JPH0643299B2

JPH0643299B2 - 薬剤療法

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Publication number: JPH0643299B2
Application number: JP63502333A
Authority: JP
Inventors: アンドリューリーズ，ジョン
Original assignee: Boots Co PLC
Current assignee: Boots Co PLC
Priority date: 1987-02-28
Filing date: 1988-02-25
Publication date: 1994-06-08
Anticipated expiration: 2009-06-08
Also published as: GR3001395T3; US4816488A; ATE58059T1; JPH01500356A; WO1988006444A1; EP0303677A1; EP0282206B1; EP0282206A1; GB8704777D0; US4871774A; ZA881417B; DE3860960D1

Description

【発明の詳細な説明】本発明は大脳基底における神経節の変性変化によるパー
キンソン病の薬剤療法に関する。

本発明によれば、式Ｉ（式中、Arは場合により置換されたフエニルであり、R₁
は場合により置換された脂肪族基または炭素環式基ある
いは複素環式基であり、そしてR₂およびR₃はＨまたは場
合により置換されたアルキル基であるかあるいはR₂とR₃
とはこれらが結合している窒素原子と共に複素環式環を
完成する）の化合物の治療上有効量を、医薬的に許容し得る希釈剤
または担体と共に投与する、パーキンソン病の治療方法
が提供される。式Ｉの化合物は、レボドーパのようなド
ーパミン前駆物質および（または）カルビドーパまたは
ベンゼラジドのようなドーパデカルボキシラーゼ阻害剤
と共に投与してもよい。

式Ｉの適当な化合物は、英国特許第２０９８６０２号、
同第２１２７８１９号および同第２１２８９９１号明細
書および欧州特許出願第１９１５４２号明細書に記載さ
れ、しかも医薬的に許容し得る塩の形および溶媒和物の
形で使用してもよい。式Ｉの特に好ましい化合物は、欧
州特許出願第２３０７４２号明細書に記載されたＮ，Ｎ
−ジメチル−１−〔１−（４−クロロフエニル）シクロ
ブチル〕−３−メチルブチルアミン塩酸塩１水和物であ
る。

ドーパミン機能の増大を起こす式Ｉの化合物は、パーキ
ンソン病の治療に有用性を有する。Ｎ，Ｎ−ジメチル−
１−〔１−（４−クロロ−フエニル）シクロブチル〕−
３−メチルブチルアミン塩酸塩１水和物は、ドーパミン
再摂取の阻害剤であり、しかもヒトに投与された場合に
血漿におけるドーパミン濃度の増大を与える。これは、
パーキンソン病の治療に単独で使用できるか、またはレ
ボドーパのようなドーパミン前駆物質および（または）
カルビドーパまたはベンゼラジドのようなドーパデカル
ボキシラーゼ阻害剤と組み合せて使用してもよい。

式Ｉの化合物は、既知の医薬剤形、例えば錠剤またはカ
プセル剤のような固体剤形あるいは液体剤形、例えば経
口または非経口投与に企図されたものの何れかで投与し
てもよい。投与される式Ｉの化合物の量は、患者の年
齢、状態の重度および患者の過去の医療履歴を初め多数
の要因によつて決まり、しかも常に投与する医師の確か
な判断内にあるが、一般に投与される式Ｉの化合物の用
量は、１日当たり、１mg〜１０００mg、好ましくは５mg
〜５００mgの範囲内で１回またはそれ以上で投与される
ことが一般に企図される。式Ｉの化合物をレボドーパと
共に投与する場合、与えられるレボドーパの量は、最適
の応答が得られるまで医師によつて漸増される。実際の
量は医師の管理下にあり、しかも１日当たり８ｇまでを
分割用量で投与してもよい。式Ｉの化合物をカルビドー
パと共に投与する場合、カルビドーパの量は１日当たり
１００mgまでである。式Ｉの化合物をベンゼラジドと共
に投与する場合、ベンゼラジドの量は１日当たり２００
mgまでである。

