JPH0646798A - アミガサタケ子実体からの抗血小板凝集活性体の 抽出法並びにその抽出物及びアミガサタケ子実体 を有効成分とする生理機能活性食品 - Google Patents
アミガサタケ子実体からの抗血小板凝集活性体の 抽出法並びにその抽出物及びアミガサタケ子実体 を有効成分とする生理機能活性食品Info
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- JPH0646798A JPH0646798A JP4243978A JP24397892A JPH0646798A JP H0646798 A JPH0646798 A JP H0646798A JP 4243978 A JP4243978 A JP 4243978A JP 24397892 A JP24397892 A JP 24397892A JP H0646798 A JPH0646798 A JP H0646798A
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Abstract
(57)【要約】 （修正有）
【目的】アミガサタケ（Ｍｏｒｃｈｅｌｌａ ｅｓｃｕ
ｌｅｎｔａ）子実体並びにアミガサタケ子実体を有機溶
媒にて抽出して得られるアミガサタケ子実体抽出物、及
びそれを有効成分とする生理機能活性食品を提供するこ
とを目的とする。 【構成】アミガサタケ子実体の有機溶媒による抽出物及
び子実元体の加工物（生理機能活性食品）は、すぐれた
血小板凝集抑制効果をもち、経口投与に適した有機また
は無機の固体（例えば、澱粉、乳糖、ブドウ糖等）及び
液体（食用アルコール等）など、食品衛生上許容される
担体と混合して機能性を有する生理機能活性食品の形態
にすることができ錠状、顆粒状、カプセル状、エキス状
の固体、及び溶液状の液体性食品が含まれる。
ｌｅｎｔａ）子実体並びにアミガサタケ子実体を有機溶
媒にて抽出して得られるアミガサタケ子実体抽出物、及
びそれを有効成分とする生理機能活性食品を提供するこ
とを目的とする。 【構成】アミガサタケ子実体の有機溶媒による抽出物及
び子実元体の加工物（生理機能活性食品）は、すぐれた
血小板凝集抑制効果をもち、経口投与に適した有機また
は無機の固体（例えば、澱粉、乳糖、ブドウ糖等）及び
液体（食用アルコール等）など、食品衛生上許容される
担体と混合して機能性を有する生理機能活性食品の形態
にすることができ錠状、顆粒状、カプセル状、エキス状
の固体、及び溶液状の液体性食品が含まれる。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、アミガサタケ（Ｍｏｒ
ｃｈｅｌｌａ ｅｓｃｕｌｅｎｔａ）子実体並びにアミ
ガサタケ子実体を有機溶媒にて抽出して得られるアミガ
サタケ子実体抽出物、及びそれを有効成分とする生理機
能活性食品からなる。
ｃｈｅｌｌａ ｅｓｃｕｌｅｎｔａ）子実体並びにアミ
ガサタケ子実体を有機溶媒にて抽出して得られるアミガ
サタケ子実体抽出物、及びそれを有効成分とする生理機
能活性食品からなる。
【０００２】
【従来の技術】今までにアミガサタケ科由来のキノコ
は、子実体を加熱調理して食用に供されている。特にそ
の特殊な風味については、それに含まれる豊富なアミノ
酸が関連していることは周知である。しかしながらアミ
ガサタケ子実体に血小板凝集抑制作用があることはこれ
まで知られていない。
は、子実体を加熱調理して食用に供されている。特にそ
の特殊な風味については、それに含まれる豊富なアミノ
酸が関連していることは周知である。しかしながらアミ
ガサタケ子実体に血小板凝集抑制作用があることはこれ
まで知られていない。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】本発明者及び出願者
は、山野に自生するアミガサタケ科に属するキノコの抽
出物について種々検討した結果、それらの子実体を有機
溶媒を用いて抽出・分画して得られるものに、抗血小板
凝集活性を見いだし、本発明を完成した。本発明は、ア
