JPH06505700A - 外膜をもつウィルスおよび精子を不活性化する方法 - Google Patents
外膜をもつウィルスおよび精子を不活性化する方法Info
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- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
外膜をもつウィルスおよび精子を不活性化する方法発明の背景
1、発明の分野
本発明は、外膜をもつウィルスの活性を阻害する新規な方法および新規な物に関
する。同じく本発明(ヨ、ウィルス感染症の治療にも関する。更に詳細には、本
発明(よ、外膜をもつウィルスが引き起こす疾患および感染症の発症を阻害する
方法に関する。一つの態様では、本発明G!特に、その主要な感染様式が性的な
ものであるウィルスの活性を阻害する方法に関する。他の態様書こお0て同じく
本発明は、その感染様式が非性的な外膜をもつウィルスの活性を阻害する方法に
も関する。本発明1こお−)で使用する組成物は、ウィルスまたはウィルス感染
症と共存する細菌および真菌の阻害にも同じく有効である。その上、本発明はウ
ィルス関連の疾患、詳細:こGtAIDSlこ関連した性行為感染症および他の
免疫が減退した宿主における日和見感染症の治療に関する。
本発明の方法は、ウィルスの阻害およびウィルス感染症の治療における、ベタイ
ンおよびアミンオキシドの混合物の使用に関する。ベタインは(a)のアルキル
−ーベタイン、アルキル−N−スルホベタイン、アシル−N−ベタイン、アルキ
ルN−置換アミノプロピオン酸およびアルキルイミダゾリニウムベタインから成
る群から選択され、アミンオキシドは(b)のアルキル−N。
N−ジメチルアミンオキシド、アルキル−N、N−ジヒドロキジエチルアミンオ
キシドおよびアシルアミド1−リシンおよびそれらの低級アルキル同族体を意味
する。
この用語は、そのような化合物のスルホン酸類似化合物であるN−ジメチルアミ
ノプロピオン酸およびスルホベタタインも含む。特に指定しない限り、N−ジメ
チル化合物を表すものである。更に詳細には、本発明は外膜をもつウィルスの阻
害におけるアルキル=N−ジ(低級アルキル)ベタインおよびアルキル=N−ジ
(低級アルキル)アミンオキシドの混合物の使用方法、およびこれらのウィルス
が引き起こす感染の治療における本混合物の使用に関する。この混合物は殺精子
剤として単独でまたは通常の殺精子剤と共に使用することができる。これらの混
合物は避妊器具と併用することができ、避妊器具に組み込んで使用することもで
きる。
2、先行技術の説明
あるアミンの混合物は、グラム陰性菌およびグラム陰性菌に対し有効な抗微生物
剤であることが知られている。
例えばアルキル−N−ベタイン、アルキル−N−スルホベタイン、アシル−N−
ベタイン、アルキルN−置換アミノプロピオン酸またはアルキルイミダゾリニウ
ムベタインおよび(b)アルキル−N、N−ジメチルアミンオキシド、アルキル
−N、N(ジヒドロキジエチルアミンオキシドまたはアシルアミドt−アミドオ
キシドの混合物は、皮膚から病原菌を除去、浄化および脱臭するのに使用できる
ことが知られている(例えば、E、B。
Michaelsに発行された米国特許第4,183゜952号明細書;E、B
、Michaelaに発行された米国特許第4,075,350号明細書および
E、B。
Mi chae l sに発行された米国特許第4.107゜328号明細書を
参照のこと)。これらの組成物は、体臭を長期に抑制することにも有用である。
同じ活性成分の混合物が、口腔の微生物相を減少させ、歯苔の形成を阻害するこ
とで口腔衛生を促進させることも知られている。(E、B、Michaelsに
発行の米国特許第4゜839.158号明細書)。この型の組成物は、同じく有
効な殺カビ剤であることでも知られている。
Cornet、A、M、ら、AvtimicrobislAgg++ts an
d Chea+othetiPL 32(3):350−353 (1988年
3月) 、Co rne r、 A、 M、 、The Jo++rnsl o
fClinical Denjistt7. Mo1.2(2)+34−38
(1990) o第2巻(2):34−38.(1990年))。(E、B。
Mi chae l s、氏に発行された米国特許第4,075.350号明細
書、第4.107.328号明細書、第4.183.952号明細書および第4
,839号明細書も参照されたい)。
分子の親水性および疎水性部分の間のエーテルまたはアミド結合を有する非イオ
ン系の界面活性剤が、単純ヘルペスウィルスIおよびIIの感染力を急速に不活
性化、−することも知られている。(Asculai、S、S。
ら、抗微生物剤および化学療法、第13巻:686−690 (1978年))
。Asculaiらは、殺細胞活性を抗ウィルス活性の指数に用いたことも同じ
く表明している。本発明で利用した組成物は、殺細胞活性が低かったにもかかわ
らず、本組成物がウィルスおよびバクテリアを不活性化した点で、Ascula
iらの説明した組成物よりも有利である。
殺精子剤Nonoxyno l−9(N−9)には殺菌性および殺ウイルス性の
効果があることが分かつている。