化合物のドーパミン再摂取阻害能は下記の手法によつて
示される。

１）ドーパミン摂取の生体外阻害雄Sprague-Dawleyラツト（チヤールズリバー）を頸部脱
臼によつて殺し、しかも脳を除き、次いでＮａｃ１２
０mM、ＫＣ４．７mM、KH₂PO₄２．１mM、ＣａＣ
_２１．２mM、MgSO₄０．６mM、NaHCO₃２５mMおよびグル
コース１１mMを含有する氷冷酸素化されたクレブス溶液
に入れた。次いで脳をGlowinskiおよびIversen〔ジヤー
ナル・オブ・ニユーロケミストリー(J.Neurochem.)（１
９６６）１３６５５〜６６９〕によつて解剖し、次いで
線条体を除いた。線条体の試料をプールし、秤量し、次
いで酸素化した０．３２Ｍ蔗糖溶液（２０容）を含有す
る氷上のガラス製均質化容器に移した。線条体を間隙
０．３５mmを有する（TR1-R Homogenisers Ltd。製）のp
tfe乳棒の６ストロークによつて均質化した。ホモジネ
ートを４℃において１０００xgで１０分遠心分離し、次
いでシナプトソームの懸濁液を含有する上澄み液を、下
記のドーパミン摂取阻害試験において用いた。クレブス
溶液１．５ｍ、Ｎ，Ｎ−ジメチル−１−〔１−（４−
クロロフエニル）シクロブチル〕−３−メチルブチルア
ミン塩酸塩１水和物の溶液０．２ｍまたは対照として
の蒸留水０．２ｍおよびシナプトソーム懸濁液０．１
ｍを含有するポリテン試料管に、二酸化炭素５％およ
び酸素９５％の雰囲気を与え、次いで３７℃において５
分予備インキユベートした。¹⁴C−ドーパミン塩酸塩(Am
ersham International)の溶液（０．２ｍ）を加え
て、最終濃度０．１７μＭを得た。管の内容物を、ワツ
トマンGF／Ｆフイルターを通して真空下にろ過する前
に、さらに５分間培養を続け、このフイルターを氷冷ク
レブス液（２×５ｍ）で洗浄した。フイルターをシン
チレーシヨン流体〔ES−２９９、パツカード・インスト
ルメンツ(Packard Instruments)供給〕１０ｍを含有
するシンチレーシヨンバイアルに入れ、次いでバイアル
中の放射能をパツカード４５３０シンチレーシヨン計数
計で計数した。各実験において、試験化合物が存在しな
い対照管、被試験化合物が３種の濃度（１００μＭ、１
０μＭおよび１μＭ）の１つで存在する３管および試験
化合物を含有せず０℃に保つて受動¹⁴C−ドーパミン摂
取を測定するバツクグラウンド管がある。各管の計数を
計数／分(cpm)で登録し、次いで摂取(I)の阻害％を式から計算した。３回の反復実験において得られた結果を
下記に示す。試験化合物は濃度依存で¹⁴C−ドーパミン
摂取を阻害した。次いで摂取の阻害５０％を与えた濃度
を計算し、次に各実験についてIC５０の数字として下記
に示す。試験化合物によるドーパミン摂取の阻害に対す
る平均（±SEM)IC５０値は１１±４．２μＭである。

この結果から、Ｎ，Ｎ−ジメチル−１−〔１−（４−ク
ロロフエニル）シクロブチル〕−３−メチルブチルアミ
ン塩酸塩１水和物は、ドーパミンの生体外線条体シナプ
トソームへの摂取を阻害したことが分かる。

２）ドーパミン再摂取の生体内阻害ドーパミン再摂取阻害の生体内試験は、このような再摂
取阻害剤がドーパミン減少剤のニユーロンへの侵入を防
止し得ることによつている。減少剤は、ドーパミンのニ
ユーロン貯蔵機構を妨げ、従つてドーパミンはモノアミ
ンオキシダーゼによつて代謝される細胞質に漏入する。
従つて減少剤は、実験的に測定できる脳ドーパミン濃度
の大きい低下を誘発する。ドーパミン再摂取阻害剤によ
る前処理によつてα−メチル−ｍ−チロシンのような減
少剤の後の投与によつて起こるドーパミン濃度の減少が
少なくなる。

雄Sprague-Dawleyラツト（１８０〜２２０ｇ、チヤール
ズリバー）を種々の処理群にランダムに割り当てた。２
群には、ビヒクル（蒸留水）を経口投与し、しかも残り
の群には異なつた３用量でＮ，Ｎ−ジメチル−１−〔１
−（４−クロロフエニル）シクロブチル〕−３−メチル
ブチルアミン塩酸塩１水和物を経口投与した。３０分
後、ビヒクル投与された１群およびすべての試験群に減
少剤α−メチル−ｍ−チロシン〔２５mg/kg、シグマ・
ケミカル・カンパニーSigma Chmeical Co.）〕を腹腔内
注射（２ｍ／kg）した。ビヒクル（経口）プラスα−
メチル−ｍ−チロシン（腹腔内）を受けた群は、減少対
照として用いた。残りのビヒクル処理群に食塩水を腹腔
内注射して絶対対照として用いた。

