JPH06503365A - 髄膜炎菌“Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ”感染症に対するワクチン - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は髄膜炎菌“ネイセリアメニンギティデス（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａｍｅｎｉ ｎｇｉｔｉｄｉｓ）’によって起こる髄膜炎の予防ワクチンとしての医薬組成物 に関するものである。

一般に、髄膜炎はウィルスまたは細菌によって起こる。主たる病原菌はＮ、ｍｅ ｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓと、ハエモフィラスインフルエンザエ（Ｈａｅｍｏｐｈｉ ｌｕｓ　１ｎｆｌｕｅｎｚａｅ）であり、これらは細菌性髄膜炎のそれぞれ約４ ０％および約５０％の原因になっている。

Ｎ、　ｍｅ旧ｎｇｉｔｉｄｉｓによる髄膜炎はフランスでは年間約６００〜８０ ０件を数え、アメリカ合衆国では年間的２．５００〜３．０００件にものぼる。

Ｎ９ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ種は莢膜多糖＜ｐｏｌｙｓａｃｃａｒｉｄｅ　ｃ ａｐｓｕｌａｉｒｅ）の種類によってさらに幾つかの血清グループに分類される 。約１２の血清グループが存在するが、髄膜炎の９０％は３種類の血清グループ Ａ、Ｂ、　Ｃによって引き起こされるものである。

Ｎ９ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓの血清グループＡとＣによる髄膜炎を予防するた めの莢膜多糖をベースとした効果的なワクチンは既に存在している。これらの莢 膜多糖それ自体は２才以下の幼児では殆ど免疫原性を持たず、免疫記憶が誘導さ れないが、これら多糖をキャリア蛋白に結合させることによってこの欠点は解決 することができる。

これに対してＮ、　ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓのＢグループの多糖は、結合体の 状態でもそうでなくても、人体内でほとんど免疫原性を持たない。

従って、Ｎ、　ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓのグループ已によって引き起こされる 髄膜炎に対する多糖ベースのワクチン以外のワクチンが強く要望されており、Ｎ 、　ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓの外膜の各種蛋白、特にヒトのトランスフェリン と結合する膜受容体等が既に提案されている。

一般に、大部分の細菌は増殖のために鉄を必要とし、この金属を摂取するための 特別なシステムを有している。特に、遊離状態の鉄の量は人体内ではほぼゼロに 近＜　（１０−”　Ｍのオーダー）、いずれにせよ細菌の増殖には不十分な量し かないので、人間に対して強い病原性を持つＮ９ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓの場 合には人間の鉄輸送蛋白、例えばトランスフェリンやラクトフェリンが唯一の鉄 の摂取源である。

Ｎ、　ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓは鉄とキレートを作った蛋白を固定して増殖に 必要な鉄を摂取するために、ヒトのトランスフェリンおよびラクトフェリンの受 容体を有している。

Ｎ、　ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ　８１６Ｂ６株のトランスフェリン受容体は膜 抽出物からシュリベール（Ｓｃｈｒｙｖｅｒｓ）達によって単離された（ＰＣＴ 特許Ｗ○９０／１２５９１号）。精製されたこの蛋白質はほぼ２種類のポリペプ チド、すなわちＳＤＳの存在下のポリアクリルアミドゲル電気泳動で分離する見 掛は分子量が約１００ｋＤの高分子量ポリペプチドと、見掛は分子量が約７０ｋ Ｄの低分子量ポリペプチドとで構成されている。

本明細書では、シュリベール達が精製した物質をトランスフェリン受容体とよび 、それを構成するポリペプチドはサブユニットとよぶことにする。以下では、高 分子量のサブユニットと低分子量のサブユニットをそれぞれＴｂｐｌおよびＴｂ ｐ２とよぶことにする。

本発明者は種々の起源を有する数十種類のＮ、　ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓの株 の膜抽出物を研究した結果、トランスフェリン受容体の構造が異なる少なくとも ２種類の株が存在するということを発見した。

すなわち、この膜抽出物を先ず最初に５ＤＳ−ＰＡＧＥゲル電気泳動で分離し、 次いで、ニトロセルロースフィルム上へ電気移送（ｅｌｅｃｔｒｏｔｒａｎｓｆ ｅｒ）　した。このニトロセルロースフィルムを下記条件で培養した： ａ）　Ｎ、　ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ　Ｂ１６Ｂ６株（２３９４ともいわれる ）から単離したトランスフェリン受容体に対する抗体を含むウサギ血清の存在下 ｂ）　Ｎ、　ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ　２１６９株から単離されたトランスフ ェリン受容体に対する抗体を含むウサギ血清の存在下、または、Ｃ）　パーオキ シダーゼに結合させたヒトトランスフェリンの存在下。

ａ）とｂ）の場合には、ウサギの免疫グロブリンに対する抗体をパーオキシダー ゼと結合させたものを添加し、その後その酵素の基質を添加してトランスフェリ ン受容体のサブユニットを検出（視覚化）する。

下記の表■および表■は、７．５％ポリアクリルアミドを含む５ＤＳ−ＰＡＧＥ ゲル上で見られる代表的な株のプロフィールを示しており、バンドは見掛は分子 量（キロダルトン（ｋＤ）で表示）で特徴づけである。

これらの表の最初の２行に記載された結果は２種の株が存在することを示してい る。

第１のタイプ（表Ｉ）は、２つのサブユニットが共に抗２３９４株受容体血清に よって認識されるが、抗２１６９株受容体血清では高分子量のサブユニットのみ が認識される受容体を有する株に対応している。

第２のタイプ（表■）は、２つのサブユニットが共に抗２１６９株受容体血清に よって認識されるが、抗２３９４株受容体血清では高分子量のサブユニットのみ が認識される受容体を有する株に対応する。

すなわち、低分子量サブユニットのレベルで抗原性にバラつきがある。しかし、 このバラつきは２つの主要タイプに分けられる限定的なものである。このことは グリフイス　（Ｇｒ　ｉｆ　ｆ　１ｔｈｓ）達の報告（ＰＥＭＳ　Ｍａｃｒｏｂ ｉｏｌ、　Ｌｅｔｔ、（１９９０）　６Ｆ＋３１）で示唆されていることとは違 っている。

なお、どのタイプの株であっても、トランフェリンに結合可能なサブユニットは 常に低分子量サブユニットである点に注意されたいく表Ａおよび表Ｂの第３行目 の結果）。

これらの事実から導かれる結論は、Ｎ、ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓの全ての感染 症の予防に効果的なワクチンはトランスフィリン受容体で構成でき、高分子量サ ブユニットが２つのタイプの抗血清で認識されるので、受容体の起源となる株の 種類とは無関係に、高分子量サブユニットのみで構成すれば十分であるという結 論になる。

