JPH06505710A

JPH06505710A - 癌の改善された処置方法

Info

Publication number: JPH06505710A
Application number: JP4502021A
Authority: JP
Inventors: ブランダス、ローン、ジェイ．
Original assignee: ユニヴァーシティーオブマニトバ
Priority date: 1990-12-17
Filing date: 1991-12-16
Publication date: 1994-06-30
Anticipated expiration: 2013-01-28
Also published as: DE69103908D1; WO1992011035A1; EP0563127A1; AU9058391A; JP2706371B2; AU664978B2; DK0563127T3; CA2098593A1; DE69103908T2; CA2098593C; ATE110966T1; EP0563127B1; ES2063574T3

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】ｌユニ１１の　された　法免豆立玉１本発明は人を含めて動物の癌をいくつかの化学療法剤によって処置する改善された方法に関する。

ｌ１立１１主な化学療法処理の１つは人の悪性成長（癌）のそれである。化学療法の目的はクローン原性腫瘍又は悪性細胞を最低の患者の損傷のもとに根絶することである。しかしながら人の癌の処置のための化学療法的処理における主な制限の１つは種々の抗癌剤が一般に正常細胞と腫瘍性細胞とを区別できないことである。抗腫瘍性薬剤は人に用いられるいかなる薬種についても最低の治療指標値しか持たず、従って重大で強い生命危害性毒性をもたらす。一般的に用いられている成る種の抗腫瘍性剤は特定の組織に対して特異的かつ急性の毒性を有する。例えばビンカアルカロイドは神経組織に対する重大な毒性を有するが、フドリアマイシンは心組線に対する特異的毒性を、そしてプレオマイシンは肺組織に対して特異的な毒性を有する。一般に、主要な領域の抗腫瘍性薬剤のほとんど全てのものは消化管組織、皮膚組織及び骨髄増血組織の正常細胞に対して著しい毒性を有する。

人における癌の化学的処置について、投薬量を制限する考慮は一般に、各抗腫瘍性薬剤が骨髄増血組織の多分化能幹細胞に対して有する毒性である。この毒性は、殆どの抗癌剤が増殖しつつある細胞に対して、経周期正常細胞と経周期腫瘍細胞とを区別する重大な能力を持たずに特異的に作用するという事実からもたらされる。

現有の各種化学療法剤に特異性を与えるための種々の試みがなされている。Ｒｏｂｅｒｔ　Ｃ，Ｗａｒｒｉｎｇｔｏｎは雑誌”Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ″６．４５１−４６４　（１９８６）に、一般的に用いられる多数の抗癌剤をＬ−ヒスチジノールと組み合わせて用いてこれらの抗癌剤の特異性と親和性との両方の改善が達成されることを示したいくつかのインビトロ実験及びインビボ実験を記述している。Ｌ−ヒスチジノールは必須アミノ酸ヒスチジンの構造的類似体であり、そのα−カルボキシル基が第１級アルコールに還元されているものである。この報告にあげられたＷａｒｒｉｎｇｔｏｎの研究においてＬ−ヒスチジノールはその化学療法剤に先立ち５時間又はそれ以上も前に組織１ｋｇ当り約１０００　Ｂ　の投与量で投与して有効であったことが見出されている。

ｌ匪旦１刀驚くべきことに、Ｈ，、Ｈ＊又はＨｌと分類されている従来のヒスタミン受容体と異なって、最近見出されたＨ＋ｃと表示される細胞内ヒスタミン受容体に対して特異的な拮抗薬を癌にかかった生きた動物に投与した場合に癌細胞に対する各種化学療法剤の特異性と親和性とが改善されることが見出された。細胞内ヒスタミンの結合を阻害するのに特異的な拮抗薬を用いることによって、この改善された効果は、その化学療法剤の投与に先立ち、上にあげたＷａｒｒｉｎｇｔｏｎの研究により示されたものよりも極めて短時間だけ前に重大に低い投与水準で投与して得られる。

本発明は、化学療法剤の投与が生きている種々の動物に対してその動物の正常細胞に通常はマイナスの作用を与えるような場合に、その動物の悪性細胞を処理するのに広く適用することができる。その動物にまず細胞内ヒスタミンに対して特異的な拮抗薬を、正常細胞中の細胞内ヒスタミンのその細胞内ヒスタミン結合部位への結合を阻害するのに充分な量で投与することにより、次に投与された治療剤の悪性細胞に対する特異性及び効果性が改善される。

従って本発明のアスペクトの１つにおいて、生きている動物における癌細胞の処置のための方法が提供されるが、これは（イ）その動物に細胞内ヒスタミンに対して特異的な拮抗薬を、正常細胞中の細胞内ヒスタミンの結合を阻害するのに充分な量で投与し、そして（ロ）次にその動物に少なくとも１種類の化学療法剤を癌細胞に対して有毒な量で投与することを含み、それにより、正常細胞に対する上記少なくとも１種類の化学療法剤のいかなる有害効果をも防止しながら、上記少なくとも１種類の化学療法剤によるその癌細胞に対する高められた毒性効果を得るものである。