腹腔内注射４時間後、動物を犠牲にし、次いで全脳を迅
速に取り出し、次にドライアイス上で凍結した。ドーパ
ミン濃度の測定前は、試料を−３０℃において貯蔵し
た。

脳試料を解凍し、次いでメタ重亜硫酸ナトリウム（０．
４mM）および内部標準３，４−ジヒドロキシベンジルア
ミン（０．８μＭ）を含有する０．４Ｍ過塩素酸４容中
に均質化した。試料を、速度設定６でポロトロン(Polyt
ron)ホモジナイザーを用いて１０秒間均質化し、その後
この試料をソルボール(Sorvall)RC-5B遠心機およびSM−
２４回転子を用いて２３０００xgにおいて４℃で１０分
遠心分離した。上澄み液を取り出し、次いで螢光分析検
出を有するHLPC（高圧液体クロマトグラフイー）系を用
いて、そのドーパミン濃度を測定した。

試験化合物による脳ドーパミン濃度の減少の防止百分率
(P)は式から算出する。試験化合物は脳ドーパミン減少の用量依
存防止を示した。３用量において得られた防止百分率値
から、経口ED₅₀用量、すなわち脳ドーパミンの５０％だ
けの減少を防止する用量を計算した。Ｎ，Ｎ−ジメチル
−１−〔１−（４−クロロフエニル）シクロブチル〕−
３−メチルブチルアミン塩酸塩１水和物のED₅₀を４４mg
/kg（経口）として計算した。

３）薬剤処理されたラツトからの血漿による生体外ドー
パミン摂取阻害Ｎ，Ｎ−ジメチル−１−〔１−（４−クロロフエニル）
シクロブチル〕−３−メチルブチルアミン塩酸塩１水和
物で処理されたラツトの血漿は、放射標識されたドーパ
ミンの、ラツト線条体から新たに調製されたシナプトソ
ームへの摂取を阻害したことが示されている。

シナプトソームを得るために、未処理雄CDラツト（Spra
gue-Dawley、２００ｇ〜２５０ｇ、チヤールズリバー）
を頸部脱臼によつて屠殺し、脳を取り出し、次いで２匹
または３匹のラツトの線条体を解剖し、次に氷冷食塩水
に入れた。プールした組織を間隙０．３５mmを有するガ
ラス−テフロンホモジナイザー中で氷冷０．３２Ｍ蔗糖
２０容で均質化した。ホモジネートを冷蔵（４℃）Hera
eus Christミニ遠心機中で１５００xgにおいて１０分回
転した。上澄み液をポリプロピレン無菌管に移し、次に
放射標識されたドーパミン摂取アツセイにおいて用いる
前に出来るだけ短時間氷上に貯蔵した。

雄ラツト（Sprague-Dawley、３５０ｇ〜４００ｇ、チヤ
ールズリバー）に、蒸溜水に溶解したＮ，Ｎ−ジメチル
−１−〔１−（４−クロロフエニル）シクロブチル〕−
３−メチルブチルアミン塩酸塩１水和物１０mg/kg、３
０mg/kgまたは１００mg/kgを与え、次いで５ｍ／kgの
割合で経口投与した。対照ラツトには蒸留水を経口投与
した。１時間後、ラツトをCO₂吸入過量によつて屠殺
し、胸腔を開き、直ちに血液を心臓から取り出し、次に
抗凝固剤溶液と混合した。

ラツト血液／抗凝固剤混合物をHeraeus Christミニ遠心
機中で室温において５７５０xgで２０分回転した。血漿
を取り出し、次いで放射標識されたドーパミン摂取アツ
セイにおける分析前に出来るだけ短時間室温に保つた。
ラツト対象からの新鮮な血漿試料を、アツセイ開始前に
まず３７℃において１０分〜１５分保つた。各血漿試料
３００μを、既に室温において食塩水５０μを含有
する６本の５ｍポリプロピレン管に加えた。これらの
管の４本を３７℃において培養した能動放射標識された
ドーパミン摂取を評価した。他の２管を、直ちにｃ．３
℃に冷却し、次いでこの温度において保つて、受動放射
標識ドーパミン摂取を明らかにした。