しかし、驚くべきことに、本発明者達は、高分子量のサブユニットは中和抗体を 産生ずることはできず、上記の結論は当てはまらないということを発見した。す なわち、受容体の２つのサブユニットのうちの最も小さい方のみしかこの機能を 有しない。低分子量ザブユニットの特徴は第１タイプの株と第２のタイプの株と の抗原性に大きなバラつきがあるという点にあるので、全てのＮ、　ｍｅｎｉｎ ｇｉｔｉｄｉｓ感染症に対するワクチンとしては単一タイプのトランスフェリン 受容体では十分ではない。

従って、本発明は下記のものを提供する：１）ヒトトランスフェリンに結合可能 な少なくとも第１および第２の分子を治療成分として含むワクチン用医薬組成物 であって、第１の分子は少なくとも高分子量サブユニット（Ｔｂｐｌ）と低分子 量サブユニッ）（Ｔｂｐ２）とを有するヒトトランスフェリン受容体を有するＮ 、　ｍｅ旧口ｇｉｔｉｄｉｓの第１の株から得られ、その低分子量サブユニット （Ｔｂｐ２＞はＮ、　ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ　２３９４株の受容体く受容体 ２３９４）に対する抗血清によって認識されるが、Ｎ、　ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄ ｉｓ２１６９株の受容体（受容体２１６９）に対する抗血清では認識されず、一 方、第２の分子は、少なくとも高分子量サブユニット　（Ｔｂｐｌ）と低分子量 サブユニッ）　（Ｔｂｐ２＞とを有するヒトトランスフェリン受容体を有するＮ 、　ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓの第２の株から得られ、その低分子量サブユニッ Ｉ−（Ｔｂｐ２）は受容体２１６９に対する抗血清によって認識されるが、受容 体２３９４に対する抗血清では認識されないもの。

１１）以下のものを含むワクチン接種用キット：ａ）ヒトトランスフェリンに結 合可能な少なくとも１つの第１の分子を治療成分として含む医薬組成物であって 、この第１の分子は少なくとも高分子量サブユニット（Ｔｂｐｌ、）と低分子量 サブユニット（Ｔｂｐ２）とを有するヒトトランスフェリン受容体を有するＮ、 　ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓの第１の株から得られ、この低分子量サブユニ・ン トはＮ。

ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ　２３９４株の受容体（受容体２３９４）に対する抗 血ｉによって認識されるが、Ｎ、　ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ　２１６９株の受 容体（受容体２１６９）に対する抗血清では認識されないもの、 ｂ）ヒトトランスフェリンに結合可能な少なくとも１つの第２の分子を治療成分 として含む医薬組成物であって、この第２の分子は少なくとも高分子量サブユニ ツトと低分子量サブユニットとを有するヒトトランスフェリン受容体を有するＮ 、　ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓの第２の株から得られ、この低分子量サブユニッ トは抗受容体２１６９の血清によって認識されるが、抗受容体２３９４の抗血清 では認識されないもの、 Ｃ）上記成分ａ）とｂ）とを同時または前後して投与するだめの投与手段。

ｉｉｉ　）ヒトトランスフェリンに結合可能な少なくとも第１および第２の分子 を組み合わせた治療的使用であって、第１の分子は少なくとも高分子量サブユニ ツトと低分子量サブユニットとを有するヒトトランスフェリン受容体を有するＮ 。

ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓの第１の株より得られ、この低分子量サブユニットは Ｎ、　ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ　２３９４株の受容体（受容体２３９４）に対 する抗血清によってｆｆ１ｍされるが、Ｎ、　ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ２１６ ９株の受容体（受容体２１６９）に対する抗血清では認識されず、一方、第２の 分子は少なくとも高分子量サブユニ・ノドと低分子量サブユニットとを有するヒ トトランスフェリン受容体を有するＮ、　ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓの第２の株 から得られ、この低分子量サブユニットは受容体２１６９に対する抗血清（こよ って認識されるが、受容体２３９４に対する抗血清では認識されないもの。

ｉｖ）　Ｎ、　ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ感染症に対するワクチン接種方法にお いで、ヒトトランスフェリンに結合可能な少なくとも第１の分子と第２の分子と を治療上効果的な量だけ、同時または前後して、ワクチン治療を必要とする対象 物に接種し、その際に、第１の分子は高分子量サブユニットと低分子量サブユニ ットとを少なくとも含むヒトトランスフェリン受容体を有するＮ、　ｍｅｎｉｎ ｇｉｔｉｄｉｓの第１の株より得られ、この低分子量サブユニットはＮ、　ｍｅ ｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ　２３９４株の受容体（受容体２３９４）に対する抗血清 によって認識されるが、Ｎ、　ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ　２１６９株の受容体 く受容体２１６９）に対する抗血清では認識されず、第２の分子は高分子量サブ ユニットと低分子量サブユニットとを少なくとも含むヒトトランスフェリン受容 体を有するＮ、　ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓの第２の株より得られ、この低分子 量サブユニットは受容体２１６９に対する抗血清によって認識されるが、受容体 ２３９４に対する抗血清では認識されないもの。

「ヒトトランスフェリンに結合可能な分子」とは、Ｎ、　ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄ ｉｓ由来のヒトトランスフェリン受容体（換言すれば２種類のサブユニットから 成る分子）、ヒトトランスフェリンに結合可能な方のみのサブユニットおよびこ のサブユニットの断片または類似体を意味する。

トランスフェリン受容体は国際特許Ｗ　Ｏ９１／　１２５９１号に記載のシュリ ベール達の方法［５ｃｈｒｙｖｅｒｅ　ｅｔ　ａｌ、、Ｉｎｆｅｃｔ、　１ｍｍ ｕｎ。

（１９８８）　５６　（５）：１１４４と同様な方法〕に従って、遊離の鉄が不 足した培地で予め培養したＮ、　ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ株から、精製した状 態で得ることができる。あるいは、Ｎ、　ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓの特定株に 由来するトランスフェリン受容体を遺伝子工学を用いて製造することもできる。

受容体のサブユニットをコードするＤＮＡ断片はへテロ発現系（例えば細菌細胞 、酵母細胞、哺乳類細胞）と同時にまたは別々に発現させることができる。この 場合には遊離のサブユニットまたは受容体の形で組込まれたサブユニットを培養 液から回収し、精製する。サブユニットを遊離の形で調製した場合には、これら を適切に処理して受容体の形に再度組み立てることができる。

