびその処方には、例えば、ヒト血清アルブミン、などの他のヒトタンパク質が含まれ、これらについては、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’　ｓ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　５ｃｉｅｎｃｅＳ（第１６版、０ｓｏ１．Ａ編、Ｍａｃｋ、　Ｅａｓｔｏｎ　ＰＡ　（１９８０））に記載されている。有効な投与に適切な薬学的に許容され得る組成物を形成するために、このような化合物は、有効量の本発明の薬剤と適当な量の担体とを含む。さらに、本発明の抗体は、キメラ化あるいはＣＤＲグラフティングによってヒト化され得、より患者に対して「薬学的に許容され得る」ようにする。抗体、特に抗ＩＣＡＭ−１抗体のキメラ化の方法は、他の明細書等に記載されている。これは、英国特許出願筒９０００９５４８．０号、第９０００９５４９．８号、ならびに、米国受理官庁に１９９１年４月２７日に出願された、ＰＣＴ出願第Ｐ　ＣＴ／ＵＳ９１１０２９４２号、およびＰＣＴ／ＵＳ９１１０２９４６号であって、これらは参考として、本明細書に援用されている。さらに別の薬学的方法は、作用時間の制御に用いられ得る。放出制御調製物は、本発明の薬剤を合成あるいは吸収するためのポリマーの使用によって、作られ得る。制御送達の速度および時間は、適当な巨大分子マトリックスを選択することによって、導入する巨大分子の濃度および導入方法を変化させることによって、ある程度に制御され得る。制御送達の時間を制御する別の方法は、本発明の薬剤を、ポリエステル、ポリアミノ酸、ヒドロゲル、ポリ（乳酸）あるいはエチレンヒニルアセテートコポリマーのようなポリマー材料の粒子中に導入することである。あるいは、これらの薬剤をポリマー粒子に導入する代わりに、これらの材料をマイクロカプセル、コロイド薬剤送達システム、あるいはマイクロエマルションの中に閉じこめてしまうことも可能である。この中で、マイクロカプセルは、例えば、コアセルベーション、界面重合、セラチンあるいはポリ（メチルメタンレート）マイクロカプセル化により調製される。そして、コロイド薬剤送達システムは、例えば、リポソーム、アルブミンマイクロスフェア、マイクロエマルション、ナノ粒子、およびナノカプセルなどである。本発明はさらに、以下を含む薬学的組成物を包含する：　（ａ）抗炎症剤（ＩＣＡＭ−３に結合し得る抗体；ＩＣＡＭ−３に結合し得る該抗体のフラグメント１１ＣＡＭ−３１１ＣＡＭ−３の機能的誘導体；あるいはＩＣＡＭ−１およびＩＣＡＭ−２以外のｌｃＡＭ−３の非免疫グロブリンアンタゴニスト）および（ｂ）少なくとも１つの免疫抑制剤。適当な免疫抑制剤には、デキサメタシン、アサ千オプリンおよびツクロスポリンＡが含まれる。本発明について一般的な記載をしてきたところで、以下の実施例を参照すると、薬剤およびそれを得る方法については、より容易に理解することができる。以下の実施例は、説明のために提供され、特に示さないかきり、本発明を限定するものではない。実施例Ｉ　ＬＦＡ−１に対する新しい接着リガンド、ＩＣＡＭ−３の特性化細胞系およびリンパ球の、ＬＦＡ−１でコートしたプレートへの付着は既述の方法で行った［ダスチンら（Ｄｕｓｔｉｎ　ｅｔ　ａｌ、　）　Ｃｏ１ｄ　Ｓｐｒｉｎｇ　Ｈａｒｂｏｒ　Ｓｙｍｐ、　Ｑｕａｎｔ、　Ｂｉｏｌ、　５４ニア５３−７６５　（１９８９）］　、　Ｊ　Ｙリゼート（溶解液）から精製したＬＦＡ−１を９６ウエルのマイクロタイタープレート（Ｌｉｎｂｒｏ−ｔｉｔｅｒｔｅｋ）ｌ：、　ｌ　ｌＯＯサイト（部位）７μｍ２で吸着させた。非特異的な結合部位を１％ＢＳＡてブロックし、ＰＢＳ１５％ＦＢＳ／２ｍＭＭｇＣｈ１０．５％Ｈ３Ａ　（検定培地）で洗浄した。ＬＦＡ−１の特異的阻害はマイクロタイターウェルを１／２０１釈ＴＳ１／２２　（抗−ＬＦＡ−１α）Ｉ水と一緒１：ＲＴ、３０分インキュベーションして行った。休止Ｔ−細胞をプラスチックアドヘランスおよびナイロンウールろ過によって単離し、９１％ＣＤ２”であった。一方、１０μｇ／ｍｌフィトヘマグルチニン（ＰＨＡ）の存在下、細胞を培養することによってＰＨＡ−芽細胞を生成させた。細胞を蛍光色素Ｂ　ＣＥ　ＣＦ　（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　Ｐｒｏｂｅｓ　Ｉｎｃ、　）て標識し、洗浄し、検定培地に再懸濁した。細胞のＭＡｂ前処理は、１／２００希釈腹水と一緒に４℃で４５分間インキュベーションすることで行い、次いて、１０５細胞を各ウェルに移した。固相ＬＦＡ−１に３７℃で１時間、細胞系を接着させ、非付着細胞を６個の２３ゲージ、ニードルアスビレーンヨンで除去し、他方、リンパ球を３０ｘｇで５分間遠心し、３７℃で３０分間インキュベートした。非結合リンパ球を、各洗浄の間に１００Ｗで８回加え、培地をフリッキングすることによって、プレートから除去した。そのサイズの小さいことにより、除去することがより困難な非結合Ｔ細胞を完全に除去するには、フリソキングがより効果的である。蛍光強度（濃度）アナライザー（Ｂａｘｔｅ）によって９６ウエルプレートから直接、蛍光を定量した。飽和濃度（１／２００希釈腹水）て全ｈｉＡｂを用い、ＴＳＩ／２２（抗ＣＤ１１ａ、ＩｇＧ１）［サンチェーマドリッド（Ｓａｎｃｈｅｚ−Ｍａｄｒｉｄ　ｅｔ　ａｌ、　）　Ｐｒｏｃ、　Ｎａｔｌ、＾ｃａｄ、ｓｃｉ、　ＬＩＳ＾７９ニア４８９−７４９３　（１９８２）　］　、ＲＲ１／　１　（抗ＩＣＡＭ−１、ＩｇＧ１）　［ロスＬ、インら（Ｒｏｔｈｌｅｉｎ　ｅｔ　ａｌ、）　Ｊ、Ｔｍｍｕｎｏｌ、１３７：１２７０−１２７４（１９８６）、ＣＢＲ−ＩＣ２／２　（抗１ｃＡＭ−２，ＩｇＧ２ａ）　「ドゥホゲロルら（ｄｅ　Ｆｏｕｇｅｒｏｌｌｅｓ　ｅｔ　ａｌ、）　Ｊ、Ｅｘｐ、１ｉｅｄ、Ｓｕｂｍｉｔｔｅｄ　（１９９１Ｘｉｎ　ｐｒｅｓｓ）］　、およびＣＢＲ−１Ｃ３／１（抗ＩＣＡＭ−３、ＩｇＧ１）を含有させる。ＣＢＲ−ＩＣ３／１はネズミミエローマＰ３Ｘ６３Ａｇ８．６５３と５ＫＷ３を注射したＢａ１ｂ／′Ｃマウス「ゲッターら（Ｇｅｆｔｅｒ　ｅｔ　ａｌ、）　Ｓｏｉ、Ｃｅ１１．Ｇｅｎ、３：２３１−２３６（１９７７）］の牌臓細抱との融合物から誘導し、６００個のハイブリドーマを、５ＫＷ３の精製ＬＦＡ−１への結合に対する阻害能力に関してスクリーニングした。ＣＲＢ−１ｃ３／ＩＩ；！精！ＭＬＦ’Ａ−１１ｍも、ＩＣＡＭ−１、ＩＣＡＭ−２まタハＬＦＡ−１ｃＤＮＡ類のいずれてトランスフェクトされたＣＯ８細胞とも反応しなかった（データ示さず）。４つの代表的な実験の１つを示し、誤差は１つの標準偏差を示す。実施例２　細胞性ＩＣＡＭ−１、ＩＣＡＭ−２、およびＩＣＡＭ−３発現のフローサイトメトリー分析用いた細胞系はすべて既述のものである［ヒブスら（Ｈｉｂｂｓ　ｅｔ　ａｌ、）　Ｃ１１ｎＩｎｖｅｓｔ、８５：６７４−６８１　（１９９０）コ。抹消血単核細胞（ＰＢＭＣ）をデキストラン沈降とＦｉｃｏｌｌ−Ｈｙｐａｑｕｅ　（１，０７７）遠心て得た「ダスチンら（Ｄｕｓｔｉｎ、　ｅｔ　ａｌ、　）　Ｊ、　Ｃｅ１１　Ｂｉｏｌ、　１０７：３２１−３３１（１９８８）］。好中球を細胞ベレットから回収し混在する赤血球を低張性溶解で除去した。リンパ球および単球を前進および垂直光スキャッターを用いるサイトメトリー分析によって分離し、単球およびＴ細胞特異的ＭＡｂて確認した。Ｐ　Ｂ　Ｍ　Ｃから得たリンパ球の豊富化にプラスチックアドヘランスを用い、細胞を１０μｇ／ｍｌのフィトヘマグルチニン（ＰＨＡ）の存在下、培養した。試料をＥＰＩＣ３Ｖフローサイトメーターを用いて分析し、サイトメーターのカリプレート（検量）のためにＥ　Ｐ　Ｔ　ＣＳ　Ｉｍｍｕｎｅ−Ｂｒｉｔｅ蛍光ピース（Ｃｏｕｌｔｅｒ）を用いて蛍光を定量した。休止リンパ球でのＩＣＡＭ−３の発現は、ＣＤ３またはＬＦＡ−１のいずれよりも２−３倍大きく、単球の発現は、ＬＦＡ−１よりもＩｃＡ〜１−３で２−３倍大きかった。好中球でのＩＣＡＭ−３の発現レヘルは、Ｍａｃ−１（ＣＤ１１ｂ／ＣＤ１８）のそれと同等であった。細胞をホスホリラーゼＣで処理することにより、ＰＩ−結合型ＩＣＡＭ−３が存在しないことが分かった。表２　免疫蛍光フローサイトメトリーによる、ＩＣＡＭの相対的表面抗原発現＊　膜発現は、原料および方法の概要を述べたように、免疫蛍光フローサイトメトリノーで測定した。値は少なくとも２回の実験で決定した。１つの単位が約１０３フルオレスセイン同等となるようサイトメーターを検量するために蛍光ビーズを用いた（Ｃｏｕｌｔｅ　Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ、　Ｈｉａｌｅａｈ、ＰＬ）。＊　＊　：　Ｍｉｓｃｅｌｌａｎｅｏｕｓ細胞系は、以下のもの含む、ヒト謄静脈内皮細胞、ｈｕｖｅｃ、ヒト乳癌細胞、Ｉ’ｌｅｐ　Ｇ２：ヒト類上皮がん細胞系、Ｈｅ１ａ：　ヒト横絞筋肉腫、ＲＤ３１５、ヒト線維細胞腫、ＦＳ］、２．３；ヒト神経グリア細胞腫。ム輿撚旦　１ｃＡλ１−３の免疫沈降ヨートゲンを用いて細胞を１２５１で標識した［キンモトら（Ｋｉｓｈｉｍｏｔｏ　ｅｔ　ａｌ）　Ｊ、Ｂｊｏｌ、Ｃｈｅｍ、　２６４：３５８８−３５９．１（］９８９）コ。細胞をトリトンＸ−１００（１％）で溶解した。リセートをウノ−１ｇＧと結合したセファロースでブレクリアーし、次いて、適当なＭＡｂ− 結合セファロースと一緒に２時間インキュベートした。ビーズを５ＱｍＭＴｒｉｓ、１％ＳＤＳおよび１％２−メルカプトエタノールを含有するサンプルバッファー中で洗浄し、沸騰させた。非還元試料を２−メルカプトエタノール不含サンプルバッファー中で沸騰させ、２０ｍＭヨウ化酢酸で処理した。試料を７％パーティカルスラブ（分離用平板）ポリアクリルアミドゲル上で既述のようにして分析し［レムリ（Ｌａｅｍｍｌｉ、　Ｕ、ｌ）　Ｎａｔｕｒｅ　２２７：６８０− ６８５（１９７０）］　、タンパク質をオートランオグラフィーで観察した。試料を既述の方法［クレソチンら（Ｔａｒｅｎｔｉｎｏ　ｅｔ　ａｌ、　）　Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　２４：４６６５−４６７１　（１９８５）］を用い、Ｎ −Ｇｌｙｃａｎａｓｅ（Ｇｅｎｚｙｍｅ）で処理し、ペプチドバックボーンの全Ｎ−結合オリゴサンカリトの開裂には、濃度（１，０単位／ｍｌ、３７℃、１８時間）を用いることが最適であることを決定した。ＭＨＣクラス■はＮ−結合炭水化物上を含有するが、ＩＣＡＭ−２（ｍ、６０．０００．６Ｎ−結合部位、Ｍ、２８．３８３のハックホーン）は高度にグリコノル化されていた。実施例４　ＪＣＡＭ−３の分布フローサイトメトリーによりＩＣＡＭ−３タンパク質の組織分布をさらに調べるために、本発明の抗ＩＣＡＭ−３抗体を用いた。ＩＣＡＭ−３の表面発現を示す細胞型を表３にまとめて示す。ＩＣＡＭ−３の発現は造血細胞に限定されるよってある。標識した抗ＩＣＡＭ−３抗体を用いる組織切片の免疫組織化学的染色によって、フローサイトメトリーのデータを確認した（データ示さず）。フローサイトメ１−ＩＪ−データと同様、免疫組織化学的研究でも、ＩＣＡＭ−３発現が造血細胞に限定されるらしいことが分かった。表３　免疫蛍光フローサイトメトリーによる、ＩＣＡＭの相対的表面抗原発現＊　膜発現は、原料および方法の項で概要を述べたように、免疫蛍光フローサイトメトリーで測定した。値は少なくとも２回の実験で決定した。１つの単位が約１０３フルオレスセイン同等となるようサイトメーターを検量するために蛍光ビーズを用いた（Ｃｏｕｌｔｅ　Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ、　Ｈｉａｌｅａｈ、ＦＬ）。 ±・Ｍｉｓｃｅｌｌａｎｅｏｕｓ　細胞系は、以下のもの含む：ヒト謄静脈内皮細胞、ＨＵ〜“ＥＣ，ヒト乳癌細胞、１ｌｅｐ　Ｇ２：ヒト類上皮がん細胞系、１ｌｅｌａ；　ヒト横絞筋肉腫、ＲＤ３１５　：　ヒト線維細胞腫、ＦＳｌ、２．３：ヒト神経ダリア細胞腫。実施例５１ＣＡＭ−３の精製当業界既知の方法でマトリックスに固定化した抗ＩＣＡＭ−３抗体ＣＢＲ−ＩＣ３，／１を用いるイムノアフィニティークロマトグラフィーでＩＣＡＭ−３を精製した。ＩＣＡＭ−３の単離のための出発物質として多くの供給源を用いた。これらには、５ＫＷ３、ヒト胸腺腫細胞系、およびヒト扁桃細胞が含まれるがこれらに限定されない。ＩＣＡＭ−３の精製に用いた方法は本質的に、文献［ドゥホゲロルら（ｄｅ　Ｆｏｕｇｅｒｏｌｌｅｓ　ｅｔ　ａｌ、　）　Ｊ、　Ｅｘｐ、　Ｍｅｄ、　１７５：１８５−１９０　（１９９２）］記載の方法による。当業者ならば、イムノアフィニティークロマトグラフィーに用いられる洗浄および溶出レノメ、試薬は精製すべき各抗原およびイムノアフィニティークロマトグラフィーに用いられる各抗体ごとにわずかずつ異なることを理解するであろう。下記の如（，５ＫＷ３細胞またはヒト扁桃細胞から精製したＩＣＡＭ−３は分子量約］、２０ｉ２４ｋＤであるが、好中球から導かれたリゼートから精製したＩＣＡＭ−３は分子量約１２０から１５０ｋＤの広いバンドを与えた。この方法で精製したＩＣＡＭ−３はその抗ＩＣＡＭ−３抗体および様々な細胞− にのＬＦＡ−１との結合能力を維持しているよってあった（図６および７参昭）ｃ。実施例６　様々な分子量のＩＣＡＭ−３の同定様々な細胞型上のＩＣＡＭ−３の分子量を決定するために免疫沈澱法とポリアク１１ルアミドケル電気泳動による分析を用いた。好中球から免疫沈澱した■ＣＡ〜１−３の分子量は、１ルバ球から免疫沈澱したものの分子量と異なることが分かった。リンパ球およびり／パ球様細胞系から単離したＩＣＡＭ−３は分子量約１２０から１２４ｋＤの／＼ントとして現れた。好中球から免疫沈澱したＩＣＡＭ−３の分子量は、リンパ球様細胞て発現したものよりやや大きく、約１２０から］　５０ｋＤまての拡散したｌ＼ントとして現れた（図４）。そのようなサイズの変化は、グリコプロティンであるＩＣＡＭ類のメン７＜−に関しては決して珍しい二とて’＋Ａｆａい。ＩＣＡＭ−１は異なる細胞型間て同様の分子量の変化を示す。このＩＣＡＭ−１てみられた分子量の変化はグリコ／ル化の程度の変化に起因することが示された。従ッて、ＩＣＡＬｉ−３の分子量における変化の原因として最もあり得るのは、グリコジル化の相違である。当業者ならば、好中球から単離したＩＣＡＭ−３を様々なグリコンダーゼおよび他の酵素的処理に付し、これが分子量に及ぼす影響を観察することにより、このことを容易に確認することができる。ＩＣＡＭ−１のグリコ／ル化の程度の変化はＭＡＣ−１（ＣＤ１１ｂ／ＣＤ１８）結合に影響することが示された。従って、ＩＣＡＭ−３のグリコジル化の程度を変化させることによって、ＩＣＡＭ−３の様々なリガンド、例えば、グリコプロティンＣＤ１１ｂ／ＣＤ１８類のメンバー、に対する結合親和性が改変されたＩＣＡＭ−３誘導体を生成することが可能である。実施例７　１ＣＡＭ−３抗体アンユハントと、上記のように５ＫＷ３または扁桃細胞から精製したＩＣＡＭ− ３タンパク質とをマウスに注射した。当業者既知の方法を用いて免疫化動物からモノクローナル抗体を生成させた。得られた様々な抗ＩＣＡＭ−３抗体を表４にまとめて示す。ＥＬＩＳＡにより、精製した固定化ＩＣＡｈｉ−３との反応能力に基づいて様々な抗体を同定した。次いて、ＩＣＡＬｉ−３陽性であることが分かっている様々な細胞系上で陽性ｍＡｂをスクリーニングし、放射性標識したＩＣＡＭ−３陽性細胞リゼートから免疫沈澱させた。ｍＡｂを、抗ＩＣＡＭ−１抗体および抗ＩＣＡＭ−２抗体の存在下、ＰＭＡて誘導される５ＫＷ３細胞の凝集を阻害する能力に関して試験した。あるいは、抗ＩＣＡＭ−３抗体は、固定化精製ＩＣＡＭ−３への５ＫＷ３細抱の結合に対する阻害能力によっても同定できる。第３のＬＦＡ−１のりカントの存在を示す一連の証拠の１つは、ＩＣＡＭ−１／ＩＣＡ〜１−２２と独立の、ＰＭＡ−刺激５ＫＷ３細胞凝集のための経路の存在である。本発明者らは、マウス抗ＩＣＡＭ−３ポリクローナル抗血清またはＣＢＲ−Ｉ　Ｃ３／１およびＣＢＲ−ＩＣ３／２の組み合わせのいずれかでこの凝集を阻害することができた。＊＊　スペインのｌａｂからの他のＩ　ＣＡ　Ｍ−３ｍ　Ａ　ｂ　（Ｆ、　Ｓａｎｃｈｅｚ−Ｍａｄｒｉｄ）。本実験の結果が示されてから、彼らはこれが彼らの作ったｍＡｂであるが、決して特性化されていないことを思い出した。それはＩＣＡＭ−３であることが明らかになった。ＣＢＲ−１ｃ３／２．３／３．３１５１　ＣＢＲ−Ｉ　Ｃ３／１と同様、１２０Ｋｄバンドで免疫沈澱した。ｍＡｂをウェスタンプロットに対する能力に関し抗ＩＣ，ＡＭ−１抗体（ＲＲＩ／１）、抗ＩＣＡＭ−２抗体（ＣＢＲ，−ＩＣ２／２）および抗ＩＣＡＭ−３抗体（ＣＢＲ−Ｉ　Ｃ３／１およびＣＢＲ−ＩＣ３２の組合せ）の、（１）ＰＭＡ刺激による５ＫＷ３細抱の精製ＩＣＡＭ順への付着、（２）フィトヘマグルチニン（ＰＨＡ）刺激による細胞分割、および（３）混合リンパ球応答（１’、ＩＬＲ）に対する阻害能力に関して試験をした。既に、ＰＭＡＩｔＬＦＡ−１を活性化し、従ってそのＩＣＡＭ−１への結合能力を増大し得ることが示された。［ダスチンら（Ｄｕｓｔｉｎ　ｅｔ　ａｌ）　Ｎａｔｕｒｅ　３４１：６１９（１９８９）］。図５は同様の活性化機構がＬＦＡ −１／ＩＣＡＭ−３結合にもあることを証明している。種々の抗体の、ＰＭＡ刺激による５ＫＷ３細胞の精製ＩＣＡＭ−１およびＩＣＡＭ−３への結合阻害能力を試験した。図６゜ＣＢＲ−ＩＣ３／１およびＣＢＲ− ＩＣ３／２抗体は、個別に存在すると、精製ＩＣＡＭ−３へのＰＭＡ刺激５ＫＷ３細胞の付着を有効に阻害しない。しかしながら、これら２つの抗体の組み合わせを用いれば、ＰＭＡ刺激下の５ＫＷ３細胞のＩＣＡＭ−３への付着が阻害される。トウホケロルら［ｄｅ　Ｆｏｕｇｅｒｏｌｌｅｓ　ｅｔ　ａｌ、　、　Ｊ、　Ｅｘｐ、　Ｍｅｄ、　］が記載したように、ＣＢＲ−ＩＣ３／１モノクローナル抗体は、それ自身、精製ＬＦＡ−１へのＩＣＡＭ−３の結合を阻害することがてきる。ＰＭＡ刺激５ＫＷ３細胞のＩＣＡＭ−３への結合が温度依存性であるか否か、および陽イオン依存性であるか否かを調べるために、さらに分析した。ＩＣＡＭ− １と同様、ＩＣＡＭ−３／ＬＦＡ−１結合は温度依存性（図８参照）であり、陽イオン依存性であることが分かった（データ示さず）。図９は種々の抗体の、ＰＨＡ刺激細胞分割に対する影響を示す。既述のごとく　［リジンスキーら（Ｋｒｅｎｓｋｙ　ｅｔ　ａｌ、　）　Ｊ、　Ｉｍｍｕｎｏｌ、１３１　：　６１１−６１６（１９８３）］、ＰＨＡは抗ＩＣＡｋｉ−１抗体、抗ＩＣＡＭ−２抗体中の抗ＬＦＡ−１で阻害され得るような方法で細胞増殖を刺激する、あるいは抗ＩＣＡＭ−１および抗ＩＣＡＭ−２抗体の組合せはＰＨＡ刺激細胞分割にほとんど影響を与えなかった。しかしながら、１）抗ＩＣＡＭ−１抗体、抗ＩＣＡＭ−２抗体および抗ＩＣＡＭ −３抗体、２）２つの抗ＩＣＡＭ−３抗体（ＩＣ３／１およびＩＣ３／２）および３）抗ＩＣＡＭ−１抗体および抗ＩＣＡＭ−３抗体の組み合わせはＰＨＡ刺激細胞分割に有効であった。実施例９　混合リンパ球反応免疫学的な反応性を評価するためにＭＬＲ検定を用いる。この検定は基本的に化学的に固定した外来性細胞［刺激細胞（ｓｔｉｍｕｌａｔｏｒ　ｃｅｌｌｓ）］を異なる固体からのＰＢＬ類［応答細胞（ｒｅｓｐｏｎｄｅｒ　ｃｅｌｌｓ）］を含有する溶液に加え、応答細胞の増殖を指数として応答のレベルを測定することを含む［Ｋｒｅｎｓｋｙ　ｅｔ　ａｌ。Ｊ、　Ｉｍｍｕｎｏｌ、　１３１：６１１−６］６　（＋９８３）］　。この検定は移植拒絶反応の治療に有用な成分の同定の第１段階である。種々の抗体および抗体の組み合わせのＭＬＲ反応への効果を図１０に示す。要約すると、抗ＩＣＡＭ−３単独では低レベルの効果がある。しかし、抗ＩＣ・＼Ｎ１−１抗体と抗ＩＣＡＭ−３抗体との組み合わせでは、％ｉＬＲ阻害により高レベルの効果が起きることが見られる。最高応答は抗ＩＣＡＭ−１抗体、抗ＩＣＡＭ　２抗体および抗ＩＣＡＭ−３抗体の組み合わせて得られた。実施例１０　１ｃＡＭ−３のペプチド配列実施例５に記載の方法でヒト扁桃細胞からイムノアフィニティークロマトグラコイ−によってＩＣＡＭ−３を精製した。精製ＩＣＡＭ−３をＬｙｓ−Ｃ酵素て既知の方法により酵素学的に消化し、ペプチドフラグメントをＨＰＬＣで分離した。図１１は通常の消化で観察された、カスクロマトグラフでの様々なタンパク質ビークを示す。ビーク１０および１７は、配列決定するに十分な大きさおよび構造のペプチドフラグメントを含有するものと同定された（以下、それぞれ、ＮＫ−１０およびＮＫ−，１７ペプチドと称する）。＼に一１０ペプチドおよびＮＫ−１７ペプチトのアミノ酸配列は標準的な手法で決定された。ＮＫ−１０タンパク質の配列はＫＩＤＲＡＴＣＰＱＨＬＫ　（配列番号１）であることが分かった。配列の第１のリジン（Ｋ）残基の存在は、Ｌ、　ｙ　ｓ　−Ｃがり／ン残基の後てタンパク質を開裂することから推定された。ＮＫ−１７ベブチトの配列はＫＩＡＬＥＴＳＬＳＫ　（配列番号２）であることが分かった。＼に一１０タンパク質と同様、第１リンン残基を推定し、ＤＮへ配列決定で確認した、＼に一１０タノバク實およびＮＫ−１７タンパク質の配列を既知のＩＣＡＭ−１およびｌｃ、ＡＭ−２配列と比較し、高度の相同性が判明した。ＮＫ−１７ペプチドはＩＣＡＭ−２の第１１ｇドメインに含まれる配列と有意な相同性を示す、、ＮＫ−１０ペプチドはＩ　ＣＡＭ−１のドメイン４内の配列と弱い相同性分解オリゴヌクレオチドプローブを上で得たペプチド配列に基づいて製造した。さらにプローブは、先に同定された、ＩＣＡＭ−１およびＩＣＡＭ−２ヌクレオチド配列で見られるコドン選択性を包含するよう設計された。ＮＫ−１７タンパク質およびＮＫ−１０タンパク質のアミノ酸配列に基づくプローブのヌクレオチド配列は下記の通りである。ＮＫ１７ブローブ　２個のＮ（イノシン）を含有する２４倍縮重のオリゴ２３（配列番号４　）ＮＫＩＯプローブ、５個のＮ（イノシン）を含有する８倍縮重の２５マー既述のごとく、扁桃ＲＮＡからｃＤＮＡ発現ライブラリーを生成させた［ウオンら（ｌｏｎｇ　ｅｔ　ａｌ、）　Ｐｒｏｃ、Ｎａｔｌ、Ａｃａｄ、Ｓｃｉ、［］ＳＡ　８２ニア７１１−７７１６　（１９８５）コ。このライブラリーをＮＫ−１７プローブでスクリーニングし、陽性ハイブリダイゼーションを示すプラークを再度、ＮＫ−１０プローブでスクリーニングした。１つのクローン、クローン１１２、が約１６から１　８ｋｂ長さの挿入体を有することが分かった。クローン１１２およびＮＫ−１０およびＮＫ−１７ペブチトの位置を示すダイアダラムを図１２に示す。挿入体の末端を隣接するヘクターから導かれたプライマーを用いて配列決定し、内部の配列決定には＼’に一１０プローブを用いた。ここまで得られた配列はただ１方の鎖のみで読まれたものである。当業者ならばそのような配列の有効性を日常的な実験で確認できることを容易に理解するであろう。得られた配列をまとめて図１８に示す。この配列には幾つかの注目されることがある。まず、ＩＣＡＭ−１の膜貫通領域と高度に相同な配列が同定される。従って、ＩＣＡＭ−３の可溶性断片の製造を望む場合、図１２に記載の膜貫通領域の開始位置から後方の全配列を欠失する。第２に、ＩＣＡＭ−１、ＩＣＡＭ− ２およびＩＣＡＭ−３間に存在する配列相同性から推測されるように、クローン１１２の５°末端から得られる配列は天然に存在する遺伝子の５′末端と近接しているよってある。実施例１２　様々なＩＣＡＭ分子間の配列相同性ＮＫ−１０およびＮＫ−１７ペプチドのヌクレオチド配列およびアミノ酸配列、並びに上記で得たヌクレオチド配列を既知のＩＣＡＭ−１およびＩＣＡＭ＝２の配列と比較した（図１３−１７）。結果は、ＩＣＡＭ−３と、ＩＣＡＭ−１およびＩＣＡＭ−２の両者との高レベルの相同性を示唆している。ＩＣＡＭ−１とＩＣＡＭ−３との配列相同性は、ＩＣＡＭ−１の第１　（図１６）および第４／第５ドメイン、並びにＩ　ＣＡＭ−１の膜貫通領域および幾つかの細胞質ドメイン（図１３および１４）に見られる。さらに、遺伝子バンクデータベースを検索したところ、ＩＣＡＭ−３に関して得られたものと同一または類似の他の配列が無いことが分かった。ＩＣＡＭ−３とＩＣＡＭ−２の第１ドメインの間にも有意な相同性が見られた（図１７）。クローン１１２を用いてさらにライブラリーをスクリーニングした。約２−２．４ｋＤのｃＤＮＡ挿入体を得るためにさらにクローンを見付けた。これまでより大きいサイズは同定されていないのて、これらが完全長さのｃＤＮＡクローンを表している可能性がある。配列表（１）一般情報・（ｉ）出願人・デフォッンローリス、アントニン・アールスプリンカー、ティモジ−・ニー（ｉ　ｉ）発明の名称、細胞間接着分子−３およびその結合リガンド（ｉ　ｉ　ｉ）配列の数・６（ｉｖ）通信のための住所。（Ａ）宛名　ステルン、ケスラー、ゴールドスタインおよびフォックス（Ｂ）通り：１２２５＝＋不チカットアヴエニュー、Ｎ、　Ｗ。（Ｅ）国　米国（Ｆ）ノツプコード　２００３６（ｖ）コンピューター読み取り可能方式：（Ａ）媒体の型　フロッピーディスク（Ｂ）コンピューター　ＩＢＭ　ＰＣコンパチブル（Ｃ）　オペレ−７−イング／ス−ｒＬ：　ＰＣ−ＤＯ３／ＭＳ−ＤＯ８（Ｄ）ソフトウェア−ＰａｔｅｎｔＩｎ　Ｒｅ１ｅａｓｅ　＃　１．０．　Ｖｅｒｓｉｏｎ　１１．２５（ｖｉ）現出願データ（Ａ）出願番号・ＵＳ（Ｂ）出願臼　１９９２年６月１１日（Ｃ）分類（ｖｉｉ）代理人／エージェント情報・（Ａ）名称　フォックス、サムエル　エル（Ｂ）登録番号・３０．３５３（Ｃ）参照番号：１１０１．０６９ＰＣ０１（ＩＸ）電信通信情報（Ａ）電話番号　（２０２）８３３−７５３３（Ｂ）テレファックス・　（２０２）８３３−８７１６（２）配列番号１（ｉ）配列の特性（Ａ）配列の長さ・１５２塩基対（Ｂ）配列の型　核酸（Ｃ）鎖の数・２本鎖（Ｄ）トポロジー、直鎖状（１１）配列の種類：ＤＮＡ（ｉｘ）配列の特徴。（Ａ）特徴を表す記号　ＣＤ５（Ｂ）存在位置：２．．１５２（Ｘ］）配列　配列番号ＩＧ■ｕ　ｒｒｃ　ｃ丁Ｔ　ＴｒＧ　ＣＧＧＧＴＧ　ＱＡＧ　ＣＣＣＣ，＾Ｇ〜ＣＣＣＴ　ＧＴＧ　ＣＴＣＴＣＴ　ＧＣＴ　４６Ｇｌｕ　Ｐｈｓ　Ｌ＠ｕ　Ｌｅｕ　Ａｒｇ　ＶａＩＧｌｕ　Ｐｒｏ　Ｇｉｎ　Ａｓｎ　Ｐｒｏ　Ｖａｌ　Ｌｅｕ　Ｓｅｒ　Ａｌａｊ　５　Ｔｏ　１５ＧＧＡＧＧＧ　ＴＣＣＣＴＧ　ＴＴＴ　ＧＴＧ　ＡＡＣＴＧＣＡＧＴ　ＡＣＴ　ＧＡＴ　ＴＧＴ　ＣＣＣＡＧＣＴＣＴ　ＧＡＧ　９４Ｇｌｙ　Ｇｌｙ　Ｓｅｒ　Ｌｅｕ　Ｐｈｅ　Ｖａｌ　Ａｓｎ　Ｃｙｓ　Ｓｅｒ　Ｔｈｒ　Ａｓｐ　Ｃｙｓ　Ｐｒｏ　Ｓｅｒ　Ｓｅｒ　Ｇｌｕ＾＾＾　＾ＴＣＧＣＣＴＴＧ　ＧＡＧ　ＡＣＧ　ＴＣＣＣＴＡ　丁ＣＡ　ＡＡＧ　ＧＡＧ　ＣＴＧ　ＧＴＧ　ＧＣＣＡＧＴ　ＧＧＣ１４２Ｌｙｓ　Ｉｌｅ　Ａｌａ　Ｌｅｕ　Ｇｌｕ　Ｔｈｒ　Ｓｅｒ　Ｌｅｕ　Ｓｅｒ　Ｌｙｓ　Ｇｌｕ　Ｌｅｕ　Ｖａｌ　Ａｌａ　Ｓｅｒ　ＧｌｙＡＴＧ　ＧＧＣＴＧＧ　Ｇ　＋５２Ｍｅｔ　Ｃ１１ｙ　Ｔｒｐ（２）配列番号２：（ｉ）配列の特性。（Ａ）配列の長さ　５０アミノ酸（Ｂ）配列の型二アミノ酸（Ｄ）トポロジー・直鎖状（］り配列の種類、タンパク質（ｘｉ）配列・配列番号２Ｇｌｕ　Ｐｈｅ　Ｌｅｕ　Ｌｅｕ　Ａｒｇ　Ｖａｌ　Ｇｌｕ　Ｐｒｏ　Ｇｉｎ　Ａｓｎ　Ｐｒｏ　Ｖａｌ　Ｌｅｕ　Ｓｅｒ　Ａｌａ　Ｇｌｙｌ　５　１０　１５Ｇｌｙ　Ｓｅｒ　Ｌｅｕ　Ｐｈｅ　Ｖａｌ　Ａｓｎ　Ｃｙｓ　Ｓｅｒ　Ｔｈｒ　Ａｓｐ　Ｃｙｓ　Ｐｒｏ　Ｓｅｒ　Ｓｅｒ　Ｇｌｕ　Ｌｙｓ１ｉｅ　Ａｌｓ　Ｌｅｕ　Ｇｌｕ　Ｔｈｒ　Ｓｅｒ　Ｌｅｕ　Ｓｅｒ　Ｌｙｓ　Ｇｌｕ　Ｌｅｕ　Ｖａｌ　Ａｌａ　Ｓｅｒ　Ｇａｙ　Ｍｅｔ（２）配列番号３（ｉ）配列の特性・（Ａ）配列の長さ、１８９塩基対（Ｂ）配列の型　核酸（Ｃ）鎖の数　２本鎖（Ｄ）トポロジー、直鎖状（１１）配列の種類：　ＤＮＡ（ＩＸ）配列の特徴（Ａ）特徴を表す記号　ＣＤ５（Ｂ）存在位置　２．．１８９（ｘｌ）配列　配列番号３：（２）配列番号４（１）配列の特性（Ａ）配列の長さ　６２アミノ酸（Ｂ）配列の型・アミノ酸（Ｄ）トポロン−直鎖状（ｉ　ｉ）配列の種類・タンパク質（Ｘｌ）配列　配列番号４゜Ｐｈｅ　Ｃｙｓ　Ｓｅｒ　Ａｌａ　Ｔｈｒ　Ｌｅｕ　Ｇｌｕ　Ｖａｌ　Ｈｌｓ　Ｇｌｙ　Ｇｌｎ　Ｐｈｅ　Ｌｅｕ　Ｇ１ｎ（２）配列番号５・（１）配列の特性（Ａ）配列の長さ・１１３塩基対（Ｂ）配列の型：核酸（Ｃ）鎖の数：２本鎖（Ｄ）トポロジー、直鎖状（１１）配列の種類：ＤＮＡ（ｉｘ）配列の特徴：（Ａ）特徴を表す記号・ＣＤ５（Ｂ）存在位置：２．．１１３（Ｘｌ）配列二配列番号５：ＧＧＣＡＧＴ　ＴＡＣＣＡＴ　ＧＴＴ　ＡＧＧｌｙ　Ｓｅｒ　Ｔｙｒ　ＨＬｓ　Ｖａ１（２）配列番号６（ｉ）配列の特性（Ａ）配列の長さ　３７アミノ酸（Ｂ）配列の型　アミノ酸（Ｄ）トポロジー・直鎖状（ユ１）配列の種類　タンパク質（ｘｌ）配列　配列番号６Ｇｌｙ　！１ｉｅｒ　Ｔｙｒ　Ｈｌｓ　Ｖａ１結合した細胞（％）ｍＡｂ　予備処理り００２９　口ＩＣＡＭ−１＋３ ’ｍ　ＩＣ”−１ｍ　ＩｃＡＭ−２＋３■ＩＣＡＭ−１＋２結合した細胞（％）ｍＡｂ　予備処理＋　１０　１００　１０００蛍光強度蛍光強度＋　１ｏ　１ｏｏ　＋ｏｏ。蛍光強度１、１０　１００　１０００＋　１０　１００　１０００蛍光強度＋　１０　１００　４０００蛍光強度＋　＋０　１ｏｏ　１０００蛍光強度＋　１０　１００　１０００蛍光強度ｔ　ｔｏ　ｉｏｏ　＋ｏｏ。蛍光強度＋　１０　１００　１０００蛍光強度＋　１０　１００　１０００蛍光強度蛍光強度＋　１０　４００　１０００蛍光強度賞光強度＋　１０　１００　４０００蛍光強度＋　１０　１００　１０００＋　４０　１００　１０００蛍光強度蛍光強度＋　１０　１００　１０００蛍光強度＋　１０　１００　１０００＋　＋ｏ　＋ｏｏ　＋ｏｏ。蛍光強度＋　１０　１００　１０００蛍光強度＋　１０　１００　１０００友光強度蛍光強度ＦＩＧ、　３Ａ　ＦＩＧ、　３ＢＳＫＷ３　５ＫＷ３　ＳＬＡ　ＪＵＲＫＡＴ．２１Ｃｏｎ、　ＨＬＡ　ＩｃＡＭ−１１ＣＡＭ−２１ＣＡＭ−３リンパ球　好中球ＦＩＧ、４部位密度（部位／　ｕ　ｍ　２）ＦＩＧ、５精製リガンドｍＡｂ　予備処理 ■　Ｎｏ　ｍＡｂ　［王コ　ＣＢＲ−Ｉｃ３／ｉドア日　ＴＳＩ／１８＋ＴＳ１／２２　口　ＣＢＲ−１ｃ３／２Ｘ　ＲＲ１／１　ロＣＢＲ−１ｃ３／１　＋ＩＣ３／２精製タンパク ■ＩＣＡＭ−Ｉ　Ｎｏ　ｍＡｂ彫１ｃＡＭ−Ｉ　ＴＳＩ／２２ｆ　＋ｃＡｙ−、ｓ　Ｎｏ　ｍＡｂ口ＩｃＡＭ−３ＴＢＩ／２２履ロロＮロ巳ロロ旧（Ｗｄ：））　Ｑ？ｌ！　ＨＣ生成シンボル　＋　Ｔｏ：　５３２゜ＡＣＣＥＳＳＩ○Ｎ　ＪＯ３１３２ＨＵＩＣＡＩ、Ｉ−１：ＰＥＰ　Ｘ　１１２７−ＮＫＩＯ，ＰＥＰ　４月２２．１９９２　１２：２０１　、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、ＰＬＲＧＳＴＶＴＶＳＯＩＡＧＡＲＶＱＶＴＬＤＧＶＰＡＡＡＰ２９Ｔｏ：　ＨＵＩＣＡＪＪ−ＬＰＥＰ　チ・ブク：６４６０　１　から　５３２ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ　ＪＯ３１３２，、。１１２８−ＲＭ１３．ＰＥＰ　Ｘ　ＨＵＩＣＡＩＪ−ＬＰＥＰ　４月１５．１９９２　０８：４３．。Ｔｏ：　ＨＬＪＩＣＡ）Ｊ−２，ＰＥＰ　”・り：　５４７３　１　カラ２７５ａ訳：　ＨＵＩＣＡｌ＋Ｉ−２，ＳＥＱ＋−７り：　１７８　６３　カラ８８７生成シンボル　１から２７５゜ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ　Ｘ＋５６０６１１’ＷＯＲＤｓ　ＣＡ）Ｊ−２タンパク；　細胞付着タンパク　；グリコプロティン９．。長すＷＥＩＧＨｒ：　０．１００　平均ミｘマツ＋　：　−０，３９６１２８− ＲＭ１３．ＰＥＰ　Ｘ　ＨＵＩＣＡ）！−２，円ア　４月　１５．１９９２０８：３９　、。１　、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、ＴＲＱＩ）ＩＰＧＲＧＤ［１ｉＨＬＲＬＧ、、、、、、、、、、、１６１７　、、、、、、、、ＡＰＴＬＳＰＶＦ、、、、、、、、、、、、、、ＶＡＶＬＬＴＬＧＷＴＩＶＬＡＬＭＹＶＦ　４４：　１１　１．Ｉ　ＩＩ。２ＳＩ　ＨＬＲＱ［）ＲＭＧＴＹＧＶＲＡＡＷＲＲＬＰＱＡＦＲＰ　２７５ギャップ：　１１２８−Ｔ７．ＰＥＰ　チ・・り：５２３７　１　から　５２翻訳　：　１１２８−ｎ、ｓＥＱ　チ・・り；３０５２　３　から１５９生成／ンボル　１から５２゜Ｔｏ：　ＨＵＩＣＡ）、１−１．ＰＥＰ　チェック：６４５０　１　から５３２翻訳　：　Ｈｕｔ観−ＬＳＥＱチェ、り、　８３８０　５８　から１６５３生成シンボル　１　から　５３２゜ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ　ＪＯ３１３２、、。キ＋　−／　フＷａＧＨＴ：　３．０００　平均？−＋　：　０．５４０長さ　ＷＥＩＧ）ｆｆ：　０．１００　平均ミスマツチ：　−０，３９６クオリテイー：　３６．０　長さ：５３２比：　０．６９２　ギャップ：　２類似性（％）　：　５９．６１５　同一性（％）　：　３８．４６２１１２８− Ｔ７．ＰＥＰ　Ｘ　ＨＵＩＣＡＭ−１，ＰＥＰ　４月　１７．　１９９２　１６：１５．、。、：１．　．１．１　、、：１．　ＩＩＩ：：１．１１１１　ＭＡＰＳＳＰＲＰＡＬＰＡＬＬＶＬＬＧＡＬＦＰＧＰＧＮＡＱＴＳＶＳＰＳＫＶＩＬＰＲＧＧＳＶＬＶＴＣＳＴ　５０．１．　＋＋　：：：１１．１．ｌ　ｌド、１．：５１　ＳＣＤＱＰＫＬＬＧＩＥＴＰＬＰＫＫＥＬＬＬＰＧ）ＪＮＲＫＶＹＥＬＳＮＶＱＥＤＳＱＰＭＣＹＳＮＣＰＤＧＱ　１００ギヤ、ブ：　１１２８−Ｔ７．ＰＥＰ　チェック：５２３７　１　から５２翻訳　：　１１２８−Ｔ７．　ＳＥＱチ、、り：　３０５２　、　、ｌ　から１５９生成ノンポル　１　から５２゜Ｔｏ：　）（ＩＪＩｃＭＩ−２，ＰＥＰ　チ・・り：５４７３　１　から　２７５翻訳：　ＨｕｌＣＡ）Ｊ−２，ＳＥＱチェ、り：＋７６　６３　から８８７生成／／ポル　１　から　２７５゜ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ　Ｘ＋５６０６１’ｆ’Ｖ１０ＲＤＳ　ｌ鐸−２ＰＲＯ正Ｎ、Ｃ狙矩ＨＥＳＩＯＮ　ＰＲＯ玉Ｎ；　ＧＬＹＣＯＰＲＯ正ＩＮ、、。長すＷＥＩＧＨＴ：　０．１００　平均ミＸ７．ｆ　：　−０，３９６類似性（％）：　５１．９２３　同一性（％）・　４０．３８５１１２８−Ｔ７．ＰＥＰ　Ｘ　）（ＵＩＣＡｌ、ｌ−２，ＰＥＰ　４月　＋４；　１９９２　０７：５６．。ＥｒＬＬＲＶＥＰＱＮＰＶＭＥＡＧＧＳＬｒ−ＫＥＬＶＡＳＧＭＧＷ　− ＰＬＲＭＩ：ＴＶＴＶＳＣＭＡＧＡＲＶＱＶＴ　−ＬＩＩＧＶＰＡＡＡＰＧＱＰＡＱＬＱＬＮＡＴ−Ｅ　Ｓ　［１ＩＩＧＲＳ　ＦｒＣ５ＡＴＬＥＶＨＧＱＦ−ＣＴＴＧＣＡ［ＪＡＧ＋８１　−＝＝−−−１８９６＾ＡＣ（ｉＴＣＴＣ丁　し　ＳＰＶＦＶＡＶＬＬＴＬＧＶＶＴＩＶＬ−ＡＬＭＹＶＦＲＥＨＱＲＳＧ５：ＹＨＶ　−ＦＩＧ　１８Ｃフロントページの続き（５１）　Ｉｎｔ、　Ｃ１，５識別記号　庁内整理番号Ａ６１Ｋ　３９／３９５　ＡＢＥ　Ｎ　９２８４−４ＣＣＯ７Ｋ　１５／１２　８３１８−４８Ｃ１２Ｎ　５／２０Ｃ１２Ｐ　２１１０２　Ｃ８２１４−４Ｂ２１１０８　８２１４−４ＢＣ１２Ｑ　１／６８　Ａ　７８２３−４ＢＧＯＩＮ　３３１５３　Ｙ　８３１０ −２Ｊ３３１５６９　Ｈ８３１０−２Ｊ３３１５７７　Ｂ　８３１０−２Ｊ／／　Ｃ０７Ｋ　７／１０　８３１８−４ＨＣＯ７Ｋ　９９：００Ｉ[Detailed description of the invention] Intercellular adhesion molecule-3 and its binding ligand This application is filed in U.S. Patent Application No. 07/7 No. 12,879 (filed on June 11, 1991) is a partially pending application, and U.S. Patent Application No. 071045. No. 963 (filed May 4, 1987), No. 07/ No. 115,798 (filed November 2, 1987), No. 07/155. No. 943 ( (filed February 16, 1988), No. 07/189. No. 815 (May 3, 1988 Application), No. 07/250. No. 446 (filed on September 28, 1988), No. 07/4 54. No. 294 (filed December 22, 1989), PCT Application No. PCT/US9 No. 1102942 and PCT/US91102946 (April 27, 1991) filed with the U.S. receiving Office). These applications are herein incorporated by reference. It is being used. Technical field of invention The present invention relates to the discovery of a novel intercellular adhesion molecule named ICAM-3. . This molecule is used when a population of white blood cells recognizes and adheres to the cellular matrix. be involved in the process. ICAM-3 is located at sites of inflammation and immune responses. mediate cell interactions with other lymphocytes, macrophages, and neutrophils. mediate The present invention further provides ICAM-3 alone or ICAM-1 and/or IC Granulocytes, lymphocytes, or macrophag 7 lines using combination with AM-2 related to inhibiting cell-cell adhesion. The use of such molecules allows for specific and non-specific inflammation treatments are provided. The present invention further provides ICA-1-3 alone or ICAM-1 and/or ICAM-1. By administering the combination with cAM-2, patients infected with HT~' or to inhibit HIV infection, particularly HIV-1 infection, of white blood cells in exposed individuals. Concerning treatment and prevention methods for Therefore, the present invention provides Provides treatments for diseases such as AIDS (Acquired Immune Deficiency Syndrome) caused by do. The present invention further provides ICAM-3 alone or ICAM-1 and/or IC Used in combination with AM-2 to inhibit migration of HIV-1 infected cells from the circulatory system. Concerning treatment methods to control the disease. Therefore, the present invention provides that Provide therapy for diseases such as AIDS (Acquired Immune Deficiency Syndrome) caused by Ru. The present invention also relates to ICAM-3 alone or ICAM-1 and/or ICA M-2 was used in combination with HIM-infected individuals to kill T cells and to The present invention relates to a treatment method for suppressing syncytia formation. Therefore, the main issue ) (AIDS caused by the IV-1 virus) provide treatment for diseases such as all syndromes). The present invention can be applied to ICAM-3 alone or ICAM-1 and/or ICAM-3. 2 in the treatment of asthma. The present invention further provides molecules capable of binding to ICAM-3 (hereinafter referred to as anti-ICAM-3). ) regarding. The binding of anti-ICAM-3 molecules to ICAM-3 is related to ICAM-3. The aim is to regulate the biological functions of The binding molecules of the invention are ICAM It can be an antibody, a peptide, or a carbohydrate that can bind to -3. Such a conclusion Synthetic molecules are useful for modulating the biological function of ICAM-3. The present invention also provides anti-ICAM-3 alone or anti-ICAM-1 and/or anti-ICAM-3. Granulocytes, lymphocytes, or Macrophor 7 using combination with ICAM-2 Concerning inhibiting cell-cell adhesion of strains. The use of such molecules allows for Methods of treating atypical and non-specific inflammation are provided. The present invention also provides anti-ICAM-3 alone or anti-ICAM-1 and/or anti-ICAM-3. By administering the combination with ICAM-2, whether or not you are infected with HIV or to inhibit HIV infection, particularly HIV-1 infection, of white blood cells in exposed individuals. Concerning treatment and prevention methods for Therefore, the present invention provides Provides treatments for diseases such as AIDS (Acquired Immune Deficiency Syndrome) caused by do. The present invention further provides an anti-ICAM-3 agent alone or an anti-ICAM-1 agent and/or or in combination with anti-ICAM'-2 agents, HIV-1 infected cells can be removed from the circulation. This invention relates to a treatment method for inhibiting migration. Therefore, the present invention provides HrV-1 Diseases such as AI[S (acquired immunodeficiency syndrome)] caused by viruses provide therapy. The present invention further provides an anti-ICAM-3 agent alone or an anti-ICAM-1 agent and/or or in combination with an anti-ICAM-2 agent in the treatment of asthma. To properly protect the host from foreign invaders such as bacteria or viruses, Leukocytes must adhere to the cell matrix. For these functions, please refer to Ei sen, Il, W., (In: Microbiology, 3rd edition, Ha rper & Row, Ph1ladelphia, @P^ (1980), pp. 290-295 and 381-41. See 8) and. Leukocytes are unable to attach to endothelial cells so that they can migrate from the circulatory system to sites of inflammation. Must be. In addition, white blood cells are , must attach to antigen-presenting cells, and finally, virus-infected cells must attach to antigen-presenting cells. It must attach to the appropriate target cells for tumor cell lysis to occur. stomach. Recently, using hybridoma technology, we have investigated the role of mediating the above-mentioned adhesion-mediated functions. A leukocyte surface molecule was identified. Simply put, it binds to the surface of white blood cells and A monoclonal antibody against human T cells (Dav jgnon, D et al., Proc, Natl ＾cad, Sci, US＾7 8:4535-4539 (1981)) and monochrome on mouse spleen cells. local antibodies (Springer, T., et al., Eur. J., Ismunol , 9:301-306 (1979)) were identified (Springer, T. Fed, Proc. 44:2660-2663 (1985)). child The molecules identified by these antibodies are Mac-1 and leukocyte function-associated antigen-1. It was called (LFA-1). Mac-1 affects macrophages, granulocytes and macrogranules. It is a heterodimer found on granular lymphocytes. LFA-1 is found on lymphocytes. (Springer, T^, et al., Immunol , Rev. 68:111-135 (1982)). these two molecules , plus a third molecule, p150. 