例えばN−9は、AIDSに関係したウィルスおよび単純ヘルペスウィルス(H
3V IおよびII)を不活性化することが発見されている。イン−ビトロでは
、N−9が淋病、クラミジア、梅毒、トリコモナス症および他の性行為感染症を
引き起こす細菌に対し有効であることが示されている。(米国薬局方会議USP
DIUpdate、1990.755−756頁参照)。
発明の要約
下記に定義するベタインの混合物が、外膜をもつウィルスの活性を阻害するのに
効果的であることを意外にも見出した:
(a)アルキル−N−ベタイン、アルキル−N−スルホベタイン、アシル−N−
ベタイン、アルキル−N−、ア ゛。
ミノプロピオン酸およびアルキルイミダゾリニウムベタインなどのベタイン、お
よび(b)アルキル−N、N−ジメチルアミンオキシド、アルキル−N、N−ジ
ヒドロキジエチルアミンオキシドまたはアシルアミドt−アミドオキシドなどの
許容可能な希釈剤中のアミンオキシド、担体および賦形剤の混合物。本発明は、
主要な感染の様式が性的である外膜をもつウィルスの活性を阻害する方法を提供
する。本発明は、外膜をもつウィルスの引き起こす疾患および感染症の治療方法
に関する。これらの組成物は、ウィルスまたはウィルス感染症と共存する細菌お
よび真菌の阻害、およびウィルスまたはウィルス感染と共存する真菌および細菌
の感染症を治療する上でも効果的である。同じく本発明は、外膜をもつウィルス
により汚染された空気および表面を消毒する方法を提供する。
また本発明は、外膜をもつウィルス感染を予防する方法を提供する。
本発明の方法に使用する組成物は、殺精子剤として使用することもできる。これ
らの組成物は単独で、他の既知の殺精子剤と共に、または避妊器具、例えばコン
ドーム、スポンジ、腟挿入物、避妊用フィルム、避妊ペッサリー、座薬、避妊用
粘剤または徐放装置などに組み込んで使用することもできる。これらの組成物は
、潅注器に組み込むこともできる。この組成物は、払拭体(wipe)に組み込
むこともできる。殺ウイルス剤として使用する場合、これらの組成物は単独で、
他の殺精子剤と共に、および前記の避妊器具と共に、またはこれらに組み込んで
応用することができる。この組成物は、泡(IosmLゲル、クリーム、軟膏、
ゼリーまたはローションの形態に応用することができる。この組成物は、液体、
エアロゾル、霧またはスプレーの形態に応用することもできる。
図面の簡単な説明
第1図は、精子運動性についてのC31G(本発明による組成物)の効果および
Nonoxyno l−9(N−9)の効果を示したグラフである。
第2図は、総精子数についてのC31Gの効果およびNonoxoyno 1−
9 (N−9)の効果を示したグラフである。
第3図は、精子の平均進行速度についてのC31Gの効果およびNonoxoy
no l (N−9)の効果を示したグラフである。
第4図は、イン・ビトロでの5up−TI細胞への毒性を、031G対N−9で
示したグラフである。
第5図は、OEM細胞への5日間にわたる毒性試験を、C31G対N−9で示し
たグラフである。
第6図は、H3Vへの効果をC31G対N−9で比較して示したグラフである。
第7図は、C31GのHIVに対する効果を示したグラフである。
第8図は、C31GおよびN−9によるHIVの不活性化を比較したグラフであ
る。
第9図は、C31GおよびN−9によるHIVの不活性化を比較した図表である
。
発明の詳細な説明
本発明の方法は、外膜をもつウィルスの阻害および外膜をもつウィルスが引き起
こすウィルス感染の治療におけるベタインおよびアミンオキシドの混合物の使用
に関する。同じく本発明の方法は、外膜をもつウィルスの不活性化におけるベタ
インおよびアミンオキシドの混合物の使用に関する。本発明に使用することので
きるベタインは、アルキル−N−ベタイン、アルキル−N−スルホベタイン、ア
シル−N−ベタイン、アルキルN−置換アミノプロピオン酸またはアルキルイミ
ダゾリニウムベタインまたはそれらの混合物である。本発明に使用できるアミン
オキシドは、アルキル−N、N−ジメチルアミンオキシド、アルキル−N、N−
ジヒドロキジエチルアミンオキシドまたはアシルアミドt−アミドオキシドまた
はそれらの混合物である。これらの組成物は、ウィルス、真菌および微生物感染
、および汚染の治療にも有効である。これらの組成物は、性的または非性的に感
染する外膜をもつウィルスの阻害に有効である。これらの組成物は、ウィルスま
たはウィルス感染と共存する細菌および真菌の阻害にも同様に有効である。これ
らの組成物は、局部的に使用することもできる。
典型的には、これらの組成物はウィルスが感染し得る部位に塗布する。これには
腟、粘膜、そして皮膚への塗布を含む。
これらの組成物は、殺精子剤として単独に、または他の殺精子剤と共に使用する
こともできる。これらの組成物は、避妊器具、例えばコンドーム、避妊ペッサリ
ー、スポンジ、避妊用フィルム、座薬、徐放装置および避妊用粘剤に組み込んで
使用することもできる。例えばこの組成物は、コンドームに塗布する潤滑剤に、
またはコンドーム先端の貯蔵部の一部として組み込むか、または避妊用スポンジ
、避妊用フィルム、座薬、徐放装置または避妊用粘剤に組み込むことができる。
避妊用フィルムは、前記に説明する組成物並びにA型ゼラチン、セルロースゴム