ヒトトランスフエイリンに結合可能なサブユニット（低分子量サブユニット）は 、受容体を強力な変性剤、例えば８Ｍの尿素または６Ｍのグアニジン塩酸で処理 し、その後に分割されたサブユニットを通常のクロマトグラフィー法、例えばイ オン交換クロマトグラフィーやゲル濾過等によって分離することによって、精製 した状態（すなわち、高分子量サブユニットから分離・単離した状！！りで得る ことができる。特に、シュリベール達の方法に従って精製した受容体から得るこ とができる。別法として、このサブユニットを遺伝子工学的に製造することもで きる。この方法はサブユニット断片または類似体の製造に特に適している。

参考までに、例として、株２３９４および株２１６９のサブユニットＴｂｐｌお よび’ｒｂｐ２のアミノ酸配列を配列識別番号１〜４（ＳＥＱ　１０　Ｎｏ、　 １〜４　）に示す。

「ヒトトランスフェリンに結合可能なサブユニット断片」とはサブユニットのア ミノ酸配列に含まれるアミノ酸配列を有するペプチドを意味する。「ヒトトラン スフェリンに結合可能なサブユニットの類似体」とはサブユニットのアミノ酸配 列に対して少なくとも８０％、好ましくは９０％以上、最良の条件としては９５ ％以上の相同性を示すアミノ酸配列を有する蛋白質を意味する。本発明の目的の ためには、これらの断片または類似体はサブユニットの免疫原特性を保持してい なければならないということは理解できよう。

Ｎ、　ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ　２３４９株（Ｂ：２ａ＋Ｐ１．２：Ｌ２．３ ）と２１６９株（Ｂ：９＋Ｐ１、９：Ｌ３．７）は実験室で普通に使用されてい るもので、パスツール研究所（７５０１５バリ　リュ　デュ　ドクトウール　ロ ワ２５）から登録番号ＣＩＰ　７９０８およびＣＩＰ　７９１７で入手できる。

Ｎ、　ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ株を識別するのに必要な抗受容体免疫血清は下 記の要領で得ることができる： 先ず最初に、シュリベール達の方法に従って初期の株（２３９４および２１６９ ）から受容体を精製する。白子のニューシーラントラビットに、完全フロインド アジュバントに混合した１００μｇの受容体を皮下注射および筋肉注射で投与す る。最初の注射から２１日および４２日経過後に、ウサギに再度、１００μｇの 精製した受容体を投与する。この時はフロイントの不完全アジュバントに混合し て投与する。最後の注射から１５日後に、動物から血清を取り出し、デコンブリ メントして、孔隙率が０．４５μｍのメンブレンを用いて濾過する。その後、濾 液を、予め鉄を加えて培養しておいた（こうすることによってトランスフェリン 受容体の形成が抑えられる）初期の株と接触させて完全に吸収させる。接触方法 としては、１０ｄの濾液をＩＱ”ｃｆｕ　（コロニー形成単位、ｕｎｉｔｅｓ　 ｆｏｒｍａｎｔ　ｄｅｓ　ｃｏｌｏｎｉｅｓ）の初期株の培養液に添加し、攪拌 下に４℃で１夜吸収させ、次いで、遠心分離で細菌を除去し、上澄み液を回収し 、同じ要領でさらに２回続けて吸収操作を行う方法を採用する。

株の種類（トランスフェリン受容体の種類に関して）は、遊離の鉄が不足した培 養液から得られる膜抽出物から５ｐｓ＝ｐＡＧＥゲル電気泳動等の通常の方法で 分離し、次いで、前記のような免疫血清を用いたイムノブロッティングを行って 確認することができる。

ワクチン用組成物に含まれる第１の分子は（ｉ）　１００〜９０ｋＤ。

好ましくは約９３〜９５ｋＤの高分子量サブユニットと、　（ｉｉ）７５〜６０ ｋＤ、好ましくは７２〜６５ｋＤの低分子量サブユニットとで基本的に構成され るトランスフェリン受容体を有するＮ、　ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓの第１の株 に由来する。特に好ましいのは（夏）が約９３ｋＤで、（ｉｉ）が約６７〜７０ ｋＤの場合である。

ワクチン用組成物に含まれる第２の分子は（ｉ）１００〜９０ｋＤ、好ましくは １００〜９５ｋＤ、特に好ましくは約９８ｋＤの高分子量サブユニットと、　（ ｉｉ）９０〜８０ｋＤ、好ましくは７８〜８５ｋＤ。

特に好ましくは約８７ｋＤの低分子量サブユニットとで基本的に構成されるトラ ンスフェリン受容体を有するＮｌｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓの第２の株に由来す る。

上記分子量は精製した受容体を５ＤＳ−ＰＡＧＥゲル上での電気泳動でめた見掛 は分子量である。この電気泳動は下記要領でＬａｅ＋ｎｍ１ｉの方法で実施する ことができる：先ず、５％のプレゲルと７．５％の分離ゲルとを含むポリアクリ ルアミドゲル（１６ｃｍ　Ｘ　２０ｃｍ　ｘ厚さ１閤）を、電気泳動バッファー （トリス６／１、グリシン２８．８ｇ／ｉｌ、　０．１％５ＤＳ）中で調製する 。

一方、５０ｕｌの試料バッファ　（６２ｍＭのトリス塩酸ｐＨ６，８，２％ＳＤ Ｓ、５％β−メルカプトエタノール、１％グリセロール、０．００１％ブロモフ ェノールブルー）を精製した受容体溶液５０μＡ　（０，０５％のサルコシルを 含有するｐｕｇ、ｏの５０１１ＩＭＩＪン酸バッファーで０．６■／ｒｎＩ！の 濃度に調製したもの）に添加する。混合物を５分間沸騰湯浴中でインキュベート する。こうして調製された１７μｌの試料（蛋白５μｇに相当する量）を、ゲル のウェルに注入する。同様な方法で調製した分子量マーカを含む試料を並べて注 入する。電気泳動バッファー中で５０Ｖで１５時間泳動する。ゲルを固定し、コ ーマシープルー（Ｃｏｏｍａｓｓｉｅ　ｂｌｕｅ）で染色する。

一般に、本発明で利用可能な第１または第２の分子は任意の血清グループに属す るＮ、　ｍｅ旧ｎｇｉｔｉｄｉｓ株から得ることができるが、第１または第２分 子がＮ９ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ血清グループＢに属する株に由来するのが好 ましく、さらには、第１および第２の分子がＮ、　ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓの 血清グループＢの第１の株および第２の株にそれぞれ由来するのが好ましい。