本発明はまた生きている動物における癌細胞の処置のための、そして上述の本発明のアスペクトにおいて使用することのできる薬剤キットをも包含する。このキットは、（イ）動物の正常細胞中の細胞内ヒスタミンの結合を阻害するのに充分な投与量の、上記細胞内ヒスタミンに対して特異的な拮抗薬よりなる第１成分と、及びこれと別に、（ロ）癌細胞に対して有毒な投与量の、それら癌細胞のための少なくとも１種類の化学療法剤よりなる第２成分とを含む。

本発明は更に、生きた動物中の正常細胞に対する化学療法剤のいかなる有害効果をも防止するとともにその生きた動物における癌細胞に対するその化学療法剤の高められた毒性効果を得るように、細胞内ヒスタミンに対して特異的な拮抗薬を使用する方法を含む。

さらにまた、成る化学療法剤で処置されている患者にその化学療法剤の投与の後約２４ないし約７２時間の期間にわたり静脈内注射を与えた場合に、一般に化学療法にともなう副作用、すなわち悪心、嘔吐、食欲不振及び口内炎が少なくとも改善され、そしてしばしば防止されることが見出された。

従って本発明のもう１つのアスペクトにおいて癌細胞の処置のための方法が提供され、これは（イ）動物に少なくとも１種類の化学療法剤を癌細胞に対して有毒な量で投与し、そして（ロ）この動物に少なくとも２４時間の期間の間に、細胞内ヒスタミンに対して特異的な拮抗薬を、正常細胞中の細胞内ヒスタミンの結合を阻害するのに充分な量で投与し、それにより、正常細胞に対するその化学療法剤の投与による種々の副作用を少なくとも改善することよりなる。

更に本発明は、上記後者の方法において使用することのできる薬剤キットを包含し、これは前述したキットと、及び細胞内ヒスタミンに対して特異的な、動物への化学療法剤の投与による種々の副作用を改善するのに充分な投与量の拮抗薬とを含む。

更にまた本発明は、生きている動物に対する癌細胞のための化学療法剤の投与による種々の副作用を改善するように、細胞内ヒスタミンに対して特異的な拮抗薬を使用する方法を含む。

の　ｔ　畳　日第１ないし第５図は以下にあげる語例に記述する各実験において得られた試験データをグラフに示すものである。

日の−・な８日本発明においては細胞内ヒスタミン受容体に対して特異的な拮抗薬であるいかなる化合物をも使用することができ、そしてこれは細胞内ヒスタミンの正常細胞中の細胞内結合部位（Ｈ＋ｃ）における結合を阻害するのに充分な量で投与される。

本発明において使用することのできる特定化合物は下記式のジフェニルメタン化合物である。

但しこの式においてＸ及びＹは塩素又は臭素であり、０及びｐはＯ又は１であり、Ｒ３及びＲ８はそれぞれ工ないし３個の炭素原子を含むアルキル基であるか又は−緒に結合してその窒素原子とともにヘテロ環を形成し、そしてｎは１．２又は３である。

これらのジフェニルメタン化合物の薬学的に受容し得る塩類も使用することができる。

好ましい具体例の１つにおいて基はジエチルアミノ基であり、そしてもう１つの好ましい具体例においてはこれはモルホリノ基である。０及びｐは通常は０であり、そしてｎは２であることができる。特に好ましい具体例の１つにおいてはｎは２であり、０およびｐはそれぞれＯであり、そして基はジエチルアミノ基である。この化合物、すなわちＮ、Ｎ −ジエチル−２−（４−（フェニルエチル）−フェノキシ１−エタンアミンはその塩酸塩の形でＤＰＰＥと略記することにする。

ここで用いられる各化合物は細胞内ヒスタミンに対して特異的な拮抗薬であり、そして特に、細胞内ヒスタミンがＨＩＣで表わされる部位に結合するのを阻害する。上にあげたＷａｒｒｉｎｇｔｏｎの研究において用いられたし一ヒスチジノールは細胞内ヒスタミンに対して特異的ではない。Ｌ−ヒスチジノールによればＨＩＣ部位への結合の若干の親和性は示されるけれども、この化合物はまた他のヒスタミン結合部位へも結合する。本発明においてはＨＩＣ部位へのみ結合する化合物が用いられる。

本発明においてはＬ−ヒスチジノールに比して大いに少ない量の拮抗薬化合物が用いられ（典型的には１０００　ｍｇ／ｋｇ　に対する２　ｍｇ／ｋｇ）　、そしてこの拮抗薬化合物はＬ−ヒスチジノールに比して極めて短い時間その化学療法剤に先立って（典型的には５時間に対して２０−３０　分）投与される。

本発明に置いて用いられる拮抗薬化合物は患者に対していかなる好都合な態様ででも、例えばこのものの水性の、薬学的に受容し得るビヒクルの中の溶液を注射することによって投与される。

この拮抗薬化合物は少なくとも１種類の化学療法剤の投与に先立って患者に投与される。化学療法剤、又はより一般的にはそのような薬剤の混合物は、通常の化学療法の手法に従いその正常な投与態様に一致したいかなる好都合な態様ででも投与することができる。