ａ）放射標識ドーパミンの能動摂取３７℃の各管に、前記のように製造された新鮮な線条体
シナプトソーム１００μを加えた。次いで、３７℃の
水浴中でこれらの管を５分攪拌した後に氷冷³H−ドーパ
ミン溶液（最終濃度１×１０^-7M）(Amersham Internati
onal)５０μを添加した。さらに３７℃においてさら
に５分攪拌および温置後、管を水浴から取り出し次いで
直ちに氷冷塩水４ｍを添加することによつて反応を停
止した。次いで管の内容物を、Edwards２段真空ポンプ
に結合したMillipore１２２５マニホールド上に支持さ
れたワツトマンガラス繊維（GF／Ｆ）フイルター上で迅
速にろ過した。管を氷冷食塩水２×４ｍですすぎ、次
いでこれをまた迅速にろ過した。最後に各マニホールド
ウエルを氷冷塩水４ｍで洗浄した。

ｂ）放射標識ドーパミンの受動摂取ｃ．３℃に保たれた２本の管に、新鮮な線条体シナプト
ソーム１００μ、次いで氷冷³H−ドーパミン溶液（最
終濃度１×１０^-7M）の５０μを添加した。これらの
管の「反応」は、氷冷食塩水４ｍを添加することによ
つて停止し、次いで試料を迅速にろ過し、次に前記(a)
のように洗浄した。

全フイルターをガラスバイアルに入れ、次いでPackard
ES−２９９シンチレーシヨン流体１０ｍを加えた。蓄
積された放射能を液体シンチレーシヨン計数により分析
する前にフイルターを少なくとも１時間可溶化させた。

ｃ）³H−ドーパミン摂取の阻害百分率の計算ｃ．３℃における³H−ドーパミンの受動摂取量（cpmで
測定）を、３７℃に能動³H−ドーパミン摂取量（cpmで
測定）から差し引いて、正味³H−ドーパミン摂取を得
た。次いで、得られた値を、対照血漿に記録された正味
³H−ドーパミン摂取の百分率(X)として表わした。後者
の血漿試料は、蒸留水で処理された対照ラツトから得ら
れた。阻害百分率値(X)は、下記式を用いて計算した。

次いで、各用量について平均〔±１平均の標準誤差(SE
M)〕阻害百分率を求めた。

１２匹の異なつたラツト（各用量において４匹のラツ
ト）について得られた結果を下記に示す。

これらの結果から、Ｎ，Ｎ−ジメチル−１−〔１−（４
−クロロフエニル）シクロブチル〕−３−メチルブチル
アミン塩酸塩１水和物を投与されたラツトからの血漿
は、ラツト線条体シナプトソームへの放射標識ドーパミ
ン摂取の用量依存阻害を示すことが明らかに分かる。

４）単一３０mg/kg用量後時間にわたつて得られた薬剤
処理ラツトからの血漿による生体外ドーパミン摂取の阻
害ドーパミン摂取の阻害百分率は、前記(3)に記載と同様
に測定した。Ｎ，Ｎ−ジメチル−１−〔１−（４−クロ
ロフエニル）シクロブチル〕−３−メチルブチルアミン
塩酸塩１水和物の用量３０mg/kgの経口投与後種々の時
間に異なつた動物から血漿を得た。結果を下記に示す。

これらの結果から、ラツト血漿の、ラツト線条体からシ
ナプトソームへのドーパミンの摂取阻害能は、薬剤の投
与後かなりの時間持続をすることが分かる。

５）薬剤で処理されたヒトからの血漿による生体外ドー
パミンの摂取阻害Ｎ，Ｎ−ジメチル−１−〔１−（４−クロロフエニル）
シクロブチル〕−３−メチルブチルアミン塩酸塩１水和
物を投与したヒト志願者から得られた血漿は、放射標識
ドーパミンの、前記(3)のように得られたラツト線条体
から新たに調製されたシナプトソームへの摂取を阻害す
ることが示された。