本発明で特に好ましいものは、第１の分子が２３９４株に由来し、第２の分子が ２１６９株に由来するものである。

本発明の医薬組成物は高地の方法で製造することができる。

本発明の治療成分は薬理楽土許容される希釈剤またはビヒクルと組み合わせるこ とができる。本発明組成物はワクチン分野で使用される任意の方法で投与するこ とができ、例えば注射用懸濁液の形で皮下注射、筋肉注射または静脈注射で投与 することができる。投与は１回で行っても、ある一定の期間をおいて１回以上繰 り返して投与しても良い。適切な投与量は各種のパラメータ、例えば治療を受け る個人または投与方法等に依存する。

以下、実施例を挙げて本発明をさらに詳細に説明する。

図１は７．５％のポリアクリルアミドを含む５ＤＳ−ＰＡＧＥゲル上での電気泳 動の結果を示しており、カラムＡとＢはそれぞれ、Ｎ、　ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄ ｉｓ　２１６９株と２３９４株の受容体に相当する。

水平の矢印は見掛は分子量が公知である参照蛋白（９４ｋＤ、ホスホリラーゼＢ 、６７ｋＤ、アルブミン）の位置を示している。

実施例１ ２３９４株からのトランスフェリン受容体の精製ＩＡ、培養 Ｎ、　ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ　２３９４株の凍結乾燥体を約１献のミューラ ーヒントン（Ｍｕｅｌｌｅｒ−Ｈｉｎｔｏｎ）ブロス（ＢＭＨ，ディフコ（Ｄｉ ｒｃｏ）社製）に取る。細菌懸濁液を加熱した血液（５％）を含むミューラーヒ ントン固体培地に広げる。

１０％の二酸化炭素を含む雰囲気下、３７℃で２４時間培養後、増殖した細菌群 を集め、３個の２５０ｍ１エーレンマイヤーフラスコに分集したｐＨ７，２のＢ ＭＨ１５０−に接種する。３７℃で攪拌しながら３時間培養する。こうして作ら れた３つの培養液の各々を、遊離の鉄のキレート剤であるエチレンジアミンジ（ ０−ヒドロキシフェニル酢酸＞　（ＥＤＤＡ、シグマ社製）３０μＭを補充した ｐＨ７，２のＢＭＨ４００ｄへ植付けすることができる。

３７℃で攪拌しながら１６時間培養後、培養液の透明度をグラム染色後に顕微鏡 で観察してモニターする。懸濁液を遠心分離し、微生物を含むベレットの重量を 測定し、−２０℃で保存する。

ＩＢ、精製 精製はほぼシュリベール達によって報告された方法（上記）で行う。

ＩＡで得られた細菌ベレットを溶かし、ｐｌ（８，０の５０ｍＭＩＪスー塩酸バ ノーァー（バッファーＡ）２００−に再懸濁させる。懸濁液を４℃で２０分、１ ５．０ＯＯＸ　ｇで遠心分離する。ベレットを回収し、バッファーＡに再懸濁し 、最終濃度を１５０ｇ／ｌとする。

１５０　ｒｎｌの画分をとり、高圧で運転されている細胞溶解装置（ラニ（Ｒａ ｎｎｉｅ）社製、８．３０Ｈ型）に入れ、８００気圧で８分間処理する。得られ た細胞溶解物を４℃で１５分、１５．０００ｘ　ｇで遠心分離する。上澄みを回 収し、４℃で７５分間、２００．０００　Ｘ　ｇで遠心分離する。

上澄みを除去した後、ベレットをバッファーＡに懸濁し、口’）　（Ｌ　ｏ　ｗ 　ｒ　ｙ　）法で蛋白定遣した後に懸濁液の濃度を５■／ｍＡに調節する。

ンユリベール記載の方法に従い、ビオチン化（ｂｉｏｔｉｎｙｌａｔｅｄ）した ヒトトランスフェリン１．７５■を１．４ｄの膜懸濁液に添加する。膜成分の最 終濃度を４■／−とする。混合物を３７℃で１時間インキュベートし、次いで、 ４℃で７５分間、１００，０００　Ｘｇで遠心分離する。膜ベレットを０．１Ｍ の塩化す）　ＩＪウムを含むバッファ−Ａに懸濁し、室温で６０分インキュベー トする。

可溶化した後、一定量の３０％（ｗ／ｖ）サルコシル（Ｓａｒｋｏｓｙｌ）（Ｎ −ラウロイルサルコシン、シグマ社製）と、５００　ｍＭ　（７）ＥＤＴＡをこ の懸濁液に添加し、サルコシルおよびＥＤＴＡの最終濃度をそれぞれ０．５％お よび５ｍＭにする。３７℃で攪拌しながら１５分間インキュベーションした後、 予めバッファーＡ中で洗浄したストレプトアビジン−アガロース樹脂（ピアース （Ｐｉｅｒｃｅ）社製）１ｍｌを添加する。懸濁液を室温で１５分インキュベー トし、１．０ＯＯＸｇで１０分間遠心分離を行う。その後、樹脂をカラムに詰め 、直接流出した溶離液は廃棄する。

１Ｍの塩化ナトリウムと、１０ｍＭのＥＤＴＡと、０．５％のサルコシルとを含 ムｐｔｌ　８．０の５０ｍ−トリス−塩酸ノイ・ンファー（）（ッファーＢ）を 、カラム容積の３倍量用いて樹脂を洗浄した後、７５０　ｍＭのグアニジン塩酸 を含有するバッファーＢをカラム容積と等量用いて樹脂を洗浄する。続いて、Ｉ Ｍの塩化す）　ＩＪウムと、１０ｍＭのＥＤＴＡと、０．０５％のサルコシルと 、２Ｍのグアニジン塩酸とを含むｐｌ＋８．０の５０１ＴＩＭトリス塩酸バッフ ァーで、トランスフェリン受容体を溶出させる。溶出液を分画する。フラクショ ンの量はＩＭの塩化ナトリウムを含有するｐＨ８，０の５０ｍＭ）ＩＪスス−酸 バッファー１ボリュームを入れた試験管一本につき１ボリユームとする。カラム の出口でＵＶ検出器を用いて溶出液の光学濃度を２８０ｎｍで測定する。

溶出ピークに相当する両分を集め、０．０５％のサルコシルを含むｐＨ８，０の １０ｍＭ　！Ｊン酸バッファーで透析し、凍結乾燥させる。

凍結乾燥体をｌＯ倍濃度で水に懸濁する。０．０５％のサルコシルを含ｔｊ　ｐ Ｈ８，０の５０ｍＭ’Ｊン酸バッファー（バッファーＣ）中で第２回目の透析を 行い、次いで、この溶液を孔隙率が０．２２μｍのメンブレンで濾過する。