ミガサタケ子実体からの有機溶媒による抗血小板凝集活
性体の抽出法及びその抽出成分、並びにアミガサタケ子
実体を有効成分とする生理機能活性食品を提供すること
を目的とする。
は、山野に自生するアミガサタケ科に属するキノコの抽
出物について種々検討した結果、それらの子実体を有機
溶媒を用いて抽出・分画して得られるものに、抗血小板
凝集活性を見いだし、本発明を完成した。本発明は、ア
ミガサタケ子実体からの有機溶媒による抗血小板凝集活
性体の抽出法及びその抽出成分、並びにアミガサタケ子
実体を有効成分とする生理機能活性食品を提供すること
を目的とする。
【０００４】
【課題を解決するための手段】本発明の抽出物は、山野
に自生するアミガサタケ科に属するキノコ（Ｍｏｒｃｈ
ｅｌｌａ ｅｓｃｕｌｅｎｔａ・Ｍｏｒｃｈｅｌｌａ
ｓｅｍｉｌｉｂｅｒａｃｒａｓｓｉｐｅｓ・Ｍｏｒｃｈ
ｅｌｌａ ｅｌａｔａ・Ｍｏｒｃｈｅｌｌａｃｏｎｉｃ
ａ・Ｍｏｒｃｈｅｌｌａ ｖｕｌｇａｒｉｓ 等）の子
実体を有機溶媒で抽出することによって得られる。アミ
ガサタケは、晩春から初夏にかけて自生する食用キノコ
である。本発明においてはアミガサタケ子実体の乾燥し
たものを原料として使用した。
に自生するアミガサタケ科に属するキノコ（Ｍｏｒｃｈ
ｅｌｌａ ｅｓｃｕｌｅｎｔａ・Ｍｏｒｃｈｅｌｌａ
ｓｅｍｉｌｉｂｅｒａｃｒａｓｓｉｐｅｓ・Ｍｏｒｃｈ
ｅｌｌａ ｅｌａｔａ・Ｍｏｒｃｈｅｌｌａｃｏｎｉｃ
ａ・Ｍｏｒｃｈｅｌｌａ ｖｕｌｇａｒｉｓ 等）の子
実体を有機溶媒で抽出することによって得られる。アミ
ガサタケは、晩春から初夏にかけて自生する食用キノコ
である。本発明においてはアミガサタケ子実体の乾燥し
たものを原料として使用した。
【０００５】
【実施例１】 １．アミガサタケの溶媒による抽出と分画 乾燥アミガサタケ（１Ｋｇ）を８０％エタノールにより
４℃（１ｌ）で７日間抽出し抽出液を濾過後、減圧濃縮
した（粗抽出物）。０．１Ｎ−塩酸でｐＨを約３にし、
酢酸エチルを加え酢酸エチル層と水層に分離した。さら
に水層に０．１Ｎ−水酸化ナトリウムを加え、ｐＨを約
７にした後、ｎ−ブタノールを加えｎ−ブタノール層と
水層とに分けた。この２層をそれぞれ減圧濃縮、乾燥
し、酢酸エチル抽出物、ｎ−ブタノール抽出物とした。 ２．生物活性検定用サンプルの調製 ａ．粗抽出物と水層・・・・懸濁用緩衝液（０．１４Ｍ
ＮａＣｌ，５ｍＭｇｌｕｃｏｓｅ，１５ｍＭ Ｔｒｉ
ｓ−ＨＣｌ ｐＨ７．４）で適当に希釈して用いた。 ｂ．酢酸エチル抽出物とｎ−ブタノール抽出物・・・・
８０％エタノールで溶解した後、上記懸濁用緩衝液で適
当に希釈して用いた。 ３．洗浄血小板の調製 血液はウサギ耳静脈より、抗凝固剤としてＡＣＤ（８５
ｍＭ ｔｒｉｓｏｄｉｕｍ ｃｉｔｒａｔｅ，６５ｍＭ
ｃｉｔｒｉｃ ａｃｉｄ，２％ ｄｅｘｔｒｏｓｅ）
１容に対し、血液６容の割合でプラスチック試験管に採
血 した。これを２５０ｘｇ，１５分室温で遠心した。
上清を分取し、１００ｘ ｇ，７分室温で遠心し混在す
る赤血球、白血球を除去し、多血小板血漿（ＰＲＰ）を
得た。ＰＲＰを１５００ｘｇ，１０分１４℃で遠心し、
得られた血小板ペレットを洗浄用緩衝液（１１３ｍＭ
ＮａＣｌ，４．３ｍＭ Ｋ２ＨＰＯ４，４．３ｍＭ Ｎ
ａ２ＨＰＯ４，２４．４ｍＭ ＮａＨ２ＰＯ４，５．５
ｍＭ ｄｅｘｔｒｏｓｅ，１ｍＭ ＥＤＴＡ・２Ｎａ
ｐＨ６．５）に懸濁し、さらに１５００ｘｇ，８分４℃
で遠心した。上清を除き、血小板ペレットを懸濁用緩衝
液に懸濁した。懸濁液の一部を取り１０倍希釈し、６０
０ｎｍの吸光度を測定し、次式より血小板数を算出し、
４ｘ１０８ｃｅｌｌｓ／ｍｌになる様に希釈し洗浄血小
板を調製した。 （ＯＤ−０．１１９）／０．８４５ （ｘ１０９ｃｅｌ
ｌｓ／ｍｌ） ４．凝集反応の測定と凝集抑制率の算出 洗浄血小板懸濁液１５０μｌに、ＣａＣｌ２ １０μｌ
（最終濃度１．５ｍＭ）、懸濁用緩衝液または試料２０
μｌを加え３７℃で２分間インキュベート後、ｔｈｒｏ
ｍｂｉｎ（０．１３Ｕ／ｍｌ）２０μｌを加え血小板凝