95 (This is a similar organization to Mac-1) distribution) plays a role in cell adhesion (Keizer, G., et al. Eur, J. Immunol, 15:1142-1147 (1985)) . The above leukocyte molecule is a sugar called the rCD-18 family of glycoproteins. It was found to be a member of a related family of proteins (Sanch ez-Madrid, F. J. et al., Expert, Med, 158: 178 5-1803 (1983); Keizer, GAD. et al., Eur, J. Immunol, 15:1142-1147 (1985) ). This glycoprotein family has one alpha chain and one beta chain It consists of a heterodimer with The alpha chains of antigens are different, but the beta chains are highly conserved. (Sanchez-Madrid, F, J, Expert, 1ied , 158:1785-1803 (1983)). sugar^ The beta enzyme of the protein family (sometimes called rcD18J) is 95 kd, while the alpha chain has a molecular weight of 150 kd to 18 I found out that there are various values for 0kd (Springer, T,, Fed, Proc, 44:2660-2663 (1985)). Al of membrane protein Although the fa subunit does not show as much homolonescence as the beta subunit, it A detailed analysis of the alpha subunits of proteins reveals that they are virtually similar. I found out that they are similar. Alpha subunit of LFA-1 related glycoprotein The similarity between the 5anchez-31 and beta subunits is adrid, F. et al. (J, Exper, Med, 158:586-60 2 (1983); J, Exper, Med, 158:1785-1803 (1983)). Normal amounts of any of this family of adhesion proteins on the surface of white blood cells A group of individuals incapable of expression has been identified (Anderson, D., C., et al. Fed, Pr. c, 44:2671-2677 (1985) + Anderson, D.C. et al., J. Infect, Dis, 152:668-689(1,985)). Such individuals have “Leukocyte Adhesion Deficiency J (LAD)” (Ander son. D, C et al., Fed, Proc, 44:2671-2677 (1985); Anderson, D., C. et al., J. InfectDis, 152:668 -689 (1985)). Characteristics of LAD patients include necrosis. Dead soft tissue lesions, impaired gonad formation, and wound healing, as well as in vitro Abnormalities in adhesion-dependent leukocyte function and susceptibility to chronic and recurrent bacterial infections included. In vitro, normal granulocytes from LAD-derived in the same imperfect way as it does in the presence of CD18 monoclonal antibody. behave. That is, these granulocytes may aggregate or adhere to endothelial cells. cannot perform adhesion-related functions. But more importantly, these patients The inability of the granulocytes to attach to the cellular matrix increases the normal inflammatory response. What was observed is that it cannot be observed. The most noteworthy thing is that these LAD This is because patient-derived granulocytes cannot attach to endothelial cells in blood vessels near the inflammatory lesion. , it has been observed that the site of inflammation, such as skin inflammation, cannot be reached. child Such attachment is a necessary step for extravasation. Lymphocytes derived from these workers were injected with members of the CD18 family in vitro. The cells showed similar defects to normal lymphocytes, which were neutralized by antibodies. Furthermore, such individuals are , failed to enhance the normal inflammatory response (Anderson, D.C., et al., Fed , Proc, 44:2671-2677 (1985): Anderso n, D, C et al., J. Infect, Dis, 152:668-689 (198 5) j From these data, it was found that CD 1) If the tuber bulbs do not attach in the normal way, the immune response will be moderated. I understand. Therefore, in summary, in order to maintain the health and life of animals, other white blood cells must be The ability to adhere to cells (such as endothelial cells) is required. This adhesion involves white blood cell Requires cell-cell contact involving specific receptor molecules present on the cell surface It was discovered that These receptors allow leukocytes to interact with other leukocytes and endothelial cells. cells, and become able to adhere to non-vascular cells. cell surface receptor The molecules LFA-1, Mac-1, and p150. 95 are deeply related to each other. I know that they are connected. These cell surface receptor molecules are missing. Humans with white blood cells associated with the disease develop other clinical symptoms, including chronic and recurrent infections and incomplete antibody responses. Furthermore, because leukocyte adhesion is involved in the process by which foreign tissues are identified and rejected, understanding this process is important for solid organ transplants such as kidneys, non-solid organ transplants such as bone marrow, tissue transplants, allergies, and oncology. has significant value in the field of B. HIV infection HIV infection is the cause of AIDS. Many variants of HIV have been reported. The main ones are HIV-1 and HIV-2. HIV-1 is a chemical It is endemic in America and Europe; HIV-2 is endemic only in Africa. These viruses have similar structures and proteins with similar functions. Coats the quality. HIV infection is caused by a viral protein called rgp120. Schnittman, S., which is incorporated herein by reference, is believed to occur by binding to a receptor molecule (called rcD4J) present on the surface of T4 (rT helper) lymphocytes. , M et al., J. Immunol, 141:4] 81-4186 (1988)). This receipt After binding to the protein, the virus enters the cell, replicates, and kills the T cell in the process. Thus, the destruction of an individual's T4 cells is a direct result of l-(IV infection. Destruction of T cells impairs the ability of infected patients to fight opportunistic infections. Cancer often occurs in individuals, but this type of cancer and HIV infection In most cases, the relationship between infection and infection is unclear. Even a small reproduction of the HIV virus is fatal to infected cells, but this Such replication is typically detected in only a small fraction of T4 cells in an infected individual. Not served. Recent results suggest that viremia occurs more often than previously thought. It can be seen that the T cell infection rate is 1%. Several studies have elucidated other mechanisms by which the HIV virus mediates the destruction of T4 cells. Apart from HIV replication, HIV-infected cells can be destroyed by the action of cytotoxic killer cells. Killer cells are normally present in humans and are responsible for monitoring the host and destroying any foreign cells it encounters (such as those found in incompatible blood transfusions or organ transplants). Upon infection with HIV, T4 cells display gp120 molecules on their cell surface. Killer cells recognize these T4 cells as foreign (rather than as native cells) and therefore mediate their destruction. HIV infection can also lead to the destruction of uninfected, healthy cells. Infected cells can secrete gp120 protein into the bloodstream. The released gp120 molecules can then bind to the CD4 receptor on healthy, uninfected cells. Such binding gives the cells the appearance of HIV-infected cells. Cytotoxic killer cells recognize gp120 bound to uninfected T4 cells, recognize them as foreign, and destroy them. Mediate destruction. Yet another mechanism, of particular interest to the present invention, is that in which H2N.' causes T4 cell death through "nonnotia" formation. "Non/thium" is a multinucleated giant cell, formed by the fusion of hundreds of T4 cells. HIV infection causes infected cells to spread to other infected T4 cells or non-infected T4 cells. It has the ability to fuse with new healthy T4 cells. The function is Wound, dies quickly. Its death results in the destruction of both HIV-infected and non-H1-infected T cells. This process occurs directly in the cells of T4 cells. It is of particular interest to the present invention because it requires cell-cell contact. The ability of HIV-infected cells to form nonnotia makes it possible for these cells to fuse with healthy cells. It is suggested that he has achieved a dan. HIV infection, and especially HIV-1 infection, appears to affect cell surface expression of leukocyte integrins and cell adhesion responses mediated by these heterodimers (Petit, ^. J et al., J. Cl1n, Invest, 79:188 (1987): Hildreth, J, E, K et al., 5science 244: 1075 (1989): Valentin, A, et al., J, Immunology 144:934-937 (1 990): Rossen, R, D et al., Trans. (all of which are incorporated herein by reference). After II~7-1 infection, homotypic aggregation of U937 cells increases, as does cell surface expression of CD18 and CD11b (Petit, J et al., J, Cl1n, Invest, 79:188 (1987) ). U937 cells infected with HIV-1 are insensitive. IL-1 stimulated endothelial cells were much more likely to adhere to IL-stained U937 cells. This behavior can be suppressed by treating the endothelial matrix with anti-CD18 monoclonal antibodies or anti-CD11a monoclonal antibodies, or by treating with anti-ICAM-1 antibodies (Rossen, R.D., Trans., As5oc, American Physicians 102). :117-130 (1989)). E/clonal antibodies against CD18 or CD11a also It has been found that magglutinin (PHA) stimulated lymphoblastoid cells and the formation of synnotia containing constitutively infectious CD4 necatable T cells can be inhibited (Hildreth, J.E., Nira, 5science 244 :1075 (1989)). It was found that treating only virus-infected cells with anti-CD18 or anti-CD1 monoclonal antibodies had little effect on tumor formation. This suggests that these antibodies primarily protect uninfected target cells from infection (Hildreth, J. E., 5science 244:1075 (1989); Valentin, A. et al., J. , Immunology 144:934-937 (1990)). Valentin et al. (Valenti B A et al. J. Immunolog Y 144:934-937 (1990)) recently reported that a monoclonal antibody specific for CD18 was used to treat a continuous T cell line with HIV-1 infected U937 cells. inhibits synntia formed when cultured. We confirmed these things by showing that it harms people. The mechanism by which monoclonal antibodies specific for CD18 or CD11a prevent susceptible cells from fusion with HIV-infected cells remains unclear and is not required in the present invention, but may be useful in studies with radiolabeled gp120. It has been suggested that a heterodimer containing CD18 does not provide a binding site for the virus (Valentin, et al., J. Immunology 144:934-937 (1990)). Therefore, HIV infection requires cell-cell cell interactions and/or viruses similar to such cell-cell interactions. including cell-cell interactions. This cell-cell interaction facilitates the transport of cell-free virus across the endothelial barrier. Alternatively, transport of virus-infected cells can be carried out. Similar to cell-cell interaction Similar virus-cell interactions allow free virus to attach to healthy cells and and/or may facilitate or enable infection. Accordingly, the present invention provides, in part, that HIV infection and particularly HIV-1 infection increases expression of the CD11a/CD18 heterodimer and its binding ligand. It comes from the observation that it adds. This increased expression increases the ability of HIV-infected T cells to adhere to and aggregate with each other (i.e., “homotypic aggregation” occurs). It is important that Because such homotypic aggregation has not been seen to occur between resting normal leukocytes, this finding suggests that the CDII/CD18 receptor It is suggested that Gant, such as teracter and/or IcAM-1, is required for such aggregation. For homotypic aggregation to occur, LFAn must bind to IcAM-1. As described herein, lcAM-3 is the only ICAM family molecule expressed at high levels on resting T cells. Only anti-ICAM-3 antibodies can block T cells from adhering to L F ,A-1 unless the T cells are "activated." Therefore, anti-IC M-3 antibodies can be used to inhibit T cell aggregation. Additionally, anti-1cAM3 antibodies can be used to inhibit the adhesion process of infected T cells. This adhesion process helps H1~'-1 move from infected cells to healthy cells of an individual and helps or facilitates the infection of healthy cells with free virus. Migration and dissemination of leukocytes is important in protecting individuals from infectious diseases. However, these processes also play a role in the migration and dispersal of virus-infected leukocytes. Of particular concern is the migration and dispersal of HIV-infected white blood cells. Ru. This migration of cells results in the formation of extravascular foci and the formation of tumors and and other abnormalities. Histological examination of affected organs reveals focal extravascular mononuclear cell infiltrates. It's turning into a crab. Virus-infected cells in such infiltrates within the central nervous system Attempts to identify cells revealed the presence of HIV-1 infected cells. child These studies found that the HIV-1 virus resides in monocytes and macrophages, as well as other cells of this lineage (R, T. Johnson et al., FASEB J, 2:2970 (1988)). ; M, H, 5toler et al., J. Mer, Med, As5n, 256:2360 (1986); S, Gartner et al., 5science 233:215 (1986)). The mechanism that stimulates the formation of extravascular infiltrates of HIV-1-infected monocytoid cells remains unknown. I didn't really understand it. This mechanism is responsible for the transport of viruses released from cells. or the transport of the virus across the endothelial barrier within the cytoplasm of infected mononuclear cells. may include any deviation. HIV-1 infection causes leukocyte adhesion to vascular endothelial cells and leukocyte concentration in the blood. expression of cell surface molecules that promote migration from cells to extravascular tissue sites (C, f, Sm1th et al., J, Cl1n, Invest, 82:1746 (1 988), which is incorporated herein by reference). Therefore, it has been proposed to use antibodies that inhibit cell migration to prevent dissemination of HIV-infected cells (1090/13316). D. Asthma Clinical Features Asthma is a heterogeneous family of diseases. Asthma is characterized by tracheobronchial hyperresponsiveness to stimuli (Kay, A.B., Llergy and Inflao+mation, Academic Press, NY (1987); incorporated herein by reference. ). Clinically, asthma is Narrowing of the bronchial tubes, thick persistent secretions, as well as difficulty breathing, coughing, and whistling. It manifests itself as a work. Although the relationship of each of these symptoms to each other is unclear, the net result is increased airway resistance, hyperinflation of the lungs and thorax, and altered airflow distribution. abnormalities in blood flow to the lungs. This disease causes short-lived periods of acute symptoms, with periods of no symptoms. Acute symptoms can lead to hypoxia, which can be fatal. Approximately 3% of the world's population suffers from asthma. Two types of asthma have been reported: allergic asthma and idiosyncratic asthma. Allergic asthma is usually associated with inherited allergic diseases such as rhinitis, rhinitis, and eczema. Symptoms include wheals and flares positive for skin injection of airborne antigens (e.g., pollen, environmental pollutants, occupational pollutants, etc.). wheal-and-flare reactions and increased serum levels of IgE. Characterized by addition. Allergic asthma is caused by the presence of IgE antibodies in many patients. It is said that there is a causal relationship with existence. Asthma patients who do not exhibit the above-mentioned characteristics are considered to have idiosyncratic asthma. Allergic asthma relies on IgE responses regulated by T and B lymphocytes and is thought to be activated by the interaction of airborne antigens with preformed IgE molecules bound to mast cells. It is being When encountering an antigen, the anti- The source must be in sufficient concentration to produce 1gE over a long period of time in order to sensitize the individual. Once sensitized, asthmatics will respond to very low levels of the antigen and develop symptoms. Asthma symptoms can be exacerbated by the presence and increase of triggering antigens, environmental factors, occupational factors, physical work, and emotional stress. Asthma is treated with methylxanthines (such as theophylline), beta-adrenergic antagonists (catecholamines, resorcinol, saligenin, and ephemeral curcocorticoids (such as hydrocortisone), mast cell decondylation grain inhibitors (i.e., lomons such as cromolyn sodium), and anticoagulants. Can be treated with phosphorus agonists (such as atropine). Asthma is thought to be associated with an influx of eosinophils (“eosinophilia”) into the lung tissues. (Frigas, E et al., J. AIlergy C11n, Immunol, 77+527-537 (1986), which is incorporated herein by reference. (Incorporated in the detailed description) The immunological basis of asthma has been studied in bronchoalveolar lavage studies (Godard, P et al., J. Allergy C11n, Immunol, 70:88 (1982)) and in studies of epithelially exposed respiratory smooth muscle tissue (Flavahan et al. , N. A. et al., J. Appl, Physiol, 58:834 (1985): Barnes, P. J. et al., Br, J., Pharmacol, 86+685 (1985)). Obtained from Although these studies have not elucidated the mechanisms underlying the immunology of asthma, they have led to generally accepted assumptions regarding the immunological causes of this disease (Frigas, E., et al., J. .AIlergy C11n, Immunol, 77:527-537 (1 986)). The pathological hallmark of asthma is extensive infiltration of the lung parenchyma by eosinophils. destruction of mucociliary capacity. According to the so-called “eosinophil hypothesis,” obese cells in the lungs Eosinophils are attracted to the bronchi to neutralize harmful mediators released from the vesicles. It is said that it can be attached. According to this hypothesis, eosinophils are attracted to the bronchi. There, degranulation occurs and cytotoxic molecules are released. Through degranulation, eosinophils release histamine and allylsamine, which enzymatically neutralize harmful mediators of mast cells. Releases enzymes such as ruphatase and phospholipase D, etc. However, this These molecules also promote the destruction of the mucociliary machinery and thus remove bronchial secretions. This inhibits the clearing of the lungs and causes the lung damage characteristic of asthma. Since cell migration is involved in asthma, the use of antibodies that inhibit this migration has been proposed to alleviate the effects of allergens in the subject (Wo 90/], 0 453) The present invention is based on the discovery of a novel cell adhesion molecule called intercellular adhesion molecule-3 (ICAM-3). The invention further provides functional derivatives of ICAM-3, anti-ICAM-3 antibodies, humanized anti-ICAM-3 antibody fragments of this antibody, and and ICAM-3 and can inhibit the biological functions of ICAM-3. It also concerns other molecules that can be used. The invention further includes the use of all the molecules mentioned above in therapy and prophylaxis. In particular, the present invention provides ICAM-3 or its like that is substantially free of natural contaminants. including functional derivatives of. The present invention provides methods for obtaining recombinant or synthetic NA molecules that encode or are capable of expressing ICAM-3 or a functional derivative thereof. The present invention further provides the group consisting of ICAM-3 and functional derivatives of ICAM-3. Antibodies, and in particular monoclonal antibodies, are provided that are capable of binding molecules selected from the present invention. The present invention further provides Nosobridoma cells