蛋白濃度を無菌条件下で測定し、バッファーＣを加えて、１■／−に調節する。

この調製液を一７０℃で保存する。

実施例２ ２１６９株からのトランスフェリン受容体の精製実施例１と同一条件で、２１６ ９株を培養し、トランスフ、　ＩＪン受容体を精製する。

実施例３ Ｎ、　ｍｅｎｉｎｇ＋ｔｉｄｉｓ感染症予防用ワクチンとしての医薬組成物 実施例１および２で得られた無菌溶液を溶解する。活性成分をそれぞれの１００ μｇｌｒｒｄｌずつ含有する１１のワクチンを調製するため、無菌条件下で、以 下の溶液を混合する：受容体２３９４のバッファーＣ溶液（濃度１■／−）　１ ００献受容体２１６９（７）ハフ　７７　Ｃ溶液（濃度１　ｍｇ／−）　１００ ｍ１緩衝化生理食塩水（ＰＢＳ）　ｐＨ６、ｏ　３００ｍｊ！Ａ１″１７を１０ ■／−の濃度で含有する水酸化アルミニウム　５０献 メルチオレートの１％（Ｗ／Ｖ）　Ｐ　Ｂ　Ｓ溶液　１０ｄＰ　Ｂ　Ｓ　ｑｓｐ 　１．０００ｍ１ 実施例４ ワクチン剤として低分子量サブユニットが重要であることの証明 白子のニューシーラントラビットに、フロイントの完全アジュバントに混合した １００μｇの受容体２３９４または２１６９　（実施例１または２で得られたも の）を皮下注射および筋肉注射で投与する。最初の注射から２１日および４２日 経過後に、ウサギに再度１００μｇの精製した受容体を、この場合はフロイント の不完全アジュバントと混合して与える。最後の注射から１５日経過後に動物か ら血清を取り出し、デコンブリメントして孔隙率が０．４５μｍのメンブレンで 濾過する。その後、濾液を、予め遊離の鉄を加えて培養しておいた（こうするこ とによってトランスフェリン受容体の形成が抑えられる）初期株と接触させて完 全に吸収させる。接触方法は以下の通り： １０ｍ１の濾液を、１０”ｃｆｕ（コｏ　＝−形成単位、ｕｎｉｔｅｓ　ｆｏｒ ｍａｎｔｄｅｓ　ｃｏｌｏｎｉｅｓ）の初期株の培養液に添加する。攪拌しなが ら、４℃で１夜吸収させた後、遠心分離で細菌を除去する。上澄み液を回収し、 上記要領でさらに２回続けて吸収操作を行う。

各々の免疫血清（抗受容体２３９４および抗受容体２１６９の免疫血清）の希釈 溶液をＭ１９９培地（ギブコ（Ｇｉｂｃｏ）社製）で調製する。各希釈液の２０ ０μｌを微量滴定プレート（８Ｘ１２インチ）のウェルに入れる。対照試験はＭ １９９培地２００μｌを用いて行う。各ウェルに（ｉ）　Ｎ、　ｍｅｎｉｎｇｉ ｔｉｄｉｓ株を３０μＭのＥＤＤＡを補充したミューラーヒントン培地で培養し た指数増殖期の培養液１００μｌと（ｉｉ）補体１００μｍ（幼ウサギの血清） とを添加する。

緩やかに拡販しながら３７℃で３０分インキュベートした後、各ウェルにスーパ ークール状態（液体を凝固させずに凝固点以下に冷却した状態）にあるノープル アガー１ｄを含む１献のミューラーヒントン培地を入れる。培地が凝固した後、 ３７℃で１８〜２４時間インキュベーションし、コロニー形成単位の数を測定す る。コントロールの５０％の溶解が観察された時の抗血清の最終希釈率の逆数が 殺菌力に対応する。

結果を下記表■に示す。

表■ 抗受容体２３９４免疫血清は本明細書で定義の第１のタイプの株（２３９４，２ ２２８，２１５４，２２３４および２４４８）に対してのみ殺菌活性を示し、一 方、抗受容体２１６９免疫血清は第２のタイプの株（２１６９および８７６）に 対してのみ殺菌活性を示す。このことは、中和抗体の製造は、抗原性にばらつき のある低分子量サブユニットによって本質的に誘導されることを示している。

↓没１Σ匣と」 Ｎ、ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ　２３９４のサブユニットＴｈｐ２のアミノ酸配 列Ｃｙｓ　Ｌ＠ｕ　にｌｙ　Ｃ１ｙ　にＬｙ　ＧＬｙ　Ｓ＠ｔ　Ｐｈ會　＾＠ｐ 　Ｌ＠ＩＪ　八ｓｐ　５＠ｒ　Ｖａｌ　Ｇｌｕ　Ｔｌ１ｒＰｒｏ　Ｌｙｓ　Ｔｙ ｒ　Ｌｙｅ　Ｃ１ｕ　Ｌｙｅ　）Ｉｔｓ　Ｌｙｅ　Ｐｒｏ　Ｌ＊ｕ　Ｇｌｙ　５ ＠ｒ　１４＠ヒ　八＊ｐ　ＴｒｐＬｙｅ　Ｌｙｓ　Ｌ＠ｕ　Ｇｉｎ＾ｔｑ　Ｃ１ ｙ　（：Ｌｕ　Ｐｒｏ　Ａｓｎ　Ｓｅｅ　Ｐｈ＠Ｓａｔ　Ｇｌｕ＾ｒｇ　Ａｓｐ ｇｏ　、　Ｉｔｓ　９０ ＣＬＬＩ　ＶＩＬ　＾−ｐ　Ｐｈ＠　Ｓａｙ：　Ａ＠ｐ　Ｌｙｓ　Ｔｈｒ　Ｉｆ ＠　Ｌｙｓ　Ｃ１ｙ　Ｔｈｒ　Ｉ、ｍｕ　Ｔｙｒ　＾ｃ９２コ０　２コ５　２４ ０ ＾−ｎ　Ａｓｎ　＾ｒｇ　ｒｌ＊　τｈＩ″　Ｇｉｎ　Ａｍｎ　Ａｍｎ　Ｓ＠ｒ 　ＧＬｕ　八−ｎ　ＬＹｌ　Ｇｉｎ　Ｈａ　ＬＹ曽τｈ【　Ｔｈｅ　Ａｒｇ　Ｔ ｙｒ　Ｔｈｒ　Ｉｌｅ　Ｃ１ｎ　＾１畠　τＩｌｒ　Ｌａｕ　Ｉｌｌ＠　Ｃ１ｙ 　＾−ｎ　Ａｒｇ　Ｐｈ＊２６０　２６５　スフ０ ＾ｓｎ　Ｓｉｒ　ＨＬｍ　丁Ｙ【　丁ｈｒ　Ｈｌｓ　ＩＩｓ　Ｃ１ｕ　Ａｌａ　 Ｔｈｒ：　ｖａＬ　Ｓｅｔ　ｃｒｙ　Ｇｌｙ　ｐｈ＊５３０　５３Ｓ　５４０ Ｔｙｒ　にＬｙ　Ｌｙｅ＾１ｎ＾ｌａ　ＩｌｅＧｌｕ　Ｓｅｔ　Ｃ１ｙ　Ｃ１ｙ 　Ｓｅｔ　Ｐｈ囃Ｓｅｔ　Ｐｈ＠Ｐｒ。

