JPH0646942B2 - 新規なブルガリア乳酸桿菌 - Google Patents
新規なブルガリア乳酸桿菌Info
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- JPH0646942B2 JPH0646942B2 JP3083047A JP8304791A JPH0646942B2 JP H0646942 B2 JPH0646942 B2 JP H0646942B2 JP 3083047 A JP3083047 A JP 3083047A JP 8304791 A JP8304791 A JP 8304791A JP H0646942 B2 JPH0646942 B2 JP H0646942B2
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- JP
- Japan
- Prior art keywords
- lactic acid
- medium
- glucose
- hours
- lactobacillus
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- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/40—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a carboxyl group including Peroxycarboxylic acids
- C12P7/56—Lactic acid
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/225—Lactobacillus
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
- Y10S435/853—Lactobacillus
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- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Dairy Products (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Description
【０００１】本発明は、新規なブルガリア乳酸桿菌に関
する。
する。
【０００２】Ｄ−乳酸の発酵的製法は英国特許第１１５
７２１３号明細書の記載から知られている。この方法に
使用されたラクトバチルス・ライヒマニイ（Lactobacil
lusleichmanii）ＡＴＣＣ ４７９７は、他の慣用の添加
物質と並んでグルコースまたは甜菜糖糖蜜を含有する栄
養培地１ｌ当り１１３ｇのＤ−乳酸を６０時間以内で産
生しうる。
７２１３号明細書の記載から知られている。この方法に
使用されたラクトバチルス・ライヒマニイ（Lactobacil
lusleichmanii）ＡＴＣＣ ４７９７は、他の慣用の添加
物質と並んでグルコースまたは甜菜糖糖蜜を含有する栄
養培地１ｌ当り１１３ｇのＤ−乳酸を６０時間以内で産
生しうる。
【０００３】光学活性化合物を化学合成するための出発
物質としてのＤ−乳酸に対する需要が増大しているゆえ
に、これの能率のよい取得法を開発するのが本発明の目
的である。その場合特に発酵時間の短縮およびグルコー
スおよび甜菜糖糖蜜のみでなく、乳漿中で大量に入手し
うる乳糖を利用する微生物を見出すことが望ましい。こ
の目的がブルガリア乳酸桿菌（Lactobacillus bulgaric
us）によって達成された。
物質としてのＤ−乳酸に対する需要が増大しているゆえ
に、これの能率のよい取得法を開発するのが本発明の目
的である。その場合特に発酵時間の短縮およびグルコー
スおよび甜菜糖糖蜜のみでなく、乳漿中で大量に入手し
うる乳糖を利用する微生物を見出すことが望ましい。こ
の目的がブルガリア乳酸桿菌（Lactobacillus bulgaric