集能をＡＧＧＲＥＴＥＣ ＴＥ−５００（ＥＲＭＡ）を
用い測定した。懸濁用緩衝液添加時の最大凝集率（８
０．６％）に対する試料添加時の最大凝集率から試料の
凝集抑制率（阻害率 ％）を求めた。 ５．抗血小板凝集活性の測定結果 酢酸エチル抽出物において２００μｇ／ｍｌでは血小板
凝集抑制作用を示さなかったが、５００μｇ／ｍｌでは
約４０％、１０００μｇ／ｍｌでは約８４％の血小板凝
集抑制作用を示した。その作用はＩＣ５０で比較した場
合、アスピリンの約１／４であった。またｎ−ブタノー
ル抽出物においては１００μｇ／ｍｌでは約２４％、５
００μｇ／ｍｌでは５０％、１０００μｇ／ｍｌでは７
３％の血小板凝集抑制作用を示した。ＩＣ５０は約５０
０μｇ／ｍｌで、酢酸エチル抽出物のそれとほぼ同程度
であった。粗抽出物と水層においては１０００μｇ／ｍ
ｌにおいても血小板凝集抑制作用を示さなかった。（表
１−１，図１−１参照）
４℃（１ｌ）で７日間抽出し抽出液を濾過後、減圧濃縮
した（粗抽出物）。０．１Ｎ−塩酸でｐＨを約３にし、
酢酸エチルを加え酢酸エチル層と水層に分離した。さら
に水層に０．１Ｎ−水酸化ナトリウムを加え、ｐＨを約
７にした後、ｎ−ブタノールを加えｎ−ブタノール層と
水層とに分けた。この２層をそれぞれ減圧濃縮、乾燥
し、酢酸エチル抽出物、ｎ−ブタノール抽出物とした。 ２．生物活性検定用サンプルの調製 ａ．粗抽出物と水層・・・・懸濁用緩衝液（０．１４Ｍ
ＮａＣｌ，５ｍＭｇｌｕｃｏｓｅ，１５ｍＭ Ｔｒｉ
ｓ−ＨＣｌ ｐＨ７．４）で適当に希釈して用いた。 ｂ．酢酸エチル抽出物とｎ−ブタノール抽出物・・・・
８０％エタノールで溶解した後、上記懸濁用緩衝液で適
当に希釈して用いた。 ３．洗浄血小板の調製 血液はウサギ耳静脈より、抗凝固剤としてＡＣＤ（８５
ｍＭ ｔｒｉｓｏｄｉｕｍ ｃｉｔｒａｔｅ，６５ｍＭ
ｃｉｔｒｉｃ ａｃｉｄ，２％ ｄｅｘｔｒｏｓｅ）
１容に対し、血液６容の割合でプラスチック試験管に採
血 した。これを２５０ｘｇ，１５分室温で遠心した。
上清を分取し、１００ｘ ｇ，７分室温で遠心し混在す
る赤血球、白血球を除去し、多血小板血漿（ＰＲＰ）を
得た。ＰＲＰを１５００ｘｇ，１０分１４℃で遠心し、
得られた血小板ペレットを洗浄用緩衝液（１１３ｍＭ
ＮａＣｌ，４．３ｍＭ Ｋ２ＨＰＯ４，４．３ｍＭ Ｎ
ａ２ＨＰＯ４，２４．４ｍＭ ＮａＨ２ＰＯ４，５．５
ｍＭ ｄｅｘｔｒｏｓｅ，１ｍＭ ＥＤＴＡ・２Ｎａ
ｐＨ６．５）に懸濁し、さらに１５００ｘｇ，８分４℃
で遠心した。上清を除き、血小板ペレットを懸濁用緩衝
液に懸濁した。懸濁液の一部を取り１０倍希釈し、６０
０ｎｍの吸光度を測定し、次式より血小板数を算出し、
４ｘ１０８ｃｅｌｌｓ／ｍｌになる様に希釈し洗浄血小
板を調製した。 （ＯＤ−０．１１９）／０．８４５ （ｘ１０９ｃｅｌ
ｌｓ／ｍｌ） ４．凝集反応の測定と凝集抑制率の算出 洗浄血小板懸濁液１５０μｌに、ＣａＣｌ２ １０μｌ
（最終濃度１．５ｍＭ）、懸濁用緩衝液または試料２０
μｌを加え３７℃で２分間インキュベート後、ｔｈｒｏ
ｍｂｉｎ（０．１３Ｕ／ｍｌ）２０μｌを加え血小板凝
集能をＡＧＧＲＥＴＥＣ ＴＥ−５００（ＥＲＭＡ）を
用い測定した。懸濁用緩衝液添加時の最大凝集率（８
０．６％）に対する試料添加時の最大凝集率から試料の
凝集抑制率（阻害率 ％）を求めた。 ５．抗血小板凝集活性の測定結果 酢酸エチル抽出物において２００μｇ／ｍｌでは血小板
凝集抑制作用を示さなかったが、５００μｇ／ｍｌでは
約４０％、１０００μｇ／ｍｌでは約８４％の血小板凝
集抑制作用を示した。その作用はＩＣ５０で比較した場
合、アスピリンの約１／４であった。またｎ−ブタノー
ル抽出物においては１００μｇ／ｍｌでは約２４％、５
００μｇ／ｍｌでは５０％、１０００μｇ／ｍｌでは７
３％の血小板凝集抑制作用を示した。ＩＣ５０は約５０
０μｇ／ｍｌで、酢酸エチル抽出物のそれとほぼ同程度
であった。粗抽出物と水層においては１０００μｇ／ｍ
ｌにおいても血小板凝集抑制作用を示さなかった。（表
１−１，図１−１参照）
【０００６】