Ｃ１ｙ　Ａｓｎ　＾１ｍ　Ｐｒｏ　ＣＬｕ　Ｇｌｙ　Ｌｙｅ　ＣＬｒ＋　ＧＬｕ 　Ｌｙｅ　ＡＬａ　５ｓｒ　Ｖａｌ　ｖａＬ　Ｐｈ・ερ上ε式Ｌ」 ０１７　Ａｒｇ　Ｓｍｇ　Ｇｌｙ　ＯＬｙ　ＡＬａ　（ｆｌｕ　Ａｌａ　Ｌａｕ 　Ｌａｕ　１１＊　Ｔｙｃ　Ｔｈｅ　Ｌｙｓ　＾ｒ９１９０　１９５　２０Ｇ ＾ｒｇ　Ｇｌｙ　＾ｃｑ　Ｏｌｕ　Ｉｌｅ　Ｈｌｓ　Ａｌａ　ＨＬｓ　Ｌｙ＠　 ＾１ｐ　ＡＬａ　Ｃ１ｙ　Ｌｙｅ　ＣＬｙ　ＶａＬＧｉｎ　ｊ＠ｒ　Ｐｈ＠　＾ −０Ａｒｇ　Ｌａｕ　Ｖａｔ　Ｌａｕ　＾−ｐ　Ｃ１ｕ　Ａｓｐ　Ｌｙｓ　Ｌｙ ＠　ＧＬｕ　ＣＬｙ２２０　２２５　２コ０ Ｃ１ｙ　Ｓｅｒ　Ｇｉｎ　Ｔｙｃ　Ａｒｇ　Ｔｙｃ　ｔｈｅ　ＨＬｍ　ＶａＬ　 ＧＬｕ　Ｃ１ｕ　Ｃ１ｕ　Ｃｙｖ　ＨＬｍ　八−ｎ２コＳ　２４０　２４５ ０Ｌｙ　Ｔｙｔ　＾１＆　＾１ｍ　Ｃｙｓ　Ｌｙｅ　Ａｓｎ　Ｌｙｓ　Ｌａｕ　 Ｌｙｓ　Ｃ１ｕ　Ａｓｐ　八Ｌａ　Ｓｅｔ　Ｖａｔ２５０　’　２５５　２６０ Ｌｙ＠　＾−ｐ　Ｃ１ｕ　Ａｒｇ　［、ｙ−Ｔｈｅ　ＶａＩ　Ｓｅｒ　丁ｈｒ　 Ｇｉｎ　Ａｓｐ　丁ｙｒ　Ｔｈｒ　Ｃ１ｙ　５＠ｒ２６Ｓ２）０２７５ ＾ｒｇＶ龜１　５＠ｒ　Ｉｌｅ　にｌｙ　Ｌｙｓ　Ｔｈｒ　Ｔｈｒ　Ｖａｌ　八 ＠ｎ　Ｔｈｅ　５ｅｒ　ｐｒｏ　Ｉｌｅ　Ｃｙ＊＾ｒｇ　Ｐｈ＠　Ｃ１ｙ　Ａｓ ｎ　Ａｓｎ　Ｔｈｅ　Ｔｙｒ　Ｔｈｅ　八＊ｐ　Ｃｙｓ　丁ｈｒ　Ｐｒｏ　八【 ９　Ａｓｎ　Ｉｌ＊Ｓ＠ｒ　Ｔｈｒ　Ｈｌｓ　５＠ｒ　Ｇｌｕ　Ａｓｐ　［、ｙ ｓ　Ｓｅｔ　Ｖａｌ　Ｓｅｔ　丁ｈｒ　Ｃ１ｙ　Ｔｈｅ　８１−　＾ｒ９＾ｓｎ 　Ｌａｕ　５・【　丁ｒｐ　Ａｓｎ　八ｌａ　Ｃ１ｙ　Ｖａｌ　ＶａＬ　Ｌａｕ 　Ｌｙ＠　Ｐｒｏ　Ｐｈ＠　丁ｈｒ　Ｔｒｐ８−ヒ　Ａｓｐ　Ｌ＠１１　Ｔｈｒ 　Ｔｙｃ　八【９　八ｌａ　Ｓｅｔ　τｈ【　Ｇｌｙ　Ｐｈ＠　八ｒｑ　Ｌａｕ 　Ｐｒｏ　５１１（６１０ｇ１５　６２０ ＶａＬ　Ａｓｐ　ＧＬｕ　Ｌａｕ　Ｌａｕ　Ｇｌｙ　１ａｓｔ：　ｌＪｎ　Ａｌ ａ　Ｌａｕ　Ｌａｕ　Ａｓｎ　Ｇｌｙ　Ａｓｎ　ＡＬａ７９０　７９５　！１０ ０ ＾【９　ＡＬａ　ＣＬｙ　Ｖａｌ　Ｔｙｒ　Ａｗｎ　Ｌａｕ　Ｌ、＠ｕ　Ａｓｎ 　Ｔｙｒ　八ｒｇ　Ｔｙｒ　Ｖａｔ　Ｔｈｅ　ＴｒｐＧＬｕ　Ａｓｎ　Ｖａｌ　 ＾ｖ：ｑ　ＧＬｎ　Ｔｈｒ　八Ｌａ　Ｃ１ｙ　Ｇｌｙ　Ａｌａ　ＶａＬ　Ａｓｎ 　Ｇｉｎ　Ｈｌｓ　＋、ｙｓ８５０　ａｓｓ　１１６０ ＾−ｎ　ＶａＬ　にｌｙ　Ｖａｔ　Ｔｙｃ　Ａｓｎ　＾ｒ９　τｙ【　ＡＬａ　 Ａｌａ　Ｐｒｏ　にＩＹ　Ａｒｇ　＾−ｎ　Ｔｙｃ８６５８７０Ｂ〕５ 証追上四五と」 Ｎ、ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ　２１６９のサブユニットＴｈｐｌのアミノ酸鹸 列ＧＬｕ　Ａｓｎ　ＶａＬ　ＣＬｎ　ＡＬａ　ＧｌｙＣＬｎ　Ａｌａ　Ｃ１ｎ　 Ｃ１ｕ　ｆ、ｙｓ　Ｃ１ｎ　ｔ、＠ｕ　八−ｐ　Ｔｈ【　ＸＬａ　Ｃ１ｎ　Ｖａ ｎ　Ｌｙｅ　八Ｌａ　Ｌｙｅｌｏ　１５　２０ ＬＹ＠　Ｑｌｎ　Ｌｙｅ　Ｔｈ【　Ａｒｇ　Ａｒｇ　Ａｍｐ　ＡＬａ　Ｇｌｕ　 ＶａＬ　Ｔｈｅ　Ｃ１ｙ　Ｌｅｕ　ＣＬｙ　Ｌｙｅ２５−　コＯ３５ Ｌ＊ｕ　ＶａＬ　Ｌｙｓ　Ｔｈｒ　ＡＬａ　Ａｍｐ　Ｔｈｒ　ＬａＬＩ　Ｓｅｔ 　Ｌｙｓ　にＬｕ　ＧＬｎ　Ｖａｌ　Ｌｌｕ　＾窃ｐ４０、　４５　Ｓ。