化学療法剤の投与に先立っての患者への拮抗薬化合物の投与はこの拮抗薬が正常細胞中の細胞内ヒスタミンの結合を阻害するのを許容し、そしてそれによって実際にそれら正常細胞の増殖をさえぎるために必要である。拮抗薬化合物投与の、化学療法剤の投与より前の時間の長さはその拮抗薬化合物、このものの投与の態様及び患者の大きさに依存する。一般には拮抗薬化合物は少なくとも１種類の治療薬の投与に先立って約１５　ないし約９０分前に、好ましくは約３０ないし約６０分前に患者に投与される。

患者に投与する拮抗薬化合物の量は正常細胞中の細胞内ヒスタミンの結合を阻害するのに少な（とも充分でなければならない０本発明の有利な種々の効果を達成するのに必要な量は、その用いた拮抗薬化合物、用いた化学療法剤及びそのような使用薬剤の量に依存する。

一般にその用いる拮抗薬化合物の量は、この化合物の投与される動物の体重１　ｋｇ当り約２から約７５　ｍｇまでである。本発明によれば、従来の化学療法がその疾病過程に含まれない正常細胞や組織の損傷をもたらすような広範囲の条件のもとてその化学療法剤による損傷に対して正常細胞を同時に保護するとともに、癌細胞に対する高められた化学療法効果を達成することができる。従来の化学療法においてもたらされる正常細胞に対する有害効果の例としては、（イ）骨髄細胞の斃死又は損傷、（ロ）消化管を覆う正常細胞の斃死又は損傷、（ハ）例えばドキソルビシン（すなわちアドリアマイシン）及びダウノルビシン並びにエビルビシンを含むその類似体及びそれと関係はないが、交差反応性の化合物であるミドキサントロンのような抗癌剤による正常心筋細胞の斃死又は損傷、及び（ニ）シスブラチナムによる正常な組織、特に腎臓内の正常細胞に対する損傷が含まれる。

癌に罹患した種々の動物においてはＤＰＰＥ処置のみでは腫瘍の成長に対して、もしあったとしても僅かなインビボ効果しか示さない。しかしながら公知の種々の抗癌剤と組み合わせた場合には著しい相乗作用が観測され、それによって腫瘍細胞は阻害されるか又は死滅する。この効果は、例えば肉腫や黒色腫のような成る種の動物の癌において著しい退行又は治癒をもたらした。

上に述べたように、化学療法剤の投与に引き続く拮抗薬化合物の継続的な投与、なかでも日量基準で約０．２　ｍｇ／ｋｇまでのＤＰＰＥの継続的投与は化学療法に伴う悪心、嘔吐、食欲不振及び口内炎を含む種々の副作用を少な（とも改善し、そしてしばしばこれらを取り除き、その際、投与の期間が長ければ長い程、それらの副作用に対する防護が大きくなる。このような拮抗薬の、日量で約０．１　ないし約５　ｍｇ／ｋｇ　の投与量を用いることができる。

このような拮抗薬化合物の継続的投与は静脈内投与によってもっとも好都合に行われるが、経口投与も可能であって、成る場合には患者の受容性及びその医療設備の負荷の低減の観点からむしろより望ましい。

本出願人はほめによって達成される種々の好都合な効果を説明するためにいかなる理論とも結びつけることを望むものではないけれども、下記のような理論が提案される。患者に投与される化合物は新しく見出された新規な細胞内受容体（Ｈ，ｃ）に結合するヒスタミンの特異的な拮抗薬である［例えば５ａｘｅｎａ等による雑誌″５ｃｉｅｎｃｅ″　第２４３　巻、１５９６−１５９９頁の［ヒスタミンは血小板凝集反応を媒介する細胞内メツセンジャーである」を参照されたい］。細胞内ヒスタミンは通常、この受容体を通じて細胞増殖、免疫応答及び血小板凝集反応を含む多くの重要な細胞機能を媒介又は変成する。

正常細胞の保護は拮抗薬によるＨＩＣ部位におけるヒスタミンの拮抗作用によって達成される。このような拮抗作用は細胞分化の１時的な完全遮断をもたらし、それによって正常細胞は細胞の分化に優先的に作用する化学療法剤の存在のもとてＤＮＡの損傷に非感受性である。このようにして、例えばＤＰＰＥは正常の骨髄幹細胞の、治療にともなう毒性を遮断するのに有効である。

加えて、その拮抗作用はその組織内にのプロスタグランジン（組織を種々の損傷性薬剤に対して保護することが知られている天然物質）の水準の上昇をもたらす。例えばＤＰＰＨによる処理は腸内の保護性プロスタグランジンであるプロスタグランジン　（ＰＧＩＩ！の５００％の上昇をもたらす。この機構によってＤＰＰＥは例えばアルコールやシステアミンのような有毒薬剤の存在において潰瘍の形成を完全に阻止することが知られている（本発明者共同発明者の一人である米国特許第４，８２９，０６８　号参照）。

この拮抗薬は更に、そのヒスタミン自身を含む顆粒の含有量が組織の損傷及び重大な全身的副作用と結びつけられた、組織肥満細胞の脱顆粒の強力な阻止をもたらす、アドリアマイシンのような成る種の抗癌剤は心電効果と関連している効果の１つである肥満細胞の重大な脱顆粒をもたらす。