【実施例２】 １．アミガサタケの溶媒による抽出と分画 実施例１によるアミガサタケ（ＡＦ）の８０％エタノー
ル抽出物（粗抽出物）とその各種溶媒による分画物につ
いて活性を検討したところ、粗抽出物と水層には活性が
殆ど認められず、酢酸エチル抽出物とｎ−ブタノール抽
出物に活性が認められたので、今回、最初に８５％エタ
ノールで抽出し、その粗抽出物を酢酸エチルで抽出し
て、ＥｔＯＡｃ ｅｘｔｒａｃｔを調製し、これをＷＡ
ＫＯＧＥＬＣ−２００カラムにかけ、クロロホルム、ク
ロロホルム：アセトン（９５：５）、クロロホルム：ア
セトン（８：２）及びメタノールで順次溶出し、１１画
分に分けた。これらをそれぞれＡＦ−１〜ＡＦ−１１と
し（図２−１参照）、その抗血小板凝集活性について検
討した。またアミガサタケの小形のもの（ＡＦＳ）につ
いても同様に操作し、ＥｔＯＡｃ ｅｘｔｒａｃｔと水
溶性画分とし（図２−２参照）、それらの活性について
検討した。 ２．生物活性検定用サンプルの調製 実施例１に準じて行なった。 ３．洗浄血小板の調製 実施例１に準じて行なった。 ４．凝集反応の測定と凝集抑制率の算出 実施例１に準じて行なった。 ５．抗血小板凝集活性の測定結果 酢酸エチル抽出物（ＥｔＯＡｃ ｅｘｔｒａｃｔ）から
得られた画分ＡＦ−１〜ＡＦ−１１の活性検定結果を図
２−３〜図２−１３に示す。また水溶性画分（Ａｑｕｅ
ｏｕｓ ｅｘｔｒａｃｔ，ＡＦ−Ａｑ）の活性検定結果
を図２−１４に示す。これらの検定結果をＩＣ５０（μ
ｇ／ｍｌ）で表し、アスピリンのＩＣ５０と比較すると
表２−１３に示すごとくとなり、ＡＦ−１１の画分に強
い活性が認められた。またＡＦＳについては図２−１
５、図２−１６に示すとおりで、ＡＦの場合と同様に、
酢酸エチル抽出物（ＥｔＯＡｃ ｅｘｔｒａｃｔ）にや
や強い活性が認められ、水溶性画分（ＡＦＳ−Ａｑ）に
は活性が認められなかった（表２−１３参照）。以上の
ことからアミガサタケの抗血小板凝集効果を示す成分
は、酢酸エチルに可溶性で、水に難溶性の成分と思われ
る。
ル抽出物（粗抽出物）とその各種溶媒による分画物につ
いて活性を検討したところ、粗抽出物と水層には活性が
殆ど認められず、酢酸エチル抽出物とｎ−ブタノール抽
出物に活性が認められたので、今回、最初に８５％エタ
ノールで抽出し、その粗抽出物を酢酸エチルで抽出し
て、ＥｔＯＡｃ ｅｘｔｒａｃｔを調製し、これをＷＡ
ＫＯＧＥＬＣ−２００カラムにかけ、クロロホルム、ク
ロロホルム：アセトン（９５：５）、クロロホルム：ア
セトン（８：２）及びメタノールで順次溶出し、１１画
分に分けた。これらをそれぞれＡＦ−１〜ＡＦ−１１と
し（図２−１参照）、その抗血小板凝集活性について検
討した。またアミガサタケの小形のもの（ＡＦＳ）につ
いても同様に操作し、ＥｔＯＡｃ ｅｘｔｒａｃｔと水
溶性画分とし（図２−２参照）、それらの活性について
検討した。 ２．生物活性検定用サンプルの調製 実施例１に準じて行なった。 ３．洗浄血小板の調製 実施例１に準じて行なった。 ４．凝集反応の測定と凝集抑制率の算出 実施例１に準じて行なった。 ５．抗血小板凝集活性の測定結果 酢酸エチル抽出物（ＥｔＯＡｃ ｅｘｔｒａｃｔ）から
得られた画分ＡＦ−１〜ＡＦ−１１の活性検定結果を図
２−３〜図２−１３に示す。また水溶性画分（Ａｑｕｅ
ｏｕｓ ｅｘｔｒａｃｔ，ＡＦ−Ａｑ）の活性検定結果
を図２−１４に示す。これらの検定結果をＩＣ５０（μ
ｇ／ｍｌ）で表し、アスピリンのＩＣ５０と比較すると
表２−１３に示すごとくとなり、ＡＦ−１１の画分に強
い活性が認められた。またＡＦＳについては図２−１
５、図２−１６に示すとおりで、ＡＦの場合と同様に、
酢酸エチル抽出物（ＥｔＯＡｃ ｅｘｔｒａｃｔ）にや
や強い活性が認められ、水溶性画分（ＡＦＳ−Ａｑ）に
は活性が認められなかった（表２−１３参照）。以上の
ことからアミガサタケの抗血小板凝集効果を示す成分
は、酢酸エチルに可溶性で、水に難溶性の成分と思われ