us）によって達成された。
【０００４】乳酸菌ブルガリア乳酸桿菌はその高い代謝
活性ゆえに特に速かに発酵しうることで知られる。それ
ゆえこれはヨーグルトの調製に使用されそして乳発酵を
４時間以内で終了させうる。しかしながら自然の乳およ
び発酵された乳中に存在するブルガリア乳酸桿菌菌株は
培地１ｌ当り２５〜３０ｇ以上の乳酸を産生できない。
存在する乳糖の半分以上が未発酵のまま残る。
活性ゆえに特に速かに発酵しうることで知られる。それ
ゆえこれはヨーグルトの調製に使用されそして乳発酵を
４時間以内で終了させうる。しかしながら自然の乳およ
び発酵された乳中に存在するブルガリア乳酸桿菌菌株は
培地１ｌ当り２５〜３０ｇ以上の乳酸を産生できない。
存在する乳糖の半分以上が未発酵のまま残る。
【０００５】今や驚くべきことに、酸性化した乳試料中
にその能率が計画的な選択により培地１ｌ当り１１５ｇ
までの乳酸を生成するまでに改良され得たブルガリア乳
酸桿菌の菌株が見出された。この菌株を正確に同定した
ところ、これはカタラーゼ陰性、運動なしそして微好気
性でありそして何ら胞子を有しない長いグラム陽性桿菌
からなることが示された。さらにこれは以下のデータを
特徴としている。
にその能率が計画的な選択により培地１ｌ当り１１５ｇ
までの乳酸を生成するまでに改良され得たブルガリア乳
酸桿菌の菌株が見出された。この菌株を正確に同定した
ところ、これはカタラーゼ陰性、運動なしそして微好気
性でありそして何ら胞子を有しない長いグラム陽性桿菌
からなることが示された。さらにこれは以下のデータを
特徴としている。
【０００６】
【０００７】この菌株はドイツ微生物寄託機関（Deutsc
he Sammelung fuer Mikroorganismen）にＤＳＭ ２１２
９として寄託された。
he Sammelung fuer Mikroorganismen）にＤＳＭ ２１２
９として寄託された。
【０００８】この新規なブルガリア乳酸桿菌菌株は４８
時間以内で培地１ｌ当り１１５ｇまでのＤ−乳酸を生成
しうる。さらにこれはグルコースの発酵に特定されず、
乳糖をグルコースとほとんど同様に速かに乳酸に発酵さ
せうる。従って乳業廃物として大量に入手しうる乳漿が
Ｄ−乳酸を製造するための原料物質源として使用でき
る。
時間以内で培地１ｌ当り１１５ｇまでのＤ−乳酸を生成
しうる。さらにこれはグルコースの発酵に特定されず、
乳糖をグルコースとほとんど同様に速かに乳酸に発酵さ
せうる。従って乳業廃物として大量に入手しうる乳漿が
Ｄ−乳酸を製造するための原料物質源として使用でき
る。
【０００９】それゆえ本発明はグルコースおよび／また
は乳糖および他の慣用の添加物質を含有する栄養培地の
発酵によりＤ−乳酸を調製するに当り、乳酸産生性微生
物としてブルガリア乳酸桿菌ＤＳＭ ２１２９を使用す
ることからなる方法にも関する。その場合乳糖は大抵新
鮮な乳漿または乳漿末の懸濁液（これは場合によりさら
にグルコースも添加されてもよい）の形態で使用され
る。
は乳糖および他の慣用の添加物質を含有する栄養培地の
発酵によりＤ−乳酸を調製するに当り、乳酸産生性微生
物としてブルガリア乳酸桿菌ＤＳＭ ２１２９を使用す
ることからなる方法にも関する。その場合乳糖は大抵新
鮮な乳漿または乳漿末の懸濁液（これは場合によりさら
にグルコースも添加されてもよい）の形態で使用され
る。
【００１０】Ｄ−乳酸の取得に使用される栄養培地はそ
れ自体既知の方法により構成される。これらはグルコー
スおよび／または乳糖と並んで、窒素源例えば肉抽出
物、コーンスティープまたは大豆粉をも当然含有してい
なければならない。その他に鉱物塩、ビタミンおよび界
面活性剤も添加される。界面活性剤としては特に商業上
の非イオン性界面活性剤なかんずく液体製品があげられ
る。これら界面活性剤は作用物質として一般にポリオキ
シアルキレート類例えばアルコールまたは酸とエチレン
オキサイドおよび／またはプロピレンオキサイドの反応
生成物を含有している。アルコールとしては脂肪族アル
コール、樹脂アルコール、グリセリン、エリスリトー
ル、ペンタエリスリトールまたは糖アルコール（例えば