骨髄細胞の場合と同様に、本発明に従う正常に増殖しつつあるリンパ球（免疫細胞）の処理は投与量に依存するＤＮＡ合成の阻止及びこれらの細胞の遮断を細胞毒性を生ずることなくもたらす、この拮抗薬は免疫系におけるＴ−リンパ球及びＢ−リンパ球の両方に対して作用する０例えばＤＰＰＥは強力な分裂促進剤であって植物レクチンの１つであるコンカナバリンＡの存在のもとてＴ−リンパ球の増殖に完全な拮抗作用をもたらすことができる。、ＤＰＰＥはまた成る種のＢ− 細胞におけるメディエータであるインターロイキン−２による抗体形成の刺激をも遮断する。

ここに記述するように、正常細胞及び組織に対するインビボでのこのものの細胞保護効果と異なって、ＤＰＰＥ処理は、米国特許第４．８０３．２２７　号に記述されているように、悪性細胞或いはウィルス感染させた細胞をインビトロにおいて損傷させ、及び／又は斃死させる。

叉」Ｌ泗偶Ｌ１この例は成るマウス肉腫モデルにおけるアドリアマイシンの抗腫瘍活性のＤＰＰＨによるインビトロでの増大を示す。

Ｃ−３繊維肉腫細胞（３Ｘ　１０’）を第０日にＣ３Ｈマウスの左臀部領域に注入した。これらのマウスに腹腔内投与によってＤＰＰＥとアドリアマイシンとの組み合わせによる処理を施した。ＤＰＰＥはアドリアマイシン投与の６０分前に投与した。また、マウスに食塩水、ＤＰＰＥ単独及びアドリアマイシン単独の投与も行った。

この実験における各動物（ｎ・１２）を６０日にわたり追跡した。この実験期間の最後において諸苦心できる腫瘍のない動物を治癒したものと考えた。

得られた結果を下記第１表にあげる。

簾」二人アドリアマイシン　（２ｍｇ／ｋｇｌ　ＯＤ　Ｐ　Ｐ　Ｅ　（５０Ｂ／ｋｇ）　０ＤＰＰＥ　（２ｍｇ／ｋｇ　）　／　１アドリアマイシン　（２ｍｇ／ｋｇｌ ♀Ｖじ昌Ｓ　、、ｍ　ｇ、／にマ’２　ｉ’ｇ／ｋｇｌ　３♀Ｙじバ：’！に１ ’２　ｍｇ／）ｃｇｌ　“上記第１表にあげた結果かられかるように、アドリアマイシン及びＤＰＰＥをそれぞれ単独で投与した場合にはなんらの効果も観測されなかったけれども、ＤＰＰＥを増大する量でアドリアマイシンと組み合わせて使用した場合には試験したＤＰＰＥの最高の投与量（５０ｍｇ／ｋｇ）において１２匹の動物のうち７匹が治癒しているという増大した抗腫瘍活性が観測された。

Ｌ工この例は５ＦＵ及びアドリアマイシンの致死量で処理したマウスにおけるＤＰＰＥによる継代骨髄細胞の保護作用を示す。

Ｃ５７Ｂ１株のマウスに５ＦＵ（５−フルオロウラシル）の致死量（７，５ｎａｇ）　、ＤＰＰＥの致死量（１００ｎａｇ／ｋｇ）又は５ＦＵの致死量とＤ　Ｐ　Ｐ　Ｅ　（１００ｍｇ／ｋｇ又は４ｍｇ／ｋｇ　）との組み合わせを投与し、そしてその得られた結果を食塩水のみを投与したコントロール群と比較した。ＤＰＰＥ及び食塩水は５ＦＵの９０分前に投与した。骨髄細胞の計数を投与後２４時間目及び４８時間目に行った。

得られた結果を下記の第１ＩＡ　表にあげる。

処理　ＣＦＵ−（：／１０’　ｃｅｌｌｓ　ｌ）　Ｒ，Ｃ，Ｓ、２）２４　ｈｒ　４８　ｈｒ　２４　ｈｒ　４８　ｈｒ食塩水　３８．３　４０．３　１．０　１．０５　Ｆ　Ｕ　Ｏ，２０，０９０，００６０，００２Ｄ　Ｐ　Ｐ　Ｅ　３６．７　３８．６　０．９６　０．９６上に記述した５ＦＵによる実験と平行するいくつかの実験をアドリアマイシンの致死量（２０Ｂ／ｋｇ）を用いて行った。

これらの実験により得られた結果を下記の第１ＩＢ　表にあげる。

笈−工ＩＢ−表アドリア　１．８　０．６５　０．０４　０．００６マイシンＤ　Ｐ　Ｐ　Ｅ　４２．３　４１．３　０．９７　０．９７［４Ｂ／ｋｇ）上の第１ＩＡ　及びＩＩＢ　表にあげた結果かられかるように、ＤＰＰＥを５ＦＵ又はアドリアマイシンと共に投与することによって５ＦＵ又はアドリアマイシンの致死的作用に対する継代骨髄細胞のほとんど完全な保護がもたらされた。