る。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.5 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ０７Ｋ 15/10 8619−4Ｈ
Claims (3)
- 【請求項１】 アミガサタケ子実体からの有機溶媒に
よる抗血小板凝集活性体の抽出方法。 - 【請求項２】 アミガサタケ子実体を有機溶媒で抽出
して得られるアミガサタケ子実体の有機溶媒抽出物。 - 【請求項３】 前記請求項１に記載のアミガサタケ子
実体の有機溶媒抽出物並びにアミガサタケ子実体を有効
成分とする生理機能活性食品。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4243978A JPH0646798A (ja) | 1992-07-29 | 1992-07-29 | アミガサタケ子実体からの抗血小板凝集活性体の 抽出法並びにその抽出物及びアミガサタケ子実体 を有効成分とする生理機能活性食品 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4243978A JPH0646798A (ja) | 1992-07-29 | 1992-07-29 | アミガサタケ子実体からの抗血小板凝集活性体の 抽出法並びにその抽出物及びアミガサタケ子実体 を有効成分とする生理機能活性食品 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0646798A true JPH0646798A (ja) | 1994-02-22 |
Family
ID=17111886
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP4243978A Pending JPH0646798A (ja) | 1992-07-29 | 1992-07-29 | アミガサタケ子実体からの抗血小板凝集活性体の 抽出法並びにその抽出物及びアミガサタケ子実体 を有効成分とする生理機能活性食品 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0646798A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1999055350A1 (en) * | 1998-04-24 | 1999-11-04 | Rowett Research Services Limited | Antithrombotic agents |
-
1992
- 1992-07-29 JP JP4243978A patent/JPH0646798A/ja active Pending
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1999055350A1 (en) * | 1998-04-24 | 1999-11-04 | Rowett Research Services Limited | Antithrombotic agents |
| EP1334728A2 (en) * | 1998-04-24 | 2003-08-13 | Provexis Ltd. | Antithrombotic agents |
| EP1334728A3 (en) * | 1998-04-24 | 2003-09-03 | Provexis Ltd. | Antithrombotic agents |
| AU772923B2 (en) * | 1998-04-24 | 2004-05-13 | Provexis Natural Products Limited | Antithrombotic agents |
| US6958164B2 (en) | 1998-04-24 | 2005-10-25 | Provexis Limited | Antithrombotic agents |
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