ソルビトールおよびマンニトール）のような一価および
多価アルコールがあげられ、酸としては特に脂肪酸およ
び樹脂酸があげられる。かかる多価アルコールと前記酸
との部分エステル例えばアンヒドロソルビトールモノオ
レエートのオキシエチレートが好都合である。
れ自体既知の方法により構成される。これらはグルコー
スおよび／または乳糖と並んで、窒素源例えば肉抽出
物、コーンスティープまたは大豆粉をも当然含有してい
なければならない。その他に鉱物塩、ビタミンおよび界
面活性剤も添加される。界面活性剤としては特に商業上
の非イオン性界面活性剤なかんずく液体製品があげられ
る。これら界面活性剤は作用物質として一般にポリオキ
シアルキレート類例えばアルコールまたは酸とエチレン
オキサイドおよび／またはプロピレンオキサイドの反応
生成物を含有している。アルコールとしては脂肪族アル
コール、樹脂アルコール、グリセリン、エリスリトー
ル、ペンタエリスリトールまたは糖アルコール（例えば
ソルビトールおよびマンニトール）のような一価および
多価アルコールがあげられ、酸としては特に脂肪酸およ
び樹脂酸があげられる。かかる多価アルコールと前記酸
との部分エステル例えばアンヒドロソルビトールモノオ
レエートのオキシエチレートが好都合である。
【００１１】ブルガリア乳酸桿菌ＤＳＭ ２１２９は酸
感受性であるので、生成する乳酸はアルカリまたはアル
カリ土類の水酸化物または炭酸塩、特に炭酸カルシウム
と結合されねばならない。従ってpH値は４.５〜７好ま
しくは６.５〜６.８の範囲内に保持される。
感受性であるので、生成する乳酸はアルカリまたはアル
カリ土類の水酸化物または炭酸塩、特に炭酸カルシウム
と結合されねばならない。従ってpH値は４.５〜７好ま
しくは６.５〜６.８の範囲内に保持される。
【００１２】各栄養培地は、外部有機物による何らかの
汚染を除くためにブルガリア乳酸桿菌ＤＳＭ ２１２９
を接種する前に滅菌されるべきである。これには栄養培
地を１５分間１２１℃に加熱することで充分である。
汚染を除くためにブルガリア乳酸桿菌ＤＳＭ ２１２９
を接種する前に滅菌されるべきである。これには栄養培
地を１５分間１２１℃に加熱することで充分である。
【００１３】すべての乳酸発酵におけるように本発明方
法についても嫌気性条件が保持されるべきである。これ
には乳酸を炭酸カルシウムで中和することにより生成す
る二酸化炭素、または発酵培地上の窒素ブランケットで
充分である。
法についても嫌気性条件が保持されるべきである。これ
には乳酸を炭酸カルシウムで中和することにより生成す
る二酸化炭素、または発酵培地上の窒素ブランケットで
充分である。
【００１４】乳酸発酵は３０〜５０℃の温度範囲で実施
されうる。特に好都合な温度範囲は４０〜４５℃であ
る。
されうる。特に好都合な温度範囲は４０〜４５℃であ
る。
【００１５】本発明方法で得られるＤ−乳酸の塩からイ
オン交換によるかまたは乳酸カルシウムの場合には硫酸
で酸性化することにより遊離のＤ−乳酸が取得されう
る。
オン交換によるかまたは乳酸カルシウムの場合には硫酸
で酸性化することにより遊離のＤ−乳酸が取得されう
る。
【００１６】本発明を以下の例によりさらに詳細に説明
する。％は重量による。
する。％は重量による。
【００１７】例 １ ブルガリア乳酸桿菌ＤＳＭ ２１２９菌株の発育 発酵乳の試料中に見出されるブルガリア乳酸桿菌菌株を
単離しそして下記培地１上で培養した（数字はｇ／ｌで
ある）。
単離しそして下記培地１上で培養した（数字はｇ／ｌで
ある）。
【００１８】 カゼインペプトン（トリプシン消化） １０ 肉抽出物（メルク社製品） １０ 酵母抽出物 ５ グルコース ２０ Ｋ2ＨＰＯ4 ２ 酢酸ナトリウム ５ ＭｇＳＯ4・７Ｈ2Ｏ ０.２ ＭｎＳＯ4・Ｈ2Ｏ ０.０５ 非イオン性界面活性剤 １ml／ｌ
【００１９】次に菌株の試料を希釈し、そして１.８％
の寒天を添加した同じ培地から調製された寒天プレート
上に接種した。次に接種された寒天プレートを嫌気性条
件下に培養器中４５℃で１日保管した。