ＩＬ・＾【９＾−ｐ　Ｌｅｕ　Ｔｈ【Ａｒｇ　Ｔｙｒ　Ａｓｐ　Ｐｒｏ　Ｇｌｙ 　ＩＬ＠＾Ｌａ　Ｖａｔ　ＶａＬ　ＧＬｕにｉｎ　ＧＬｙ　Ａｒｇ　Ｃ１ｙ　Ａ Ｌａ　Ｓｓｒ　Ｓａｔ　ＣＬｙ　Ｔｙｒ　Ｓ＠ｔ　ＩＬ＠　Ａｒｇ　ｃｒｙ　Ｍ ＠ｅ、＾―ρＬＹ＠　Ａ箇ｎ　Ａｒｇ　Ｖａｎ　Ｓｉｒ　Ｌｅｕ　Ｔｈｒ　Ｖａ ｌ＾−ｐ　ＧＬｙ　［、＠ｕ　Ａｌａ　Ｇｉｎ　Ｉｔｓ　ＧＬｎｓｉｒτｙ【Ｔ ｈ【＾１ｍ　Ｇｌｎ＾Ｌａ　Ａｌａ　Ｌｅｕ　ＧＬｙ　ＧＬｙ　Ｔｈｒ＾ｒｇ　 Ｔｈｅ　ＡＬａ　Ｃ１ｙＺｏｏ　１０５　１１０ Ｓａｔ　Ｓ＠ｔ　Ｇｌｙ　Ａｌａ　工１・　＾＠ｎ　Ｇｌｕ　Ｈｅ　ＣＬｕ　丁 ｙｒ　ＣＬｕ　Ａ＠ｎ　ＶａＬ　Ｌｙｅ　＾１ａＶａｌ　Ｃ１ｕ　工Ｌｅ　５Ｉ Ｉｒ　Ｔ、ｙｍ　Ｃ１ｙ　Ｓ＠ｔ　＾−ｎ　Ｓｉｒ　Ｖａｌ　ＣＬｕ　ＧＬｎ　 ＣＬｙ　Ｓａｔ：　ＧＬｙ１コ０　１３５　１４０ ＾１ａ　Ｔａ＠ｕ　ＡＬａ　Ｃ１ｙ　ｓａｔ　Ｖａｌ　ＡＬａ　Ｐｈ＠　ＧＬｎ 　丁ｙｒ　ＬｙＩＩ　Ｔｈｒ　ＡＬａ　八１ｐ　八１９Ｖａｌ　Ｘｉｓ　Ｇｌｙ 　ＧＬｕ　Ｇｌｙ　Ａｒｇ　ＧＬｎ　Ｔｒｐ　ＧＬｙ　Ｅｌｓ　Ｇｉｎ　５ｅｒ 　Ｌｙｓ　丁ｈｒ　＾１ａτｙｃ　Ｓ＠ｒ’ＧＬｙ　Ｌｙｓ　＾−ロ　Ａｒｇ　 Ｇｌｙ　Ｌｅｕ　Ｔｈｅ　ＧＬｎ　Ｓ＠ｙ：　Ｈ−ＡＬａ　Ｌｅｕ　入Ｌｍ１７ ５　１８０　１ｌ１５ Ｃ１ｙ　Ａｔｑ　Ｉｆ　Ｃ１ｙ　Ｇｌｙ　ＡＬａ　Ｃ１ｕ　ＡＬａ　ＬＩＩＬＩ 　Ｌｅｕ　Ｉｌｍ　１口１　丁ｈｒ　Ｃ１ｙ　ＡｒｇＡｒｇ　ＡＬａ　Ｇｌｙ　 （ｌｕ　Ｚｌ＠　＾ｒ９　ＡＬａ　）ｌＬｍ　Ｃ１ｕ　Ａｍｐ　Ａｌａ　ＧＬｙ 　Ａｔｑ　ＧＬｙ　Ｖａ１２０５　２１０　２１％ Ｇｌｎ　５ｅｒ　Ｐｈ−Ａｓｎ　Ａｒｇ　Ｌｅｕ　ＶａＬ　Ｐｒｏ　Ｖａｌ　Ｇ ｌｕ　Ａｓｐ　５ｅｒ　Ｓｅｔ：　ＧＬｕ　τｙＩ：２２０　２２５　２コ０ ＾１ａ　Ｔｙｒ　Ｐｈｓ　Ｉｌ＠　ＶａＬ　Ｇｌｕ　Ａｍｐ　ＣＬｕ　Ｃｙｍ　 Ｇｌｕ　Ｃ１ｙ　Ｌｙ−＾−０丁ｙｇ　ＣＬｕＴｈｒ　Ｃｙｍ　Ｌｙｓ　Ｓｕｒ 　Ｌｙｅ　Ｐｒｏ　ＬＹ＃　Ｌｙｅ　＾５ｐ　ＶａＬ　Ｖａｌ　Ｃ１ｙ　Ｌｙｓ 　ＡＳＰ　ＣＬｕ＾ｒｇ　Ｇｉｎ　丁ｈｒ　ＶａＬ　Ｓａｔ　Ｔｈｒ　ｈｔｑ　 Ａ１　丁ｙｃ　Ｔｈ【　Ｃ１ｙ　Ｐｒｏ　Ａｗｎ　八ｒｇ　Ｐｈ−２６５２７０ ２フ５ Ｐｒｏ　八ｌａ　Ｐｈｓ　ＬａＬＩ　Ｔｈｒ：　Ｌｙｓ　八Ｌａ　ＶａＬ　Ｐｈ ＠　八ｓｐ　＾１１１　八ｗｎ　Ｓ＠ＣＬｙｅ　Ｇ１ｎ３２ｓ　３コ０　〕３５ Ｌ＠ｕ　Ｐｒｏ　Ｓ＠ｔ　Ｐｈｓ　ＡＬａ　ＣＬｕ　Ｈｔａ七　丁ｙｔ　Ｃ１ｙ 　Ｔｒｐ　Ａｒｇ　Ｓ＠ｒ　Ｇｌｙ　ＶａＬ　Ｇ１ｎ６２５　６３０　６コ５ Ｎ、ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ　２１６９のサブユニットＴｈｐ２のアミノ酸配 列＾−１＾ａｎ　Ｔｈｒ　＾−ｎ　＾１ｎ　八―ｐ　Ｌｙｅ　ＨＬｓ　Ｔｈｒ　 Ｔｈｅ　（＋ｌｎ　丁ｙ【　丁ｙｒ　Ｓ＠ｒ　Ｌｅｕ２７０　２７％　２８０ ＬＹ＠　ｒｌｓ　Ｔｈｅ　Ｇｌｙ　ＬＹ＃　Ｌ＊ｕ　Ｔｈｅ　八ｌａ　Ｃ１ｕ　 ＾−ｎ　Ａｒｑ　Ｇｌｎ　八ｌａ　Ｇｉｎ　τｈ【国際調査報告

