JPH06505027A - グアニジン構造を有する新規化合物及びそれを含む医薬組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 グアニジン構造を有する新規化合物及びそれを含む医薬組成物 本発明は、神経軸索（ｎｅｕｒｏｎａｌ　ａｘｏｎ）の成長、修復及び再生を促 進し、神経障害（ｎｅｕｒｏｐａｔｈｉｅｓ）及び筋疾患（ｍｙｏｐａｔｈｉｅ ｓ）に冒された患者の状態を改善できるグアニジン構造を有する新規化合物に関 する。より一般的には、これら化合物は、神経系の変性疾患（ｄｅｇｅｎｅｒａ ｔｉｖｅ　ｄｉｓｅａｓｅｓ）の治療に有用である。

さらに、本発明の目的は、上記化合物及びそれら化合物を含む医薬組成物を得る ための製造方法である。

出願人の知る限りでは、末梢神経の再生に作用し、神経筋の異常に対して有効な 効果を持ち、人間の治療に利用できる化合物はない。

優れた薬理的効果を持つ化合物、イサクソニン（ｉｓａｘｏｎｆｎｅ）もしくは ２−（イソプロピルアミン）−ピリミジンは、“ラ　ヌーブル　プレス　メディ カル”（“Ｌａ　Ｎｏｕｖｅｌｌｅ　Ｐｒｅｓｓｅ　Ｍｅｄｉｃａｌｅ”）、ｖ ツソン（Ｍａｓｓｏｎ）、１９８２．１６（１１）、１１９３−１２８０にすで に記載されている。

しかし、ナーファクタ−（Ｎｅｔｆａｃｔｏｒ）と命名されて市場で販売されて いたが、肝臓毒性があったため、販売を中止せざるを得なかった。

雑誌“テラビニ”　（“Ｔｈｅｒａｐｉｅ”）（１９６８゜ＸＸＩ　Ｉ　Ｉ、ｐ ｐ、１２２１−１２３２）中に、ベラトリルグアニジン及びこの化合物のへミス ルフエートが、抗高血圧薬として記載されていた。

しかし、出願人の知る範囲では、神経治療におけるこれら化合物の性質は、記載 されていない。

従って、本発明の目的は、ニューロン再生の領域で有用であり、それに関する病 気、例えば筋疾患に対し有効な効果を示す新規化合物（ベラトリルグアニジン及 びそのヘミスルフェート塩を除く）を提供することである。

本発明によると、上記化合物は、下記一般式で表わされる： 、−Ｒ２ 上記式中Ｒ１は、イソプロピル基、−もしくはそれ以上の（Ｃ１−０４）アルコ キシ基で置換されてもよいベンジル基又は基： を示し、ＲＳＲ及びＲ４は、これらが結合する窒素原子及びこれら窒素原子が結 合する炭素原子と共に、一般式■のピリミジン環又は一般式ＩＩａのピリミジニ ウム環を形成しており、 上記式において、 ｎ＝０．１．２、 Ｒは、（Ｃ−Ｃ）アルキル基、（ＣＣｃ、　）アラ４　１　４　フ ルキル基、フェニル基又は水素原子であり、Ｒは、（Ｃ−Ｃ）アルキル基、（Ｃ −Ｃ９）アラ８　１　４　フ ルキル基であり、ｃｏＯＲは、一般的にアミン保護基であることができ、 Ｒは、ヒドロキシル基、（Ｃ１−０４）アルコキシ基又はアミノ基であり、 Ｘ　は、薬理学的に許容されるカチオンであるか、又はＲ２、Ｒ３及びＲ４は、 水素原子であるか、又はＲ２、Ｒ３及びＲ４は、これらが結合する窒素原子及び これら窒素原子が結合する炭素原子と共に下記一般式で表わされるイミダゾール 環： 又は下記一般式で表わされる１、６−シヒドロピリミジン＝（Ｒ６は、Ｒ５の定 義の一つを示す）を形成しているか、又はＲ２、Ｒ３はこれらが結合する窒素原 子及びこれら窒素原子が結合する炭素原子と共に、下記一般式の環：を形成して おり、この場合はＲ１は水素原子であってもよく、Ｒは（０１−０４）アルコキ シ基又は１−グリセリフ ル基であり、 及びこれら化合物の薬理学的に許容される塩（ベラトリルグアニジン（ｖｅｒａ ｔｒｙｌｇｕａｎｉｄｆｎｅ）及びそのヘミスルフェートを除＜）。

本発明は、また、これら化合物の薬理学的に許容される塩、特に乳酸塩、フマル 酸塩、塩酸塩、マレイン酸塩、リンゴ酸塩、ケトグルタル酸塩、グルタル酸塩、 フェノキシ酢酸塩、スルホン酸塩、ピクリン酸塩、酒石酸塩及びメタンスルホン 酸塩にも関する。

本発明の好ましい態様によれば、Ｒ１は、イソプロピル基又はジーもしくはトリ メトキシベンジル基又は下記の基：である。

本発明の第二の好ましい態様によれば、上記態様と組合わせてもそうでなくとも 、Ｒ４はメチル、エチル、ｎ−プロピル又はベンジル基である。

第三の態様によれば、本発明は、ベラトリルグアニジンの乳酸塩、フマル酸塩、 塩酸塩、マレイン酸塩、リンゴ酸塩、ケトグルタル酸塩、グルタル酸塩、フェノ キシ酢酸塩、スルホネート、ピクリン酸塩、酒石酸塩、メタンスルホン酸塩に関 する。