の寒天を添加した同じ培地から調製された寒天プレート
上に接種した。次に接種された寒天プレートを嫌気性条
件下に培養器中４５℃で１日保管した。
【００２０】次に合計で３０個の個々のコロニーをとり
出しそして下記培地４（数字はｇ／ｌである）を含有す
る培養バイアル中に加えた。
出しそして下記培地４（数字はｇ／ｌである）を含有す
る培養バイアル中に加えた。
【００２１】 グルコース ５０ ＣａＣＯ3 ７０ 酵母抽出物 ７ コーンスティープ（乾燥物） １５ 酢酸ナトリウム ５ 非イオン性界面活性剤 １ml／ｌ
【００２２】培養時間は４５℃において２４時間であっ
た。２４時間後、種々のよく発酵した培養物間のそれぞ
れに形成させたＤ−乳酸量の相異が明らかに識別され
た。Ｄ−乳酸含量が最高であるバイアルを寒天プレート
上の新しい塗抹（インキュベーション）に使用した。こ
の過程を８週間規則的に反復しそしてその際培地の糖含
量ははじめ８％でありそしてさらに５週間後で１０％に
上昇した。続いてこの菌株をそれが最終的に培地１ｌ当
り１００ｇのグルコースを２４時間で６５％まで代謝し
うるようになるまでさらに１２週間選択すると、１ｌ当
り５５ｇのＤ−乳酸が形成された。完全なグルコース分
解は３６〜４０時間後に完全であった。
た。２４時間後、種々のよく発酵した培養物間のそれぞ
れに形成させたＤ−乳酸量の相異が明らかに識別され
た。Ｄ−乳酸含量が最高であるバイアルを寒天プレート
上の新しい塗抹（インキュベーション）に使用した。こ
の過程を８週間規則的に反復しそしてその際培地の糖含
量ははじめ８％でありそしてさらに５週間後で１０％に
上昇した。続いてこの菌株をそれが最終的に培地１ｌ当
り１００ｇのグルコースを２４時間で６５％まで代謝し
うるようになるまでさらに１２週間選択すると、１ｌ当
り５５ｇのＤ−乳酸が形成された。完全なグルコース分
解は３６〜４０時間後に完全であった。
【００２３】例 ２ 例１により取得されたブルガリア乳酸桿菌菌株を、培地
１を１５mlずつ含有する培養バイアル中に接種した。バ
イアルを培養のために４５℃で少なくとも８時間そして
最高２０時間垂直に置きそして次に、それぞれ培地１を
２５０mlずつ含有するエレンマイヤーフラスコ中の培養
物への接種物として使用した。これらを同様に４５℃で
８〜２０時間保管した。
１を１５mlずつ含有する培養バイアル中に接種した。バ
イアルを培養のために４５℃で少なくとも８時間そして
最高２０時間垂直に置きそして次に、それぞれ培地１を
２５０mlずつ含有するエレンマイヤーフラスコ中の培養
物への接種物として使用した。これらを同様に４５℃で
８〜２０時間保管した。
【００２４】次に上記エレンマイヤーフラスコ６個の内
容物を予め以下の培地２（数字はｇ／ｌである）が加え
られた内容量３０ｌの発酵器の接種物として使用した。
容物を予め以下の培地２（数字はｇ／ｌである）が加え
られた内容量３０ｌの発酵器の接種物として使用した。
【００２５】 グルコース ３０ ＣａＣＯ3 １５ 酵母抽出物 ７ カゼインペプトン １０ コーンスティープ（乾燥物） ２０ 酢酸ナトリウム ５ 非イオン性界面活性剤 １ml／ｌ
【００２６】発酵器を毎分１００回転で撹拌しそして４
５℃で８〜１２時間後に例１記載の培地４または下記培
地３（数字はｇ／ｌである）を含有する内容量２７０ｌ
の発酵器中に加えた。
５℃で８〜１２時間後に例１記載の培地４または下記培
地３（数字はｇ／ｌである）を含有する内容量２７０ｌ
の発酵器中に加えた。
【００２７】 グルコース ３０ ＣａＣＯ3 ７０ 酵母抽出物 ７ 大豆粉 １５ 酢酸ナトリウム ５ 非イオン性界面活性剤 １ml／ｌ
【００２８】培養物の生育開始後、すなわち約６〜８時
間後、さらにグルコースを添加した。添加されるべきグ
ルコース量はグルコース消費および酸形成の如何によ
る。グルコース総量は４０〜５０時間内に添加され、こ
れは栄養培地の約１０重量％に相当した。グルコースか
ら培養基１ｌ当り１１０〜１１５ｇのＤ−乳酸（乳酸カ
ルシウム１５９〜１６６ｇに相当）が形成された。遊離
の乳酸の単離は既知方法すなわち硫酸を用いてカルシウ