および多価アルコールを含むことができる。本組成物は、避妊用の泡、ゲル、ゼ
リー、クリームに使用することもできる。この組成物は、潅注器において、また
はウィルスの感染予防においても使用することができ、これらの組成物は単独で
、他の殺精子剤と共に、または前記の避妊器具に組み込んで使用することができ
る。同じく本発明は、性的な活動中に相手の発する体液に暴露される解剖学的な
部位に、本組成物を塗布することから成る、性行為感染症を引き起こすウィルス
の感染阻害に関する方法を含む。
これらの組成物はNonoxoyno l−9(N−9)より哺乳類細胞に対す
る毒性が低い、と言うことが期せずして分かった(図4および5参照)。表1は
、これらの組成物がN−9と同等の殺精子作用を有することを示しており、本組
成物はFDAが殺精子剤に認可した数少ない界面活性剤の1つでもある。
局部への塗布に使用する場合、本組成物は液体、クリーム、軟膏、ローション、
泡およびゲルに組み込むこともできる。
同じ(本発明は、例えば手術室または検査室における空気、より詳細には本発明
は、外膜をもつウィルスに汚染された領域を消毒する方法を提供する。これらの
組成物は、スプレー、霧、払拭体、エアロゾル、またはスプレー、霧、エアロゾ
ルを生成する装置に組み込むこともできる。これらの組成物を液体として使用す
ることもできる。
本発明の方法に従いこれらの組成物は、殺ウイルス剤、殺カビ剤および殺バクテ
リア剤として使用することもできる。
本発明で使用する組成物は、ベタインおよびアミンオキシドの混合物を含む。本
発明に用いるベタインは、(a)アルキル−N−ベタイン、アルキル−N−スル
ホベタイン、アシル−N−ベタイン、アルキルN−置換アミノプロピオン酸、ア
ルキルイミダゾリニウムベタインおよびそれらの2つ以上の混合物から成る群か
ら選択される。典型的には、ベタインは窒素原子に結合した2つの低級アルキル
基を有する。最も効果的には、それらは窒素原子上に2つのメチル置換基を有す
る。本発明に用いるアミンオキシドは、(b)アルキル−N、N−ジメチルアミ
ンオキシド、アルキル−N、N−ジヒドロキジエチルアミンオキシドまたはアシ
ルアミンt−アミンオキシドおよびそれらの2つ以上の混合物から成る群から選
択される。典型的には、ベタインおよびアミンオキシド成分は、モル比1:5か
ら5=1、好ましくはモル比使用するアルキル−N−ベタイン、アルキル−N−
スルホベタイン、アシル−N−ベタイン、アルキルN−置換2−アミノプロピオ
ン酸およびアルキルイミダゾリニウムベタイン(ココアンホアセテートとも言う
)は、各々下記の構造を有する:
または
(式中Rは、炭素原子を10から18個、好ましくは12から166個有る高級
アルキル基である。
本明細書で使用する用語、低級アルキルとは、炭素原子を1個から3個有するア
ルキル基を指す。
これら前記の物質の実例としては、(1)コ)−N−ベタイン、セチル−N−ベ
タイン、ステアリル−N−ベタイン、イソステアリル−N−ベタイン、オレイル
−N−ベタイン、(2)ココ−N−スルホベタイン、セチル−N−スルホベタイ
ン、ステアリル−N−スルホベタイン、イソステアリル−N−スルホベタイン、
オレイル−N−スルホベタイン、(3)ココアミド−N−ベタイン、セチルアミ
ド−N−ベタイン、ステアリルアミド−N−ベタイン、イソステアリルアミド−
N−ベタイン、オレイル−アミノ−N−ベタイン、(4)N−ココ−2アミノプ
ロピオン酸、N−セチル−2−アミノプロピオン酸、N−ステアリル−2−アミ
ノプロピオン酸、N−イソステアリル−2−アミノプロピオン酸、N−オレイル
−2−アミノプロピオン酸、N−ステアリル−ビス(2−アミノプロピオン酸)
、N−オレイル−ビス(2−アミノプロピオン酸)、N−ココ−ビス(2−アミ
ノプロピオン酸)、N−セチル−ビス(2−アミノプロピオン酸)、(5)N−
ラウリル−ビス(2−アミノプロピオン酸)1−ヒドロキシエチル−1−カルボ
キシメチル−2−デシルイミダゾリウムベタイン、1−ヒドロキシエチル−1−
カルボキシメチル−2−ドデシルイミダゾリウムベタイン、1−ヒドロキシエチ
ル−1−カルボキシメチル−2−ココイミダゾリウムベタイン、1−ヒドロキシ
エチル−1−カルボキシメチル−2−ステアリルイミダゾリウムベタイン、1−
ヒドロキシエチル−1−カルボキシメチル−2−オレイルイミダゾリウムベタイ
ン、またはこれらの混合物。
本文中で使用する用語「ココ」は、CTFA(Cosmetic and To
iletryand Fragrance As5ociation。
ワシントン、D、C,の指定)で用いるものを指し、ヤシ油に存在するアルキル
基、即ち炭素原子10から18個のアルキル基の混合物を示している。本文中に
掲げた化合物の指定は、CTFAのものと同じである。
前記の混合物の成分(b)として使用した(1)アルキル−N、N−ジエチルア
ミンオキシド、(2)アルキ/l/−N、N−ジヒドロキジルエチルアミンオキ
シド、または(3)アシルアミド t−アミンオキシドは、各々下記の構造を有
する。
(式中、Rは炭素原子10から18個の炭素原子を有する高級アルキル基、例え
ばデシル、ウンデシル、ラウリル、トリデシル、ミリスチル、セチル、ステアリ