capable of producing the above monoclonal antibodies. The present invention provides an anti-inflammatory agent capable of binding to ICAM-3 or a functional derivative of ICAM-3. The present invention includes a method for preparing desired hybridoma cells that produce the desired hybridoma cells. This method is Includes the steps below. (a) Substantially pure ICAM-3, cells expressing ICAM-3, membranes expressing ICAM-3, ICAM-3 bound to a carrier, peptide flag of ICAM-3. (b) immunizing an animal with an immunogen selected from the group consisting of a peptide fragment of ICAM-3 bound to a carrier, or a peptide fragment of ICAM-3 bound to a carrier; (C) converting the fused spleen and myeloma cells into antibody-secreting/hybridoma cells; (d) screening the hybridoma cells to determine whether the hybridoma cells can produce anti-ICAM-3 antibodies; The process of finding cells. The present invention also provides methods for modulating IcAM-3-mediated biological functions of cells. provide The method includes providing an effective amount of an ICAM 3 modulator to a subject in need of such treatment. Here, the ICAM-3 modulating agent is an antibody capable of binding to ICAM-3; a fragment of the antibody, which is capable of binding to ICAM-3; and non-immunoglobulin antagonists of ICAM-3 other than molecules of the ICAM-1, IcAM-2, or CD-18 families. The invention further provides methods of treating specific inflammation in humans and other mammals. provide This method provides sufficient anti-inflammation treatment to subjects requiring such treatment. including providing adequate amounts of anti-inflammatory agents. Here, the anti-inflammatory agent is an antibody capable of binding to ICAM-3, a fragment of the antibody, and capable of binding to ICAM-3. fragment; substantially pure ICAM-3; functional induction of ICAM-3 or non-immunoglobulin antagonists of ICAM-3. selected. Here, the inflammation is the result of a solid organ transplant (eg, kidney), a non-solid organ transplant (eg, bone marrow), or a tissue transplant. The invention also provides methods of treating non-specific inflammation in humans and other mammals. provide This method provides sufficient anti-inflammation treatment to subjects requiring such treatment. including providing adequate amounts of anti-inflammatory agents. Here, the anti-inflammatory agent is an antibody capable of binding to ICAM-3, a fragment of the antibody, and capable of binding to ICAM-3. a functional derivative of ICAM-3; or a non-immunoglobulin antagonist of ICAM-3. The present invention further includes methods of treating inflammation as described above, where the inflammation is associated with the following conditions: In other words, the symptoms may be Adult Respiratory Distress Syndrome 1 sepsis, trauma, or bleeding. multiple organ injury syndrome derived from the disease, reperfusion injury of the myocardium or other tissues, acute glomerulonephritis9 reactive arthritis, skin disease with an acute inflammatory component: acute purulent meningitis or other central nervous system inflammatory diseases such as stroke, *11 injury; hemodialysis. Leukocyte-depleted transfusion, ulcerative colitis, localized ileitis: necrotizing enteritis, granular transfusion-related selected from the group consisting of linked syndromes, and cytokine-induced toxicity. The invention also includes a method of inhibiting metastasis of hematopoietic tumor cells. This cell utilizes members of CD-1,8 (particularly LFA-1) for migration. This method Providing patients in need of such treatments with sufficient doses of drugs to suppress metastasis. including. Here, this drug includes an antibody capable of binding to ICAM-3, and a toxin of the antibody. non-conjugated product (derjvation); a fragment of the antibody that is capable of binding to IC78M-3; a toquinone-conjugated product of the fragment; substantially pure ICAM-3; toquinone-conjugated ICAM-3; ICAM A functional derivative of ICAM-3, a conjugate of a functional derivative of ICAM-3, or non-immunoglobulin antagonists other than members of the CD-18 family of molecules. selected from the group consisting of: The invention also includes methods of inhibiting the proliferation of tumor cells expressing ICAM-3. This method provides patients in need of such treatment with a sufficient amount of the drug to inhibit growth. including providing an agent. Here, the drug is an antibody capable of binding to ICAM-3, a toquinone conjugate of the antibody, or a fragment of the antibody that binds to ICAM-3. Fragments that can be combined, conjugates of the fragments, and immobilized on proteins. and a member of the CD-18 family of molecules, or a functional derivative of a member of the CD-18 family of molecules that is bound to a toxin. The invention also provides methods of detecting the presence of cells expressing ICAM-3. This method includes the following steps. (a) Incubating cells or cell extracts in the presence of a nucleic acid molecule, the nucleic acid molecule being a molecule capable of hybridizing to ICAM-3 mRNA. (b) determining whether the nucleic acid molecule hybridizes with a complementary nucleic acid molecule present in the cell or in the cell extract. The present invention also provides a method of detecting the presence of IcAM-3 in a biological fluid sample. This method includes the following steps. (a) incubating the sample with an antibody or fragment thereof capable of binding ICAM-3; and (b) detecting whether the antibody binds to the sample. The present invention also provides a pharmaceutical composition comprising: (a) binding to ICAM-3; antibodies capable of binding to ICAM-3, fragments of said antibodies capable of binding to ICAM-3; Substantially pure ICAM=3: a functional derivative of ICAM-3. Alternatively, a non-immune member of ICAM-3 other than a member of the CD-18 family of molecules may A drug selected from the group consisting of epiglobulin antagonists and an immunosuppressant. Brief description of the drawings Figure 1. Adhesion of cell lines to purified LFA-1 Cell lines to purified LFA-1 (A) and lymphocyte (B) adhesion to ICAM-1, ICAM-2, and ICAM-1. CAM-3i: Cause. LFA-1, ICAM-1, ICAM-2, and I LFA-1 coated bimer in the presence of blocking MAb specific for CAM-3. Binding of BCECF labeled cells on microtiter wells. control web The cells were coated without LFA-1. (A) Lymphoblastoid cell line was treated with saturating amount of MAb RRI/1 (anti-ICAM-1 , MAb CB-IC2/1 (anti-ICAM-2), MAb CBR-IC3/1 (anti-ICAM-3) or unbound control MAb X63 (thin line) and then FITC-anti-mouse immunoglobulin. (B ) Resting human leukocytes and 3-day PHA-activated lymphocytes were analyzed for ICAM expression. It was analyzed. Figure 3. Immunoprecipitation of ICAM-3 (A) I2J-labeled cell lysates were mixed with unbound control X63 or M It was immunoprecipitated with Ab CB-IC3/1 (anti-■ cAM-3). (BP257-labeled 5KW3 cell lysate with N-glycanase (+) or was treated with no (-), unbound control MAb X63, MAb W6/ 32 (anti-HLA ASB, C), MAb RRI/1 (anti-ICAM-1) , MAb CBR-IC2/1 (anti-1cAM-2), certain L'l;! MAb C Immunoprecipitation was performed with B-IC3/1 (anti-ICAM-3). Figure 4 Immunoprecipitation of ICAM-3 from different I251-labeled lymphocytes and ICAM-3 from medosphere lysates was immunoprecipitated using mAb-conjugated Sepharose. did. Immunoprecipitated ICAM-3 was separated by polyacrylamide Kel electrophoresis. I let go. Ike's mAb was used to immunoprecipitate other cell surface molecules. 1g human Sepharose (control lane), CBR-IC2/1 (ICAM) 2), CBR-IC3/1 (ICAM-3), TS2/4 (LFA-1 ), LM2/1 (MAC-1). The ability of 5KW3 cells to bind to purified ICAM-1 and ICAM-3, if The effect of PMA stimulation on this binding was tested as described in the literature. Stin et al., Nature 341:6]9 (1989) + Marlin et al. , Ce1l 51:813-819 (19g?))B One representative result is shown. The line showing the error shows the standard deviation (SD) PM Ai11-enriched 5KWll cells bound to purified ICAM-1 or ICAM-3. Various antibodies were tested for their ability to block binding as described in the literature. Dustin et al., Nature 341:619 (1989): Marlin et al., Ce1l 51:8]3-819 (1987)), 1 One representative result is shown. The line showing the error shows the standard deviation (SD) There is. Figure 7. Binding of CO5 transductants to purified ICAM's as described in the literature. CO8 cells were transfected with LFA-1 expression vector (deF Ougerolles et al., J. Exp. Med, 175:185-190 (1992)). Presence or absence of anti-LFA-1 antibody (TSI/22) Below, the ability to bind to immobilized ICAM-1 and ICAM-3 was tested. Transfected cells were tested. One representative result is shown. error Lines showing SD indicate PMA stimulation at 4°C, 16°C, 22°C, and 37°C. Regarding the binding ability of purified 5KW3 cells to purified ICAM-1 and ICAM-3. and tested as described in the literature (Marlin et al. Ce1l 51:81 3-819 (1987)). The assay uses LFA-1 mAb (TSI/2 2) in the presence or absence of. One representative result is shown. The line indicating the error indicates the SD. Figure 9. Blocking of PHA-stimulated T cell division with antibodies Various antibodies were tested for their ability to block cell division as described in the literature. tested (Krensky et al., J. Ima+uno1. 131:611-6 16 (1983)). Figure 10. Effect of anti-ICAM antibody on the reaction of mixed lymphocytes Various antibodies were tested for their ability to block reactions as described in the literature. (Krensky et al., J. Immunol, 131:611-616 ( 1983)). Figure 11. Gas chromatography of peptide fragments of ICAM-3 ICAM- 3 was purified and digested with LVS-C. Peptide fragments were purified using high-performance liquid chromatography. Separated by chromatography. Figure 12 Schematic diagram of clone 112 Clone 11. Schematic diagram of 2. Location of NK-10 and NK-17 peptides, obtained Various NA sequences and transmembrane regions are shown. Figure 13. Sequence comparison between NK-10-order sequence and human ICAM-1 NK-10-order sequence To identify sequence homology between the sequence and the human ICAM-1 protein, the GA P program was used. Figure 14. Sequence comparison between RM13-order sequence and human ICAM-1 RM13-i&sequence To identify sequence homology between the sequence and human ICAM-1, the GAP program I used the system. Figure 15. Sequence comparison between RM13-order sequence and Hi-eye CAM-2 RM13-order sequence and Hi-eye CAM-2 The GAP program was used to identify sequence homology with ICAM-2. there was. Figure 16 Sequence comparison between T7-order sequence and human ICAM-1 T7-order sequence and human IC The GAP program was used to identify sequence homology with AM-1. Figure 17. Sequence comparison between T7-order sequence and human ICAM-2 T7-order sequence and human IC The GAP program was used to identify sequence homolons with AM-2. Figure 18. Partial sequence of ICAM-3 The DNA sequence of clone 112 was determined by a conventional method. A, Sequence obtained from the 5° end of ICAM-3. These sequences are clone 11 ．． 2 was primed with T7 primer. B, Sequence obtained from within the ICAM-3 gene. These sequences are clone 112 The 3' end of 6,C,ICAM-3 obtained by priming with NK-]Q probe The array obtained from These sequences were obtained by converting clone 112 with the reverse RM13 primer. Primed and obtained. Description of preferred embodiments The present invention is based on the discovery of a previously unidentified binding ligand for LFA-1. I'm there. Molecules such as the CD-18 family involved in the process of cell adhesion are called "adhesion molecules". 1.LFA-1 Leukocyte adhesion molecule LFA-1 is involved in a wide range of lymphocytes, in immunity and inflammation. Mediates interactions of monocytes, natural killer cells, and granulocytes with other cells (Springer, TA, et al, ^nn, Rev, Immunol, 5+ 223-252 (1987)). LFA-1 includes ICAM-1, ICAM-2, and the newly identified ICAM -3 (which is disclosed herein). These surface areas It is expressed constitutively in some tissues and induced by inflammation in others. (Marlin, S, D et al., Ce1l 5]:813-819 (]Qg? ): Dustin, l11. L, L, JImmunol, 137:24 5-254 (1986) + Dustin, M, 1. , et al., ImmunoL Today 9:213-2P5 (1988) + U.S. Patent Application No. 071 filed on February 26, 1987 No. 019°440, and U.S. Patent Application No. 0, filed September 28, 1988. 7/250. No. 446, both applications are incorporated herein by reference. ) Antigen-specific and antigen-independent T cytotoxicity, T pelper, natural cytotoxicity LFA-1 in its interactions with other cell types, granulocytes, and monocytes. works (Springer, TA et al., ^nn, Rev, Immuno L, 5:223-252 (1987); Kishimoto, T. ^dv, Immunol, (1988, in press)). ICAM-1 varies in size from 76 to 114 kD on different cells. It is a single-chain glycoprotein with five C-like domains. (Dustin, M, L et al., Immunol, To day 9:213-215 (1988): 5taunton, D, E et al. , Ce1l 52:925-933 (198g): Sjmmons, D, et al. Nature 331:624-627 (1988)). ICAM-1 is I Cytokines including FN-g, TNF, and L-1 target a wide range of cell types. (Dustin, M, L et al., Immunol, To daY 9:213-215 (1988)). epithelial cells, endothelial cells, and By inducing ICAM-1 on lymphocytes and fibroblasts, lymphocyte LFA-1 Dependent adhesion is mediated (Dustin, LL et al., J. Immunol. 137:245-254 (1986): Dustin, M. L. et al., J. Ce11. Biol, 107:321-331 (1988) + Dus Amashi B kl, L et al., J. Exp, Med, 167:] 323-1340 (19 88)). Adhesion can be achieved by pretreating lymphocytes with LFA-I MAb or by is blocked by pretreating other cells with ICAM-I MAb ( Dustin, M.L., et al., J. Iwunol, 137:245-254 (1986); Dustin 9M, L et al., J, Ce11. Biol , +07:321-331 (1988): @Dus tjn, M, L et al., J, Exp, Med, 167:1323-1340 (1988)). Using purified ICAM-1 in an artificial membrane or on a Petri dish The same result is obtained even if LFA=1 and ICAM-1 are has been shown to be a scepter (Maraine, S, D et al., Ce1l 5 ]: 8] 3-819 (1987): Makgobal M, W et al., Nat. ure　331:86|8 8 (1988)). For distinction, these are referred to as "receptors" and "receptors," respectively. called "ligand". For ICAM-1, U.S. Patent Application No. 0710 45°963, No. 07/115. No. 798, No. 07/155. No. 943, No. 0 7/189. No. 815 or No. 07/155. It is also stated in No. 446, These are incorporated herein by reference in their entirety. IIl, ICAM- The existence of an LFA-1 ligand other than ICAM-1 was predicted (Rothl et al. ein, Ill et al., J, I [Immunol, 137:1270-1274 ( 1!1186): Makgoba, M, W et al., Eur, JAI mmunol, 18:637-640 (198g): Dustin, LL et al., J., Ce11. Bjol, 107:321-331 (1988)). same The second LFA-1 ligand identified is named rIcAM-2J. ICAM-2 is highly effective in terms of cellular distribution and lack of cytokine induction. , is different from ICAM-1. ICAM-2 has two Ig-like domains. ICAM-1 is an essential membrane protein with five Ig-like domains. (Staunton, D, E et al., Ce1l 52:925-933 (1988): Simmons. D. et al., Nature 331:624-627 (1988)). In particular, I CAM-2 is closely related to the two most N-terminal domains of ICAM-1. (34% identical), and this percentage is higher than ICAM-1 or ICAM-2 (34% identical). Also greater than for members of the 1g superfamily. From this, the same A subfamily of Ig-like ligands that bind to the same integrin family receptors. It turns out that this is true. ICAM-2 is described in U.S. patent application Ser. No. 07/454. Also mentioned in issue 295 , which is incorporated herein by reference. IV, ICAM-3 The present invention relates to the discovery of a third LFA (ligand), rICAM-3J. The development of MAb against ICAM-2 has shown that the previous LFA-1 dependence, ICAM- 1-independent phenomena were analyzed and the existence of a third ligand of LFA-1 was demonstrated. It was suggested that of several cell types, including epithelial and endothelial cells. Binding to LFA-1 was determined by the combination of ICAM-1 and ICAM-2 MAbs. can be more completely blocked, whereas ICAM-1, ICAM-2 independent The pathway for LFA-1 is also linked to multiple ( present in lymphoid cell lineages (Fig. 1). To investigate the characteristics of this adhesion pathway, we induced MAb against 5KW3 and Together with CAM-1 and anti-ICAM-2 MAbs, this cell line binds LFA-1. screened for its ability to inhibit Complete this new adhesive route One MAb, CBR-IC3/1, was selected, which inhibits (Figure 1). Adhesion of 5KW3 to purified LFA-1 was determined by blocking side holes ICAM-1 and and anti-ICAM-2 MAb combination. When only anti-ICAM-3 MAb CB, IC3/1 was added, adhesion was sufficiently inhibited. , was completely inhibited by combination with blocking anti-ICAM-2 MAb. Therefore, the adhesion of 5KW3 to purified LFA-1 is mainly due to ICAM-3. mediated by ICAM-2. Different patterns of MAb inhibition Therefore, each of the four cell lines had different adhesion to LFA-1. However, they used these three ICAMs in different proportions. B lymphoblastoid cell line The adhesion of JY occurs mainly through the ICAM-1 pathway and only slightly through the ICAM-2 pathway. and by the ICAM-3 pathway. The SLA of other B lymphoblastoid cell lines is ICA Both M-1 and ICAM-3 were used. This is because the adhesion is ICAM-IM It was not inhibited by either Ab or ICAM-3 MAb alone, but both This was demonstrated by almost complete inhibition when used together with MAb. Thymus enlargement The cell system, Jurkat, uses both the ICAM-2 and ICAM-3 adhesion pathways. However, it was slightly dependent on ICAM-1. Resting T lymphocytes and phytohemaglu Adhesion of T lymphocytes activated with tinin (PHA) was also examined (Figure IB ). It has been described in the literature that resting lymphocytes strongly bind to purified LFA-1. (Dustin et al., Nature 341:619-624 (1989 )), and this binding was found to be strongly dependent on ICAM-3. Activation by PHA induces ICAM-1 expression, which in turn induces LFA-1 Adhesion to is mainly caused by ICAM-1 and partially by ICAM-3. Ru. The ICAM-2 component of adhesion in both resting and activated T cells is detectable. degree, but was masked by the presence of ICAM-1 and ICAM-3. For each cell, at least two ICs are required to achieve substantial inhibition. Using ICAM required a lot of effort as MAb against AM was required. It takes. A notable exception to this is the adhesion of resting lymphocytes to LFA-1. However, this adhesion was mostly mediated by ICAM-3. in all cases , for all three anti-ICAM-MAb combinations, due to the presence of anti-LFA-IMAb. binding to LFA-1 is abolished to levels comparable to those seen in The relative affinities of the three ICAMs for LFA-1 were determined as described above. :ICAM(7) Contribution to binding to LFA-1 and immunofluorescence Comparing the cell surface expression of ICA, M measured by low cytometry. (Figure 2). Surface expression of ICAM and its effect on LFA-1 adhesion ICAM-1 has a very high affinity for LFA-1 by comparison with and that rcAM-2 and ICAM-3 have comparable low affinities. I understand. For example, Jurkat cells express ICAM-2 and ICAM-3. They were expressed at similar levels and each contributed to binding to LFA-1. ICAM-2 In cases such as JY cells, where expression is much greater than ICAM-3, LFA-1 adhesion The ICAM-2 pathway was superior to ICAM-3. On the other hand, SLA and and 5KW3 express 3 to 5 times more ICAM-3 than ICAM-2, and Not surprisingly, the ICAM-3 route of adhesion is superior to the ICAM-2 route. Ta. ICAM-3 is well expressed on resting 1926 spheres, and ■CAM-1 is not expressed. However, the adhesion to LFA-1 was mainly mediated by ICAM-3. ICAM-1 is commonly expressed in SLA, JY, and PHA-activated T cells. In such cases, ICAM-1 is the main route of adhesion. The distribution pattern of ICAM-3 is similar to that of ICAM-1 and ICAM-2. It was different. Unlike ICAM-1 and ICAM-2, ICAM-3 It was not expressed on either stopped or stimulated endothelial cells (data data not shown). This indicates whether the cells are resting endothelial cells or stimulated endothelial cells. LFA-1-dependent binding to both ICAM-1 and ICAM-2 This is consistent with the finding that it is an addictive phenomenon. ICAM-3 has some exceptions. However, it is restricted to the hematopoietic system and is highly prevalent in lymphoid and monocytoid cell lineages. It was manifesting. However, in all cases ICAM-3 on cell lines Expression is LFA-1 dependent and ICAM-1, ICAM=2-independent adhesion pathway. was collaborating with Exclusively connected to LFA-1 by ICAM-1 and ICAM-2. No expression of ICAM-3 was observed in the compatible cell lines (HUVEC, Raji); On the other hand, a cell line (JY, U937. 