本発明は、上記した本発明化合物の一つから成る医薬品（ｍｅｄｉｃｉｎａｌ　 ｐｒｏｄｕｃｔｓ）及び、これら医薬品の少なくとも一つ及び許容される担体を 含む製剤学的組成物（ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ ｓ）−に関する。これら医薬品及び組成物は、人間もしくは動物の神経系の機能 に関連するある種の疾患の内科療法（ｍｅｄｉｃａｌ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）に おいて有用である。

上記医薬品及び組成物は、末梢神経系の変性疾患（ｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｖｅ　 ｄｉｓｅａｓｅｓ）及び神経筋障害例えば筋障害（ｍｙｏｐａｔｈｙ）に対する 有効的治療において有利に役割を果たすことが意図され得るものである。

前記製剤学的組成物は、特に、経口摂取もしくは注射できるように製剤化される 。しかし、他の投与方法も本発明の枠内で考えられ得る。

その投与量は、治療されるべき疾患及びその病状により、また個人のタイプ（体 重、年齢）にもよる。

ベラトリルグアニジンもしくはそのヘミスルフェートのような既知の化合物につ いては、本発明の主題は、これら化合物の神経筋疾患治療に有用な医薬品製造の ための使用（ｕ　ｓ　ｅ）である。

また、本発明は、本発明化合物の製造方法にも関する。

Ｒ２、Ｒ３及びＲ４が、これらが結合している窒素原子及びこれら窒素原子が結 合している炭素原子と共に、一般式■のピリミジン環を形成している一般式（Ｉ ）の化合物を調製する方法は、下記一般式 で表わされるグアニジン類の酸性塩（ａｃｉｄ　５ａｌｔ）（例えば硫酸水素塩 （ｈｙｄｒｏｇｅｎ　ｓｕｌ　ｆａｔｅ））を、酸受容体（例えばピロリジンの ような第３級アミン）及び必要に応じてメタノールのようなプロトン性極性溶媒 の存在下で、下記一般式の（Ｃ１−０４）アルコキシマロンアルデヒド類と接触 させることからなる。

塩形成されていない形態で得られた化合物は、既知の方法で加水分解して酸に変 換し、必要に応じて、やはり公知の方法（例えば、アミノクロロメチルアルミニ ウムを用いた反応）によりカルボキサミド（ｃａｒｂｏｘａｍｉｄｅ）に変換す る。

これら一般式■のピリミジン類は、どのような形態（酸、エステルもしくはアミ ド）であっても、そのアルキル化は、非プロトン性極性溶媒中で一ジアルキルス ルフェートを作用させて行われ、対応する１−アルキルピリミジニウムヒドロキ シドの形態で精製されるアシッドスルフェートを得、これは次いで他の塩（例え ば、メタンスルホン酸塩）に変換することができる。

該ヒドロキシドは、必要に応じて、プロトン性極性溶媒（特にエタノール）の存 在下で還元剤特にナトリウムテトラボロハイドライド（ｓｏｄｉｕｍ　ｔｅｔｒ ａｂｏｒ。

ｈｙｄｒｉｄｅ）との反応により、一般式■の１．６−シヒドロー１−アルキル ピリジミンに変換することもできる。

Ｒ２、Ｒ３及びＲ４が、それらが結合している窒素原子及びこれら窒素原子が結 合している炭素原子と共に、一般式■のイミダゾール環を形成している一般式（ Ｉ）の化合物を調製する製造法は、必要に応じてＮ、　Ｎ−ジメチルアセトアミ ドのような極性溶媒の存在下で、加熱することにより、４，５−ジカルボキシイ ミダゾール類を部分的に脱炭酸することからなる。

４．５−ジカルボキシイミダゾール類は、既知の方法により、対応する４、５− ジシアノ化合物を鹸化して得る。

後者の物質は、産業上の製品であるか又は既知の方法によ−り得られる。

例えば、その調製方法の一例は、ジアルキルスルホネートとの反応により２−ブ ロモ−４，５−ジシアノ−イミダゾール類の１位をアルキル化することにある。

得られた生成物を、２位をアミン　Ｈ２Ｎ−Ｒ１で置換し、次いで強塩基（Ｎａ ＯＨなど）で処理して、酸性化（濃塩酸など）する。

出発物質である２−ブロモ−４，５−ジシアノイミダゾール化合物は、既知の方 法により４．５−ジシアノイミダゾール類を臭素化することにより得られる。

本発明による、Ｒ４が水素原子である（従って、互変異性が存在する）イミダゾ ール類のもう一つの調製方法は、次のようなスキームによる一連の反応を行うこ とからなる。

■ 一般式（Ｉ）のグアニジン類もしくはそれらの薬理学的に許容される塩を調製す る一つの方法は、対応するＳ−アルキルチオ−尿素を出発物質とし、これを既知 の方法でアルキルアミン　ＲＩＮＨ２と反応させることによる。

窒素原子が結合する炭素原子と共に、Ｒが（Ｃ１−０４）アルコキシ基である一 般式Ｖの環を形成する一般式（Ｉ）の化合物の製造方法の一つは、上記反応スキ ームに従い、対応する一般式１のグアニジン類とジアルキルケトマロネートとを 、必要に応じてプロトン性極性溶媒中で、反応させることによる。

は、アスコルビン酸の酸化された形と一般式（Ｉ）のグアニジン類とを縮合させ ることからなり、下記反応スキームに従い、アミンは必要に応じて脱アルキル化 することができる。