ル、イソステアリルまたはオレイルのような基である。典型的なアミンオキシド
は、デシル−N、N−ジメチルアミンオキシド、ラウリル−N、N−ジメチルア
ミンオキシド、ステアリル−N−N−ジメチルアミンオキシド、オレイル−N、
N−ジメチルアミンオキシド、ココーN、Nジヒドロキジエチルアミンオキシド
、セチル−N、N−ジヒドロキジエチルアミンオキシド、オレイル−N、N−ジ
ヒドロキジエチルアミンオキシド、N、N−ジヒドロキジエチルアミンオキシド
、オレイル−N−N−ジヒドロキシエチル−アミンオキシドおよびこれらの混合
物である。)
成分(a)および(b)を普通に混合し、次に0. 5%溶液のpHを4から8
、好ましくはpH4,5から5.5に調節するのに必要な量の酸を加える。前記
に列挙した本発明の成分を含む水性溶液のpHは、組成物の酸度を精確に定義す
るため、典型的にガラス電極における活性成分の総重量の0.5%水性溶液を使
用して測定する。
通常、全体の組成物を必要なpHに調整するのに使用する酸は、組成物の意図し
た用途に適合する全ての有機または無機酸、例えば塩酸、リン酸、硫酸、クエン
酸、酢酸、またはニコチン酸などである。酸を使用した後の組成物の残余は、通
常許容できる溶剤、例えば100部以上の水または低級(C1−04)−価脂肪
族アルコールである。水を使用する場合には、低級アルキルアルコール、例えば
エタノールまたはプロパツールを少量加え、処方を容易にすることもできる。許
容可能な希釈剤、坦 、。
体、賦形剤は、例えばエチル、イソプロピルアルコール、ポリエチレングリコー
ル、ポビドン(po’yidoneL多価アルコール、グリセリン、セルロース
ゴム、ゼラチン、着色剤および芳香剤である。必要ならば総組酸物のpHは、そ
の好適な無機または有機の酸を加えることにより、その後必要なpHに合わせる
ことができる。こうして得た調製物は、外膜をもつウィルス、バクテリアおよび
真菌に対する作用の向上した、実質的に均一、均買で、相対的に無毒性の組成物
である。
これらの組成物は、(1)@乳類細胞に対する毒性が低いという、粘膜と接触さ
せて使用した場合の低刺激および低毒性と相関することが知られている(Jou
rnal C11nical Dentistry 2 (2):34−38頁
、(1990年))特性を有し、および(2)殺細胞作用が低いにもかかわらず
外膜をもつウィルスを極めて効果的に不活性化する、ということが期せずして見
いだされた。過去においては、殺細胞作用を活性の指数として研究に用いていた
。(Asculai。
S、S、、Ant 1m1crb、AgentsChemother、13:6
78−690頁(1978年))。
実際には、全組成物中の成分(a)および(b)の総量は、意図する使用方法に
応じて0.01%から40%、好ましくは0.03%から30%にすることがで
きる。
例えば使用する濃度は避妊用フィルムで約20%から30%、およびゲルでは0
.2%から2%である。
本発明で使用する組成物は、アルキルN−ジ(低級アルキル)グリシンおよびア
ルキルN−ジ(低級アルキル)アミンオキシドを含み、ここで低級アルキルは、
01−3である。本発明において、本発明者が特に有用であると認めたベタイン
の1種は、アルキルN−ジメチルベタイン、例えばココベタインおよびラウリル
ベタインなどである。本発明における使用に特に有用なアミンオキシドは、アル
キルN−ジメチルアミンオキシド、例えばココジメチルアミンオキシドおよびラ
ウリルジメチルアミンオキシドである。
本発明に用いることのできる特別な組成物の1つには、ココベタイン、ココアミ
ンオキシドおよびクエン酸モノヒトレートが挙げられる。
本発明に用いることのできる別の組成物は、ラウリルベタイン、ラウラミンオキ
シドおよびクエン酸−水和物を含む。
このような組成物において、ベタイン対アミンオキシドのモル比は、通常5:1
から1:5、好ましくはモル比2:1から1:2、より好ましくは約1=1であ
る。
本発明に用いることのできる他の組成物は、ベタイン、アミンオキシド、Blo
om強度100から300、および分子量約75.000から約300.000
のゼラチン、多価アルコールおよびセルロースゴムの混合物を含む。このような
組成物は、本出願と同時に出願され、米国特許出願連続番号第07/673,6
31号を有する同時係属中の米国特許出願明細書に記載されている。
本発明に使用する組成物は、AIDSに関係するウィルスの活性を阻害すること
ができる。これらの組成物がH3V−1およびH3V−2の活性を阻害できるこ
とも予想されている。本発明に用いられる組成物がASB。
C型の肝炎を阻害できるとも予想されている。この組成物は、性行為感染症(S
TD)に関連したウィルス、バクテリアおよびカビを阻害することができるであ
ろうとも予想されている。
本発明の組成物は、下記との関係において有用であろう:
1)HIVの感染は、しばしば他のウィルスおよび/または微生物病原体の同時
感染を伴うことが多い。実際、数人の研究者は、HIVがAIDSの原因となる
唯一の病原体ではないかも知れない、と言うことを示唆した(Duesberg
、P、H,(1991年)proc。
Natl、Acad、Sci、88:1575−1579;、2Lemaitr
e、M、Guetard、D、。