ム沈殿、濾過、蒸発およびエチルエステルまたはメチル
エステルとして蒸留することによる精製により遂行され
る。
間後、さらにグルコースを添加した。添加されるべきグ
ルコース量はグルコース消費および酸形成の如何によ
る。グルコース総量は４０〜５０時間内に添加され、こ
れは栄養培地の約１０重量％に相当した。グルコースか
ら培養基１ｌ当り１１０〜１１５ｇのＤ−乳酸（乳酸カ
ルシウム１５９〜１６６ｇに相当）が形成された。遊離
の乳酸の単離は既知方法すなわち硫酸を用いてカルシウ
ム沈殿、濾過、蒸発およびエチルエステルまたはメチル
エステルとして蒸留することによる精製により遂行され
る。
【００２９】培地３の使用は最終生成物に何ら証明しう
る量のＬ−乳酸が含有されないという利点を有する。こ
れに対して培地４はそれが発酵後に培地３より明らかに
より良く濾過されうるという利点を有する。何故ならば
培地３中の大豆粉は部分的に分解されるのみだからであ
る。培地４を用いて調製された生成物は培地中のコーン
スティープに由来する１.５〜２％のＬ−乳酸を含有す
る。
る量のＬ−乳酸が含有されないという利点を有する。こ
れに対して培地４はそれが発酵後に培地３より明らかに
より良く濾過されうるという利点を有する。何故ならば
培地３中の大豆粉は部分的に分解されるのみだからであ
る。培地４を用いて調製された生成物は培地中のコーン
スティープに由来する１.５〜２％のＬ−乳酸を含有す
る。
【００３０】濾過後、濾液をＬ−乳酸を特異的に分解す
る酵素を含有する酵素反応器に通すことによりＬ−乳酸
部分を分解させることが可能である。Ｌ−ラクテートオ
キシダーゼ、Ｌ−ラクテートデヒドロゲナーゼまたはチ
トクロームｂ2を用いる系が適当である。Ｌ−ラクテー
トデヒドロゲナーゼは補因子としてＮＡＤを必要とし、
これは同様に担体に結合されることができそして次に再
生されそして再び使用される。チトクロームｂ2にはヘ
キサシアノ鉄酸塩が補因子として適当で、これは電流に
より貴金属電極で再酸化されうる。
る酵素を含有する酵素反応器に通すことによりＬ−乳酸
部分を分解させることが可能である。Ｌ−ラクテートオ
キシダーゼ、Ｌ−ラクテートデヒドロゲナーゼまたはチ
トクロームｂ2を用いる系が適当である。Ｌ−ラクテー
トデヒドロゲナーゼは補因子としてＮＡＤを必要とし、
これは同様に担体に結合されることができそして次に再
生されそして再び使用される。チトクロームｂ2にはヘ
キサシアノ鉄酸塩が補因子として適当で、これは電流に
より貴金属電極で再酸化されうる。
【００３１】例 ３ 例２に記載の操作法により菌株培養物および接種物を調
製するが、栄養培地としては発酵させるべき基質として
乳糖を含有する下記培地５（数字はｇ／ｌである）を使
用した。
製するが、栄養培地としては発酵させるべき基質として
乳糖を含有する下記培地５（数字はｇ／ｌである）を使
用した。
【００３２】乳漿末
６０ ＣａＣＯ3 ７０ 酵母抽出物 ３ 大豆粉 ５ 酢酸ナトリウム ５ 非イオン性界面活性剤 １ml／ｌ
６０ ＣａＣＯ3 ７０ 酵母抽出物 ３ 大豆粉 ５ 酢酸ナトリウム ５ 非イオン性界面活性剤 １ml／ｌ
【００３３】例２におけるようにして、培養物の生育開
始後糖基質を添加された乳糖合計量が培地１ｌ当り１３
０ｇとなるまで加えた。乳酸の生成は例２におけるより
幾分長く持続するが、４５〜５５時間後には終了した。
その他は例２におけると同様の方法で操作した。
始後糖基質を添加された乳糖合計量が培地１ｌ当り１３
０ｇとなるまで加えた。乳酸の生成は例２におけるより
幾分長く持続するが、４５〜５５時間後には終了した。
その他は例２におけると同様の方法で操作した。
【００３４】例 ４ 菌株培養物および接種物は例１におけると同様に窒素ブ
ランケット下に調製された。培地３、４または５が使用
されるが、これらははじめは何らＣａＣＯ3を含有しな
かった。これは乾燥形態でかまたは２０％懸濁液として
後から添加され、従ってpH値は決して５.５以下に低下
しない。４８時間後に栄養溶液の添加が開始された。希
釈速度ははじめ栄養溶液１ｌ当り毎時０.０１ｌであ