5 Consistent with this, the surface expression of ICAM-3 was lower in T. upT) (data not shown). (not). ICAM-3 is significantly different from ICAM-1 and ICAM-2 in terms of expression on leukocytes. The sound was quite different (Figure 2B). ICAM-3 stimulates resting lymphocytes, monocytes and and neutrophils, while ICAM-1 and ICAM-2 In comparison, ICAM-1 and IC AM-2 is poorly expressed on monocytes, and only ICAM-2 is dormant. It was present on the lymphocytes. Both ICAM-1 and ICAM-2 are It was not expressed on the mesosphere. ICA by activation of lymphocytes by PHA Expression of M-3 increased 2-3 times, and ICAM-1 expression was also greatly induced (Dus tjn et al., J. Immunol, 137:245-254 (1986)) (Figure 2B). reduced by immunoprecipitates of ICAM-3 from various +251-labeled cell lines. Under conditions 124. A dark band of 000 Mr, with a slight difference under non-reducing conditions. It became clear that the mobility increased (Fig. 3A). Treated with N-glycanase Then, the band of ICAM-3 decreases to Mr87,000, and ICAM-3 becomes ICAM-3. A highly glycolylated protein similar to CAM-1 and ICAM-2 (Fig. 3B). Biological characteristics and expression pattern of ICAM-3 ICAM-3 is distinct from previous adhesion molecules due to its structural and functional properties. Ru. Previous adhesion molecules include human homing receptor L, AM-1 (Ted der et al., J. Tmmunol, 144:532-540 (1990)) , inducible endothelial adhesion molecule VAC, AM-1 (Rice et al., J. Exp, Med , 171:1369-1374 (1990) + Carlos et al., Blood In press (1990) + (Osborn et al., Ce1l 59:1203-12 11 (1989)), and the VLA family of matrix receptors ( Deller, M, E, ^nn, Rev, Immunol. 8:365-400 (1990)). And the fourth white blood cell work No MAb with similar cellular distribution was found in the Shituba data space ( Gilks, f.R. et al., Leukocyte Typing Data Ba5e IV, 0xf ord　IJuniversity　Press,　0xfo nitпA　En grand (1990)). The presence of three LFA-1 ligands suggests that LFA-1-dependent leukocyte interactions are involved. This suggests differentiation in different aspects. ICAM-1 is basically expressed on endothelial cells and It is expressed on many epithelial cells and is involved in inflammation and immunity. (induced), controls cell positioning, and promotes specific antigen recognition (favryk et al., Immunol, Rev. 108:135 (61 (1989)). ICAM-2 is the predominant LFA on resting endothelial cells. -1 ligand, this route of adhesion is similar to normal L by tissue endothelial cells. may have important effects on the recirculation of lymphocytes bearing FA-1 (Hamann et al. , J. Immunol 140:693-699 (1988); Macka y et al., J., Exp. Med, 171:810-817 (1990): P a1s et al., J. Immu■ ol 140:1851-1853 (1988): and (Nunoi et al. Hum, Path, 19 Near 53-759 (1988j) . Currently, the function of ICAM-3 on neutrophils remains unclear. because For example, despite the presence of LFA-1, homotypic aggregation of neutrophils is primarily caused by Mac -1 dependence (Anderson et al., J. Ima+un o1. 137:15-27 (1986); Patarroyo et al., 5cand , J. I++ usunol 22:619-631 (1985)), Stop ■ Discovery that adhesion of T lymphocytes to LFA-1 is primarily caused by ICAM-3 and that ICAM-3 was more effective than other LFA-1 ligands in monocytes and resting lymphocytes. Combined with the well-expressed facts above, this suggests that A role is suggested. In fact, LFA-1+ is involved in adhesion of T cells to antigen-presenting cells. ICAM interaction is required (Dransfield et al., Imm, Rev. 114:29-44 (1990): Makgoba et al., Irnraunol , TodaY IO:417-422 (1989)). And especially IC On resting 1926 spheres that express neither AM-1 nor ICAM-2, ICA M-3 itself can play a role. In fact, allogeneic and autologous mixed lymphocyte reactions A role for LFA-1 ligands other than ICAM 1 has been proposed (Bag Nasco et al., Ce1l Immunol, 128:362-369 (19 90)), furthermore, ICAM-3 promotes antigen-specific interactions between T and B lymphocytes. It is expected to be important in action. Here, of these cells Either one is in an inactive state. ICAM-3 is also LFA- important for the lysis of specific targets by T cells, which is dependent on ICAM-1 but not on ICAM-1. (Makgoba et al., Eur. J. Immunol 18:637 -640 (1988)). The presence of multiple ICAMs makes it difficult for MAbs to ICAM or ICAM analogs to This has important implications for clinical treatment. ICAM-IMAb is an in vitro in the kidney (Cosimi et al., J. Immunol, 144:4 604-4612 (1990)) and of the heart (Flavin et al., Trans. plant, Proc, 23:533-534 (1991)). It is effective in prolonging it. ICAM-3 MAb targets different cell type subsets. In vivo, it inhibits the LFA-1-dependent adhesion interaction of and inhibit a redundant number of immune responses. V, cDNA cloning of IcAM-3 For cloning of ICAM-3 gene , any of a variety of methods can be used. In one such method, cD Shuttle vector library of NA inserts (derived from ICAM-3 expressing cells) for the presence of an insert containing the ICAM-3 gene. child For such an analysis, cells were transfected with this vector and ICAM This can be done by assaying for -3 expression. ICAM-3 cDNA is preferably used to identify adhesion molecule glue. ruffo and 5eed's method (Seed, B. et al., Proc, Natl. , Acad, 5ciUS^84/3365-3369 (1987)) Identification using the method. In this method, cells expressing ICAM-3 (SLA, J urkat, or 5KW3 lymphoblastoid cell line), live cDNA Prepare rally. Preferably, the cDNA library is prepared from T cells. Ru. This library contains cells that do not normally express ICAM-3 (e.g. Co s cells or HeLa cells). Tran The infected cells were coated with LFA-1 or anti-ICAM-3 antibody. Place in a covered Petri dish. A cell that contains the ICAM-3 encoding sequence and expresses the ligand on its cell surface. Transfected cells were incubated with LFA-1 or anti-ICAM-3 on the surface of a vetri dish. Glue to the body. Wash away unattached cells, then remove adherent cells from the vetri dish. , to culture. Determine the sequence of recombinant ICAM-3 expressing cells. When LFA-1 is used to coat Vetribrate, ICAM-1 or I Anti-ICAM-1 and anti-ICAM to prevent adhesion of CAM-2 expressing cells. -2 specific antibody is added to the Vetri dish. ICAM-1" or ICAM-2" type The adhesion of transfectants to LFA-1 coated plastics was thus determined by RR1/1, Anti-ICAM-IMAb and CBR-IC2/2, like anti-ICAM-2 MAb can be inhibited by specific antibodies. LF of cells transfected with ICAM-3 Binding to A-1 coated Vetribrate was achieved by EDTA and anti-LFA-1 MAb. However, it was inhibited by anti-ICAM-1 or anti-ICAM-2 MAb. not be harmed. Therefore, cells expressing ICAM-1 or ICAM-2 are are unable to adhere to the plate and are often washed away along with other non-adherent cells. . This enriches cells expressing ICAM-3. Other methods for obtaining the gene sequence encoding ICAM-3 are also known in the art. are well known and those skilled in the art can routinely use these methods to obtain the desired gene. Used in chin. One such method for obtaining the gene sequence encoding ICAM-3 Screens cDNA libraries or chromosomal DNA libraries To do this, oligonucleotide probes are used. In this method, the ICAM-3 protein is preferably isolated from immunostimulants well known in the art. purified using methods known in the art, and the terminal amino acid sequence is Determined by method. Alternatively, ICAM-3 can be combined with trypsin or one of L. Determine the amino acid sequence of Once a partial amino acid sequence has been determined, the preferred codons for that organism are create oligonucleotide probes based on Create degenerate probes based on combinations or use known preferred codons. Homology with ICAM-1 or ICAM-2 DNA sequences and codon condensation Create a probe using a combination of This probe can be used in chromosome libraries. It is used to screen cDNA libraries or probes. Find a sequence that hybridizes. Human aldehyde dehydrogena by techniques as described above or similar thereto. gene ()lsu, L, C et al., Proc, Natl, 8cad, S ci, tls^g2:3771-3775 (1985)), Fibronecti gene (Suzuki, S., et al., Eur, Mo1. Biol, Or gan, 14:2519-2524 (1985)), Human Strokenle. Scepter gene (Walter. P et al., Proc, Natl, Acad, Sci, USA 82 Near 88 9-7893 (1985)), and tissue-type plasminoken activator - (Pennica, D et al., Nature 301:214-221 (19 83)) was successfully cloned. Yet another method for cloning the IcAM-3 gene involves using chromosomal DNA or Preferably, the cDNA is cloned from cells expressing ICAM-3. An expression library is prepared by This library was then used with anti-ICAM -3 Screening for Metuber that can express proteins that bind to antibodies. Ru. Cloned ICAM-3 genes obtained by any of the above methods The child is operably linked to an expression vector and transferred to a bacterial, eukaryotic cell (X can be introduced to produce ICAM-3 protein. Techniques for such operations The technique is disclosed in Ilaniatis, T. et al., supra, and is well known in the art. is well known in A method using PCR for cloning the IcAM-3 gene is ICA It is said that M-3 is homolonous with ICAM-1 and/or ICAM-2. Assumptions are made. Based on the conserved sequences between ICAM-1 and ICAM-2 Polymerase chain reaction using degenerate oligonucleotides made from amplification of cDNA or mRNA is performed using This cDNA or mR NA is 5KW3, which is known to express ICAM-3 protein. It is derived from tonsil-like cells (de Fougerolles et al., J. Ex. p, Med. 7175・+85-190 (1992)). The clones were sequenced and I Obtain full-length cDNA clones different from CAM-1 and ICAM-2. used for With any of the above methods, you can determine whether a clone is genuine by using a full-length clone. expressed in e.g. CO8 cells and reacted with ICAM-3 mAb. This was confirmed by examining the gender. The present invention further provides ICAM-3, its "functional derivatives", its "agonists", ”, and “antagonist” purposes. A, functional derivative of ICAM-3 A "functional derivative" of ICAM-3 means a "functional derivative" of ICAM-3 that has substantially no biological activity Compounds with similar biological activity (either functional or structural) Ru. The term "functional derivative" includes "fragments" of the original ICAM-3 molecule; Includes "variants" and "chemical derivatives." A “fragment” of ICAM-3 is a fragment of any polypeptide of this molecule. I say "Buse" and "T". have ICAM-3 activity and are soluble (i.e., not membrane bound) ) is particularly preferred. soluble fragment is preferably achieved by deleting the membrane-spanning region of any molecule. or substitute hydrophilic amino acid residues in place of hydrophobic amino acid residues or delete them. It is created by Identification of such residues is well known in the art. There is. of domain 1 (DI), DI and D2, Dl-3, Dl-4, and Dl-5. Fragments containing several complete Ig-like domains such as Ig-like domains are preferred. A “variant” of ICAM-3 refers to either the complete molecule or a fragment thereof. A molecule that has substantially the same structure and function as a molecule. A molecule is "substantially similar" to another molecule if both molecules are substantially the same. have similar structures or both molecules have similar biological activities This is the case. Therefore, if two molecules have similar activities, they are It is considered to be a variant as referred to herein. This means that one molecule is attached to the other molecule. If it has a structure that cannot be found, or the sequence of amino acid residues is not the same The same can be said for cases. In the present invention, a molecule is a "chemical derivative" of another molecule when it is a natural molecule. may contain additional chemical components not normally found in This kind of growth The fraction can be one that improves the solubility, absorption, biological half-life, etc. of the molecule. child These components may also reduce the toxicity of the molecule or add some desired properties to the molecule. It may eliminate or attenuate unwanted side effects. This kind of effect Components that can mediate include Remington's Pharmaceutical 5 sciences (1980). Molecules ``linked to a compound'' constitute a special class of ``chemical derivatives.'' A molecule that is “toxin-bound” is a molecule that is covalently bound to a toxin component (ICAM- 3 or anti-ICAM-3 antibody, etc.). By combining these components into molecules, Methods for doing so are well known in the art. The binding of such molecules to cells causes the quinone component to become very close to the cell. delivered, thereby promoting cell death. Use all suitable toxin components I can. However, for example, su/toquinone, cholera toxin, shifteria toxin, Preferred are toquinones, lannoisotopequinones, or membrane channel-forming toquinones. Often used. Functional derivatives of ICAM-3 of up to about 100 residues can be conveniently synthesized in vitro. can be prepared. If desired, such fragments can be prepared using methods known in the art. can be modified using methods. Modifications can be targeted to purified or crude proteins amino acid residues and organic inducing agents that can react with specific side chains or terminal residues. It will be made to respond. The resulting covalent derivatives contain residues important for biological activity. Can be used to identify groups. Many methods have been used to generate and isolate fragments of ICAM-3. It can be done. - ICAM-3 to a water-insoluble support using conjugation with a bifunctional agent Can be crosslinked to the matrix. Alternatively, charcoal activated with bromide Reactive water-insoluble matrices such as hydrogen oxide, and U.S. Pat. No. 3.969 ．． No. 287, No. 3. 691. 01. No. 6: No. 4. 195. No. 128, No. 4247 ．． No. 642: No. 4. 229. No. 537: and No. 4,330. As stated in No. 440 A reactive substrate is used for protein immobilization. Functional derivatives of ICAM-3 with modified amino acid sequences may also be referred to as ICAM-3. It can be prepared by mutating the DNA encoding 3. A machine like this Functional derivatives include, for example, residues deleted from the amino acid sequence of ICAM-3. Including residues, insertions, or substitutions. The final construct is Any combination of deletions, insertions, and substitutions can be used as long as it has the desired activity. It can be used to make the final construct. Obviously, functional Mutations in the DNA encoding the derivative are placed in sequences outside the reading frame. should not be used, and preferably should not be complementary, such as creating secondary structure of the mRNA. (EP Patent Application Publication No. 75. 444). At the genetic level, functional derivatives are site specific to the DNA encoding ICAM-3. Introduction of mutations and thereby the creation of DNA encoding functional derivatives; and subsequent expression of the DNA in recombinant cell culture.　 The site where the mutation will be introduced in the amino acid sequence is determined in advance, but the mutation itself is not. There is no need to decide in advance. For example, by appropriately performing mutations at predetermined positions. In order to Many derivatives can be created by targeting a target codon or target region. Then this Derivatives are expressed and screened for appropriate combinations of desired activities. Already The technique of creating mutations at predetermined sites in a known DNA sequence is well known. For example, there is site-directed mutagenesis. The preparation of functional derivatives of ICAM-3 herein preferably includes ICAM-3 Alternatively, site specificization of the DNA that coats the functional derivative of ICAM-3 prepared previously. This is done by introducing different mutations. Such site-directed mutagenesis technology is Well known in the field, Maniatis, T. et al. Cloning, a Laboratory Manual, Coldsp as described in publications such as Ring Harbor, NY (1982). , the disclosure of which is incorporated herein by reference. By site-directed mutagenesis uses a specific oligonucleotide sequence encoding the DNA sequence of the desired mutation. Functional derivatives of ICAM-3 can be created by Deletion, insertion, or substitution of amino acids using site-directed mutagenesis I can do it. Amino acid sequence deletions generally range from about 1 to 30 residues. , more preferably 1 to 10 residues, typically each adjacent to There is. The most preferred deletions are those made to create a soluble form of ICAM-3. It is. The soluble form of ICAM-3 is most preferably incorporated into the membrane of ICAM-3. Either the spreading region or the hydrophobic region in ICAM-3 could be severely damaged. made by. Amino acid insertions include one or more amino acids in the CAM-3 code sequence. Inserting residues and creating polypeptides of virtually unlimited length and fusions at the termini. including matching. Insertions within the sequence (e.g., within the complete ICAM-3 molecule sequence) insertions into) may generally range from about 1 to 10 residues, and are preferred. There may be from 1 to 5 residues. Examples of terminal insertions include a single heterologous or homologous sequence is fused to the N-terminus of the molecule and released from the recombinant host. This includes promoting the secretion of derivatives of. A third group of functional derivatives are those in which one or more amino acid residues of the ICAM-3 molecule one in which it has been removed and a different residue inserted in its place. child Preferably, substitutions such as If desired, made according to the table below. (Margin below) Substantial changes in functional or immunological properties may occur in more conservative than those listed in Table 1. This is done by choosing a low displacement. That is, (a) the poly of the region of substitution Peptide backbone structure, e.g. notebook or helical conformation, (b) the charge or hydrophobicity of the molecule at the target site; or (C) the portion of the side chain. This is done by selecting residues that have significantly different effects on the retention of . one Generally, less conservative substitutions include (a) replacing glycidi and/or proline; Substitute, delete, or insert other amino acids. (b) Hydrophilic residues Replacement with a hydrophobic residue: (C) Replacement of the Nstein residue with any other residue ffi<　; (d) Substituting a residue with an electropositive side chain for a residue with an electronegative charge. or substitute an electronegative charge for a residue with an electropositive side chain. (9 or (e) place residues with large side chains with such side chains. Substitute in place of residues that do not have or even in place of residues with large side chains, Say that you put a residue that has no such side chain. Most preferred are substitutions that affect the solubility of ICAM-3. like this This can be achieved by placing a hydrophilic amino acid residue in place of a hydrophobic amino acid. be done. Mutants designed to increase the affinity of ICAM-3 include ICAM-1. or by introducing amino acids that exist in similar positions to ICAM-2. obtain. Similarly, N-bonded CH at a similar position to ICAM-1 or ICAM-2 Mutant ICAM-3 molecules lacking O can be prepared. How do specific substitutions, deletions, or insertions affect the biological activity of ICAM-3? It is difficult to predict accurately before actually doing it. However, for those skilled in the art, It is clear that such effects can be assessed in routine screening assays. Ru. For example, derivatives typically include the DN encoding the native ICAM-3 molecule. Created by linker scanning site-directed mutagenesis of A. Next, this induction The body is expressed in a recombinant host and optionally, e.g. by immunoaffinity cloning. Purified from cell culture by matography. The activity of the cell lysates or purified derivatives is then tested using a suitable screening assay. and screen to select those with the desired properties. For example, certain The immunological properties of functional