例ＩＩＩこの例はＢＩ３黒色腫肺転移モデルにおけるＢＣＮＵの抗癌活性のインビボでの上昇を示す。

第Ｏ日月にＣ５７Ｂｌ　マウスの尾の翅脈中に５ＸｌＯ’個のＢＩ３黒色腫細胞を静脈内注射した。これらのマウスを食塩水、２３　Ｂ／ｋｇのＤＰＰＥ、ｌＩｍｇ　のＢＣＮＵ又は３２　Ｂ／ｋｇのＤＰＰＥと１　ｍｇのＢＣＮＵとの組み合わせを用いて、第１８目に腹腔内注射によって処理した。ＤＰＰＥはＢＣＮＵの６０分前に投与した。

各群共に１２匹の動物のうち６匹を第１４日日に層殺してそれぞれの細胞を転移の測定のために取り出した。残りの６匹の動物を死に至るまで追跡した。肺転移の数と大きさとを肉眼又は顕微鏡での計数によってめた。

得られた結果を下記の第１ＩＩ　表にあげる。

ｌ」旦−１食塩水　２４１　−　全て巨視的　１９ＤＰＰＥ　２１９　（９１％）　全て巨視的　２１ＢＣＮＵ　１４４　（６０％）　全て巨視的　２４ＤＰＰＥ／　５９　（２７％）　全て微視的　３２ＣＮＵ上記第１ＩＩ　表の結果かられかるように、肺腫瘍に対するＢＣＮＵの阻害効果はＤＰＰＥ　（このもの単独で縁辺効果を有していた）の追加的な存在によって著この例はＢＩ３黒色腫の肺転移モデルにおけるダウノルビシンの抗腫瘍活性のインビボでの上昇を示す。

シンを用いて繰返した。６匹のマウスのいくつかの群に８１６ｆｌＯ黒色腫の細胞を注射し、そして２４時間後に食塩水、４　ｍｇ／ｋｇのＤＰＰＥ単独、ダウノルビシン単独の非致死量（１２，５ｎａｇ／ｋｇ）又はＤＰＰＥ　（それぞれ４．２５　又は５０　Ｂ／ｋｇ　）を投与した。全ての動物を致死まで追跡するか、又は注射後６０日間にわたり追跡して肺転移を調べるために層殺した。

得られた結果を下記第１Ｖ表にあげる。

第１Ｖ表食塩水　１７　０ダウノルビシン　（１２，５Ｂ／ｋｇｌ　２５　０夛じ是Ｊｔソ／１〒２！５” Ｂ／ｋｇｌ　２９２夛じ是８すｇ偽！５’Ｌｇ／ｋｇ）　６０°　４夛；シ児Ｊリ−ｇ／に讐！５”ｇｇ／ｋｇｌ　””　４第１Ｖ表の結果かられかるように、ダウノルビシンの肺腫瘍に対する阻害効果はＤＰＰＨの存在によって促進された。

ｉ」この例はアドリアマイシンの致死量の投与に対するインビボでの宿主細胞保護作用を示す。

アドリアマイシン１５　Ｂ／ｋｇの投与の１時間前（口＝１２）又は１５分前（ｎ　＝　６　）にＤＢＤ／２　のマウスに食塩水又はＤＰＰＥ　（２園ｇ／ｋｇ）を投与した。３０日後の生存動物の数をめた。結果を下記第Ｖ　表にあげる。

第Ｖ表食塩水　４／１２　（３３％）第Ｖ　表かられかるように、ＤＰＰＥの投与はインビボにおいてアドリアマイシンの致死量の投与に対する宿主細胞の保護をもたらした。

」工この例はリンパ球ＤＮＡ中へのチミジン取込みに対するＤＰＰＨの効果を示す。

ＢＡＬＢ／Ｃマウスからの牌臓細胞をチミジン取込みのためにコンカナバリンＡ（５μｇ／ｍｌ）によって刺激した０次にこれらの細胞を変化する量のＤＰＰＨの投与により処理し、そして取込まれたチミジンの水準をめた。結果をグラフにプロットしたが、これは第１図の通りである。この図かられかるように、２５　 μＭの投与水準においてＤＰＰＥはＤＮＡ中へのチミジンの取込みを完全に阻止するが細胞の生存率に有害な影響は与えない、すなわちＤＰＰＨによる処理は正常に増殖しつつあるリンパ球を、細胞毒性をもたらすことなく成長遮断の状態にする。

この実験を５μｇ／ｍｌ　に代えて２．５μｇ／■ｌ　のコンカナバリンＡ及び１０％に代えて２４％の牛脂仔血清を用いて繰り返した。得られた結果を第２図に示す。

ＤＮＡ合成を阻害したＤＰＰＨの濃度（５μ■）においてなんらの重大な細胞毒性も観測されなかった。

１」■ この例もリンパ球ＤＮＡ中へのチミジン取込みに対するＤＰＰＨの作用を示す。

例ＶＩの実験を、同様にＢＡＬＢ／Ｃ由来のウィルス感染させた非老化性の形質転換された牌臓から導いたリンパ球（Ｓ−１０）を０．２５　ｎＭ　の３■−チミジンの添加とともに用いて繰り返した。結果をグラフにプロットしてそれぞれ第３及び第４図に示す。これに見られるように、第１及び第２図と異なって、２５μ−のＤＰＰＥはウィルス感染させた細胞に約５０％の細胞毒性をもたらした。細胞数に換算すれば、チミジンの取込みはＤＰＰＨの細胞毒的濃度（１０ないし２５μＭ）　において上昇した。