Ｎ．Ｎ−ジメチル−１−〔１−（４−クロロフエニル）
シクロブチル〕−３−メチルブチルアミン塩酸塩１水和
物の経口用量５０mgを６名の健康なヒト志願者に投与す
る直前に静脈血液（１００ｍ）を採取し、次いで３時
間後にさらに静脈血液を採取した。血漿を、Heraeus Ch
ristミニ遠心機中で室温において２９００xgで２０分遠
心分離し、次いで分析前に−２０°において貯蔵した。
¹⁴H−ドーパミンを用いた以外、前記(3)のように行われ
た生体外ドーパミン摂取アツセイの開始前に１０分〜１
５分３７℃の水浴において試料を解凍した。アツセイ
を、各志願者からの血漿について２回行つた。得られた
結果を下記に示す。

６名の薬剤で処理された志願者からの血漿による¹⁴H−
ドーパミンの阻害％の平均（±SEM）は１．４２±１．
４であつた。

６）薬剤投与後の一側性黒色線条体病変ラツトの同側回
旋病挙動によつて示したドーパミン再摂取阻害黒色線条体ドーパミン系の２路は独立であり、しかも脳
の正中線の両側に位置する。特別の神経毒、６−ヒドロ
キシドーパミン（６−OHDA）を用いて１つの路が破壊さ
れた場合、ドーパミン作動性薬剤の注射後、ラツトは特
徴的な回旋挙動を示す。しかしながら回転の方向は、用
いた刺激によつて決まる。ドーパミン再摂取を阻害する
薬剤は、脳の未病変側のみに作用することができ、しか
も病変部位（同側回旋として知られる）への回旋を誘発
する。

雄CDラツト（２５０ｇ〜３００ｇ、チヤールズリバー）
を「エクイテシン(Equithesin)」型麻酔剤（３．２ｍ
／kg腹腔内）をもつて麻酔し、次いで定位固定枠（Davi
d Kopf Small Animal Stereotaxic Instrument DKI９０
０）中に固定した。部分を剃毛して後、１．５cm〜２cm
の縦の切開を行い、次いで皮膚弁を頭骨から切開した。
NO.６歯科バーを用いて、頭骨に小孔をあけて、３０s.
w.g.ステンレス鋼カニユーレの先端を左黒質に挿入させ
た。これは、頭骨目標前頂を０標準点として用いて、す
べてmmで測定した下記の座標を用いて位置した。吻側−
尾側−２．８、内側−外側＋２．０、硬膜の表面から背
側−腹側−８．０。この座標系は、Pellegrinoら〔ア・
ステレオタクシツク・アトラス・オブ・ザ・ラツト・ブ
レイン(A stereo-taxic atlas of the rat brain)、第
２版、Plenum Press１９７９〕によつて記載されたde G
root系の改変である。６−ヒドロキシドーパミンHBr
〔塩基として２μｇ／μ、シグマ・ケミカル・カンパ
ニー(Sigma Chemical co.)〕を１μ／minにおいて左
黒節に注射し、全量８μｇを注入ポンプ(Braun 「Perfus
or」ED２）を用いて４分にわたつて投与した。カニユー
レ除去後、皮膚弁を単一外転縫合線をもつて接合し、次
いで動物を回復させた。

２１日後、ラツトの回旋挙動を調べた。ラツトを個別に
円形プラスチツクアリーナ（直径３０cm×高さ１２cm）
に１時間入れ、この間食物または水に接近しなかつた。
１０分毎に、各動物を１分観察し、次いで「旋回」数を
計数した。１「旋回」は各方向に３６０°の回転からな
つていた。ラツトは常に脳の左側に病変しているので、
左回旋は同側であつた。

対照値は、さきに投与せずに全ラツトについてアリーナ
におけるその自発回旋挙動を観察することによつて測定
した。平均回旋／分は常に１未満であつた。

ラツトは、メタンフエタミン（２mg/kg）の腹腔内用量
を挑戦し、直ちにアリーナに入れた。これらの実験にお
いて、回旋挙動を、投与後０ｈ〜１ｈおよび４ｈ〜５ｈ
の２期間の間監視した。メタンフエタミンに対する第１
時間に平均５同側回旋／分より大を与えるラツトを後続
試験において用いた。選別後、ラツトを５匹またはそれ
以上の群で用いて、試験中の薬剤を試験した。群は、メ
タンフエタミンに種々の応答を示すラツト（常に前記の
＞５回旋／分）からなり、群の平均応答は常に１０同側
旋回／分より大であつた。