実施例１： １−メチル−２−イソプロピルアミノ−５−メトキシカルボニル−１，６−シヒ ドローピリミジン水素化ホウ素ナトリウム（２，８ｇ　；　７３ｍｍｏ　ｌ）を アルゴンの下、−４０℃で無水エタノール１８０ｍ１中の１−メチル−２−イソ プロピルアミノ−５−メトキシカルボニルピリミジニウムヒドロキシド１０．５ ｇ　（３２ｍｎｏ　ｌ）に少量ずつ添加する。混合物をアルゴンの下、１時間、 室温で撹拌する。エタノールの留去の後、反応媒体をジクロロメタン及び水で抽 出する。有機相を飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、次いで硫酸ナトリウム上で 乾燥する。有機相の留去により得られた油状物をシリカゲル（２ＱＱｍｂ；溶離 液：１０％　Ｍ　ｅ　ＯＨ／　ＣＨ２Ｃ１２）上で精製して、対応するジヒドロ エステル７ｇ（収率：１００％）を得る。融点：８３℃ １−メチル−２−イソプロピルアミノ−６−メトキシカルボニル−ピリミジニウ ムヒドロキシドは次の方法で得られる。

無水テトラヒドロフラン４４０ｍ１中に２−イソプロピル−アミノ−５−メトキ シカルボニルピリミジン２７．４５ｇ　（０，１４０ｍｏｌ）及び硫酸ジメチル ５６ｍ１　（２ｅｑ　；０．５９ｍｏｌ）を含む混合物を２４時間還流する。

反応媒体を酢酸エチル及び水で抽出する。水相の留去で得られた油状物をシリカ ゲル上で精製（溶離液：９５　ＣＨ−メチル−２−イソプロピルアミノ−５−メ トキシカルボニル−ピリミジニウムヒドロキシド３７．２ｇを得る。

（収率：８２％）。

実施例２ ２−イソプロピルアミノ−５−メトキシカルボニルピリミジン 無水メタノール２３０ｍ１中にイソプロピル−グアニジン硫酸水素塩１１．６２ ｇ　（７７，５ｍｍｏｌ）及び、新たに蒸留したピロリジン３２ｍ１　（５ｅＱ ；０．３７ｍ。

−１）を含む混合物を２０分間遠流す−る。メトキシマロンアルデヒド（ｌｅｑ 　；　７７．５ｍｍｏ　１　；　Ｌｏｇ）のメタノール溶液（６０ｍ　ｌ　）を 、上記溶液及びモレキュラーシーブ（４Ａ’　）１４０ｇに０℃で添加する。反 応媒体をアルゴンの下、２４時間還流しながら撹拌する。濾過してモレキュラー シーブを除去し、次いでメタノールで洗浄する。

濾液を蒸発して、残渣を得、酢酸エチルにとり、次いでＩＮ塩酸溶液で酸性化す る。有機相を飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥し、蒸 発及び２００ｍｂでシリカゲル上（溶離液：５ｏ　酢酸エチル１５０ヘプタン） で精製する。

重量：１１．２７ｇ（収率ニア５％） 融点　１０２℃ 実施例３ １−メチル−２−イソプロピルアミノ−５−メトキシカルボニルピリミジニウム スルフェート メタンスルホン酸１．０９ｍ１ｇ　（１６，７８ｍｏｌ；１．６１ｇ）を、無水 テトラヒドロフラン１００ｍ　ｌ中に１−メチル−２−イソプロピルアミノ−５ −メトキシカルボニルピリミジニウムヒドロキシド（３，４８ｇ；１５゜３５ｍ ｏｌ）を溶解させた溶液に添加する。混合物をアルゴン下、室温で１時間−撹拌 する。形成された沈殿物を濾過−し、次いでエーテルで洗浄する。

重量：３．７４ｇ（収率：８０％） 融点：２０９℃。

実施例４ ２−イソプロピルアミノ−５−カルバモイルピリ；ジントルエンにトリメチルア ルミニウムを含む２Ｎの溶液３０゜６ｍｌ　（６１，２ｍｍｏｌ）を、０℃で無 水ベンゼン７１ｍ１中に塩化アンモニウム（６１，２ｍｍｏｌ　；３．２６ｇ） を懸濁させた懸濁液にゆっくりと添加する。添加を完了し、メタンの放出が終了 するまで混合物をアルゴンの下、１〜２時間撹拌する。９２ｍ１　（６ｅＱの試 薬）の上記の溶液に、無水ベンゼン４０ｍ１中に２−イソプロピルアミノ−５− メトキシカルボニル−ピリミジン（０，１０２ｍｏ１；２ｇ）を含む溶液を管を 用いて添加する。４８時間、室温でアルゴンの下撹拌した後、混合物を５％塩酸 で中性化し、次いでジクロロメタンで抽出する。有機相を除去し、水相を濾過及 び留去する。シリカゲル上で精製（溶離液：８０％　ＣＨ２Ｃｌ２／２０％　Ｍ ｅＯＨｌｏ、７％の３３％ＮＨ３水溶液）した後、粉末状態でアミドが収率８０ ％で得られる。

実施例５ ２−イソプロピルアミノ−５−カルボキシルピリミジン水酸化ナトリウムのＩＮ 溶液６ｍｌを、メタノール３３ｍ１中に２−イソプロピルアミノ−５−メトキシ カルボニルピリミジン（１ｇ　；　５．１２ｍｍｏ　１）を含む溶液に添加する 。混合物を２時間還流（６６℃）する。形成された沈殿物を溶解させるため最少 限の水を添加し、メタノールを減圧下蒸発させる。残留溶液を０℃で２Ｎ塩酸で 酸性化する。得られた沈殿物を濾過し、水で洗浄し、次いで乾燥して８５０ｍｇ 　（９２％）の酸を得る。