derivatives, such as their affinity for antibodies, may Measured by assay. Changes in immunomodulatory activity are measured by appropriate assays. do. Redox or thermal stability, biological half-life, hydrophobicity, protein content Proteins such as susceptibility to degradative digestion or tendency to aggregate with carriers or into multimers Alteration of protein properties is assayed by methods well known to those skilled in the art. . B. Agonists and antagonists of ICAM-3 Enhances or increases the ability of ICAM-3 to perform any of its biological functions. A compound that An example of such an agonist is the cellular receptor for ICAM-3. It increases the binding ability to. An “antagonist” of ICAM-3 means any biological agent of ICAM-3. Compounds that reduce or impede the ability to perform functions. such antagonists Examples include ICAM-1 and ICAM-2, ICAM-1 and ICAM-2 machines. functional derivatives, anti-ICAM-3 antibodies, anti-LFA-1 antibodies, and the like. For cell aggregation assays, see U.S. Patent Application No. 071045. No. 963: 07゜ 115. No. 798 +07/155. No. 943; 07/189. No. 815 or 07/250. No. 446, all of which are incorporated herein by reference. It is used as a reference. Such assays allow measurement of LFA-1-dependent aggregation. Therefore, drugs that affect the extent of ICAM-3/LFA,-1 aggregation are can be used to define Thus, this assay demonstrates that the agonist of ICAM-3 can be used to identify antagonists and antagonists. The antagonist is L FA-] or may act to impair the ability of ICAM-3 to mediate aggregation. In addition, non-immune clopurine (i.e. chemical) agents can be used as described above. to determine if they are agonists or antagonists of ICAM-3/LFA-1-mediated aggregation. It can be determined whether the Such agglutination assays typically involve PHA This is done using peripheral T cells stimulated with Therefore, peripheral blood 1, F A -1 Binding to is used to assay ICAM-3 mediated aggregation. C anti-ICAkj-3 antibody Preferred immunocloblinoantconists of the invention are disclosed herein. , CBR-IC3/1 and other antibodies against ICAM-3. Other suitable anti-I CAM-3 antibodies can also be obtained in a variety of ways. Antibodies against ICAM-3 (or functional derivatives of ICAM-3) It can be either local or monoclonal. Furthermore, the antibodies of the present application by any method known in the art or by the U.S. Receiving Office on April 22, 1991. PCT Application No. PCT/US91102942 and PCT/U filed in It can be humanized by the method disclosed in S91102946. The anti-ICAM-3 antibody can be prepared using ICAM-3 or its peptide fragment. can be created by introducing it into a specific animal. Immunized animals are treated with Produces reclonal antibodies. Using a peptide fragment of ICAM-3 , the epitope contained in the peptide fragment used to immunize the animal It is possible to obtain region-specific antibodies that react only with (single or multiple) . Alternatively, anti-ICAM-3 antibodies can be used to target ICAM-3 that is naturally expressed on the surface of lymphocytes. It can be made using AM-3. These cells are injected intraperitoneally into a suitable animal. When introduced, an antibody capable of binding to a single molecule of the ICAM-3 or CD-18 family is produced. If desired, the serum of such animals can be removed and combined with these molecules. It can be used as a raw material for polyclonal antibodies capable of binding. Alternatively, the anti-ICAhi-3 antibody is described by 5elden, R,F, (European Patent Publication No. Application Publication No. 289. No. 034) or 5elden, R, F et al. (Scientific CE 236:7] 4-718 (1987)). Details Specifically, cells of a suitable animal (e.g. mouse) are injected with the complete ICAM-3 molecule. Alternatively, transfect a hector capable of expressing the fragment. that animal immune response in the animal by N1-3 production to IC in transfected cells of is induced, and anti-ICA-1-3 antibodies are produced by the animal. However, from animals immunized by any of the above methods, spleen cells were removed and IC It is preferred to generate monoclonal antibodies capable of binding AM-3. - Screen the hybridoma cells obtained as above using various methods. , identify hybridoma cells that secrete antibodies capable of binding IcAM-3. In a preferred screening assay, such a molecule is capable of releasing IcAM-3. Nobu 7 that inhibits cell aggregation that does not express ICAM-1 and ICAM-2 Identified by We will further screen for antibodies that can inhibit such aggregation. Therefore, certain molecules inhibit such aggregation by binding to ICAM-3. or by binding to a single member of the CD-18 family. Determine if it will inhibit the collection. In such screening, ICAM Any method that can distinguish CD-3 from other CD-18 families can be used. subordinate For example, antigens that can bind to antibodies can be immunoprecipitated and It can be analyzed by electrophoresis. These antibodies are linked to molecules of the CD-18 family. The distinction between antibodies that bind to ICAM-3 and antibodies that bind to ICAM-3 is based on the LFA of the antibody. -1-expressing cells but not ICAM-3-expressing cells (or its ability to bind to ICAM-3-expressing cells) This is possible by screening for the opposite). cells expressing LFA-1. The ability of antibodies to bind to cells expressing ICAM-3 is well known to those skilled in the art. can be detected by the method described. Such methods include immunoassays, especially , immunofluorescence-based assays), cell aggregation, filter binding studies, antibody precipitation, etc. is not included. In a preferred method, the antibody binds to cells expressing ICAM-3; Those with the ability not to bind to cells that do not express 3 are selected. In addition to the above-mentioned agonists and antagonists of ICAM-3, in the present invention Ike's drugs that can be used to treat inflammation, HIV infection, asthma, etc. include anti-IC drugs. Anti-idiotype antibodies against AM-3 antibodies and receptor molecules, or I Included are fragments of such molecules that are capable of binding CAM-3. The anti-idiotype antibodies of the invention can be used in competition with (or in the exclusion of) ICAM-3. ) can be combined. Such antibodies include, for example, anti-ICAM-3 antibodies. to the ability of ICAM-3 to bind to one of the natural glue-gants. can be obtained by screening for Molecules of the CD-18 family are capable of binding to ICAM-3; Molecules such as rhodimers, or molecules consisting only of alpha or beta subunits, or or molecules with fragments of both or one subunit). In binding to ICAM-3 present on cells, other It will compete with cells. The anti-V cluster antibodies of the invention can be identified and titered in a variety of ways. For example, an antibody binds to ICAM-3-expressing cells (such as T cells), and The ability to not bind to cells that do not express AM-3 can be measured. of cell aggregation A suitable assay is described in US Patent Application No. 071045. No. 963, No. 07/115. No. 798: No. 07/115,943; No. o7/189. No. 815; or No. 07/250. No. 446, all of which are incorporated herein by reference. It has been used as a reference. Alternatively, antibody ICAM-3 or ICAM-3 vector The ability to bind petite fractions can be measured. As is clear to those skilled in the art , the above assays provide a variety of possible screening assays. The steps may be modified or performed in a different order for different purposes. These assays use an antibody capable of binding ICAM-3 and a CD-18 antibody, respectively. It is possible to identify and distinguish between antibodies that can bind to molecules of member members of the amily. Ru. D Preparation of the drug of the present invention The agents of the present invention can be used to induce natural processes (e.g., animals, plants, fungi, bacteria, etc.). inducing CAM-3 to produce a non-immunoglobulin antagonist; Alternatively, animals can be directed to produce polyclonal antibodies capable of binding IcAM-3. 9 synthesis methods (e.g., ICAM-3, functional induction of ICAM-3) ICAM-3 protein antagonists (immunoglobulin or synthesis of non-immune clopurins), hybridoma technology (e.g. for example, by creating a monoclonal antibody capable of binding to ICAM-3), or Recombinant techniques (e.g., transfection of the agents of the present invention into various hosts (i.e., germs, bacteria, fungi) recombinant plasmid or viral hector in cultured mammalian cells, etc.). can be obtained by preparing the medicament of the present invention). The choice of which method to use will depend on factors such as convenience and desired yield. but, One of the methods, processes, or techniques described above to make a particular anti-inflammatory agent. It is not necessary to use only one method, process, or technique, and the methods, processes, or techniques described above can be combined to obtain a drug. Agents of the invention modulate various biological activities mediated by ICAM-3 It can be used for. , to Suppression of inflammation One of the present inventions provides that ICAIV13 and its functional derivatives are derived from the CD-18 family. It originates from the ability of the 11-molecule to bind to LFA-1. ICAM- 3 can interact with members of the CD-18 family of glycoproteins. can be used to suppress (i.e. prevent or attenuate) a disease in order to Ru. The term "inflammation" as used herein refers to specific defense 111/stem responses and non-specific defense. This includes both control and stem reactions. As used herein, the term "specific defense system" refers to an immune system that responds to the presence of a specific antigen. Refers to the components of the stem. Inflammation is caused by a reaction of specific defense systems. specific protection, if mediated by, or associated with This is said to be the result of a response to the control system. Result of response of specific defense system Examples of inflammation include responses to antigens such as rubella virus, autoimmune diseases, and and T cell-mediated delayed hypersensitivity reactions (e.g. Manto-Q lantaux) (found in individuals who test “positive”). chronic inflammatory diseases and Rejection of body transplants and organs such as kidneys, as well as bone marrow transplants, also provides specific protection. This is an example of an inflammatory response in the system. In the present invention, the term "non-specific defense system" reaction refers to white blood cells that are incapable of immunological memory. A reaction mediated by Such cells include granulocytes and macrophages. - Includes. Herein, inflammation is defined as inflammation caused by a non-specific defense system response. non-specific when, mediated by, or related to This is said to be the result of a response to a defensive system. At least some non-specific protection Examples of inflammation caused by control system reactions include inflammation associated with the following symptoms: be caught. i.e. Adult Respiratory Distress Syndrome (ARDS) or sepsis, trauma, Multiple organ injury syndrome derived from blood, reperfusion injury of the myocardium or other tissues, acute Glomerulonephritis 1 reactive arthritis, skin disease with acute inflammatory component, acute purulent meningitis or other central nervous system inflammatory diseases such as stroke, thermal injury: hemodialysis, leukapheresis. Facet transfusion, ulcerative colitis, localized ileitis; necrotizing enteritis, granular transfusion-related syndrome , and cytokine-induced toxicity. As mentioned above, the binding of an ICAM-3 molecule to a single member of the CD-18 family fusion is of central importance for cell adhesion. Through the process of adhesion, leukemia The sphere allows for continuous monitoring of the presence of foreign antigens in animals. Although these processes are usually desirable, solid organ transplant rejection (e.g. (e.g. kidney), non-solid organ transplant rejection (e.g. bone marrow) tissue transplant rejection and other autoimmune It can also cause epidemic diseases. Therefore, cell adhesion may be weakened or inhibited. Both methods are effective for solid organ transplants (particularly kidney transplants) and non-solid organ transplants. Organ transplant recipient/pient (especially bone marrow transplant) Tissue transplant recipient or autoimmunity Highly desired by disease patients. Monoclonal antibodies against members of the CD-18 family have been shown to inhibit leukocyte adhesion. It inhibits many of the addictive functions. This function includes adhesion to endothelial cells (llaska). rd, D et al., J. Immunol, 137:2901-2906 (198 6)), homotypic adhesion (Rothlein, R. et al., J. Exp. Med, 163:1132-1149 (1986)) , antigen and mitogeno-induced proliferation of leukocytes (Davignon, D et al., Proc, Natl, Acad, Sci, USA 78:4535- 4539 (198], )), antibody formation (Fischer, et al., J. Immu. Nol. 136:3198-3203 (1986)), as well as e.g. Cytotoxic T cells (Krensky, et al., J. Immunol, 132 :2180-2182 (1984)), macrophage (Strassma n, G et al., J. Immunol, 136:432g-4333 (1986 )), and all cells involved in antibody-dependent cytotoxic responses (Kohl, S et al., J. 1wuno1. 133:2972-2978 (1984)), including all leukocyte effector functions such as lytic activity. In all of the above functions, antibodies inhibit the ability of leukocytes to adhere to appropriate cell substrates and By inhibiting the biological functions associated with binding. Such functions can be prevented by anti-ICAM-3 antibodies as long as the ICAM-3/LFA-1 interaction is involved. can be suppressed. Therefore, monoclonal antibodies capable of binding ICAM-3 can be used as anti-inflammatory agents in mammalian specimens. Importantly, such anti-inflammatory agents differ from common anti-inflammatory agents in that they can selectively inhibit adhesion and do not have other side effects, such as nephrotoxicity, seen with conventional drugs. The points are different. Such ICAM-3, especially the soluble form, is associated with members of the CD-18 family. Because they can act in the same way as antibodies against them, they can be used to suppress inflammation. difference Additionally, functional derivatives and antagonists of ICAM-3 may also inhibit inflammation. It can be used to 1. Suppressor of delayed-type hypersensitivity reactions ICAM-3 is, in part, necessary for producing inflammatory reactions such as delayed-type hypersensitivity reactions. mediates essential adhesion events. Therefore, antibodies (especially monoclonal antibodies) capable of binding to ICAM-3 local antibodies) have therapeutic potential to attenuate or eliminate such responses. Alternatively, ICAM-3 is an antagonist of ICA, M-1/LFA-1 interaction. ICAM-3 (particularly soluble form) or its functional induction The body may use it to suppress delayed hypersensitivity reactions. These potential therapeutic uses can be utilized in either of two ways. First, compositions containing anti-ICAM-3 antibodies or soluble induction of ICAM-3 The drug may be administered to patients who have experienced delayed-type hypersensitivity reactions. For example, this Such compositions may be provided to individuals who have been exposed to antigens such as poison ivy, poison can, and the like. In other embodiments, a monoclonal antibody capable of binding ICAM-3 is administered to the patient along with the antigen. This is to prevent the subsequent inflammatory response. In this way, by administering the anti-ICAM-3 antibody and antigen, the next presentation of the antigen can be improved. to temporarily make the individual tolerant. 2 Treatment of Chronic Inflammatory Diseases Because LAD patients lacking LFA-1 are unable to mount an inflammatory response, it is believed that LFA-1's natural antagonism also inhibits the inflammatory response. The ability of antibodies against ICAM-3 to inhibit inflammation has shown that it is possible to treat chronic inflammatory diseases and For the treatment of autoimmune diseases such as lithomatosis, autoimmune thyroiditis, experimental allergic encephalomyelitis (EAE), multiple sclerosis, some forms of diabetes, Reynolds syndrome, rheumatoid arthritis, etc. This provides the basis for therapeutic use. Such antibodies may also be employed as a therapy for the treatment of psoriasis. Generally, the anti-ICAM-3 antibodies of the invention may be used alone or with anti-ICAM-1 antibodies. Administered to the body and/or in combination with anti-ICAM-2 antibodies, they can be used to treat diseases that can currently be treated with steroid therapy. According to the present invention, such inflammation and immune rejection responses are suppressed by providing a subject in need of such treatment with an anti-inflammatory agent in an amount sufficient to suppress the inflammation. i.e., can be impeded or weakened). Suitable anti-inflammatory agents include antibodies capable of binding to ICAM-3, fragments of said antibodies capable of binding to ICAM-3; substantially pure ICAM-3: ICAM-3 mechanisms; functional derivatives, non-immunoglobulin antagonists of ICAM-3, or non-immunoglobulin antagonists of ICAM-3 other than LFA-1. Particularly preferred are anti-inflammatory agents comprising soluble functional derivatives of ICAM-3. child Anti-inflammatory treatments such as antibodies that can bind to LFA-1, non-immunoglobulin antagonists of LFA-1, substantially pure ICAM-1 and/or The method may include administering ICAM-2, or a derivative thereof, or an agent selected from the group consisting of anti-ICAM-1 antibodies and/or anti-ICAM-2 antibodies or fragments thereof. The present invention further includes a method for suppressing the inflammatory response of the specific defense system described above, further comprising a method of providing an immunosuppressive agent to a subject. Such immunosuppressive agents are preferably provided at lower doses than normally required (ie, "suboptimal" doses). Use of suboptimal doses may result in synergistic action with the agents of the invention. It is very possible. Suitable immunosuppressants include, but are not limited to, dexamethacin, azathioprine, ICAM-1, IcAM-2, or cyclosporin A. 3. Treatment of non-specific inflammation Many inflammatory reactions are caused by reactions of the “non-specific defense system” and It is mediated by white blood cells that cannot remember. Such cells include granulocytes and macrophages. Inflammation, as used herein, refers to the reaction of non-specific defense systems. It is said to be the result of a non-specific defense/stem response if it is caused by, mediated by, or associated with a response. Examples of inflammation caused at least in part by non-specific defense system responses include inflammation associated with the following symptoms: i.e. Adult Respiratory Distress Syndrome (ARDS) or multiple organ injury syndrome derived from sepsis, trauma, hemorrhage: reperfusion injury of the myocardium or other tissues, acute glomerulonephritis, non-reactive arthritis, skin with an acute inflammatory component. Diseases: acute suppurative meningitis or other central nervous system inflammatory diseases such as seizures; heat injury, hemodialysis, leukapheresis; l11 ulcerative canine enteritis, localized ileitis: necrotizing enterocolitis; Granular transport blood-related syndromes; and cytokine-induced toxicity. The anti-inflammatory agent of the present invention is characterized by the interaction between the CD-18 complex on granulocytes and endothelial cells. It is a compound that can be differentially weakened. Such antagonists include ICAM-3; functional derivatives of ICAM-3; ICAM-1, ICAM-2; or non-immunoglobulin antagonists other than molecules that are members of the CD-IB sofa family. Includes strikes. B. Suppressor of Organ and Tissue Rejection ICAM-3, especially the soluble form, can act similarly to antibodies against members of the CD-18 family, and therefore They can be used to inhibit organ or tissue rejection caused by some cell adhesion-dependent functions. Furthermore, anti-ICAM-3 antibodies, functional inducers of ICAM-3 conductors, and antagonists of ICAM-3 can also be used to suppress such rejection. ICAM-3 and anti-ICAM-3 antibodies are used to prevent rejection