３０mg/kgにおいて、Ｎ，Ｎ−ジメチル−１−〔１−
（４−クロロフエニル）シクロブチル〕−３−メチルブ
チルアミン塩酸塩１水和物を経口投与し、次いでドーシ
ング後種々の時間に観察された回旋の量を下記に示す。

これらの結果から、この用量において、Ｎ，Ｎ−ジメチ
ル−１−〔１−（４−クロロフエニル）シクロブチル〕
−３−メチルブチルアミン塩酸塩１水和物は、ドーパミ
ン再摂取阻害剤として長い持続作用を有することが分か
る。

７）薬剤投与後のDOPAC濃度の測定による齧歯類脳中の
ドーパミンの転換の測定脳におけるドーパミンの再摂取の阻害は、ドーパミンが
合成され、かつ代謝される速度（転換速度）を減少す
る。これは、ラツトおよびマウスの脳において蓄積する
ドーパミン代謝産物DOPAC（ジヒドロキシフエニル酢
酸）の量を測定することによつて評価できる。さらに、
プロベネシドの投与によつて、DOPACの脳からの能動輸
送は妨害される。脳DOPAC濃度の後の上昇は、ドーパミ
ン再摂取を阻害する薬剤によつて減少する。

Ｎ，Ｎ−ジメチル−１−〔１−（４−クロロフエニル）
シクロブチル〕−３−メチルブチルアミン塩酸塩１水和
物（１０mg/kg）を、雄Sprague-Dawleyラツト（１８０
ｇ〜２５０ｇ）または雄CD１マウス（２５ｇ〜３０ｇ）
（チヤールズリバー）に経口投与した。動物の１群を、
２時間後に屠殺した。薬剤後３０分に、他の群にプロベ
ネシド（２００mg/kg、腹腔内、シグマ・ケミカル・カ
ンパニー）を投与し、次いでさらに９０分後に屠殺し
た。動物を断頭によつて屠殺し、次いで脳を迅速に除
き、氷冷磁器板上で解部した。これらは正中線に沿つて
縦に切断し、半分は全脳分析用に保ち、一方線条体を他
から解部した。組織を直ちに液体N₂中で冷凍し、次いで
アツセイまでドライアイス（−８０℃）上で貯蔵した。
マイクロプローブ（ＰＴ−７）を備えたポリトロン(Pol
ytron)（設定６、２０秒）を用いて全脳組織を６００μ
中の０．４Ｍ過塩素酸〔０．０１％（ｗ／ｖ）Na₂S₂O
₃、0.1%(w/v)EDTA含有〕および線条体５容に均質化し
た。次いで試料を３０，０００xg（全脳試料）または
３，５００xg（線条体）において、１２００μポリプ
ロピレン管を採るように備えたマイクロフユージ（ベツ
クマン）を用いて遠心分離した。次いで、明澄上澄み液
のアリコート（５０μ）を自動的にDOPACの分離およ
び定量化用のクロマトグラフ系に注入した。

電気化学検出(ECD)と組み合せた高圧液体クロマトグラ
フイー(HPLC)を用いてDOPACを分析した。移動相〔オク
タンスルホン酸０．１％、EDTA０．１％およびNa₂S₂O₃
０．０１％を含有する０．１ＭNa₂HPO₄：CH₃OH（８４：
１６％）〕をデユポン８７０ポンプモジユールを用い
て、流量１．０ｍ／minで、恒温制御されたキヤビネ
ツト内において４５℃に保つた逆相分析カラム（２５×
０．４cm）およびカードカラム（両者共５μｍ Spheri
sorb ODS２を充てん）に排出した。自動試料注入は、WI
SP７１０Ｂモジユール（ウオーターズ・アソシエーツ）
によつて与えられ、しかもECDは、Ａｇ−ＡｇＣ参照
電極に対して＋０．６５Ｖに保つたガラス状炭素電極を
有するBioanalytical Systems LC4A制御器およびセルを
用いて行つた。制御器は、２０nAフルスケールに設定
し、次いでセルからの出力をSpectra-Physics４１００
自動計算積分器を用いて記録した。DOPACの定量化は、
既知の濃度のDOPACを用い、かつ内部標準としてイソプ
レナリンを含むHPLC-ECD系の較正後に計算積分器によつ
て行つた。

脳DOPAC濃度に及ぼす薬剤の効果について得られた結果
を下記に示す。Ａ印をつけた実験は薬剤単独の脳DOPAC
濃度の減少能を示す。Ｂ印をつけた実験は、薬剤の脳DO
PAC濃度のプロベネシドー誘発上昇を弱める能力を示
す。