コノ実験を、人の乳癌細胞（ＭＣＦ−７）を０．２５　ｎＭのチミジンの添加と共に用いて再び繰り返した。結果をグラフにプロットしたが、これは第５図に示す通りである。５−１０細胞を用いて観測されたと類似の結果を見ることができる。

匠」ユＵ進行した癌を有する　１４人の患者について臨床研究を実施した。

（ａ）ＤＰＰＥ単独を複数の患者に投与して人における安全投与範囲をめた。最高の非毒性投与量は１時間の時間にわたり静脈内投与で与えた４　Ｂ／ｋｇ　であることが見出された。１時間の間の６　ｍｇ／ｋｇ　においてＣＮＳ毒性（いずれかの、又は全ての筋肉単収縮、体中心部温度の１ないし２℃の低下、聴覚過敏や幻覚、コレオアテトーシス、小脳性運動失調及び吐射によって示される）は投与限界であった。しかしながら２時間にわたり６　ｍｇ／ｋｇ　を静脈内投与したときに重大な毒性は存在せず、このことはピーク血清水準がＣＮＳ毒性を決定することを示唆している。その投与量をｍｇ／Ｍ”　に換算するならば、前に前臨床的な毒物学（腹腔経由）でのマウスにおける研究（２４０ｍｇ／Ｍ”ｌにおいて観測された同じ投与量においてＣＮＳ毒性の閾値が現れる。

（ｂ）２４ないし７２時間にわたる静脈内注射として与えられた、日量で０．２　ｍｇ／ｋｇ　の投与量においてＤＰＰＥは、ときたまの患者における便秘症の排除の可能性と共に全く臨床的副作用がなく、そして種々の生化学或いは血液計数におけるなんらの重大な変化を生じないことが見出された。このＤＰＰＨの投与もまたアドリアマイシン（６０ｍｇ／Ｍ”ｌで処理した６７６人の患者において悪心、嘔吐、食欲不振及び口内炎を強く防止し、又は９０％以上改善することが確かめられている。ＤＰＰＥを静脈内注射によって７２時間にわたって毎日　０．２　ｍｇ／ｋｇ　の投与量で与えたときにＧＩの防止がもっとも著しかった。

（ｃ）１時間にわたりＤＰＰＥをより高い投与量での単一の静脈内投与（１，２，４ｍｇ／ｋｇ）もアドリアマイシンに対して重大に制吐作用性であるようであり、但し若干の患者においてはＤＰＰＥ単独の４　＋ｇ／ｋｇの投与量において悪心又は一過性食欲不振が経験された。ＤＰＰＥ単独の１時間にわたる工ないし６　Ｂ／ｋＨの静脈内投与量においても４／６人の患者において好中球計数における一過性の減少（２０−３０％）を引き起こしたが、第５ないし７日目までに完全に回復したことが見出された。ＤＰＰＥ単独での血小板、ヘモグロビン又は種々の生化学に対するなんらの重大な効果も観測されなかった。

（ｄ）毎日の投与量としてＤＰＰＥの０．２腸ｇ／ｋｇ　を用いた場合に処理期間の増大は悪心、嘔吐、食欲不振及び最低白計数　（ｎａｄｉｒ　ｗｈｉｔｅ　ｃｏｕｎｔｓｌの低下を防止するという治療上の便利さを改善したけれども、６０■ｇ／Ｍ”の投与水準におけるアドリアマイシンにより引き起こされる脱毛症は改善しなかった。２４時間のＤＰＰＥ注射はアドリアマイシン投与に引き続く最初の２４　ないし４８時間における効果的な制吐的治療であったが、次いで多くの患者はアドリアマイシン投与の７２　又は９６時間後において遅延された悪心、嘔吐、及び／又は食欲不振を経験した。しかしながら７２時間注射として与えた場合にＤＰＰＥは、それぞれがそのような処理を２回受けた４人の患者においてアドリアマイシンの、全ての急性の、かつ遅延された消化管副作用を完全に遮断することが観測された。加えて、追加的な２人の患者はアドリアマイシン投与に引き続く最初の２４時間の間に悪心及び／又は嘔吐のほんの副次的な経験を１度経験したが、その後は制吐剤をなんら必要とせずに回復した。低い投与量でのＤＰＰＨの７２時間注射も１人の患者において口の潰瘍形成を防止したが、この患者は以前の非アドリアマイシン化学療法及び短いスケジュールで与えられたＤ　Ｐ　Ｐ　Ｅ／アドリアマイシンの全ての間においてこの症状を経験したものであった。

（ｅ）ＤＰＰＥ／アドリアマイシンの他の治療法に比して第１４８目の最低多形核球ＷＢＣ計数は７２時間にわたり　０．２■ｇ／ｋｇ　のＤＰＰＥを投与された患者において最高である（１，２８５±３８５、平均±Ｓ、Ｅ、Ｍ、　）もののようである、第１４８目に血小板数は一様に１５００００　／■■８以上であった。