of solid organs or tissues, such as kidneys, and non-solid organ rejection, such as bone marrow, in mammalian subjects. or to attenuate autoimmune responses. Importantly, the use of monoclonal antibodies capable of recognizing ICAM-3 allows organ transplantation even between HLA-mismatched individuals. C Additions to the introduction of antigenic substances administered for therapeutic or diagnostic purposes, e.g. insulin, interferon, tissue-type plasminogen activator, An immune response to a therapeutic or diagnostic agent, such as a monoclonal antibody or a monoclonal antibody, can substantially reduce the therapeutic or diagnostic value of such agent and In some cases, it can cause diseases such as serum sickness. This situation is covered by the present invention. It can be relieved by using the body. In this aspect of the invention, anti-ICAM-3 antibodies are administered in combination with therapeutic or diagnostic agents. Adding antibodies prevents lempient from recognizing the drug, and therefore prevents the initiation of an immune response against the drug. The absence of such an immune response makes the patient even less likely to receive the therapeutic or diagnostic agent. be able to receive gifts. ICAM-3 (particularly in soluble form) or its functional derivatives may be useful in the treatment of diseases. can be used alone or in combination with ICAM-1 or ICAM-2, or in combination with antibodies capable of binding LFA-1. Thus, in solubilized form, such molecules can be used to inhibit organ or transplant rejection. ICAM-3, or a functional derivative thereof, can be used to reduce the immunogenicity of therapeutic or diagnostic agents in a manner similar to anti-ICAM-3 antibodies. D. Suppressors of Tumor Metastasis - Agents of the invention may also be used to suppress metastasis of hematopoietic tumor cells, which require functional members of the CD-18 family for migration. This aspect of the invention In some cases, a subject in need of such treatment is given a sufficient amount of a drug to inhibit metastasis (e.g., an antibody capable of binding to CAM-3, a toxin conjugate of the antibody, a fragment of the antibody). toquinone conjugates of said fragments; substantially pure ICAM-3; functional derivatives of ICAM-3; or non-functional derivatives of ICAM-3 other than ICAM-1 or ICAMi; immunoglobulin antagonists) are provided. A further aspect of the invention provides a method for inhibiting the proliferation of tumor cells expressing ICAM-3. In particular, the method includes providing a subject in need of such treatment with an agent in an amount sufficient to inhibit said proliferation. Suitable agents include antibodies capable of binding to ICAM-3; toquinone conjugates of the antibody; flags of the antibody; a fragment capable of binding to ICAM-3; Toxin conjugate, a single molecule member of the CD-18 family bound to toxin: or Includes toxin-conjugated functional derivatives of single-molecule members of the CD-18 family. In yet another aspect of the invention, a method of inhibiting the proliferation of LFA-1 expressing tumor cells is provided. In particular, the method includes providing a subject in need of such treatment with an agent in an amount sufficient to inhibit said proliferation. Suitable agents include toxin-conjugated ICAM-3; toxin-conjugated functional derivatives of ICAM-3. E. Suppression of HIV infection and prevention of spread of HIV-infected cells Yet another aspect of the invention provides a method for inhibiting HIV infection. In particular, the method comprises providing an HTV-infected individual with an effective amount of an HIV infection inhibitor. nothing. Although the present invention particularly relates to a method for inhibiting HIV-1 infection, the present invention does not affect any HIV variant (such as HIV-2) that can infect cells. It is understood that it can be applied in a similar manner that can be inhibited by other drugs. Such mutations are equivalents for the purposes of this invention. One aspect of the present invention is that expression of LFA-1, and in some cases LFA,-1 binding ligands, stimulated by HIV infection promotes cell-to-cell adhesion reactions, which differentiate between infected and uninfected cells. It is based on the realization that it can increase contact time with cells, facilitating the movement of the virus from infected cells to uninfected cells. Therefore, agents of the invention capable of modulating LFA-1/ligand interaction can inhibit infection by HIV, and in particular HIV-1. One way in which molecules that inhibit LFA-1/ligand interactions may suppress HIV infection is by inhibiting the ability of LFA-1 ligand expressed by HTV-infected cells to bind to CDII/CD18 receptors on healthy T cells. This is due to the reduction. Alternatively, molecules that inhibit LFA-1/ligand interactions can reduce the ability of the CDII/CD18 receptor expressed by IIV-infected cells to bind to LFA-1 on healthy T cells. Cells have CD11a/CD18 receptors, Alternatively, ICAM-3, a fragment of ICAM-3, a functional derivative of ICAM-3, or an anti-ICAM-3 antibody can be used to reduce the ability to inhibit LFAi binding. The agents of the invention are provided to the recipient subject in an amount sufficient to achieve suppression of HTV infection. A dose of a drug is said to be sufficient to ``suppress'' an HIV infection if it is sufficient to attenuate or prevent such an infection. The drug is intended to be provided to patients exposed to or affected by HIV infection. The drug of the present invention can be used for either "preventive" or "therapeutic" purposes in the treatment of HI~' infections. It's for you. When used prophylactically, the drug may treat any symptoms of viral infection. before symptoms appear (e.g., before, at, or shortly after such an infection) (but before all symptoms of such infection appear). medicine Prophylactic administration of agents can prevent or attenuate subsequent HIV infection. When used therapeutically, this drug may be used upon detection of virus-infected cells (some (or shortly thereafter). By therapeutic administration of drugs. further) (IV infection is attenuated). Therefore, the drug of the present invention can be used before the onset of viral infection (to inhibit anticipated HIV infection). control) or the actual detection of such virus-infected cells i&(further). (in order to suppress infection). In a further aspect, the present invention provides ameliorative therapies for AIDS and enhanced methods for inhibiting F-order infections, and in particular H1-'-1 infections. This includes: This includes administering the following together. (1) ICAM-3, soluble 1cA-1-3 derivative, CDII (CD11a, CD11. b, or CD1lc), soluble CDII derivative, CD18, soluble CD18 derivative, or CDII/CD18 heterodimer, or CD 1], 'CD 18 Heson rhodimer soluble derivative and/or some Ll is ( +1) an antibody capable of binding to TCAM-3; (II) Cell- or particle-associated CD4 or soluble derivatives of CD4 and and/or (TV) Molecules (preferably antibodies or antibody fragments) capable of binding to CD4 In a further aspect of the invention, a method of inhibiting migration of HIV-infected cells is provided. be done. In particular, the method comprises administering to an individual infected with HTV an effective amount of an anti-migratory agent. including administering. The anti-migratory agents of the invention include binding to LFA-1 ligand of HIV-infected T cells. ICAM-3, fragments of ICAM-3, ICs that can reduce capacity Included are functional derivatives of AM-3 or anti-ICAM-3 antibodies. ICAM- The antibody that binds to ICAM-3 CD11/C expressed by HIV-infected T cells Migration is inhibited by reducing the ability to bind to cells expressing the D18 receptor. suppress. to reduce the ability of cells to bind to CDII/CD18 receptors can use antibodies that can bind to ICAM-3. The drug of the present invention can be applied to a recipient subject infected with HIV (or other viruses). provided in an amount sufficient to inhibit the migration of stained T cells. administration of drugs, etc. of T cells when the dose is sufficient to attenuate or prevent such migration. This is said to be enough to "curb" migration. Such compound(s) may be used for "preventive" or "therapeutic" purposes. It could be for either. When used for prophylaxis, the agents of the present invention before any symptoms of infection appear (e.g., before, at, or after such infection) infection soon after, but before all symptoms of such infection appear. ) provided. Prophylactic administration of drugs prevents the next migration of virus-infected T cells. motion can be prevented or attenuated. When used therapeutically, this drug The agent is provided upon (or shortly after) the detection of virus-infected T cells. drug Therapeutic administration of T cells attenuates further migration of such T cells. Therefore, the agents of the present invention can be used before the onset of viral infection (anticipated migration of infected T cells). or after the actual detection of such virus-infected cells. It can be provided in either. F Asthma treatment In a further aspect of the invention, agents capable of modulating LFA-1/ICAM-3 interactions drugs are used to treat asthma. In particular, the method comprising administering to the body an effective amount of an anti-asthmatic agent. The anti-asthmatic agent of the present invention is capable of impairing the ability of cells to bind to LFA-1. ICAM-3, fragment of ICAM-3, functional induction of ICAM-3 or anti-ICAM'-3 antibodies. Antibodies that bind to IcAM-3 , the CDII/CD18 receptor of ICAM-3 expressed on these cells. Inhibits eosinophil migration by impairing their ability to bind to expressing cells do. The anti-asthmatic agent of the present invention can be used to determine the severity and severity of asthma symptoms in the recipient subject. or provided in sufficient quantity to reduce or attenuate the time. The agents of the invention may be used alone or in combination with one or more anti-asthmatic agents. can be administered at Such anti-asthmatic agents include, for example, methylxanthine (theophylxanthine). beta-adrenergic agonists (catecholamines, glucocorticoids (such as Zornol, salichenin, and ephedrine) and anticholinergic agents (such as atropine), which may be used in combination with the agents of the invention. This can reduce the amount of these drugs needed to treat asthma symptoms. The agents of the present invention are for either "preventive" or "therapeutic" purposes. When used prophylactically, the drug is given before any symptoms of asthma appear. . Prophylactic administration of medications can prevent or attenuate subsequent asthma responses. Ru. When used therapeutically, this drug is administered at the onset of asthma symptoms (or provided shortly thereafter). Therapeutic administration of drugs reduces substantial asthma symptoms. be weakened. Therefore, the agent of the invention can be used before the expected onset of an asthma attack (pre-anticipated). (to reduce the severity, duration, or severity of an expected asthma attack) or to reduce the severity of an asthma attack. may be provided any time after the commencement of. G Application to diagnosis and prediction Monoclonal antibodies capable of binding ICAM-3 can be used to detect ICAM-3 expression in a patient. It can be used in methods for imaging or visualizing sites and sites of inflammation. like this In a specific method of use, anti-ICAM-3 antibodies can be detected using a radioisotope. Tope, affinity label (biotin, avinone, etc.), fluorescent label, or is labeled by the use of paramagnetic atoms. Methods for such labeling are well known in the art. It is well known for. The labeled antibody can then be used for imaging for diagnosis. of antibodies For clinical applications in diagnostic imaging, see Grossman. H. B. ,　Uro]. CIin. North Amer. 13:465 -474 (1986), Unger. E. C. Ra, Inma■■ t. Radiol. 20:693-700 (1985), and Kha w. Described in BA et al., Science 209:295-297 (1980). It is. The presence of ICAM-3 expression was also determined by the use of hybridization probes. can also be detected. Such probes include capable of binding to an ICAM-3 gene sequence or an ICAM-3 mRNA sequence, mRNA, cDNA, chromosomal DNA, or synthetic oligonucleotide probes etc. are included. Information on the technology for performing such hybridization assays is available. Maniatjs. T. et al., Molecular C]oning. a Laboratory Manual. Coldspring Har bor. NY (19g2), and Haymes. B. D. et al., Nucl eic　Aci■ Hybridization. a Practical Approach. IRL Press, Washington. DC (P985) , which are incorporated herein by reference. ICAM-3 expression by using labeled antibodies or nucleic acid probes Detection of the tumor can be used in the diagnosis of tumor development. In one diagnostic aspect, the set A sample of tissue or blood is removed from the subject and labeled with an antibody or Incubate in the presence of an antibody that can be labeled. In a preferred embodiment, the technique incorporates the use of magnetic imaging, fluorography. It is performed using a method that does not involve entering the body. Tests for such diagnostics are e.g. Monitor organ transplant patients, such as kidneys, for early signs of possible tissue rejection. It can be used to attach. Such assays can also be used to treat rheumatoid arthritis in individuals. or to examine susceptibility to other chronic inflammatory diseases. For example, radioisotope labeling of anti-ICAM-3 antibodies or antibody fragments This allows detection of the antigen using radioimmunoassay. For Lannoimmunoassay (RIA), please contact Laboratory Tech. niquesand Bjochecjstry in Molecular Biology, (Work, T. S. North Ro attack by et al. and Publishing Company. New York (1978)) ^n Introduction to Radioiwu■ Assay and Related Techniques” (Chard ．． (by T.), which is incorporated herein by reference. ing. Alternatively, the antibody may be a fluorescent compound, an enzyme, or a fluorescent compound known in the art. may be labeled with other suitable labels. Apart from locating the site of inflammation, antibodies capable of binding IcAM-3 are Biological fluids can be assayed using solvents commonly employed in body assays to It can be used to test for the presence of ICAM-3. Circulating IC in liquid sample The presence of AM-3 is a sign of an inflammatory response or other ICAM-3-mediated biological function. It is. Alternatively, the presence of ICAM-3 in amniotic fluid may be a product of complications during pregnancy. Related. Any biological fluid can be used in the assay. However, preferred biological fluids include blood, serum, plasma, synovial fluid, amniotic fluid, cerebrospinal fluid, Or urine. VII II Administration of the composition of the invention The therapeutic effect of ICAM 3 ICAM-3 molecule, or any therapeutically active peptide fragment thereof can be obtained by administering either to the patient. Of particular interest is ICAM- A soluble therapeutically active peptide fragment of No. 3. ICAM-3 and its functional derivatives are produced synthetically and by recombinant DNA technology. , by proteolysis or by a combination of such methods. can. Amino acid residues or ICA added to strengthen binding strength with the carrier ICAM-3 with added amino acid residues to increase the activity of M-3 The therapeutic benefits of ICAM-3 are increased by the use of functional derivatives of ICAM-3. Main departure The scope of the present invention further includes those having biological or pharmacological activity of ICAM-3. As long as a certain amino acid residue is missing or substituted, Also included are functional derivatives of ICAM-3 containing amino acid residues. Both the antibodies and ICAM-3 molecules of the invention disclosed herein are preparations containing those antibodies or molecules as they are normally and naturally found; A product is said to be "substantially free of natural contaminants" if it is substantially free of natural contaminants. The present invention is capable of binding to ICAM-3 (polyclonal or monoclonal). ) antibodies, active fragments thereof; Such antibodies can be used in animals, tissue culture It can be produced either by culture or by recombinant DNA methods. Administration of ICAM-3, or molecules derived from ICAM-3, can be administered alone or positionally. It can be performed in combination with ICAM-2 and/or in combination with ICAM-2. anti-ICAM- 3 antibodies, or other antibodies capable of binding to ICAM-3 or molecules derived from ICAM-3. The molecules can be used alone or with anti-ICAM-1 antibodies and/or anti-ICAM-2 antibodies. Can be administered in combination with antibodies. The patient has an antibody capable of binding to ICAM-3. or when providing antibody fragments, or when providing ICAM-3 (or its fragments). drug, variant, or derivative) to a renopient patient. The dose of the drug administered depends on the patient's age, weight, height, gender, general symptoms, medical history, etc. Depends on factors such as. Generally, about 1 pg/kg to 10 mg/kg (patient It is desirable to provide the recipient with a dose of antibody ranging up to Lower or higher doses may also be administered. This also applies when providing the ICAM-3 molecule, or a functional derivative thereof, to a patient. Molecules such as It is preferable to administer doses within the range, but lower or higher doses may also be used. Can be administered. As shown below, therapeutically effective doses are Furthermore, anti-LFA-1 antibody, anti-ICAM-1 antibody, and/or anti-ICAM- When administered with two antibodies, it can be lower. In this specification, a certain A compound is said to be further administered with a second compound when the two compounds are administered so close together that they are found in the patient's serum at the same time. Both antibodies that can bind ICAM-3, and ICAM-3 itself, are Administer intravenously, intramuscularly, subcutaneously, enterally, topically, or parenterally, Ru. If the antibody or ICAM-3 is administered by infusion, administration is a continuous infusion. , or in single or multiple units. The agents of the invention are administered at the end of the recipe in amounts sufficient to be "physiologically effective." provided to the specimen. The dose of the drug, such as by A dose is physiological when it is sufficient to attenuate or prevent a physiological effect. It is said to be effective. For example, this product may be provided to patients to suppress inflammation. One drug in the field of medicine, when provided in a sufficient dose to "suppress" inflammation, It can be said that it is physically effective. Additionally, the anti-ICAM'-3 antibody, or fragment thereof, alone or one or more other immunosuppressants (especially in organ or tissue transplant recipients) (for anti-inflammatory drugs). Such compounds (singular or administration may be for either "preventive" or "therapeutic" purposes. Ru. When used prophylactically, immunosuppressive compounds suppress any inflammatory response or symptoms. (e.g., before an organ or tissue transplant, when (or shortly after, but before any symptoms of organ rejection appear). Prophylactic administration of compound(s) may inhibit the following inflammatory responses (e.g. (rejection of transplanted organs or tissues) can be prevented or attenuated. used for treatment If present, the compound(s) may be used to induce the actual symptoms of inflammation. Provided at the beginning (or shortly thereafter). Treatment of compound(s) The administration of rejection of non-solid organs such as tissue or bone marrow) is weakened. Therefore, the anti-inflammatory agent of the present invention can be used before the onset of inflammation (to suppress expected inflammation). (sea urchin) or after the onset of inflammation. A composition is defined as "pharmaceutically acceptable" when administered and tolerated by the recipient patient. "It can be done." Such drugs should be administered only if the amount administered is physiologically sufficient. A "pharmaceutically effective amount" is said to be administered. Due to its presence, drugs If there is a detectable change in the patient's physiology at the end