脳DOPAC濃度の減少は、ドーパミン再摂取阻害を示し、
薬剤で処理された動物におけるドーパミン転換の減少を
起こす。

Ｎ，Ｎ−ジメチル−１−〔１−（４−クロロ−フエニ
ル）シクロブチル〕−３−メチルブチルアミン塩酸塩１
水和物の、この化合物が投与されたヒト被験者の血漿中
のドーパミン濃度を上昇させる能力は、下記試験によつ
て具体的に説明された。

Ｎ，Ｎ−ジメチル−１−〔１−（４−クロロフエニル）
シクロブチル〕−３−メチルブチルアミン塩酸塩１水和
物の単一用量１日当たり３０mgを７日間受けた６名のヒ
ト被験者の血漿中のドーパミンの量は、投与２時間後に
採取した血漿試料中で測定した。ピコｇ／ｍで表わし
たドーパミンの平均値を、１日、４日および７日におい
て下記に示す。偽薬錠剤を与えた８名のヒト被験者は、
下記の平均対照ドーパミン濃度を得た血漿試料を与え
る。

これらの数字は、Ｎ，Ｎ−ジメチル−１−〔１−（４−
クロロフエニル）シクロブチル〕−３−メチルブチルア
ミン塩酸塩１水和物を用量３０mgで投与されたヒト被験
者において、血漿ドーパミン濃度が増大したことを明示
している。

以上の薬理試験の結果から本発明に係わるＮ，Ｎ−ジメ
チル−１−［１−（４−クロロフエニル）シクロブチ
ル］−３−メチルブチルアミン塩酸塩１水和物を含むパ
ーキンソン病治療剤は優れたドーパミン再採取阻害活性
とヒトの血漿中のドーパミン濃度を増大させる効果とを
持つことがわかる。Ｏｘｆｏｒｄｔｅｘｔｂｏｏｋ
ｏｆｃｌｉｎｉｃａｌｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ
ａｎｄｄｒｕｇｔｈｅｒａｐｙ，１９９２，第４３
０頁左欄第２８行に記載されているように、パーキンソ
ン病の治療薬ではドーパミン機能を増大させることが必
要である。従って、本発明に係わる製剤はドーパミンの
再摂取を阻害し、血漿におけるドーパミン濃度を増大さ
せるので、パーキンソン病の治療剤として有用であるこ
とがわかる。

８）毒性試験本発明に係わるＮ，Ｎ−ジメチル−１−［１−（４−ク
ロロフエニル）シクロブチル］−３−メチルブチルアミ
ン塩酸塩１水和物を含むパーキンソン病治療剤の安全性
確認試験を下記に従って行った。

５mg，２０mgのＮ，Ｎ−ジメチル−１−［１−（４−ク
ロロフエニル）シクロブチル］−３−メチルブチルアミ
ン塩酸塩１水和物および対照として偽薬をそれぞれ、１
８人、１８人、１９人の被験者に８週間投与し、その影
響を観察した。

この試験の間に血圧や脈拍が大幅に変化した者は皆無で
あった。しかしながら、偽薬を投与した者の中には脈拍
が増加した者がいた。４名の被験者に１０打／分の脈拍
の増加が観察され、ある時には９０打／分以上まで上昇
した。２名の被験者が偽薬を、１名が５mg、１名が２０
mgのＮ，Ｎ−ジメチル−１−［１−（４−クロロフェニ
ル）シクロブチル］−３−メチルブチルアミン塩酸塩１
水和物を投与されていた。

どの被験者群にも心電図における異常はみられなかっ
た。また、Ｎ，Ｎ−ジメチル−１−［１−（４−クロロ
フェニル）シクロブチル］−３−メチルブチルアミン塩
酸塩１水和物の毒性を示唆するような症状は特に観察さ
れなかった。

従って、パーキンソン病治療に用いる投与量において
Ｎ，Ｎ−ジメチル−１−［１−（４−クロロフェニル）
シクロブチル］−３−メチルブチルアミン塩酸塩１水和
物は特に毒性を示さないことがわかる。

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】活性成分として、Ｎ，Ｎ−ジメチル−１−
［１−（４−クロロフェニル）シクロブチル］−３−メ
チルブチルアミン塩酸塩１水和物を含むパーキンソン病
治療剤。