実施例６ １−メチル−２−イソプロピルアミノ−５−カルバモイル−１，６−シヒドロー ピリミジン トルエン中にトリメチルアルミニウムを含む２Ｎ溶液４９．７ｍｌ　（９９，５ ｍｍｏ　１）を、０℃で無水トルエン１０５ｍ１中に塩化アンモニウム（９９， ５ｍｍｏ　ｌ　；　５゜３２ｇ）を懸濁させた懸濁液にゆっくりと添加する。添 加を完了し、メタンの放出が終了するまで混合物をアルゴンの下、１〜２時間撹 拌する。

無水トルエン１７５ｍ１中に１−メチル−２−イソプロピルアミノ−５−メトキ シカルボニル−１，６−シヒドロピリミジン（３，４ｇ　；　０．１６ｍｏ　Ｉ ）を含む溶液を、管を用いて、アミノクロロメチルアルミニウムの０．６７Ｍ溶 液１４４ｍ１（６ｅｑの試薬）に添加する。６０時間、室温でアルゴンの下撹拌 した後、混合物を０℃でゆっくりとＩＮの塩酸（３５０ｍｌ）で中性化し、次い で酢酸エチルで抽出する。水相を留去し、シリカ　（アルミニウム塩を保持する ）及びアンモニアで飽和したエタノールにとり、この混合物を濾過して、次いで 蒸発する。濾液を数回のシリカゲル上でフラッシュクロマトグラフィー（２００ ｍｂ；溶離液：５−３０％　Ｍ　ｅ　ＯＨ／　ＣＨＣｌ　／　Ｎ　Ｈ３飽和）の 後、２．２８ｇのアミドを収率７２％で得る。

融点、１７９−１８０℃ 実施例７ ａ−Ｎ−Ｂｏｃ−δ−Ｎ−（（２−ピリミジニル−５−メトキシカルボニル）− Ｌ−オルニチン 無水メタノール３０ｍ１中にアルファーＮ−Ｂｏｃ−Ｌ−アルギニン（市販）４ ｇ　（１４，５ｍｍｏ　ｌ）　、メトキシマロンアルデヒド２．８４ｇ　（１， ５ｅｑ；２１．８ｍｏｌ）、新たに蒸留したピロリジン３．６５ｍ１、活性モレ キュラーシーブ４Ａ’を１０ｇ含む混合物を、アルゴンの下、２４時間、５０℃ で加熱する。濾過してモレキュラーシープを除去し、メタノールを留去した後、 反応媒体を水及びジクロロメタンで抽出する。水相を留去し、次いでシリカゲル 上（２００ｍｂａｒ；溶離液：８０％　ＣＨ２ＣＩ　／２０％　ＭｅＯＨ／３３ ％のＮ　Ｈ３水溶液、１００ｍｌ当たり０．７ｍ１）で精製する。４．２１ｇが 得られる。（収率：８０％）。

実施例８ δ−Ｎ−（２−ピリミジニル−５−メトキシカルボニル）−Ｌ−オルニチン ヨードトリメチルシラン（ｉｏｄｏｔｒｉｍｅｔｈｙｌｓｉｌａｎｅ）　０．　 ７７ｍ１　（４ｅｑ　；５．４３ｍｍｏｌ）を、りｏロホルム２０ｍ１に実施例 ７のピリミジン類５００ｍｇ　（１，３５ｍｍｏｌ）を溶解させた溶液に添加す る。１時間、室温で、無水雰囲気下で撹拌した後、ジクロロメタン及び水を添加 する。水相を蒸発させて、残渣を得、これをシリカゲル上で精製する。

実施例９ ２−ベラトリルアミノ−５−カルボキシピリミジン水酸化ナトリウムのＩＮ溶液 ０．４ｍｌを、２−ベラトリルアミノ＝５−カルボキシメチルピリミジン（１０ ０ｍ１　；　３，３ｍｍｏ　１）のメタノール溶液（１ｍｌ）に添加する。混合 物を２時間還流する。メタノールを減圧下、留去する。残留溶液を２Ｎの塩酸で 酸性化し、形成された沈殿物を濾過し、水で洗浄し、次いで乾燥する。（収率： ９０％） 実施例１０ ヱ 無水メタノール３００ｍ１中に’Ｔｈ；ｒａｐｉｅ”（ｏｐ、　ｃｉｔ、　）に 従って得られたベラトリルグアニジン２１．９２　（０゜１ｍｍｏ　り　、新た に蒸留したピロリジン４１．７ｍ１（０，５ｍｏ　ｌ）　、メトキシマロンアル デヒド１５ｇ１モレキユラーシーブ（４Ａ’　）１８０ｇを含む混合物をアルゴ ンの下、２４時間還流する。モレキュラーシーブを濾別し、次いでメタノール及 びクロロホルムで洗浄する。濾液を蒸発して残渣を得、これを酢酸エチルにとり 、次いで、塩酸のＩＮ溶液で酸性化する。有機相を飽和塩化ナトリウム溶液で洗 浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥、蒸発させて、シリカゲル（溶離液：５０　酢酸 エチル１５０　ヘプタン）上で精製する。（収率：４０％）。

実施例１１ １−メチル−２−ベラトリルアミノ−５−メトキシカルボニル−１，６−シヒド ロピリミジン 水素化ホウ素ナトリウム０．１７０ｇ　（３ｅｑ）を、エタノール５０ｍ１中に １−メチル−２−ベラトリルアミノ−５−メトキシカルボニル−ピリミジニウム ヒドロキシド０．４００ｇを゛溶解させた溶液に添加する。混合物をアルゴンの 下、室温で３時間撹拌する。エタノールを留去した後、媒体をジクロロメタン及 び水で抽出する。有機相を飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、硫酸ナトリウム上 で乾燥する。有機相の蒸発により得られた油状物を、中圧（ｍｅｄｉｕｎ　ｐｒ ｅｓｓｕｒｅ　）においてシリカゲル上で精製（溶離液：１５％　Ｍ　ｅ　ＯＨ ／　ＣＨ２Ｃ１２）　シ、対応する１、６−シヒドロピリミジン体を４６７ｍｇ 　（収率：９８％）得る。