of the recipe, It is enough. Antibodies and ICAM-3 molecules of the invention can be used to prepare pharmaceutically useful compositions. can be formulated in a known manner. These methods require the use of these materials or The functional derivative is combined with a pharmaceutically acceptable carrier excipient. Appropriate excipients and its formulation may contain other human proteins, such as human serum albumin. These include Remington's Pharmaceut ical 5scienceS (16th edition, 0so1. Part A, Mack, Eas ton PA (1980)). Such compositions may be used to form pharmaceutically acceptable compositions suitable for effective administration. The compounds include an effective amount of an agent of the invention and a suitable amount of carrier. Furthermore, the present invention Antibodies can be humanized by chimerization or CDR grafting to make them more disease-prone. be ``pharmaceutically acceptable'' for people. Antibodies, especially anti-ICAM-1 Methods for body chimerization are described in other specifications. This is a UK patent application Tube 90009548. No. 0, No. 90009549. No. 8 and the U.S. Receiving Officer PCT Application No. P CT/US9110 filed with the Office on April 27, 1991 No. 2942, and PCT/US91102946, which are incorporated by reference. and is hereby incorporated by reference. Still other pharmaceutical methods can be used to control the duration of action. Controlled release preparations are may be made by the use of polymers to synthesize or absorb the agents of the invention. Ru. Control delivery rate and time by selecting appropriate macromolecular matrix By changing the concentration of macromolecules introduced and the method of introduction, can be controlled to some extent. Another way to control the time of controlled delivery is to , polyester, polyamino acid, hydrogel, poly(lactic acid) or ethylene can be incorporated into particles of polymeric materials such as hinyl acetate copolymers. Ru. Alternatively, instead of incorporating these agents into polymer particles, these materials microcapsules, colloidal drug delivery systems, or microemulsions. It is also possible to confine them inside a tank. Among these, microcapsules are For example, coacervation, interfacial polymerization, ceratin or poly(methylmethane) rate) prepared by microencapsulation. And colloid drug delivery system For example, liposomes, albumin microspheres, microemulsions, etc. nanoparticles, and nanocapsules. The present invention further encompasses pharmaceutical compositions comprising: (a) an anti-inflammatory agent (IC Antibody capable of binding AM-3; fragment 1 of said antibody capable of binding ICAM-3 1CAM-311 A functional derivative of CAM-3; or ICAM-1 and IC non-immunoglobulin antagonists of lcAM-3 other than AM-2) and (b) At least one immunosuppressant. Suitable immunosuppressants include dexamethacin and Asasen Includes oprin and tucrosporin A. Having provided a general description of the invention, reference is made to the following examples: Drugs and how to obtain them can be more easily understood. The following examples are provided for illustrative purposes only, and do not limit the invention unless otherwise specified. It's not something you can do. Example I Characterization of ICAM-3, a new adhesion ligand for LFA-1 Cells Attachment of cells and lymphocytes to LFA-1 coated plates was performed as previously described. [Dustin et al., Co1d Sprin] g Harbor Symp, Quant, Biol, 54 Near 53-7 65 (1989)], LFA-1 purified from J Y lysate (solution solution) into a 96-well microtiter plate (Linbro-titertek) l:, l　1OO site (site) was adsorbed at 7 μm2. Non-specific binding site Blocked with 1% BSA, PBS15%FBS/2mM MgCh10. 5%H Washed with 3A (assay medium). Specific inhibition of LFA-1 was achieved by microtiter dilute the well with 1/201 TS1/22 (anti-LFA-1α) I water at 1:RT, This was done by incubating for 30 minutes. Resting T-cells with plastic adheran It was isolated by water and nylon wool filtration and had 91% CD2''. Cultivating cells in the presence of 10 μg/ml phytohemagglutinin (PHA) PHA-blasts were generated by. Cells were treated with fluorescent dye B CE CF (Mo regular probes, Inc.), washed, and rehydrated in assay medium. Suspended. MAb pretreatment of cells with 1/200 diluted ascites for 45 min at 4°C. This was done by incubation and then 105 cells were transferred to each well. Cell lines were allowed to adhere to solid phase LFA-1 for 1 hour at 37°C, and non-adherent cells were separated into six 23 Gauge, remove with needle aspirator, and remove lymphocytes at 30xg for 5 min. The mixture was centrifuged for 30 minutes and incubated at 37°C for 30 minutes. Remove unbound lymphocytes from each wash. Remove from the plate by applying 100W 8 times in between and flicking the medium. Removed. Due to its small size, unbound T is more difficult to remove. Frisoking is more effective for completely removing cells. Fluorescence intensity (concentration ) Fluorescence was determined directly from the 96-well plate using an analyzer (Baxte). I weighed it. TSI/22 ( Anti-CD11a, IgG1) [Sanchez-Madr id et al, ) Proc, Natl, ^cad, sci, LIS ^79 Near 489-7493 (1982)], RR1/1 (anti-ICA M-1, IgG1) [Rothlein et al. J, Tmmunol, 137:1270-1274 (1986), CBR-IC 2/2 (anti-1cAM-2, IgG2a) “de Foug erolles et al, ) J, Exp, 1ied, Submitted (1991 Xin press)], and CBR-1C3/1 (anti-ICA M-3, IgG1). CBR-IC3/1 is murine myeloma P3 X63Ag8. Ba1b/'C mice injected with 653 and 5KW3 "Getter et al. (Gefter et al,) Soi, Ce11. Gen, 3:231-2 36 (1977)], and 600 hybrids was screened for its ability to inhibit the binding of 5KW3 to purified LFA-1. I nged. CRB-1c3/II;! Spirit! MLF'A-11m is also ICAM-1 , ICAM-2 and LFA-1 cDNAs were transfected. It also did not react with CO8 cells (data not shown). One of the four representative experiments and errors indicate one standard deviation. Example 2 Cellular ICAM-1, ICAM-2, and ICAM-3 expression flow -Cytometry analysis All cell lines used were previously described [Hibbs et al. ) C11nInvest, 85:674-681 (1990). Peripheral blood mono Nuclear cells (PBMC) were subjected to dextran precipitation and Ficoll-Hypaque (1 , 077) obtained by centrifugation, ``Dustin et al. Ce11 Biol, 107:321-331 (1988)]. Neutrophils The red blood cells collected from the cell pellet were removed by hypotonic lysis. lymphocytes and Monocytes isolated by cytometric analysis using forward and vertical light scatter and confirmed using monocyte- and T cell-specific MAbs. Lymph obtained from P B M C Using plastic adherens for sphere enrichment, cells were treated with 10 μg/ml phytolytic acid. Cultured in the presence of hemagglutinin (PHA). Transfer the sample to the EPIC3V flow cytometer. E for cytometer calibration. PT CS Immune-Brite fluorescent piece (Coulter) used The fluorescence was quantified. Expression of ICAM-3 on resting lymphocytes is determined by CD3 or L Ic expression is 2-3 times greater than either FA-1 and monocyte expression is greater than LFA-1. It was 2-3 times larger in A~1-3. The expression level of ICAM-3 in neutrophils is M It was equivalent to that of ac-1 (CD11b/CD18). phosphorylate cells It was found that PI-bound ICAM-3 was absent by treatment with ZeC. It was. Table 2 Relative surface antigen expression of ICAM by immunofluorescence flow cytometry* Membrane expression was performed using immunofluorescence flow cytometry as outlined in Materials and Methods. Measured with Reno. Values were determined in at least two experiments. One unit is about 10 Fluorescent beads to calibrate the cytometer to 3 fluorescein equivalents (Coulte Diagnostics, Hialeah, PL) . *　＊　: Miscellaneous cell lines are human tranquil cell lines, including the following: Vascular endothelial cells, huvec, human breast cancer cells, I'lep G2: human epithelioid carcinoma cells cell lineage, He1a: human transverse strangulation, RD315, human fibrocytoma, FS], 2 ．． 3; Human neuroglioma. Immunoprecipitation of 1cAλ1-3 Cells were labeled with 1251 using iotogen [Kishimot et al. o et al) J, Bjol, Chem, 264:3588-359. 1 (]989) Ko. Cells were lysed with Triton X-100 (1%). reset Clear with Sepharose coupled to No-1gG, followed by appropriate MAb- Incubated with bound Sepharose for 2 hours. Beads in 5QmMTri Sample buffer containing s, 1% SDS and 1% 2-mercaptoethanol Washed in a vacuum and boiled. The non-reduced sample was converted into a 2-mercaptoethanol-free sample. Boiled in pull buffer and treated with 20mM iodoacetic acid. sample at 7% Separate on a polyacrylamide gel as described above. analysis [Laemmli (U, l) Nature 227:680- 685 (1970)], proteins were observed by autotranography. trial The material was prepared by the method described previously [Kresotin et al. (Talentino et al.) Bi Chemistry 24:4665-4671 (1985)], N - Treated with Glycanase (Genzyme) to completely remove the entire peptide backbone. For cleavage of N-linked oligosancharites, concentrations (1,0 units/ml, 37°C, 18 It was determined that it was optimal to use MHC class ■ is N-bonded carbon ICAM-2 (m, 60. 000. 6N-binding site, M , 28. 383 Huckhorn) was highly glyconolated. Example 4 Distribution of JCAM-3 Further investigate the tissue distribution of ICAM-3 protein by flow cytometry For this purpose, the anti-ICAM-3 antibody of the present invention was used. Showing surface expression of ICAM-3 The cell types are summarized in Table 3. ICAM-3 expression is restricted to hematopoietic cells. There is. Immunohistochemical staining of tissue sections using labeled anti-ICAM-3 antibody Therefore, the flow cytometry data were confirmed (data not shown). Frosa Similar to the Itome1-IJ-data, immunohistochemical studies also showed that ICAM-3 expression was It was found that it appears to be restricted to hematopoietic cells. Table 3 Relative surface antigen expression of ICAM by immunofluorescence flow cytometry* Membrane expression was determined by immunofluorescence flow cytometry as outlined in the Materials and Methods section. Measured by metry. Values were determined in at least two experiments. One unit is approximately 1 Fluorescent beads were used to calibrate the cytometer to 03 fluorescein equivalent. (Coulte Diagnostics, Hialeah, FL) ). ± Miscellaneous cell lines include: human sacrificial vein endothelium Cell, HU ~ “EC, human breast cancer cell, 1lep G2: human epithelioid cancer cell line, 1 lela; Human lateral strangulation, RD315: Human fibrocytoma, FSl, 2 ．． 3: Human neurodariacytoma. Example 51 Purification of CAM-3 Anti-ICAM-3 antibody CBR-IC immobilized on a matrix by methods known in the art. ICAM-3 was purified by immunoaffinity chromatography using 3,/1. Manufactured. A number of sources were used as starting material for the isolation of ICAM-3. child These include 5KW3, human thymoma cell lines, and human tonsil cells. It is not limited to these. The method used to purify ICAM-3 is essentially the same as that described in the literature [Duho Fougerolles et al. J. Exp. According to the method described in [Med, 175:185-190 (1992)]. skilled in the art washes and solvents used in immunoaffinity chromatography. Reagents and antigens to be purified and immunoaffinity chromatograph It will be appreciated that each antibody used in the antibody will be slightly different. ICAM-3 purified from 5KW3 cells or human tonsil cells is a molecular amount], 20i24kD, but purified from lysate derived from neutrophils. CAM-3 gave a broad band with a molecular weight of approximately 120 to 150 kD. ICAM-3 purified by this method can be used with its anti-ICAM-3 antibodies and various cell lines. The binding ability with LFA-1 was maintained (see Figures 6 and 7). c. Example 6 Identification of ICAM-3 of various molecular weights ICAM-3 on various cell types by immunoprecipitation and polyacrylamide gel electrophoresis to determine molecular weight. analysis was used. ■The molecular weight of CA~1-3 immunoprecipitated from neutrophils is 1 Ruba cell. It was found that the molecular weight was different from that of the immunoprecipitated product. lymphocytes and lymphocytes ICAM-3 isolated from a similar cell line has a molecular weight of approximately 120 to 124 kD. It appeared as. The molecular weight of ICAM-3 immunoprecipitated from neutrophils is Slightly larger than that expressed in cells, from about 120 to 50 kD ＼It appeared as a mark (Fig. 4). Such a size change is due to the glycoprotein ICAM family 7 <-. When it comes to this, it's definitely rare. ICAM-1 is the same across different cell types. It shows a similar change in molecular weight. This change in molecular weight observed with ICAM-1 is due to glyco/ It was shown that this is due to changes in the degree of decoding. Therefore, the molecular weight of ICALi-3 The most likely cause of the change in is a difference in glycosylation. skilled in the art If you are a person, you can treat ICAM-3 isolated from neutrophils with various glycondase and other enzymes. This was demonstrated by subjecting it to enzymatic treatment and observing its effect on molecular weight. can be easily confirmed. Changes in the degree of glycosylation of ICAM-1 are associated with MAC-1 (CD11b/CD18 ) was shown to affect binding. Therefore, the degree of glycosylation of ICAM-3 Various ligands of ICAM-3, e.g. Modified binding affinity for rotin, a member of the CD11b/CD18 family It is possible to produce ICAM-3 derivatives. Example 7 1CAM-3 antibody Anyuhant and ICAM- purified from 5KW3 or tonsil cells as described above. 3 proteins were injected into mice. from immunized animals using methods known to those skilled in the art. Monoclonal antibodies were generated. The various anti-ICAM-3 antibodies obtained are summarized in Table 4. By ELISA, Various antibodies were identified based on their ability to react with purified immobilized ICAhi-3. positive m on various cell lines known to be ICALi-3 positive. Abs were screened and isolated from radiolabeled ICAM-3 positive cell lysate. The epidemic precipitated. mAb in the presence of anti-ICAM-1 and anti-ICAM-2 antibodies Below, it was tested for its ability to inhibit PMA-induced aggregation of 5KW3 cells. Alternatively, anti-ICAM-3 antibodies can be used to bind 5KW3 to immobilized purified ICAM-3. They can also be identified by their ability to inhibit binding. One line of evidence pointing to the existence of a third LFA-1 glue cant is the ICAM-1/ Existence of a pathway for PMA-stimulated 5KW3 cell aggregation independent of ICA~1-22 It is. We used mouse anti-ICAM-3 polyclonal antiserum or CB This aggregation with either the combination of R-I C3/1 and CBR-IC3/2 could be inhibited. ** Other ICA from Spanish lab M-3m Ab (F, Sa nchez-Madrid). After the results of this experiment were shown, they realized that this was the mAb they had created, but I remember that it has not been characterized. It turns out to be ICAM-3. Or it becomes. CBR-1c3/2. 3/3. 3151 CBR-I Same as C3/1, 120 Immunoprecipitation was performed using Kd band. The mAb was tested for its ability to perform Western blots. IC, AM-1 antibody (RRI/1), anti-ICAM-2 antibody (CBR, -IC2/ 2) and anti-ICAM-3 antibodies (CBR-I C3/1 and CBR-IC32 (1) Attachment of 5KW3 receptors to purified ICAM sequence by PMA stimulation , (2) cell division by phytohemagglutinin (PHA) stimulation, and (3) mixing. It was tested for its ability to inhibit synolytic lymphocyte responses (1', ILR). already activates PMAItLFA-1 and thus its ability to bind to ICAM-1. It has been shown that it is possible to increase [Dustin et al. N ture 341:619 (1989)]. Figure 5 shows a similar activation mechanism in LFA. -1/ICAM-3 binding. Purification of 5KW3 cells with PMA stimulation of various antibodies ICAM-1 and ICA The ability to inhibit binding to M-3 was tested. Figure 6゜CBR-IC3/1 and CBR- IC3/2 antibodies, when present individually, stimulated PMA-stimulated 5KW onto purified ICAM-3. 3 does not effectively inhibit cell adhesion. However, the combination of these two antibodies The use of cellulose inhibits the attachment of 5KW3 cells to ICAM-3 under PMA stimulation. Ru. Fougerolles et al., J. As described by Exp, Med,] CBR-IC3/1 monoclonal The antibody itself is capable of inhibiting ICAM-3 binding to purified LFA-1. I'll come. Whether the binding of PMA-stimulated 5KW3 cells to ICAM-3 is temperature dependent or not. Further analysis was carried out to investigate whether it was cation-dependent. ICAM- Similar to 1, ICAM-3/LFA-1 binding is temperature dependent (see Figure 8) and It was found to be ion dependent (data not shown). Figure 9 shows the effect of various antibodies on PHA-stimulated cell division. As already mentioned [Krensky et al. J. Immunol , 131: 611-616 (1983)], PHA is anti-ICAki-1 antibody , cell proliferation in such a way that it can be inhibited by anti-LFA-1 in anti-ICAM-2 antibodies. or the combination of anti-ICAM-1 and anti-ICAM-2 antibodies is PHA Stimulation had little effect on cell division. However, 1) anti-ICAM-1 antibodies, anti-ICAM-2 antibodies and anti-ICAM -3 antibody, 2) two anti-ICAM-3 antibodies (IC3/1 and IC3/2) and and 3) the combination of anti-ICAM-1 and anti-ICAM-3 antibodies stimulated by PHA. It was effective for cell division. Example 9 Mixed lymphocyte reaction The MLR assay is used to assess immunological reactivity. This test is basically Scientifically fixed exogenous cells [stimulator cells] PBLs from different individuals [responder cells] The level of response can be measured using the proliferation of responding cells as an index. [Krensky et al. J, Immunol, 131:611-6]6 (+983)]. This inspection Determination is the first step in the identification of components useful in the treatment of transplant rejection. The effect of various antibodies and antibody combinations on the MLR response is shown in FIG. 10. In summary, anti-ICAM-3 alone has a low level of efficacy. However, anti-IC ＼The combination of N1-1 antibody and anti-ICAM-3 antibody resulted in %iLR inhibition. High-level effects are seen to occur. The highest response was with anti-ICAM-1 antibody, anti-I A combination of CAM2 antibody and anti-ICAM-3 antibody was obtained. Example 10 Peptide sequence of 1cAM-3 Human tonsil cells were prepared by the method described in Example 5. ICAM-3 was purified by immunoaffinity chromatography from . Purified ICAM-3 was enzymatically digested with Lys-C enzyme by a known method, and The peptide fragments were separated by HPLC. Figure 11 shows the results observed during normal digestion. Various protein peaks are shown in the Cass chromatograph. beak 10 and 17 contains peptide fragments of sufficient size and structure to be sequenced (hereinafter referred to as NK-10 and NK-,17 peptides, respectively) ). The amino acid sequences of the Ni-10 peptide and NK-17 peptide were determined using standard techniques. It has been determined. The sequence of NK-10 protein is KIDRATCPQHLK (sequence It turned out to be number 1). The presence of the first lysine (K) residue in the sequence indicates that L, It was estimated that the protein is cleaved after the ys-C residue. The sequence of NK-17bebutito is KIALETSLSK (SEQ ID NO: 2) I understand. As with the 10 proteins, we estimated the first phosphorus residue and assigned it to the DN. Confirmed by column determination, ICAM-1 with the known sequence of 10 Tanobacter and NK-17 protein and lc, AM-2 sequences revealed a high degree of homology. NK-17 Pep shows significant homology with sequences contained in the 11g domain of ICAM-2. , NK-10 peptide has weak homology with the sequence within domain 4 of ICAM-1. Oligonucleotide probes were prepared based on the peptide sequences obtained above. Sara The probes contained previously identified ICAM-1 and ICAM-2 nucleotides. It was designed to encompass the codon preferences found in the sequence. NK-17 protein and the nucleotide sequence of the probe based on the amino acid sequence of the NK-10 protein. The columns are as follows. NK17 probe 24 times degenerate oligo 23 (containing 2 N (inosine)) Sequence number 4) NKIO probe, an 8-fold degenerate 25-mer containing 5 N (inosines) A cDNA expression library was generated from tonsil RNA [Wong et al. ong et al,) Proc, Natl, Acad, Sci, []SA 82 Near 711-7716 (1985). Use this library on the NK-17 Lobe screen and re-screen plaques showing positive hybridization. , was screened with the NK-10 probe. One clone, clone 112, has an insert approximately 16 to 18 kb long. It turns out that Clone 112 and NK-10 and NK-17 peptides A diadem showing the position of is shown in FIG. sequencing the end of the insert using primers derived from adjacent hectors; One ten probes were used for internal sequencing. The array obtained so far is However, only one strand was read. A person skilled in the art would appreciate the validity of such an arrangement. It will be easy to understand that this can be confirmed by routine experiments. The obtained sequences are summarized in FIG. 18. There are several things to note about this arrangement. be. First, a sequence that is highly homologous to the transmembrane region of ICAM-1 is identified. Therefore, if one wishes to produce a soluble fragment of ICAM-3, the transmembrane region shown in FIG. The entire sequence after the start of the region is deleted. Second, ICAM-1, ICAM- As deduced from the sequence homology that exists between 2 and ICAM-3, the clone The sequence obtained from the 5° end of 112 is close to the 5′ end of the naturally occurring gene. It is said that there is. Example 12 Sequence homology between various ICAM molecules NK-10 and NK-17 Nucleotide and amino acid sequences of peptide and the nucleotides obtained above The sequences were compared with known ICAM-1 and ICAM=2 sequences (Figures 13-17 ). The results showed high levels of ICAM-3 and both ICAM-1 and ICAM-2. suggests homology. The sequence homology between ICAM-1 and ICAM-3 indicates that IC The first (FIG. 16) and fourth/fifth domains of AM-1, and ICAM-1 found in the transmembrane region and several cytoplasmic domains (Figures 13 and 14). Furthermore, when we searched the gene bank database, we found that It was found that there were no other sequences identical or similar to the one given. ICAM-3 and Significant homology was also found between the first domains of ICAM-2 (Figure 17). Clone 112 was used to further screen the library. Approximately 2-2. Additional clones were found to obtain a 4kD cDNA insert. than before These are full-length cDNA clones, as larger sizes have not been identified. It may represent. Sequence list (1) General information/ (i) Applicant: Defon-Loris, Antonin Earlsprinker, Timo Genie (ii) Title of the invention, intercellular adhesion molecule-3 and its binding ligand (ii) i) Number of arrays・6 (iv) Address for correspondence. (A) Address: Stern, Kessler, Goldstein and Fox (B) ri:1225=+Fuchikat Avenue, N, W. (E) Country: United States (F) Nop code 20036 (v) Computer-readable method: (A) Media type: floppy disk (B) Computer IBM PC compatible (C) Operating 7-ing /Su-rL: PC-DO3/MS-DO8(D) Software-Patent In Re1ease #1. 