Hen1n、Y、、Montagnier、L、およびZerial、A、 (
1990)、Res、Virol。
141 : 5−16参照)。このような理由で、例えば本明細書で説明したウ
ィルス、バクテリア、およびカンジグなどの酵母に対し広い活性スペクトルをも
つ抗微生物剤は、後天性免疫不全症候群(A I D S)の予防および治療に
特に重要であることがある。
2)STDを引き起こすことで知られるある種のバクテリアは、HIV感染を助
長すると考えられている。
HIVに暴露された人において、STDを引き起こすバクテリアは、しばしば他
の人にとっては非常に有効な治療に対しても反応を示さない。HIV感染は、バ
クテリア性のSTDの伝染を助長し、順次HIVの伝染を助長する場合がある。
STD、例えばクラミジア、軟性丁度、梅毒、陰部ヘルペスおよび淋病は、性器
の皮膚の潰瘍形成の原因となり、HIV感染を性的に獲得または伝染させる危険
性を上昇させると考えられる。Aral、S。
00.ら著5cientific American。
264 (2):62−69頁(1991年2月)。
前記の組成物はまた、他の外膜をもつウィルス、例えばワクシニア症、水痘、帯
状ヘルペス、サイトメガロウィルス、EBウィルス、インフルエンザ、流行性耳
下腺炎、麻疹、ライノウィルス、狂犬病および風疹を不活性化するのにも有益な
場合がある。本発明をさらに深く理解するために、下記の例を主として更に詳細
な具体例を例示する目的で提供する。本発明は、請求の範囲におい下記に説明す
る組成物は、C31G、すなわちココベタインおよびココジメチルアミンオキシ
ド(CTFACosmetic and Toiletry andFragr
ance As5ocjationSワシントン、D、Cの措定)[CFTA]
の等モル調製物の濃縮物であり、多くの異なる形状に用いることができる。
ココベタイン;31.5%の活性成分(AI):183、 9 k g (40
5,8ボンド)、ココアミンオキシド、31.5%(AI):147、 4 k
g (325ポンド)、クエン酸−水和物、USP:11.8kg (26ポ
ンド)、
精製水、USP : 11.8kg (26ポンド)、29.6%AIで(7)
C31Gを354. 9 k g (782,5ポンド)作成、1%AI希釈;
pH=4.9゜毀1
例1におけるC31Gの殺精子作用を、nonoxyn o 1−9 (N−9
)の殺精子作用と比較した。
本試験は、Hami 1 ton−Thorn精子運動率分析器を用いて行った
。集めて洗浄した精液の検体を、2つの化合物で希釈し、15秒間インキュベー
トした後に分析しく同じものを3つ作成)、下記の判定基準に従い不活性化の最
小濃度を測定した;
1、精子運動性の阻害(第1図)
2、総精子数の減少(第2図)
3、平均精子進行速度の阻害(第3図)第1表に示す通り、C31GおよびN−
9は同じ結果を得た。
第1表
殺精子作用に関する最小濃度
C31G N−9
運動性の総阻害 150ppm 150ppm精子数における90%
の減少 150pI)m 150ppm進行速度における50%
の減少 125ppm 125ppm
ト
哺乳類細胞に対する031GおよびN−9の細胞毒性作用を幾つかの種類の検定
により測定した。細胞毒性は、避妊薬または予防薬に界面活性剤を使用する場合
の相対的な安全性および快適性の指標となる。
第4図に示す通り、5UP−TI細胞(ヒトリンパ球の細胞系)への薬効を観察
する2週間の試験では、同じ濃度のN−9が極めて毒性が高かったのに対し、C
31Gは、0.001%[10p pmコにおいて最小の毒性を示した。
胆
第5図は、継続的な暴露の5日後の、OEM細胞におけるMMT減少を示したも
のである。これらの条件下でC31G ft、3ppm c、0003%]にお
いて哺乳類細胞に全く毒性を示さず、これに対しN−9は同じ濃度で毒性を示し
、哺乳類細胞の生存率を50%減少させた。
N−9と同じ殺精子作用を有する化合物が、N−9よりも哺乳類細胞への毒性が
低いということは、予想外であC31Gの抗ウィルス作用について、HSV−1
およびHIV−1を使用して試験した。
031GおよびN−9の、単純ヘルペスウィルス1型(K2S株)への効果を試
験するため、保存用ウィルスをVero(アフリカ緑ザルの腎臓)細胞において
調製した。このウィルスを1サイクルの凍結融解により細胞から解放し、次に超
音波処理を行った。このウィルスカ価をVero細胞で測定すると4.5X10
8プラーク方は、殺精子試験における薬剤と同じものであった。
各薬剤の保存濃度は5%であった。2倍の連続希薄を行い、室温でPBS中pH
7,41:おいrO,04%まで希釈した。各回24μlの希釈をウィルス22
0μ1(108PFU)に加、t、最終濃度0.5から0.004%にした。こ
れらの検体を室温で10分間インキュベートシ、次に各々の100u lを、直
ちに氷冷したDMEM15%FBSで1mlに希釈した。次に10倍の連続希釈
を行い、24ウエルプレートにおいてVer0細胞上の残った伝染性ウィルスの
滴定を10 に下げた。プラークは、感染の36時間後に数えた。
表2
濃度(%) 残ったウィルス(PFU/m1)N−9C31G
O,0043,5X108 3.5X1080.008 2.7X108 3.