実施例１２ １−メチル−２−ベラトリルアミノ−５−メトキシカルボニルピリミジニウムヒ ドロキシド 無水ＴＨＦ６０ｍｌ中に２−ベラトリルアミノ−５−メトキシカルボニルピリミ ジ：／２．６２ｇ　（８，６ｍｍｏｌ）及びジメチルスルフェート３．　２８ｍ 　ｌ　（４ｅ　ｑ）を含む混合物を４８時間還流する。混合物を酢酸エチル及び 水で抽出する。水相の蒸発により得られた油状物をシリカゲル上（溶離液：３％ 　Ｍ　ｅ　ＯＨ／　ＣＨＣｌ　／　Ｎ　Ｈａの３３％水溶液、５．５ｍｌ／１０ ０）で精製して、２．２ｇの塩を得る（収率ニア６％）。

実施例１３ １−メチル−２−ベラトリルアミノ−５−メトキシカルボメタンスルホン酸８５ μｌ　（１，ｌｅｑ；１．３１ｍｍｏ１）を、無水テトラヒドロフラン１５ｍ１ 中に１−メチル−２−ベラトリルアミノ−５−メトキシ−カルボニルピリミジニ ウムヒドロキシド４００ｍｇを溶解させた溶液に添加する。混合物をアルゴンの 下、室温で１時間撹拌する。

沈殿物を濾過し、テトラヒドロフラン及びエーテルで洗浄し、次いで乾燥する。

（重量：４９０ｍｇ−収率：９６％）実施例１４ ベラトリルグアニジン　メタンスルホネートメタンスルホン酸（７，８ｍｌ　； ０．１２０ｍｏｌ）を、メタノール２４０ｍ１中にベラトリルグアニジン　（２ ５”ｇｏｏ、１１９ｍｏｌ）を懸濁させた懸濁液に添加する。

混合物を室温で、１時間撹拌する。減圧下でメタノールを留去して、得られた油 状物をテトラヒドロフラン中で１５分間撹拌し、沈殿させる。白色固体を濾過し 、テトラヒドロフラン及びエーテルで洗浄し、次いで減圧下で乾燥する。

ベラトリルグアニジンメタンスルホネート３０ｇを収率８２％で得る。

実施例１５ １−メチル−２−イソプロピルアミノ−４−カルボキシイミダゾール １−メチル−２−イソプロピルアミノ−４，５−ジカルボキシイミダゾール（９ １０ｍｇ　；　４ｍｍｏ　１）及びＮ。

Ｎ−ジメチルアセトアミド２０ｍ１の混合物をアルゴンの下、１８０℃で３時間 加熱する。溶媒を減圧下で留去し、残渣を最少限のエタノールにとり、テトラヒ ドロフランで沈殿させる。母液を沈殿物が得られるまで濃縮する。１−メチル− ２−イソプロピルアミノ−４−カルボキシイミダゾールを収率８８％で得る。

（ｍ＝６５０ｍｇ）。

融点：２４７℃ 実施例１６ １−メチル−２−イソプロピル−４−メトキシカルボニルイミダゾール １−メチル−２−イソプロピルアミノ−４−カルボキシイミダゾール４００ｍｇ を無水メタノール２５ｍ１に溶解させる。溶液を０℃まで冷却し、塩酸で飽和し 、次いで１２時間還流する。冷却した後、過剰の酸をアルゴン通気で追い出す。

媒体を炭酸ナトリウムの添加により中和し、蒸発する。残渣を水にとり、ジクロ ロメタンで抽出する。有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥し、蒸発して残渣を得、 これをエーテルで洗浄し、次いで減圧下乾燥する。

ｍ＝３８４ｍｇ；収率：８９％ 融点＝１９８℃。

実施例１７ ２−イソプロピルアミノ−４−オキソ−５−エトキシカルボニル−５−ヒドロキ シ−Δ２二＜＝ｒ／＋Ｊｙイソプロピルグアニジン硫酸水素塩５．　７２ｇ　（ ０，０１９１ｍｏ　１）を、水酸化ナトリウム（０，０３８ｍｏ　１　；１．５ ３ｇ）を含むメタノール溶液（２０ｍｌ）で室温にて、アルゴンの下、１時間、 脱塩する。得られた沈殿物を濾過し、濾液を蒸発する。イソプロピルグアニジン をエタノールにとり、再度濾過する。エータノール性濾液を濃縮する。

エタノール１５０ｍ１中にイソプロピルグアニジン３゜８５ｇ　（０，０３８２ ｍｏｌ）及びジエチルアセトマロネート１０ｇを含む溶液を１０時間、５０℃で 加熱する。エタノールの蒸発により、残渣を得、シリカゲル６０上でフラッシュ クロマトグラフィー（溶離液：１５　ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ　２　）により精製 する（　ｍ　＝　７　ｇ　；収率：８０％）。化合物は平衡状態のＡ及びＢの２ 種類の形態で存在する。