（ｆ）１５人の評価できる患者において、５人の主応答、２人の乳癌、１人のリンパ腫、及び１人の甲状腺の髄様癌が実証された。

ｌ豆皮１力この開示を要約すれば、本発明は癌の化学療法処理の新規な方法を提供するものであり、それによって、この化学療法剤の毒作用に対する正常細胞の保護を同時に達成しながら、その化学療法剤の高められたインビボでの効果が得られる０本発明の範囲内で種々の修飾態様が可能である。

第１図（○）コントロール細胞数％（・）コントロール３■−チミジン取込み％第４図Ａょ　ＭＣＦ−７国際調査報告 −０−−一息−−１＋１１＋Ｍ＋　ｐｃｖ’ｌｃ＾　Ｑｌ／ＱＱｕＱ＋−，，１２，−＋ｌｌ＋ｌｌ＋＋−＝　ＤｒＴ／Ｃム　０１／ｎｎＪｊ。

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Claims

【特許請求の範囲】

（１）生きている動物における癌細胞を処理する方法において、（イ）その動物に細胞内ヒスタミンに対して特異的な拮抗薬を、正常細胞中の細胞内ヒスタミンの結合を阻害するのに充分な量で投与し、そして（ロ）次にその動物にそれら癌細胞用の少なくとも１種類の化学療法剤を上記癌細胞に対して有毒な量で投与することを含み、それにより、正常細胞に対する上記少なくとも１種類の化学療法剤のいかなる有害効果をも防止しながら、上記少なくとも１種類の化学療法剤によるその癌細胞に対する高められた毒性効果を得る方法。
（２）上記少なくとも１種類の化学療法剤の投与の後で、上記少なくとも１種類の化学療法剤の投与による副作用を少なくとも改善するのに充分な時間にわたって上記拮抗薬の有効量を投与する、請求の範囲１の方法。
（３）上記細胞内ヒスタミンに対して特異的な拮抗薬が下記式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （この式においてＸ及びＹはそれぞれ塩素又は臭素であり、ｏ及びｐは０又は１であり、Ｒ１及びＲ２はそれぞれ１ないし３個の炭素原子を含むアルキル基であるか、又は一緒に結合してその窒素原子とともにヘテロ環を形成し、そしてｎは１、２又は３である）のジフェニルメタン化合物又はその薬学的に受容し得る塩である、請求の範囲１の方法。
（４）基 ▲数式、化学式、表等があります▼ がジエチルアミノ基又はモルホリノ基である、請求の範囲３の方法。
（５）基 ▲数式、化学式、表等があります▼ がジエチルアミノ基であり、ｎが２であり、そしてｏとｐとがそれぞれ０である、請求の範囲３の方法。
（６）ジフェニルメタン化合物が塩酸付加塩の形である、請求の範囲５の方法。
（７）上記拮抗薬を上記少なくとも一種類の化学療法剤の上記投与の約１５ないし約９０分前にその動物に投与する、請求の範囲１の方法。
（８）その時間が約３０から約６０分までである、請求の範囲７の方法。
（９）上記拮抗薬を動物の体重１ｋｇ当り約２から約７５ｍｇまでの量で投与する、請求の範囲７の方法。
（１０）生きている動物における癌細胞を処理する方法において、（イ）上記動物にそれら癌細胞用の少なくとも１種類の化学療法剤を上記癌細胞に対して有毒な量で投与し、そして（ロ）次に細胞内ヒスタミンに対して特異的な拮抗薬を、少なくとも２４時間の間にわたって正常細胞中の細胞内ヒスタミンの結合を阻害するのに充分な量で投与することを含み、それにより、上記少なくとも１種類の化学療法剤の投与による副作用を少なくとも改善する方法。
（１１）上記細胞内ヒスタミンに対して特異的な拮抗薬が下記式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （この式においてＸ及びＹはそれぞれ塩素又は臭素であり、ｏ及びｐは０又は１であり、Ｒ１及びＲ２はそれぞれ１ないし３個の炭素原子を含むアルキル基であるか、又は一緒に結合してその窒素原子とともにヘテロ環を形成し、そしてｎは１、２又は３である）のジフェニルメタン化合物又はその薬学的に受容し得る塩である、請求の範囲１０の方法。
（１２）基 ▲数式、化学式、表等があります▼ がジエチルアミノ基又はモルホリノ基である、請求の範囲１１の方法。
（１３）基 ▲数式、化学式、表等があります▼ がジエチルアミノ基であり、ｎが２であり、そしてｏとｐとがそれぞれ０である、請求の範囲１０の方法。
（１４）ジフェニルメタン化合物が塩酸付加塩の形である、請求の範囲１３の方法。
（１５）上記拮抗薬を日量約０．２ｍｇ／ｋｇまでの投与量で投与し、そしてこのものの上記投与を悪心、嘔吐、食欲不振及び口内炎の防止の達成のために約７２時間までにわたり実施する、請求の範囲１４の方法。