3X1080.015 1.lX108 2.5X1050.03 3200
<167
0.06 <167 <167
0.13 <167 <167
0.25 <167 <167
0、5 <167 <167
これらはPFUの絶対数というより、力価(即ちPEU / m L )である
ことに注目されたい。未処理ウィルスを測定した力価は、N−9を用いた実験で
4.7×108PFU/mL、およびC31Gを用いた実験で4.5×108P
FU/mlであった。
C31Gによるプラーク形成の完全な阻害は、N−9より希釈が1回以上少ない
時点で起こることに注目される。第6図を参照されたい。
例6
HIV−1(AIDS)ウィルスの不活性化を2つの実験で研究した。最初の試
験では、031GのHIV−1への効果を2つの異なる接触回数である2分およ
び45分において比較した。次の試験では、C31GおよびN−9のHIvに対
する相対的な作用について、同じウ 。
イルス株を用い、ウィルス力価をP−24HIV抗原の減少により確定された様
に減少して抗ウィルス活性を測定し比較した。
最初の試験のプロトコルおよび結果は以下の通りである。
C31Gのヒト免疫不全ウィルスへの効果材料:
ウィルス:HIV−i株3B (5XIOID50単位/ m l )
細胞:5UP−’rtセルライン(HI Vに感染されると巨大細胞およびシン
シチウムと共に特有の細胞融解を生じるC D 4 + +Jンパ球様細胞)プ
ロトコル:
1、連続して4倍希薄を行ったPBSにおけるC31Gを調製した(4.0%か
ら0.004%、およびコントロールとして単独のPBS)。pHは、5.5に
調整した。
2、保存ウィルスを集めた一定量を調製し、031Gを、洗浄剤、ウィルスの比
1:9(1:10の洗浄剤希釈)の各濃度で加えた。これらは、2分または45
分間インキュベートした。
3、連続した4倍希釈により1 : 4096まで希釈した各ウィルス/洗浄剤
混合物を調製した。
4、各回で得た各ウィルス/洗剤希釈物16.6μlを、5UP−TI細胞の4
つの複製ウェル(150μm容積における104細胞:洗浄剤希釈1:10をさ
らに4倍希釈したもの)に加えた。
5、このウェルを、1週間に2回、2週間にわたり検査し、各ウェルは特有のウ
ィルスのシンシチウムの存在について、または洗浄剤の溶菌による非シンシチウ
ム性のゴースト形成について陽性または陰性で評価した。
注:
ウィルスは、最初の濃度の1:10希釈でC31Gに2分または45分のいずれ
かの間暴露し、次に別の1:10希釈、そして連続の4倍希釈に全期間中暴露し
た。
細胞はC31Gに1 : 100で、次に初期濃度の連続4倍希釈に全期間の間
暴露した。
第7図参照。
例7
第2の試験のプロトコルおよび結果は以下の通りである:
材料:
細胞:CEM細胞系ATCC#119T細胞ウィルス: HI V I I I
b試験化合物:5%溶液として供給する化合物C31GおよびN−9は、希釈
前に低結合0.22のフィルタを経1、連続゛して2倍希釈したPBS中の化合
物N−9およびC31Gを、pH5,5に調整した。最高濃度は、4%、最低は
0.03%であった。最初の濃度は4.2.1.0.5.0.25.0.125
.0.06および0.03%であり、薬剤なしのコントロールと同様であった。
コントロール滴定は、2度行った。
2.14 12X75mmの無菌の可塑チューブに入った各濃縮ウィルス(最低
lXl0 TCID /ml)を用意した。各化合物希釈を0.1mlずつチュ
ーブに移した(最初の薬剤濃度の1=10の希釈)。
3.室温で10分間インキュベーションを行い、完全成長培地(氷上)において
1:10に希釈することで完了(または遅らせた)した。
4、氷上の完全培地において、追加の連続5倍希釈(最終の希釈が1 : 78
1250に等しい7回希釈)を調製した。
5.50μlのウィルス希釈液を、96のウェルトレイ(U底)を4倍にした、
50μl中に3×104のCEM細胞を含むウェルに加えた。
6.60分の間、ウィルスを吸収させた。この細胞は、プレートを150Orp
mで5分間遠心分離し、上澄液を吸引することにより2度洗浄した。最終の沈澱
細胞を100u lの培地に再懸濁し、96の平底ウェルトレイに移した。これ
らの結果は、第8図及び第9図に示す。
例8
避妊用/感染防止用製剤の処方
濃縮物(CCo n)は以下を含むニ
ラウリルベタイン(30%at) 1000部ラウラうンオキシド(30%ai
) 870部クエン酸モノヒトレート 69部
上記を撹拌し均一な溶液にする。30倍の希釈時に、この組成物はガラス電極で
pH4,85とする。推定上の濃度は、28.5%の活性成分(ai)に等しい
。
例9
コンドームと併用して、または併用せずに使用する座薬(挿入)
CCon (例8のもの) 526部
PEG−32 4000部
PEG−201000部
ポビドン 74部
上記を攪拌して45℃の溶液にし、型に注入して冷却し、取り出して包装する。
例10
避妊用スポンジ
CCon (例8のもの) 3.5gm5各型に入れて硬化ウレタンにする。こ
の型に、性交後にスポンジから除去するためのポリエステルループを装子宮頚の
蓋、コンドーム、避妊ペッサリーと共に。
または性交の前に単独で使用する殺精子用ゲル、クリームまたはゼリー。
ゲル−I CCon(例8のもの) 7.0部ゼラチン A200 1.5部