実施例１８ ２−アミノ−４−（１−，２″、３″−トリヒドロキシブタノイル）−４−ヒド ロキシ−５−オキソ−イミダシリンエタノール４７０ｍ１中にＬ−アスコルビン 酸（０，３１４ｍｏ　１　；　５５．４ｇ）及びｐ−ベンゾキノンを含む混合物 を暗所でアルゴンの下、９０分間撹拌する。次いでグアニジン（０，１５７ｍｏ ｌ）（事前にエタノール中で水酸化ナトリウムにより脱塩）のエタノール溶液（ １００ｍｌ）を添加する。媒体を室温でアルゴンの下、暗所で６時間撹拌する。

形成された沈殿物を濾過し、エタノールで洗浄し、減圧下乾燥する。

（ｍ＝３０ｇ’：収率＝１００％）。

実施例１９ ２−アミノ−４−（１＝、２−．３″−トリヒドロキシブタノイル）−５−オキ ソイミダゾール 無水エタノール８０ｍ１中に溶解させた実施例１８の粗化合物２ｇ　（８，２３ ｍｍｏｌ）の溶液を１時間還流する。

蒸発及びシリカゲル上（溶離液：３５％　Ｍ　ｅ　ＯＨ／　５％Ｈｏ／ＣＨ２Ｃ ｌ２）で精製した後、収率２２％テ４００ｍｇを得る。

イソプロピルグアニジン（実施例２０）、イサクソニン（ｉｓａｘｏｎｉｎｅ） 　（実施例２１）及びイソプロピルグアニジンクロライド（実施例２２）もまた 既知の技術により得られた。

新生のラットから集められた神経節を９６ウエルの平底プレートにおいて、５％ ウシ胎児血清及び１０ｍＭ　Ａｒａ二Ｃ（シトシン−β−Ｄ−アラビノブラノシ ド）を添加したＤＭＥＭ培地（Ｇｉｂｃｏ）で培養する。

１日後、各種供試化合物及び対照溶液を添加する。

２日後、培養を停止し、外植片（ｅｘｐｌａｎｔ）を、アルデヒドの混合物で固 定後、トルイジンブルーで染色した後、在来の顕微鏡を使用して又は位相差顕微 鏡の下で、低倍率で撮影する。評価する上で、神経突起束の伸張（ｅｘｔｅｎｓ ｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｎｅｕｒｉｔｉｃ　ｂｕｎｄｌｅｓ）の直径平均、それ らの分校、それらのダリア細胞及び死細胞との関連を考慮する。

供試化合物 化合物１〜８．１４．１８及び２１を３種の異なる濃度：１０−５．１０−６及 び１０’Ｍにおいて、５０　Ｉ　Ｕ／ｍ　ｌのＮＧＦ　（神経成長因子（ｎｅｒ ｖｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ）を指すアングロサクソンの頭文字）の存在 下又は不在下で試験した。

ＮＧＦの存在下における実験の目的は、一方では、供試生成物との比較であり、 他方では、ＮＧＦ効果（細胞死、神経分枝の誘導）の修飾の可能性の観察である 。

各種の化合物を溶解させるのに使用するＰＢＳ以外に添加剤が存在しない場合、 稀な短い伸張（ｒａｒｅ　５ｈｏｒｔｅｘｔｅｎｓｉｏｎ）及び多数の死細胞の 存在が観察される。対照ＮＧＦの存在下では、非常に多くの細く、長い、高度に 分校していない、伸張（ｆｉｎｅ　ａｎｄ　ｌｏｎｇ、　ｎｏｔ　ｈｉｇｈｌｙ 　ｂｒａｎｃｈｅｄ、　ｅｘｔｅｎｓｉｏｎｓ）が観察される。

各種生成物の効果を、参照コントロールと比較して評価するニ一方でＰＢＳに対 する生成物、他方でＮＧＦに対する生成物子ＮＧＦ０更に、単独で使用された生 成物のポジティブな効果を、ＮＧＦのそれと比較する。

ＮＧＦの存在下の実施例３の化合物は、神経突起の実質的な修飾を惹起する；即 ち、神経突起はより長く、特に伸長に多数の細胞が付着した実質的な樹枝状分岐 を示す。ＮＧＦの存在下の実施例１４の化合物は、神経突起の延長を惹起する（ ＮＧＦ単独の存在下での培養の場合の約２倍）。

神経突起の架橋を増進する効果もある（より大きな直径の神経突起が少ない）。

単独で使用した化合物３及び１４は、コントロールのＰＢＳに比較して神経突起 の成長を強化する。伸長（ｅｘｔｅｎｓｉｏｎｓ）の形態学的外観は、ＮＧＦの 場合と同一であり、その有効性は、この成長因子に類似しているように思われる 。

実施例５の化合物は、単独で低濃度で又はＮＧＦ　（１０−７Ｍ）の存在下で使 用した場合、伸長数の増加を伴うポジティブな効果を示す。

実施例７及び２２の化合物は、単独で又はＮＧＦとの相乗作用で認められ、且つ 、神経突起の長さの増加により特徴付けられるポジティブな効果を示す。

実施例２．６及び２１の化合物については、より多数の伸長（ｅｘｔｅｎｓｉｏ ｎｓ）の存在が、その長さの増加を伴うことなく観察される。

Ｂ　−初代培養におけるニワトリ及びラットのニューロン及び神経膠細胞に対す る効果 実施例１４及び２１の化合物を、初代培養（ｐｒｉｍａｒｙ　ｃｕｌｔｕｒｅ） において、中枢及び末梢神経系のニューロンの神経突起の生存及び成長、並びに 星状細胞の増殖及び形態学的修飾について試験した。