Claims (14)

【特許請求の範囲】
1. １．治療成分としてヒトのトランスフェリンに結合可能な少なくとも第１および 第２の分子を含み、第１の分子は少なくとも高分子量サブユニットと低分子量サ ブユニットとを含むヒトトランスフェリン受容体を有するＮ．ｍｅｎｉｎｇｉｔ ｉｄｉｓの第１の株に由来し、この低分子量サブユニットはＮ．ｍｅｎｉｎｇｉ ｔｉｄｉｓ２３９４株の受容体（受容体２３９４）に対する抗血清によって認識 されるが、Ｎ．ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ２１６９株の受容体（受容体２１６９ ）に対する抗血清では認識されず、第２の分子は少なくとも高分子量サブユニッ トと低分子量サブユニットとを含むヒトトランスフェリン受容体を有するＮ．ｍ ｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓの第２の株に由来し、この低分子量サブユニットは受容 体２１６９に対する抗血清によって認識されるが、受容体２３９４に対する抗血 清では認識されないことを特徴とするＮ．ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ感染症の予 防または治療用のワクチンとしての医薬組成物。
2. ２．治療成分としてヒトのトランスフェリンに結合可能な少なくとも第１および 第２の分子を含み、第１の分子は高分子量サブユニットと低分子量サブユニット が受容体２３９４に対する抗血清で認識されるようなヒトトランスフェリン受容 体を有するＮ．ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓの第１の株に由来し、第２の分子は高 分子量サブユニットと低分子量サブユニットとが受容体２１６９に対する抗血清 で認識されるようなヒトトランスフェリン受容体を有するＮ．ｍｅｎｉｎｇｉｔ ｉｄｉｓの第２の株に由来する請求項１に記載の組成物。
3. ３．治療成分としてヒトのトランスフェリンに結合可能な少なくとも第１および 第２の分子を含み、第１の分子が分子量が約１００ｋＤ〜９０ｋＤの高分子量サ ブユニツトと、分子量が７５ｋＤ〜６０ｋＤの低分子量サブユニットとで主とし て構成されるヒトトランスフェリン受容体を有するＮ．ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉ ｓの第１の株に由来し、第２の分子が分子量が約１００ｋＤ〜９０ｋＤの高分子 量サブユニットと、分子量が９０ｋＤ〜８０ｋＤの低分子量サブユニットとで主 として構成されるヒトトランスフェリン受容体を有するＮ．ｍｅｎｉｎｇｉｔｉ ｄｉｓの第２の株に由来する請求項１または２に記載の組成物。
4. ４．第１の分子が分子量が約９３〜９５ｋＤの高分子量サブユニットと、分子量 が７２ｋＤ〜６５ｋＤの低分子量サブユニットとで主として構成されるヒトトラ ンスフェリン受容体を有するＮ．ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓの第１の株に由来す る請求項３に記載の組成物。
5. ５．第１の分子が分子量が約９３ｋＤの高分子量サブユニットと、分子量が約６ ７ｋＤ〜７０ｋＤの低分子量サブユニットとで主として構成されるヒトトランス フェリン受容体を有するＮ．ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓの第１の株に由来する請 求項４に記載の組成物。
6. ６．第２の分子が、分子量が約１００ｋＤ〜９５ｋＤの高分子量サブユニットと 、分子量が８７〜８５ｋＤの低分子量サブユニットとで主として構成されるヒト トランスフェリン受容体を有するＮ．ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓの第２の株に由 来する請求項５に記載の組成物。
7. ７．第２の分子が、分子量が約９８ｋＤの高分子量サブユニットと、分子量が約 ８７ｋＤの低分子量サブユニットとで主として構成されるヒトトランスフェリン 受容体を有するＮ．ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓの第２の株に由来する請求項６に 記載の組成物。
8. ８．第１の株に由来するヒトトランスフェリンと結合可能な第１の分子が第１の 株のヒトトランスフェリン受容体である請求項１〜７のいずれか一項に記載の組 成物。
9. ９．第１の株に由来するヒトトランスフェリンと結合可能な第１の分子が、第１ の株のヒトトランスフェリン受容体の低分子量サブユニットか、この低分子量サ ブユニットの断片または類似体である請求項１〜７のいずれか一項に記載の組成 物。
10. １０．第１の株に由来するヒトトランスフエリンと結合可能な第１の分子が、第 １の株のヒトトランスフェリン受容体の低分子量サブユニットである請求項９に 記載の組成物。
11. １１．第２の株に由来するヒトトランスフェリンと結合可能な第２の分子が、第 ２の株のヒトトランスフェリン受容体である請求項１〜１０のいずれか一項に記 載の組成物。
12. １２．第２の株に由来するヒトトランスフェリンと結合可能な第２の分子が、第 ２の株のヒトトランスフェリン受容体の低分子量サブユニットか、この低分子量 サブユニットの断片または類似体である請求項１〜１０のいずれか一項に記載の 組成物。
13. １３．第２の株に由来するヒトトランスフェリンと結合可能な第２の分子が、第 ２の株のヒトトランスフェリン受容体の低分子量サブユニットである請求項１２ に記載の組成物。
14. １４．第１および第２の分子がそれぞれＮ．ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ血清グル ープＢの第１および第２の株に由来する請求項１〜１３に記載の組成物。