グリセリン 10.0部
ヒドロキシエチルセルロース
(高粘度品) 0.4部
水 81.1部
ゲル−23,5部のCCon (例8のもの)を1、OptのNonoxyno
l−9に置換する他は、前記と同じ。
手続−ゼラチンおよびセルースゴムをグリセリン中で粉砕し、45℃の水に加え
、攪拌して溶解する。界面活性剤を容器に加え、温かい溶液を取り出して包装す
る。冷却すると均一な流動性の高粘性ゲルを形成する。
ゼリー1および2
透明な液体避妊ゼリーは、前記の例のゼラチンおよびヒドロキシエチルセルロー
スを、1.5部の高粘度ヒドロキシプロピルまたはヒドロキシプロピルメチルセ
ルロースに置換して調製する。
クリーム1および2
上記のゲルの処方は、0.5部のセチルアルコールを49℃のグリセリン中で溶
解し、ゼラチンおよびセルロースゴムを粉砕する前にゲル1または2の処方に配
合することにより変換することができる。
例12
避妊用フィルム
6.2ポンドのA型ゼラチンを、0.5ポンドのヒドロキシエチルセルロースと
共に粉砕する。31ポントノグリセリンを加える。溶液を十分に混合してスラリ
を形成させる。例8のCConを33ボンドおよび水を15ポンド加える。40
℃に暖める。ゴムおよびゼラチンが完全に水和するまで混合する。溶液を、ポリ
エチレンのシートに流し、厚み約3mmのフィルムを流延し、冷却後にフィルム
を切り取り、避妊用フィルムとして使用する。
9ヨ0LX−4べcct:in証
9ヨOLX薯壬−積
9ヨOLX薯丑−稠
±1■
四N0L911駆硬響
6−9r
−6J−6’t10−Cφ裏薯杯
国際調査報告
+m峠WI Am1tell# NaρCT/US 91105060!、@、
1.el Aemlct11a++颯Pσ八バ91105060−−−−−^−
−−−・ ρCT/us 91105060国際調査報告
PCTM 91105060
S^ 4%17
Claims (19)
- 1.外膜をもつウィルスの存在する場所にベタインおよびアミンオキシドの混合 物を含む組成物を適用することから成る、外膜をもつウィルスの活性を阻害する 方法であって、前記のベタインは、アルキル−N−ベタイン、アルキル−N−ス ルホベタイン、アシル−N−ペタイン、アルキルN−置換アミノプロピオン酸ま たはアルキルイミダゾリニウムベタインまたはそれらの2つ以上の混合物から選 択され、前記のアミンオキシドは、アルキル−N,N−ジエチルアミンオキシド 、アルキル−N,N−ジヒドロキシエチルアミンオキシドまたはアシルアミドt −アミンオキシドまたはそれらの2つ以上の混合から選択されることを特徴とす る方法。
- 2.ベタインおよびアミンオキシドの混合物を含んでなる組成物を、性行為中に 相手が発する体液に暴露される身体の部分に適用することからなる、性感染症の 原因となるウイルスの感染を阻害する方法であって、前記のベタインがアルキル −N−ベタイン、アルキル−N−スルホベタイン、アシル−N−ペタイン、アル キルN−置換アミノプロピオン酸またはアルキルイミダゾリニウムベタインまた はそれらの2つ以上の混合物から選択され、前記のアミンオキシドがアルキル− N,N−ジエチルアミンオキシド、アルキル−N,N−ジヒドロキシエチルアミ ンオキシドまたはアシルアミドt−アミンオキシドまたはそれらの2つ以上の混 合物から選択されることを特徴とする、方法。
- 3.ベタインおよびアミンオキシドの混合物を含む組成物をウイルスの感染部位 に適用することから成るウイルス感染症の治療法であって、このベタインがアル キ、ル−N−ベタイン、アルキル−N−スルホベタイン、アシル−N−ベタイン 、アルキルN−置換アミノプロピオン酸またはアルキルイミダゾリニウムベタイ ンまたはそれらの2つ以上の混合物から選択され、前記のアミンオキシドがアル キル−N,N−ジエチルアミンオキシド、アルキル−N,N−ジヒドロキシエチ ルアミンオキシドまたはアシルアミドt−アミンオキシドまたはそれら2っ以上 の混合物から選択されることを特徴とする、方法。
- 4.ペタインおよびアミンオキシドの混合物を含む組成物を殺精子剤として用い ることにより精子の活性を阻害する方法であって、このベタインがアルキル−N −ベタイン、アルキル−N−スルホベタイン、アシル−N−ベタイン、アルキル N−置換アミノプロピオン酸またはアルキルイミダゾリニウムベタインまたはそ れらの2っ以上の混合物から選択され、前記のアミンオキシドがアルキル−N, N−ジエチルアミンオキシド、アルキル−N.N−ジヒドロキシエチルアミンオ キシドまたはアシルアミドt−アミンオキシドまたはそれらの2つ以上の混合物 から選択されることを特徴とする、方法。
- 5.ベタインおよびアミンオキシドの混合物を含む組成物を有する避妊器具であ って、このベタインがアルキル−N−ベタイン、アルキル−N−スルホベタイン 、アシル−N−ベタイン、アルキルN−置換アミノプロピオン酸またはアルキル イミダゾリユウムベタインまたはそれらの2つ以上の混合物から選択され、前記 のアミンオキシドがアルキル−N,N−ジエチルアミンオキシド、アルキル−N ,N−ジヒドロキシエチルアミンオキシドまたはアシルアミドt−アミンオキシ ドまたはそれら2つ以上の混合物から選択されることを特徴とする、避妊器具。