（１６）生きている動物における癌細胞を、抗癌作用を有する少なくとも１種類の化学療法剤で処理する方法において、上記動物に下記式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （この式においてＸ及びＹはそれぞれ塩素又は臭素であり、ｏ及びｐは０又は１であり、Ｒ１及びＲ２はそれぞれ１ないし３個の炭素原子を含むアルキル基であるか、又は一緒に結合してその窒素原子とともにヘテロ環を形成し、そしてｎは１、２又は３である）の少なくとも１種類のジフェニルメタン化合物を、その動物の１ｋｇ当り約２ないし約７５ｍｇの量で、上記少なくとも１種類の化学療法剤の上記動物への投与の約１５ないし約９０分前に投与することよりなる、改良。
（１７）動物における正常な骨髄細胞を、この動物に癌細胞の処置のために投与された少なくとも１種類の化学療法剤の有害効果に対して保護する方法において、上記動物に下記式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （この式においてＸ及びＹはそれぞれ塩素又は臭素であり、ｏ及びｐは０又は１であり、Ｒ１及びＲ２はそれぞれ１ないし３個の炭素原子を含むアルキル基であるか、又は一緒に結合してその窒素原子とともにヘテロ環を形成し、そしてｎは１、２又は３である）の少なくとも１種類のジフェニルメタン化合物を、その動物の１ｋｇ当り約２ないし約７５ｍｇの量で、上記少なくとも１種類の化学療法剤の上記動物への投与の約１５ないし約９０分前に投与することよりなる方法。
（１８）動物における正常な心筋細胞を、この動物に癌細胞の処置のために投与された少なくとも１種類の化学療法剤の有害効果に対して保護する方法において、上記動物に下記式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （この式においてＸ及びＹはそれぞれ塩素又は臭素であり、ｏ及びｐは０又は１であり、Ｒ１及びＲ２はそれぞれ１ないし３個の炭素原子を含むアルキル基であるか、又は一緒に結合してその窒素原子とともにヘテロ環を形成し、そしてｎは１、２又は３である）の少なくとも１種類のジフェニルメタン化合物を、その動物の１ｋｇ当り約２ないし約７５ｍｇの量で、上記少なくとも１種類の化学療法剤の上記動物への投与の約１５ないし約９０分前に投与することよりなる方法。
（１９）胃腸管を覆っている正常な細胞を、この動物に癌細胞を処置するために投与された少なくとも１種類の化学療法剤の有害効果に対して保護する方法において、上記動物に下記式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （この式においてＸ及びＹはそれぞれ塩素又は臭素であり、ｏ及びｐは０又は１であり、Ｒ１及びＲ２はそれぞれ１ないし３個の炭素原子を含むアルキル基であるか、又は一緒に結合してその窒素原子とともにヘテロ環を形成し、そしてｎは１、２又は３である）の少なくとも１種類のジフェニルメタン化合物を、その動物の１ｋｇ当り約２ないし約７５ｍｇの量で、上記少なくとも１種類の化学療法剤の上記動物への投与の約１５ないし約９０分前に投与することよりなる方法。
（２０）上記少なくとも１種類の化学療法剤がＤＰＰＥである、請求の範囲１６、１７、１８又は１９のいずれか１つの方法。
（２１）生きている動物における癌細胞の処置のためのキットにおいて、（イ）動物の正常細胞中の細胞内ヒスタミンの結合を阻害するのに充分な投与量の、上記細胞内ヒスタミンに対して特異的な拮抗薬よりなる第１成分と、及びこれと別に、（ロ）癌細胞に対して有毒な投与量の、それら癌細胞用の少なくとも１種類の化学療法剤よりなる第２成分とを含む上記キット。
（２２）更に、別に（ハ）細胞内ヒスタミンに対して特異的な、動物への化学療法剤の投与による種々の副作用を改善するのに充分な投与量の拮抗薬よりなる第３成分を含む、請求の範囲２１のキット。
（２３）上記細胞内ヒスタミンに対して特異的な拮抗薬か下記式のジフェニルメタン化合物、すなわち▲数式、化学式、表等があります▼ （この式においてＸ及びＹはそれぞれ塩素又は臭素であり、ｏ及びｐは０又は１であり、Ｒ１及びＲ２はそれぞれ１ないし３個の炭素原子を含むアルキル基であるか、又は一緒に結合してその窒素原子とともにへテロ環を形成し、そしてｎは１、２又は３である）又はこのものの薬学的に受容し得る塩である、請求の範囲２１又は２２のキット。
（２４）上記細胞内ヒスタミンに対して特異的な拮抗薬が下記式 ▲数式、化学式、表等があります▼ の、場合によりこのものの塩酸付加塩の形のジフェニルメタンである、請求の範囲２１又は２２のキット。
（２５）上記（イ）の投与量が動物１ｋｇ当り約２ｍｇから約７５ｍｇまでである、請求の範囲２１又は２２のキット。
（２６）上記（ハ）の投与量が動物１ｋｇ当り約０．２ｍｇまでである、請求の範囲２１又は２２のキット。
（２７）生きている動物における癌細胞に対する化学療法剤の高められた毒作用を、この動物の正常細胞に対するその化学療法剤のいかなる有害効果をも防止しながら得るために、細胞内ヒスタミンに対して特異的な拮抗薬を使用する方法。
（２８）生きている動物への癌細胞用化学療法剤の投与による副作用を改善するために、細胞内ヒスタミンに対して特異的な拮抗薬を使用する方法。