り、その際同量の液体が発酵器から継続的に取り出され
た。希釈速度は栄養溶液１ｌ当り毎時０.０３〜０.０４
ｌの値となるまで徐々に上昇され、その際発酵器からの
流出物はＤ−乳酸含量５〜７％を示した。細胞塊を流出
物から連続的分離器を用いて分離しそしてその９０％が
発酵器に戻された。上澄み液を水酸化カルシウムを用い
てpH６.５に調整しそしてそのもとの容量の約1／10まで
蒸発させた。冷却トラップ中で濃縮物を４℃に冷却する
と乳酸カルシウムが晶出した。濃縮された溶液は連続的
に冷却トラップに流れ込み、一方沈殿した乳酸カルシウ
ムは規則的な間隔ですべり弁により外に出された。母液
は発酵器に再循環された。取得された乳酸カルシウムか
らの乳酸の遊離は硫酸および引続いての濾過により遂行
された。
ランケット下に調製された。培地３、４または５が使用
されるが、これらははじめは何らＣａＣＯ3を含有しな
かった。これは乾燥形態でかまたは２０％懸濁液として
後から添加され、従ってpH値は決して５.５以下に低下
しない。４８時間後に栄養溶液の添加が開始された。希
釈速度ははじめ栄養溶液１ｌ当り毎時０.０１ｌであ
り、その際同量の液体が発酵器から継続的に取り出され
た。希釈速度は栄養溶液１ｌ当り毎時０.０３〜０.０４
ｌの値となるまで徐々に上昇され、その際発酵器からの
流出物はＤ−乳酸含量５〜７％を示した。細胞塊を流出
物から連続的分離器を用いて分離しそしてその９０％が
発酵器に戻された。上澄み液を水酸化カルシウムを用い
てpH６.５に調整しそしてそのもとの容量の約1／10まで
蒸発させた。冷却トラップ中で濃縮物を４℃に冷却する
と乳酸カルシウムが晶出した。濃縮された溶液は連続的
に冷却トラップに流れ込み、一方沈殿した乳酸カルシウ
ムは規則的な間隔ですべり弁により外に出された。母液
は発酵器に再循環された。取得された乳酸カルシウムか
らの乳酸の遊離は硫酸および引続いての濾過により遂行
された。
【００３５】例 ５ pH調整にＣａＣＯ3でなく水酸化ナトリウムが使用され
る以外は例４による連続的な乳酸調製が反復された。こ
の方法の利点はpHを６.５〜６.８に保持することが可能
で、それによりブルガリア乳酸桿菌ＤＳＭ ２１２９の
発酵速度が高められることにある。生じた乳酸ナトリウ
ムの溶液を乳酸を吸着するイオン交換体カラムに加え
る。カラムに乳酸が負荷されるや否やこれを塩酸で溶離
する。カラムき希苛性ソーダを用いて再生後新たに乳酸
吸着に使用されうる。
る以外は例４による連続的な乳酸調製が反復された。こ
の方法の利点はpHを６.５〜６.８に保持することが可能
で、それによりブルガリア乳酸桿菌ＤＳＭ ２１２９の
発酵速度が高められることにある。生じた乳酸ナトリウ
ムの溶液を乳酸を吸着するイオン交換体カラムに加え
る。カラムに乳酸が負荷されるや否やこれを塩酸で溶離
する。カラムき希苛性ソーダを用いて再生後新たに乳酸
吸着に使用されうる。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.5 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ１２Ｒ 1:225）
Claims (1)
- 【請求項１】 Ｄ−乳酸生産能を有するラクトバチルス
・ブルガリクスＤＳＭ−２１２９。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE19813131717 DE3131717A1 (de) | 1981-08-11 | 1981-08-11 | Lactobacillus bulgaricus dsm 2129 und seine verwendung zur herstellung von d-milchsaeure |
| DE3131717.0 | 1981-08-11 |
Related Parent Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
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