- 6.ベタインおよびアミンオキシドの混合物を含む組成物の使用であって、この ベタインがアルキル−N−ベタイン、アルキル−N−スルホベタイン、アシル− N−ベタイン、アルキルN−置換アミノプロピオン酸またはアルキルイミダゾリ ニウムベタインまたはそれらの2つ以上の混合物から選択され、前記のアミンオ キシドがアルキル−N,N−ジエチルアミンオキシド、アルキル−N,N−ジヒ ドロキシエチルアミンオキシドまたはアシルアミドt−アミンオキシドまたはそ れら2つ以上の混合物から選択されることを特徴とする、外膜をもつウィルスの 活性を阻害する、または殺精子剤として使用する薬を調製するための使用。
- 7.ベタインおよびアミンオキシドの混合物を含んで成るウイルス感染症を治療 する医薬であって、このベタインがアルキル−N−ベタイン、アルキル−N−ス ルホベタイン、アシル−N−ペタイン、アルキルN−置換アミノプロピオン酸ま たはアルキルイミダゾリニウムベタインまたはそれらの2つ以上の混合物から選 択され、前記のアミンオキシドがアルキル−N,N−ジエチルアミンオキシド、 アルキル−N,N−ジヒドロキシエチルアミンオキシドまたはアシルアミドt− アミンオキシドまたはそれら2つ以上の混合物から選択されることを特徴とする 、医薬。
- 8.組成物がアルキルN−ジ(低級アルキル)ベタインおよびアルキルN−ジ( 低級アルキル)オキシドを含んで成り、低級アルキルがC1−C3である、請求 の範囲第1項から第7項のいずれか1項に記載の方法または装置。
- 9.アルキルN−ジ(低級アルキル)ベタインおよびアルキルN−ジ(低級アル キル)アミンオキシドのモル比が1:5から5:1である、請求の範囲第1項か ら第8項のいずれか1項に記載の方法または装置。
- 10.組成物がアルキルN−ジ(低級アルキル)ベタイン、アルキルN−ジ(低 級アルキル)アミンオキシド、および組成物のpHを許容可能なキャリヤーの水 性溶液で測定した場合に4から8に調整するのに十分な量の酸を含む、請求の範 囲第1項から第9項のいずれか1項に記載の方法または器具。
- 11.請求の範囲第1項から第10項のいずれか1項に記載の方法または器具で あって、ここで組成物には以下を含む: a)アルキルジメチルグリシン、 b)アルキルジメチルアミンオキシドおよびc)許容可能なキャリヤー中の成分 (a)および(b)の水性溶液において測定する場合の組成物のpHを4から8 に調整するのに十分な量の酸。
- 12.アルキルN−ジ(低級アルキル)ベタインがココベタインまたはうウリル −ペタインであり、アルキルN−ジ(低級アルキル)アミンオキシドがココアミ ンオキシドまたはラウラミンオキシドである、請求の範囲第1項から第10項の いずれか1項に記載の方法または器具。
- 13.組成物を、粘膜、皮膚、腟、不活発な表面に適用、または空気中に分散す る、請求の範囲第1、2、3、4または6項のいずれか1項に記載の方法。
- 14.ベタインおよびアミンオキシドの組成物を、泡、ゲル、クリーム、軟膏、 ゼリー、ローション、液体、スプレー、ミスト、エアロゾルまたは払拭体の形態 において配合し、または適用する、請求の範囲第1項から第13項のいずれか1 項に記載の方法または器具。
- 15.ウィルスが、HIV、AIDS関連ウイルス、HSVI、HSVII、A 型肝炎、B型肝炎、C型肝炎、ワクシニア、水痘、帯状ヘルペス、サイトメガロ ウイルス、エプスタイン−バーウィルス、インフルエンザ、流行性耳下腺炎、麻 疹、ライノウィルス、狂犬病または風疹に関与するウィルスである、請求の範囲 第1から3項のいずれか1項、または6項または7項に記載の方法。
- 16.組成物を避妊器具と共に、またはこれに組み込んで使用する、請求の範囲 第1項から4項、第6から12項のいずれか1項に記載の方法。
- 17.組成物をコンドームに塗布する潤滑剤に配合した、または組成物がコンド ーム先端の貯蔵部の一部である、組成物を避妊用スポンジ、避妊用フィルム、徐 放装置、座薬、泡、ゲル、クリームまたはゼリーに配合した、請求の範囲第5項 に記載の避妊器具。
- 18.ベタインおよびアミンオキシドの混合物を含んで成る潅注器であって、前 記のベタインがアルキル−N−ベタイン、アルキル−N−スルホベタイン、アシ ル−N−ベタイン、アルキルN−置換アミノプロピオン酸またはアルキルイミダ ゾリニウムベタインまたはそれら2つ以上の混合物から選択され、前記のアミン オキシドが、アルキル−N,N−ジエチルアミンオキシド、アルキル−N,N− ジヒドロキシエチルアミンオキシドまたはアシルアミドt−アミンオキシドまた はそれらの2つ以上の混合物から選択されることを特徴とする、潅注器。
- 19.ベタインおよびアミンオキシドの混合物を含んで成る払拭体であって、前 記のベタインがアルキル−N−ベタイン、アルキル−N−スルホベタイン、アシ ル−N−ベタイン、アルキルN−置換アミノプロピオン酸またはアルキルイミダ ゾリニウムベタインおよびそれら2つ以上の混合物から選択され、前記のアミン オキシドが、アルキル−N,N−ジエチルアミンオキシド、アルキル−N,N− ジヒドロキシエチルアミンオキシドまたはアシルアミドt−アミンオキシドまた はそれらの2っ以上の混合物から選択されることを特徴とする、払拭体。
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