0. Version 11. 25(vi) current Application data (A) Application number/US (B) Application date: June 11, 1992 (C) Classification (vii) Agent/Agent Information (A) Name Fox, Samuel E. (B) Registration number・30. 353 (C) Reference number: 1101. 069PC01(IX) Telegraphic communication information (A) Telephone number (202) 833-7533 (B) Telefax (20 2) 833-8716 (2) Sequence number 1 (i) Characteristics of array (A) Sequence length: 152 base pairs (B) Sequence type Nucleic acid (C) Number of strands/double strands (D) Topology, linear (11) Type of sequence: DNA (ix) Sequence characteristics. (A) Symbol representing characteristics CD5 (B) Location: 2. ．． 152 (X]) Array Sequence number I G ■ u rrc c d T TrG CGGGTG QAG CCCC, ^G~C CCT GTG CTCTCT GCT 46Glu Phs L@u Leu Arg VaIGlu Pro Gin Asn Pro Val Leu Ser Alaj 5 To 15 GGAGGG TCCCTG TTT GTG AACTGCAGT ACT GAT　TGT　CCCAGCTCT　GAG　94Gly　Gly　Ser　 Leu Phe Val Asn Cys Ser Thr Asp Cys Pro Ser Ser Glu^^^^TCGCCTTG GAG ACG TCCCTA Ding CA AAG GAG CTG GTG GCCAGT G GC142Lys Ile Ala Leu Glu Thr Ser Leu Ser　Lys　Glu　Leu　Val　Ala　Ser　GlyATG　 GGCTGG G +52 Met　C11y　Trp (2) Sequence number 2: (i) Properties of sequences. (A) Sequence length: 50 amino acids (B) Sequence type diamino acid (D) Topology/linear (] type of sequence, protein (xi) Sequence/Sequence number 2 Glu　Phe　Leu　Leu　Arg　Val　Glu　Pro　Gin　 Asn Pro Val Leu Ser Ala Glyl 5 10 15 Gly Ser　Leu　Phe　Val　Asn　Cys　Ser　Thr　 Asp Cys Pro Ser Ser Glu Lys1ie Also L eu Glu Thr Ser Leu Ser Lys Glu Leu V al Ala Ser Gay Met (2) Sequence number 3 (i) Characteristics of array (A) Sequence length, 189 base pairs (B) Sequence type Nucleic acid (C) Number of strands: 2 strands (D) Topology, linear (11) Type of sequence: DNA (IX) Features of array (A) Symbol representing characteristics CD5 (B) Existence location 2. ．． 189 (xl) Array Sequence number 3: (2) Sequence number 4 (1) Array characteristics (A) Sequence length: 62 amino acids (B) Sequence type/amino acid (D) Topolon - linear (ii) Sequence type/protein (Xl) Sequence Sequence number 4゜ Phe Cys Ser Ala Thr Leu Glu Val Hls Gly Gln Phe Leu G1n (2) Sequence number 5・ (1) Array characteristics (A) Sequence length: 113 base pairs (B) Sequence type: Nucleic acid (C) Number of strands: 2 strands (D) Topology, linear (11) Type of sequence: DNA (ix) Array characteristics: (A) Symbols representing characteristics/CD5 (B) Location: 2. ．． 113 (Xl) Sequence 2 Sequence number 5: GGCAGT TACCAT GTT AGGly Ser Tyr HLs Va1 (2) SEQ ID NO: 6 (i) Characteristics of array (A) Sequence length: 37 amino acids (B) Sequence type Amino acid (D) Topology/linear (Y1) Sequence type protein (xl) Sequence Sequence number 6 Gly! 1ier Tyr Hls Va1 bound cells (%) mAb pretreatment ri0029 mouth ICAM-1+3 'm IC"-1m IcAM-2+3■ICAM-1+2 Combined cells (%) mAb pretreatment +10 100 1000 Fluorescence intensity Fluorescence intensity + 1o 1oo +oo. Fluorescence intensity 1, 10 100 1000 +10 100 1000 Fluorescence intensity +10 100 4000 Fluorescence intensity + +0 1oo 1000 Fluorescence intensity +10 100 1000 Fluorescence intensity t　to　iooo　+oo. Fluorescence intensity +10 100 1000 Fluorescence intensity +10 100 1000 Fluorescence intensity Fluorescence intensity +10 400 1000 Fluorescence intensity award light intensity +10 100 4000 Fluorescence intensity +10 100 1000 + 40 100 1000 Fluorescence intensity Fluorescence intensity +10 100 1000 Fluorescence intensity +10 100 1000 +　+o　+oo　+oo. Fluorescence intensity +10 100 1000 Fluorescence intensity +10 100 1000 friend light intensity Fluorescence intensity FIG, 3A FIG, 3B SKW3 5KW3 SLA JURKAT. 21 Con, HLA IcAM-11CAM-21CAM-3 lymphocytes neutrophils FIG.4 Part density (part/　u　m　　2) FIG.5 purified ligand mAb pretreatment ■ No mAb [Oko CBR-Ic3/i door day TSI/18+TS1 /22 mouth CBR-1c3/2X RR1/1 CBR-1c3/1 +I C3/2 purified protein ■ICAM-I No mAb Engraving 1cAM-I TSI/22 f + cAy-, s No mAb Mouth IcAM-3TBI/22 Roro N Romi Roro old (Wd:)) Q? l! HC Generated symbol + To: 532° ACCESSI○N JO3132 HUICAI, I-1:PEP　X　1127-NKIO,PEP　April 22. 1992 12:201 , , , , , , , , , , , , , , , , , PLR GSTVTVSOIAGARVQVTLDGVPAAAP29To: HUIC AJJ-LPEP Chi Buku: 6460 1 to 532 ACCESSION JO3132,. 1128-RM13. PEP X HUICAIJ-LPEP April 15. 19 92 08:43. . To: HLJICA) J-2, PEP”・Re: 5473 1 Color 275 a translation: HUICAL+I-2, SEQ+-7ri: 178 63 color 887 Generated symbol 1 to 275° ACCESSION X+5606 11'WORDs CA) J-2 protein; Cell adhesion protein; Glycopro Ting 9. . Length WEIGHr: 0. 100 Average Mixed Pine +: -0,396128- RM13. PEP X HUICA)! -2, Yen A April 15. 199208 :39,. 1 , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , TRQI) IPGRGD [1iHLRLG, , , , , , , , 1617 , , , , , , , APTL SPVF, , , , , , , , , , VAVLLTLGWTIVLALMYV F 44: 11 1. I II. 2SI HLRQ[)RMGTYGVRAAWRRLLPQAFRP 275 Gya Up: 1128-T7. PEP Chi-ri: 5237 1 to 52 translation : 1128-n, sEQ chi...ri; 159 generation/embol from 3052 3 1 to 52° To: HUICA), 1-1. PEP check: 6450 1 to 532 Translation: Hut view - LSEQ Che, Ri, 1653 generated from 8380 58 Symbol 1 to 532° ACCESSION JO3132,. Ki + - / Fu WaGHT: 3. 000 average? -+: 0. 540 length WEIG) ff: 0. 100 Average mismatch: -0,396 quality : 36. 0 Length: 532 Ratio: 0. 692 Gap: 2 Similarity (%): 59. 615 Identity (%): 38. 4621128- T7. PEP X HUICAM-1, PEP April 17. 1992 16 :15. ,. , :1. ．． 1. 1,, :1. III::1. 1111 MAPSSPRP ALPALLVLLGALFPGPGNAQTSVSPSKVILPRGGSV LVTCST 50. 1. ++:::11. 1. 1. :51 S CDQPKLLGIETPLPKKELLLPG)JNRKVYELSNVQE DSQPMCYSNCPDGQ 100 gear, bu: 1128-T7. PEP Check: 5237 1 to 52 Translation: 1128-T7. SEQ Chi... Ri: 3052, , l to 159 generated nonpol 1 to 52° To: ) (IJIcMI-2, PEP Chi・ri: 5473 1 to 27 5 Translation: HulCA) J-2, SEQ Che, Ri: +76 63 to 887 birth From 1 to 275° ACCESSION X+5606 1'f'V10RDS ltaku-2PRO positive N, C aim rectangle HESION PRO ball N ;　GLYCOPRO Positive IN,,. Length WEIGHT: 0. 100 Average Mi X7. f: -0,396 similarity ( %): 51. 923 Identity (%)・40. 3851128-T7. PEP X) (UICAL, l-2, PEP April +4; 1992 07:56 ．． . ErLLRVEPQNPVMEAGGSLr-KELVASGMGW- PLRMI:TVTVSCMAGARVQVT-LIIGVPAAAPGQP AQLQLNAT-E　S　[1IIGRS　FrC5ATLEVHGQF-C TTGCA[JAG +81 −==−−−189 6＾AC(iTCTC Ding SPVFVAVLLTLGVVTIVL-ALMYVFREHQRSG 5:YHV-FIG 18C Continuation of front page (51) Int, C1,5 identification symbol Internal office reference number A61K 39/395 ABE N 9284-4CCO7K 15/12 8318-48C12N 5/20 C12P 21102 C8214-4B21108 8214-4B C12Q 1/68 A 7823-4BGOIN 33153 Y 8310 -2J331569 H8310-2J 331577 B 8310-2J // C07K 7/10 8318-4HCO7K 99:00 I

Claims

[Claims] 1. ICAM-3, or a functional derivative thereof, substantially free of natural contaminants . 2. A recombinant DNA molecule capable of encoding ICAM-3 or a functional derivative thereof. 3. The molecule may further express ICAM-3 or a functional derivative thereof within the cell. 3. The recombinant DNA molecule of claim 2. 4. selected from the group consisting of ICAM-3 and functional derivatives of ICAM-3; An antibody or antibody fragment capable of binding a molecule. 5. binding of the antibody to the molecule inhibits binding of the molecule to the receptor molecule; 5. The antibody of claim 4. 6. 6. The antibody of claim 5, wherein said receptor is LFA-1. 7. 6. The antibody of claim 5, wherein said receptor is MAC-1. 8. 6. The antibody of claim 5, wherein said receptor is p150,95. 9. A hybridoma cell capable of producing the monoclonal antibody of claim 4. 10. Desiring to produce antibodies capable of binding ICAM-3 or functional derivatives thereof A method for producing a hybridoma comprising: (a) immunizing an animal with purified ICAM-3; (b) fusing the spleen cells of the animal with a myeloma cell line; (c) fusion. Hybridoma cells that secrete antibodies are formed from spleen cells and myeloma cells. Let, and (d) to desired hybridoma cells capable of producing antibodies capable of binding to ICAM-3. A method comprising the step of screening hybridoma cells in relation to . 11. A method of modulating an ICAM-3 mediated biological function of a cell, the method comprising: an effective amount of an ICAM-3 modulating agent in a subject in need of such treatment, comprising: -An antibody capable of binding to ICAM-3; a fragment IC of said antibody capable of binding to ICAM-3 AM-3: a functional derivative of ICAM-3; and ICAM-1, ICAM- 2, or non-immunization of ICAM-3 with molecules other than members of the CD-18 family. administering an ICAM-3 modulating agent selected from the group consisting of globulin antagonists; A method that includes doing. 12. The biological function mediated by the ICAM-3 is an inflammatory response, and the ICAM-3 11. The M-3 modulator is administered to the subject in an amount sufficient to suppress the inflammation. the method of. 13. The inflammatory response may cause delayed-type hypersensitivity reactions, psoriasis syndrome, autoimmune diseases, and organ metastases. transplantation, or in response to a condition selected from the group consisting of tissue graft rejection. 13. The method of claim 12, which is inflammation. 14. 14. The method of claim 13, wherein said organ transplant is a solid organ transplant. 15. 15. The method of claim 14, wherein said organ transplant is a kidney transplant. 16. 14. The method of claim 13, wherein the organ transplant is a non-solid organ transplant. 17. 17. The method of claim 16, wherein said non-solid organ transplant is a bone marrow transplant. 18. The autoimmune disease is Rayles syndrome, autoimmune thyroiditis, EAE, multiple sclerosis. selected from the group consisting of rheumatoid arthritis, rheumatoid arthritis, and lupus erythematosus. 14. The method of claim 13. 19. The inflammatory response is derived from adult respiratory distress syndrome; sepsis, trauma, and hemorrhage. Multiple organ injury syndrome; reperfusion injury of myocardium or other tissues; acute glomerulonephritis; Reactive arthritis; skin disease with an acute inflammatory component; acute purulent meningitis or attacks Other central nervous system inflammatory diseases such as; heat injury; hemodialysis; leukocyte-depleted blood transfusion; ulcers localized colitis; necrotizing enteritis; granular transfusion-associated syndrome; and site It is a non-specific inflammation in response to conditions selected from the group consisting of Caine-induced toxicity. 14. The method of claim 13. 20. The biological function mediated by ICAM-3 is CD-18, which is functional in migration. Metastasis of hematopoietic tumor cells that require family members and the agent is applicable to the subject. 12. The method of claim 11, wherein the agent is administered in an amount sufficient to inhibit metastasis. 21. The ICAM-3-mediated biological function extravascular migration of leukocytes, and the ICAM-3 modulating agent is administered to a subject having such leukocytes. 12. The method of claim 11, wherein the method is administered in an amount sufficient to inhibit migration of the leukocytes. 22. 22. The method of claim 21, wherein the virus-infected cells are infected with HIV. . 23. the ICAM-3 biological function is cell migration associated with asthmatic response; the ICAM-3 modulator is sufficient to suppress asthma-associated cell migration in the subject; 12. The method of claim 11, wherein the amount is administered. 24. A method of suppressing HIV infection of white blood cells, which is used in subjects exposed to HIV. antibody capable of binding to ICAM-3; conjugate; fragment of said antibody capable of binding to ICAM-3; said fragment toxin conjugate; ICAM-3; functional derivative of ICAM-3; ICAM -1, non-immunoglobulin antagonists of ICAM-3 other than ICAM-2, or or a member of the CD-18 family of molecules; a member of the CD-18 family of molecules; toxin conjugates of molecules; and members of the CD-18 family associated with toxins. containing an anti-HIV infection inhibitor selected from the group consisting of functional derivatives of molecules of A method comprising administering an effective amount. 25. 25. The method of claim 24, wherein said HIV is HIV-1. 26. A method for inhibiting the proliferation of tumor cells expressing ICAM-3, the method comprising: a toxin in an amount sufficient to inhibit said proliferation in a subject in need of such treatment; Antibody capable of binding AM-3; toxin conjugate of said antibody; capable of binding ICAM-3 a fragment of said antibody; a toxin conjugate of said fragment; toxin conjugates of Milly member molecules; and CD-1 bound to toxins. a toxin selected from the group consisting of functional derivatives of eight family member molecules; A method comprising administering. 27. A method for inhibiting the proliferation of tumor cells expressing LFA-1, the method comprising: The toxin is administered to a subject in need of appropriate treatment in an amount sufficient to inhibit the proliferation, and the toxin induces the Conductive ICAM-3 and functional ICAM-3 derivatized with toxin A method comprising administering a toxin selected from the group consisting of derivatives of. 28. The method further comprises: an antibody capable of binding LFA-1; an antibody capable of binding LFA-1; Fragment of said antibody; non-immunoglobulin antagonist of LFA-1; ICA An antibody capable of binding M-1; a fragment of the antibody capable of binding ICAM-1; Antibody capable of binding to ICAM-2; fragment of the antibody capable of binding to ICAM-2 a claim comprising administering one or more substances selected from the group consisting of: Any method according to claim 11-27. 29. The ICAM-3 modulator can be administered by oral, parenteral, topical, inhalation or 28. The method of any of claims 11-27, wherein said is administered by nasal means. 30. Any of claims 11-27, wherein said ICAM-3 modulator is administered prophylactically. the method of. 31. Any of claims 11-27, wherein said ICAM-3 modulating agent is administered therapeutically. the method of. 32. 30. The method of claim 29, wherein said parenteral means is intramuscular, intravenous or subcutaneous administration. 33. An antibody capable of binding to ICAM-3; a fragment of the antibody capable of binding to ICAM-3 ICAM-3; functional derivatives of ICAM-3; and ICAM-3; 1. ICAM-2 or ICAM-3 other than members of the CD-18 family a pharmaceutical composition comprising a substance selected from the group consisting of non-immunoglobulin antagonists of A product. 34. 34. The composition of claim 33, further comprising an immunosuppressant. 35. Claim 11, 24, 26, 27 or 2 together with a pharmaceutically acceptable carrier. 9. A pharmaceutical composition comprising the ICAM-3 modulator according to any one of 8. 36. 36. The pharmaceutical composition of claim 35, comprising at least one other immunosuppressive agent. 37. The antibody component of claim 4 together with a pharmaceutically acceptable diluent, excipient or carrier. A therapeutic composition containing a child or a fragment thereof. 38. comprising the antibody molecule of claim 4 or a fragment thereof in a detectably labeled form. A diagnostic composition comprising: 39. A method for detecting the presence of cells expressing ICAM-3, comprising: (a) the cells expressing ICAM-3; A nucleic acid component capable of hybridizing with ICAM-3 mRNA and (b) the nucleic acid molecule is incubated in the presence of the cell or the cell. to determine whether the sample has hybridized with complementary nucleic acid molecules present in the extract. and a method including. 40. 1. A method for diagnosing tumor cells expressing ICAM-3 in a mammalian subject, the method comprising: , (a) an antibody detectably labeled to the subject, or a flag capable of binding to ICAM-3; and (b) administering a composition containing the ICAM-3-conjugated A method comprising detecting antibodies. 41. 1. A method of diagnosing inflammation in a mammalian subject, the method comprising: (a) preparing a sample of the subject; an antibody, or a fragment of the antibody capable of binding to a cell expressing ICAM-3. and (b) detecting the antibody bound to the cell. A method that includes doing. 42. A method for diagnosing the presence of ICAM-3 in a liquid sample obtained from a mammalian subject So, (a) A biological sample of the subject is treated with an antibody or an antibody capable of binding to ICAM-3. (b) incubating the composition containing the fragment; and (b) combining the liquid with the composition. Detecting combined antibodies. 43. The fluid is blood, serum, plasma, synovial fluid, amniotic fluid, cerebrospinal fluid or urine. 43. The method of claim 42, wherein the method is selected. 44. The functional derivative of claim 1, wherein said derivative is a fragment of said ICAM-3. body. 45. The fragment is selected from the group consisting of SEQ ID NOs: 2, 4, and 6. Fragment of claim 44. 46. Claim wherein said derivative is a fragment of said DNA molecule capable of encoding ICAM-3. 2 derivative. 47. 46. Said fragment is selected from the group consisting of SEQ ID NOs: 1, 3, and 5. Fragment of. 48. The fragments are}D1, D1-2, D1-3, D1-4 of CAM-3, and D1-5. . 49. A method for identifying substances that can modulate the binding of ICAM-3 to LFA-1. Therefore, ICAM-3 and LFA-1 are brought into contact in the presence of the substance, and ICAM-3 /LFA-1 binding. 50. the LFA-1 and the ICAM-3 are free of naturally occurring impurities 50. The method of claim 49, wherein the method is purified. 51. the LFA-1 is expressed on the cell surface and the ICAM-3 is naturally present 50. The method of claim 49, wherein the method is purified and does not contain any impurities. 52. The ICAM-3 is expressed on the cell surface and the LFA-1 is naturally present. 50. The method of claim 49, wherein the method is purified and does not contain any impurities.