実験手法： １．１４日目のラット胎児（１４−ｄａｙ　ｏｌｄ　ｒａｔ　ｅｍｂｒｙｏ）の 脳のニューロン ニューロンを大脳半球から分離し、合成血清（ｃｈｅｍｉｃａｌ　１ｙ　ｄｅｆ ｉｎｅｄ　ｓｅｒｕｍ）を欠く栄養培地の存在下、ペトリ皿中でポリリジン上で 培養する。

２．８日目のニワトリ胚（８−ｄａｙ　ｏｌｄ　ｃｈｉｃｋｅｎ　ｅｍｂｒｙｏ ）のを髄及び毛様体神経節のニューロン 分離したニューロンを−、２０％ウシ胎児血清を含む栄養培地中でポリオルニチ ン上で培養する。

３、新生ラットの脳の星状細胞 分離した細胞を、合成培地（ｄｅｆｉｎｅｄ　ｍｅｄｉｕｍ）中でペトリ皿のプ ラスチック表面上で直接培養する。

化合物１４及び２１を、１０−４Ｍ〜１０−８Ｍ濃度で、接種直後及び培地の交 換時毎に添加した。

純粋培養で分離したニューロンに対して、化合物２１は、中枢神経系のニューロ ンの神経突起の成長を刺激し、化合物１４はを髄神経節（末梢神経系）のニュー ロンの生存及び神経突起の成長を増進する。しかも、化合物１４は、支持細胞（ 星状細胞）に対して毒性効果を有しない。これら化合物は、ニューロンの生存及 び神経突起の成長を調節（ｒｅｇｕｌａｔｅ）することができ、神経障害及び筋 障害の治療ルートを構成する。

化合物１．３及び１４を、インビボで、トレンブラーマウス（Ｔｒｅｍｂｌｅｒ 　ｍ１ｃｅ）　、即ちヒトにおけるシャルコーーマリーーツースニューロパシ− （Ｃｈａｒｃｏｔ−Ｍａｒｉｅ−Ｔｏｏｔｈ−ｓ　ｎｅｕｒｏｐａｔｈｙ）の動 物モデルにおいて軸索の再生及びその再脊髄化（ｒｅｍｙｅｌｉｎａｔｉｏｎ） について試験した。

皮下注射により投与（１００ｍｇ／ｋｇ）された化合物１、及び腹腔的注射によ り投与（５０ｍｇ／ｋｇ）された化合物１４は、神経内の軸索の“新生（ｓｐｒ ｏｕｔｉｎｇ）”を促進（＋２５％及び＋２０％）し、トレンブラー変異（Ｔｒ ｅｏ＋ｂｌｅｒ　ｍｕｔａｔｉｏｎ）を特徴付ける脱髄（ｄｅｍｙｅｌｉｎａｔ ｉｏｎ）を加速する（−２５％）。

化合物３もまた脱髄を促進する。毎日注射を４０日間した後では、神経繊維のわ ずか２２％が脊髄化されるに過ぎないが、コントロールにおいては３２％である 。

化合物１．３．７及び１４は、また、以下の培養において１０　Ｍ、１０’Ｍ及 び１０−７Ｍでインビトロで試験された。

１）１４日目のラット胎児（１４−ｄａｙ　ｏｌｄ　ｒａｔ　ｅｍｂｒｙｏ）の を髄細胞（ｓｐｉｎａｌ　ｃｏｒｄ　ｃｅｌｌｓ）。

２）正常マウス及びＭｄｘマウス即ちヒトにおけるデュシェーヌミオパシ−（Ｄ ｕｃｈｅｎｎｅ’ｓ　ｍｙｏｐａｔｈｙ）と類似の動物モデルの筋原細胞、 ３）筋原細胞（１９日目のラット胎児）およびニューロン（１４日目のラット胎 児）の共培養（Ｃ□−ｃｕｌｔｕｒｅ）および４）３Ｔ３細胞、繊維芽細胞系 化合物１．３及び１４は細胞クラスターの形成を促進する。神経突起の出現及び 発達。化合物１４が３つのなかで最も活性である。

ニューロン−筋肉の共培養において、化合物３及び１４は、神経突起の発達及び 分校を促進する。

該共培養において、神経筋接合部（シナプス）が、アセチルコリンエステラーゼ 及びアセチルコリンレセプターの共局在化（ｃｏ−１ｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎ） により、検出される。

化合物７は、１０’Ｍでシナプスの数を６０％増加させる。

化合物７の影響の下で生成されたシナプスの数の増加は、用量依存性である。

フロントページの続き （５１）　Ｉｎｔ、　Ｃ１，５識別記号　庁内整理番号Ａ６１Ｋ　３１１５０５ 　ＡＡＭ　９３６０−４ＣＣＯ７Ｄ　２３３／７２　９３６０−４Ｃ２３３／８ ８　９３６０−４Ｃ ２３３／９０　Ａ　９３６０−４Ｃ ２３９／２８　８６１５−４Ｃ ２３９／４２　Ｚ　８６１５−４Ｃ （７２）発明者　ボテイエ　ビニール フランス国　７５００７　パリ　アベニュ　デブルトイユ　１４ （７２）発明者　レンフ　トロール フランス国　９１１９０　シフ　スール　イベット　シュマン　デ　ラ　グール ディレリ（７２）発明者　ザネッタ　ジャン−ビニールフランス国　６７３７０ 　グリースハイム／スーフエル　リュ　デ　プレ　１０ Ｉ （７２）発明者　ポルチェ　マリー−マドレーヌフランス国　９１３７０　ベリ エル　ル　ブイラン　シュマン　デザント　１７ （７２）発明者　センセンブレンナー　モニクフランス国　６７０００　ストラ スプール　リュ　ダニエル　ヒルツ　１９ （７２）発明者　ケーニグ　ジャニン フランス国　３３８００　ボルドー　リュ　ベルト　ラン　デ　ボート　１５５ （７２）発明者　ケ一二グ　エルベールフランス国　３３８００　ボルドー　リ ュ　ベルト　ラン　デ　ボート　１５５

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １　下記一般式の化合物： ▲数式、化学式、表等があります▼ ［式中、Ｒ１は、イソプロピル基、一もしくはそれ以上の（Ｃ１−Ｃ４）アルコ キシ基で置換されてもよいベンジル基又は基： ▲数式、化学式、表等があります▼ を示し、 Ｒ２、Ｒ３及びＲ４は、これらが結合する窒素原子及びこれら窒素原子が結合す る炭素原子と共に、一般式ＩＩのピリミジン環又は一般式ＩＩａのピリミジニウ ム環を形成しており、▲数式、化学式、表等があります▼ＩＩ▲数式、化学式、 表等があります▼ＩＩａ上記式において、 ｎ＝０、１、２、 Ｒ４は、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基、（Ｃ７−Ｃ９）アラルキル基、フェニル基 又は水素原子であり、Ｒ８は、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル基、（Ｃ７−Ｃ９）アラ ルキル基であり、ＣＯＯＲ８は、一般的にアミン保護基であることができ、 Ｒ５は、ヒドロキシル基、（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ基又はアミノ基であり、 Ｘ−は、薬理学的に許容されるカチオンであるか、又はＲ２、Ｒ３及びＲ４は、 水素原子であるか、又はＲ２、Ｒ３及びＲ４は、これらが結合する窒素原子及び これら窒素原子が結合する炭素原子と共に下記一般式で表わされるイミダゾール 環： ▲数式、化学式、表等があります▼ＩＩＩ又は下記一般式で表わされる１，６− ジヒドロピリミジン：▲数式、化学式、表等があります▼ＩＶ（Ｒ６は、Ｒ５の 定義の一つを示す）を形成しているか、又はＲ２、Ｒ３はこれらが結合する窒素 原子及びこれら窒素原子が結合する炭素原子と共に、下記一般式の環：▲数式、 化学式、表等があります▼Ｖ を形成しており、この場合はＲ１は水素原子であってもよく、Ｒ７は（Ｃ１−Ｃ ４）アルコキシ基又は１−グリセリル基である。］ 及びこれら化合物の薬理学的に許容される塩（ベラトリルグアニジン及びそのヘ ミスルフェートを除く）。 ２　Ｒ１が、イソプロピル基又はジ−もしくはトリメトキシベンジル基又は下記 の基： ▲数式、化学式、表等があります▼ であることを特徴とする請求項１に記載の化合物。 ３　Ｒ４がメチル、エチル、ｎ−プロピル又はベンジル基であることを特徴とす る請求項１に記載の化合物。 ４　ベラトリルグアニジンの乳酸塩、フマル酸塩、塩酸塩、マレイン酸塩、リン ゴ酸塩、ケトグルタル酸塩、グルタル酸塩、フェノキシ酢酸塩、スルホネート、 ピクリン酸塩、酒石酸塩、メタンスルホン酸塩から選ばれる前記請求項のいずれ かに記載の化合物。 ５　治療的に活性な物質として適用されるための請求項１から４のいずれかに記 載の一般式（Ｉ）の化合物。 ６　請求項５に記載の化合物の少なくとも一種及び薬理学的に許容される不活性 担体を含む製剤学的組成物。 ７　筋障害の治療に有用な医薬品の製造のためのべラトリルグアニジンもしくは そのヘミスルフェートの使用。 ８　Ｒ２、Ｒ３及びＲ４が、これらが結合している窒素原子及びこれら窒素原子 が結合している炭素原子と共に、一般式ＩＩのピリミジン環を形成している請求 項１から４のいずれかに記載の一般式（Ｉ）の化合物を調製する製造方法であっ て、下記一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼Ｉ で表わされるグアニジン類の酸性塩（例えば硫酸水素塩）を、酸受容体（例えば ピロリジンのような第２級アミン）及び必要に応じてメタノールのようなプロト ン性極姓溶媒の存在下で、下記一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ＶＩで表わされる（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ マロンアルデヒド類と接触させることからなり、得られた化合物は、必要に応じ て、加水分解し、必要に応じて、カルボキサミドに変換及び／又は必要に応じて ジアルキルスルフェートを作用させて一般式ＩＩａの１−アルキルピリミジニウ ムに変換することができる製造方法。 ９　Ｒ２、Ｒ３及びＲ４が、それらが結合する窒素原子及びこれら窒素原子が結 合している炭素原子と共に、一般式ＩＶの１，６−ジヒドロピリミジン環を形成 する請求項１から４のいずれかに記載の一般式（Ｉ）の化合物の製造方法であっ て、Ｒ４が水素原子である場合、請求項７で得られたピリミジニウムヒドロキシ ドを、ナトリウムテトラボロハイドライドのような還元剤と接触させることより なる製造方法。 １０　必要に応じてＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミドのような極性溶媒の存在下で 、加熱することにより４，５−ジカルボキシイミダゾール類を部分的に脱炭酸す ることを特徴とし、Ｒ４が水素原子の場合、Ｒ２及びＲ３が、それらが結合した 窒素原子及びこれら窒素原子が結合している炭素原子と共に、一般式Ｖの環を形 成している一般式（Ｉ）の化合物を脱水することを特徴とするＲ２、Ｒ３及びＲ ４が、それらが結合した窒素原子及びこれら窒素原子が結合している炭素原子と 共に、一般式ＩＩＩのイミダゾール環を形成している一般式（Ｉ）の化合物の製 造方法。